fibroblastes associés au cancer sont positivement corrélés avec le potentiel métastatique des fibroblastes associés au cancer de l'estomac cancers

humains sont corrélés positivement avec le potentiel métastatique des cancers gastriques humaines
Résumé de l'arrière-plan
Le pronostic des patients atteints de cancer gastrique est difficile à prévoir, car des défauts dans l'établissement des caractéristiques de chirurgie pathologiques. fibroblastes associés au cancer (CEFA) ont été trouvés à jouer un rôle de premier plan dans la promotion de la croissance tumorale, l'invasion et les métastases. Ainsi soulève l'hypothèse que l'ampleur de la prévalence CAFs peut aider à établir le pronostic des patients atteints de cancer gastrique
. Méthodes de immunochimie et des expériences en temps réel-PCR ont été réalisées pour comparer l'expression des protéines qui sont des marqueurs spécifiques de CAFs ou sécrété par CAFs dans la tumeur et des spécimens de tissus normaux. L'étendue de la CAF de la prévalence a été classé en fonction de coloration immunochimique, et la corrélation a également été analysé entre CAFs de la prévalence et d'autres caractéristiques de la tumeur qui peut influer sur le pronostic des patients atteints de cancer gastrique.
Résultats
Près de 80 pour cent des tissus gastriques normaux étaient négatifs ou faiblement positif pour CAFs coloration, alors que plus de 60 pour cent des tissus de cancer gastrique était modérée ou forte coloration positive pour CAFs. les résultats en temps réel PCR ont également montré une expression élevée significative du FAP, SDF-1 et de TGF-β1 dans les tissus du cancer de l'estomac par rapport à des tissus normaux gastriques. Conclusions de Une analyse plus poussée a montré que CAFs de la prévalence a été corrélée avec taille de la tumeur, la profondeur de la tumeur, métastase ganglionnaire, métastases hépatiques ou du péritoine métastase.
cancer associé fibroblastes réactifs (CEFA) ont souvent été accumulés dans les tissus de cancer gastrique, et la prévalence de la CAF a été corrélée avec la taille de la tumeur, la profondeur de la métastase de la tumeur et la tumeur, donne ainsi quelques supports pour établir le pronostic des patients atteints de cancer gastrique.
Contexte
le cancer gastrique est la deuxième cause principale de cancer- décès liés à travers le monde [1]. variations géographiques importantes existent dans l'incidence du cancer de l'estomac et il représente le cancer le plus commun en Chine [2]. De plus en plus de patients atteints de cancer gastrique ont été diagnostiqués au cours des dernières années, avec une modification du régime et de style de vie ainsi que l'élaboration de procédures de diagnostic. Bien que le traitement chirurgical a montré pour être efficace pour certains cancers gastriques précoces, y compris gastrectomie totale et gastrectomie radicale étendue, le pronostic de ces patients est médiocre en raison de la récidive après la chirurgie, sous la forme d'une propagation lymphatique, métastases par le sang, ou péritonéale diffusion [3].
le pronostic des patients atteints du cancer gastrique a été démontré être influencée par plusieurs dispositifs chirurgicaux pathologiques établis, tels que le stade pathologique, la localisation de la tumeur et le type histologique et le grade de la tumeur [ ,,,0],4]. Alors que Aurello et al. [5] ont indiqué que le nombre de noeuds nécessaires à la conclusion N0 peut varier en fonction de la profondeur de l'invasion tumorale (T), la classification TNM nécessite la récupération et l'analyse d'au moins 15 ganglions lymphatiques pour la stadification précise. Cependant, dans la plupart des cas, le nombre de noeuds est disséqué plus petite et seulement 20 à 30% des patients ont une dissection minimale recommandée de 15 noeuds. indicateurs accessorial qui peuvent fournir des renseignements complémentaires sur le pronostic des patients atteints de cancer gastrique sont nécessaires.
fibroblaste Cancer-associé (CAF), l'une des cellules stromales importantes comprenant des tumeurs solides, a été trouvé à jouer un rôle de premier plan dans la promotion de la croissance tumorale et la progression [6]. Contrairement aux fibroblastes de repos, CAFs possèdent un phénotype activé et peuvent être identifiés par leur expression de spécifique à fibroblaste protein 1 (FSP1), vimentine, desmine, et l'actine α-muscle lisse [7]. CAFs communiquer entre eux ainsi qu'avec les cellules cancéreuses et les cellules inflammatoires et immunitaires directement par contact des cellules et indirectement par l'intermédiaire paracrine /signalisation exocrine, des protéases, et la modulation de la matrice extracellulaire (ECM). Ce réseau de communication complexe est essentiel pour fournir le microenvironnement approprié pour soutenir la tumorigenèse, l'angiogenèse et les métastases [8, 9]. En outre, par rapport aux cellules tumorales transformées, CAFs sont génétiquement plus homogènes [10] et il a été démontré par Gastavo et al que stroma réactif peut agir comme un facteur prédictif de récidive dans le cancer de la prostate [11], ce qui représente un prédicteur attrayant et cible thérapeutique pour les patients de la tumeur.
dans cette étude, nous avons recueilli 100 cas de spécimens de résection chirurgicale du cancer gastrique primaire, ainsi que les tissus normaux gastriques (plus de 5 cm loin de tissu tumoral) à partir de Janvier 2007 à Juin 2007 dans la deuxième médicale militaire Université affiliée hôpital Changhai (Shanghai, Chine). Immunochimie et RT-PCR expériences ont été réalisées pour comparer l'expression des protéines qui sont des marqueurs spécifiques de CAFs ou sécrétée par CAFs dans la tumeur et des spécimens de tissus normaux. L'étendue de la CAF de la prévalence a été classé en fonction de coloration immunochimique, et la corrélation a également été analysé entre CAFs de la prévalence et d'autres caractéristiques de la tumeur qui peuvent influer sur le pronostic des patients atteints de cancer gastrique.
Méthodes
cohorte Inscription
Cent les cas de patients atteints de cancer gastrique primaire ont été inscrits de Janvier 2007 à Juin 2007 à l'hôpital Changhai université médicale militaire Deuxième affilié. Tous les patients ont fourni un consentement éclairé. Les critères d'entrée pour cette étude comprennent: (a) aucun traitement de chimiothérapie préopératoire; (B) pathologiquement ou cytologique validé gastrique adénocarcinome; (C) âgés de 18-85 ans; (D) la vie >attendus; 3 mois; (E) WBC > 3,5 × 10 9 /L; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /L; Créatinine sérique pas plus de 1,25 fois la limite supérieure de la normale; GPT et ALP pas plus de 1,25 fois la limite supérieure de la normale; bilirubine totale pas plus de 1,5 fois la limite supérieure de la normale; PT < 12s; et (f) pas de maladie grave du système nerveux central.
analyse anatomopathologique
Tous les échantillons, y compris les tissus tumoraux et tissus gastriques normaux qui était plus de 5 cm loin de tissus tumoraux ont été fixés dans 10% de formaline dans les 30 minutes après résection chirurgicale. Paraffine sections de série embarqués (4 pm) ont été préparés. la différenciation de la tumeur a été caractérisée selon la classification de l'OMS (2000), tandis que la classification TNM a été fait selon l'Union internationale contre le cancer, cinquième édition (1997).
immunochimie de l'anticorps utilisé dans cette procédure comprend lapin anti-FSP1 anticorps polyclonaux ( Abcam, 01:50), souris-α-SMA anticorps monoclonal anti (Sigma, 1A4, 1: 200), le rat anti- procollagène I anticorps monoclonal (Chemicon, Mab1912, 1: 500), conjugué à la biotine de rat anti-IgG de souris un anticorps polyclonal (de eBioscience, 13-4013, 1: 100), souris anti-rat IgG polyclonal conjugué à la biotine (eBioscience, 13-4813, 1: 100) et de souris anti-IgG de lapin polyclonal conjugué à la biotine (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). l'analyse de l'immunochimie a été réalisée comme décrit précédemment [12]. En bref, des sections de paraffine ont été retirés de paraffinées dans le xylène et une série de solutions d'alcool graduées. Les sections ont ensuite été traitées avec 0,3% de peroxyde d'hydrogène (H2O2) dans de l'eau pendant 10 minutes pour étancher toute activité peroxydase endogène dans le tissu, et les sites de liaison non spécifiques ont été bloqués avec 0,5% de sérum albumine bovine (BSA) pendant 10 minutes à la température ambiante . Ensuite, les coupes ont été incubées pendant 15 minutes en présence de l'anticorps primaire, puis les lames ont été lavées dans du tampon phosphate salin (PBS) contenant 0,1% de Tween 20 (PBS /Tween) pendant 15 minutes tout en changeant la solution 3 fois avant l'application de l'anticorps secondaire biotinylé. Les lames ont été incubées avec l'anticorps secondaire pendant 15 minutes à température ambiante avant d'être lavée pendant 15 minutes dans du PBS /Tween qui a été modifié 3 fois. Les sections ont ensuite été incubées pendant 15 minutes avec un complexe avidine-peroxydase de raifort biotinylée, et la réaction visualisées en utilisant 0,02% de 3,3'-diaminobenzidine comme chromogène dans un tampon Tris-HCl, pH 7,6, contenant 0,03% de H2O2. Hématoxyline a été utilisé pour les noyaux contre-colorer.
L'analyse histologique
Pour évaluer le niveau de FSP1, α-SMA et procollagène-I expression, le pourcentage de cellules positives-coloration ont été notés sur une échelle de 0-3, avec moins de 5% de cellules positives à la coloration comme grade 0, 5-25% en grade 1, 26-50% en grade 2, et plus de 50% de grade 3. et l'intensité de la coloration également notés sur une échelle de 0- 2, avec négative à faible intensité de grade 0, faible à intensité modérée comme grade 1 et intensité modérée à forte au grade 2. Dix champs de forte puissance ont été choisis au hasard pour chaque diapositives et analysés par deux pathologistes indépendamment. Pour chaque marqueur, le score de pourcentage et l'intensité a été multipliée et les scores de ces trois marqueurs a été ajouté lorsque ces marqueurs ont été analysés conjointement. Et le score final entre 0-6 a été déterminée comme négatif (-), le score entre 7-9 a été déterminée comme positive faible (+), le score entre 10-12 a été déterminée comme positive modérée (++), et le score supérieur à 13 on a déterminé comme positif fort (+++) en temps réel L'ARN total de PCR de. on extrait à partir de tissus tumoraux ou normal par le réactif Trizol (Invitrogen) et l'ADNc du premier brin a été synthétisé en utilisant le kit RevertAid First Strand cDNA Synthesis ( Fermentas, USA) comme décrit précédemment [13]. PCR en temps réel a été réalisée en utilisant le LightCycler DNA Master SYBR Green I kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Allemagne) selon les instructions du fabricant. Les copies d'ADNc cible ont été normalisées par l'expression de GAPDH. Amorces pour FAP, SDF-1, le TGF-β1 et GAPDH ont été répertoriés comme suit:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5' AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
Pour chaque ADNc cible, les copies d'échantillons de tissus normaux on fait la moyenne, et les exemplaires de chaque échantillon de tissu tumoral est divisé par la moyenne, les résultats de ces trois ADNc cible est ajouté pour chaque échantillon de tissu tumoral. Si la somme est égale ou supérieure à 8, puis le tissu tumoral est considéré comme positif pour les EFC.
L'analyse statistique
données sont présentées en moyennes et les écarts types. Les analyses statistiques des données ont été analysées avec le test t de Student indépendant à deux queues et χ 2 analyse par SPSS 12.0. Le niveau de signification statistique a été fixé à P < Résultats de 0,05.
fibroblastes tumoraux réactifs étaient répandus dans les tissus de cancer gastrique Comment faire pour déterminer l'étendue de la prévalence de CAFs dans les tissus de cancer gastrique, paraffine sections intégrées de spécimens de tissus ont été préparées et colorées pour FSP1, α- SMA et de procollagène I expression tel que décrit ci-dessus. De plus, en temps réel-PCR a été effectuée pour déterminer le niveau de plusieurs protéines qui a été exprimé ou sécrétées par CAFs réactifs, comme FAP, SDF-1 et TGF-β1 expression.: Résultats de l'immunochimie coloration ont montré que les fibroblastes plus réactifs étaient présents dans les tissus du cancer de l'estomac que dans les tissus gastriques normaux. Vingt-quatre des 100 échantillons normaux étaient négatifs (-) pour les fibroblastes réactifs de coloration et 55 échantillons normaux étaient positifs faibles (+). Et le nombre de spécimens normaux qui étaient modérés (++) ou fortement positif (+++) était de 21 et 0, respectivement. Bien que concernant les tissus cancéreux, il y avait 13, 26, 25 et 36 échantillons qui étaient négatifs (-), faiblement positif (+), modérément positif (++) et fortement positif (+++) pour fibroblaste coloration, respectivement (figure 1a et la figure 1b). Et si des échantillons de tumeurs classées comme négatif ou faiblement positif ont été considérés comme négatifs, et modéré ou fort positif ont été considérés comme positifs, il y avait une différence significative entre la tumeur et les tissus normaux concernant le taux positif de CAFs (Fig 1c). Figure 1 Analyse de immunochimie de la note de la prévalence de CAFs dans la tumeur et les tissus gastriques normaux. sections de paraffine de tumeur chirurgicalement réséquée et les tissus normaux à partir des mêmes patients atteints de cancer gastrique (100 cas) ont été colorées pour FSP1, α-SMA et procollagène-1 expression et CAFs prévalence ont été classées en fonction du taux positif et l'intensité de la coloration immunochimique. Le nombre de tumeurs ou des échantillons de tissus normaux comme graduées -, +, ++ et +++ a été comparée (a). Et la distribution de ces quatre catégories de la prévalence de CAFs dans la tumeur ou 100 échantillons de tissus normaux ont été analysés (b). Année - et + a été considéré comme négatif, bien que la nuance ++ et +++ a été considéré comme positif pour CAFs la prévalence, le nombre de la tumeur ou des échantillons de tissus normaux qui était positif ou négatif pour la prévalence de CAFs a été comparée (c).
pour l'expression de l'ARNm des protéines, les résultats montrent que le niveau de toutes ces protéines d'expression ont été élevés dans des échantillons de tumeurs par rapport à ceux-ci dans les tissus normaux. Prenant FAP, par exemple, le niveau d'expression de l'ARNm du PAF dans les échantillons de tumeur était de 4 fois plus élevé que dans les tissus normaux (figure 2a). Il y avait aussi 3 fois l'élévation du niveau d'expression de l'ARNm en ce qui concerne le SDF-1 (figure 2b) ou le TGF-β1 (figure 2c). Figure 2 Analyse en temps réel-PCR des protéines sécrétées par CAFs dans la tumeur et les tissus gastriques normaux. L'ARN total a été extrait et l'ADNc a été préparé à partir d'une tumeur réséquée chirurgicalement et les tissus normaux à partir des mêmes patients atteints de cancer gastrique (100 cas). En temps réel, la PCR a été réalisée pour comparer le niveau du PAF (a), le SDF-1 (b) et le TGF-β1 (c) l'expression dans les tissus tumoraux et normaux, les deux premières voies de l'électrophorégramme représentés les tissus normaux et les deux derniers les voies représentées les tissus tumoraux. *: P < 0,01.
A partir de ces résultats, nous pouvons conclure que les CAFs réactifs étaient répandus dans les tissus tumoraux gastriques et secrète niveau élevé de protéines qui se sont révélées être essentiel pour la croissance de la tumeur, l'invasion et les métastases. La prévalence de
CAFs était étroitement liées aux propriétés invasives et métastatiques de tumeur
gastrique pour déterminer si le grade de CAFs de la prévalence peut être servi comme un prédicteur pour le pronostic des patients atteints de cancer gastrique, l'analyse de corrélation a été réalisée entre le grade de CAFs de la prévalence et de l'autre clinicopathologique les paramètres de cancers gastriques. échantillons de tumeur classés comme négatif ou faiblement positif ont été considérés comme négatifs, et modéré ou fort positifs ont été considérés comme positifs dans ces analyses. les caractéristiques du patient et de la tumeur ont été décrits dans le tableau 1. On peut trouver aussi dans le tableau 1 qu'il n'y avait pas de corrélation entre la prévalence et l'âge CAFs, le sexe du patient ou de l'emplacement de la tumeur. Il y avait une augmentation de la prévalence de CAFs lorsque la différenciation de la tumeur a diminué de bien différencié (43,75%) à peu différenciés (64,00%), tandis que le taux positif de CAFs dans le cancer gastrique indifférenciée est seulement 26,67%, bien inférieur à celui de bien ou cancers gastriques peu différenciés, donc nous ne pouvions pas trouver la corrélation entre la prévalence et la tumeur de la différenciation des CAFs (P = 0,56). Bien que concernant la taille de la tumeur, la profondeur de la tumeur (T) et métastase ganglionnaire (N), il a montré une corrélation statistiquement significative entre la prévalence de la CAF et ces caractéristiques de la tumeur, avec un taux plus élevé positif de CAFs dans les tumeurs plus grandes, plus de tumeurs invasives et les tumeurs avec plus métastase ganglionnaire. Aussi, nous pouvons trouver que le taux positif de CAFs était élevée dans les cancers gastriques avec métastases hépatiques (P < 0,01) ou métastases péritoine (P < 0,01) .Table 1 patient et de la tumeur caractéristiques et leur relation avec CAFs prévalence

N
positif pour CAFs N (%) P
valeur
Age (année)
2.77a
≤60
47
22 (46,81)
> 60
53
29 (54,72)
Homme de sexe
5.11a
57
32 (56.14)
43
19 (44.19)
Localisation Femme de la tumeur
1.35B
l'extrémité proximale de l'estomac (1/3)
13
9 (69,23)
corps gastrique (1/3)
19
9 (47,37)
fin à distance de l'estomac (1/3)
51
22 (43.14)
Plus de 1/3 de l'estomac impliqué
17
11 (64.71) tumeur
différenciation
0.56b
bien différencié
16
7 (43,75)
modéré différencié
44
24 (54.55)
mal différencié
25
16 (64.00)
indifférencié
15
4 (26,67 )
Tumor taille
0.02A
≤5 cm
62
16 (35.48)
> 38
29 (76.32)
Profondeur
5 cm de la tumeur (T)
0.03b
Tis 4
1 (25.00)
T1
13
5 (38.46)
T2
39
19 (48.72)
26
15 (57.69)
T4
18
11 (61.11)
métastase ganglionnaire (N)
T3
< 0,01 un
N0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64,81)
métastases hépatiques
< 0.01A
Oui
12
9
Non
88
42
péritoine métastase
< 0.01A
Oui
9
7 (77.77)
Non
91
44 (48.35)
TNM Stade
< 0.01b
IA
15
3 (20)
IB
7
2 (28.57)
II
19
6 (31.58)
IIIA
23
11 (47.83)
IIIB
15
8 (53.33)
IV
21
14 (66.67)
a: test exact de Fisher; b: Chi-Square Tests
En outre, dans la situation de la métastase des tumeurs, quel que soit des ganglions lymphatiques métastases, des métastases à distance ou d'une métastase d'organes, le pourcentage positif pour CAFs est beaucoup plus élevé que chez ceux sans métastases (71,93% vs 25,58% P < 0,01) (figure 3). Figure 3 Le pourcentage d'échantillons de tumeur qui est positif ou négatif pour la prévalence de CAFs dans le groupe de patients avec ou sans métastases tumorales. Les échantillons de tumeurs ont été regroupés en fonction de savoir si oui ou non les patients atteints de cancer gastrique avaient des métastases tumorales (quel que soit métastase ganglionnaire, métastases à distance ou d'une métastase d'organes). Et le pourcentage des spécimens qui était positif (grade - ou + selon la coloration immunochimique) ou négative (grade ++ ou +++ selon la coloration immunochimique) pour la prévalence de CAFs a été analysée (a). Et la coloration immunochimique de α-SMA a été montré dans le tissu gastrique normal, un tissu de cancer gastrique sans métastases et de tissu de cancer gastrique avec métastases (b). Hôtels et nous avons également analysé la corrélation entre le niveau de PAF de l'ARNm, SDF-1 et le TGF-β1 et le stade du cancer gastrique. Le niveau de ces protéines ont été marqués comme décrit dans les méthodes et les échantillons de tissus tumoraux ont été déterminés à être positif si le score est égal ou supérieur à 8. Il a été constaté que le pourcentage positif est beaucoup plus élevé dans les grandes tumeurs (> 5 cm, 32/38) que dans les petites tumeurs (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). Et le pourcentage positif dans des échantillons de tumeurs de stade TNM IA, IB, II, IIIA, IIIB et IV sont de 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) et 76,2 (16/21), respectivement, montrant que la prévalence de la CAF est étroitement corrélée avec les stades de cancer gastrique (p < 0,01). Ces résultats suggèrent fortement que la prévalence de CAFs pourrait aider à établir le stade du cancer gastrique et peut être utilisé comme marqueur pour le pronostic des patients atteints de cancer gastrique.
Discussion
études récentes en biologie moléculaire et cellulaire ont montré que la croissance de la tumeur et les métastases ne sont pas déterminées par des cellules cancéreuses seul, mais aussi par une variété de cellules stromales [14, 15]. Le stroma fournit un soutien continu activement à des cellules de carcinome à travers les différents processus pathophysiologiques qui modulent la progression tumorale. Les fibroblastes sont une composante importante de stroma tumoral, qui ont reçu une attention accrue en raison de leur participation au développement de tumeurs, y compris la croissance, l'invasion et les métastases, tels que le cancer de la prostate [16, 17] ou d'un cancer du sein [18, 19]. Il a également été démontré dans un estomac modèle de souris cancéreuses qui activés fibroblastes favorisent l'angiogenèse tumorale [20], et il est compatible avec les résultats out qui ont activé les fibroblastes ont été accumulés dans les tissus de cancer gastrique humain.
Le terme fibroblaste englobe un certain nombre de stroma cellules avec un phénotype globalement similaire. La plupart des tumeurs incorporent, un type cellulaire évidente biologiquement actif fibroblastique connu sous les fibroblastes réactifs, myofibroblastes ou fibroblastes simplement associé à une tumeur. muscle lisse α-actine (α-SMA) est le marqueur le plus couramment utilisé pour identifier CAFs, tandis que son expression peut également être trouvée dans les cellules musculaires lisses et des cellules myoépithéliales [21]. Ainsi, d'autres marqueurs doivent être utilisés en combinaison avec des α-SMA pour identifier EFC. spécifiques à la protéine 1 fibroblaste (FSP1, S100A4), un membre de la famille des protéines S100 Ca 2+ de liaison d'constitutivement exprimé dans le cytoplasme des fibroblastes de tissu, et son expression est hautement spécifique pour les fibroblastes [22, 23]. Il est largement admis à combiner un SMA et FSP1 pour l'identification des fibroblastes associés à des tumeurs. Et dans notre expérience, nous avons également utilisé un troisième marqueur, procollagène I, pour identifier les CAFs réactifs avec la production de composants de la matrice extracellulaire.
Nous avons également détecté le niveau d'expression de l'ARNm d'autres protéines qui est exprimé ou sécrétées par CAFs. FAP est une protéine de type II de surface cellulaire transmembranaire appartenant à la famille de la dipeptidyl aminopeptidase de post-proline, avec la dipeptidylpeptidase et l'activité d'endopeptidase, y compris une activité collagénolytique capable de dégrader la gélatine et le collagène de type I [24, 25]. FAP est exprimé sélectivement par CAFs et péricytes dans plus de 90% des cancers épithéliaux humains examinés [26-30] et de la recherche a été rapporté dans un modèle animal montrant un effet thérapeutique en inhibant l'expression de FAP ou une activité enzymatique [31]. La prochaine protéine, nous avons choisi de détecter est SDF-1, qui est sécrété par CAFs et stimule la prolifération des cellules tumorales, l'angiogenèse, l'invasion et les métastases à travers le récepteur CXCR4 exprimé par les cellules tumorales [32-34]. Une autre protéine sécrétée, nous avons détecté est le TGF-β1, ce qui est un puissant inducteur de la différenciation des myofibroblastes [35], et peut jouer un rôle dans la tumeur en cascade invasion de métastases [36]. Les résultats de la présente étude ont montré que ces protéines étaient régulés à la hausse dans les tissus de cancer gastrique, ce qui suggère leur rôle potentiel dans la promotion de la progression du cancer gastrique.
Le cancer gastrique est la deuxième cause de mortalité associé au cancer dans le monde. Pronostic chez les patients atteints de cancer gastrique est difficile à établir car il est communément diagnostiquée lorsque l'invasion de la paroi gastrique et les métastases ont eu lieu. Plusieurs groupes ont tenté de trouver des biomarqueurs pour le pronostic du cancer gastrique. Par exemple, l'expression de plusieurs métalloprotéinases de la matrice extracellulaire (MMP-2, 7, 9) a été trouvé être élevée dans les tissus du cancer de l'estomac par rapport à des tissus sains gastriques. Et la régulation positive de ces MMP dans le cancer gastrique a été associée à un mauvais pronostic et élevé la capacité invasive [37]. Un autre exemple est le facteur de croissance 1 récepteur de l'insuline (IGF-1R), il a été fréquemment exprimée dans les cancers gastriques et a été associée à la taille de la tumeur, la quantité de stroma, profondeur de l'invasion de la paroi, métastases ganglionnaires, stade TNM et l'état de différenciation des cancer gastrique [38]. Et VEGF-C expression des marges tumorales a également été associée à une métastase ganglionnaire, l'invasion des vaisseaux lymphatiques, faible taux de survie sans récidive et la survie globale pauvres, et pourrait servir comme un facteur prédictif indépendant pour les patients atteints d'un carcinome gastrique [39]. Nous pouvons trouver que ces prédicteurs sont soit des protéines sécrétées par CAFs ou récepteurs exprimés par les cellules tumorales qui lient les protéines sécrétées par CAFs, de sorte que ces indices peuvent suggérer que la prévalence de la CAF dans les tissus de cancer gastrique sera un prédicteur important de patients atteints de cancer gastrique. Et nos résultats ont confirmé que la prévalence de la CAF a été étroitement associée au potentiel métastatique du cancer gastrique, et d'autres travaux doit être fait pour confirmer la corrélation entre la prévalence et la survie des patients atteints de cancer gastrique de CAFs.
Conclusions
Nos résultats rapport ici démontrent que le cancer associé fibroblastes réactifs (CEFA) ont souvent été accumulés dans les tissus de cancer gastrique, et la prévalence de la CAF a été corrélée avec la taille de la tumeur, la profondeur de la tumeur et les métastases de la tumeur ainsi que la scène globale TNM, ce qui suggère que CAFs étaient critiques pour la croissance de la tumeur, l'invasion et les métastases, donner ainsi des supports pour le pronostic des patients atteints de cancer gastrique
abréviations
CAFs:.
fibroblastes associés à des tumeurs
FAP:
protéine d'activation des fibroblastes
SDF-1:
stromal-cell facteur dérivé 1
TGF-β1:
facteur de croissance transformant bêta 1
ECM:
matrice extracellulaire
WBC:
globules blancs count

PLT:
numération plaquettaire
Hb:
hémoglobine
GPT:
transaminase glutamique-pyruvique
ALP:
phosphatase alcaline
PT:
temps de prothrombine

CNS:
système de nerfs centrale
α-SMA: actine
α-muscle lisse
FSP1:
fibroblaste protéine spécifique 1
GAPDH:
glycéraldéhyde phosphate déshydrogénase
MMP:
métalloprotéinase matricielle

VEGF:.
facteur de croissance vasculaire endothéliale
Déclarations de les Remerciements
Nous tenons à remercier le professeur Li Gao dans le département de la pathologie de l'hôpital Changhai et le Dr Ni Zhu dans le laboratoire central de l'hôpital Changhai pour leurs supports techniques d'experts pour les expériences. Ce travail a été soutenu par la National Science Foundation naturel de Chine (30672046).
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Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts.

• Mise en place et la caractérisation d'un modèle de métastases du cancer gastrique humain chez la souris nude
• Détection des sentinelles et non-sentinelles micrométastases des ganglions lymphatiques par tronçonnage série complète et analyse immunohistochimique pour le cancer gastrique