Magekreft cellesupernatanten fører til apoptose og fibrose i de peritoneale vev og resulterer i et miljø som er gunstig for peritoneal-metastaser, in vitro og in vivo

magekreft cellesupernatanten fører til apoptose og fibrose i de peritoneale vev og resulterer i et miljø som er gunstig for peritoneal-metastaser, i vitro Hotell og in vivo
Abstract
Bakgrunn
i denne studien undersøkte vi effekten av løselige faktorer utgitt av magekreftceller på peritoneal mesothelial celler in vitro Hotell og in vivo
.
Metoder
HMrSV5, et menneske peritoneal mesothelial cellelinje, ble inkubert med supernatanter fra mage kreftceller. ble observert morfologiske endringer av HMrSV5 celler. Apoptose av HMrSV5 celler ble observert under et transmisjonselektronmikroskop og kvantitativt bestemt ved MTT-analyse og flowcytometri. Uttrykk for apoptose relaterte proteiner (caspase-3, caspase-8, Bax, BCL-2) ble immunokjemisk evaluert.
Resultater
ble observert iøynefallende morfologiske endringer indikerer apoptose i HMrSV5 celler 24 timer etter behandling med supernatantene av mage kreftceller. In vivo
, peritoneal vev behandles med magekreft celle supernatant ble betydelig tykkere og inneholdt omfattende fibrose.
Konklusjoner
Disse funnene viser at supernatanter av mage kreftceller kan indusere apoptose og fibrose i HMrSV5 menneskelige peritoneal mesothelial cellene gjennom supernatantene i tidlig peritoneal metastasering, på en tidsavhengig måte, og tyder på at løselige faktorer i det peritoneale hulrom påvirke morfologien og funksjonen av mesothelial celler, slik at det resulterende miljø kan være gunstig for å peritoneale metastaser.
nøkkelord
peritoneal karsinomatose mage~~POS=TRUNC svulster mesothelial celle apoptose fibrose Bakgrunn
peritoneal karsinomatose begrenser sterkt forbedring av magekreft pasientenes prognose etter operasjonen [1]. Peritoneal metastase resulterer i en metastatisk kaskade, som vanligvis oppstår på sent stadium svulst utvikling, som i betydelig grad bidrar til magekreft relatert dødelighet. Mekanismene for peritoneal metastasering av diffust infiltrerende kreft, er ikke klart forstått.
Peritoneal stroma miljø fremmer proliferasjon av tumorceller ved å fungere som en rik kilde for vekstfaktorer og kjemokiner som er kjent for å være involvert i tumormetastase. Molekyler som medierer denne kaskade har ikke blitt grundig undersøkt [2]. Angivelig, kan mesothelial celler forebygge kreft invasjon og gjennomgå morfologiske endringer i respons til løselige faktorer utgitt av kreftceller [3]. De spesifikke molekyler som er involvert i denne prosessen er diktert av iboende egenskapene til de metastatiske tumorceller. Tumorceller trenger å feste fast på submesothelial mono og trenge mesothelial monolag for invasjon. Buck et al.
[4] utforsket den beskyttende effekten av mesothelial sjikt, ved hjelp av en rottemodell hvori mesothelial foring av parietal peritoneum ble avdrevet i de eksperimentelle rotter, forlater basalmembranen intakt. Vi viste tidligere at laget av sammenflytende, intakte mesothelial celler hindrer kreftcelle invasjon av bukhulen. Men når integriteten av denne barrieren er brutt, kan metastase forekomme, fordi peritoneum gir et gunstig miljø for magekreftceller til å vokse [5-9]. Andre studier har vist at før festingen av magekreftceller på bukhinnen, mesothelial celler erverve halvkuleform og begynner å kaste. Som et resultat, er nakne områder av submesothelial bindevev utsettes for bukhulen [10-12]. Det er sannsynlig at gjennomtrengning av mesothelial monolaget av tumorceller starter med tumorindusert mesothelial celle apoptose. I denne studien undersøkte vi effekten av løselige faktorer utgitt av magekreftceller på morfologi og biologisk aktivitet av peritoneale mesothelial celler in vitro og in vivo
.
Metoder
Reagenser
3- (4, 5-dimetyltiazol-2-yl) -2,5-difenyl tetrazoliumbromide (MTT) ble oppnådd fra Fluka, USA. Propidiumjodid (PI) ble oppnådd fra Biosharp, USA. Bcl-2, Bax, caspase-3, caspase-8 og actin primære antistoffer, og det sekundære antistoff, geit-anti-mus IgG ble oppnådd fra Santa Cruz Biotechnology Inc., CA, USA. Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) og føtalt kalveserum (FCS) ble oppnådd fra GIBCO BRL (Grand Island, NY, USA). Andre laboratorie reagenser ble oppnådd fra Sigma, USA. En fasekontrastmikroskop (Japan Nikon), transmisjonselektronmikroskop (Hitachi H-6001, Japan) ble brukt.
Cellelinjer og cellekultur
menneskelige peritoneal mesothelial cellelinje HMrSV5 ble innhentet fra Institutt for cellebiologi Kina Medical University, Kina. HMrSV5 ble opprinnelig isolert fra human omentum. I korthet, omentum oppsamlet fra samtykkende ikke-uremisk pasienter som gjennomgår elektiv abdominal kirurgi, og ble inkubert i 0,05% (vekt /volum) trypsin og 0,01% (w /v) EDTA i 20 minutter ved 37 ° C. De høstede mesothelial Cellene ble sentrifugert ved 150 g i 5 minutter og deretter overført til 75 cm 2 vevskulturflasker og dyrket i en fuktet 5% CO 2 inkubator, i DMEM supplert med 10% føtalt kalveserum (FCS ), 100 U /ml penicillin, 100 ug /ml streptomycin, 2 mmol /l L-glutamin og 20 mmol /l hydroksyetylpiperazin etansulfonsyre (HEPES, Gibco BRL, USA). Medium ble endret etter 2-3 dager.
Menneskemagekreft cellelinjer, MKN-45, MKN-en, SGC-7901, BGC-823 og MGC-803, ble oppnådd fra Institutt for cellebiologi, Kina Medical University , Kina. Disse cellene ble dyrket i DMEM supplementert med 10% FCS, 100 U /ml penicillin, 100 ug /ml streptomycin, og 2 mmol /L L-glutamin i en fuktet 5% CO 2 inkubator ved 37 ° C.
Fremstilling av serumfritt kondisjonert medium
serum-fritt kondisjonert medium (SF-CM) ble fremstilt fra mage kreftceller eller normale gastriske epitel-celler som tidligere rapportert [1]. I korthet, 5,0 x 10 5-celler ble sådd ut på 100 mm vevskulturskåler med 10 ml DMEM, supplert med 10% FCS og inkubert ved 37 ° C i 3 dager. For å oppnå SF-CM ble cellene vasket to ganger med fosfat-bufret oppløsning (PBS) og deretter inkubert i 2 dager med 3 ml serumfritt DMEM. SF-CM ble eluert og sentrifugert ved 1000 g i 5 minutter, passerte gjennom filtre (porestørrelse 0,45 um) og lagret ved -20 Dyr
Mann C57BL ° C inntil anvendelse
/6 mus. (åtte uker gammel, veide 20 ± 2 g), ble hentet fra Kina Medical University dyre~~POS=TRUNC og matet med renset vann og en kommersiell lager diett i en luftkondisjonerte rom på 20-22 ° C.Animals brukt i denne studien ble opprettholdt i samsvar med guide for omsorg og bruk av forsøksdyr utgitt av det amerikanske National Institutes of Health (NIH publikasjon nr 85-23, revidert 1996) og politikk av Animal Care og bruk komité Kina Medical University.
morfologiske evaluering under en fase-kontrast mikroskop
menneske peritoneal mesothelial celler (HPMCs) ble dyrket til subconfluence i en 50-cm 2 tallerken med DMEM inneholder 10% FCS. Mediet ble så endret til (1) serumfritt DMEM, eller (2) SF-CM fra mage cancer-cellelinjer. De HPMCs i 24-brønners kamre ble eksponert for testløsninger i 24 timer, og vasket forsiktig med PBS. De ble deretter undersøkt under et fasekontrastmikroskop for størrelse, form og integritet av cellemembranen, cytoplasma og cellekjernen.
Transmisjonselektronmikros Bedrifter Den HPMCs ble dyrket til subconfluence i en 50-cm 2 tallerken med DMEM inneholder 10% FCS. Mediet ble så endret til (1) serumfritt DMEM, eller (2) SF-CM fra mage cancer-cellelinjer. Etter inkubering i 24 timer ble cellene trypsinert og deretter fiksert i iskald 2,5% elektronmikroskopi karakter glutaraldehyd i PBS (pH 7,3). Prøvene ble skyllet med PBS, post-fiksert i 1% osmiumtetroksyd med 0,1% kalium-ferricyanid, dehydratisert gjennom en gradert etanolserie (30% -90%), og innleiret i Epon. Semi-tynn (300 nm) seksjoner ble kuttet ved hjelp av en Reichart ULTRACUT (Reichart ULTRACUT (Leica, Tyskland), farget med 0,5% toluidinblått, og undersøkt under et lysmikroskop. Ultratynne seksjoner (65 nm) ble farget med 2% uranylacetat og Reynolds 'bly-citrat og undersøkt i et transmisjonselektronmikroskop ved x 5000 eller 8000 x forstørrelse.
Kvantitativ bestemmelse av celleskade ved MTT-assay
MTT-analysen ble utført for å vurdere levedyktigheten til de humane peritoneale mesothelial celler etter behandling med SF-CM fra mage cancer cellelinjer. Celler i 96-brønners platekulturer, etter eksponering for å kontrollere eller testløsninger for en bestemt tidsperiode (observert 12 h, 24 h og 48 h), ble inkubert med 50 ug /mL MTT ved en fortynning på 1:10, basert på volumet av kulturmediet i 3 timer ved 37 ° C. ved slutten av inkubasjonstiden ble MTT oppløsningen fjernet og 150 ul DMSO ble tilsatt til hver brønn, og omrørt til oppløse mørkeblå formazon krystaller som hadde dannet. Andelen av levedyktige celler ble bestemt ved å måle den optiske tettheten til hver prøve ved 480 nm med et spektrofotometer. Tre kulturene ble eksponert for hver løsning ved hver tidsperiode. Midlene for hver gruppe av kulturer ble sammenlignet.
Strømningscytometri
Etter inkubering i forsøksløsningene i 24 timer, 48 timer og 72 timer, ble cellene høstet ved hjelp av trypsinering. Celler ble resuspendert i PBS ved en konsentrasjon på 1 x 10 6 /ml og løst i 2 ml metanol i 30 minutter ved 4 ° C. Etter at CNE2 cellene ble fiksert, blandingen ble inkubert i 0,5 ml PI-oppløsning (0,05 mg /ml i 3,8 mol /l Na-citrat) og 0,5 ml RNase A (0,5 mg /ml) ved romtemperatur i 30 min. Til slutt, ble cellene resuspendert i 1 ml PBS og analysert ved flow-cytometri ifølge produsentens instruksjoner. Cellene i den subdiploid toppen ble ansett apoptotisk.
Histologisk utseende av peritoneum
Male C57BL /6 mus (åtte uker gamle, som veide 20 ± 2 g) ble anvendt i denne studien. Forsøket fulgt retningslinjene for bruk av forsøksdyr i forskning og undervisning. Musene ble matet en standard pellet laboratorium chow og var utstyrt med vann ad libitum
. Mus ble tilfeldig plassert i en av tre grupper (n = 5 eller 6 i hver gruppe). Mus i DMEM gruppe ble behandlet med DMEM (100 ml /kg) ved intraperitoneal injeksjon på dag 1, 3, 5 og 7. mus i SF-CM gruppe ble behandlet med 100 ml /kg av SF-CM fra magekreftcelle linjer ved intraperitoneale injeksjoner på dagene 1, 3, 5 og 7. det ble ikke tilsatt til injeksjoner for kontrollmusene. Etter 29 dager ble musene bedøvet med etyleter og ofret. Parietal peritoneums ble farget med hematoxylin og eosin (H & E) og Masson er Trichrome farging. Morfologiske endringer av parietal peritoneum ble observert med lysmikroskop. Tykkelse på submesothelial ekstracellulære matrise ble bestemt etter at vevsdelene hadde H & E og Masson farging. Gjennomsnittet for 10 uavhengige målinger ble beregnet for hver del; Dataene ble deretter oppsummert.
Western blotting
menneske peritoneal mesothelial celler ble dyrket til subconfluence i en 50-cm 2 tallerken med DMEM inneholder 10% FCS. Mediene ble deretter endret til (1) SF-CM fra magekreft celle MKN-45, MKN-en, SGC-7901, BGC-823 og MGC-803; og (2) serumfritt DMEM som tjener som kontroll. Protein ble hentet i en standard lysis buffer med proteinaseinhibitorer (natriumortovanadat, fenylmetylsulfonylfluorid, leupeptin og aprotinin hentet fra BioShop, Burlington, ON, Canada). Aliquoter av 20 ug av protein lysatet ble elektroforert med en 12% SDS-PAGE-gel, overført til en nylonmembran og probet separat med antistoffer for Bcl-2, Bax, caspase-3 og kaspase-8. Etter inkubasjon med det sekundære antistoff, ble blottene utviklet ved hjelp av en ECL Western Blot Substrate Kit (Abcam, USA).
Statistisk analyse
Alle data er uttrykt som x
± sd
. Sammenligninger av narkotika effekter ble gjort ved hjelp av Student t
-test. En P
verdi < 0,05 ble ansett å være betydelig.
Resultater
Morfologisk evaluering under et fasekontrastmikroskop
Mens HPMCs bare behandles i serumfritt DMEM viste en typisk kantet og brostein mønster (figur 1A.), Celler behandlet med SF-CM fra magekreftcelle MKN45 for 24 timer begynte å ha morfologiske endringer, den mest åpenbare som var peeling og utseendet på nakne områder (Figur 1b). Figur 1 Morfologiske endringer på menneske peritoneal mesothelial cellene under fasekontrastmikroskop. product: (A) med ett lag av polygonale og brosteinslignende HPMCs dyrket i serumfritt DMEM. (B-D) ekspandert utseendet på nakne områder etter behandling med SF-CM fra mage kreft cellelinjer MKN45, SGC7901, og BGC823. (Forstørrelse: × 40).
Transmisjonselektronmikros
Etter 24 timer av SF-CM fra magekreft cellen behandling, apoptotiske funksjoner (for eksempel kondensering av kjernefysisk kromatin, rynker av kjernefysiske membraner, utvidelse av endoplasmatisk retikulum, og forholdsvis normal struktur av mitokondriene) ble observert i henhold til transmisjonselektronmikroskop (TEM, figurene 2A, B). Under TEM, ble kjernemembranen sees å være intakt, kromatin kondensert i massene, og på grensen av membranen eller danner bue (figur 2C). Den spirende og dannelsen av apoptose likene ble også observert (figur 2C). Figur 2 Menneske peritoneal mesothelial celler (HPMC) 24 timer etter inkubasjon med og uten SF-CM fra mage kreftceller. product: (A) Kontrollceller vise normale kjerner og endoplasmatiske reticula. (B) celler behandlet med SF-CM fra MKN1 magecancerceller vises kromatin kondenseres til massene, og på grensen av membranen eller danner bue. Spirende og dannelsen av apoptose-legemene ble observert (pilene i B). (C) .Cells behandlet med SF-CM fra MKN45 mage kreftceller viser kondensasjon av kjernefysisk kromatin (piler i C). (D) Celler behandlet med magekreft cellelinje MGC-803 var lik B. Budding og dannelsen av apoptose likene ble også observert.
MTT analyse
å evaluere mulige undertrykkende effekter av magekreft celle SF-CM på HPMCs undersøkte vi sin vekstkurve på HPMC linjen HMrSV5. Gastric kreftcelle SF-CM indusert veksthemming i HPMC celler, og gjorde det på en tidsavhengig måte (figur 3A). Denne effekten ble observert ved 0 timer, 12 timer, 24 timer og 48 timer. Disse resultatene indikerer at tumoren supernatanten induserer mesothelial celleskade eller apoptose. Figur 3 Apoptose ble kvantifisert ved to metoder: MTT og flowcytometri. product: (A) Livskraftig av mesothelial celle HMrSV5 etter behandling med SF-CM fra mage kreftceller. (B) Apoptose ble kvantifisert ved flow-cytometri etter behandling med SF-CM fra mage kreftceller.
Strømningscytometri
For å kvantifisere prosentandel av apoptotiske celler etter behandling ved forskjellige tidsperioder, ble mesothelial celler farget med PI. Gastric kreftcelle SF-CM effektivt indusert apoptose i mesothelial celler, og gjorde det på en doseavhengig måte etter 48 timer (Figur 3.B). Disse resultatene var de samme som for den MTT målings
Histologi og morfometrisk analyse
morfologiske forandringer av parietal peritoneum ble analysert ved hjelp av H &. E og Masson s Trichrome farging. Blant normale mus, en mesothelial celle monolag dekket peritoneale overflaten uten noen fortykning (figur 4 a, d). På grunn av åpen inkompatibilitet, mus som fikk intraperitoneale injeksjoner av DMEM hadde liten fortykkelse i peritoneal submesothelial collagenous sone (figur 4 b, e); de som er injisert intraperitonealt med magekreft celle SF-CM hadde markert fortykkelse av submesothelial kompakte sonen og øket celledannelse (Figur 4 c, f). Figur 4 Hematoxylin /eosin (H & E) og Masson farging av peritoneum vev.
peritoneum vev fra forskjellige grupper ble erholdt kirurgisk og underkastet H & E og Masson farging. (A) Alle bildene ble oppnådd ved 40 × forstørrelse. Normal peritoneum består av bare et monolag av mesothelium med lite fibrose (a, d). Peritoneum behandlet med DMEM viste også små mengder av bindevev under mesothelial celler (piler i b, e). I motsetning til dette, peritoneum behandlet ved SF-CM fra magekreftceller ble vesentlig fortykket og inneholdt omfattende fibrose (pilene c, f). (B) Morfometriske parametere av peritoneale vev. Data er uttrykt som gjennomsnitt ± standard feil av gjennomsnittet av minst 3 separate eksperimenter. * P
< 0,05.
Western blotting
Vi søkte å ytterligere avgrense hvilke mekanismer som ligger til grunn den kombinerte effekten av magekreft celle SF-CM på apoptose relaterte proteiner (caspase-3, caspase-8, Bax, BCL-2) . Nivåer av disse proteinene ble evaluert ved hjelp av western blot-analyse. Caspase-3, caspase-8, og Bax proteinnivåer økes etter 48 timers behandling med SF-CM fra de fleste magekreftceller, mens bcl-2-protein nivåer redusert (figur 5). Beta-aktin ble benyttet som kontroll lasting. Figur 5 Western blot analyse av apoptose-relatert protein nivåer (caspase-3, caspase-8, Bax, og BCL-2) i HPMCs med SF-CM fra ulike magekreft cellelinjer behandling.
Serum-sultet HPMCs ble inkubert med SF-CM fra ulike mage kreft cellelinjer for opp til 48 timer; totalt cellulært protein ble trukket ut og utsatt for western blot analyse
. Diskusjon
De fleste studier av postoperativ tumorresidiv viser at traumatisert mesothelial overflater er å foretrekke områder for svulst celle adhesjon. Nylig disassociated kreftceller inne peritonealhulene og proteiner spesifikt uttrykt i peritoneal metastasering av magekreft ble funnet å være knyttet til kreft prognoser. Mens immunogenetic tilnærminger viser store løftet i behandling av peritoneal metastasering av magekreft [13-15], blir effekten av mage kreftceller på mesothelial celler dårlig forstått.
Study viste at mesothelial cellene gir beskyttelse mot peritoneal metastasering av tumor i intakte mesothelia [9, 16, 17]. Paget et al
foreslått en "frø og jord" teori: metastasering oppstår bare når kreftceller leve og vokse i et gunstig miljø [18]. Peritoneum kan være for eksempel et gunstig miljø for scirrhous magekreftceller; muligens mesothelial celler forhindre kreftceller fra å infiltrere inn submesothelial bindevev. Masakazu et al. Product: [1] viste at tilstøtende konfluente mesothelial celler hindret invasjonen av kreftceller. I tillegg Kiyasu et al.
[3] rapportert at før peritoneal Implantasjon av kreftceller, mesothelial celler blir halvkuleformet og exfoliate fra peritoneum. Vår hypotese er at etter serosa er utsatt, gratis kreftceller utøst fra primær mage kreftformer i bukhulen indusere apoptose i peritoneal mesothelial celler [19-21]. Som et resultat, mesothelial celler blir halvkuleformet og eksfoliering finner sted. Nakne områder av submesothelial bindevev blir således eksponert for bukhulen; dette skadet peritoneal området blir et gunstig miljø for peritoneal metastase [22-24].
Vi hadde tidligere vist magekreft celle supernatant for å redusere levedyktigheten til mesothelial celler, men normal gastrisk epitelcellelinje GES-1 utviser ingen effekt på mesothelial celler [5]. Vår foreliggende undersøkelse viser også at dyrkede celler blir mesothelial halvkuleformet, og peeling oppstå når serumfritt medium kondisjonert med magekreftceller ble tilsatt, slik som vist derimot fasemikroskopi. Videre ble cytoplasmisk reduksjon, atom kondensasjon og dannelsen av ekstracellulære og /eller intracellulære apoptotiske legemer observert i henhold til transmisjonselektronmikroskop. Apoptose ble kvantifisert ved to metoder: MTT og flowcytometri. Vi spekulerer i at frie mage kreftceller i bukhulen indusere apoptose av mesothelial celler og forårsake peeling, til slutt fører til metastasering. Dette kan være den mekanismen som kreftceller følge submesothelial bindevev, selv mesothelial cellene er fortsatt godt organisert og sammenflytende. Videre studier er nødvendig for å karakterisere SF-CM løslatt fra mage kreftceller.
Gastric kreftceller kan indusere apoptose gjennom mitochondria- og død reseptor-avhengige apoptotiske veier. Gastric kreftceller undertrykke mesothelial cellevekst ved å hemme spredning gjennom å fremme caspase-avhengig apoptose. Caspases er cytoplasmatiske aspartat-spesifikke cystein proteaser, og spiller viktige roller i apoptose [25]. Døds reseptor-avhengig apoptotiske reaksjonsvei blir utløst på celleoverflaten og krever aktivering av kaspase-8, mens den mitokondrie-avhengige reaksjonsveien blir initiert ved frigivelse av mitokondriell cytokrom c inn i cytoplasma og krever aktivering av kaspase-9. Deretter kan caspase-8 eller -9 aktivere caspase-3, som i sin tur mål og forringer spesifikke og viktige cellulære proteiner, til slutt resulterer i nukleært DNA degradering og apoptotisk celledød [26]. Bcl-2, en inhibitor av mitokondrial apoptose vei, utøver sin virkning ved å blokkere proapoptotiske kolleger, som i sin tur hindrer frigjøring av cytokrom c og aktivering av kaspaser [27]. Bax er en død promoter, som nøytraliseres av heterodimerisering med Bcl-2. Bax translocates inn i den ytre mitokondriemembranen etterfulgt av lekkasje av cytokrom c fra mitochondria i cytosol [28]. Caspase-9 og caspase-3 aktiveres sekvensielt, og disse hendelsene fører til nedbryting av kromosomal DNA. Ettersom det er en betydelig mulighet for at magekreft celle-mediert apoptose av mesothelial celler er et resultat av regulering av Bcl-2 og Bax, er nødvendig for identifikasjon av deres målforbindelsene.
I denne studien vi benyttet en mus eksperimentell modell av peritoneal sklerose indusert ved gjentatte injeksjoner av magekreft celle SF-CM. Eksperimentell peritoneal fibrose forårsaket av gjentatte intraperitoneale injeksjoner av magekreft celle SF-CM kanskje ikke helt ligne peritoneal sklerose observert hos pasienter (diffust infiltrerende karsinom eller Bormann sin type VI karsinom). Faktisk, patologiske funn av peritoneal karsinomatose og peritoneal sklerose er ikke ensartet og ulike faktorer er involvert. I tillegg er visse fellestrekk observert under utviklingen av peritoneal sklerose mellom magekreft celle SF-CM-induserte eksperimentelle dyremodeller og menneskelige pasienter som får peritoneal karsinomatose. Disse vanlige histologiske funn inkluderer økt ansamling av interstitiell kollagen som type I og III kollagen, infiltrasjon av monocytter /makrofager, økning i a-SMA + myofibroblasts, og vaskulær tetthet i bukhinnen [7, 8]. Disse likheter i forandringer i de peritoneale membranene mellom eksperimentelle modeller og humane peritoneal karsinomatose pasienter som tyder på at dette er en passende modell for å undersøke effekten av forskjellige potensielle terapeutiske reagenser for regulering av peritoneal karsinomatose.
Konklusjoner
Disse funn viser at magekreft celler kan indusere apoptose og fibrose av humane peritoneale mesothelial celler gjennom supernatanter i den tidlige peritoneal metastaser, og indikerer at løselige faktorer i det peritoneale hulrom kan påvirke morfologien og funksjonen av mesothelial celler, slik at den resulterende miljøet blir gunstig å peritoneale metastaser.
Forkortelser
HPMCs:
menneske peritoneal mesothelial celler
SF-CM.
Serum-free betinget media

Erklæringer
takk
forfatterne ønsker å uttrykke sin oppriktige takk til Dr. Yan Song for sin teknisk assistanse. Denne studien ble støttet av et stipend fra National Foundation Natural Sciences of China (NO. 81071956 og 81101884).
Forfatternes originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 12876_2011_768_MOESM1_ESM.jpeg Forfatteroriginalfilen for figur 1 12876_2011_768_MOESM2_ESM.jpeg Forfatteroriginalfilen for figur 2 12876_2011_768_MOESM3_ESM.bmp Forfatteroriginalfilen for figur 3 12876_2011_768_MOESM4_ESM.jpeg Forfatteroriginalfilen for figur 4 12876_2011_768_MOESM5_ESM.bmp Forfatteroriginalfilen for figur 5 konkurrerende interesser
forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
forfatternes bidrag
DN, Z-DL og F-NL utført studier på morfologi og biologisk aktivitet av peritoneal mesothelial celler in vitro
og in vivo
. ZS, Z-FM og FL deltok i in vivo
studier. YX og C-GJ deltatt i morfologi studiene. DN og HX deltatt i utformingen av studien og utført den statistiske analysen. HX og DN unnfanget av studien, og deltok i sin utforming og koordinering og bidratt til å utarbeide manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Er samtidig splenektomi gunstig for langsiktig overlevelse av pasienter med magekreft som gjennomgår kurativ gastrektomi? En enkelt-institusjon studie
• Uttrykk og kliniske betydningen av lange ikke-kodende RNA HNF1A-AS1 i human magekreft