Stikstofoxidevrij een endogene remmer van maagzuurafscheiding in geïsoleerde menselijke maagklieren

Stikstofoxidevrij een endogene remmer van maagzuurafscheiding in geïsoleerde menselijke maagklieren
Abstract achtergrond
endotheliaal stikstofoxide synthase (eNOS) eerder in de klier deel van het menselijk maagslijmvlies waargenomen. Bovendien is stikstofoxide (NO) is aangetoond maagzuurafscheiding beïnvloeden verschillende diermodellen. Deze studie werd uitgevoerd om de invloed van exogeen en endogeen onderzoeken afgeleide nr over histamine en cAMP-gestimuleerde maagzuursecretie in geïsoleerde menselijke oxyntic klieren.
Methods
Oxyntic klieren werden geïsoleerd uit humane gastrische biopten en werden vervolgens pre -behandeld met NO donoren en stikstofoxide synthase remmers en vervolgens blootgesteld aan histamine of dibutyryl-cAMP (db-cAMP). De secretorische respons van de klieren werd bepaald als accumulatie van [ 14C] aminopyrine.
Resultaten
De histamine of db-cAMP-geïnduceerde zuursecretie werd verzwakt door L-arginine, een bekende bron van endogene NO en ook door de NO-donoren natriumnitroprusside (SNP) en S-nitroso-N-acetyl-penicillamine (SNAP). Voorbehandeling met een van de NOS-remmers N G-nitro-L-arginine-methylester (L-NAME) of N G-nitro-L-arginine (L-NNA) verhoogde de secretorische respons.
Conclusie
Onze resultaten tonen aan dat NO de maagzuursecretie remt in geïsoleerde menselijke maagklieren en dat er endogene vorming van NO in het glandulaire epitheel in de nabijheid van de pariëtale cellen. achtergrond
Stikstofmonoxide (NO) wordt geproduceerd uit L-arginine in een reactie gekatalyseerd door het enzym nitric oxide synthase (NOS) [1, 2]. NO is een belangrijke biologische signaalmolecuul die de circulatie beïnvloeden door het reguleren vasculaire gladde spieren en moduleren systemische bloeddruk. Verder NO is betrokken bij neurotransmissie; Het is een kritische factor bij de ontstekingsreactie en immuniteit [3-5]; en het is aangetoond dat het positieve effect op de mucosale afweer uitoefenen in het maagdarmstelsel. In verscheidene studies (voor een overzicht, zie [6]), chemisch geïnduceerde mucosale schade leek verminderd met gelijktijdige toevoeging van NO en verminderde door verwijdering van NO uit het maagslijmvlies. Een verklaring voor deze resultaten kan zijn dat NO verhoogt mucosal bloedstroom [7], en er is gesuggereerd dat NO bevordert de afgifte van slijm [8]. Het is onwaarschijnlijk dat ook betrokken is bij de regulatie van andere secretoire processen in het maagdarmkanaal. Takeuchi en medewerkers [9] hebben gerapporteerd dat NO remt de afscheiding van bicarbonaat duodenale, terwijl andere onderzoekers hebben voorgesteld bicarbonaatsecretie wordt gestimuleerd door NO [10, 11]. Bovendien hebben verscheidene studies aangetoond dat NO beïnvloedt de maagzuursecretie [12-16].
Dierexperimenten tegenstrijdige gegevens over de interactie tussen NO en maagzuursecretie ontvangen. Bijvoorbeeld, in vitro studies hebben aangetoond dat NO stimuleert maagzuursecretie bij de muis [17, 18] en bullfrog [19]. Daarnaast werden overeenkomstige resultaten verkregen in honden [12]. Echter, hebben andere onderzoeken aangetoond dat NO remt de maagzuursecretie in de rat [13, 14], in maagklieren geïsoleerd uit konijnen [15], en mucosa van padden [16]. Studies van mensen hebben gegevens verstrekt waaruit blijkt dat NO kan zowel remmen en versterken intragastrische pH [20, 21], maar het is nog niet bekend hoe deze verbinding deelneemt aan maagzuursecretie bij de mens.
In een eerdere studie hebben we morfologische ondersteuning die endogeen NO een rol speelt bij de regulering van pariëtale celfunctie [22]. Ook de immunohistochemische gegevens van dat onderzoek onthulde de aanwezigheid van endogeen NOS in epitheelcellen van normale menselijke oxyntic mucosa, meer bepaald in oppervlakte- muceuze cellen en endocriene cellen. Daarnaast hebben we vastgesteld dat er nauwe contacten tussen eNOS-positieve cellen en pariëtale cellen hetzij omdat de eNOS-positieve cellen in contact pariëtale cellen via cytoplasmische processen of zijn gekeerde een pariëtale cel. Op basis van deze bevindingen, samen met de chemische eigenschappen van NO, concludeerden wij dat NO afgeleid van het endocriene-achtige cellen een paracriene regulator van maagzuursecretie kan zijn. In deze studie, ons doel was om het effect van exogene NO op histamine en cAMP-gestimuleerde maagzuursecretie verifiëren bij de mens, en ook te bepalen of endogeen afgeleid NO een functioneel effect op menselijke pariëtale cellen.
Methods
onderwerpen en ethische goedkeuring
Vierentwintig gezonde mannen, variërend in leeftijd van 22-31 jaar werden gerekruteerd als betaald vrijwilligers. De selectiecriteria bepaald dat de proefpersonen was vrij van de ziekte te zijn en mogen geen medicijnen genomen of ingezogen alcohol gedurende ten minste één week voorafgaand aan onderzoek. De mannen vasten gedurende ten minste zes uur voor het onderzoek.
Pharyngeal anesthesie werd geïnduceerd met lidocaïne spray (Xylocain ®, AstraZeneca, Södertälje, Zweden), waarna routine gastroscopie werd uitgevoerd met behulp van een Olympus GIF-100 endoscoop. Pinch biopsietang (Olympus FB 24K-1) gebruikt om weefselmonsters te nemen van de grote curvatuur onmiddellijk distaal van de fundus. In alle vakken, het maagslijmvlies verscheen zowel macroscopisch en histologisch normaal te zijn,. Alle proefpersonen getest negatief voor Helicobacter pylori
infectie in de urease ademtest (Diabact ® UBT 50 mg 13C-ureum, Diabact AB, Uppsala, Zweden). Ondernemingen De experimentele procedures werden goedgekeurd door de regionale Ethics Committee for Human Research bij University Hospital, Linköping, Zweden (dossier nr. 02-039), en alle patiënten gaven informed consent.
Secretory studie
Isolatie en incubatie van maag-klieren Ondernemingen De huidige experimenten waren gebaseerd op een techniek die het eerst in 1976 in konijnen werd beschreven voor gebruik in vitro [23] en is reeds goed voor indirecte bepaling van maagzuursecretie geïnduceerd door verschillende stimuli. De werkwijze voor het isoleren maagklieren werd oorspronkelijk ontwikkeld voor dierlijk weefsel, maar werd later verfijnd zodat het ook kan worden toegepast op kleine hoeveelheden humaan weefsel [24]. Ondernemingen De menselijke oxyntic mucosale biopsies worden in onze studie werden gewassen en niet langer opgeslagen dan 15 minuten in ijskoud geoxygeneerd fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). De weefselmonsters werden in kleine stukjes gesneden met een schaar en overgebracht in geoxygeneerde (100% O 2) collagenase enzymoplossing (130,0 mM NaCl, 12,0 mM NaHCOs 3, 3,0 mM Na 2HPO 4, 3,0 mm K 2HPO 4, 2,0 mM MgSO 4, 1,0 mM CaCl 2, 0,1 mM N (alfa) tosyl-L-lysine chloormethylketon [ ,,,0],TLCK], 10 uM indomethacine, 10 mM glucose, 2 mg /ml humaan serumalbumine [HSA, Sigma], en 1 mg /ml collagenase type IA [Sigma]). Het mengsel werd in een 37 ° C waterbad geplaatst en werd voorzichtig geroerd gedurende 120 minuten, waarna de meeste van de behandelde monster was opgelost en blijft in hoofdzaak geïsoleerde maagklieren. Het mengsel werd vervolgens gefiltreerd door een 200 pm gaas. De geïsoleerde klieren werden gewassen en opnieuw gesuspendeerd in voorverwarmde (37 ° C) respiratoire medium (132,4 mM NaCl, 1,0 mM NaH 2PO 4, 1,2 mM MgSO 4, 5,4 mM KCI, 5,0 mM Na 2HPO 4, 1,0 mM CaCl 2, 10 uM indomethacine, 10 mM glucose, en 2 mg /ml HSA). De klieren werden daarna overgebracht in flesjes die verse respiratoire medium waaraan voegden wij een van de volgende: de NOS-remmer N G-nitro-L-arginine-methylester (L-NAME, 1 mmol /L) of equivalente hoeveelheden van de biologisch inactieve enantiomeer N G-nitro-D-arginine methylester (D-NAME); NOS inhibitor N G-nitro-L-arginine (L-NNA; 0,1 mmol /l); van beide NO donoren natriumnitroprusside (SNP, 1 mmol /l) en S-nitroso-N-acetyl-penicillamine (SNAP; 0,1 mmol /l); het substraat voor endogeen NO productie, L-arginine (0,1 mmol /l) [15]. Alle klier suspensies, ook die welke niet waren gestimuleerd, werden geïncubeerd in een schuddend waterbad bij 37 ° C gedurende 30 minuten, waarna we histamine tot een uiteindelijke concentratie van 50 umol /L of dibutyryl-cAMP (db-cAMP) toegevoegd een eindconcentratie van 1 mmol /L. Om degradatie van cyclische nucleotiden te voorkomen, voegde we 0,1 mmol /l 3-isobutyl-1-methylxantine (IBMX) om alle prikkels.
Bepaling van de [14C] aminopyrine accumulatieratio
Een bekende methode gebruikt om indirect meten zuursecretie door geïsoleerde maag klieren is om accumulatie van 14C-gelabeld aminopyrine (AP) te bepalen in de klieren zichzelf en in het supernatant na centrifugeren en vervolgens de berekening van de verhouding tussen die twee waarden (de AP ratio) [23] . Kortom zuursecretie werd gestimuleerd bij 37 ° C gedurende 40 minuten en daarna 0,5 uCi [ 14C] -gelabelde aminopyrine werd toegevoegd aan de buisjes die werden vervolgens verder bij 37 ° C gedurende 90 minuten geïncubeerd. Daarna werd de suspensie overgebracht naar klier tevoren gedroogde en gewogen buizen, die bij 4000 rpm werden gedurende twee minuten. Het supernatant werd verwijderd en overgebracht naar scintillatieflesjes. De pellets (klieren) werden gedroogd bij 100 ° C en het droge gewicht werd bepaald, en de klieren werden vervolgens geresuspendeerd in 0,5 mol /l NaOH bij 60 ° C en overgebracht naar scintillatieflesjes. De radioactiviteit van de klieren en de supernatant werd bepaald in een vloeistofscintillatieteller (1214 Rackbeta, LKB), en de AP werd berekend met de volgende formule [24]: waarin
IGW is intraglandular watervolume (= 2 x de drooggewicht van klieren in mg).
Achtergrond accumulatie van AP is in de waarden die de secretorische respons. De AP's voor achtergrond en histamine-en db-cAMP-gestimuleerde omstandigheden verschillen tussen de individuen. Daarom is voor elk onderwerp, hebben we de AP ratio voor gestimuleerde klieren en oordeelde dat de waarde 100% te zijn en gebruikte het als een individuele referentiewaarde. Alle waarden zijn gebaseerd op een enkele analyse. Statistische gegevens
De gegevens werden geanalyseerd door één steekproef teken testen vergelijken mediane waarden met behulp van MINITAB ™ statistische software. P-waarden kleiner dan 0,05 werden als significant beschouwd.
Immunohistochemie
Geïsoleerd maagklieren van vijf proefpersonen geplaatst gebracht Super Frost * /Plus objectglaasjes (Menzel-Glaser Duitsland) en daarna gewassen met PBS en gepermeabiliseerd met 100 % ethanol bij -70 ° C gedurende 5 minuten. Daarna werden de objectglaasjes geïncubeerd bij kamertemperatuur overnacht met konijn anti-NOS3 antilichaam (1: 1000; Santa Cruz Biochemicals) en vervolgens in PBS grondig gewassen en geïncubeerd gedurende 1 uur met gebiotinyleerd geiten anti-konijn secundair antilichaam. Dia's, waar primaire antilichaam was weggelaten dienden als negatieve controles. De objectglaasjes werden vervolgens opnieuw gewassen en gebiotinyleerd antilichaam werd gedetecteerd door blootstelling aan 20 ug /ml Texas Red ® avidine (Vector Laboratories) gedurende 1 uur. Na deze behandeling werden de glaasjes gewassen en afgedekt middels Vectashield ® fixeermiddel. Een Nikon Eclipse ® E800 fluorescentiemicroscoop met VFM EPI-fluorescentie bevestiging werd gebruikt voor de objectglaasjes onderzoeken en evalueren. Een banddoorlaatfilter met een golflengtebereik van 520-560 nm en een lange-pass filter met een cut-on golflengte bij 590 nm (voor het uitgezonden licht) toegepast voor het visualiseren Texas Red ® moleculen.
Hematoxyline en eosine kleuring
voor morfologische evaluatie, klieren werden vastgesteld op glasplaatjes en gekleurd met Harris hematoxyline gedurende vijf minuten en 0,5% eosine Y gedurende twee minuten. Elke stap werd gevolgd door een spoeling in leidingwater.
Resultaten
We bestudeerden de effecten van NO op de zuursecretie geïnduceerd door diverse prikkels in maagklieren geïsoleerd uit maag biopten uit menselijk. Morfologisch onderzoek van de hematoxyline-eosine-gekleurde coupes toonde dat de isolatiewerkwijze succes heeft opgeleverd gehele klier preparaten en pariëtale cellen in de maag klieren waren. Immunohistochemische analyse toonde dat de geïsoleerde klieren bevatte eNOS-immunoreactieve cellen (Fig. 1), hetgeen overeenkomt met de resultaten verkregen met andere mucosale preparaten [22]. Controle-experimenten werden primair antilichaam werd uitgesloten vertoonden geen immunoreactiviteit. Figuur 1 Immunofluorescentie van een geïsoleerde maagklierwerking. Immuunlokalisatie van eNOS (pijlpunten) in een maagklierwerking geïsoleerd uit humane oxyntic mucosa werd bereikt met een konijn anti-eNOS polyklonaal antilichaam. De resultaten werden zichtbaar gemaakt met Texas Red ®-geconjugeerd geit anti-konijn IgG. Bar = 30 urn
Achtergrond AP-accumulatie
Achtergrond AP accumulatie werd waargenomen in de geïsoleerde klieren, met een mediane AP verhouding van 8,6. (Range 2,5-22,1; n = 19). Na toediening van 50 micromol /l van histamine of 1 mmol /l db-cAMP, de mediane AP ratio's waren 24,7 (5,8-64,5; n = 16) en 38,2 (range 7,6-47,8; n = 11) respectievelijk. De respons op zowel histamine en db-cAMP boven de achtergrond met een factor 2-4 in alle preparaten (fig. 2 en 3). Figuur 2 Accumulatie van 14 C-gemerkt aminopyrine in histamine gestimuleerde maagklieren. Alle waarden zijn uitgedrukt als percentage van de maagzuursecretie geïnduceerd door histamine (als 100% zijn), die apart berekend voor maagklieren geïsoleerd uit elk van de gezonde vrijwilligers. Elk symbool geeft de resultaten van een individu. a) Accumulatie van 14C-aminopyrine in klieren voorbehandeld met de NO nitroprussidenatrium (SNP, 1 mmol /L) of met L-arginine (0,1 mmol /l), het substraat voor endogeen NO productie. Te zien is dat SNP duidelijk verminderde accumulatie AP (mediaan = 48%; p < 0,05), wat aangeeft dat NO remt de maagzuursecretie van het geïsoleerde klieren. Achtergrond 14C-aminopyrine accumulatie (bg) wordt ook getoond. b) Accumulatie van 14C-aminopyrine in maagklieren voorbehandeld met de NOS remmers L-NNA (0,1 mmol /L) en L-NAME (1 mmol /l), respectievelijk. L-NAME veroorzaakt verhoogde accumulatie (mediaan = 147%; p < 0,05), hetgeen suggereert dat zuursecretie verhoogd wanneer endogene NO productie voorkomen, wijst een remmende rol van endogeen NO in menselijke maagklieren. D-NAME, de biologisch inactieve stereo-isomeer van L-NAME, had geen invloed op de zuursecretie niet en werd derhalve gebruikt als controlemiddel.
Figuur 3 Ophoping van 14 C-gemerkt aminopyrine in db- cAMP-gestimuleerde maagklieren. Alle waarden zijn uitgedrukt als percentage van de waarde die de maagzuursecretie geïnduceerd door db-cAMP (als 100% zijn), die afzonderlijk berekend voor elk van de onderzochte proefpersonen. Elk symbool staat voor de gegevens van een individu. a) Voorbehandeling met SNP (mediaan = 63%; p < 0,05) of SNAP (mediaan = 81%; p < 0,05) om exogeen NO loslaat voordat het toevoegen van db-cAMP te zuursecretie stimuleren verminderde de accumulatie van 14C-aminopyrine in maagklieren, in vergelijking met die secretie waargenomen in onbehandelde klieren. Dit geeft aan dat NO zuursecretie in de maag klieren geïsoleerd uit mens kan remmen. b) Behandeling met L-NAME om NOS te remmen in de maagklieren verhoogde de accumulatie van 14C-aminopyrine na stimulatie met db-cAMP (mediaan = 152%; p < 0,05). Deze resultaten tonen aan dat NO remt db-cAMP geïnduceerde zuursecretie. De NO substraat L-arginine verminderde de accumulatie van 14C-aminopyrine in db-cAMP-gestimuleerde klieren (mediaan = 77%; p < 0,05). Achtergrond accumulatie (bg) wordt ook getoond.
Effect van NO donoren en NOS remmers op-histamine gestimuleerde maagzuursecretie
Pre-behandeling van geïsoleerde klieren met de exogene NO donor SNP (1 mmol /l) reduceerde de histamine antwoord op een mediaan van 48% (n = 7) van de respons waargenomen in niet-voorbehandelde klieren (100%). In vier van de vijf klier preparaten, het substraat voor endogene NO-vorming, L-arginine (0,1 mmol /l), verlaagde de AP ratio. Dit effect was echter niet significant (Fig. 2a). Wanneer geïsoleerd klieren werden voorbehandeld met NOS-remmer L-NAME (1 mmol /l), en vervolgens blootgesteld aan histamine, werd de AP-verhouding aanmerkelijk verhoogd tot een gemiddelde waarde van 147% (n = 13). Hoewel een klein aantal individuen werden getest, L-NNA (0,1 mmol /l) leverde een vergelijkbaar resultaat; 172% (n = 2). Ter vergelijking, in controle-experimenten, de L-NAME analoog D-NAME (1 mmol /l) had geen effect op door histamine gestimuleerde maagzuursecretie (fig. 2b).
Effect van NO donoren en NOS-remmers op db -cAMP gestimuleerde maagzuursecretie
blootstellen van de geïsoleerde klieren db-cAMP verhoogde de maagzuursecretie opzichte van het achtergrondniveau. In vergelijking met onbehandelde klieren, die waren voorbehandeld met SNP (1 mmol /L) of SNAP (0,1 mmol /l) geaccumuleerde minder AP na stimulatie met db-cAMP; 63% (n = 9) en 81% (n = 8) (Fig. 3a). Bovendien, vergelijkbaar met histamine gestimuleerde secretie werd de db-cAMP-geïnduceerde secretie verhoogd tot een gemiddelde van 152% (n = 9) in klieren die voorbehandeld met L-NAME (1 mmol /l) was. Hoewel geen effect op L-arginine-histamine gestimuleerde maagzuursecretie te zien, was er een significant effect van L-arginine op db-cAMP-geïnduceerde secretie. Zuurproductie werd geremd mediaan van 77% (n = 10) in die voorbehandeld met L-arginine (0,1 mmol /l)
(fig. 3b). Bespreking
De methode om geïsoleerde maagklieren in vitro is zeer geschikt voor het bestuderen van de interactie tussen maagzuursecretie en diverse endocriene signalen. Deze techniek is grondig onderzocht, vooral in dierproeven en is gemeld goede reproduceerbaarheid [23] bieden. Ook uit onderzoek van maagklieren geïsoleerd uit maag biopten genomen van mens [24], bleek dat zowel histamine en db-cAMP induceerde secretorische respons die reproduceerbaar waren bij herhaald gebruik klier preparaten van hetzelfde onderwerp, hoewel er een aanzienlijke interindividuele variatie. Fellenius et al. [24] en Haglund et al. [25] hebben gemeld dat zowel histamine en db-cAMP gestimuleerde maagzuurafscheiding van geïsoleerde humane maagklieren en dit werd waargenomen als een twee- tot drievoudige toename van accumulatie AP opzichte van het achtergrondniveau. Deze resultaten komen overeen met onze gegevens die zijn verkregen met behulp van histamine en db-cAMP. Het is bekend dat NO vrijgeeft SNP [26], en in onze experimenten SNP verminderde maagzuursecretie van alleenstaande klieren. Vandaar dat er geen remt de zuursecretie in geïsoleerde menselijke maag klieren. Sommige van de effecten van SNP kan worden veroorzaakt door cytotoxische interactions, terwijl een dergelijke effect werd gevonden in een studie van geïsoleerde konijn maagklieren [15]. Om uit te sluiten de mogelijkheid van een cytotoxische invloed, voerden we aanvullende experimenten met behulp van de NO-donor SNAP, die chemische eigenschappen die verschillen van die van SNP heeft. In deze experimenten, zagen we dezelfde verlaging van AP accumulatie na stimulatie met db-cAMP, die verder begunstigt de conclusie dat NO in feite verantwoordelijk voor analyseresultaten. In db-cAMP gestimuleerde klieren, was de geïnduceerde secretorische respons verminderd met L-arginine, een verbinding die afhangt van een endogene factor (dwz eNOS) genereren NO, maar deze vermindering niet zo uitgesproken als de daling veroorzaakt door SNP en SNAP. Er zijn een aantal mogelijke verklaringen voor deze waarneming. Als er al genoeg L-arginine in de klieren NO productie in stand ten tijde van het experiment, toevoeging van L-arginine dus zonder effect. Bovendien kan L-arginine een zwak effect hebben omdat het effect van NO trad met op- of neerwaartse regulatie van het enzym NOS en werd niet beïnvloed door de toegang tot substraat. Desondanks heeft L-arginine de accumulatie van AP verminderen, hoewel niet zoveel als exogene NO donoren heeft op de onderhavige doses. Dit geeft aan dat een speciale proces is verantwoordelijk voor het genereren van NO uit L-arginine in geïsoleerde maagklieren. Deze resultaten zijn consistent met de studies waaruit blijkt dat SNP, SNAP, en L-arginine remde histamine gestimuleerde maagzuursecretie van maagklieren geïsoleerd uit dieren [13, 15]. L-arginine is ook waargenomen tot carbachol gestimuleerde maagzuursecretie in padden [16] te verminderen.
In een eerder onderzoek van onze onderzoeksgroep [22], onderzoek van het glandulaire epitheel van specimens van menselijk oxyntic slijmvlies bleek dat een bepaald type cellen bevatten NOS. Deze eNOS-immunoreactieve cellen, gedefinieerd als endocriene cellen, waren in nauw contact met de pariëtale cellen. Deze twee kenmerken suggereren dat cellen volgens deze releasetype NO, die dus een paracriene regulator die de figuur van de pariëtale cellen beïnvloedt kan zijn. Deze aanname wordt ondersteund door een aantal andere voorwaarden. Bijvoorbeeld kan NR gemakkelijk binnendringen celmembranen en heeft een intracellulaire plaats van werking kunnen wijzen. Ook NO vrij korte levensduur, wat inhoudt dat bronnen die voor dit oxide genereren moet Dicht bij het NO doelcel zijn. In deze studie is het voorkomen van eNOS in de klieren getoond, maar eerder uitgebreide onderzoekingen met behulp van antilichamen tegen zowel nNOS en iNOS geen betekenisvolle aanwezigheid van een van de twee isovormen in de glandulaire epitheel van normale menselijke proefpersonen (niet gepubliceerde waarneming). Soortgelijke resultaten verkregen bij een onderzoek van geïsoleerde konijn maagklieren [15], vonden we dat de NOS remmers L-NAME en L-NNA, maar geen D-NAME, versterkt de uitscheiding stimulerend effect van histamine, die verder aangeeft dat de geïsoleerde menselijke klieren we gebruikten die het enzym NOS. Zowel de toename van de AP verhouding die we waargenomen na remming van NOS en de daling van secretorische responsen die wij klieren behandeld met opgemerkt L-arginine versterkt de hypothese dat NO wordt geproduceerd door cellen in het glandulaire epitheel en, wanneer vrijgegeven, het interfereert met gestimuleerde zuursecretie. Interessant is dat de genoemde observaties suggereren dat de afgifte van NO wordt gehandhaafd, ongeacht of zuursecretie wordt gestimuleerd, hetgeen impliceert dat NO functioneert als een endogene remmer van maagzuurafscheiding. De intensiteit van deze remming waarschijnlijk afhankelijk van het aantal eNOS-bevattende endocrine-achtige cellen die aanwezig zijn in de nabijheid van de pariëtale cellen. Ondernemingen De exacte mechanismen achter deze paracriene regulatie van maagzuursecretie is nog niet opgehelderd. Er zijn verschillende trajecten in de pariëtale cel die kan worden beïnvloed door NO. Het kan ADP ribosylering van G-actine [27] te induceren, waardoor het cytoskelet beïnvloeden. Dit kan belangrijk voor de morfologische veranderingen die cellen vertonen pariëtale tijdens zuursecretie zijn. Indien derhalve NO heeft een blijvende invloed op een element, zoals het cytoskelet, kan het een rol in de door Forte et al voorgesteld membraanrecyclage hypothese spelen. [28]. Kort samengevat, die theorie suggereert dat pariëtale cellen ondergaan de volgende morfologische veranderingen: ze hebben een groot werkzaam oppervlak secretorische tijdens de stimulerende fase, en ze een minimale actieve secretoire oppervlak weergeven tijdens de rustfase
Omdat het bekend dat guanylaatcyclase is. een algemene doelstelling van NO in verschillende celsystemen, hebben sommige onderzoekers gesuggereerd dat NO oefent zijn effecten via cyclisch guanosine 3 ', 5'-monofosfaat (cGMP) in zowel ratten als honden pariëtale cellen [13, 15]. Een lopende studie in ons laboratorium zal blijken of dit het geval is in menselijke pariëtale cellen. Stroomafwaarts gelegen van cGMP kunnen activatie van verschillende effectoren, zoals ionenkanalen, proteïnekinasen, en fosfodiësterasen [29]. Het is ook aannemelijk dat NO zijn effect alleen kan uitoefenen, zonder de andere signaalmoleculen. Onder experimentele omstandigheden, kan NO nitrosylering en nitrering van cellulaire eiwitten induceren, hoewel dit waarschijnlijk niet het geval in vivo, aangezien deze twee processen vaak tot blijvende schade aan vitale functies [30]. Er is een mogelijkheid dat de onderdrukking van zuursecretie treedt niet alleen op pariëtale celniveau, maar via andere celtypen. ECL-cellen waarschijnlijk aanwezig zijn in de klier preparaat en bij de rat, deze cellen hebben het vermogen om histamine bij toenemende intracellulaire niveaus van cAMP [31]. NO kan deze histamine-afgifte [14] vertragen en daardoor verder bij aan de remming van maagzuursecretie. Hoewel er weinig bekend over de menselijke ECL-cellen en het effect van NO op histamine-afgifte zijn er studies die soorten verschillen voor andere histamine-afscheidende cellen geven. Bijvoorbeeld, rat mestcellen blijkt een "NO-achtige factor" die histamine-afgifte [32] remt terwijl er onderzoeken die aangeven dat NO geen invloed histamine-secretie in menselijke basofielen [33] produceren. Momenteel zijn de enige verschillen in remmende respons op L-arginine voor histamine en db-cAMP stimulatie
stellen.
Verder onderzoek is nodig om de rol van NO in pariëtale celfunctie verduidelijken.
Conclusies De resultaten van de onderhavige studie suggereren dat endogeen NO geproduceerd in het menselijk oxyntic mucosa kunnen de stimulerende effecten van histamine of db-cAMP op de maagzuursecretie te verminderen. We verkregen uniforme resultaten voor maag-klieren geïsoleerd uit verschillende gezonde proefpersonen, hetgeen impliceert dat NO vrijkomt uit specifieke cellen in het secretoire slijmvlies speelt een belangrijke fysiologische rol in de regulatie van de maagzuursecretie.
Verklaringen
Dankwoord
Wij danken Ulf Hannestad voor het uitvoeren van de urease ademtests, Inga-Lill Andersson en Gunilla Strand voor hulp bij de gastroscopisch procedures en Marja Tjädermo voor technische ondersteuning. Dit werk werd ondersteund door AstraZeneca R & D, Zweden.
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12876_2004_88_MOESM2_ESM.ppt Authors' 12876_2004_88_MOESM1_ESM.ppt Auteurs oorspronkelijke bestand naar originele bestand figuur 2 12876_2004_88_MOESM3_ESM.ppt Authors 'voor figuur 3 Competing belangen
geen gemeld.

• Onvolledige gastrische metaplasie bij kinderen met insuline-afhankelijke diabetes mellitus en coeliakie. Een ultrastructurele study
• Expressie van serum miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a en hun correlaties met pepsinogen in atrofische gastritis en maagkanker: een case-control study