Rak povezano fibroblasti so pozitivni korelaciji z metastatskega potenciala želodčnega raka človekovih

Rak povezano fibroblasti so pozitivni korelaciji z metastatskega potenciala želodčnega raka človekovih
Abstract
Ozadje
The prognozo bolnikov z rakom želodca je težko napovedati, zaradi napak pri določanju kirurško patološke značilnosti. Rak povezano fibroblasti (KGZS) je bilo ugotovljeno, da igrajo pomembno vlogo pri spodbujanju rasti tumorja, invazijo in metastaze. Tako se postavlja hipotezo, da lahko obseg KGZS razširjenosti pomaga vzpostaviti prognozo bolnikov z rakom želodca.
Metod
imunokemija in posrednik-PCR eksperimenti so bili izvedeni za primerjavo izražanje proteinov, ki so specifične markerje KGZS ali izloča KGZS v tumor in normalnih vzorcev tkiva. Obseg KGZS "razširjenosti so bili razvrščeni glede na imunokemijskega barvanjem in korelacijo so dodatno analizirani med KGZS 'razširjenosti in drugih tumorskih značilnosti, ki lahko vplivajo na prognozo bolnikov z rakom želodca.
Rezultati
Skoraj 80 odstotkov običajnih želodčnih tkiv so bili negativni ali šibko pozitivni za KGZS obarvanje, medtem ko je bilo več kot 60 odstotkov želodca tkiv rakom zmerno ali močno pozitiven za KGZS obarvanje. Rezultati Realtime-PCR je tudi pokazala znatno povišano izražanje FAP, SDF-1 in TGF-β1 v želodčnih tkivih raka v primerjavi z običajnimi želodčnega tkiva. Nadaljnja analiza je pokazala, da je razširjenost KGZS "povezana z velikostjo tumorja, globina tumorja, bezgavk metastaze, metastaz jeter ali peritoneja metastaz.
Sklepi
Reaktivna povezani z rakom fibroblasti (KGZS), pogosto so nabrali v želodčnih tkivih raka, in razširjenosti KGZS bila povezana z velikostjo tumorja, globina tumorja in tumorsko metastaziranje, s čimer dobimo nekaj podpore za vzpostavitev prognozo bolnikov z rakom želodca.
Ozadje
raka želodca je drugi najpogostejši vzrok cancer- povezane smrti po vsem svetu [1]. Precejšnje geografske razlike obstajajo v pojavnosti raka želodca in predstavlja najpogostejši rak na Kitajskem [2]. Vse več bolnikov z rakom želodca bila ugotovljena v zadnjih letih s spremembo prehrane in načina življenja, kot tudi razvoj diagnostične postopke. Čeprav je kirurško zdravljenje izkazalo za učinkovito pri nekaterih zgodnjih želodca, vključno z rakom celotnega želodca in razširjeno radikalno želodca, prognoza teh bolnikov je slabo zaradi ponovitve po operaciji, v obliki limfna razpona, ki se prenašajo s kri metastaz, ali trebušni votlini razširjanje [3].
prognozo pacienta z rakom želodca dokazano je, da se vpliva več uveljavljenih kirurških patoloških funkcije, kot je patološko fazi lokacijo tumorja in histološki vrsti in stopnji tumorja [ ,,,0],4]. Medtem Aurello sod. [5], so pokazale, da se je število vozlišč, ki so potrebni za sklenitev N0 se lahko razlikujejo glede na globine tumorske invazije (T), klasifikacija TNM zahteva pridobivanje in analizo vsaj 15 bezgavk za natančno uprizoritev. Vendar pa je v večini primerov, število vozlišč seciramo je manjši in le 20 do 30% bolnikov, ki so imeli priporočene najmanjše seciranje 15 vozlišč. Potrebni so accessorial kazalniki, ki lahko zagotovijo dodatne informacije o prognozo bolnikov z rakom želodca.
raka povezan fibroblast (CAF), eno od pomembnih stromalnih celicah, ki sestavljajo trdne tumorje, je bilo ugotovljeno, da igrajo pomembno vlogo pri spodbujanju rasti tumorja in napredovanje [6]. V nasprotju s stojijo fibroblastov, KGZS imajo aktivirano fenotip in lahko identificiramo z njihovo izražanje fibroblastnega specifične proteina 1 (FSP1), vimentina, dezmin, nev in α-gladko mišic aktina [7]. KGZS komunicirajo med seboj, kakor tudi z rakavih celic in vnetnih in imunskih celic neposredno prek stika celic in posredno prek parakrin /eksokrine signalizacijo, proteaze in modulacijo ekstracelularnega matriksa (ECM). Ta kompleks komunikacijsko omrežje je ključnega pomena za zagotavljanje ustreznega mikrookolje za podporo tumorigeneze, angiogeneze in metastaz [8, 9]. Poleg tega, v primerjavi z transformirane tumorskih celic, KGZS so bolj genetsko homogena [10] in je bilo dokazano s Gastavo et al, da lahko reaktivni STROMA deluje kot napovedovalec ponovitve raka prostate [11], kar predstavlja privlačne napovedovalec in terapevtski cilj za bolnike tumorskih.
v tej raziskavi smo zbrali 100 primerov kirurški odstranitvi osebkov primarnim rakom želodca, kot tudi običajnih želodčne tkiva (več kot 5 cm daleč od tumorsko tkivo), od januarja 2007 do junija 2007 v drugega vojaškega Medical Univerza povezan Changhai bolnišnico (Šanghaj, Kitajska). Imunokemija in RT-PCR eksperimenti so bili izvedeni za primerjavo ekspresije beljakovin, ki so specifične označevalci KGZS ali izloča KGZS v tumor in normalnih osebkov tkiva. Obseg KGZS "razširjenosti so bili razvrščeni glede na imunokemijskega barvanjem in korelacijo so dodatno analizirani med KGZS 'razširjenosti in drugih tumorskih značilnosti, ki lahko vplivajo na prognozo bolnikov z rakom želodca.
Metode
kohorte Vpis
Sto primeri primarnih bolnikov z rakom želodca je bilo vključenih od januarja 2007 do junija 2007 v drugem Military Medical University povezana Changhai bolnišnici. Vsi bolniki so zagotovili informirano soglasje pisno. merila za to študijo Prijavnina vključuje: (a) ni preoperativno kemoterapiji; (B) patološko ali citološko potrjena v želodcu-adenokarcinom; (C), starih med 18-85 let; (D) pričakovana življenjska > 3 mesece; (E) WBC > 3,5 x 10 9 /L; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /L; Kreatinina v serumu ne več kot 1,25 krat normalnega zgornjo mejo; GPT in ALP ne več kot 1,25 krat normalnega zgornjo mejo; Skupaj bilirubin ne več kot 1,5-krat normalne zgornjo mejo; PT < 12s; in (f) ni huda bolezen CNS.
patoloških analizo
vseh osebkov, vključno z tumorskih tkiv in normalnih želodčnega tkiva, ki je bila več kot 5 cm daleč od tega so tumor tkiva določen v 10% formalinu v 30 minutah po kirurški odstranitvi. Pripravili smo parafin vgrajeni serijskih odseki (4 um). Tumor diferenciacija je značilna po klasifikaciji Svetovne zdravstvene organizacije (2000) klasifikacija TNM, medtem ko je bilo opravljeno v skladu z mednarodnim proti raku unije, peta izdaja (1997).
Imunokemija
protiteles se uporablja v tem postopku tudi kunčjega anti-FSP1 poliklonsko protitelo ( Abcam, 01:50), miška anti-α-SMA monoklonsko protitelo (Sigma, 1A4, 1: 200), podganji proti prokolagen I monoklonsko protitelo (Chemicon, Mab1912, 1: 500), biotin konjugiranih podganji proti mišji IgG poliklonsko protitelo (ebioscience, 13-4013, 1: 100), biotin konjugiranih miško anti-podgana IgG poliklonsko protitelo (ebioscience, 13-4813, 1: 100) in biotina konjugiranih miške anti-kunčjega IgG poliklonskega protitelesa (BD Pharmingen, C101-167, 1: 100). Analiza imunokemija smo izvedli kot je opisano predhodno [12]. Na kratko, parafinske odseki bila odpravljena paraffinized v ksilena in vrsti razvrščenih alkoholne raztopine. Odseki smo nato obdelali z 0,3% vodikovega peroksida (H2O2) v vodi 10 minut pogasiti nobene endogene peroksidaze dejavnost v tkivu in nespecifična vezavna mesta smo blokirali z 0,5% goveji serumski albumin (BSA) 10 minut pri sobni temperaturi . Naslednji so bili odseki inkubirali 15 minut v prisotnosti primarnega protitelesa, nato pa so drsi izprali v fosfatnem pufrom (PBS), ki vsebuje 15 minut 0,1% Tween 20 (PBS /Tween), medtem ko spreminjanje raztopino 3-krat pred uporaba sekundarnega biotiniliranega protitelesca. Drsniki inkubiramo s sekundarnim protitelesom 15 minut pri sobni temperaturi, predno jih spirali 15 minut v PBS /Tween, ki je spremenila 3-krat. Odseki smo nato inkubirali 15 minut z avidinskim-biotiniliranega hrenovo peroksidazo kompleksa in reakcijsko vizualizirali z uporabo 0.02% 3,3'-diaminobenzidine tetrahidroklorid kot kromogena v Tris-HCl pufru, pH 7,6, ki vsebuje 0,03% H2O2. Hematoxylin smo uporabili za nasprotno jedra.
Histološko analizo
Za oceno stopnje FSP1, a-ATVP in prokolagena-I izražanja, odstotek pozitivnih pušča madežev celice so ocenjena na lestvici od 0-3, pri čemer manj kot 5% prisilni barvanje celic s stopnjo 0, 5-25% v razredu 1, 26-50% v razred 2, in več kot 50% v razred 3. in intenzivnost obarvanja razvrstijo tudi na lestvici od 0- 2, z negativno šibke intenzivnosti kot razred 0, šibko do zmerno intenzivnostjo kot razred 1, in zmerno do močno intenzivnostjo kot razredu so 2. Deset high-power polja naključno izbrana za vsako stekelca in analizirali z dvema patologi samostojno. Za vsako oznako, je bil rezultat za odstotek in intenzivnosti pomnoženo in dodali so rezultati teh treh markerjev, ko so ti markerji analizirali dogovorno. In končni rezultat med 0-6 je bil določen kot negativno (-), ocena med 7-9 je bil določen kot šibko pozitivni (+), je ocena med 10-12 določena kot zmerno pozitivno (++), in rezultat višje kot 13 je bil določen kot močan pozitiven (+++).
realtime PCR
Total RNA je bila vzeta iz tumorskih ali normalnih tkivih s TRIzola reagenta (Invitrogen) in prvi sklop cDNA smo sintetizirali s pomočjo RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit ( Fermentas, ZDA), kot je opisano predhodno [13]. Realtime PCR je bila izvedena s pomočjo LightCycler DNA Master SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Nemčija), v skladu z navodili proizvajalca. Kopije ciljne cDNA smo normalizirali s GAPDH izražanja. Primerji za FAP, SDF-1, smo TGF-β1 in GAPDH navedeni takole:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5' AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
Za vsako ciljno cDNA, kopije normalnih vzorcev tkiva je povprečje, in kopije vsakega vzorca tumorskega tkiva, se deli s povprečjem, se rezultati teh treh ciljne cDNA za vsak vzorec tumor tkiva dodal. Če je vsota enaka ali večja od 8, potem je tumorsko tkivo šteje za pozitivno za KGZS.
Statistična analiza
Podatki so prikazani kot sredstvo in standardnih odklonov. Statistične analize podatkov smo analizirali s testom t dvorepe neodvisnega Dijaški in χ 2 analize s SPSS 12.0. Stopnja statistične značilnosti je bila določena na P < 0,05.
Rezultati
Reaktivna tumorjem povezani fibroblasti so prevladovale v želodčnih tkivih raka PODJETJA
Za določitev obsega razširjenosti KGZS na področju želodca tkivih raka, so bili pripravljeni in obarvamo za FSP1 parafin vgrajeni deli vzorcev tkiva, α- SMA in izražanje prokolagen I, kot je opisano zgoraj. Poleg tega je bilo v realnem času PCR izvajajo za določanje nivoja izražanja različnih proteinov, ki so izražene ali izločajo reaktivnih KGZS, kot FAP, SDF-1 in TGF-β1.
Rezultati imunokemija obarvanjem pokazala, da več reaktivne fibroblasti so bili prisotni pri želodčnih rakavih tkivih kot pri običajnih želodčnega tkiva. Štiriindvajset od normalnih osebkov, 100 so bili negativni (-) za reaktivne fibroblastov obarvanje in 55 običajnih vzorcev je bilo šibko pozitivni (+). In število normalnih osebkov, ki so bile zmerno (++) ali močna pozitivna (+++) so bili 21 in 0, oz. Medtem ko se v zvezi z rakom tkiva, je bilo 13, 26, 25 in 36 osebkov, ki so bili negativni (-), šibko pozitiven (+), zmerno pozitiven (++) in močna pozitivna (+++) za fibroblastnega obarvanje, v tem zaporedju (slika 1a in Slika 1b). In če so tumor osebki ocenjeno kot negativno ali šibko pozitivno obravnavati kot negativni, in zmerno ali močno pozitivni so bili šteti kot pozitiven, je bila velika razlika med tumorjem in normalnih tkivih v zvezi s pozitivno stopnjo KGZS (slika 1c). Slika 1 Analiza imunokemija v razredu razširjenosti KGZS na področju tumorja in običajnih želodca tkiva. Parafinski deli kirurško izrezanega tumorja in zdravega tkiva iz istih bolnikov želodca z rakom (100 primerov), smo obarvali za FSP1, a-SMA in prokolagena-1 izraz in KGZS razširjenost so bili razvrščeni glede na pozitivne stopnje in intenzivnosti imunokemijskega obarvanje. Število tumorja ali normalnih osebkov tkiva razvrščenih kot -, +, ++ in +++ smo primerjali (a). In smo analizirali porazdelitev teh štirih razredov razširjenosti KGZS "v 100 tumorja ali normalnih osebkov tkiva (b). Razred - in + je bil obravnavati kot negativni, medtem ko razred ++ in +++ bil obravnavati kot pozitiven za KGZS razširjenosti, nato pa so primerjali število tumorja ali normalnih osebkov tkiva, ki je bil pozitiven ali negativen razširjenosti KGZS "(c).
za mRNA ekspresije proteinov, rezultati so pokazali, da je bila stopnja ekspresijo vseh teh proteinov povišano tumorskih vzorcih v primerjavi s tistimi iz normalnih tkivih. Ob FAP kot primer, je bila raven mRNA izraz FAP v tumorskih vzorcev 4-krat večja, kot je v normalnih tkivih (slika 2a). In so bili tudi 3-krat zvišanje ravni ekspresije mRNA v zvezi SDF-1 (slika 2b) ali TGF-β1 (slika 2c). Slika 2 Analiza Realtime-PCR izločajo proteine, ki jih KGZS v tumor in normalnih želodčnega tkiva. Skupno RNK je ekstrakt in cDNK smo pripravili iz kirurško izrezanega tumorja in normalnih tkiv iz istih bolnikov z rakom želodca (100 primerov). Realnem času PCR smo izvedli primerjavo nivoja izražanja FAP (a), SDF-1 (b) in TGF-β1 (c) v tumorskih in normalnih tkiv, prva dva pasova iz electrophoretogram zastopa normalnih tkiv in zadnji dve steze zastopa tumorske tkiva. *: P lt; 0.01.
Iz teh rezultatov lahko sklepamo, da so reaktivne KGZS so prevladovale v želodčnih tumorskih tkivih in tajno visoko raven proteinov, ki so pokazale, da je ključnega pomena za rast tumorja, invazije in metastaz. Razširjenost
KGZS "je tesno povezane z invazivnimi in metastatskih lastnosti želodca tumorja
ugotoviti, ali je razred KGZS "se razširjenosti lahko služil kot napovedovalec za prognozo bolnikov z rakom želodca, je bila analiza korelacije izvedena med stopnjo KGZS" razširjenosti in druge clinicopathological parametri želodčnih raka. Tumorski vzorci ocenjeno kot negativno ali šibko pozitivni so smatrajo kot negativni, in zmerna ali močna pozitivna bilo obravnavati kot pozitiven teh analiz. Bolnikov in tumor značilnosti so opisane v tabeli 1. najdemo tudi v tabeli 1, ki je bil med razširjenosti KGZS in glede na starost, spol bolnika ali lokacijo tumorja ni nobene povezave. Prišlo je do povečanja razširjenosti KGZS ", ko razlikovanje tumor zmanjšal z dobro diferenciranim (43,75%), da slabo diferencirane (64,00%), medtem ko je pozitivna stopnja KGZS v nediferencirani raka želodca, je le 26,67%, kar je precej manj kot v dobro ali slabo diferencirani želodčni rak, zato nismo mogli najti korelacijo med razširjenosti in tumorja diferenciacije strategijo Komisije "(P = 0,56). Medtem ko se v zvezi velikost tumorja, globina tumorja (T) in na bezgavkah metastaze (N), je pokazala statistično pomembno povezanost med razširjenosti KGZS in teh značilnosti tumorjev, z več pozitivne stopnje KGZS v večjih tumorjev, bolj invazivnih tumorjev in tumorjev z več bezgavk metastaz. Prav tako smo lahko ugotovili, da je bila pozitivna stopnja KGZS visoko v želodčnih rakov z metastaz jeter (P < 0,01), ali peritonej metastazami (P < 0,01) .table 1 pacientov in tumor lastnosti in njihova povezava z razširjenostjo KGZS

N
Positive za KGZS N (%)
P vrednost
Starost (leta)
2.77a
≤60
47
22 (46.81)
> 60
53
29 (54.72)
Sex
5.11a
Moški
57
32 (56.14)
ženski
43
19 (44.19)
Lokacija tumorja
1.35b
proksimalnem koncu trebuhu (1/3)
13
9 (69,23)
želodca telo (1/3)
19
9 (47.37)
Remote konec želodec (1/3)
51
22 (43.14)
Več kot 1/3 želodca vključenih
17
11 (64.71)
Tumor razlikovanje
0.56b
dobro diferenciranega
16
7 (43.75)
Zmerna razlikujejo
44
24 (54.55)
Slabo razlikujejo
25
16 (64.00)
Raznovrstna
15
4 (26.67 )
Tumor velikost
0.02a
≤5 cm
62
16 (35.48)
> 5 cm
38
29 (76,32)
Globina tumorja (T)
0.03b
Tis
4
1 (25,00)
T1
13
5 (38.46)
T2
39
19 (48.72)
T3
26
15 (57.69)
T4
18
11 (61,11)
limfnega vozla metastaze (N)
< 0.01
N0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64.81)
metastaz jeter
< 0.01a
Da
12
9
Ne
88
42
potrebušnice metastaze
< 0.01a
Da
9
7 (77,77)
št
91
44 (48.35)
TNM Stage
< 0.01b
IA
15
3 (20)
IB
7
2 (28.57)
II
19
6 (31.58)
IIIA
23
11 (47.83)
IIIB
15
8 (53.33)
IV
21
14 (66.67)
a: Fisher natančen preizkus; b: Chi-kvadrat Testi
Poleg tega se v primeru tumorja metastaz, ne glede na bezgavk metastaz, oddaljene metastaze ali metastaz organov, pozitiven odstotek KGZS je veliko večja kot pri tistih brez metastaz (71,93% v primerjavi z 25.58% P < 0,01) (slika 3). Slika 3 Odstotek tumorskih osebke, ki so bili pozitivni ali negativni razširjenosti KGZS 'v skupini bolnikov z ali brez tumorskega metastaziranja. Osebki tumor so bili razvrščeni glede na to, ali so imeli bolniki z rakom želodca tumorskih metastaz (karkoli limfnega vozla metastaze, oddaljenih metastaz ali metastaz organov). In odstotek vzorcev, ki je bil pozitiven - smo analizirali (razred ali + po imunokemijskega barvanjem) ali negativna (razred ++ ali +++ po imunokemijskega barvanjem) za razširjenost KGZS '(a). In imunokemijska obarvanje a-SMA je bila prikazana v normalnem želodčnega tkiva, želodčnega raka tkiva brez metastaz in želodca raka tkiva s metastaz (b).
In smo analizirali tudi povezavo med stopnjo mRNA s FAP, SDF-1 in TGF-β1 in želodca stopnjo raka. Raven teh proteinov bilo doseženih kot je opisano v metodah in vzorcev tkiva tumorja smo določili, da je pozitivna, če je rezultat enak ali večji od 8. Ugotovili smo, da je pozitivna odstotek precej visok v velikih tumorjev (> 5 cm, 32/38) kot pri majhnih tumorjih (≤5 cm 20/62) (p 0.05). In pozitivni delež v vzorcih tumorjev z TNM fazi IA, IB, II, IIIA, IIIB in IV, 33,3% (15/05), 42,9% (07/03), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) in 76,2 (16/21), oziroma, ki kažejo, da je razširjenost KGZS tesno povezana s fazami želodčnega raka (p < 0,01). Ti rezultati jasno kažejo, da bi lahko razširjenost KGZS "pomaga določiti želodčne fazo raka in se lahko uporablja kot označevalec za prognozo bolnikov z rakom želodca.
Razprava
so Nedavne raziskave v molekularni in celični biologiji pokazala, da je rast tumorja in so metastaze ni odvisna od samih, temveč tudi rakave celice z različnimi stromalnih celic [14, 15]. Strome aktivno zagotavlja stalno podporo celic karcinoma vsej različnih patofizioloških procesih, ki modulirajo napredovanje tumorja. Fibroblasti so pomemben sestavni del tumorske strome, ki so prejeli večjo pozornost zaradi njihovega sodelovanja pri razvoju tumorjev, vključno rasti, invazije in metastaz, kot pri raku prostate [16, 17] ali raka dojke [18, 19]. Dokazano je bilo tudi v želodčni modelu raka miši, ki aktivirano fibroblasti spodbujanje tumorsko angiogenezo [20], in je v skladu z rezultati, da se aktivirajo fibroblasti so nabrali v človeških želodčnega tkiva raka.
Izraz fibroblast zajema številne stromalnih celice z zelo podobnega fenotipa. Večina tumorjev vključi očitno biološko aktivne, fibroblastic vrsto celic znan različno, kot reaktivne fibroblastov, myofibroblasts, ali pa preprosto tumor, povezanih fibroblastov. Gladkih mišic α-aktin (α-SMA) je najpogostejši dvojno podajo uporabljajo za ugotavljanje KGZS, medtem ko je njegova ekspresija lahko najdemo tudi v gladkih mišičnih celicah in myoepithelial celic [21]. Zato je treba druge markerje uporablja v kombinaciji z a-SMA identificirati KGZS. Fibroblastni specifične protein 1 (FSP1, S100A4), član družine Ca2 + -binding S100 proteinov, konstitutivno izražen v citoplazmi tkiva fibroblastov in njegova ekspresija je zelo specifičen za fibroblaste [22, 23]. Na splošno velja, da združiti-SMA in FSP1 za identifikacijo tumor povezan fibroblastov. In v našem poskusu smo uporabili tudi tretji marker, prokolagena I, da prepoznajo reaktivne KGZS s proizvodnjo izvencelicnega matriksa.
Prav tako zazna nivo mRNA ekspresije drugih proteinov, ki so izražene ali izločajo KGZS. FAP je tipa II transmembranski celični površinski protein, ki pripada po prolinsko dipeptidil aminopeptidaznega družine, z dipeptidil peptidaze in endopeptidazni aktivnosti, vključno z aktivnostjo collagenolytic sposoben razgraditi želatina in kolagen tipa I [24, 25]. FAP je izražena selektivno s KGZS in pericytes v več kot 90% epitelnih rakov človekovih preučiti [26-30] in raziskave so poročali pri živalskem modelu kaže terapevtski učinek pri zaviranju FAP ekspresije ali encimsko aktivnost [31]. Naslednji protein smo izbrali za odkrivanje je SDF-1, ki se izloča s KGZS in stimulira proliferacijo tumorskih celic, angiogenezo, invazijo in metastaz preko CXCR4 receptor v tumorskih celicah [32-34] izražen. Druga izločen protein smo zaznali, je TGF-β1, ki je močan induktor za myofibroblasts diferenciacije [35], in lahko igrajo vlogo pri tumorskih invazija-metastazami kaskad [36]. Rezultati te študije so pokazali, da so bile te beljakovine navzgor regulirano v želodčnih tkivih raka, kar kaže na njihovo morebitno vlogo pri spodbujanju želodčni napredovanje raka.
Rak želodca je drugi najpogostejši vzrok raka povezana umrljivost v svetu. Prognozo pri bolnikih z rakom želodca je težko določiti, saj je običajno diagnosticirana, ko so se pojavili želodčni steno invazija in metastaze. Več skupin poskušali najti nekaj biomarkerjev za prognozo raka želodca. Na primer, izraz več zunajcelične matriksnih metaloproteinaz (MMP-2, 7, 9) je bilo ugotovljeno, da je povišana v želodčnih tkivih rakom v primerjavi z zdravimi želodčnega tkiva. In up-ureditev teh MMP pri bolnikih z rakom želodca je bila povezana s slabo prognozo in povišano invazivno sposobnost [37]. Drug primer je inzulinu podoben rastni faktor-1 receptorja (IGF-1 R), je bila pogosto izražene v želodčnih raka je povezano z velikostjo tumorja, količine strome globine stene invazije, bezgavkah metastaze, TNM stopnjah in stanja diferenciacije rak želodca [38]. In VEGF-C izražanje pri tumorskih robu je bila povezana tudi z vozlišča metastaz, limfnega invazijo plovila, slabega preživetja ponovitve brez, in slaba celokupno preživetje, in lahko služi kot samostojna napovedovalec za bolnike z želodčnega raka [39]. Lahko ugotovimo, da so ti napovedujejo bodisi proteini s KGZS in receptorjev v tumorskih celicah, ki se vežejo na beljakovine, ki jih KGZS izločajo izraženih izločajo, tako da ti indici lahko pomeni, da bo razširjenost KGZS v želodčnih tkivih raka pomemben napovednik bolnikov z rakom želodca. In naši rezultati so potrdili, da je bila razširjenost KGZS tesno povezana z metastatskim potencialom raka želodca, in nadaljnje delo je treba storiti, da bi potrdila povezave med razširjenosti in preživetja bolnikov z rakom želodca KGZS.
Sklepe
naših ugotovitvah poročilo tukaj dokazati, da so reaktivni z rakom povezana fibroblaste (KGZS) se pogosto zbirajo v želodčnih tkivih raka in razširjenosti KGZS bila povezana z velikostjo tumorja, globine tumorja in tumorsko metastaziranje, kot tudi celotno fazo TNM, kar kaže, da so bile KGZS kritični za rast tumorja, invazije in metastaze, tako dati nekaj podpore za prognozo bolnikov želodca z rakom
Kratice
KGZS.
povezane s tumorjem fibroblasti
FAP:
aktivacije fibroblastov protein
SDF-1:
stromalni-celicah faktor 1
TGF-β1:
preoblikovanje rastni faktor beta 1
ECM:
ekstracelularnega matriksa
WBC:
belih krvnih celic

PLT:
trombocitov
Hb:
hemoglobin
GPT:
glutamat-piruvat transaminaze
ALP:
alkalne fosfataze
PT:
protrombinski čas

CNS:
centralno živčevje
α-SMA:
α-gladke mišice aktina
FSP1:
fibroblastov specifični protein 1
GAPDH:
gliceraldehid fosfat dehidrogenaze
MMP:
matrica metalo

VEGF.
vaskularni endotelijski rastni faktor
deklaracij
Potrditve
želimo zahvaliti prof Li Gao na oddelku za patologija Hospital Changhai in dr Ni Zhu v centralnem laboratoriju bolnišnice Changhai njihovih strokovnih tehnično podporo za poskuse. To delo je podprl Nacionalni Natural Science Foundation Kitajske (30672046).
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf avtorjev 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf avtorjev prvotni datoteki številka 2 prvotne datoteke 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf avtorjev za slika 3 nasprotujočimi si interesi
Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov.

• Vzpostavitev in karakterizacija model metastaz raka človeške želodčne pri nude mice
• Odkrivanje kontrolnim in brez kontrolne bezgavkah micrometastases s popolno serijskega razreza in imunohistokemičnim analizo za rakom želodca