Želodčni karcinom supernatanta povzroči apoptozo in fibrozo v peritonealno tkivih in posledico ugodnega okolja za peritonealno metastaz, in vitro ter in vivo

Rak želodca celic supernatant povzroča apoptozo in fibrozo v peritonealno tkiv in rezultate v okolju, ugodnih za peritonealno metastaz, in vitro
in vivo
Abstract
Ozadje
V tej študiji smo preučili učinki topnih faktorjev želodčnih rakavih celic sproščajo na peritonealno mesothelial celicah in vitro
in vivo
.
metode
HMrSV5, človeški peritonealno mesothelial celične linije, smo inkubirali z supernatantih iz želodca rakavih celic. Opazili so morfološke spremembe HMrSV5 celic. Apoptoza od HMrSV5 celic smo opazili pod prenos elektronskim mikroskopom in kvantitativno določena z MTT testom in pretočno citometrijo. Izrazi proteinov, povezanih z apoptoze (kaspaze-3, kaspaznih-8, Bax, bcl-2) so bile imunokemijsko ocenili.
Rezultati
24 ur po zdravljenju z supernatantih, so bila v HMrSV5 celicah opazili vidnih morfološke spremembe, ki označujejo apoptozo želodčne rakave celice. Vivo
, peritonealni tkiva s rakave celice supernatanta želodca so precej zgosti in je vsebovala obsežno fibrozo.
Sklepe
Te ugotovitve kažejo, da se lahko supernatante želodčnih rakavih celic povzroči apoptozo in fibrozo v HMrSV5 človekovih peritonealno mesothelial celice skozi supernatante v zgodnji peritonealno metastaz, v odvisnosti od časa način, in kažejo, da topnih dejavnikov v peritonealno votlino vplivajo na morfologijo in funkcijo mesothelial celic, tako da se lahko nastali okolje postalo naklonjeno peritonealno metastaz.
besede
peritonealno karcinomatozo želodcem novotvorbe Mesothelial apoptoza celic fibroza Ozadje
peritonealno karcinomatozo močno omejuje izboljšanje prognoze bolnikov z želodčnim rakom po operaciji [1]. Peritonealno rezultati metastaze v metastatskega kaskade, ki se ponavadi pojavljajo v pozni fazi razvoja tumorja, ki znatno prispeva k želodca, povezanih z rakom umrljivost. Mehanizmi za peritonealno metastazami difuzno infiltracije karcinom niso jasno razume.
Za peritonealno STROMA okolje podpira proliferacijo tumorskih celic, ki služi kot bogat vir rastnih faktorjev in Kemokini je znano, da sodelujejo pri tumorja metastaz. Molekule posredniške to kaskado niso temeljito raziskan [2]. Poročajo, da bi mesothelial celice preprečevanje raka invazijo in opraviti morfološke spremembe v odgovor na topnih dejavnikov, ki jih rakave celice [3] sproščeni. Specifične molekule, ki sodelujejo pri tem procesu so narekuje bistvene značilnosti metastaznimi tumorskimi celicami. Tumorske celice potrebujejo trdno pritrdite na submesothelial enoplastni in prodrejo v mesothelial strnjena plast za invazijo. Buck sod.
[4] raziskovali zaščitni učinek mesothelial sloja, z uporabo modela podgane, v kateri je mesothelial sluznice parietalnih peritonej odstranimo iz poskusnih podganah, pri čemer bazalno membrano nedotaknjen. Smo prej pokazali, da je plast konfluentnih, intaktne mesothelial celice ovira rakavih celic invazijo trebušno votlino. Ko pa se celovitost te pregrade motena, lahko pride metastaze, saj peritonej zagotavlja ugodno okolje za želodčni rakave celice raste [5-9]. Dodatne študije so pokazale, da pred zaplembo želodčnih rakavih celic na peritonej, mesothelial celice pridobijo polkrogle oblike in začeti skladišče. Kot rezultat so golih področja submesothelial vezivnega tkiva izpostavljena peritonealno votlino [10-12]. Verjetno je, da pronicanje v mesothelial monosloja z tumorskih celicah sproži s tumorsko povzročeno mesothelial celične apoptoze. V tej študiji smo preučili učinke topnih faktorjev želodčnih rakave celice na morfologijo in biološko aktivnostjo peritonealno mesothelial celic sproščenih v in vitro in in vivo.

Metodami
reagentov
3- (4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil tetrazoliumbromide (MTT) dobimo iz Fluka, ZDA. Propidijevim jodidom (PI) dobimo iz Biosharp, ZDA. Bcl-2, Bax, kaspaza-3, smo kaspaza-8 in aktinu primarna protitelesa in sekundarno protitelo, kozji anti-mišji IgG, pridobljen iz Santa Cruz Biotechnology Inc., CA, USA. Dulbeccovem modificiranem Eaglov medij (DMEM) in fetalni telečji serum (FCS), smo dobili od GIBCO BRL (Grand Island, NY, ZDA). Drugi laboratorijski reagenti so bili pridobljeni iz Sigma, ZDA. Uporabljena je bila fazno kontrastnim mikroskopom (Japonska Nikon), transmisijski elektronski mikroskop (Hitachi H-6001, Japonska).
celic in celične kulture
prehrano peritonealno celične linije mesothelial je HMrSV5 pridobljenih iz Oddelka za biologijo celice Kitajska Medical University, Kitajska. HMrSV5 je bil prvotno izoliran iz človeškega omentum. Na kratko, omentum zbirajo iz soglašanja non-uremični bolnike, ki so v postopku poseg v trebuhu in inkubiramo pri 0,05% (m /v) tripsina in 0,01% (m /v) EDTA za 20 minut pri 37 ° C. Požeta mesothelial celice smo centrifugirali pri 150 g 5 minut in nato prenesli v 75 cm 2 tkivne kulture bučke in kultiviramo v navlaženi 5% CO 2 inkubator v DMEM z dodatkom 10% fetalnega telečjega seruma (FCS ), 100 U /ml penicilina, 100 ug /ml streptomicina, 2 mmol /L L-glutamin in 20 mmol /L hidroksietil piperazin etansulfonska kislina (HEPES, Gibco BRL, ZDA). Gojišče smo spremenili vsakih 2-3 dni.
Človeške želodčne karcinom celičnih linij, MKN-45, MKN-1, SGC-7901, BGC-823 in MGC-803, so bili pridobljeni iz Oddelka za biologijo celice, China Medical University Kitajska. Te celice smo gojili v DMEM z dodatkom 10% FCS, 100 enot /ml penicilina, 100 fig /ml streptomicina in 2 mmol /L L-glutamin v navlaženi 5% CO 2 inkubator pri 37 ° C.
Priprava brez seruma kondicioniranem mediju
brez seruma pogojeno medijev (SF-CM) z dne smo pripravili iz želodca rakavih celic ali normalnih želodčnih epitelnih celic, kot smo že poročali [1]. Na kratko, 5,0 x 10 5 Celice smo zasejali v 100-mm tkivne kulture posodo s 10-ml DMEM, dopolnjen z 10% FCS in inkubiranih pri 37 ° C 3 dni. Da dobimo SF-CM smo celice dvakrat oprali s fosfatnim pufrom raztopine (PBS) in nato inkubiramo 2 dni s 3 ml DMEM brez seruma. SF-CM eluiramo in centrifugiramo pri 1000 g 5 min, spustili skozi filtre (velikost por: 0,45 um) in shranili pri -20 ° C, dokler se uporablja
Živalski
Moški C57BL /6 miših. (osem tednov, ki tehtajo 20 ± 2 g), so bili pridobljeni iz China Medical University objekta živali in hranili s čisto vodo in komercialni prehrani zalogi v klimatizirani sobi 20-22 ° C.Animals, ki se uporabljajo v tej študiji so se ohranili v skladu z navodili za nego in laboratorijskih živalih, ki so jih ameriški National Institutes of Health, objavljenega (NIH objava št 85-23, revidiran leta 1996) in pravilnik o varstvu živali in uporabo odbora Kitajske Medical University.
morfoloških evalvacija v skladu s fazno kontrastnim mikroskopom
človekove peritonealno mesothelial celic (HPMCs) smo gojili na subconfluence v 50-cm 2 posodi z DMEM, ki vsebuje 10% FCS. Medij smo nato spremeni v (1) DMEM brez seruma ali (2) SF-CM iz želodca raka celičnih linij. Je HPMCs v 24 vdolbinami komor bili izpostavljeni testnih raztopin 24 ur in previdno speremo s PBS. Nato so pregledali pod fazno kontrastnim mikroskopom po velikosti, obliki in integritete celične membrane, citoplazme in jedra.
Transmisijsko elektronsko mikroskopijo
so bili HPMCs kultivirajo, da subconfluence v 50-cm 2 jed z DMEM, ki vsebuje 10% FCS. Medij smo nato spremeni v (1) DMEM brez seruma ali (2) SF-CM iz želodca raka celičnih linij. Po inkubaciji 24 ur, smo celice tripsinizirali in fiksira v ledeno mrzle 2,5% elektronsko mikroskopijo naziv glutaraldehidom v PBS (pH 7,3). Vzorce speremo s PBS, po fiksni in 1% osmijevim tetroksidom z 0,1% kalijevega fericianida, dehidrirano skozi stopenjski etanola serije (30% -90%), in vgrajeni v EPON. Semi-tanek (300 nm) odseki so prerežemo s pomočjo REICHART Ultracut (REICHART Ultracut (Leica, Nemčija), obarvajo z 0,5% toluidin modri barvi, in pregledali pod svetlobnim mikroskopom. Tankih odsekov (65 nm), smo obarvali z 2% uranil acetat in svinec citrat Reynold je, in preučiti za prenos elektronskim mikroskopom na × 5000 ali × 8000 povečave.
Kvantitativna določitev poškodbe celic s MTT testom
MTT testom smo želeli oceniti izvedljivost peritonealno mesothelial celicami po zdravljenju z SF-CM iz želodca raka celičnih linijah. Celice v 96-plate kultur, po izpostavitvi nadzorujejo ali testne rešitve za določeno časovno obdobje (opaženo pri 12 h, 24 h in 48 h), inkubiramo pri 50 ug /ml MTT pri razredčitvi 1:10, temelječ na volumnu medija kulture za 3 ure pri 37 ° C. na koncu inkubacijskega časa, raztopino MTT odstranimo in 150 xl DMSO dodamo v vsako vdolbino in mešali do raztopijo temno modre formazon kristalov, ki so nastale. Delež živih celic določimo z merjenjem optične gostote vsakega vzorca pri 480 nm s spektrofotometrom. Tri kulture smo izpostavili vsakega raztopini pri vsakem časovnem obdobju. smo primerjali sredstva vsake skupine kultur.
pretočna citometrija
Po inkubaciji v testnih raztopin 24 ur, 48 ur in 72 ur, celice požanjemo s pomočjo trypsinization. Celice smo resuspendirali v PBS pri koncentraciji 1 x 10 6 /ml in fiksna v 2 ml metanola 30 minut pri 4 ° C. Potem ko so bile določene CNE2 celice, smo zmes inkubirali v 0,5 ml raztopine PI (0,05 mg /ml v 3,8 mol /l Na citrata) in 0,5 ml RNaze A (0,5 mg /ml) pri sobni temperaturi 30 minut. Končno smo celice resuspendirali v 1 ml PBS in analiziramo s citometrije toka v skladu z navodili proizvajalca. Celice v subdiploidne vrha, so bile obravnavane apoptotske.
Histološko videz peritonej
Moški C57BL /6 miših (starih osem tednov, ki tehtajo 20 ± 2 g) so bile uporabljene v tej študiji. Poskus upoštevali smernice za uporabo laboratorijskih živali v raziskave in poučevanje. Miši so bile krmljene standardni pelete laboratorijsko chow in so bili opremljeni z vodo ad libitum
. Miši smo naključno dodeljena enemu od treh skupin (n = 5 ali 6 v vsaki skupini). Miši v skupini DMEM smo obdelali z DMEM (100 ml /kg), ki ga intraperitonealne injekcije na dan 1, 3, 5 in 7. miši v skupini SF-CM smo obdelali s 100 ml /kg SF-CM iz želodca rakavo celico proge po intraperitonealne injekcije na dan 1, 3, 5 in 7. Nič dodamo injekcije za kontrolne miši. Po 29 dneh smo miši anestezirali z etil etrom in žrtvovali. Parietalnih peritoneums smo obarvali s hematoksilinom in eozinom (H & E) in Masson trikrom barvanjem. Morfološke spremembe parietalnih potrebušnice so opazili s svetlobnim mikroskopom. Debelina submesothelial ekstracelularne matrice smo določili po odseki tkiva imel H &E in Masson obarvanja. Povprečje za 10 neodvisnih meritev smo izračunali za vsako sekcijo; Podatki so bili potem povzeti.
Western blot
so človekove peritonealno mesothelial celice gojimo do subconfluence v 50-cm 2 posodi z DMEM, ki vsebuje 10% FCS. Mediji so se nato spremeni v (1), SF-CM iz želodca celice raka MKN-45, MKN-1, SGC-7901, BGC-823 in MGC-803; in (2) DMEM brez seruma, ki služi kot kontrolo. Protein je bila vzeta v standardni lize pufru z zaviralci proteinaz (natrijevega ortovanadata, fenilmetilsulfonil fluorida, leupeptina in aprotinin pridobljenih iz BioShop, Burlington, ON, Kanada). Alikvotov 20 ig proteina lizat smo elektroforezo s 12% SDS-PAGE gelu, prenesemo v najlonsko membrano in ločeno zaznati s protitelesi za Bcl-2, Bax, kaspaza-3 in kaspaze-8. Po inkubaciji s sekundarnih protiteles, so bile razvite blots uporabo kompleta za ECL Western Blot Substrat (Abcam, ZDA).
Statistična analiza
so vsi podatki, izražen kot x
± sd
. Primerjave učinki zdravila so bile narejene s pomočjo Studentov t
-test. U D
vrednost < 0.05 je bila ocenjena kot pomembna.
Rezultati
Morfološka ocena pod fazno kontrastnim mikroskopom
Medtem HPMCs obravnavati le v DMEM brez seruma pokazala tipičen poligonalno in tlakovanih vzorec (slika 1A.), Celice zdravijo z SF-CM iz želodca rakave celice MKN45 za 24 h se je začela, da imajo morfološke spremembe, od katerih je najbolj očitno je bilo luščenje in videz golih površin (slika 1B). Slika 1 morfološke spremembe človekovih peritonealno mesothelial celic pod fazno kontrastnim mikroskopom.
(A) enojno plast mnogokotni in tlakovanih podobnih HPMCs kultiviranih v DMEM brez seruma. (B-D) listasti videz golih področjih po zdravljenju z SF-CM iz želodca raka celičnih linijah MKN45, SGC7901 in BGC823. (Povečava: x 40).
Prenos elektronska mikroskopija
Po 24 urah od SF-CM po zdravljenju želodčnega raka celic, apoptotske značilnosti (kot kondenzacijo jedrskega kromatina, gubanja jedrskih membran, dilatacija endoplazemski retikulum, sliki 2A, B), in razmeroma normalno struktura mitohondrijev) smo pod presevnim elektronskim mikroskopom (TEM opazili. Pod TEM, je jedrska membrana razvidno, da je nedotaknjeno je kromatin kondenzira v masah, ter na meji membrane ali tvori lok (slika 2C). Opazili so tudi brstenja in oblikovanje apoptozo teles (slika 2C). Slika 2 človekove peritonealno mesothelial celice (HPMC) 24 ur po inkubaciji z in brez SF-CM iz želodca rakavih celic.
(A) Kontrolne celice kažejo normalne jedra in endoplazmatskem reticula. (B) celice zdravljeni z SF-CM iz MKN1 rakavih celic želodca prikaz kromatin kondenzira v masah, ter na meji membrane ali tvori lok. Budding in oblikovanje apoptozo organov so opazili (puščice v B). (C) .Cells zdraviti z SF-CM iz MKN45 želodca rakave celice kažejo kondenzacijo jedrske kromatina (puščice v C). (D) celice zdravijo z rakom celična linija želodca so MGC-803 podobni B. brstenja in formiranje apoptoze organov, so opazili tudi.
MTT test
Za oceno možnih omejevalno učinke želodca rakave celice SF-CM na HPMCs, smo pregledali njeno rast krivulje na HPMC liniji HMrSV5. Želodčni karcinom SF-CM povzročene zatiranje rasti v HPMC celicah, in to v odvisnosti od časa način (slika 3A). Ta učinek so opazili pri 0 urah, 12 h, 24 h in 48 h. Ti rezultati kažejo, da je tumor supernatant povzroča mesothelial poškodbe celic ali apoptozo. Slika 3 apoptoza je količinsko na dva načina: MTT in pretočna citometrija.
(A) Izvedljivost mesothelial celic HMrSV5 po zdravljenju z SF-CM iz želodca rakavih celic. (B) Apoptoza je količinsko s pretočno citometrijo po zdravljenju z SF-CM iz želodca rakavih celic.
Pretočno citometrijo
Za določitev odstotka apoptotskih celic po obdelavi v različnih časovnih obdobjih, so mesothelial celice obarvali z PI. Rak želodca celic SF-CM dejansko povzroča apoptozo v mesothelial celicah in to na način, ki je odvisen od odmerka po 48 urah (slika 3.b). Ti rezultati so bili enaki kot tisti za MTT testu so bili analizirani
Histologija in morfometrična analiza
morfoloških sprememb parietalnih potrebušnice, H &. E in Masson trikrom barvanjem. Med normalnih miših, A mesothelial celica enoplastna zajela peritonealno površino brez odebelitev (slika 4 a, d). Zaradi očitne nezdružljivosti, miši, ki so prejemali intraperitonealne injekcije DMEM imel rahlo izbočenost v peritonealno submesothelial kolagenskih cone (slika 4 b, e); tiste vbrizga intraperitonealno z želodca rakave celice SF-CM je označena odebelitev submesothelial kompaktne cone in povečano celičnost (slika 4 c, f). Slika 4 Hematoxylin /eozin (H &E) in Masson obarvanje peritonej tkiv.
peritonej tkiva iz različnih skupin so bili pridobljeni kirurško in izpostavimo H &E in Masson obarvanjem. (A) Vse fotografije so bili pridobljeni pri 40-kratni povečavi. Normalna peritonej sestavlja samo enojno plast mesothelium z malo fibrozo (A, D). Peritonej, zdravljenih z DMEM pokazala tudi majhne količine vezivnega tkiva pod mesothelial celic (puščice v B, E). V nasprotju s tem pa je peritonej s SF-CM obdelamo iz želodca rakavih celic v bistvu zgosti in vsebujejo obsežne fibrozi (puščice V c, f). (B) Morfometrična parametri peritonealnih tkiv. Podatki so izraženi kot povprečje ± standardna napaka povprečja vsaj 3 ločenih eksperimentih. * P
< 0.05.
Western blot
Nato smo si prizadevali nadalje opredeljene tudi mehanizme, ki so osnova za skupne učinke želodca rakave celice SF-CM na podobni proteini apoptoze (kaspaze-3, kaspaze-8, Bax, bcl-2) . Ravni teh proteinov so ovrednotili s pomočjo zahodne analize blot. Kaspaza-3, kaspaza-8 in vrednosti Bax proteinski povečala po 48 urah zdravljenja z SF-CM od večine želodčnih rakavih celic, medtem ko bcl-2 vsebnosti beljakovin zmanjšalo (slika 5). Beta-aktin uporabimo kot kontrolo obremenitve. Slika 5 blot analizo Western nivojev beljakovin povezanih apoptoze (kaspaza-3, kaspaza-8, Bax, in Bcl-2) v HPMCs z SF-CM iz različnih želodčni rak celične linije zdravljenja.
Serum-sestradana HPMCs inkubiramo z SF-CM iz različnih želodčnih linij rakavih celic za do 48 ur; Skupno celični protein je bila vzeta in izpostavljena zahodni blot analizo.
debato
Večina študij pooperativne tumor povratno kažejo, da šoka mesothelial površine so zaželene lokacije za adhezijo tumorskih celic. V zadnjem času, ločiti rakave celice znotraj peritonealne votline in beljakovine posebej izražene v peritonealno zasevke raka želodca je bilo ugotovljeno, da je povezana z rakom napovedi. Medtem ko immunogenetic pristopi kažejo veliko obetajo pri zdravljenju peritonealno metastazami želodčnega raka [13-15], so učinki želodčne rakavih celic na mesothelial celice slabo razumljen.
Študija je pokazala, da mesothelial celice pod zaščito pred peritonealno metastaze tumorja v intaktna mesothelia [9, 16, 17]. Paget et al
predlagala "seme in zemljo" teorijo: metastaze pride le, če tumorske celice živijo in rastejo v ugodnem okolju [18]. Trebušne votline je lahko tako ugodno okolje za scirrhous želodčne rakavih celic; morda mesothelial celice preprečevanje rakavih celic infiltracije v submesothelial vezivnega tkiva. Masakazu sod.
[1] je pokazalo, da je sosednja Strnjena mesothelial celice ovirana vdor rakavih celic. Poleg tega Kiyasu sod.
[3], poročajo, da pred peritonealno vsaditvijo rakavih celic, mesothelial celice postanejo hemisfere in luščenje iz peritonej. Naša hipoteza je, da po tem, ko so serosa izpostavljeni, brez rakave celice shed od primarnih želodca onkoloških v trebušno votlino inducira apoptozo v peritonealno mesothelial celic [19-21]. Kot rezultat, mesothelial celice postanejo hemisfere in luščenje poteka. Gole površine submesothelial vezivnega tkiva so tako izpostavljene peritonealno votlino; To je bilo ranjenih peritonealno stran postane ugodno okolje za peritonealno metastaz [22-24].
Imeli smo že pokazale, želodčni rak celic supernatanta za znatno zmanjšanje preživetja mesothelial celic, ampak normalno želodca epitelijskih celic linija GES-1 izvaja nobenega vpliva na mesothelial celice [5]. Naša raziskava prisotni tudi dokazuje, da kultivirani mesothelial celice postanejo hemisfere in luščenje pride, ko smo dodali medij brez seruma, ki ga želodčne rakavih celic pogojeno, kot je prikazano s kontrastnim fazo mikroskopijo. Poleg tega so v skladu s presevnim elektronskim mikroskopom opazili citoplazemskega zmanjšanje jedrske kondenzacija in nastajanje ekstracelularnih in /ali znotrajceličnih apoptotskih telesih. Apoptozo je količinsko na dva načina: MTT in pretočna citometrija. Smo domnevajo, da prosta želodčnih rakave celice v trebušni votlini inducira apoptozo mesothelial celic in povzroči piling, sčasoma vodi do metastaz. To je lahko mehanizem, s katerim se rakave celice držijo submesothelial vezivno tkivo, čeprav so mesothelial celice še vedno dobro organizirano in zlit. Nadaljnje raziskave so potrebne za opredelitev SF-CM sprosti iz želodca rakavih celic.
Želodca rakave celice lahko sproži apoptozo preko mitochondria- in smrti receptorjev odvisna apoptotska poti. Želodčne rakave celice zavirajo rast mesothelial celic, tako da zavira proliferacijo s spodbujanjem kaspaze odvisna od apoptoze. Kaspaze so citoplazemska aspartat specifične cisteinske proteaze, in igrajo pomembno vlogo v apoptozi [25]. Smrt receptorja odvisni apoptotični pot se sproži na celični površini in zahteva aktivacija kaspaze-8, medtem ko je mitohondrijske odvisni poti sproži sproščanje mitohondrijske citokroma c v citoplazmo in zahteva aktivacija kaspaze-9. Kasneje lahko kaspaze-8 ali -9 aktivacijo kaspaze-3, ki je v ciljih turn in razgrajuje specifične in vitalne celične proteine, kar nazadnje pomeni degradacijo jedrske DNK in celične smrti apoptoze [26]. Bcl-2, zaviralec mitohondrijske apoptozo poti, deluje s blokiranje proapoptotičnih kolegi, kar preprečuje sprostitev citokroma c in aktivacije kaspaze [27]. Bax je smrt promotor, ki jo nevtralizirali z heterodimerizacijo z Bcl-2. Bax premikanjem v zunanjo mitohondrijsko membrano, ki mu sledi puščanja citokroma c iz mitohondrijev v citosol [28]. Kaspaze-9 in kaspaze-3 so aktivirani zaporedno, in ti dogodki privedejo do zloma kromosomske DNA. Ker obstaja velika verjetnost, da se želodčni rak celično apoptozo od mesothelial celic posledica regulacije Bcl-2 in Bax, je potrebna identifikacija njihovih ciljnih spojin.
V tej študiji smo uporabili miške eksperimentalni model peritonealno skleroza s ponavljajočimi injekcije želodca rakave celice SF-CM povzroča. Eksperimentalni peritonealno fibroza zaradi ponavljajočih intraperitonealno injekcijo iz želodca rakave celice SF-CM povzročene morda ne v celoti posnemajo peritonealno skleroza opazili pri bolnikih (difuzno infiltracije karcinom ali karcinom VI Vrsta Bormann je). Dejstvo je, patološke ugotovitve peritonealno karcinomatozo in peritonealno sklerozo niso enotni in različni dejavniki so vključeni. Poleg tega so med razvojem peritonealne sklerozo med želodčni rak celic SF-CM-induciranih poskusnih modelih, živalskih in človeških bolnikih na peritonealni karcinomatozo opazili nekatere skupne značilnosti. Ti skupni histološke ugotovitve vključujejo povečano kopičenje vmesnih kolagena kot tipa I in kolagena III infiltracijo monociti /makrofagi, povečanje v-SMA + myofibroblasts in vaskularno gostote v potrebušnice [7, 8]. Te podobnosti v spremembah iz peritonealne membrane med eksperimentalnih modelov in bolnikov človekovih peritonealno karcinomatozo kažejo, da je to primeren model za preučevanje učinkovitosti različnih možnih terapevtskih reagentov za urejanje peritonealno karcinomatozo.
Sklepe
Te ugotovitve kažejo, da je rak želodca celice lahko inducira apoptozo in fibrozo človeških peritonealno mesothelial celic skozi supernatantih v začetku peritonealne metastaz in kažejo, da lahko topnih dejavnikov v peritonealno votlino vplivajo na morfologijo in funkcijo mesothelial celic, tako da dobljeni okolje postane naklonjeno peritonealno metastaz.
Kratice
HPMCs:
človekove peritonealno mesothelial celic
SF-CM.
Serum brez pogojno mediji

Izjave
Zahvala
avtorji želijo izraziti svoje iskreno zahvalo dr Yan Song za njegovo tehnično pomoč. Ta študija je bila podprta z nepovratnimi sredstvi iz državnega naravoslovje Foundation Kitajske (NO. 81071956 in 81101884).
Avtorjev originalnih predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12876_2011_768_MOESM2_ESM.jpeg avtorjev 12876_2011_768_MOESM1_ESM.jpeg avtorjev prvotni datoteki številka 2 12876_2011_768_MOESM3_ESM.bmp avtorjev prvotni datoteki Slika 3 12876_2011_768_MOESM4_ESM.jpeg avtorjev prvotni datoteki številka 4 prvotne datoteke 12876_2011_768_MOESM5_ESM.bmp avtorjev za sliki 5 konkurenčni interesi
Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov. prispevkov
avtorjev
DN, z-DL in F-NL izvajajo študije o morfologiji in biološko aktivnostjo peritonealno mesothelial celic in vitro
in vivo
. ZS, Z-FM in FL sodelovali v in vivo
študij. YX in C-GJ sodelovali v študijah morfologije. DN in HX sodeloval pri oblikovanju študije in izvedli statistično analizo. HX in DN zasnovana študije in sodeloval pri oblikovanju in usklajevanju in pomagali pripraviti rokopis. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Je sočasna splenektomija koristna za dolgoročno preživetje bolnikov z rakom želodca v postopku kurativno želodca? En-ustanova study
• Izražanje in klinični pomen dolge nekodirajočega RNA HNF1A-AS1 v človeškega raka želodca