Оксид азота-эндогенным ингибитором секреции желудочной кислоты в изолированных желудочных железах человека

Окись азота-ингибитор эндогенной секреции желудочной кислоты в изолированных желудочных желез человека
Аннотация
Справочная информация
эндотелиальной синтазы окиси азота (Енос) ранее был обнаружен в железистой части слизистой оболочки желудка человека. Кроме того, оксид азота (NO), было показано, что влияет на желудочную секрецию в различных моделях на животных. Настоящее исследование было проведено с целью изучения влияния экзогенного и эндогенного NO происходит на секрецию histamine- и цАМФ-стимулированной желудочной кислоты в изолированных oxyntic желез человека.
Методы
Oxyntic железы были выделены из желудка биопсии человека, а затем были предварительно -обработанной с NO донорами и азота ингибиторы оксида азота, а затем подвергаются гистамина или дибутирил-цАМФ (DB-цАМФ). Секреторная реакция желез была определена как накопление [ 14C] аминопирин.

Результаты The histamine- или DB-цАМФ-индуцированной секреции кислоты была ослаблена L-аргинин, известного источника эндогенного NO , а также с помощью нитропруссида NO-доноров натрия (SNP) и S-нитрозо-N-ацетил-пеницилламин (SNAP). Предварительная обработка с любым из ингибиторов NOS N G-нитро-L-аргинин метил эфир (L-NAME) или N G-нитро-L-аргинин (L-NNA) усиливает секреторную реакцию.
Заключение
Наши результаты показывают, что NO ингибирует секрецию желудочной кислоты в изолированных желудочных железах человека, и что существует эндогенное образование NO в железистого эпителия вблизи париетальных клеток.
фон
оксида азота (NO), получают из L-аргинина в реакции, катализируемой ферментом, оксида азота-синтазы (NOS) [1, 2]. NO является важной биологической сигнальной молекулой, которая влияет на циркуляцию, регулируя сосудистый тонус гладкой мускулатуры и модуляции системного артериального давления. Кроме того, NO участвует в синапсах; это является решающим фактором в воспалительной реакции и иммунитета [3-5]; и было показано, оказывают положительное воздействие на слизистую оболочку обороны в желудочно-кишечной системе. В ряде исследований (обзор см [6]), химически индуцированное повреждение слизистой оболочки, казалось, быть уменьшен путем одновременного добавления NO и нарушение путем удаления NO из слизистой оболочки желудка. Объяснение этих выводов может быть, что не увеличивает поток крови через слизистую оболочку [7], и было высказано предположение, что NO усиливает высвобождение слизи [8]. Вполне вероятно, что НЕТ также участвует в регуляции других секреторные процессы в желудочно-кишечном тракте. Takeuchi и соавторами [9] сообщили, что NO ингибирует секрецию двенадцатиперстной бикарбоната, в то время как другие исследователи предположили, что бикарбонат секреция стимулируется NO [10, 11]. Кроме того, некоторые исследования показали, что NO влияет на секрецию желудочной кислоты [12-16].
Эксперименты на животных предоставили противоречивую информацию о взаимодействии между NO и секреции желудочной кислоты. Например, исследования в пробирке показали, что NO стимулирует секрецию желудочной кислоты у мышей [17, 18] и [19 лягушки]. Кроме того, аналогичные результаты были получены у собак [12]. Тем не менее, другие исследования показали, что NO ингибирует секрецию желудочной кислоты у крыс [13, 14], в желудочных желез, выделенных из кроликов [15], а также в слизистой оболочке из жаб [16]. Исследования людей представили данные, указывающие, что NO может ингибировать как и увеличить внутрижелудочный рН [20, 21], но пока не известно, как это соединение участвует в секреции желудочной кислоты в организме человека.
В более раннем исследовании мы обнаружили морфологические поддержка, что эндогенный NO играет роль в регуляции функции обкладочных клеток [22]. Кроме того, иммуногистохимические данные этого исследования выявили наличие эндогенных NOS в эпителиальных клетках нормальной человеческой oxyntic слизистой оболочки, а точнее, в обоих поверхностных слизистых клеток и эндокринных клеток. Кроме того, мы обнаружили, что там были тесные контакты между Енос-позитивными клетками и париетальных клеток либо потому, что Енос-позитивные клетки контактируют париетальные клетки с помощью цитоплазматических процессов или были инвагинированного с помощью париетальных клеток. Основываясь на этих выводах, наряду с химическими свойствами NO, мы пришли к выводу, что NO происходит от эндокринных-подобных клеток может быть паракринная регулятором секреции желудочной кислоты. В настоящем исследовании, наша цель состояла в том, чтобы проверить эффект экзогенного NO на секрецию histamine- и цАМФ-стимулированной желудочной кислоты в организме человека, а также определить, имеет ли эндогенно получен NO функциональное действие на клетки теменной человека.
Методы <бр> Субъекты и этическое утверждение
Двадцать четыре здоровых мужчин в возрасте от 22 до 31 лет были приняты на работу в качестве оплачиваемых добровольцев. Критерии отбора предусматривает, что субъекты должны были быть свободны от болезни и не должны приниматься какие-либо лекарства или алкоголь впитывается в течение по крайней мере за одну неделю до экзамена. Мужчины постился в течение по крайней мере за шесть часов до начала экзамена.
Фарингальный анестезии индуцировали с лидокаином спрея (Xylocain ®, AstraZeneca, Седертелье, Швеция), после чего процедура гастроскопии была выполнена с использованием Olympus GIF-100 эндоскопа. Pinch биопсийных щипцов (Olympus FB 24K-1) были использованы взять образцы ткани из большой кривизны, сразу дистальнее на глазном дне. Во всех субъектах, слизистая оболочка желудка оказалась нормальной, как макроскопически и гистологически. Все пациенты испытали недостаток для Helicobacter Pylori
инфекции в тесте уреазы дыхания (Diabact ® УБТ 50 мг 13С-мочевина, Diabact AB, Уппсала, Швеция).
Экспериментальные процедуры были утверждены Региональный комитет по этике по изучению человека в университетском госпитале, Линчепинг, Швеция (Файл нет. 02-039), и все субъекты дали информированное согласие.
Секреторное исследование
Выделение и инкубации желудочных желез
текущие эксперименты основана на методике, которая была впервые описана в 1976 году для использования у кроликов в пробирке [23] и в настоящее время хорошо установленного для косвенного определения секреции желудочной кислоты, вызванной различными стимулами. Способ выделения желудочных желез была первоначально разработана для животной ткани, но позже она была усовершенствована таким образом, что он также может быть применен к небольшим количеством ткани человека [24].
Oxyntic слизистых оболочек биопсий человека, используемые в нашем исследовании были промыты и хранили не дольше, чем 15 минут в охлажденном на льду окисленной фосфатно-солевом буфере (PBS). Образцы тканей разрезают на более мелкие кусочки с ножницами и переносили на окисленный (100% O <суб> 2) коллагеназы раствор фермента (130,0 мМ NaCl, 12,0 мМ NaHCO <суб> 3, 3,0 мМ Na <суб> 2HPO <к югу от> 4, 3,0 мМ K <суб> 2HPO <суб> 4, 2,0 мМ MgSO <суб> 4, 1,0 мМ CaCl <югу> 2, 0,1 мМ N (альфа) -tosyl-L-лизина хлорметилкетона [ ,,,0],TLCK], 10 мкМ индометацина, 10 мМ глюкозы, 2 мг /мл сывороточного альбумина человека [ЧСА; Sigma], и 1 мг /мл коллагеназы типа IA [Sigma]). Смесь помещали в С водяной бане при 37 ° и осторожно перемешивают в течение 120 мин, после чего большинство обработанных образцов разложилась, в результате чего в основном изолированных желудочных желез. Затем смесь фильтруют через сито 200 мкм. Выделенные железы отмывали и ресуспендировали в предварительно нагретом (37 ° С) респираторного среды (132,4 мМ NaCl, 1,0 мМ NaH <суб> 2PO <суб> 4, 1,2 мМ MgSO <суб> 4, 5,4 мМ КСl, 5,0 мМ Na <суб> 2HPO <суб> 4, 1,0 мМ CaCl <суб> 2, 10 мкМ индометацина, 10 мМ глюкозы, и 2 мг /мл ЧСА). Железы были затем переносили в пробирки, содержащие свежие дыхательную среду, к которой мы добавили один из следующих вариантов: Ингибитор БДУ N G-нитро-L-аргинин метил эфир (L-NAME; 1 ммоль /л) или эквивалентные количества его биологически неактивный энантиомер N G-нитро-D-аргинин метиловый эфир (D-NAME); ингибитор NOS N G-нитро-L-аргинин (L-NNA; 0,1 ммоль /л); любой из двух доноров NO нитропруссид натрия (SNP; 1 ммоль /л) и S-нитрозо-N-ацетил-пеницилламин (SNAP; 0,1 ммоль /л); субстрат для производства эндогенного NO, L-аргинина (0,1 ммоль /л) [15]. Все железы суспензии, в том числе и те, которые не были стимулированы, инкубировали в встряхивании на водяной бане при 37 ° С в течение 30 минут, после чего мы добавили гистамин до конечной концентрации 50 мкмоль /л или дибутирил-цАМФ (ДБ-цАМФ) в конечная концентрация 1 ммоль /л. Для предотвращения деградации циклических нуклеотидов, мы добавили 0,1 ммоль /л 3-изобутил-1-methylxantine (IBMX) для всех раздражений.
Определение [14C] отношение накопления аминопирин
хорошо налаженной метод, используемый косвенно измерить секрецию кислоты с помощью изолированных желудочных желез является определение накопления 14С-меченого аминопирин (AP) в железах сами по себе и в надосадочной жидкости после центрифугирования, а затем рассчитать соотношение между этими двумя значениями (так называемый коэффициент AP) [23] , Короче говоря, секреции кислоты стимулировали при 37 ° С в течение 40 минут, а после этого 0,5 мкКи [ 14C] помечены аминопирин был добавлен в пузырьках, которые были затем дополнительно инкубировали при 37 ° С в течение 90 минут. После этого суспензия железа переносили в предварительно высушена и взвешена трубок, которые центрифугировали при 4000 оборотов в минуту в течение двух минут. Надосадочную жидкость удаляли и переносили в сцинтилляционные флаконы. Гранулы (железы) сушат при 100 ° С, а сухой вес был определен, и гланды были впоследствии повторно суспендировали в 0,5 моль /л NaOH при 60 ° С и переносили в сцинтилляционные флаконы. Радиоактивность желез и супернатант определяли в жидкостном сцинтилляционном счетчике (1214 RackBeta, LKB), а отношение АП рассчитывалась по следующей формуле [24]: где
IGW является intraglandular объем воды (= 2 × сухой вес желез в мг).
Предпосылки накопление AP включена в значения, представляющие секреторного ответа. Коэффициенты AP для фона и гистамина и дб-цАМФ-стимулированных условиях отличались между частными лицами. Таким образом, для каждого субъекта, мы определили соотношение AP для стимулированных желез и считает, что значение равным 100% и использовали его в качестве индивидуального эталонного значения. Все значения основаны на единичных анализов.
Статистика
Данные были проанализированы с помощью одного образца испытаний знак сравнения медианные значения с помощью Minitab ™ статистического программного обеспечения. Значения P менее 0,05 считались значимыми.
Immunohistochemistry
изолированных желудочных желез из пяти испытуемых помещали на заряженный Супер Frost * /Plus предметные стекла (Мензель-Glaser, Германия), а затем промывали PBS и пермеабилизовали 100 % этанола при -70 ° С в течение 5 мин. Затем предметные стекла инкубировали при комнатной температуре в течение ночи с кроличьей анти-NOS3 антитела (1: 1000; Santa Cruz Биохимикаты), а затем тщательно промывают в PBS и инкубировали в течение 1 ч с биотинилированным козьим анти-кроличьим вторичным антителом. Слайды, где первичное антитело было оставлено из служили в качестве отрицательного контроля. Срезы затем промывают снова, и биотинилированные антитела определяли путем облучения до 20 мкг /мл Texas Red ® авидином (Vector Laboratories) в течение 1 ч. После этой обработки, слайды были промыты и с использованием Vectashield покрывали ® гистологическая среда. Компанией Nikon Eclipse, ® E800 флуоресцентный микроскоп с приложением EPI-флуоресцентной ГФП использовали для изучения и оценки слайдов. Полосовой фильтр с диапазоном длин волн от 520-560 нм и фильтр долго частот с вырезом на длине волны при 590 нм (для излучаемого света) были использованы для визуализации Texas Red ® молекул.
Гематоксилином и эозином
для морфологической оценки железы были зафиксированы на стеклах и окрашивали гематоксилином Харриса в течение пяти минут и 0,5% эозина Y в течение двух минут. Каждый шаг был с последующим промыванием в водопроводной воде.
Результаты
Мы изучали влияние NO на секрецию кислоты, вызванной различными стимуляторами в желудочных желез, выделенных из биопсий желудка от человека. Морфологическое исследование на гематоксилин-эозином, окрашенного слайдах показал, что процедура выделения успешно давала всей железы препараты и что париетальных клеток присутствовали в желудочных желез. Иммуногистохимическое анализ показал, что выделенные железы содержали ENOS-иммунореактивных клеток (рис. 1), что согласуется с результатами, полученными с использованием других типов слизистых оболочек препаратов [22]. Контрольные эксперименты были первичные антитела были исключены не показали иммунореактивности. Рисунок 1 иммунофлюоресценции изолированной железы желудка. Иммунолокализация Эноса (наконечники стрел) в желудочной железы, выделенной из oxyntic слизистой оболочки человека была достигнута с помощью кролика анти-Енос поликлональные антитела. Результаты были визуализированы с Техас Red® конъюгированные с козьими антителами против IgG кролика. Bar = 30 мкм
Background AP-накопления
накопления фона AP наблюдалось в изолированных желез, со средним коэффициентом AP 8.6. (Диапазон 2.5-22.1; п = 19). После введения 50 мкмоль /л гистамина или 1 ммоль /л дб-цАМФ, медианные показатели AP были 24.7 (5.8-64.5; п = 16) и 38,2 (диапазон 7.6-47.8; п = 11) соответственно. Реакция на обоих гистамина и ДБ-цАМФ превысил фона на коэффициент примерно 2-4 во всех препаратах (рис. 2 и 3). Рисунок 2 Накопление 14 С-меченого аминопирин в гистамин-стимулированной желудочных желез. Все величины выражены в процентах секреции кислоты желудочного сока, вызванного гистамином (считается 100%), который рассчитывается отдельно для желудочных желез, выделенных из каждого из здоровых добровольцев. Каждый символ представляет результаты для одного индивидуума. а) Накопление 14C-аминопирин в железах, предварительно обработанных с NO нитропруссид натрия донор (SNP, 1 ммоль /л) или с L-аргинина (0,1 ммоль /л), субстрат для эндогенного NO производства. Можно видеть, что СНП заметно снижается накопление AP (медиана = 48%; р ≪ 0,05), что указывает на то, что NO ингибирует секрецию кислоты из изолированных желез. Фон накопления 14С-аминопирин (BG) также показано на рисунке. б) накопление 14C-аминопирин в желудочных железах, предварительно обработанных с NOS ингибиторы L-NNA (0,1 ммоль /л) и L-NAME (1 ммоль /л), соответственно. L-NAME вызвало повышенное накопление (медиана = 147%, р &лт; 0,05), что свидетельствует о секреции кислоты повышается, когда предотвращается производство эндогенного NO, что указывает на тормозящее роль эндогенного NO в желудочных желез человека. D-NAME, который является биологически неактивными стерео-изомер L-NAME, не оказывает влияние на секрецию кислоты, и, следовательно, он был использован в качестве контрольного вещества. Рисунок 3
Накопление 14 С-меченого аминопирин в dB- цАМФ-стимулированной желудочных желез. Все величины выражены в процентах от значения, представляющего секрецию желудочной кислоты, индуцированное ДБ-цАМФ (считается 100%), который был рассчитан отдельно для каждого из исследованных субъектов. Каждый символ представляет собой данные для одного человека. а) Предварительная обработка с SNP (медиана = 63%; р &ЛТ; 0,05) или SNAP (медиана = 81%; р &л; 0,05), чтобы освободить экзогенного NO перед добавлением DB-цАМФ, чтобы стимулировать секрецию кислоты снижается накопление 14C-аминопирин в желудочных желез, по сравнению с уровнем секреции видели в неочищенных желез. Это указывает на то, что NO может ингибировать секрецию кислоты желудочного желез, выделенных у человека. б) Лечение с L-NAME ингибировать NOS в желудочных желез увеличило накопление 14C-аминопирин после стимуляции дб-цАМФ (медиана = 152%; р &лт; 0,05). Эти результаты указывают на то, что NO ингибирует секрецию ДБ-цАМФ-индуцированной кислоты. NO субстрата L-аргинина уменьшается накопление 14C-аминопирин в дб-цАМФ-стимулированных желез (медиана = 77%; р &лт; 0,05). Фон накопления (BG) также отображается.
Влияние NO доноров и NOS ингибиторов на секрецию желудочной кислоты гистамин-стимулированной
Предварительная обработка изолированных желез с экзогенной NO донора SNP (1 ммоль /л) снизили гистамин ответ на медиана 48% (N = 7) реакции, наблюдаемой в не предварительно обработанных желез (100%). В четырех из пяти железистых препаратов, субстрат для эндогенного NO образование L-аргинина (0,1 ммоль /л), не приводила к снижению отношения AP. Этот эффект, однако, не было статистически значимым (рис. 2а). Когда изолированные железы были предварительно обработаны с NOS ингибитор L-NAME (1 ммоль /л), а затем экспонировали на гистамин, отношение АР был заметно повышен до медианного значения 147% (n = 13). Несмотря на то, небольшое количество особей тестировали, L-NNA (0,1 ммоль /л) дает аналогичный результат; 172% (N = 2). Для сравнения, в контрольных опытах, то L-NAME аналог D-NAME (1 ммоль /л) не оказывает влияния на все на секрецию кислоты гистамин-стимулированной (рис. 2, б).
Влияние NO доноров и ингибиторов NOS на дб секрецию -цАМФ-стимулированной желудочной кислоты
Разоблачение изолированных желез DB-цАМФ увеличили секрецию кислоты желудочного сока по сравнению с фоновым уровнем. По сравнению с необработанными желез, те, которые были предварительно обработаны SNP (1 ммоль /л) или SNAP (0,1 ммоль /л) накапливается меньше АП после стимуляции ДБ-цАМФ; 63% (п = 9) и 81% (n = 8), соответственно (рис. 3, а). Кроме того, подобно секреции гистамина-стимулированной ДБ-цАМФ-индуцированной секреции была увеличена до медиана 152% (п = 9) в железах, которые были предварительно обработаны с L-NAME (1 ммоль /л). Хотя никакого эффекта на L-аргинина на секрецию кислоты гистамин-стимулированной не было видно, наблюдалось значительное влияние L-аргинина на ДБ-цАМФ-индуцированной секреции. Выход кислоты снижалось в среднем на 77% (N = 10) в тех предварительно обработанных L-аргинина (0,1 ммоль /л) (рис. 3б).
Обсуждение
Метод с использованием изолированных желудочных желез в пробирке хорошо подходит для изучения взаимодействия секреции желудочной кислоты и различных эндокринных сигналов. Эта методика была тщательно оценена, главным образом, в опытах на животных, и было сообщено, чтобы предложить хорошую воспроизводимость [23]. Кроме того, при изучении желудочных желез, выделенных из биоптатов желудка, взятых у человека [24], было установлено, что как гистамин и ДБ-цАМФ индуцируется секреторные ответы, которые воспроизводились при повторении с использованием сальниковых препараты из той же теме, хотя существуют значительные межиндивидуальная изменение. Fellenius и др. [24] и Haglund и др. [25] сообщили, что оба гистамин и дб-цАМФ стимулированную секрецию желудочного сока из изолированных желудочных желез человека, и это было отмечено как двух- к трехкратному увеличению накопления AP по сравнению с фоновым уровнем. Эти результаты согласуются с нашими данными, полученными с использованием гистамин и DB-цАМФ. Известно, что SNP выпускает NO [26], и в наших опытах SNP пониженной секреции желудочной кислоты из изолированных желез. Следовательно, NO ингибирует секрецию кислоты в изолированных желудочных железах человека. Некоторые из эффектов SNP может быть связано с цитотоксическими взаимодействий, хотя и не такое воздействие не было обнаружено при изучении изолированных желудочных железах кролика [15]. Чтобы исключить возможность влияния цитотоксического, мы провели дополнительные эксперименты с использованием NO донора SNAP, который имеет химические свойства, которые отличаются от таковых SNP. В этих экспериментах мы наблюдали такое же снижение накопления AP после стимуляции с дб-цАМФ, что дополнительно способствует к выводу, что NO является фактически ответственным за наблюдаемые результаты. В ДБ-цАМФ, стимулированной секреции, индуцированный секреторный ответ был уменьшен на L-аргинин, соединение, которое зависит от эндогенного фактора (т.е. Енос) для генерации NO, хотя это снижение не было столь выраженным, как уменьшение индуцированной SNP и ЩЕЛЧОК. Есть целый ряд возможных объяснений этого наблюдения. Если уже было достаточно, L-аргинин в железах не выдержать никакого производства во время эксперимента, добавление L-аргинина был, следовательно, без эффекта. Кроме того, L-аргинин, возможно, оказали слабое влияние, поскольку эффект NO происходит через вверх или вниз регуляции фермента NOS и не находился под влиянием доступа к субстрату. Тем не менее, L-аргинин сделал уменьшить накопление АП, хотя и не так сильно, как экзогенные доноры NO при нынешних дозах. Это указывает на то, что некоторые конкретный процесс отвечает за генерацию NO из L-аргинина в изолированных желудочных желез. Эти результаты согласуются с данными исследований, показавших, что СНП, Фиксированный и L-аргинин ингибирует гистамина-стимулированной секреции кислоты из желудочных желез, выделенных из животных [13, 15]. L-аргинин также наблюдалось для снижения секреции кислоты карбахолом-стимулированных в жаб [16].
В предыдущем исследовании, проведенном нашей исследовательской группой [22], изучение железистого эпителия особей oxyntic слизистой оболочки человека показало, что один конкретный тип клеток содержали NOS. Эти Енос-иммунореактивных клеток, определяемые как эндокринных клеток, находились в тесном контакте с париетальных клеток. Эти две характеристики позволяют предположить, что клетки этого типа выпуска NO, который, таким образом, мог бы быть паракринная регулятор, который оказывает непосредственное влияние на функцию париетальных клеток. Это предположение может быть поддержано рядом других условий. Например, NO может легко проникать через клеточные мембраны, которые могут указывать на внутриклеточный сайт действия. Кроме того, NO имеет довольно короткий срок службы, что подразумевает, что источники, необходимые для создания этого оксида должен быть доступен близко к клетке-мишени NO. В этом исследовании, появление ENOS в железах показано, но ранее обширные исследования с использованием антител против обоих нОАС и иСОА не выявили наличие какой-либо из двух изоформ в железистого эпителия нормальных человеческих субъектов (неопубликованные наблюдения). По аналогии с результатами, полученными при исследовании изолированных желудочных железах кролика [15], мы обнаружили, что NOS ингибиторы L-NAME и L-NNA, но не D-NAME, усиливал секрецию стимулирующий эффект гистамина, что дополнительно указывает, что изолированных человеческих желез, которые мы использовали содержали фермент NOS. И увеличение отношения AP, что мы наблюдали следующие ингибирование NOS и уменьшение секреторных реакций, которые мы отмечали в железах, обработанных L-аргинин подтверждают гипотезу о том, что NO вырабатывается клетками в железистого эпителия и, когда выпустили, это мешает с секрецией вынужденном кислоты. Интересно отметить, что упомянутые наблюдения указывают на то, что высвобождение NO выдержан, независимо от того, стимулированной секреции кислоты, которое подразумевает, что не функционирует в качестве эндогенного ингибитора секреции желудочной кислоты. Интенсивность этого торможения, вероятно, зависит от количества Эноса содержащих эндокринные-подобных клеток, которые присутствуют в непосредственной близости от париетальных клеток.
Точные механизмы, лежащие в этой паракринной регуляции секреции желудочной кислоты, еще предстоит выяснить. Есть несколько различных путей внутри париетальных клеток, которые могут быть затронуты NO. Это может вызвать АДФ рибозилирования из G-актина [27], тем самым влияя на цитоскелета. Это может иметь важное значение для морфологических изменений, которые теменной клетки обладают во время кислотной секреции. Соответственно, если НЕТ имеет стойкое воздействие на элемент, такой как цитоскелета, он может играть определенную роль в гипотезе рециркуляции мембрана предложенной Forte и др. [28]. Если коротко, то, что теория предполагает, что париетальных клеток претерпевают следующие морфологические изменения: они имеют большую активную поверхность секреторную в течение фазы стимуляции, и они показывают минимальную активную секреторную поверхность во время фазы покоя
Так как известно, что гуанилатциклаза есть. общая цель NO во многих клеточных системах, некоторые исследователи предположили, что NO оказывает свое действие через циклический гуанозин-3 ', 5'-монофосфата (цГМФ) в обеих крыс и кроликов париетальных клеток [13, 15]. Продолжающееся исследование в нашей лаборатории покажет, является ли случай в клетках теменных человека. Вниз по течению цГМФ могут включать в себя активацию ряда эффекторов, таких как ионные каналы, протеинкиназ, и фосфодиэстераз [29]. Кроме того, вероятно, что NO может оказывать свое действие в одиночку, не действуя через других сигнальных молекул. В экспериментальных условиях NO может вызывать нитрозилирование и нитрование клеточных белков, хотя это, вероятно, не так в естественных условиях, так как эти два процесса часто приводят к необратимому повреждению жизненно важных функций [30]. Существует возможность того, что происходит подавление секреции кислоты не только на уровне париетальных клеток, а через другие типы клеток. ЭСЛ-клетки, вероятно, присутствуют в железистой препарата и у крыс, эти клетки обладают способностью высвобождать гистамин в ответ на повышение внутриклеточной концентрации цАМФ [31]. NO может ингибировать этот гистамина-релиз [14] и тем самым еще больше способствовать торможению секреции кислоты. Хотя мало известно о человеческих ЭСЛ-клеток и влияние NO на гистамин-релиз Есть исследования, которые указывают на различия видов в других гистамин-секретирующих клеток. Например, крысы тучные клетки, как было показано, чтобы произвести "НЕТ-подобный фактор", который ингибирует гистамином релиз [32] в то время как существуют исследования, которые показывают, что NO не влияет на секрецию гистамина в человеческих базофилов [33]. В настоящее время мы можем только установить различия в ингибиторной ответ на L-аргинина для гистамина и дб-цАМФ стимуляции.
Необходимы дальнейшие исследования для выяснения роли NO в функции обкладочных клеток.
Выводы
выводов в настоящем исследовании не позволяют предположить, что NO эндогенно в произведенный человеческой oxyntic слизистую оболочку может уменьшить стимулирующее действие гистамина или DB-цАМФ на секрецию желудочной кислоты. Мы получили однородные результаты для желудочных желез, выделенных из различных здоровых людей, что подразумевает, что NO высвобождается из специфических клеток в секреторных слизистой оболочки играет важную физиологическую роль в регуляции секреции желудочной кислоты.

Объявления Подтверждения
Мы благодарим Ulf Hannestad для проведения испытаний дыхания уреазы, Inga-Lill Андерссон и Гунилла Strand помощи с гастроскопической процедур, и Марью Tjädermo для оказания технической помощи. Эта работа была поддержана AstraZeneca R &Amp; D, Швеция.
Авторов оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинальных представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для Рисунок 1 12876_2004_88_MOESM2_ESM.ppt Авторского 12876_2004_88_MOESM1_ESM.ppt авторов исходного файла для исходного файла Рисунок 2 12876_2004_88_MOESM3_ESM.ppt Авторского для фигурного 3 Конкурирующие интересы
Не заявлен.

• Неполное ЖМ у детей с инсулинозависимым сахарным диабетом и целиакии. Ультраструктурным study
• Выражение сывороточного MIR-20a-5p, пусть-7а, и микроРНК-320а и их корреляции с пепсиногена в атрофический гастрит и…