Kreft-assosiert fibroblaster er positivt korrelert med metastatisk potensial av humane gastriske cancere

Kreft-assosiert fibroblaster er positivt korrelert med metastatisk potensial av menneskelige mage kreft
Abstract
Bakgrunn
prognose av magekreftpasienter er vanskelig å forutsi på grunn av feil i å etablere kirurgisk-patologiske funksjoner. Kreft-assosiert fibroblaster (kafeer) er blitt funnet å spille fremtredende rolle i å fremme tumorvekst, invasjon og metastase. Således øker den hypotese at graden av kafeer utbredelsen kan bidra til å etablere den prognose av magekreftpasienter
. Methods
Immunochemistry og sanntids-PCR-forsøk ble utført for å sammenligne ekspresjon av proteiner som er spesifikke markører for kafeer eller utskilles av kafeer i tumor og normalt vev prøver. Omfanget kafeer av 'utbredelsen ble gradert etter immunokjemiske flekker, og korrelasjon ble videre analysert mellom kafeer' utbredelse og andre tumor egenskaper som kan påvirke prognosen av mage kreftpasienter. Search Results
Nesten 80 prosent av normal mage vev var negative eller svakt positiv for kafeer flekker, mens mer enn 60 prosent av magekreft vev var moderat eller sterk positiv for kafeer farging. Realtime-PCR resultater viste også signifikant forhøyet uttrykk for FAP, SDF-1 og TGF-β1 i mage kreft vev i forhold til normal mage vev. Videre analyser viste at kafeer 'utbredelsen var korrelert med tumor størrelse, dybde av svulsten, lymfeknutemetastaser, levermetastaser eller peritoneum metastaser.
Konklusjoner
reaktiv kreft assosiert fibroblaster (kafeer) ble ofte samlet i mage kreft vev, og utbredelsen av kafeer var korrelert med tumor størrelse, dybde av svulsten og tumormetastase, og dermed gi noen støtte for å etablere prognosen av mage kreftpasienter.
Bakgrunn
mage~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP er den nest største årsaken til kreft dødsfall på verdensbasis [1]. Betydelige geografiske variasjoner i forekomst av magekreft, og det representerer den vanligste kreftformen i Kina [2]. Flere og flere magekreftpasienter har blitt diagnostisert i de senere år med skiftende kosthold og livsstil samt utvikle diagnostiske prosedyrer. Selv om kirurgisk behandling har vist seg å være effektive for noen tidlig gastriske cancere, inkludert total gastrektomi og utvidet radikal gastrektomi, er prognosen for disse pasientene dårlig på grunn av tilbakefall etter kirurgi, i form av lymfesystemet spredning, blodbårne metastase, eller peritoneal formidling [3].
prognose for pasienten med magekreft er blitt vist å være påvirket av flere etablerte kirurgiske-patologiske funksjoner, slik som det patologiske trinnet, plasseringen av svulsten og histologisk type og grad av tumoren [ ,,,0],4]. Mens Aurello et al. [5] har indikert at antallet noder som er nødvendige for å avslutte N0 kan variere i henhold til dybden av tumorinvasjon (T), krever TNM klassifikasjon innhenting og analyse av minst 15 lymfeknuter for nøyaktig staging. Men i de fleste tilfeller, er det antall noder dissekert mindre og bare 20 til 30% av pasientene har anbefalt minimums disseksjon av 15 noder. Ekstra indikatorer som kan gi ytterligere informasjon om den prognose av magekreftpasienter er nødvendig.
Kreft-assosiert fibroblast (CAF), en av de viktige stromale celler omfattende faste tumorer, er blitt funnet å spille fremtredende rolle i å fremme tumorvekst og progresjon [6]. I motsetning til hvilende fibroblaster, kafeer har en aktivert fenotype, og kan identifiseres ved deres ekspresjon av fibroblast-spesifikt protein 1 (FSP1), vimentin, desmin, og α-glatt-muskel-aktin [7]. Kafeer kommunisere seg imellom, samt med kreftceller og inflammatoriske og immunceller direkte gjennom celle-kontakt og indirekte gjennom parakrin /eksokrin signalering, proteaser, og modulering av den ekstracellulære matriks (ECM). Dette komplekset kommunikasjonsnettverk er avgjørende for å gi den riktige mikromiljøet for å støtte tumorigenesis, angiogenese og metastase [8, 9]. I tillegg, sammenlignet med transformerte tumorceller, kafeer er mer genetisk homogene [10], og det er blitt demonstrert ved Gastavo et al det reaktive stroma kan fungere som en prediktor for tilbakefall i prostatakreft [11], og dermed representere en attraktiv prediktor og terapeutisk mål for kreftpasienter.
i denne studien har vi samlet inn 100 tilfeller av kirurgisk fjerning eksemplarer av primær magekreft samt normale mage vev (mer enn 5 cm langt fra svulstvev) fra januar 2007 til juni 2007 i det andre Military Medical Universitetet tilknyttet Changhai sykehus (Shanghai, Kina). Immunokjemiske og RT-PCR-forsøk ble utført for å sammenligne ekspresjon av proteiner som er spesifikke markører for kafeer, eller utskilles av kafeer i tumor og normalt vev prøver. Omfanget kafeer av 'utbredelsen ble gradert etter immunokjemiske flekker, og korrelasjon ble videre analysert mellom kafeer' utbredelse og andre tumor egenskaper som kan påvirke prognosen av mage kreftpasienter.
Metoder
Cohort Påmelding
Ett hundre tilfeller av primær mage kreftpasienter ble innmeldt fra januar 2007 til juni 2007 i Second Military Medical University tilknyttet Changhai sykehus. Alle pasienter har gitt et skriftlig informert samtykke. Entry kriterier for denne studien omfatter: (a) ingen preoperativ kjemoterapi behandling; (B) patologisk eller cytologisk validert mage-adenokarsinom; (C) i alderen mellom 18-85 år; (D) forventet levetid > 3 måneder; (E) WBC > 3,5 × 10 9 /L; PLT > 10 11 /L; Hb +, 100 g /l; Serum kreatinin ikke mer enn 1,25 ganger av normal øvre grense; GPT og ALP ikke mer enn 1,25 ganger av normal øvre grense; Total bilirubin ikke mer enn 1,5 ganger av normal øvre grense; PT < 12s; og (f) ikke alvorlig CNS sykdom.
Patologisk analyse
Alle prøver inkludert tumorvev og normal mage vev som var mer enn 5 cm langt fra tumorvev ble fiksert i 10% formalin i løpet av 30 minutter etter kirurgisk reseksjon. Parafin innebygde seriesnitt (4 mikrometer) ble forberedt. Tumor differensiering ble karakterisert i henhold til WHO-klassifisering (2000), mens TNM klassifikasjon ble gjort i henhold til International Union Against Cancer, femte utgave (1997)
. Immun
antistoff som brukes i denne prosedyren omfatter kanin anti-FSP1 polyklonale antistoff ( Abcam, 01:50), muse-anti-α-SMA-monoklonalt antistoff (Sigma, 1A4, 1: 200), rotte-anti-prokollagen I monoklonalt antistoff (Chemicon, Mab1912, 1: 500), biotin-konjugert rotte-anti-muse-IgG polyklonalt antistoff (eBioscience, 13-4013, 1: 100), biotin-konjugert mus-anti-rotte-IgG polyklonalt antistoff (eBioscience, 13-4813, 1: 100) og biotin-konjugert mus-anti-kanin-IgG polyklonalt antistoff (PharMingen BD, C101-167, 1: 100). Immunokjemiske analyser ble utført som tidligere beskrevet [12]. I korthet, parafinsnitt ble de-paraffinized i xylen og en rekke graderte alkoholløsninger. Snittene ble så behandlet med 0,3% hydrogenperoksid (H2O2) i vann i 10 minutter for å slukke enhver endogen peroksidaseaktivitet i vevet, og de ikke-spesifikke bindingsseter ble blokkert med 0,5% bovint serumalbumin (BSA) i 10 minutter ved romtemperatur . Deretter ble seksjonene inkubert i 15 minutter i nærvær av det primære antistoff, og deretter ble objektglassene vasket i fosfatbufret saltvann (PBS) inneholdende 0,1% Tween 20 (PBS /Tween) i 15 minutter under endring av løsning 3 ganger før påføringen av det sekundære biotinylerte antistoff. Glassene ble inkubert med det sekundære antistoff i 15 minutter ved romtemperatur før den ble vasket i 15 minutter i PBS /Tween ble endret 3 ganger. Seksjonene ble deretter inkubert i 15 minutter med et avidin-biotinylert pepperrot-peroksydase kompleks, og reaksjonen visualisert ved hjelp 0,02% 3,3'-diaminobenzidin tetrahydroklorid som et kromogen i en Tris-HCl-buffer, pH 7,6, inneholdende 0,03% H2O2. Hematoxylin ble brukt til å counterstain kjerner.
Histologisk analyse
å vurdere nivået på FSP1, α-SMA og prokollagen-I uttrykk, prosentandelen av positive-flekker celler ble gradert på en skala fra 0-3, med mindre enn 5% positiv-flekker celler som klasse 0, 5-25% som klasse 1, 26-50% som klasse 2, og mer enn 50% som klasse 3. og intensiteten av flekker også gradert på en skala fra 0- 2, med negativt av svak intensitet som klasse 0, svak til moderat intensitet som klasse 1, og moderat til sterk intensitet som klasse 2. ti kraftige feltene ble valgt tilfeldig for hver lysbilder og analysert av to patologer uavhengig. For hver markør, poengsummen for prosent og intensitet var multiplisert og resultatet for disse tre markørene ble lagt da disse markørene ble analysert conjointly. Og sluttresultatet mellom 0-6 ble bestemt som negative (-), poengsum mellom 7-9 ble bestemt som svak positiv (+), ble resultatet mellom 10-12 fastsettes som moderat positive (++), og scorer høyere enn 13 ble bestemt som sterk positiv (+++) Realtime-PCR
.
Total RNA ble ekstrahert fra tumor eller normale vev ved Trizol reagens (Invitrogen) og første tråd cDNA ble syntetisert ved hjelp RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit ( Fermentas, USA) som tidligere beskrevet [13]. Realtime PCR ble utført ved hjelp av LightCycler DNA Master SYBR Grønn Jeg Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland) i henhold til produsentens instruksjoner. Kopiene av mål cDNA ble normalisert ved GAPDH uttrykk. Grunning for FAP, SDF-1, ble TGF-β1 og GAPDH oppført som følger:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5' AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
for hvert mål cDNA, kopier av normale vevsprøver er gjennomsnitt, og kopier av hver svulst vevsprøve er delt på gjennomsnittet, så resultatene av disse tre mål cDNA er lagt for hver svulst vevsprøve. Dersom summen er lik eller større enn 8, så tumorvevet er ansett for å være positiv for kafeer.
Statistisk analyse
data er vist som gjennomsnitt og standardavvik. Statistiske analyser av dataene ble analysert med den tosidige uavhengig Student t test og χ 2 analyse av SPSS 12.0. Nivået av statistisk signifikans ble satt til P < 0.05.
Resultater
reaktiv tumorassosierte fibroblaster var utbredt i mage kreft vev
å fastslå omfanget kafeer 'utbredelse i mage kreft vev av, parafin innebygde deler av vevsprøver ble forberedt og farget for FSP1, α- SMA og prokollagen jeg uttrykk som beskrevet ovenfor. I tillegg ble realtime PCR gjennomført for å bestemme ekspresjonsnivået av flere proteiner som er uttrykt eller utskilt av reaktive kafeer, slik som FAP, SDF-1 og TGF-β1.
Resultatene av immunfarging viste at mer reaktive fibroblaster var tilstede i magekreft vev enn vanlige mage vev. Tjue fire av de 100 normale prøver var negative (-) for reaktive fibroblaster flekker og 55 normale prøver var svakt positiv (+). Og antall normale prøver som var moderat (++) eller sterk positiv (+++) var 21 og 0, henholdsvis. Mens om kreftvev, var 13, 26, 25 og 36 prøver som var negative (-), svakt positiv (+), moderat positiv (++) og sterk positiv (+++) for fibroblast farging, henholdsvis (fig 1a og figur 1b). Og hvis vevsprøver gradert som negativ eller svak positiv ble betraktet som negativt, og moderat eller sterk positiv ble sett på som positiv, var det en betydelig forskjell mellom tumor og normalt vev om positive frekvensen av kafeer (fig 1c). Figur 1-immun analyse av karakteren av kafeer 'utbredelse i tumor og normal mage vev. Parafin deler av kirurgisk reseksjon tumor og normalt vev fra samme mage kreftpasienter (100 tilfeller) ble farget for FSP1, α-SMA og prokollagen-1 uttrykk og kafeer utbredelsen ble gradert i henhold til den positive frekvensen og intensiteten av immunkjemiske farging. Antall tumor eller normale vevsprøver gradert som -, +, ++ og +++ ble sammenlignet (a). Og fordelingen av disse fire karakterer kafeer 'utbredelse i 100 svulst eller prøver normalt vev av ble analysert (b). Grade - og + ble sett på som negativt, mens klasse ++ og +++ ble sett på som positivt for kafeer utbredelse, deretter antall svulsten eller prøver normalt vev som var positiv eller negativ for kafeer 'utbredelse ble sammenlignet (c).
for mRNA ekspresjon av proteiner, viste resultatene at ekspresjonsnivået av alle disse proteiner ble forhøyet i tumorprøver i forhold til disse i normale vev. Tar FAP som et eksempel, det mRNA-ekspresjonsnivået av FAP i tumorprøver var 4 ganger høyere enn i normalt vev (figur 2a). Og det var også 3 ganger heving av mRNA-ekspresjonsnivået av SDF-1 (figur 2b) eller TGF-β1 (figur 2c). Figur 2 Realtime-PCR analyse av utskilte proteiner av kafeer i tumor og normale mage vev. Total RNA ble ekstrakt og cDNA ble fremstilt fra kirurgisk resekterte tumor og normalt vev fra de samme magekreftpasienter (100 tilfeller). Realtime-PCR ble utført for å sammenligne ekspresjonsnivået av FAP (a), SDF-1 (b) og TGF-β1 (c) i tumor og normalt vev, de første to baner av electrophoretogram representert normalt vev og de to siste baner representert tumorvev. *: P < 0.01.
Fra disse resultatene, kan vi konkludere med at reaktive kafeer var utbredt i mage tumorvev og hemmelig høyt nivå av proteiner som har vist seg å være avgjørende for tumorvekst, invasjon og metastasering.
Kafeer 'utbredelsen var tett beslektet med invasive og metastatiske egenskaper mage tumor
å avgjøre om karakteren kafeer av 'utbredelse kan serveres som en prediktor for prognosen av magekreftpasienter, ble korrelasjonsanalyse utført mellom karakteren kafeer av' utbredelse og andre clinicopathological parametre for mage kreft. Vevsprøver gradert som negativ eller svak positiv ble betraktet som negativt, og moderat eller sterk positiv ble ansett som positivt i disse analyse. Pasient og tumoregenskaper ble beskrevet i tabell 1. Vi finner også i tabell 1 at det ikke var noen korrelasjon mellom kafeer 'utbredelse og alder, kjønn av pasienten eller plasseringen av svulsten. Det var en økning kafeer 'utbredelsen av når svulsten differensiering redusert fra godt differensiert (43,75%) til dårlig differensiert (64,00%), mens den positive frekvensen av kafeer i udifferensiert magekreft er kun 26,67%, langt mindre enn det som i godt eller dårlig differensierte mage kreft, og dermed kunne vi ikke finne sammenhengen mellom kafeer 'utbredelse og tumor differensiering (P = 0,56). Mens vedrørende tumor størrelse, dybde av tumor (T) og lymfeknutemetastase (N), der viste statistisk signifikant sammenheng mellom forekomsten av kafeer og disse tumoregenskaper, med høyere positive rate av kafeer i større svulster, mer invasive tumorer og tumorer med flere lymfeknutemetastase. Også vi kan finne at den positive frekvensen av kafeer var høy i magekreft med levermetastaser (P < 0,01) eller peritoneum metastase (P < 0,01) .table 1 pasient og tumor egenskaper og deres forhold til kafeer utbredelsen

N
Positivt for kafeer N (%)
P-verdi
Alder (år)
2.77a
≤60
47
22 (46.81)
> 60
53
29 (54.72)
Sex
5.11a
Mann
57
32 (56.14)
Kvinne
43
19 (44.19)
plassering av svulsten
1.35b
proksimale enden av magen (1/3)
13
9 (69,23)
Gastric kroppen (1/3)
19
9 (47.37)
Remote slutten av magen (1/3)
51
22 (43.14)
Mer enn 1/3 av magen involvert
17
11 (64,71)
Tumor differensiering
0.56b
Vel differensiert
16
7 (43.75)
Moderat differensiert
44
24 (54.55)
dårlig differensiert
25
16 (64.00)
Undifferentiated
15
4 (26,67 )
Tumor størrelse
0.02a
≤5 cm
62
16 (35.48)
> 5 cm
38
29 (76,32)
Dybde av tumor (T)
0.03b
Tis
4
1 (25.00)
T1
13
5 (38.46)
T2
39
19 (48.72)
T3
26
15 (57.69)
T4
18
11 (61.11)
lymfeknutemetastase (N)
< 0,01 en
N0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64.81)
levermetastaser
< 0.01a
Ja
12
9
Ingen
88
42
peritoneum metastase
< 0.01a
Ja
9
7 (77,77)
Nei
91
44 (48,35)
TNM Stage
< 0.01b
IA
15
3 (20)
IB
7
2 (28.57)
II
19
6 (31.58)
IIIA
23
11 (47.83)
IIIB
15
8 (53,33)
IV
21
14 (66.67)
en: Fisher eksakt test; b: khikvadrattester
I tillegg, i tilfelle av tumormetastase, uansett lymfeknutemetastase, fjern metastase eller organ metastase, er den positive prosent for kafeer mye høyere enn det som i de uten metastase (71,93% mot 25,58% P < 0,01) (figur 3). Figur 3 Prosentandelen av vevsprøver som var positiv eller negativ for kafeer 'utbredelse i gruppen av pasienter med og uten tumormetastase. Tumorstykkene ble gruppert i henhold til hvorvidt eller ikke de magekreftpasienter som hadde tumormetastase (hva enn lymfeknutemetastase, fjern metastase eller organ metastase). Og hvor mange prosent av prøvene som var positive (klasse - eller + i samsvar med immunokjemisk flekker) eller negativ (grad ++ eller +++ ifølge immunkjemiske flekker) for kafeer 'utbredelse ble analysert (a). Og den immunokjemiske farging av α-SMA ble vist i normal gastrisk vev, magekreft vev uten metastase og magekreft vev med metastase (b).
Og vi også analysert korrelasjonen mellom mRNA-nivået av FAP, SDF-1 og TGF-β1 og gastrisk kreft stadium. Nivået av disse proteinene ble merket som beskrevet i fremgangsmåtene og vevsprøvene tumor ble bestemt til å være positiv dersom poengsummen er lik eller større enn 8. Det ble funnet at den positive prosentandelen er mye høy i store tumorer (> 5 cm, 32/38) enn i små svulster (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). Og den positive andelen i tumorprøver med TNM stadium IA, IB, II, IIIA, IIIB og IV er 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) og 76,2 (16/21), henholdsvis, viser at utbredelsen av kafeer er nært korrelert med magekreft stadier (p < 0,01). Disse resultatene sterkt at kafeer 'utbredelsen kan bidra til å etablere de kreft gastrisk trinnet og kan brukes som en markør for prognose av magekreftpasienter.
Diskusjon
Nyere studier i molekylær og cellulær biologi har vist at tumorvekst og metastase ikke bestemmes av kreftceller alene, men også av en rekke av stromale celler [14, 15]. Stroma gir aktivt kontinuerlig støtte til carcinoma celler gjennom de forskjellige patofysiologiske prosessene som modulerer tumorprogresjon. Fibroblaster er en viktig komponent av tumor stroma, som har fått økt oppmerksomhet på grunn av deres deltagelse i tumorutvikling, inkludert vekst, invasjon og metastaser, for eksempel i prostatakreft [16, 17] eller brystkreft [18, 19]. Det har også blitt demonstrert i et magekreft mus modell som aktiverte fibroblaster fremme tumor angiogenese [20], og den er i overensstemmelse med ut resultater som aktiverte fibroblaster ble akkumulert i humane magecancer vev.
Uttrykket fibroblast omfatter en rekke stromal celler med et bredt lignende fenotype. De fleste svulster innlemme en åpenbar biologisk aktive, fibroblastisk celletype kjent blant annet som reaktive fibroblaster, myofibroblasts, eller rett og slett tumor-assosiert fibroblaster. Glatt muskulatur α-aktin (α-SMA) er den mest vanlige markør som brukes til å identifisere kafeer, mens dets ekspresjon kan også finnes i glatte muskelceller og korg celler [21]. Slik at andre markører bør brukes i kombinasjon med α-SMA for å identifisere kafeer. Fibroblast-spesifikt protein 1 (FSP1, S100A4), et medlem av familien av Ca2 + -binding S100 proteiner, konstitutivt uttrykt i cytoplasma av vev fibroblaster, og dens ekspresjon er meget spesifikt for fibroblaster [22, 23]. Det er allment akseptert å kombinere en-SMA og FSP1 for identifikasjon av tumorassosierte fibroblaster. Og i våre forsøk, har vi også brukt en tredje markør, prokollagen I, for å identifisere reaktive kafeer med produksjon av ekstracellulære matrikskomponenter.
Vi oppdaget også mRNA-ekspresjonsnivået for andre proteiner som uttrykkes eller skilles ut av kafeer. FAP er en type II-transmembrant celleoverflateprotein som tilhører den post-prolin dipeptidyl aminopeptidase familie, med dipeptidylpeptidase og endopeptidase-aktivitet, inkludert en kollagenolytisk aktivitet stand til å nedbryte gelatin og type I kollagen [24, 25]. FAP uttrykkes selektivt ved kafeer og pericytes i mer enn 90% av humane epiteliale cancere undersøkt [26-30] og forskning har blitt rapportert i dyremodell som viser en terapeutisk virkning ved å hemme ekspresjon FAP eller enzymatisk aktivitet [31]. Den neste protein vi valgt å detektere er SDF-en, som utskilles av kafeer og stimulerer proliferasjon tumorceller, angiogenese, invasjon og metastase gjennom CXCR4-reseptoren uttrykt ved tumorceller [32-34]. Et annet utskilt protein vi har oppdaget er TGF-β1, som er en potent induser for myofibroblasts differensiering [35], og kan spille en rolle i tumor invasjon-metastase kaskader [36]. Resultatene av denne studien viste at disse proteiner var oppregulert i magekreft vev, noe som tyder på deres potensielle rolle i å fremme magekreft progresjon.
Magekreft er den andre ledende årsak til kreft-assosiert mortalitet i verden. Prognosen hos pasienter med magekreft er vanskelig å etablere, fordi det er vanlig diagnostisert når maveveggen invasjon og metastase har oppstått. Flere grupper har forsøkt å finne noen biomarkører for prognosen for magekreft. For eksempel er ekspresjon av flere ekstracellulære matriks-metalloproteinaser (MMP-2, 7, 9) er funnet å være forhøyet i magekreft vev sammenlignet med friske gastrisk vev. Og opp-regulering av disse MMP'er i magekreft er blitt assosiert med en dårlig prognose og forhøyet invasiv kapasitet [37]. Et annet eksempel er insulin-lignende vekstfaktor-1-reseptor (IGF-1R), ble det ofte uttrykt i mage cancer og var forbundet med tumorstørrelse, mengden av stroma, dybden av vegg invasjon, lymfeknutemetastase, TNM trinn og differensiering statusen magekreft [38]. Og VEGF-C uttrykk ved tumoravgrensninger var også assosiert med knutemetastaser, lymfekar invasjon, dårlig tilbakefall overlevelse, og dårlig total overlevelse, og kan tjene som en uavhengig prediktor for pasienter med magekreft [39]. Vi finner at disse prediktorer er enten proteiner utskilt av kafeer eller reseptorer uttrykt av tumorceller som binder proteinene utskilt av kafeer, så disse sporene kan tyde på at utbredelsen av kafeer i mage kreft vev vil være en viktig prediktor for mage kreftpasienter. Og våre resultater bekreftet at utbredelsen av kafeer var nært knyttet til metastatisk potensial av magekreft, og videre arbeid bør gjøres for å bekrefte sammenhengen mellom kafeer 'utbredelse og overlevelse av mage kreftpasienter.
Konklusjoner
Våre funn rapport her viser at reaktive kreft assosiert fibroblaster (kafeer) ble ofte samlet i magekreft vev, og utbredelsen av kafeer ble korrelert med tumorstørrelse, dybde av tumor og tumormetastase så vel som den totale TNM-fasen, noe som tyder på at kafeer var kritiske for tumorvekst, invasjon og metastasering, og dermed gi noen støtte for prognosen av mage kreftpasienter
Forkortelser
kafeer.
tumorassosierte fibroblaster
FAP:
fibroblast aktivering protein
SDF-1:
stromal-celle avledet faktor 1
TGF-β1:
transformerende vekstfaktor beta 1
ECM:
ekstracellulære matrise
WBC:
hvite blodlegemer

PLT:
platetallet
Hb:
hemoglobin
GPT:
glutamin-pyrodruenase
ALP:
alkalisk fosfatase
PT:
protrombintid

CNS:
sentrale nervesystemet
α-SMA:
α-glatt-muskel aktin
FSP1:
fibroblast bestemt protein 1
GAPDH:
glyseraldehyd fosfat dehydrogenase
MMP:
matriksmetalloproteinase

VEGF.
vaskulær endotelial vekstfaktor
Erklæringer
takk
Vi ønsker å takke professor Li Gao ved Institutt for patologi Changhai Hospital og Dr. Ni Zhu i Sentral-Lab av Changhai Hospital for deres ekspert teknisk støtte for forsøkene. Dette arbeidet ble støttet av The National Natural Science Foundation of China (30672046).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 2 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 3 konkurrerende interesser
Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.

• Etablering og karakterisering av en metastase modell av human magekreft i nakne mus
• Påvisning av sentinel og ikke-sentinel lymfeknute mikrometastaser fra hele serie seksjonering og immunhistokjemisk analyse for magekreft