Желудочный раковых клеток надосадочную вызывает апоптоз и фиброз в перитонеальных тканей и приводит к окружающей среде, благоприятной для перитонеального метастазов, в пробирке и в естественных условиях

Желудочный раковых клеток надосадочную вызывает апоптоз и фиброз в перитонеальных тканей и приводит к созданию благоприятных условий для перитонеального метастазов, в пробирке
и в естественных условиях

Аннотация
фона
В этом исследовании мы рассмотрели влияние растворимых факторов обнародованные клеток рака желудка на перитонеальных мезотелиальной клеток в пробирке
и в естественных условиях

. методы
HMrSV5, человека перитонеального мезотелиальной линии клеток, инкубировали с супернатанатах клеток рака желудка. наблюдались морфологические изменения клеток HMrSV5. Апоптоз клеток HMrSV5 наблюдалась под просвечивающим электронным микроскопом, и количественно определяли с помощью МТТ и проточной цитометрии. Выражения связанных с апоптозом белков (каспазы-3, каспазы-8, Вах, Bcl-2) были оценены. Иммунохимически
Результаты
Заметные морфологические изменения, характерные для апоптоза наблюдались в клетках HMrSV5 24 ч после обработки надосадочной жидкости клетки рака желудка. В естественных условиях
перитонеальные ткани обрабатывали клетки рака желудка супернатанта существенно загустеет и содержал обширную фиброзом.
Выводы
Эти результаты показывают, что супернатанты клеток рака желудка могут вызывать апоптоз и фиброз в HMrSV5 перитонеального мезотелиальной клетки человека через супернатанты в начале перитонеального метастазирования, в зависимости от времени, а также показывают, что растворимые факторы в брюшной полости влияют на морфологию и функцию мезотелиальных клеток таким образом, чтобы в результате чего среда может стать благоприятным для перитонеальных метастазов.
Ключевые слова
Перитонеальный карциноматоз Желудок новообразования Мезотелиальной клеток Апоптоз фиброз фон
перитонеального карциноматозом существенно ограничивает улучшение прогнозов больных раком желудка после операции "[1]. Перитонеальный результаты метастазирование в метастатического каскада, как правило, происходит при развитии опухоли на поздней стадии, что значительно способствует желудка, связанной с раком смертности. Механизмы перитонеального метастазирования диффузно инфильтрации карциномы не ясно поняты.
Перитониальный среда стромы способствует пролиферации опухолевых клеток, выступая в качестве богатого источника факторов роста и хемокинов, как известно, участвует в метастазирование опухоли. Молекулы, опосредующие этот каскад не были широко исследованы [2]. Как сообщается, мезотелиальные клетки могут предотвратить инвазию раковых и претерпевают морфологические изменения в ответ на растворимых факторов, высвобождаемых раковых клеток [3]. Конкретные молекулы, участвующие в этом процессе, продиктованы внутренними характеристиками метастатических опухолевых клеток. Опухолевые клетки должны прочно прикрепить на submesothelial монослоя и проникают в мезотелиальной монослоя для вторжения. Бак и др.
[4] исследовали защитный эффект мезотелиальной слоя, используя крысиную модель, в которой мезотелиальной подкладка париетальной брюшины была содранной в подопытных крыс, в результате чего базальную мембрану неповрежденной. Ранее мы показали, что слой сливающиеся, неповрежденные мезотелиальной клетки препятствует инвазии раковых клеток в брюшной полости. Тем не менее, как только целостность этого барьера нарушается, метастазирование может произойти, так как брюшина обеспечивает благоприятные условия для рака желудка клеткам расти [5-9]. Дополнительные исследования показали, что до прикрепления клеток рака желудка на брюшине, мезотелиальные клетки приобретают полусферическую форму и начинают лить. В результате, обнаженные участки submesothelial соединительной ткани подвергаются брюшную полость [10-12]. Вполне вероятно, что проникновение мезотелиальной монослоя опухолевыми клетками инициирует с индуцированный опухолью мезотелиальной апоптоза клеток. В данном исследовании мы изучили влияние растворимых факторов высвобождаемые клеток рака желудка по морфологии и биологической активности перитонеальных мезотелиальной клеток в пробирке и в естественных условиях

. МЕТОДЫ
Реагенты
3- (4, 5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенил tetrazoliumbromide (МТТ) был получен от Fluka, США. Пропидиум йодида (PI), была получена из Biosharp, США. Bcl-2, Вах, каспазы-3, каспазы-8 и актиновые первичных антител, а вторичное антитело, козье антитело против мышиных IgG, были получены из Santa Cruz Biotechnology Inc., штат Калифорния, США. среда Игла в модификации Игла (DMEM), и фетальной телячьей сыворотки (FCS), были получены от GIBCO BRL (Grand Island, NY, США). Другие лабораторные реагенты были получены от компании Sigma, США. Была использована фаза-контрастный микроскоп (Япония Nikon), просвечивающий электронный микроскоп (Hitachi H-6001, Япония).
клеточных линий и клеточных культур
Человеческий перитонеального мезотелиальной клеточной линии HMrSV5 была получена из Департамента клеточной биологии , Китай медицинский университет, Китай. HMrSV5 первоначально был выделен из человеческой сальнике. В кратком изложении, сальнике собранные из соглашаясь без пациентов с уремией, которые подвергались плановым абдоминальной хирургии, и инкубировали в 0,05% (вес /объем) трипсина и 0,01% (вес /объем) ЭДТА в течение 20 мин при 37 ° С. Собранный мезотелиальные клетки центрифугировали при 150 г в течение 5 мин, а затем переносили в 75 см 2 для культуры тканей колбах и культивировали в увлажненной 5% CO <суб> 2 инкубаторе, в среде DMEM, дополненной 10% фетальной телячьей сыворотки (FCS, ), 100 ед /мл пенициллина, 100 мкг /мл стрептомицина, 2 ммоль /л L-глутамина и 20 ммоль /л гидроксиэтилпиперазина этансульфоновой кислоты (HEPES, Gibco BRL, США). Среду меняли каждые 2-3 дня.
Желудка человека линии клеток карциномы, MKN-45, MKN-1, SGC-7901, КУП-823 и MGC-803, были получены из Департамента клеточной биологии, Китайского медицинского университета , Китай. Эти клетки культивировали в среде DMEM, дополненной 10% FCS, 100 ед /мл пенициллина, 100 мкг /мл стрептомицина, и 2 ммоль /л L-глутамина в увлажненной 5% CO <суб> 2 инкубаторе при температуре 37 ° С.
Приготовление не содержащей сыворотки кондиционированной среды
бессывороточной кондиционированной среде (SF-CM) получали из клеток рака желудка или нормальных эпителиальных клеток желудка, как сообщалось ранее [1]. Если коротко, то 5,0 × 10 5 клеток высевали в 100-мм чашки для культивирования тканей с 10 мл DMEM, дополненной 10% FCS, и инкубировали при 37 ° С в течение 3-х дней. Для получения SF-CM, клетки дважды промывали фосфатно-буферном растворе (PBS), а затем инкубировали в течение 2-х дней с 3 мл не содержащей сыворотки DMEM. СФ-СМ элюировали и центрифугировали при 1000 г в течение 5 мин, пропускают через фильтры (размер пор: 0,45 мкм) и хранили при -20
° C до использования Животные
Мужской мышей C57BL /6. (восемь недель, весом 20 ± 2 г), были получены из Китайского медицинского университета виварии и кормили с очищенной водой и коммерческой фондовой диеты в кондиционируемом помещении при температуре 20-22 ° C.Animals, используемых в данном исследовании, были сохранены в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных опубликованных американских национальных институтов здравоохранения (NIH публикации № 85-23, пересмотренная 1996) и политики уходу и использованию животных комитета Китайского медицинского университета.
Морфологические Оценка под фазово-контрастным микроскопом
человека перитонеального мезотелиальной клетки (НРМС) культивировали в subconfluence в 50 см 2 блюдо с DMEM, содержащей 10% FCS. Среду затем заменяли на (1) не содержащей сыворотки DMEM или (2) SF-CM от желудочных линий раковых клеток. В НРМС в 24-луночных камер подвергали воздействию испытуемых растворов в течение 24 ч и осторожно промывали PBS. Затем они исследовали под фазово-контрастным микроскопом размера, формы и целостности клеточной мембраны, цитоплазмы и ядра.
просвечивающей электронной микроскопии
В НРМС культивируют в subconfluence в 50 см 2 блюдо с DMEM, содержащей 10% FCS. Среду затем заменяли на (1) не содержащей сыворотки DMEM или (2) SF-CM от желудочных линий раковых клеток. После инкубации в течение 24 ч, клетки обрабатывали трипсином и затем фиксировали в охлажденном льдом 2,5% электронная микроскопия класса глутаровый альдегид в PBS (рН 7,3). Образцы были промыты PBS, фиксировали в 1% осмия с 0,1% кровяной соли, обезвоженной через серии градуированных этанола (30% -90%), и заливали в Epon. Полу-тонкий (300 нм) получали срезы с использованием Reichart ULTRACUT (Reichart ULTRACUT (Leica, Германия), окрашивали 0,5% толуидиновым синим, и исследовали под световым микроскопом. Ультратонкие срезы (65 нм) окрашивали 2% ацетата уранила и цитратом свинца Рейнольда, и исследовали на просвечивающем электронном микроскопе при × 5000 × 8000 или увеличения.
Количественное определение повреждения клеток с помощью МТТ-теста
МТТ анализ выполняли для оценки жизнеспособности перитонеальных мезотелиальных клеток человека после лечения с SF-CM из желудка линий раковых клеток. Клетки в культурах 96-луночного планшета, после облучения для контроля или тестирования решения в течение определенного периода времени (наблюдается в 12 ч, 24 ч и 48 ч), инкубировали с 50 мкг /мл МТТ в разведении 1:10, в расчете на объем культуральной среды в течение 3 ч при 37 ° с. в конце периода инкубации раствор МТТ удаляли и 150 мкл ДМСО добавляли в каждую лунку, и перемешивают до растворять темно-синие кристаллы formazon, которые сформировали. Доля жизнеспособных клеток определяли путем измерения оптической плотности для каждого образца при 480 нм с помощью спектрофотометра. Три культуры подвергали воздействию каждого раствора в каждый период времени. Сравнивали средства каждой группы культур.
Проточная цитометрия
После инкубации в тестируемых растворах в течение 24 ч, 48 ч и 72 ч, клетки собирали с помощью трипсинизации. Клетки ресуспендировали в PBS при концентрации 1 × 10 6 /мл и фиксировали в 2 мл метанола в течение 30 мин при температуре 4 ° С. После того, как клетки CNE2 фиксировались, смесь инкубировали в 0,5 мл раствора PI (0,05 мг /мл в 3,8 моль /л цитрата натрия) и 0,5 мл РНКазы А (0,5 мг /мл) при комнатной температуре в течение 30 мин. И наконец, клетки ресуспендировали в 1 мл PBS и анализировали с помощью проточной цитометрии в соответствии с инструкциями изготовителя. Клетки в субдиплоидных пике считались апоптическая.
Гистологической внешний вид брюшины
Мужской мышей C57BL /6 (восемь недель, с массой тела 20 ± 2 г) использовались в настоящем исследовании. Эксперимент следовал рекомендации по использованию лабораторных животных в исследованиях и преподавании. Мышей кормили стандартный лабораторный корм осадок и были обеспечены водой вволю
. Мыши были случайным образом распределены в одну из трех групп (n = 5 или 6 в каждой группе). Мыши в группе DMEM обрабатывали DMEM (100 мл /кг) путем внутрибрюшинной инъекции в дни 1, 3, 5 и 7. Мыши в группе SF-CM обрабатывали 100 мл /кг SF-CM из клеток желудка линии внутрибрюшинной инъекции в дни 1, 3, 5 и 7. Ничто добавляли к инъекции для контрольных мышей. После 29 дней мышей анестезировали диэтиловым эфиром и умерщвляли. Париетального окрашивали гематоксилином и эозином (H &Amp; E) и окрашивании трихромом Массона. Морфологические изменения париетальной брюшины наблюдали под световым микроскопом. Толщина submesothelial внеклеточной матрицы определяют после того, как срезы ткани имели H &Amp; E и Masson окрашивание. В среднем за 10 независимых измерений рассчитывали для каждой секции; Затем данные были обобщены.
Вестерн-блоттинга
человека перитонеального мезотелиальной клетки культивировали в subconfluence в 50 см 2 блюдо с DMEM, содержащей 10% FCS. Среды затем изменено на (1) SF-CM из клеток желудка MKN-45, MKN-1, СГК-7901, КУП-823 и МГЦ-803; и (2) не содержащей сыворотки DMEM, выступающей в качестве контроля. Белки экстрагировали в стандартном буфере для лизиса с ингибиторами протеаз (ортованадат натрия, фторофенилметилсульфонил, лейпептина и апротинина, полученные из BioShop, Берлингтон, Онтарио, Канада). Аликвоты 20 мкг белка лизата проводили электрофорез с 12% геле SDS-PAGE, переносили на нейлоновую мембрану, и отдельно зондировали антителами к Bcl-2, Вах, каспазы-3 и каспазы-8. После инкубации с вторичным антителом, блоты были разработаны с использованием набора ECL Вестерн-блот-субстрат (Abcam, США).
Статистический анализ
Все данные выражены в виде х
± стандартное отклонение
. Сравнения эффектов препарата были сделаны с использованием т Стьюдента
-тесту. Значение P
&л; 0,05 считается значительным.

Результаты Морфологические оценка под фазово-контрастным микроскопом
В то время как НРМС обрабатывали только в бессывороточной DMEM показал типичный многоугольной и булыжником шаблон (рисунок 1А.), Клетки, обработанные SF-CM из клеток желудка MKN45 в течение 24 ч начал иметь морфологические изменения, наиболее очевидным из которых были отшелушивание и появление обнаженных областей (рис 1В). Рисунок 1 Морфологические изменения брюшины мезотелиальной клеток человека под фазово-контрастного микроскопа.
(A) однослойная ломаных и булыжником, как НРМС, культивированных в бессывороточной DMEM. (B-D) Вспученный появление обнаженных областей после обработки SF-CM от желудочных линий раковых клеток MKN45, SGC7901 и BGC823. (Увеличение: × 40).
Просвечивающей электронной микроскопии
Через 24 ч SF-CM из желудка лечения раковых клеток, апоптотических особенности (такие как конденсация ядерного хроматина, сморщивание ядерных мембран, расширение эндоплазматической сети, и относительно нормальное строение митохондрий) наблюдались при просвечивающем электронном микроскопе (ПЭМ; фиг.2А, в). В соответствии с ТЕМ, ядерная мембрана была замечена неповрежденными, хроматин конденсируется в массах, а на границе мембраны или образующего арку (фиг.2с). Почкование и формирование апоптозных тел также наблюдались (фиг.2С). Фигура 2 человека перитонеальные мезотелиальные клетки (НРМС) через 24 ч после инкубации с и без SF-CM из клеток рака желудка.
(A) Контрольные клетки обеспечивают отображение нормальных ядер и эндоплазматической сеточки. (В) Клетки, обработанные SF-CM от MKN1 рака желудка клетки показывают хроматин конденсируется в массах, а на границе мембраны или образуя арку. Многообещающий и формирование апоптотических тел были обнаружены (стрелки в б). (C) .Cells обрабатывают SF-CM из MKN45 Клетки рака желудка показывают конденсации ядерного хроматина (стрелки в C). (D) Клетки обрабатывали Линия клеток желудка МГЦ-803 были аналогичны Б. бутонизации и формирования апоптозных тел также наблюдали.
МТТ
для оценки потенциальных подавляющих эффектов клеток желудка, SF-CM на НРМС, мы исследовали его кривую роста на НРМС линии HMrSV5. Желудочный раковых клеток SF-CM индуцированное подавление роста в клетках ГПМЦ, и сделал это в зависимости от времени (рис 3А). Этот эффект наблюдался при 0 ч, 12 ч, 24 ч и 48 ч. Эти результаты указывают на то, что опухоль надосадочную индуцирует Мезотелиальной повреждение клеток или апоптоз. Рисунок 3 Апоптоз количественно оценивали с помощью двух методов: МТТ и проточной цитометрии.
(A) Жизнеспособность клеток мезотелиальной HMrSV5 после обработки SF-CM из клеток рака желудка. (Б) Апоптоз количественно оценивали с помощью проточной цитометрии после лечения с помощью SF-CM из клеток рака желудка.
Проточной цитометрии
Для количественной оценки процент апоптотических клеток после обработки в различные периоды времени, мезотелиальные клетки окрашивали PI. Желудочный раковых клеток SF-CM эффективно индуцированный апоптоз в клетках мезотелиальной и делали это в зависимости от дозы через 48 ч (рис 3.b). Эти результаты были такими же, как для МТТ-анализе
гистологии и морфометрического анализа
морфологические изменения париетальной брюшины были проанализированы с использованием H &Amp;. E и Массона окрашивании трихромом. Среди нормальных мышей, A мезотелиальной монослой клеток покрыта брюшную поверхность без каких-либо утолщение (рисунок 4 a, d). Из-за очевидной несовместимости, мышей, получавших внутрибрюшинные инъекции DMEM имели небольшое утолщение в перитонеальной submesothelial коллагеновой зоны (рис 4 б, д); те, внутрибрюшинно вводили клетки рака желудка SF-CM был отмечен утолщение submesothelial компактной зоны и увеличение клеточности (рис 4 в, е). Рисунок 4 гематоксилин /эозином (H &Amp; E) и Массон окрашивание тканей брюшины.
брюшины ткани из разных групп были получены хирургическим путем и подвергали H &Amp; E и Masson окрашивания. (A) Все фотографии были получены при 40-кратном увеличении. Нормальная брюшина состоит только из монослоя мезотелием с небольшим фиброзом (а, г). Брюшина обрабатывали DMEM также показали небольшое количество соединительной ткани под мезотелиальной клеток (стрелки в б, д). В противоположность этому, брюшина обрабатывают SF-CM из клеток рака желудка был значительно утолщен и содержали обширные фиброз (стрелки в C, F). параметры (B) Морфометрические перитонеального тканей. Данные выражены в виде среднего значения ± стандартная ошибка среднего значения, по меньшей мере, 3-х отдельных экспериментов. * P &
л; 0.05.
Вестерн-блоттинга
Затем мы стремились к дальнейшему очертить механизмы, которые лежат в основе комбинированных эффектов желудка раковых клеток SF-CM на связанных с апоптозом протеинов (каспазы-3, каспазы-8, Bax, Bcl-2) , Уровни этих белков оценивали с помощью Вестерн-блоттинга. Каспазы-3 каспазы-8, и уровни белка Bax увеличилась после 48 часов обработки с SF-CM от большинства клеток рака желудка, в то время как Bcl-2 уровни белка снизился (рисунок 5). Бета-актин был использован в качестве нагрузочного контроля. Рисунок 5 Вестерн-блот-анализ уровней белка связанных с апоптозом (каспазы-3, каспазы-8, Вах и Bcl-2), в НРМС с SF-CM из различных желудочной обработки линий раковых клеток.
Сыворотка-голодали НРМС инкубировали с SF-CM из различных желудочных линий раковых клеток в течение 48 часов; общий клеточный белок экстрагировали и подвергали Вестерн-блот-анализа.
Обсуждение
Большинство исследований послеоперационного рецидива опухоли, показывают, что травмированной мезотелиальные поверхности являются предпочтительными участки для адгезию опухолевых клеток. В последнее время, раковые клетки в отрыве внутри полости брюшины, а также белки, специфически экспрессируется в перитонеального метастазирования рака желудка были обнаружены быть связаны с раком прогнозов. В то время как Иммуногенетические подходы показывают большие перспективы в лечении перитонеальным метастазирование карциномы желудка [13-15], эффекты клеток рака желудка на мезотелиальной клетках мало изучены.
Исследование показало, что мезотелиальные клетки обеспечивали защиту от перитонеального метастазирования опухоли неповрежденные мезотелий [9, 16, 17]. Педжета и др
предложил "семена и почва" теория: метастазирование происходит только, когда опухолевые клетки жить и расти в благоприятных условиях [18]. Брюшины может быть такая благоприятная среда для скиррозных клеток рака желудка; возможно, мезотелиальной клетки предотвращают раковые клетки от проникновения в submesothelial соединительной ткани. Масакадзу и др.
[1] показали, что соседние сливающихся мезотелиальной клетки препятствуют вторжение раковых клеток. Кроме того, Kiyasu и др.
[3] сообщили, что до перитонеального имплантации раковых клеток, мезотелиальные клетки становятся полусферические и отслаивается от брюшины. Наша гипотеза состоит в том, что после того, как серозная подвергаются, свободные раковые клетки пролил от первичных желудочных локализаций рака в брюшную полость индуцирует апоптоз в клетках перитонеальных мезотелиальными [19-21]. В результате мезотелиальные клетки становятся полусферические и отшелушивание происходит. Голые участки submesothelial соединительной ткани, таким образом, подвергается воздействию в брюшную полость; этот потерпевший перитонеального сайт становится благоприятной средой для перитонеального метастазирования [22-24].
Ранее мы показали желудочной раковых клеток супернатанта значительно снизить жизнеспособность мезотелиальной клеток, но нормальная желудочная линия эпителиальных клеток ГЭС-1 не оказывает никакого влияния на мезотелиальные клетки [5]. Наше настоящее исследование также показывает, что культивируемые мезотелиальные клетки становятся полусферической, и отшелушивания происходить при добавлении сыворотки среде обуславливается клеток рака желудка, как это показано с помощью фазового контраста микроскопии. Кроме того, наблюдалось снижение цитоплазматического, ядерная конденсация и образование внеклеточного и /или внутриклеточных апоптотических тел под просвечивающего электронного микроскопа. Апоптоз количественно оценивали с помощью двух методов: МТТ и проточной цитометрии. Мы предполагаем, что свободные Клетки рака желудка в брюшной полости вызывают апоптоз мезотелиальной клеток и вызывают отшелушивание, в конечном итоге приводит к метастазированию. Это может быть механизм, с помощью которого раковые клетки придерживаться submesothelial соединительной ткани, хотя мезотелиальной клетки все еще хорошо организованы и вырожденная. Необходимы дальнейшие исследования для характеристики SF-CM высвобождается из клеток рака желудка.
Клетки рака желудка могут вызывать апоптоз через mitochondria- и смерти рецептор-зависимых путей апоптоза. Желудочный раковые клетки подавляют Мезотелиальной рост клеток путем ингибирования пролиферации путем поощрения каспаз-зависимого апоптоза. Каспазы цитоплазматические аспартат-специфические цистеиновых протеаз, и играют важную роль в апоптозе [25]. Смерть рецептор-зависимого пути апоптоза инициируется на клеточной поверхности и требует активации каспазы-8, в то время как митохондрия-зависимый путь инициируется выходом митохондриального цитохрома с в цитоплазму и требует активации каспазы-9. Впоследствии, каспазы-8 или -9 может активировать каспазы-3, который в свою очередь целям и ухудшает специфические и жизненно важных клеточных белков, в конечном счете, приводит к деградации ядерной ДНК и апоптотической гибели клеток [26]. Bcl-2, ингибитор митохондриального пути апоптоза, оказывает свое действие путем блокирования проапоптотической коллег, которые, в свою очередь, предотвращает высвобождение цитохрома с и активацию каспаз [27]. Вах является смерть промотор, который нейтрализуется гетеродимеризации с Bcl-2. Вах транслоцирует во внешнюю мембрану митохондрий с последующей утечкой цитохрома с из митохондрий в цитозоль [28]. Каспазы-9 и каспазы-3 активируются последовательно, и эти события приводят к разрушению хромосомной ДНК. Поскольку существует значительная вероятность того, что рак желудка клеточно-опосредованный апоптоз мезотелиальных клеток является результатом регуляции Bcl-2 и Вах, определение их целевых соединений необходимо.
В этом исследовании мы использовали мышиной экспериментальной модели перитонеальный склероз, индуцированный повторные инъекции клеток рака желудка SF-CM. Экспериментальная перитонеального фиброз, индуцированный повторных внутрибрюшинных инъекций клеток желудка SF-CM может не полностью имитируют перитонеального склероз наблюдались у пациентов (диффузно инфильтрации рак или рак типа VI Бормана). На самом деле, патологические находки перитонеального карциноматозом и перитонеального склероз не являются единообразными и различные факторы участвуют. Кроме того, наблюдаются некоторые общие черты в процессе развития перитонеального склероза между клетку рака желудка SF-CM-индуцированных экспериментальных моделях на животных и у человека, проходящих перитонеального карциноматоза. Эти общие гистологические находки включают увеличение накопления интерстициальных коллагенов, таких как тип I и III коллагена, инфильтрацией моноцитов /макрофагов, увеличение а-SMA + миофибробластами и плотность сосудов в брюшину [7, 8]. Эти сходства в переделок перитонеальных мембран между экспериментальными моделями и больных перитонеального карциноматоз человека позволяют предположить, что это подходящая модель для изучения эффективности различных потенциальных терапевтических реагентов для регулирования перитонеальный карциноматозе.
Выводы
Эти результаты показывают, что рак желудка клетки могут индуцировать апоптоз и фиброз брюшины мезотелиальных клеток человека с помощью супернатантов в начале перитонеального метастазирования, и показывают, что растворимые факторы в брюшную полость может влиять на морфологию и функцию мезотелиальных клеток таким образом, чтобы в результате чего среда становится благоприятным для перитонеальных метастазов.
Сокращения
НРМС:
человека перитонеального мезотелиальной клетки


SF-CM:.
бессывороточной условно медиа

<бр> Объявления
благодарности
авторы хотели бы выразить свою искреннюю благодарность доктору Ян песни за его технической помощи. Это исследование было поддержано грантом от Национального фонда естественных наук Китая (NO. 81071956 и 81101884).
Авторов оригинальных представлены файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинала, представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для фигурного 1 12876_2011_768_MOESM2_ESM.jpeg Авторского 12876_2011_768_MOESM1_ESM.jpeg авторов исходного файла для фигурного 2' исходного файла для Рисунок 3 12876_2011_768_MOESM4_ESM.jpeg Авторского 12876_2011_768_MOESM3_ESM.bmp Авторского исходного файла для фигурного 4 исходного файла 12876_2011_768_MOESM5_ESM.bmp Авторского на рисунке 5 конкурирующие интересы
авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. вклады
Авторского
DN, Z-DL и F-NL, проведенные исследования по морфологии и биологической активности перитонеальных мезотелиальной клеток в пробирке <бр> и в естественных условиях
. ZS, Z-FM и FL участвовал в естественных условиях
исследований в области. YX и С-ГДж участвовали в исследованиях морфологии. DN и HX участвовал в разработке дизайна исследования и проводили статистический анализ. HX и Д. Н. задуманы исследования, а также участвовал в ее разработке и координации и помог подготовить рукопись. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Является ли сопутствующее спленэктомии полезно для долгосрочного выживания пациентов с раком желудка, перен…
• Экспрессия и клиническое значение длинных некодирующих РНК HNF1A-AS1 в желудка человека cancer