Gastric Kriibs Zell supernatant bewierkt apoptosis an fibrosis an der peritoneal Stoffer a Resultater an enger Ëmwelt gënschteg un peritoneal Investitiounen, kënschtlech an vivo

Gastric Kriibs Zell supernatant bewierkt apoptosis an fibrosis an der peritoneal Stoffer a Resultater an enger Ëmwelt gënschteg un peritoneal Investitiounen, an kënschtlech VerfÜgung an VIVO
méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung an dëser Etude, mir op Auswierkunge vun soluble Faktoren Verëffentlechung vun gastric Kriibs Zellen peritoneal mesothelial Zellen kënschtlech VerfÜgung an VIVO iwwerpréift
. VerfÜgung Method VerfÜgung HMrSV5, e Mënsch Linn peritoneal mesothelial Zell, mat supernatants aus gastric Kriibs Zellen incubated war. Morphological Ännerunge vun HMrSV5 Zellen sech observéiert. Apoptosis vun HMrSV5 Zellen war ënner enger Transmissioun Elektronen microscope observéiert a quantitativ vun MTT assay an Flux cytometry alles. Ausdrock vun apoptosis-Zesummenhang Proteinen (caspase-3, caspase-8, Bax, BCL-2) waren immunochemically bewäert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung opfällegen morphological Ännerungen besot apoptosis zu HMrSV5 Zellen observéiert goufen 24 h der Behandlung mat der supernatants vun gastric Kriibs Zellen. An VIVO VerfÜgung, behandelt peritoneal Stoffer mat supernatant gastric Kriibs Zell aktiv thickened waren an extensiv fibrosis Texter. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Dës Conclusiounen bewisen, datt supernatants vun gastric Kriibs Zellen apoptosis an fibrosis zu HMrSV5 Mënsch peritoneal mesothelial Zellen duerch induce kann supernatants am Ufank peritoneal Metastasen, zu enger Zäit-ofhängeg Manéier, a weisen, datt soluble Faktoren an der peritoneal Discours der Wirklechkeet an Funktioun vun mesothelial Zellen betreffen, sou dass déi doraus resultéierend Ëmwelt gënschteg un peritoneal Investitiounen ginn kann. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Peritoneal carcinomatosis Mo. neoplasms Mesothelial Zell Apoptosis Fibrosis Background VerfÜgung Peritoneal carcinomatosis Limite Foul d'Verbesserung vun gastric Kriibs Patienten prognoses der Chirurgie [1]. Peritoneal Metastasen Resultater an engem metastatic CASCADE, geschitt normalerweis um spéiden-Etapp entholl Entwécklung, déi gastric Kriibs-Zesummenhang dréit wiesentlech zu veruerteelt. D'Mechanisme vun peritoneal Metastasen vun diffusely carcinoma infiltrating sinn net kloer verstanen. VerfÜgung der peritoneal stroma Ëmwelt Prolifératioun vu entholl Zellen favoriséiert déi als räiche Quell vu Wuesstem Faktoren Déngscht an chemokines bekannt an entholl Metastasen Équipe ze ginn. Molekülle dëser CASCADE mediating hunn net extensiv propagéieren ginn [2]. Berichter, konnt mesothelial Zellen Kriibs Invasioun an Aus- morphological Ännerungen an Äntwert ze soluble Faktoren Verëffentlechung vun Kriibs Zellen [3] verhënneren. Déi spezifesch Molekülle an dësem Prozess bedeelegt sinn déi Ausriichtung Charakteristiken vun der metastatic entholl Zellen diktéiert. Entholl Zelle brauchen ferme op de submesothelial monolayer ze leeën an d'mesothelial monolayer fir Invasioun gelongen. Buck et al. VerfÜgung [4] lant d'Schutzpatrounin Effet vun der mesothelial futti, engem Grenzwäerter Modell mat an déi d'mesothelial Doropshin vun parietal peritoneum war an der experimentell deër, loosst d'basal Membran intakt ewechgeholl ugefaangen. Mir weisen virdrun, dass der Layer vu Spuenien wär, intakt mesothelial Zellen Kriibs Zell Invasioun vun der postwendend misse Discours behënneren. Mä, eng Kéier d'Integritéit vun dësem Barrière erofgaangen ass, kann Metastasen geschéien, well d'peritoneum engem ordentleche Ëmwelt fir gastric Kriibs Zellen gëtt zu wuessen [5-9]. Zousätzlech Studie berichten iwwer propedeutësch, virun der Unhang vun gastric Kriibs Zellen op peritoneum, mesothelial Zellen hemispherical Form Kaf a fänkt un, datts. Als Resultat, si plakeg Beräicher vun der submesothelial connective Otemschwieregkeeten zu der peritoneal Discours ausgesat [10-12]. Et ass wahrscheinlech, datt Pénétratioun vun der mesothelial monolayer vun entholl Zellen Initiaten mat entholl-entschlof mesothelial Zell apoptosis. An dëser Etude, iwwerpréift mir d'Effete vun soluble Faktoren vun gastric Kriibs Zellen op Wirklechkeet a biologescher Aktivitéit vun peritoneal mesothelial Zellen kënschtlech Hit an VIVO VerfÜgung. VerfÜgung Method VerfÜgung Reagents VerfÜgung 3- (4, 5-Dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazoliumbromide (MTT) war vun Fluka, USA kritt. Propidium Kaliumiodid (PI) war vun Biosharp, USA kritt. BCL-2, Bax, caspase-3, caspase-8 an actin Primärschoul antibodies, an de Secondaire antibody, Geess anti-Maus IgG sech vu Santa Cruz Déi Galaxy CA, USA kritt. Dulbecco d'geännert Eagle d'mëttel- (DMEM) an An et Kallef serum (FCS) sech aus GIBCO BRL (Grand Island, NY, USA) kritt. Aner Labo reagents sech aus Fläch, USA kritt. A Phas-Kontrast microscope (Japan Zur Nikon), Transmissioun Elektronen microscope (Hitachi H-6001, Japan) benotzt gouf. VerfÜgung Zell Linnen an Zell Kultur VerfÜgung De Mënsch peritoneal mesothelial Zell Linn HMrSV5 vun de Pompjeeën vun Zell Biologie kritt huet , China Medical University, China. HMrSV5 war ursprénglech aus Mënsch omentum isoléiert. Kuerz, omentum aus erwuesse Net-uremic Patienten gesammelt dee Regionalarchivar postwendend misse Agrëff waren amgaang, a gouf zu 0,05% (w /v) trypsin an 0,01% (w /v) héich fir 20 min bei 37 ° C incubated. D'recoltéiert mesothelial Zellen op 150 g fir 5 min centrifuged goufen an dann an 75 cm transferéiert 2 Otemschwieregkeeten Kultur Kréi an cultured zu engem humidified 5% CO 2 incubator, an DMEM mat 10% An et Kallef serum nà (FCS ), 100 U /mL penicillin, 100 μg /mL streptomycin, 2 mmol /L L-glutamine an 20 mmol /L hydroxyethyl piperazine ethanesulfonic Seier (HEPES, GIBCo BRL, USA). Mëttel- all 2-3 Deeg geännert huet. VerfÜgung Mënscherechter gastric carcinoma Zell Linnen, MKN-45, MKN-1, SGC-7901, BGC-823 an MGC-803, goufe vun de Pompjeeën vun Zell Biologie, China Medical Uni kritt , China. Dës Zellen sech cultured zu DMEM ergänzt mat 10% FCS, 100 U /ML penicillin, 100 μg /ML streptomycin, an 2 mmol /L L-glutamine zu engem humidified 5% CO 2 incubator bei 37 ° C.
Virbereedunge serum-gratis bedingt Medien VerfÜgung Serum-gratis bedingt Medien (SF-CM) war vun gastric Kriibs Zellen oder normal gastric epithelial Zellen virbereet wéi virdrun gemellt [1]. Kuerz, goufen 5.0 × 10 5 Zellen rakommen an 100-mm Otemschwieregkeeten Kultur Platen mat 10-ml DMEM, mat 10% FCS ergänzt a fir 3 Deeg bei 37 ° C incubated. Ze kréien SF-CM, goufen d'Zellen zweemol mat phosphate-gefiermt Léisung (PBS) gewäsch an duerno fir 2 Deeg mat 3 ml vun serum-gratis DMEM incubated. D'Cour-CM war bei 1000 g fir 5 min eluted an centrifuged, (pore Gréisst: 0,45 μm) duerch Filter- batter a gespäichert op -20 ° C gebraucht bis VerfÜgung Déieren VerfÜgung Männlech C57BL /6 Mais. (aacht Wochen al, Persoun vu 20 ± 2 g), sech aus China Medical University Déier Gebei kritt an z'iesse mat stilvoller Waasser an eng kommerziell Bourse Ernährung an eng Loft-bedingt Sall um 20-22 ° C.Animals an dëser Etude benotzt goufen haten am Aklang mat de Guide fir Care an Uwendung vun schafft Déieren vun der US National Instituter vun Gesondheet publizéiert (NIH Publikatioun Nr 85-23, iwwerschafft 1996) an de Politiken vun Déieren Care an Benotzt Comité vun China Medical University. VerfÜgung Morphological Evaluatioun ënner enger Phase-Kontrast Microscope VerfÜgung Mënscherechter peritoneal mesothelial Zellen (HPMCs) waren cultured zu engem 50-cm 2 Plat zu subconfluence mat DMEM 10% FCS mat. Mëttelfristeg huet dann geännert bis (1) serum-gratis DMEM oder (2) SF-CM aus gastric Kriibs Zell Linnen. D'HPMCs zu 24-gutt CHAMBERS sech fir 24 h ze Test Léisungen ausgesat, an weider mat PBS gewäsch. Si goufen dunn ënnert enger Phas-Kontrast microscope fir eng Gréisst, Form, an Integritéit vun der Zell Membran, Zytoplasma iwwerpréift, an ervirgaangen. VerfÜgung Transmissioun Elektronen microscopy VerfÜgung D'HPMCs cultured sech zu engem ze subconfluence 50-cm 2 Plat mat DMEM 10% FCS mat. Mëttelfristeg huet dann geännert bis (1) serum-gratis DMEM oder (2) SF-CM aus gastric Kriibs Zell Linnen. No incubation fir 24 h, goufen d'Zellen trypsinized an dann am Äis-kal 2,5% Elektronen microscopy Schouljoer glutaraldehyde vun PBS (pH 7.3) fest. D'uplanzen sech mat PBS rinsed, post-fix an 1% Osmium tetroxide mat 0,1% KaliumiodidPëlle Wëllen, léif duerch eng graded Ethanol Serie (30% -90%), an an Epon Ënnerbewosstsinn. Semi-dënn (300 nm) Rubriken huet probéiert e Reichart Ultracut (Reichart Ultracut (Leica, Däitschland) benotzt, Kierchefënster mat 0,5% toluidine blo, an ënner engem Liicht microscope iwwerpréift. Ultrathin Rubriken (65 nm) sech mat 2% uranyl acetate Kierchefënster a Féierung citrate d'Reynold, an um × 5000 op engem Transmissioun Elektronen microscope iwwerpréift oder × 8.000 Vergréisserung. VerfÜgung Chemeschen Determinatioun vun Zell Schued duerch MTT assay VerfÜgung d'MTT assay Leeschtung war Nuetsvolen vun der mënschlecher peritoneal mesothelial Zellen an der Behandlung ze bewäerten mat SF-CM aus gastric Kriibs Zell Linnen. BTS am 96-gutt zappen Kulturen, no aussetzt fir eng bestëmmten Zäit ze kontrolléieren oder Test Léisungen (um 12 h observéiert, 24 h an 48 h), waren mat 50 μg /mL incubated MTT op engem dilution vun 1:10, baséiert op de Volume vun der Kultur mëttelfristeg fir 3 h bei 37 ° C. um Enn vun der incubation Zäit, war d'MTT Léisung ofgegruewen an 150 μL DMSO war fir all gutt ugebaut, an géinteneen ze verbidden d'donkel-blo formazon Kristaller déi geformt haten. Den Undeel vun liewensfäeg Zellen gouf duerch Miessunge optesch Dicht vun all Prouf bei 480 nm mat engem spectrophotometer alles. Dräi Kulturen sech un all Léisung op all Zäit ausgesat. D'Méiglechkeete vun all Grupp vun de Kulturen sech Verglach. VerfÜgung cytometry Flow VerfÜgung am Test Léisunge fir 24 h No incubation, 48 h an 72 h, Zellen sech mat trypsinization recoltéiert. Zellen sech am PBS op eng Usammlung vun 1 × 10 6 /ML an fix an 2 ml methanol fir 30 min bei 4 ° C resuspended. No der CNE2 Zellen fix waren, war d'Mëschung vun 0,5 ml vun PI Léisung (0,05 mg /ML zu 3,8 mol /L Na citrate) an 0.5 ml vun RNAse A (0,5 mg /l) bei Raumtemperatur fir 30 min incubated. Endlech, goufen d'Zellen am 1 ml PBS resuspended an duerch onkontrolléiert cytometry analyséiert no der Taktik vum Produzent. Déi Zellen an der subdiploid Héichpunkt huet apoptotic considéréiert. VerfÜgung Histological Optrëtt vun peritoneum VerfÜgung Männlech C57BL /6 Mais (aacht Wochen al, Persoun vu 20 ± 2 g) sech am Moment Etude benotzt. D'Experimenter duerno d'Richtlinne fir d'Benotzung vun schafft Déieren a Fuerschung an geléiert. De Mais sech e Liewesniveau PELLET Labo Chow z'iesse a sech mat Waasser ad libitum VerfÜgung gëtt. Mais sech un ee vun dräi Gruppen zoufälleg uechtzéng (n = 5 oder 6 vun all Grupp). Mais an der DMEM Grupp sech mat DMEM (100 ml /kg) vun intraperitoneal injections op Deeg 1, 3, behandelt 5 an 7. Mais an der Cour-CM Grupp mat 100 ml behandelt goufen /kg SF-CM aus gastric Zell Kriibs Verse intraperitoneal injections op Deeg 1, 3, 5 an 7 Näischt war bis injections fir d'Kontroll Mais ugebaut. No 29 Deeg, Mais sech mat ethyl ETHER Nodeel a geaffert. Parietal peritoneums sech mat hematoxylin an eosin (H & E) Kierchefënster an Masson d'trichrome staining. Morphologic Ännerunge vun der parietal peritoneum sech duerch Liicht microscope observéiert. Deck vun der submesothelial extracellular Matrixentgasung sech no der Otemschwieregkeeten Rubriken huet H & E an Masson staining. Der Moyenne fir 10 onofhängeg Miessunge war fir all Rubrik berechent; Date goufen dann zesummegefaasst. VerfÜgung Western blotting VerfÜgung Mënscherechter peritoneal mesothelial Zellen cultured sech zu engem 50-cm 2 Plat zu subconfluence mat DMEM 10% FCS mat. D'Medien waren dann geännert bis (1) SF-CM aus gastric Kriibs Zell MKN-45, MKN-1, SGC-7901, BGC-823 an MGC-803; an (2) serum-gratis DMEM Déngscht als Kontroll. Protein war an e Liewesniveau lysis gefiermt mat proteinase inhibitors (Natrium orthovanadate, phenylmethylsulfonyl fluoride, leupeptin, an aprotinin kritt aus BioShop, haaptsächlech, ON, Kanada) ofgebaut. Aliquots vun 20 μg vun FAQ lysate war mat engem 12% SDS-PAGE gelies, iwwerginn zu engem Nylon Membran, an separat Komedie mat antibodies fir BCL-2, Bax, caspase-3 an caspase-8 electrophoresed. No incubation mat der Première antibody, goufen blots mat engem ECL Western Blot Realitéiten Kit (Abcam, USA) entwéckelt. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung All Donnéeën ausgedréckt sinn als x VerfÜgung ± Fils VerfÜgung. Vergläicher vun Drogenofhängeger Effekter benotzt Student d't VerfÜgung Azeton huet. A P VerfÜgung Wäert &Si besteet; 0,05 war als bedeitendst gin. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Morphological Evaluatioun ënner enger Phas-Kontrast microscope VerfÜgung Iwwerdeems HPMCs nëmmen zu serum-gratis DMEM behandelt eng typesch polygonal an cobblestone Muster zougedréckt (Dorënner 1A.), Behandelt Zellen mat SF-CM aus gastric Kriibs Zell MKN45 fir 24 h ugefaang morphological Ännerungen ze hunn, déi net ze iwwersinn, vun deenen waren-mamm genannt an d'Opkommen vun plakeg Beräicher (Dorënner 1B). Figur 1 Morphological Ännerunge vum Mënsch peritoneal mesothelial Zellen ënner Phas-Kontrast microscope. VerfÜgung (A) Monolayer vun polygonal an cobblestone-wëll HPMCs cultured zu serum-gratis DMEM. (B-D) Exfoliated Optrëtt vun plakeg Beräicher an der Behandlung mat SF-CM aus gastric Kriibs Zell Linnen MKN45, SGC7901, an BGC823. (Vergréisserung: × 40). VerfÜgung Transmissioun Elektronen microscopy VerfÜgung No 24 h vu SF-CM aus gastric Kriibs Zell Behandlung, apoptotic Funktiounen (wéi Kondensatioun vun der Nuklearenergie chromatin, wrinkling vun nuklearem Schläimhait, dilation vun endoplasmic reticulum, a relativ normal Struktur vun der Mitochondrie) goufen ënner Transmissioun Elektronen microscope (Tem observéiert; Rockhal 2A, B). Ënner Tem, war d'nuklear Membran ginn intakt gesinn, déi chromatin an Radius ënnersichen, an op der Grenz vun der Membran oder administrativ héich (Dorënner 2C). D'budding an d'Équipe vun der apoptosis Kierper sech och observéiert (Dorënner 2C). Figur 2 Mënscherechter peritoneal mesothelial Zellen (HPMC) 24 h der incubation mat an ouni SF-CM aus gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung (A) Control Zellen Ecran normal Kären an endoplasmic reticula. (B) BTS mat SF-CM aus MKN1 gastric Kriibs Zellen behandelt weisen chromatin an Radius ënnersichen, an op der Grenz vun der Membran oder héich grënnen. Budding an der Opstellung vun der apoptosis Kierper goufen observéiert (Feiler an B). (C) .Cells mat SF-CM aus MKN45 gastric Kriibs Zellen Kondensatioun vun nuklearem chromatin (Feiler an C) show behandelt. (D) BTS mat gastric Kriibs Zell Linn MGC-803 behandelt goufen gläicht B. Budding an der Opstellung vun der apoptosis Kierper sech och observéiert. VerfÜgung MTT assay VerfÜgung Fir Potential suppressive Auswierkunge vun gastric Kriibs Zell SF-CM diskutéieren op HPMCs, mir seng Wuesstem rop op de HPMC Linn HMrSV5 iwwerpréift. Gastric Kriibs Zell SF-CM Wuesstem Ennerdréckung vun HPMC Zellen entschlof, an huet dofir op enger Zäit-ofhängeg Manéier (Dorënner 3A). Dësen Effekt gouf op 0 h, 12 h observéiert, 24 h an 48 h. Dës Resultater weisen, datt entholl supernatant mesothelial Zell Schued oder apoptosis induces. Figur 3 Apoptosis war vun zwou Methoden laachen: MTT an cytometry stréimen. VerfÜgung (A) Nuetsvolen vun mesothelial Zell HMrSV5 der Behandlung mat SF-CM aus gastric Kriibs Zellen. (B) Apoptosis duerch onkontrolléiert laachen war cytometry der Behandlung mat SF-CM aus gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung cytometry Flow VerfÜgung Fir de Prozentsaz vun apoptotic Zellen der Behandlung bei verschiddenen Zäit Perioden, mesothelial Zellen ofgedonkelt sech mat PI Kierchefënster. Gastric Kriibs Zell SF-CM apoptosis zu mesothelial Zellen effektiv entschlof an huet esou zu enger Portioun-ofhängeg Manéier no 48 h (Dorënner 3.B). Dës Resultater goufen d'selwecht wéi déi, déi fir de MTT assay VerfÜgung Histologie an morphometric Analyse VerfÜgung Morphologic Ännerunge vun der parietal peritoneum analyséiert goufen mat H &. E an Masson d'trichrome staining. Dorënner normal Mais, iwwerdeckter engem mesothelial Zell monolayer der peritoneal Uewerfläch ouni thickening (Dorënner 4 engem, d). Wéinst visuell incompatibility, Mais Erhalen intraperitoneal injections vun DMEM haten schmäerzhafte thickening an der peritoneal submesothelial collagenous Zone (Dorënner 4 b, e); déi intraperitoneally mat gastric Kriibs Zell SF-CM heijen haten thickening vun der submesothelial kompakt Zone markéiert a fräi cellularity (Dorënner 4 c, f). Figur 4 Hematoxylin /eosin (H & E) an Masson staining vun peritoneum Stoffer. VerfÜgung Peritoneum Stoffer aus verschiddene Gruppe waren surgically kritt an deen an den H & E an Masson staining. (A) All Fotoen waren um 40 × Vergréisserung kritt. Normal peritoneum besteet aus nëmmen enger monolayer vun mesothelium mat klenge fibrosis (en, d). Peritoneum behandelt mat DMEM zougedréckt och kleng Quantitéiten vun connective Otemschwieregkeeten ënnert der mesothelial Zellen (Feiler an b, E). Am Géigesaz, peritoneum vun SF-CM aus gastric Kriibs Zellen behandelt gouf méi thickened an enthale extensiv fibrosis (Feiler an c, f). (B) Morphometric Parameter vun peritoneal Stoffer. Date sinn wéi déi heeschen ± normale Feeler vun der mëttlerer vun op d'mannst 3 separat Experimenter ausgedréckt. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05. VerfÜgung Western blotting VerfÜgung Mir machen dann fir weider de Mechanismen delineate déi den Auswierkunge vun gastric Kriibs Zell SF-CM op apoptosis-Zesummenhang Proteinen (caspase-3, caspase-8, Bax, BCL-2) underlie . Niveau vun deene Proteinen sech mat westlecher blot Analyse bewäert. Caspase-3, caspase-8, an Bax FAQ Niveauen fräi no 48 h vu Behandlung mat SF-CM aus stäerkste gastric Kriibs Zellen, iwwerdeems BCL-2 FAQ Niveau ofgeholl (Dorënner 5). Beta-actin war wéi d'Luede Kontroll benotzt. Figur 5 Western blot Analyse vun apoptosis-Zesummenhang FAQ Niveauen (caspase-3, caspase-8, Bax, an BCL-2) an HPMCs mat SF-CM aus verschiddene gastric Kriibs Zell Linnen Behandlung. VerfÜgung Serum-gehongert HPMCs sech aus verschiddene gastric Kriibs Zell Linnen mat SF-CM incubated fir bis 48 h; total bewosst FAQ war bis westlech blot Analyse ofgebaut an ënnerworf. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung meescht Studie vun der Post-grënnen entholl Terrain weisen, datt mesothelial Fläch traumatized Siten fir entholl Zell Haftung gi bevirdeelegt. Kuerzem, disassociated Kriibs Zellen bannen peritoneal Huelraim, a Proteinen speziell zu peritoneal Metastasen vun gastric carcinoma ausgedréckt sech fonnt ze Kriibs prognoses verbonne ginn. Iwwerdeems immunogenetic Approche grouss Versprieche vun der Behandlung vun peritoneal Metastasen vun gastric carcinoma weisen [13-15], sinn d'Auswierkunge vun gastric Kriibs Zellen op mesothelial Zellen ganz wéineg verstan. VerfÜgung Etude gewisen, datt mesothelial Zellen Schutz géint peritoneal Metastasen vun entholl gëtt an intakt mesothelia [9, 16, 17]. Paget et al VerfÜgung proposéiert eng "Som a Buedem" Theorie: Metastasen nëmme geschitt, wann entholl Zellen zu engem ordentleche Ëmwelt liewen a wuessen [18]. D'peritoneum kéint esou engem ordentleche Ëmwelt fir scirrhous gastric Kriibs Zellen ginn; méiglecherweis mesothelial Zellen verhënneren vu Kriibs Zellen an submesothelial connective Otemschwieregkeeten infiltrating. Masakazu et al. VerfÜgung [1] gewisen, datt nieft Spuenien wär mesothelial Zellen Invasioun duerch Kriibs Zellen Inspektiounen. Zousätzlech, Kiyasu et al. VerfÜgung [3] confirméiert, datt, virun peritoneal ofgestouss vun Kriibs Zellen, ginn mesothelial Zellen hemispherical an aus der peritoneum exfoliate. Eis Hypothes ass, datt no serosa ausgesat sinn, datts gratis Kriibs Zellen aus der Primärschoul gastric Kriibs Siten an der postwendend misse Discours apoptosis zu peritoneal mesothelial Zellen induce [19-21]. Als Resultat, ginn mesothelial Zellen hemispherical a-mamm genannt stattfennt. Plakeg Beräicher vun submesothelial connective Otemschwieregkeeten sinn also fir d'peritoneal Discours ausgesat; dëser haarder peritoneal Site gëtt engem ordentleche Ëmwelt fir peritoneal Metastasen [22-24]. VerfÜgung Mir virdrun gastric Kriibs Zell supernatant dës missen vill d'Nuetsvolen vun mesothelial Zellen reduzéieren, mä normal gastric epithelial Zell Linn GES-1 enormen keen Effet op mesothelial Zellen [5]. Eis presentéieren Etude weist och, dass cultured mesothelial Zellen ginn hemispherical, a-mamm genannt geschéie wann serum-gratis mëttel- vun gastric Kriibs Zellen bedingt dobäi war, wéi par contre Phase microscopy gewisen. Ausserdeem, cytoplasmic Reduktioun, nuklear Kondensatioun, an Opstellung vun extracellular an /oder intracellular apoptotic Kierper goufen ënner Transmissioun Elektronen microscope observéiert. Apoptosis war vun zwou Methoden laachen: MTT an Flux cytometry. Mir spekuléieren, datt gratis gastric Kriibs Zellen am postwendend misse Discours apoptosis vun mesothelial Zellen a verursaache-mamm genannt induce, schliisslech zu Metastasen Haaptfiguren. Dëst kann de Mechanismus ginn duerch déi Kriibs Zellen unhänken connective Otemschwieregkeeten zu submesothelial, obwuel d'mesothelial Zellen nach gutt organiséiert a Spuenien wär ginn. Weider Studien sinn waren SF-CM aus gastric Kriibs Zellen Verëffentlechung ze Markenzeeche. Gastric Kriibs Zellen VerfÜgung kann apoptosis duerch mitochondria- an Doud receptor-ofhängeg apoptotic Weeër induce. Gastric Kriibs Zellen oofgesinn mesothelial Zell Wuesstem vun Verbreedung duerch d'Promotioun vun caspase-ofhängeg apoptosis inhibiting. Caspases sinn cytoplasmic aspartate-spezifesch cysteine ​​proteases, a wichteg Roll an apoptosis Leeschtung [25]. Den Doud receptor-ofhängeg apoptotic Passerelle ass bei der Zell Uewerfläch ausgeléist a verlaangt Aktivatioun vun caspase-8 hierkommen, déi mitochondrion-ofhängeg Passerelle vun der Verëffentlechung vu Kënschtlech cytochrome c an der Zytoplasma Ausgangspunkt ass a verlaangt Aktivatioun vun caspase-9. Duerno, caspase-8 oder -9 kann caspase-3, wat dann Zilsetzungen an degrades spezifesch an kruzial bewosst Proteinen aktivéieren, schlussendlech an nuklear DNA ofgeschnidden an apoptotic Zell Doud doraus [26]. BCL-2, eng inhibitor vun der Kënschtlech apoptosis Passerelle, enormen hir Aktioun vun proapoptotic garantéieren erauszesichen, wat dann d'Verëffentlechung vun cytochrome c an der Aktivatioun vun caspases [27] hält. Bax ass e Doud Promoteur, déi vun heterodimerization mat BCL-2 neutraliséiert gëtt. Bax translocates an de baussenzege Kënschtlech Membran vun Auslafe vum cytochrome c aus der Mitochondrie an der Zytosol duerno [28]. Caspase-9 an caspase-3 sinn ageschalt Rei, an dësen Evenementer huet d'Ënnerdeelunge vun chromosomal DNA. Well et e wesentlechen Méiglechkeet ass, datt gastric Kriibs Zell-mediated apoptosis vun mesothelial Zellen ass d'Resultat vu Regulatioun vun BCL-2 an Bax, Identifikatioun vun hirem Ziel awer ass néideg. VerfÜgung An dëser Etude, et geheescht mir eng Maus experimentell Modell vun peritoneal ënnergaangen vun widderholl injections vun gastric Kriibs Zell SF-CM entschlof. Experimentell vun widderholl intraperitoneal injections vun CM SF-entschlof peritoneal fibrosis gastric Kriibs Zell kéint net komplett rescht peritoneal ënnergaangen an Patienten observéiert (diffusely carcinoma oder Bormann d'Type VI carcinoma infiltrating). An Tatsaach, sinn pathologic Conclusiounen vun peritoneal carcinomatosis an peritoneal ënnergaangen net eenheetlech a verschiddene Facteuren implizéiert. Zousätzlech, si bestëmmte gemeinsam Funktiounen während der Entwécklung vun peritoneal ënnergaangen tëscht gastric Kriibs Zell SF-CM-entschlof experimentell Déier Modeller a mënschlech Patienten amgaang peritoneal carcinomatosis observéiert. Dës gemeinsam histological Conclusiounen och fräi Heefung vun interstitial collagens wéi Typ ech an III collagen, einfach vun monocytes /macrophages, Erhéijung vun engem-SMA + myofibroblasts, a wiere Dicht vun der peritoneum [7, 8]. Dës souvill hire Restaurant vun der peritoneal Schläimhait tëscht experimentell Modeller a mënschlech peritoneal carcinomatosis Patienten hindeit, datt dëst eng adäquat Modell fir d'Efficacitéit vun verschiddenen Potential therapeutesch reagents waat fir peritoneal carcinomatosis Regulatioun. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung dëse Conclusiounen bewisen, datt gastric Kriibs Zellen kann also d'Wirklechkeet an Funktioun vun mesothelial Zellen apoptosis an fibrosis vum Mënsch peritoneal mesothelial Zellen duerch supernatants am Ufank peritoneal Metastasen, a weisen, datt soluble Faktoren an der peritoneal Discours induce Afloss kann dass déi doraus resultéierend Ëmwelt ze peritoneal Investitiounen ordentleche gëtt.
Croix VerfÜgung HPMCs: VerfÜgung Mënscherechter peritoneal mesothelial Zellen
SF-CM:. VerfÜgung Serum-gratis geplangten Medien

Deklaratioune VerfÜgung Merci D'Auteuren VerfÜgung wënschen hir oprichtege Merci un Dr. Yan Song fir seng technesch Assistenz fir auszedrécken. Dës Etude gouf vun engem Zouschoss aus der National Natural Sciences Foundation vu China ënnerstëtzt (nee. 81071956 oder 81101884). VerfÜgung Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller. 12876_2011_768_MOESM1_ESM.jpeg Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12876_2011_768_MOESM2_ESM.jpeg Auteuren' original Datei fir Figur 2 12876_2011_768_MOESM3_ESM.bmp 'original Datei fir Figur 3 12876_2011_768_MOESM4_ESM.jpeg Auteuren' Auteuren original Datei fir Figur 4 12876_2011_768_MOESM5_ESM.bmp original Datei 'Auteuren fir Figur 5 konkurréiert Interessen VerfÜgung d'Auteuren erklären, datt se keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung Auteuren 'Contributiounen VerfÜgung DN, Z-DL an F-NL d'Studien op Wirklechkeet a biologescher Aktivitéit vun peritoneal mesothelial Zellen kënschtlech duerchgefouert
an zu VIVO VerfÜgung. ZS, Z-FM an FL un d'zu VIVO VerfÜgung Studien. YX an C-GJ deelgeholl an der Wirklechkeet Studien. DN an HX deelgeholl an den Design vun der Etude an standing statistesch Analyse. HX an DN vun der Etude komm, an un hiren Design an Koordinatioun an gehollef d'mëttelalterlech Handschrëft zu Projet. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Ass concomitant splenectomy virdeelhaft fir de langfristeg Iwwerliewe vu Patienten mat gastric Kriibs amgaang curative gastrectomy? A Single-Institutioun Etude
• Ausdrock a Krankheete Bedeitung vun laang Net-coding RNS HNF1A-AS1 zu Mënsch gastric cancer