Nitrogenoxid-en endogen inhibitor af mavesyresekretion hos isolerede humane gastriske glands

nitrogenoxid-en endogen inhibitor af mavesyresekretion hos isolerede humane gastriske kirtler
Abstract
Baggrund
Endothelial nitrogenoxidsyntase (eNOS) har tidligere blevet påvist i glandulære del af den menneskelige gastriske mucosa. Endvidere nitrogenoxid (NO) har vist, at påvirke gastrisk sekretion i forskellige dyremodeller. Den foreliggende undersøgelse blev udført for at undersøge indflydelsen af ​​eksogent og endogent afledt NO på histamine- og cAMP-stimuleret mavesyresekretion i isolerede humane oxyntic kirtler.
Metoder
Oxyntic kirtler blev isoleret fra humane gastriske biopsier og blev efterfølgende pre -behandlede med NO-donorer og nitrogenoxidsyntaseinhibitorerne og derefter udsat for histamin eller dibutyryl-cAMP (db-cAMP). Den sekretoriske respons af kirtlerne blev bestemt som ophobning af [ 14C] aminopyrin.
Resultater
histamine- eller db-cAMP-induceret syresekretion blev svækket af L-arginin, en kendt kilde af endogent NO , og også af den NO-donorer natriumnitroprussid (SNP) og S-nitroso-N-acetyl-penicillamin (SNAP). Forbehandling med en af ​​NOS-inhibitorer N G-nitro-L-arginin-methylester (L-NAME) eller N G-nitro-L-arginin (L-NNA) forstærkede den sekretoriske respons.
Konklusion
Vores resultater viser, at NO inhiberer mavesyresekretion i isolerede humane gastriske kirtler, og at der er endogen dannelse af NO i kirtelepitel i nærheden af ​​parietalcellerne.
Baggrund
Nitrogenoxid (NO) fremstilles ud fra L-arginin i en reaktion katalyseret af enzymet nitrogenoxidsyntase (NOS) [1, 2]. NO er ​​en vigtig biologisk signalmolekyle, der påvirker cirkulationen ved at regulere vaskulær glat muskel-tonus og modulerende systemiske blodtryk. Desuden er NO involveret i neurotransmission; Det er en kritisk faktor i den inflammatoriske respons og immunitet [3-5]; og det er blevet vist at udøve en positiv indvirkning på mucosal forsvar i det gastrointestinale system. I flere undersøgelser (for en oversigt, se [6]), syntes at blive reduceret ved samtidig tilsætning af NO og forringet ved fjernelse af NO fra maveslimhinden kemisk induceret mucosal beskadigelse. En forklaring for disse oplysninger kunne være, at NO øger mucosal blodstrøm [7], og det er blevet foreslået, at NO forøger frigivelsen af ​​mucus [8]. Det er sandsynligt, at NO også er involveret i reguleringen af ​​andre sekretoriske processer i mave-tarmsystemet. Takeuchi og medarbejdere [9] har rapporteret, at NO hæmmer udskillelsen af ​​duodenal bicarbonat, mens andre forskere har foreslået, at bikarbonat sekretion stimuleres af NO [10, 11]. Desuden har flere undersøgelser indikerede, at NO påvirker sekretionen af ​​mavesyre [12-16]. Salg Dyreforsøg har givet modstridende oplysninger om samspillet mellem NO og mavesyresekretion. For eksempel har undersøgelser in vitro vist, at NO stimulerer sekretion af mavesyre i musen [17, 18] og bullfrog [19]. Desuden er lignende resultater blevet opnået i hunde [12]. Imidlertid har andre undersøgelser vist, at NO hæmmer mavesyresekretionen i rotter [13, 14], i gastriske kirtler isoleret fra kaniner [15], og i slimhinden fra tudser [16]. Studier af mennesker har givet data indikerer, at NO både kan hæmme og forøge intragastrisk pH [20, 21], men det vides endnu ikke, hvordan dette stof deltager i mavesyre sekretion hos mennesker.
I en tidligere undersøgelse fandt vi morfologiske støtte, at endogent NO spiller en rolle i regulering af parietale celle funktion [22]. Også de immunhistokemiske data fra undersøgelsen afslørede tilstedeværelsen af ​​endogene NOS i epitelceller af den normale menneskelige oxyntic slimhinde, mere præcist, i både overflade mukøse celler og endokrine celler. Derudover observerede vi, at der var tætte kontakter mellem eNOS-positive celler og parietalcellerne enten fordi eNOS-positive celler kontaktet parietalcellerne via cytoplasmatiske fremgangsmåder eller var sammentrækningsorgan af en parietalcellen. Baseret på disse resultater, sammen med de kemiske egenskaber af NO, konkluderede vi, at NO afledt af de endokrine-lignende celler kan være en parakrin regulator af gastrisk syresekretion. I den foreliggende undersøgelse, vores mål var at kontrollere effekten af ​​eksogent NO på histamine- og cAMP-stimuleret mavesyresekretion hos mennesker, og også for at afgøre, om endogent afledt NO har en funktionel effekt på humane parietalceller.
Metoder
emner og etisk godkendelse
Fireogtyve raske mænd i alderen fra 22 til 31 år blev rekrutteret som betalte frivillige. Udvælgelseskriterierne fastsat, at de emner, skulle være fri for sygdom og burde ikke have taget nogen medicin eller drukket alkohol i mindst en uge før eksamen. Mændene fastet i mindst seks timer før eksamen.
Faryngeal anæstesi blev induceret med lidocain spray (Xylocain ®, AstraZeneca, Södertälje, Sverige), hvorefter rutinemæssig gastroskopi blev udført ved hjælp af et Olympus GIF-100 endoskop. Knivspids biopsi pincet (Olympus FB 24K-1) blev anvendt til at tage vævsprøver fra større krumning, umiddelbart distalt for fundus. I alle fag, maveslimhinden syntes at være normal, både makroskopisk og histologisk. Alle emner testet negative for Helicobacter pylori
infektion i urease ånde test (Diabact ® UBT 50 mg 13C-urea, Diabact AB, Uppsala, Sverige).
Den eksperimentelle procedurer blev godkendt af regionale Etik Udvalg for Humanmedicinske Forskning på University Hospital, Linköping, Sverige (Journalnr. 02-039), og alle fag gav informeret samtykke.
Sekretorisk undersøgelse
Isolering og inkubation af gastriske kirtler
De nuværende eksperimenter var baseret på en teknik, der først blev beskrevet i 1976 til anvendelse i kaniner in vitro [23] og er nu veletableret til indirekte bestemmelse af mavesyresekretion induceret af forskellige stimuli. Fremgangsmåden til isolering af gastriske kirtler blev oprindeligt udviklet til animalsk væv, men det blev senere videreudvikles, så den også kan anvendes på små mængder humant væv [24].
Den humane oxyntic mukosale biopsier anvendes i vores undersøgelse blev vasket og opbevares ikke længere end 15 minutter i iskold oxygeneret phosphatbufret saltvand (PBS). De vævsprøver blev skåret i mindre stykker med en saks og overført til iltet (100% O 2) collagenase enzymopløsning (130,0 mM NaCl, 12,0 mM NaHCO 3, 3,0 mM Na 2HPO 4, 3,0 mM K 2HPO 4, 2,0 mM magnesiumsulfat 4, 1,0 mM CaCl 2, 0,1 mM N (alfa) tosyl-L-lysinchlormethylketon [ ,,,0],TLCK], 10 uM indomethacin, 10 mM glucose, 2 mg /ml humant serumalbumin [HSA, Sigma] og 1 mg /ml collagenase type IA [Sigma]). Blandingen blev anbragt i et 37 ° C vandbad og blev forsigtigt omrørt i 120 minutter, hvorefter de fleste af de behandlede prøve havde nedbrydes, hvilket efterlader hovedsagelig isolerede gastriske kirtler. Blandingen blev efterfølgende filtreret gennem et 200 um mesh. De isolerede kirtler blev vasket og resuspenderet i forvarmet (37 ° C) respiratorisk medium (132,4 mM NaCl, 1,0 mM NaH 2PO 4, 1,2 mM MgSO 4, 5,4 mM KCI, 5,0 mM Na 2HPO 4, 1,0 mM CaCI 2, 10 uM indomethacin, 10 mM glucose, og 2 mg /ml HSA). Kirtler blev derefter overført til hætteglas indeholdende frisk respiratorisk medium, hvortil vi tilføjet et af følgende: NOS inhibitor N G-nitro-L-arginin-methylester (L-NAME; 1 mmol /L) eller ækvivalente mængder af dens biologisk inaktive enantiomer N G-nitro-D-arginin-methylester (D-NAME); NOS-inhibitoren N G-nitro-L-arginin (L-NNA; 0,1 mmol /L); en af ​​de to NO donorer natriumnitroprussid (SNP; 1 mmol /l) og S-nitroso-N-acetyl-penicillamin (SNAP; 0,1 mmol /L); substratet for endogen NO-produktion, L-arginin (0,1 mmol /l) [15]. Alle kirtel suspensioner, herunder dem, som ikke blev stimuleret, blev inkuberet i et rystevandbad ved 37 ° C i 30 minutter, hvorefter der er føjet histamin til en endelig koncentration på 50 pmol /L eller dibutyryl-cAMP (db-cAMP) til en slutkoncentration på 1 mmol /l. For at forhindre nedbrydning af cykliske nukleotider, vi tilføjet 0,1 mmol /l 3-isobutyl-1-methylxantine (IBMX) til alle stimulationer.
Bestemmelse af [14C] aminopyrin akkumuleringsratio
En veletableret metode til indirekte måle syresekretion ved isolerede gastriske kirtler er at bestemme akkumulering af 14C-mærket aminopyrin (AP) i kirtler selv og i supernatanten efter centrifugering og herefter beregne forholdet mellem disse to værdier (kaldet AP-forhold) [23] . Kort sagt, blev stimuleret syresekretion ved 37 ° C i 40 minutter, og efter at 0,5 uCi [ 14C] mærket aminopyrin blev tilsat til hætteglassene, som blev derpå yderligere inkuberet ved 37 ° C i 90 minutter. Derefter blev kirtel suspensionen overført til tidligere tørres og vejes rør, som blev centrifugeret ved 4.000 rpm i to minutter. Supernatanten blev fjernet og overført til scintillationshætteglas. Pellets (kirtler) blev tørret ved 100 ° C, og tørvægten blev bestemt, og kirtlerne blev efterfølgende resuspenderet i 0,5 mol /l NaOH ved 60 ° C og overføres til scintillationshætteglas. Radioaktiviteten af ​​kirtler og supernatanten blev bestemt i en væskescintillationstæller (1214 Rackbeta, LKB), og AP-forholdet blev beregnet ved hjælp af følgende formel [24]:
hvor IGW er intraglandular vand volumen (= 2 × tørvægt kirtler i mg).
Baggrund akkumulering af AP er inkluderet i de værdier, der repræsenterer den sekretoriske respons. De AP nøgletal for baggrund og histamin-og db-cAMP-stimulerede betingelser afveg mellem individer. Derfor, for hvert emne, bestemt vi AP ratio for stimuleret kirtler og mente, at værdien at være 100% og brugte det som en individuel referenceværdi. Alle værdier er baseret på enkelte analyser.
Statistik
Data blev analyseret ved en sample sign test sammenligner medianværdier hjælp MINITAB ™ Statistisk Software. P-værdier mindre end 0,05 blev betragtet som signifikante.
Immunhistokemi
Isolerede gastriske kirtler fra fem forsøgspersoner blev anbragt på ladet Super Frost * /Plus objektglas (Menzel-Glaser, Tyskland) og derefter vasket med PBS og permeabiliseret med 100 % ethanol ved -70 ° C i 5 minutter. Derefter blev objektglassene inkuberet ved stuetemperatur natten over med kanin-anti-NOS3 antistof (1: 1000; Santa Cruz Biochemicals) og derefter vasket grundigt i PBS og inkuberet i 1 time med biotinyleret gede-anti-kanin sekundært antistof. Slides hvor primært antistof var blevet efterladt ud tjente som negative kontroller. Objektglassene blev efterfølgende vasket igen, og biotinyleret antistof blev påvist ved udsættelse for 20 ug /ml Texas Red ® Avidin (Vector Laboratories) i 1 time. Efter denne behandling blev slides vasket og dækglas hjælp Vectashield ® montering medium. Et Nikon Eclipse ® E800 fluorescens mikroskop med en VFM EPI-fluorescens vedhæftning blev brugt til at undersøge og vurdere dias. Et båndpasfilter med et bølgelængdeområde fra 520 til 560 nm og en lang-pass filter med cut-on bølgelængde ved 590 nm (for udsendt lys) blev anvendt til at visualisere Texas Red ® molekyler.
Hematoxylin og eosin farvning
for morfologisk evaluering blev kirtler fikseret på objektglas og farves med Harris hæmatoxylin i fem minutter og 0,5% eosin Y i to minutter. Hvert trin blev efterfulgt af en skylning i ledningsvand. Search Results
Vi undersøgte virkningerne af NO på syresekretion fremkaldt af forskellige stimulanser i gastriske kirtler isoleret fra mave-biopsier fra menneske. Morfologisk undersøgelse af hematoxylin-eosin-farvede objektglas viste at isolationsproceduren held havde givet hele-kirtel præparater og at parietalcellerne var til stede i de gastriske kirtler. Immunohistokemisk analyse viste, at de isolerede kirtler indeholdt eNOS-immunreaktive celler (fig. 1), hvilket stemmer med resultater opnået under anvendelse af andre typer af mucosale præparater [22]. Kontroleksperimenter var primært antistof blev udelukket viste ingen immunreaktivitet. Figur 1 Immunofluorescens af et isoleret gastrisk kirtel. Immunolokalisering af eNOS (pilespidser) i en gastrisk kirtel isoleret fra humant oxyntic mucosa blev opnået under anvendelse af et kanin-anti-eNOS polyklonalt antistof. Resultaterne blev visualiseret med Texas Red®-konjugeret gede anti-kanin IgG. Bar = 30 um
Baggrund AP-ophobning
Baggrund AP akkumulering blev observeret i de isolerede kirtler, med en median AP-forhold på 8,6. (Interval 2,5-22,1; n = 19). Efter administration af 50 umol /L af histamin eller 1 mmol /l af db-cAMP, medianen AP-forhold var 24,7 (5,8-64,5; n = 16) og 38,2 (interval 7,6-47,8; n = 11) henholdsvis. Reaktionen på både histamin og db-cAMP oversteg baggrund med en faktor på ca. 2-4 i alle præparater (fig. 2 og 3). Figur 2 Akkumulering af 14 C-mærket aminopyrin i histamin-stimulerede gastriske kirtler. Alle værdier er udtrykt som procent af mavesyresekretion induceret af histamin (regnet som 100%), som blev beregnet separat for gastriske kirtler isoleret fra hver af de raske frivillige. Hvert symbol repræsenterer resultaterne for en person. a) Akkumulering af 14C-aminopyrin i kirtler forbehandlet med NO-donor natriumnitroprussid (SNP, 1 mmol /L) eller med L-arginin (0,1 mmol /l), substratet for endogen NO-produktion. Det kan ses, at SNP markant reduceret AP akkumulering (median = 48%; p < 0,05), hvilket indikerer, at NO inhiberer syresekretion fra de isolerede kirtler. Baggrund 14C-aminopyrin akkumulation (bg) er også vist. b) Akkumulering af 14C-aminopyrin i gastriske kirtler forbehandlet med NOS-inhibitorer L-NNA (0,1 mmol /l) og L-NAME (1 mmol /l), henholdsvis. L-NAME forårsagede forøget akkumulering (median = 147%; p < 0,05), hvilket antyder, at syresekretion er forhøjet når endogen NO-produktion er forhindret, hvilket indikerer en inhibitorisk rolle for endogen NO i humane gastriske kirtler. D-NAME, som er den biologisk inaktive stereo isomer af L-NAME, ikke have en effekt på syresekretion, og det blev derfor anvendt som kontrol stof.
Figur 3 Akkumulering af 14 C-mærket aminopyrin i DB- cAMP-stimuleret gastriske kirtler. Alle værdier er udtrykt som procent af en værdi, der repræsenterer mavesyresekretion induceret af db-cAMP (regnet som 100%), som blev beregnet særskilt for hver af de undersøgte individer. Hvert symbol repræsenterer dataene for én person. a) Forbehandling med SNP (median = 63%; p < 0,05) eller SNAP (median = 81%; p < 0,05) for at frigøre eksogene NO før du tilføjer db-cAMP at stimulere syresekretion reduceret ophobning af 14C-aminopyrin i gastriske kirtler, i sammenligning med niveauerne af sekretion ses i ubehandlede kirtler. Dette indikerer, at NO kan inhibere syresekretion i gastriske kirtler er isoleret fra mennesker. b) Behandling med L-NAME til at inhibere NOS i mavens kirtler øget akkumulering af 14C-aminopyrin efter stimulering med db-cAMP (median = 152%; p < 0,05). Disse resultater viser, at NO inhiberer db-cAMP-induceret syresekretion. NO-substrat L-arginin reducerede akkumuleringen af ​​14C-aminopyrin i db-cAMP-stimulerede kirtler (median = 77%; p < 0,05). Baggrund akkumulering (bg) er også vist.
Effekt af NO donorer og NOS-inhibitorer på histamin-stimuleret mavesyresekretion
Forbehandling af isolerede kirtler med den exogene NO-donor SNP (1 mmol /l) reducerede histamin reaktion på en median på 48% (n = 7) i respons hos ikke-forbehandlede kirtler (100%). I fire ud af fem kirtel præparater, substratet for endogen NO-dannelse, L-arginin (0,1 mmol /l), faldt AP-forhold. Denne virkning var imidlertid ikke statistisk signifikant (fig. 2a). Når isoleret kirtler blev forbehandlet med NOS-inhibitor L-NAME (1 mmol /l), og derefter udsat for histamin, blev AP-forholdet markant forhøjet til en medianværdi på 147% (n = 13). Selv et lille antal individer blev testet, L-NNA (0,1 mmol /L) gav et lignende resultat; 172% (n = 2). Til sammenligning i kontrolforsøg, L-NAME analog D-NAME (1 mmol /l) ingen virkning overhovedet på histamin-stimuleret syresekretion (fig. 2b).
Effekt af NO donorer og NOS-inhibitorer på db -cAMP-stimuleret mavesyresekretion
udsættes de isolerede kirtler til DB-cAMP forøgede sekretionen af ​​mavesyre i forhold til baggrundsniveauet. Sammenlignet med ubehandlede kirtler, dem, der var forbehandlet med SNP (1 mmol /L) eller SNAP (0,1 mmol /l) akkumuleret mindre AP efter stimulering med db-cAMP; 63% (n = 9) og 81% (n = 8) (fig. 3a). Desuden ligner histamin-stimuleret sekretion blev db-cAMP-induceret sekretion øges til en median på 152% (n = 9) i kirtler, der havde været forbehandlet med L-NAME (1 mmol /l). Selv om ingen virkning på L-arginin på histamin-stimuleret syresekretion kunne ses, var der en signifikant effekt af L-arginin på db-cAMP-induceret sekretion. Syreproduktionen blev inhiberet til en median på 77% (n = 10) i de præ-behandlet med L-arginin (0,1 mmol /l) (fig. 3b).
Diskussion
Fremgangsmåde til anvendelse af isolerede gastriske kirtler in vitro er velegnet til at studere interaktionen mellem mavesyresekretion og forskellige endokrine signaler. Denne teknik er blevet grundigt undersøgt, hovedsagelig i dyreforsøg, og det er blevet rapporteret til at tilbyde god reproducerbarhed [23]. Desuden i en undersøgelse af gastriske kirtler isoleret fra mave biopsier taget fra mennesker [24], blev det konstateret, at både histamin og db-cAMP induceret sekretoriske respons, der var reproducerbar når gentages med kirtel præparater fra samme emne, selv om der var en betydelig interindividuel variation. Fellenius et al. [24] og Haglund et al. [25] har rapporteret, at både histamin og db-cAMP stimuleret mavesyresekretion fra isolerede humane gastriske kirtler, og dette blev observeret som en to- til tredobling AP akkumulering i forhold til baggrundsniveauet. Disse resultater stemmer med vore data opnået under anvendelse af histamin og db-cAMP. Det er kendt, at SNP frigiver NO [26], og i vores eksperimenter SNP reduceret sekretion af mavesyre fra isolerede kirtler. Derfor NO hæmmer syresekretion i isolerede humane gastriske kirtler. Nogle af virkningerne af SNP kan skyldes cytotoksiske interaktioner, selv om en sådan betydning blev fundet i en undersøgelse af isolerede mavekirtler fra kanin [15]. For at udelukke muligheden for en cytotoksisk påvirkning udførte vi komplementære forsøg under anvendelse af NO-donor SNAP, som har kemiske egenskaber, der afviger fra dem af SNP. Under disse eksperimenter observerede vi den samme reduktion i AP akkumulering efter stimulering med db-cAMP, hvilket yderligere fremmer den konklusion, at NO er ​​faktisk ansvarlig for observerede resultater. I db-cAMP-stimuleret kirtler, blev det inducerede sekretoriske respons reduceres ved L-arginin, en forbindelse, der afhænger af en endogen faktor (dvs. eNOS) for at generere NO, selvom dette fald ikke var så udtalt som faldet induceret af SNP og SNAP. Der er en række mulige forklaringer på denne bemærkning. Hvis der var allerede nok L-arginin i kirtler til at opretholde NO-produktion på tidspunktet for eksperimentet tilsætning af L-arginin var derfor uden virkning. Endvidere kan L-arginin har haft en svag virkning fordi virkningen af ​​NO sket gennem op- eller nedregulering af enzymet NOS og blev ikke påvirket af adgang til substratet. Uanset, havde L-arginin formindske akkumulering af AP, men ikke så meget som de eksogene NO-donorer gjorde ved de foreliggende doser. Dette indikerer, at nogle specifikke proces er ansvarlig for generering NO fra L-arginin i isolerede gastriske kirtler. Disse resultater er i overensstemmelse med undersøgelser, der viser, at SNP, SNAP, og L-arginin inhiberede histamin-stimuleret syresekretion fra gastriske kirtler isoleret fra dyr [13, 15]. L-arginin er også blevet observeret at reducere carbachol-stimuleret syresekretion i tudser [16].
I en tidligere undersøgelse foretaget af vores forskergruppe [22], undersøgelse af kirtelepitel af eksemplarer af menneskets oxyntic slimhinde viste, at en særlig type celler indeholdt NOS. Disse eNOS-immunoreaktive celler, defineret som endokrine celler, var i tæt kontakt med parietalcellerne. Disse to egenskaber tyder på, at celler af denne type udgivelse NO, der således kan være en parakrin regulator, der direkte påvirker funktionen af ​​parietalcellerne. Denne antagelse kan understøttes af en række andre forhold. For eksempel kan NR let penetrere cellemembraner, hvilket kan indikere en intracellulær virkested. Også, NO har en temmelig kort levetid, hvilket indebærer, at kilder er nødvendige for at generere denne oxid skal være til rådighed tæt på NO target cellen. I denne undersøgelse er forekomsten af ​​eNOS i kirtler vist, men tidligere omfattende undersøgelser under anvendelse af antistoffer mod både nNOS og iNOS har ikke afsløret forekomst af en af ​​de to isoformer i kirtelepitel af normale humane individer (upubliceret observation). Svarende til resultaterne opnået i en undersøgelse af isoleret kanin gastriske kirtler [15], fandt vi, at NOS-inhibitorer L-NAME og L-NNA, men ikke D-NAME, amplificerede sekretionen-stimulerende virkning af histamin, hvilket yderligere indikerer, at isolerede humane kirtler vi brugte indeholdt enzymet NOS. Både stigningen i AP-forhold, som vi observeret efter inhibering af NOS og faldet i sekretoriske responser, som vi bemærkede i kirtler behandlet med L-arginin styrke den hypotese, at NO produceres af celler i kirtelepitel og, når den frigives, det griber med stimuleret syresekretion. Interessant, de nævnte observationer antyder, at frigivelsen af ​​NO fastholdes, uanset om syresekretion stimuleres, hvilket indebærer, at ingen fungerer som en endogen inhibitor af mavesyresekretion. Intensiteten af ​​denne inhibering afhænger sandsynligvis af antallet af eNOS-holdige endokrine-lignende celler, der er til stede i nærheden af ​​parietalcellerne.
Den nøjagtige mekanismer bag denne parakrin regulering af mavesyresekretion er endnu ikke belyst. Der er flere forskellige veje inden parietalcellen der kan blive berørt af NO. Det kan fremkalde ADP ribosylering af G-actin [27], og derved påvirke cytoskelettet. Dette kunne være vigtigt for de morfologiske ændringer, parietalcellerne udviser under syresekretion. Hvis derfor NO har en vedvarende virkning på et element, såsom cytoskelettet, kan det spille en rolle i membranen genanvendelse hypotese forslag Forte et al. [28]. Kort fortalt, at teori foreslår, at parietalcellerne underkastes følgende morfologiske forandringer: de har en stor aktiv sekretorisk overflade under den stimulerende fase, og de viser en minimal aktiv sekretorisk overflade under hvilefasen
Da det er kendt, at guanylatcyklase er. en generel mål af NO i mange cellesystemer, har nogle forskere foreslået, at NO udøver sine virkninger via cyklisk guanosin-3 ', 5'-monophosphat (cGMP) i rotter og kaniner parietalcellerne [13, 15]. En igangværende undersøgelse i vores laboratorium vil vise, om dette er tilfældet i humane parietalcellerne. Downstream virkninger af cGMP kan indbefatte aktivering af en række effektorer, såsom ionkanaler, proteinkinaser og phosphodiesteraser [29]. Det er også sandsynligt, at NO kan udøve sin virkning alene, uden at handle gennem andre signalmolekyler. Under eksperimentelle betingelser, kan NO fremkalde nitrosylering og nitrering af cellulære proteiner, selvom det er nok ikke tilfældet in vivo, da disse to processer ofte resulterer permanent skade på vitale funktioner [30]. Der er en mulighed for, at undertrykkelsen af ​​syresekretion forekommer ikke kun på parietalcellerne niveau, men via andre celletyper. ECL-celler er sandsynligvis til stede i den glandulære forberedelse og i rotten, disse celler har evnen til at frigive histamin som reaktion på øget intracellulære niveauer af cAMP [31]. NO kan hæmme denne histamin-release [14] og dermed bidrage yderligere til hæmning af syresekretion. Selv om der er meget lidt kendt om humane ECL-celler og virkningerne af NO på histamin-frigivelse er der undersøgelser, der viser artsforskelle i andre histamin-secernerende celler. For eksempel har rottemastceller vist sig at give en "NO-lignende faktor", som inhiberer histamin-frigivelse [32], mens der er undersøgelser, der viser, at NO ikke påvirker histamin-sekretion i humane basofiler [33]. På nuværende tidspunkt kan vi kun etablere forskelle i hæmmende reaktion på L-arginin for histamin og db-cAMP stimulation.
Er behov for yderligere undersøgelser for at klarlægge, hvilken rolle af NO i parietal celle funktion.
Konklusioner
Resultaterne af den foreliggende undersøgelse tyder på, at NO endogent produceret i den menneskelige oxyntic mucosa kan reducere stimulerende virkninger af histamin eller db-cAMP på mavesyresekretion. Vi opnåede ensartede resultater for gastriske kirtler isoleret fra forskellige sunde forsøgspersoner, hvilket indebærer, at NO frigivet fra bestemte celler i sekretoriske slimhinde spiller en vigtig fysiologisk rolle i reguleringen af ​​mavesyre sekretion.
Erklæringer
Anerkendelser
Vi takker Ulf Hannestad for udførelse af urease ånde tests, Inga-Lill Andersson og Gunilla Strand til hjælp med de gastroskopisk procedurer, og Marja Tjädermo til teknisk bistand. Dette arbejde blev støttet af AstraZeneca R & D, Sverige.
Forfattere 'originale filer indsendt til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12876_2004_88_MOESM1_ESM.ppt Forfatternes oprindelige fil til figur 1 12876_2004_88_MOESM2_ESM.ppt Forfatternes oprindelige fil til figur 2 12876_2004_88_MOESM3_ESM.ppt Forfatternes oprindelige fil til figur 3 konkurrerende interesser
Ingen erklæret.

• Ufuldstændig gastrisk metaplasi i børn med insulinafhængig diabetes mellitus og cøliaki. En ultrastrukturelle undersøgelse
• Ekspression af serum miR-20a-5p, lad-7a, og miR-320a og deres sammenhænge med pepsinogen i atrofisk gastritis og gastrisk cancer: en case-kontrol undersøgelse