Typpioksidi-endogeeninen inhibiittori mahahapon eritystä eristetyissä ihmisen mahalaukun glands

typpioksidin endogeeninen inhibiittori mahahapon eritystä eristetyissä ihmisen maharauhanen
tiivistelmä
tausta
endoteelisolujen typpioksidisyntaasin (eNOS) on aikaisemmin havaittu rauhas osa ihmisen mahalaukun limakalvon. Lisäksi typpioksidin (NO) on osoitettu vaikuttavan mahahapon eritystä useissa eläinmalleissa. Tässä tutkimuksessa suoritettiin vaikutusten tutkimiseksi eksogeenisesti ja endogeenisesti johdettu NO päälle histamine- ja cAMP-stimuloimaa mahahapon eritystä eristetyissä ihmisen oxyntic rauhaset. Tool Menetelmät
Oxyntic rauhaset eristettiin ihmisen mahalaukun koepaloja ja sittemmin pre hoidetun NO luovuttajien ja typpioksidi-inhibiittorit ja sitten altistettiin histamiini tai dibutyryyli-cAMP (db-cAMP). Sekretorista vaste rauhaset määritettiin kertymistä [ 14C] aminopyriinin.
Tulokset
histamine- tai db-cAMP aiheuttama eritykseen lievitti L-arginiinia, tunnetusta lähteestä endogeenisen NO ja myös NO-luovuttajien natriumnitroprussidi (SNP) ja S-nitroso-N-asetyyli-penisillamiini (SNAP). Esikäsittely joko NOS-inhibiittorit N G-nitro-L-arginiini-metyyliesteri (L-NAME) tai N G-nitro-L-arginiini (L-NNA) tehosti erittymisvaste.
Johtopäätös
Tuloksemme osoittavat, että NO estää mahahapon eritystä eristetyissä ihmisen maharauhanen, ja että on olemassa endogeeninen muodostuminen NO sisällä rauhasepiteeliin läheisyydessä parietaalisolujen.
Tausta
Typpioksidi (NO) on valmistettu L-arginiinia on katalysoi entsyymi typpioksidisyntaasi (NOS) [1, 2]. NO on tärkeä biologinen signalointi molekyyli, joka vaikuttaa liikkeeseen säätelemällä verisuonten sileiden lihasten ja moduloiva systeemistä verenpainetta. Lisäksi NO on mukana neurotransmission; se on kriittinen tekijä tulehdusreaktio ja immuniteetti [3-5]; ja sen on osoitettu aiheuttavan myönteisiä vaikutuksia limakalvon puolustukseen ruoansulatuselimistöön. Useissa tutkimuksissa (katsausta varten katso [6]), kemiallisesti indusoidun limakalvovauriot näytti pienentää lisäämällä samanaikaisesti NO ja heikentynyt poistamalla NO alkaen mahalaukun limakalvon. Selitys niille havainnoista saattaisi olla, että NO parantaa limakalvon verenkiertoa [7], ja se on ehdotettu, että NO täydentää julkaisun limaa [8]. On todennäköistä, että NO on myös mukana sääntelyn muiden sekretorisen prosesseja ruoansulatuskanavan. Takeuchi ja työtoverit [9] ovat raportoineet, että NO estää eritystä pohjukaissuolen bikarbonaatin, kun taas muut tutkijat ovat ehdottaneet, että bikarbonaatin eritystä stimuloi NO [10, 11]. Lisäksi useat tutkimukset ovat osoittaneet, että NO vaikuttaa mahahapon eritystä [12-16].
Eläinkokeet ovat säädetty ristiriitaisia ​​tietoja vuorovaikutuksesta NO ja mahahapon eritystä. Esimerkiksi tutkimukset in vitro ovat osoittaneet, että NO stimuloi mahahapon eritystä hiiressä [17, 18] ja Bullfrog [19]. Lisäksi samanlaisia ​​tuloksia on saatu koirilla [12]. Kuitenkin muut tutkimukset ovat osoittaneet, että NO estää mahahapon eritystä rotilla [13, 14] ja maharauhanen eristettiin kanit [15] ja limakalvoja konnat [16]. Tutkimukset ihmisten toimittamat tiedot osoittavat, että NO voi sekä estää ja lisätä mahan pH-arvo [20, 21], mutta se ei vielä tiedetä, miten tämä yhdiste osallistuu mahahapon eritystä ihmisellä.
Aikaisemmassa tutkimuksessa, löysimme morfologiset tuki endogeenisen NO on merkitystä säätelyyn katesolufunktiota [22]. Myös immunohistokemiallista dataa, että tutkimus paljasti, että läsnä endogeenisen NOS epiteelisoluissa normaalin ihmisen oxyntic limakalvo, tarkemmin, sekä pinta limakalvojen soluja ja endokriinisiä soluja. Lisäksi havaitsimme, että oli läheinen yhteydenpitoa Enos-positiivisten solujen ja parietaalisoluihin joko siksi, että Enos-positiivisten solujen yhteyttä parietaalisoluihin kautta soluliman prosesseja tai ne riippuvaiseksi jonka parietaalisolun. Näiden tulosten perusteella yhdessä kemiallisten ominaisuuksien NO, päättelimme, että NO johdettu hormonitoimintaa kaltaisia ​​soluja voisi olla paracrine mahahapon eritystä. Esillä olevassa tutkimuksessa tavoitteenamme oli varmistaa Ulkoisten NO on histamine- ja cAMP stimuloimaa mahahapon eritystä ihmisellä, ja myös onko endogeenisesti johdettu NO on toiminnallinen vaikutus ihmisten parietaalisoluissa. Tool Menetelmät
Oppiaineet ja eettinen hyväksyntä
Kaksikymmentäneljä tervettä miestä joiden ikä 22-31 vuotta otettiin palvelukseen maksettu vapaaehtoisia. Valintakriteerit määrättiin, että koehenkilöillä oli oltava vapaa taudista ja olisi pitänyt ottaa mitään lääkkeitä tai imbibed alkoholia vähintään viikkoa ennen tutkimusta. Miehet ravinnotta vähintään kuusi tuntia ennen tutkimusta.
Nielun anestesia indusoitiin Lidokaiinisumutetta (Xylocain ®, AstraZeneca, Södertälje, Ruotsi), minkä jälkeen rutiini gastroskopia suoritettiin käyttäen Olympus GIF-100 endoskoopin. Purista biopsiapihtien (Olympus FB 24K-1) käytettiin ottamaan kudosnäytteiden isokaarretta välittömästi distaalisesti silmänpohjan. Kaikissa aineissa, mahalaukun limakalvon näytti olevan normaali, sekä makroskooppisesti ja histologisesti. Kaikki koehenkilöt olivat kielteisiä helikobakteeri
infektion ureaasitekniikan hengitystestiä (Diabact ® UBT 50 mg 13C-urea, Diabact AB, Uppsala, Ruotsi).
Koemenetelmät oli hyväksynyt Alueellinen eettinen komitea Human Research at University Hospital, Linköpingin (File no. 02-039), ja kaikki potilaat antoivat tietoon perustuva suostumus.
Sekre- tutkimus
eristäminen ja inkubaatio maharauhanen
nykyinen kokeet olivat perustuva tekniikka, joka kuvattiin ensimmäisen kerran vuonna 1976 käyttöön kaneille in vitro [23] ja on nyt vakiintunut epäsuoran määrittämiseksi mahahapon eritystä useiden erilaisten ärsykkeiden indusoimaa. Menetelmä eristämiseksi maharauhanen kehitettiin alun perin eläin- kudoksen, mutta se oli myöhemmin puhdistettu niin, että se voisi soveltaa myös pieniä määriä ihmisen kudoksen [24].
Ihmisen oxyntic limakalvon koepaloja käytettiin tutkimuksessamme pestiin ja varastoidaan enintään 15 minuuttia jääkylmään happipitoista fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS). Kudosnäytteet leikattiin pienemmiksi paloiksi kanssa saksilla ja siirrettiin hapetettu (100% O 2) kollagenaasi entsyymiliuosta (130,0 mM NaCl, 12,0 mM NaHCO 3, 3,0 mM Na 2HPO 4, 3,0 mM K 2HPO 4, 2,0 mM MgSO 4, 1,0 mM CaCI 2, 0,1 mM N (alfa) tosyyli-L-lysiiniä klorometyyliketoni [ ,,,0],TLCK: ta], 10 uM indometasiinia, 10 mM glukoosi, 2 mg /ml ihmisen seerumin albumiinia [HSA; Sigma], ja 1 mg /ml kollagenaasia tyyppiä IA [Sigma]). Seos pantiin 37 ° C: n vesihauteessa, ja sekoitettiin hellävaraisesti 120 minuuttia, minkä jälkeen suurin osa käsitellyn näytteen oli hajonnut, jolloin pääasiassa eristetty maharauhanen. Seuraavaksi seos suodatettiin 200 um mesh. Eristetty rauhaset pestiin ja suspendoitiin uudelleen esilämmitettyä (37 ° C) hengitysteiden keskipitkän (132,4 mM NaCl, 1,0 mM NaH 2PO 4, 1,2 mM MgSO 4, 5,4 mM KCI, 5,0 mM Na 2HPO 4, 1,0 mM CaCI 2, 10 uM indometasiinia, 10 mM glukoosia, ja 2 mg /ml HSA). Rauhaset siirrettiin sitten pulloihin, jotka sisälsivät tuoretta hengitysteiden väliaineessa, johon lisäsimme yhtä seuraavista: NOS-inhibiittori N G-nitro-L-arginiini-metyyliesteri (L-NAME, 1 mmol /L) tai vastaavat määrät biologisesti aktiivinen enantiomeeri N G-nitro-D-arginiini-metyyliesteri (D-NAME); NOS-inhibiittori N G-nitro-L-arginiini (L-NNA; 0,1 mmol /L); jompikumpi NO luovuttajien natriumnitroprussidi (SNP, 1 mmol /l) ja S-nitroso-N-asetyyli-penisillamiini (SNAP; 0,1 mmol /L); substraatti endogeenisen NO-tuotantoa, L-arginiini (0,1 mmol /L) [15]. Kaikki rauhanen suspensiot, mukaan lukien ne, joita ei stimuloitu, inkuboitiin ravistelevassa vesihauteessa 37 ° C: ssa 30 minuuttia, jonka jälkeen lisättiin histamiinia lopulliseen pitoisuuteen 50 umol /l tai dibutyryyli-cAMP (db-cAMP) ja lopulliseen pitoisuuteen 1 mmol /l. Estämään syklisten nukleotidien hajoamista, lisäsimme 0,1 mmol /l 3-isobutyyli-1-methylxantine (IBMX) kaikille ärsykkeet.
Määrittäminen [14C] aminopyriinin Kumulaatiosuhde
Hyvin vakiintunut menetelmä, jota käytetään epäsuorasti mitata erityksen eristetty maharauhanen on määrittää kertymistä 14C-leimattua aminopyriinin (AP) rauhaset itsensä ja supernatantissa sentrifugoinnin jälkeen ja sitten laskea suhde näiden kahden arvon (kutsutaan AP ratio) [23] . Lyhyesti, hapon eritystä stimuloitiin 37 ° C: ssa 40 minuuttia, ja sen jälkeen 0,5 uCi [ 14C] leimattu aminopyriinin lisättiin pulloihin, jotka sitten inkuboitiin edelleen 37 ° C: ssa 90 minuuttia. Sen jälkeen rauhanen suspensio siirrettiin kuivattu ja punnittu putkia, jotka sentrifugoitiin 4000 rpm: llä kaksi minuuttia. Supernatantti poistettiin ja siirrettiin tuikepulloihin. Pelletit (rauhaset) kuivattiin 100 ° C: ssa, ja kuivapaino määritettiin, ja rauhaset myöhemmin uudelleen suspendoitiin 0,5 mol /l NaOH: ta 60 ° C: ssa ja siirrettiin tuikepulloihin. Radioaktiivisuus rauhasten ja supernatantti määritettiin nestetuikelaskurilla (1214 Rackbeta, LKB), ja AP-suhde laskettiin käyttäen seuraavaa kaavaa [24]:
jossa IGW on intraglandular vesimäärä (= 2 x kuivapainosta rauhasten mg).
Taustaa kertyminen AP sisältyvät arvot edustavat eritysreaktio. AP tunnusluvut tausta ja histamiini-ja db-cAMP-stimuloiduissa olosuhteissa erosivat yksilöiden välille. Siksi kunkin aihe, päätimme AP suhde stimuloi rauhaset ja katsoi, että arvo on 100%, ja käytetty sitä yksittäisenä viitearvon. Kaikki arvot perustuvat yhteen analyyseihin.
Tilastot
Data analysoitiin yhden otoksen merkki joissa verrattiin mediaanin arvoja Minitab ™ Statistical Software. P-arvot alle 0,05 pidettiin merkittävinä.
Immunohistokemia
Isolated maharauhanen viidestä koehenkilöt laitettiin ladattu Super Frost * /Plus lasilevyjä (Menzel-Gläser, Saksa) ja sitten pestiin PBS: llä ja tehtiin läpäiseviksi 100 % etanolia -70 ° C: ssa 5 min. Sen jälkeen laseja inkuboitiin huoneenlämpötilassa yön yli kanin anti-NOS3-vasta-ainetta (1: 1000, Santa Cruz Biochemicals) ja pestiin sitten perusteellisesti PBS: ssä ja inkuboitiin 1 tunnin ajan biotinyloidun vuohen anti-kani sekundääristä vasta-ainetta. Dioja jossa ensisijainen vasta-aine oli jätetty pois tiedoksi negatiivisina kontrolleina. Levyjä pestiin sen jälkeen jälleen, ja biotinyloitu vasta-aine tunnistettiin altistamalla 20 ug /ml Texas Red ® avidiinilla (Vector Laboratories) 1 tunnin ajan. Kyseisen käsittelyn jälkeen levyjä pestiin ja päällystettiin käyttäen Vectashield ® kiinnitysväliaine. Nikonin Eclipse ® E800 fluoresenssimikroskooppiin kanssa VFM EPI-fluoresenssi kiinnitys käytettiin tutkia ja arvioida dioja. Päästökaistan suodatin aallonpituusalueella 520-560 nm ja pitkän ylipäästösuodatin leikkaa aallonpituudesta 590 nm: ssä (for valoon) käytettiin havainnollistamaan Texas Red ® molekyylejä.
Hematoksyliini ja eosiini värjäystä
morfologista arviointia varten, rauhaset kiinnitettiin lasilevyille ja värjättiin Harris hematoksyliinillä viisi minuuttia ja 0,5% eosiini Y kaksi minuuttia. Jokainen askel seurasi huuhtelu vesijohtovedellä.
Tulokset
Tutkimme vaikutuksia NO haponeritykseen aiheuttama eri piristeiden maharauhanen eristettiin mahan koepalat ihmisen. Morfologiset tarkastelu hematoksyliini- eosiini-värjättyä diat paljasti, että eristäminen menettely oli onnistuneesti tuottanut koko-rauhanen valmisteet ja että parietaalisoluissa olivat läsnä maharauhanen. Immunohistokemiallinen analyysi osoitti, että eristetty rauhaset sisälsi eNOS-immunoreaktiivisten solujen (Fig. 1), joka yhtyy käyttäen saadut tulokset muun tyyppisiä limakalvon valmisteiden [22]. Vertailukokeet olivat ensisijainen vasta-aine jätettiin eivät osoittaneet immunoreaktiivisuutta. Kuva 1 Immunofluoresenssikoe eristetyn maharauhanen. Immunolokalisoinnissa eNOS (nuolenpäät) on maharauhanen eristettiin ihmisen oxyntic limakalvon saatiin aikaan käyttämällä kanin anti-eNOS polyklonaalista vasta-ainetta. Tulokset visualisoitiin Texas Red®-konjugoitua vuohen anti-kani-IgG: tä. Bar = 30 pm.
Tausta AP-kertymistä
tausta AP kertymistä havaittiin yksittäisiä rauhaset, mediaani AP suhde 8,6 (vaihteluväli 2,5-22,1; n = 19). Antamisen jälkeen 50 mikromol /l histamiinia tai 1 mmol /l db-cAMP, mediaani AP suhteet olivat 24,7 (5,8-64,5; n = 16) ja 38,2 (vaihteluväli 7,6-47,8; n = 11) vastaavasti. Vastaus molempiin histamiini ja db-cAMP ylitti taustan tekijällä noin 2-4 kaikissa valmisteissa (kuviot. 2 ja 3). Kuvio 2 kertyminen 14 C-leimattu aminopyriinin in histamiini stimuloimaa maharauhanen. Kaikki arvot on ilmaistu prosentteina mahahapon eritystä indusoimaa histamiinin (katsotaan 100%), joka laskettiin erikseen maharauhanen eristetty kustakin terveillä vapaaehtoisilla. Kukin symboli edustaa tulokset yhden yksittäisen. a) kertyminen 14C-aminopyriinin rauhasten esikäsitelty NO luovuttaja natriumnitroprussidin (SNP, 1 mmol /l) tai L-arginiinia (0,1 mmol /l), substraatti endogeenisen NO-tuotantoa. Voidaan nähdä, että SNP pienennetään huomattavasti AP kertymistä (mediaani = 48%; p < 0,05), mikä osoittaa, että NO estää hapon erityksen eristetty rauhaset. Taustaa 14C-aminopyriinin kertyminen (bg) on ​​myös esitetty. b) kertyminen 14C-aminopyriinin in maharauhanen esikäsitelty NOS-inhibiittorit L-NNA (0,1 mmol /l) ja L-NAME (1 mmol /l), tässä järjestyksessä. L-NAME aiheutti lisääntynyttä kertymistä (mediaani = 147%; p < 0,05), mikä viittaa siihen, että erityksen on kohonnut kun omien NO tuotanto estyy, mikä osoittaa estävä rooli endogeenisen NO ihmisen maharauhanen. D-NAME, joka on biologisesti aktiivinen stereo isomeerin L-NAME, ei ollut vaikutusta eritykseen, ja siksi sitä käytettiin verrokkina aineena.
Kuvio 3 kertyminen 14 C-leimattu aminopyriinin in DB- cAMP-stimuloidun maharauhanen. Kaikki arvot on ilmaistu prosentteina arvon, joka vastaa mahahapon eritystä aiheuttama db-cAMP (katsotaan 100%), joka lasketaan erikseen kullekin tutkituista aiheista. Kukin symboli edustaa tiedot yhden yksilön. a) Esikäsittely SNP (mediaani = 63%; p < 0,05) tai SNAP (mediaani = 81%; p < 0,05) vapauttaa eksogeenisten NO ennen lisäämistä db-cAMP stimuloida haponerityksen vähensi kertymistä 14C-aminopyriinin in maharauhanen, verrattuna eritystasojen nähdä käsittelemättömän rauhaset. Tämä osoittaa, että NO voi estää hapon erityksen maharauhanen eristetty ihmisistä. b) Käsittely L-NAME estämään NOS että maharauhanen lisäsi kertymistä 14C-aminopyriinin stimulaation jälkeen db-cAMP (mediaani = 152%; p < 0,05). Nämä tulokset osoittavat, että NO estää db-cAMP aiheuttama eritykseen. NO alustan L-arginiini vähensi kertymistä 14C-aminopyriinin in db-cAMP-stimuloitu rauhaset (mediaani = 77%; p < 0,05). Taustaa kertyminen (bg) on ​​myös esitetty.
Vaikutus NO luovuttajien ja NOS-inhibiittorit histamiinin stimuloimaa mahahapon eritystä
esikäsittely eristetty rauhasten kanssa eksogeenisen NO luovuttaja SNP (1 mmol /l) vähensi histamiini vastauksena mediaani 48% (n = 7) ja hoitovasteesta ei-esikäsitellyn rauhaset (100%). Neljässä viidestä rauhanen valmisteiden, substraatti endogeenisen NO muodostumiseen, L-arginiini (0,1 mmol /l), väheni AP suhde. Tämä vaikutus ei kuitenkaan ollut tilastollisesti merkitsevä (kuvio. 2a). Kun eristetty rauhaset oli esikäsitelty NOS-inhibiittorin L-NAME (1 mmol /l), ja sitten altistettiin histamiini, AP-suhde oli merkittävästi koholla mediaanin arvo 147% (n = 13). Vaikka pieni määrä yksilöitä testattiin, L-NNA (0,1 mmol /L) saatiin samanlainen tulos; 172% (n = 2). Vertailun vuoksi kontrolli kokeissa L-NAME analoginen D-NAME (1 mmol /l) ei vaikuttanut ollenkaan histamiini-stimuloimaa eritykseen (Fig. 2b).
Vaikutus NO luovuttajien ja NOS estäjien db -cAMP stimuloimaa mahahapon eritystä
altistaminen eristetty rauhaset db-cAMP lisäsi mahahapon eritystä verrattuna taustan tasolle. Verrattuna käsittelemättömiin rauhaset, jotka oli aiemmin käsitelty SNP (1 mmol /l) tai SNAP (0,1 mmol /L) kertynyt vähemmän AP stimulaation jälkeen db-cAMP; 63% (n = 9) ja 81% (n = 8), vastaavasti (Fig. 3a). Lisäksi samanlainen histamiinin stimuloimaa eritystä, db-cAMP: n indusoimaa nostettiin mediaani 152% (n = 9) rauhasten, jotka oli esikäsitelty L-NAME (1 mmol /l). Vaikka ei ole vaikutusta L-arginiini histamiinin stimuloimaa hapon eritystä voidaan nähdä, oli merkittävä vaikutus L-arginiini on db-cAMP: n indusoimaa. Hapon estyi mediaani 77% (n = 10), jotka esikäsiteltiin L-arginiinia (0,1 mmol /L) (Fig. 3b).
Keskustelu
menetelmä, jossa käytetään yksittäisiä maharauhanen in vitro on hyvin tutkimalla vuorovaikutusta mahahapon eritystä ja erilaiset hormonaaliset signaalit. Tätä tekniikkaa on arvioitu perusteellisesti, lähinnä eläinkokeita, ja se on raportoitu tarjota hyvää toistettavuutta [23]. Lisäksi tutkimus maharauhanen eristetyn mahalaukun otetut biopsiat ihmiseen [24], todettiin, että sekä histamiini ja db-cAMP aiheuttama sekretorisia vasteita, jotka olivat toistettavissa kun toistettiin käyttäen rauhanen valmisteita samasta aiheesta, vaikka oli huomattavaa yksilöiden välistä vaihtelua. Fellenius et ai. [24] ja Haglund et ai. [25] ovat raportoineet, että sekä histamiini ja db-cAMP stimuloimaa mahahapon eritystä eristetyistä ihmisen maharauhanen, ja tämä havaittiin kaksin- tai kolminkertainen AP kertyminen verrattuna taustan tasolle. Nämä tulokset samaa mieltä meidän saadut käyttäen histamiinia ja db-cAMP. Tiedetään, että SNP vapauttaa NO [26], ja meidän kokeita SNP pienentää mahahapon eristetyistä rauhaset. Siksi NO estää erityksen eristetyissä ihmisen maharauhanen. Jotkut vaikutuksista SNP voi johtua sytotoksinen vuorovaikutus, vaikka tällaista vaikutusta ei löytynyt tutkimuksessa eristettyjä kanin maharauhanen [15]. Sulkea pois mahdollisuutta sytotoksisen vaikutuksen, suoritimme täydentäviä kokeita käyttämällä NO luovuttajan SNAP, jolla on kemiallisia ominaisuuksia, jotka eroavat SNP. Näissä kokeissa havaitsimme saman väheneminen AP kertymistä stimulaation jälkeen db-cAMP, joka edelleen suosii tulokseen, että NO on itse asiassa vastuussa havaitusta tuloksia. In db-cAMP-stimuloi rauhaset, indusoitunut erittymisvaste aleni L-arginiinia, yhdiste, joka riippuu endogeeninen tekijä (eli eNOS) tuottaa NO, vaikka tämä vähennys ei ollut yhtä jyrkkä kuin lasku aiheuttama SNP ja NAPSAHTAA. On olemassa useita mahdollisia selityksiä, että havainto. Jos oli jo riittävästi L-arginiini rauhaset ylläpitämään NO-tuotannon aikaan kokeen, lisäämällä L-arginiini oli siis ilman vaikutusta. Lisäksi L-arginiini on saattanut olla heikko vaikutus, koska vaikutus NO tapahtui kautta ylä- tai alaspäin säätely entsyymin NOS ja ollut vaikutusta siihen pääsyä alustaan. Huolimatta L-arginiini ei vähennä kertyminen AP, vaikkakaan ei yhtä paljon kuin eksogeenisen NO luovuttajien tekivät esillä olevan annoksilla. Tämä osoittaa, että tiettyjä prosessi on vastuussa tuottaa NO L-arginiinia eristetyissä maharauhanen. Nämä tulokset ovat yhdenmukaisia ​​tutkimukset osoittavat, että SNP, SNAP, ja L-arginiini esti histamiini-stimuloi hapon eritystä maharauhanen Eläimistä eristettyjen [13, 15]. L-arginiini on havaittu myös vähentää karbakolille stimuloimaa hapon erityksen konnat [16].
Aiemmassa tutkimuksessa meidän tutkimusryhmän [22], tarkastelu rauhasepiteeliin yksilöiden ihmisen oxyntic limakalvon paljasti, että yksi tietyntyyppisen sisältyvien solujen NOS. Nämä eNOS-immunoreaktiivisten solujen, määritellään endokriiniset solut, olivat tiiviissä yhteydessä parietaalisoluihin. Nämä kaksi ominaisuutta viittaavat siihen, että solut tämän tyyppinen julkaisu nro, joka siis voi olla parakriininen säädin, joka vaikuttaa suoraan toiminnan parietaalisolujen. Tämä oletus voidaan tukea useita muita ehtoja. Esimerkiksi NO helposti tunkeutumaan solukalvot, jotka saattavat olla solun sisällä. Lisäksi NO on melko lyhyt elinkaari, mikä merkitsee sitä, että lähteitä tarvitaan tuottamaan tämä oksidi on oltava lähellä NO kohdesoluun. Tässä tutkimuksessa esiintyminen eNOS rauhaset näkyy, mutta aikaisemmin laajoja tutkimuksia käyttäen vasta-aineita sekä nNOS ja iNOS ole paljastanut läsnäolo tahansa kaksi isoformia että rauhasepiteeliin normaalien koehenkilöiden (julkaisematon havainto). Samanlaisia ​​tuloksia saatiin tutkimuksessa eristettyjä kanin maharauhanen [15], huomasimme, että NOS-inhibiittorit L-NAME ja L-NNA, mutta ei D-NAME, monistettiin eritystä stimuloiva vaikutus histamiinin, joka edelleen osoittaa, että eristetty ihmisen rauhaset käytimme sisälsi entsyymin NOS. Sekä kasvu AP suhteessa, että me havaittu inhibitio NOS ja lasku sekretorisen vastauksista, että totesimme rauhaset käsiteltiin L-arginiini vahvistavat oletusta, että NO on tuotettu solut rauhasepiteelin, ja kun se vapautetaan, se häiritsee stimuloitujen eritykseen. Mielenkiintoista on, että mainitut havainnot viittaavat siihen, että vapautuminen NO jatkuva, riippumatta siitä, onko erityksen stimuloidaan, mikä tarkoittaa, että NO toimii endogeenisen estäjän mahahapon eritystä. Intensiteetti eston luultavasti riippuu määrästä eNOS sisältävien hormonitoimintaa kaltaisia ​​soluja, jotka ovat läsnä läheisyydessä parietaalisolujen.
Tarkkaa mekanismia taustalla parakriinisen asetuksen mahahapon eritys on vielä selvittämättä. On olemassa useita eri reittejä sisällä perietaalisolun joka saattaa vaikuttaa NO. Se voi aiheuttaa ADP ribosylaatiota G-aktiini [27] ja näin vaikuttaa solun tukirangan. Tämä voi olla tärkeää, että morfologiset muutokset, jotka parietaalisoluihin näytteille aikana eritykseen. Näin ollen jos NO ei ole pysyviä vaikutuksia elementin kuten solun tukirangan, se saattaa olla merkitystä kalvoon kierrätystä hypoteesin ehdottama Forte et al. [28]. Lyhyesti, että teorian mukaan parietaalisoluihin tehdään seuraavat morfologiset muutokset: ne ovat suuri aktiivinen sekretorisen pinta aikana stimuloiva vaiheessa, ja ne näyttävät minimaalisen aktiivisen sekretorisen pinta lepovaiheen aikana.
Koska tiedetään, että guanylaattisyklaasi- on yleinen tavoite NO monissa solujärjestelmissä, jotkut tutkijat ovat ehdottaneet, että NO vaikutusmekanismien kautta syklisen guanosiini-3 ', 5'-monofosfaatti (cGMP) sekä rotan ja kanin parietaalisoluissa [13, 15]. Meneillään oleva tutkimus laboratoriossamme nähdään, onko tämä koskee ihmisen parietaalisoluissa. Alavirran vaikutuksia cGMP voi sisältää aktivointi useita efektorien, kuten ionikanavia, proteiinikinaasien, ja fosfodiesteraaseja [29]. On myös todennäköistä, että NO voidaan käyttää sen vaikutuksen yksin, ilman kautta toimivien muiden signalointimolekyylien. Koeolosuhteissa, NO voi aiheuttaa nitrosylation ja nitraus solun proteiinien, vaikka se ei luultavasti ole in vivo, koska nämä kaksi prosessia usein aiheuttaa pysyviä vaurioita elintoimintoja [30]. On mahdollista, että suppressio erityksen ei tapahdu ainoastaan ​​parietaalisolujen tasolla, mutta käyttämällä muita solutyyppejä. ECL-solut ovat luultavasti läsnä rauhas valmistelussa ja rotilla, nämä solut on kyky vapauttaa histamiinia vastauksena lisääntynyt solunsisäisiä cAMP-tasoja [31]. NO voi estää tämän histamiinia julkaisu [14] ja siten edelleen edistää ja haponerityksen estoon. Vaikka on vähän tunnettu siitä ihmisen ECL-solujen ja vaikutukset NO histamiinin vapautumista on olemassa tutkimuksia, jotka osoittavat eläinten välillä muissa histamiini-erittävien solujen. Esimerkiksi rotan syöttösoluista on osoitettu tuottaa "NO kaltainen tekijä", joka estää histamiinin vapautumisen [32], kun on olemassa tutkimuksia, jotka osoittavat, että NO ei vaikuta histamiini-eritystä ihmisen basofiilien [33]. Tällä hetkellä voimme vain perustaa eroja estävä vastauksena l-arginiini histamiinille ja db-cAMP stimulaatiota.
Lisätutkimukset ovat tarpeen selventää roolin NO katesolufunktiota.
Johtopäätökset
havainnot Tässä tutkimuksessa viittaa siihen, että NO endogeenisesti tuottamat ihmisen oxyntic limakalvon voi vähentää stimuloivia vaikutuksia histamiinin tai db-cAMP mahahapon eritykseen. Saimme yhtenäinen tulokset maharauhanen eristetty erilaisista Terveillä, mikä tarkoittaa, että NO vapautuu tietyn solujen eritys- limakalvolla tärkeä fysiologinen rooli säätelyssä mahahapon eritystä.
Julistukset
Kiitokset
Kiitämme Ulf Hannestad suorittava ureaasin hengitystesteissä, Inga-Lill Andersson ja Gunilla Strand apua kanssa gastroskopisten menettelyjä, ja Marja Tjädermo tekniseen tukeen. Tätä työtä tukivat AstraZeneca R & D, Ruotsi.
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12876_2004_88_MOESM1_ESM.ppt Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12876_2004_88_MOESM2_ESM.ppt Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12876_2004_88_MOESM3_ESM.ppt Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 Kilpailevat edut
yhtään ilmoitettu.

• Puutteellinen mahalaukun metaplasiaa lapsilla insuliinista riippuvainen diabetes ja keliakia. Mikroskooppitutkimus tutkimus
• Expression seerumin miR-20a-5p, let-7a, ja miR-320a ja niiden korrelaatioita pepsinogeeni atrofisessa gastriitti ja mahasyöpä a tapauskontrollitutkimuksessa