fibroblastos asociados al cáncer se correlacionan positivamente con el potencial metastásico de los cánceres gástricos humanos

fibroblastos asociados al cáncer se correlacionan positivamente con el potencial metastásico de los cánceres gástricos humanos
Resumen Antecedentes
Francia El pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico es difícil de predecir debido a defectos en el establecimiento de las características quirúrgico-patológicos. fibroblastos asociados al cáncer (CAF) se han encontrado para desempeñar un papel destacado en la promoción del crecimiento tumoral, invasión y metástasis. De este modo se plantea la hipótesis de que el grado de prevalencia CAF puede ayudar a establecer el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
Métodos
inmunoquímica y los experimentos en tiempo real-PCR se llevaron a cabo para comparar la expresión de proteínas que son marcadores específicos de CAF o secretada por CAF en el tumor y las muestras de tejido normal. La extensión de la CAF 'prevalencia fue clasificado de acuerdo a la tinción inmunoquímica, y la correlación se analizó adicionalmente entre CAF' prevalencia y otras características del tumor que pueden influir en el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
Resultados
Casi el 80 por ciento de los tejidos gástricos normales fueron negativos o débilmente positivo para la tinción CAF, mientras que más del 60 por ciento de los tejidos de cáncer gástrico fueron moderadas o fuertes positivo para la tinción de los CAF. resultados en tiempo real-PCR también mostraron elevada expresión significativa de FAP, SDF-1 y TGF-β1 en los tejidos de cáncer gástrico en comparación con los tejidos gástricos normales. Un análisis posterior mostró que la prevalencia del CAF 'se correlaciona con el tamaño del tumor, la profundidad del tumor, metástasis a los ganglios linfáticos, metástasis en el hígado o metástasis peritoneo.
Conclusiones
cáncer asociado fibroblastos reactivos (CAF) se acumulan con frecuencia en tejidos de cáncer gástrico, y la prevalencia de los CAF se correlaciona con el tamaño del tumor, la profundidad de la metástasis del tumor y el tumor, por lo tanto dar algunos apoyos para establecer el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
Antecedentes
el cáncer gástrico es la segunda causa principal de cáncer- muerte relacionada con el mundo [1]. Existen variaciones geográficas en la incidencia de cáncer gástrico y representa el tipo de cáncer más común en China [2]. Cada vez son más los pacientes con cáncer gástrico han sido diagnosticados en los últimos años con el cambio de dieta y estilo de vida, así como el desarrollo de los procedimientos de diagnóstico. Aunque el tratamiento quirúrgico ha demostrado ser eficaz para algunos cánceres gástricos tempranos, incluyendo gastrectomía total y gastrectomía radical extendida, el pronóstico de estos pacientes es pobre debido a la recurrencia después de la cirugía, en forma de diseminación linfática, metástasis por vía sanguínea o peritoneal difusión [3]. comentario el pronóstico de pacientes con cáncer gástrico ha demostrado ser influenciado por varias características quirúrgicas-patológico establecidos, tales como el estadio patológico, la ubicación del tumor y el tipo histológico y el grado del tumor [ ,,,0],4]. Mientras Aurello et al. [5] han indicado que el número de nodos necesarios para concluir N0 puede variar según la profundidad de la invasión tumoral (T), la clasificación TNM requiere la recuperación y el análisis de al menos 15 ganglios linfáticos para la estadificación precisa. Sin embargo, en la mayoría de los casos, el número de nodos diseccionado es más pequeño y sólo del 20 al 30% de los pacientes tienen la disección mínima recomendada de 15 nodos. Se necesitan indicadores accesorias que pueden proporcionar más información del pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
fibroblastos asociada al cáncer (CAF), una de las células del estroma importantes que comprenden los tumores sólidos, se ha encontrado que jugar un papel destacado en la promoción del crecimiento tumoral y progresión [6]. En contraste con los fibroblastos de descanso, CAF poseen un fenotipo activado y se pueden identificar por su expresión de la proteína de fibroblastos específico 1 (FSP1), vimentina, desmina, actina y α-músculo liso [7]. CAF se comunican entre sí, así como con las células cancerosas y las células inflamatorias e inmunes directamente a través del contacto célula e indirectamente a través paracrina /señalización exocrina, proteasas, y la modulación de la matriz extracelular (ECM). Esta red de comunicaciones complejo es fundamental para proporcionar el microambiente apropiado para apoyar la tumorigénesis, la angiogénesis y la metástasis [8, 9]. Además, en comparación con células tumorales transformadas, CAF son genéticamente más homogéneas [10] y se ha demostrado por Gastavo et al que estroma reactivo puede actuar como un predictor de recurrencia en el cáncer de próstata [11], por lo tanto representan un factor de predicción atractivo y diana terapéutica para pacientes con tumores.
en este estudio, se recogieron 100 casos de especímenes de resección quirúrgica de cáncer gástrico primario, así como los tejidos gástricos normales (más de 5 cm lejos de tejido tumoral) entre enero de 2007 y junio de 2007 en la Segunda Médico Militar Universidad afiliada Changhai Hospital (Shanghai, china). Inmunoquímicos y RT-PCR se llevaron a cabo experimentos para comparar la expresión de proteínas que son marcadores específicos de CAF o secretada por CAF en el tumor y las muestras de tejido normal. La extensión de la CAF 'prevalencia fue clasificado de acuerdo a la tinción inmunoquímica, y la correlación se analizó adicionalmente entre CAF' prevalencia y otras características del tumor que pueden influir en el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
Métodos
Cohorte de Inscripción
Ciento casos de pacientes con cáncer gástrico primario se inscribieron entre enero de 2007 junio de 2007 en el hospital Changhai Segunda Universidad médica Militar afiliado. Todos los pacientes han proporcionado un consentimiento informado por escrito. Los criterios de ingreso para este estudio incluyen: (a) ningún tratamiento quimioterapia preoperatoria; (B) validado patológicamente o citología gástrica-adenocarcinoma; (C) con edades comprendidas entre 18-85 años; (D) espera que la vida > 3 meses; (E) del CMB > 3,5 × 10 9 /L; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /L; Creatinina sérica no más de 1,25 veces el límite superior de lo normal; GPT y ALP no más de 1,25 veces el límite superior de lo normal; La bilirrubina total no más de 1,5 veces el límite superior de lo normal; PT < 12s; y (f) sin enfermedad del SNC grave.
análisis patológico
Todas las muestras que incluyen tejidos tumorales y tejidos normales gástricas, que era más de 5 cm lejos de los tejidos tumorales fueron fijadas en formol al 10% dentro de los 30 minutos después de la resección quirúrgica. Se prepararon secciones seriadas embebidos en parafina (4 m). la diferenciación del tumor se caracteriza de acuerdo con la clasificación de la OMS (2000), mientras que la clasificación TNM se realiza de acuerdo con la Unión Internacional contra el Cáncer, quinta edición (1997).
Inmunoquímica
anticuerpo utilizado en este procedimiento incluye conejo anti-FSP1 anticuerpo policlonal ( Abcam, 01:50), anticuerpo de ratón anti-α-SMA monoclonal (Sigma, 1A4, 1: 200), de rata anti-procolágeno I anticuerpo monoclonal (Chemicon, Mab1912, 1: 500), de rata conjugado con biotina anti-ratón IgG anticuerpo policlonal (eBioscience, 13-4013, 1: 100), ratón anti-rata anticuerpo IgG policlonal conjugado con biotina (eBioscience, 13 a 4813, 1: 100) y el anticuerpo IgG policlonal de conejo anti-ratón conjugado con biotina (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). Se realizó un análisis inmunoquímica como se describe anteriormente [12]. Brevemente, las secciones de parafina se de-con parafina en xileno y una serie de soluciones de alcohol graduadas. Las secciones se trataron a continuación con peróxido de hidrógeno 0,3% (H2O2) en agua durante 10 minutos para inactivar cualquier actividad peroxidasa endógena dentro del tejido, y los sitios de unión no específicos se bloquearon con 0,5% de albúmina de suero bovino (BSA) durante 10 minutos a temperatura ambiente . A continuación, las secciones se incubaron durante 15 minutos en presencia del anticuerpo primario y, a continuación los portaobjetos se lavaron en solución salina tamponada con fosfato (PBS) que contiene 0,1% de Tween 20 (PBS /Tween) durante 15 minutos mientras se cambia la solución 3 veces antes la aplicación del anticuerpo biotinilado secundario. Los portaobjetos se incubaron con el anticuerpo secundario durante 15 minutos a temperatura ambiente antes de ser lavados durante 15 minutos en PBS /Tween que se cambió 3 veces. Las secciones se incubaron a continuación durante 15 minutos con un complejo de peroxidasa de rábano con avidina biotinilado, y la reacción visualizaron utilizando 0,02% de 3,3'-diaminobenzidina tetrahidrocloruro como cromógeno en un tampón de Tris-HCl, pH 7,6, que contiene 0,03% de H2O2. Hematoxilina se utilizó para contrateñir los núcleos.
El análisis histológico
Para evaluar el nivel de FSP1, α-SMA y la expresión de procolágeno-I, el porcentaje de células con tinción positiva se calificaron en una escala de 0-3, con menos de 5% de células-tinción positiva como de grado 0, 5-25% como grado 1, 26-50% como grado 2, y más de 50% como grado 3. y la intensidad de la tinción también clasifican en una escala de 0- 2, con el negativo de intensidad débil como el grado 0, débil a moderada intensidad como grado 1, y de moderada a fuerte intensidad como de grado 2. se seleccionaron diez campos de alta potencia al azar para cada portaobjetos y se analizaron de forma independiente por dos patólogos. Para cada marcador, la puntuación de porcentaje y la intensidad se multiplicó y se añadieron las calificaciones de estos tres marcadores cuando estos marcadores se analizó conjuntamente. Y la puntuación final entre 0-6 se determinó como negativo (-), puntuación entre 7-9 se determinó como débilmente positivo (+), puntuación entre 10-12 se determinó como positiva moderada (++), y la puntuación más alta que 13 se determinó como positiva fuerte (+++).
Realtime-PCR
ARN total fue extraído de tumores o tejidos normales por el reactivo Trizol (Invitrogen) y cDNA de primera cadena se sintetizó usando el kit RevertAid Primera Strand cDNA Synthesis ( Fermentas, EE.UU.) como se describe anteriormente [13]. En tiempo real PCR se realizó utilizando LightCycler DNA Maestro SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las copias de ADNc diana se normalizaron por la expresión GAPDH. Los cebadores para la FAP, SDF-1, TGF-β1 y GAPDH se enumeran de la siguiente manera:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5' AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
Para cada ADNc diana, las copias de las muestras de tejidos normales se promedian y las copias de cada muestra de tejido tumoral se divide por la media, a continuación, se añaden los resultados de estos tres ADNc objetivo para cada muestra de tejido tumoral. Si la suma es igual o mayor que 8, entonces el tejido tumoral se considera que es positivo para los CAF.
El análisis estadístico
datos se muestran como medias y desviaciones estándar. Los análisis estadísticos de los datos se analizaron con la prueba t de Student de dos colas independientes y χ 2 Análisis por SPSS 12.0. El nivel de significación estadística se estableció en p < 0.05.
: Resultados de la reactivas fibroblastos asociados a tumores eran frecuentes en los tejidos de cáncer gástrico
Para determinar el grado de prevalencia CAF 'en tejidos de cáncer gástrico, se prepararon y se tiñeron para FSP1 parafina secciones embebidas de muestras de tejido, α- SMA y la expresión de procolágeno I como se describe anteriormente. Además, en tiempo real-PCR se llevó a cabo para determinar el nivel de expresión de varias proteínas que se expresan o secretadas por CAF reactivos, tales como FAP, SDF-1 y TGF-β1.
Resultados de la tinción inmunoquímica mostraron que los fibroblastos más reactivos Estuvieron presentes en tejidos de cáncer gástrico que los tejidos normales gástricas. Veinticuatro de las 100 muestras normales fueron negativas (-) para los fibroblastos reactivos de tinción y 55 especímenes normales eran débilmente positivo (+). Y el número de especímenes normales que eran moderada (++) o positivo fuerte (+++) eran 21 y 0, respectivamente. Mientras que en relación con los tejidos de cáncer, había 13, 26, 25 y 36 muestras que fueron negativas (-), débilmente positivo (+), positiva moderada (++) y positiva fuerte (+++) para la tinción de fibroblastos, respectivamente (Figura 1a y la figura 1b). Y si las muestras de tumor clasificado como negativo o positivo débil eran considerados como negativos, y moderado o positivo fuerte fueron considerados como positivos, hubo una diferencia significativa entre el tumor y los tejidos normales relativos a la tasa positiva de los CAF (figura 1c). Figura 1 Análisis de inmunoquímica del grado de prevalencia CAF 'en el tumor y los tejidos normales gástricas. Las secciones en parafina de tumor resecado quirúrgicamente y los tejidos normales de los mismos pacientes con cáncer gástrico (100 casos) se tiñeron para FSP1, α-SMA y procolágeno-1 de expresión y CAF prevalencia fue clasificado de acuerdo a la tasa positiva y la intensidad de la tinción inmunoquímica. se comparó, +, ++ y +++ (a) - El número de muestras de tejido normales clasificado como tumor o. Y se analizó la distribución de estos cuatro grados de prevalencia CAF 'en el tumor o 100 muestras de tejidos normales (b). Grado - y + era considerado como negativo, mientras que el grado ++ y +++ fue considerada como positiva para la prevalencia de los CAF, a continuación, se comparó el número del tumor o muestras de tejidos normales que era positivo o negativo para la prevalencia de los CAF '(c).
para la expresión de ARNm de las proteínas, los resultados mostraron que el nivel de expresión de todas estas proteínas estaban elevados en las muestras de tumor en comparación con estos en tejidos normales. Tomando FAP como un ejemplo, el nivel de expresión de ARNm de FAP en muestras de tumor fue de 4 veces mayor que en los tejidos normales (Fig 2a). Y también había 3 veces la elevación del nivel de expresión de mRNA en relación con SDF-1 (Figura 2b) o TGF-β1 (figura 2c). La figura 2 el análisis en tiempo real-PCR de proteínas secretadas por CAF en el tumor y los tejidos gástricos normales. El ARN total fue extracto y de ADNc se preparó a partir del tumor resecado quirúrgicamente y los tejidos normales de los mismos pacientes con cáncer gástrico (100 casos). Realtime-PCR se llevó a cabo para comparar el nivel de expresión de FAP (a), SDF-1 (b) y el TGF-β1 (c) en los tejidos tumorales y normales, los dos primeros carriles de la electroforetograma representados los tejidos normales y los dos últimos carriles representados los tejidos tumorales. *: P < 0.01.
A partir de estos resultados, se puede concluir que los CAF reactivos eran frecuentes en los tejidos tumorales gástricas y de alto nivel secreto de las proteínas que han demostrado ser esenciales para el crecimiento tumoral, invasión y metástasis. Prevalencia
CAF estaba estrechamente relacionados con propiedades invasivas y metastásicas de tumor gástrico
para determinar si el grado de prevalencia CAF 'se puede servir como un predictor para el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico, el análisis de correlación se llevó a cabo entre el grado de prevalencia CAF' y otra clinicopatológica parámetros de cáncer gástrico. las muestras de tumor clasificado como negativo o positivo débil eran considerados como negativos, y moderado o positivo fuerte fueron considerados como positivos en estos análisis. Características de los pacientes y de los tumores se describen en la Tabla 1. También podemos encontrar en la Tabla 1 que no había correlación entre la prevalencia CAF 'y ​​la edad, el sexo del paciente o de la ubicación del tumor. Hubo un aumento de la prevalencia de los CAF 'cuando la diferenciación del tumor disminuyó de bien diferenciado (43,75%) a pobremente diferenciado (64,00%), mientras que la tasa positiva de CAF en el cáncer gástrico indiferenciado sólo 26,67%, mucho menor que en así cánceres gástricos o pobremente diferenciados, por tanto, no se encontró correlación entre la prevalencia y la diferenciación del tumor, las CAF '(P = 0,56). Mientras que en relación con el tamaño del tumor, la profundidad del tumor (T) y de los ganglios linfáticos de metástasis (N), no mostraron correlación estadísticamente significativa entre la prevalencia de los CAF y estas características del tumor, con mayor tasa positiva de CAF en los tumores de mayor tamaño, los tumores más invasivos y tumores con metástasis en los ganglios linfáticos más. También podemos encontrar que la tasa positiva de los CAF fue alta en el cáncer gástrico con metástasis hepáticas (P < 0,01) o metástasis peritoneal (P < 0,01) .Tabla 1 paciente y del tumor características y su relación con los CAF prevalencia
N

positiva para CAF N (%)
valor de p
Edad (años)
2.77a
≤60
47
22 (46.81) Hotel > 60
53
29 (54.72) Sexo seguro
5.11a
Hombre
57
32 (56.14)
Mujer
43 página 19 (44.19)
localización del tumor
1.35b
extremo proximal del estómago (1/3) página 13 página 9 (69,23)
cuerpo gástrico (1/3) página 19 página 9 (47.37)
extremo remoto del estómago (1/3)
51
22 (43.14)
Más de 1/3 del estómago involucrados
17 página 11 (64.71)
tumor diferenciación
0.56b
Bien diferenciado
16
7 (43.75)
moderado diferenció
44
24 (54.55)
pobremente diferenciado
25
16 (64.00)
indiferenciado
15 página 4 (26.67 )
El tamaño del tumor
0.02A
≤5 cm
62
16 (35.48) Hotel > 5 cm
38
29 (76.32)
Profundidad del tumor (T)
0.03b
Tis
4 de 1 (25.00)
T1 página 13 página 5 (38.46)
T2
39
19 (48.72)
T3
26
15 (57.69)
T4
18 página 11 (61.11)
metástasis de ganglios linfáticos (N) Hotel < 0,01 un
N0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64.81)
metástasis de hígado Hotel < 0.01a
Sí
12 página 9
Sin
88
42
peritoneo metástasis Hotel < 0.01a
Sí página 9 página 7 (77.77) Sin

91
44 (48.35)
estadio TNM Hotel < 0.01b
IA
15 página 3 (20)
IB página 7 página 2 (28.57)
II página 19 página 6 (31.58)
IIIA
23 página 11 (47.83)
IIIB
15 página 8 (53.33)
IV
21 página 14 (66,67)
una: la prueba exacta de Fisher; b: Pruebas de Chi-cuadrado de
Además, en la situación de la metástasis tumoral, cualquiera que sea metástasis de ganglios linfáticos, metástasis a distancia o metástasis de órganos, el porcentaje de positivos para los CAF es mucho mayor que en aquellos sin metástasis (71,93% vs 25,58% , P < 0,01) (Fig 3). Figura 3 El porcentaje de muestras de tumor que era positivo o negativo para la prevalencia de los CAF 'en el grupo de pacientes con o sin metástasis tumoral. Las muestras de tumores se agruparon según si los pacientes con cáncer gástrico tenían metástasis del tumor (metástasis de ganglios linfáticos lo que sea, metástasis a distancia o metástasis de órganos). Y el porcentaje de las muestras que fue positiva - se analizó (grado o + de acuerdo con la tinción inmunoquímica) o negativo (grado ++ o +++ según la tinción inmunoquímica) para la prevalencia CAF '(a). Y la tinción inmunoquímica de α-SMA se demostró en el tejido gástrica normal, el tejido de cáncer gástrico y sin metástasis y el tejido de cáncer gástrico con metástasis (b).
Y también se analizó la correlación entre el nivel de ARNm de FAP, SDF-1 y TGF-β1 y la etapa del cáncer gástrico. El nivel de estas proteínas se obtuvo como se describe en los métodos y las muestras de tejido tumoral se determinó que eran positivos si la puntuación es igual o mayor que 8. Se encontró que el porcentaje positivo es mucho alta en tumores grandes (> 5 cm, 32/38) que en tumores pequeños (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). Y el porcentaje de positivos en muestras de tumores en estadio TNM IA, IB, II y IIIA, IIIB y IV son el 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), el 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) y 76,2 (16/21), respectivamente, que muestran que la prevalencia de los CAF se correlaciona estrechamente con las etapas de cáncer gástrico (p < 0,01). Estos resultados sugieren fuertemente que la prevalencia del CAF 'podría ayudar a establecer la etapa del cáncer gástrico y podría ser utilizado como un marcador para el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico.
Discusión
Estudios recientes en biología molecular y celular han demostrado que el crecimiento tumoral y la metástasis no están determinadas por las células del cáncer solos sino también por una variedad de células del estroma [14, 15]. El estroma proporciona activamente apoyo continuo a células de carcinoma a través de los diferentes procesos fisiopatológicos que modulan la progresión del tumor. Los fibroblastos son un componente importante del estroma del tumor, que han recibido una mayor atención debido a su participación en el desarrollo de tumores, incluyendo el crecimiento, invasión y metástasis, como por ejemplo en el cáncer de próstata [16, 17] o cáncer de mama [18, 19]. También se ha demostrado en un modelo de ratón de cáncer gástrico que activan los fibroblastos promueven la angiogénesis del tumor [20], y es consistente con los resultados que activan los fibroblastos se acumulan en los tejidos de cáncer gástrico humano. México La expresión de fibroblastos abarca una serie de estroma células con un fenotipo similar en términos generales. La mayoría de los tumores incorporan un tipo biológicamente activo, fibroblástica célula conocida indistintamente como fibroblastos, miofibroblastos, reactivos o fibroblastos simplemente asociados a tumores obvio. Músculo liso α-actina (α-SMA) es el marcador más común utilizada para identificar los CAF, mientras que su expresión también se puede encontrar en las células de músculo liso y células mioepiteliales [21]. Así otros marcadores deben utilizarse en combinación con α-SMA para identificar los CAF. proteína-fibroblastos específico 1 (FSP1, S100A4), un miembro de la familia de unión a Ca2 + proteínas S100, constitutivamente expresada en el citoplasma de los fibroblastos de tejidos, y su expresión es altamente específico para fibroblastos [22, 23]. Es ampliamente aceptado para combinar un-SMA y FSP1 para la identificación de los fibroblastos asociados a tumores. Y en nuestro experimento, que también se utiliza un tercer marcador, procolágeno I, para identificar los CAF reactivos con la producción de componentes de la matriz extracelular.
También se detectó el nivel de expresión de ARNm de otras proteínas que se expresan o secretadas por los CAF. FAP es una proteína de tipo II de la superficie celular de transmembrana que pertenece a la familia de la dipeptidil aminopeptidasa post-prolina, con la dipeptidil peptidasa y la actividad endopeptidasa, incluyendo una actividad colagenolítica capaz de degradar la gelatina y el colágeno de tipo I [24, 25]. FAP es expresado selectivamente por CAF y pericitos en más de 90% de los cánceres epiteliales humanos examinados [26-30] y la investigación se ha informado en modelo animal que muestra un efecto terapéutico mediante la inhibición de la expresión de FAP o actividad enzimática [31]. La siguiente proteína se seleccionaron para detectar es SDF-1, que es secretada por los CAF y estimula la proliferación de células tumorales, la angiogénesis, la invasión y la metástasis a través del receptor CXCR4 expresado por las células tumorales [32-34]. Otra proteína secretada se detectó es TGF-β1, que es un potente inductor de la diferenciación de miofibroblastos [35], y puede desempeñar un papel en las cascadas de invasión de metástasis tumorales [36]. Los resultados del presente estudio mostraron que estas proteínas son regulados hasta en tejidos de cáncer gástrico, lo que sugiere su posible papel en la promoción de la progresión del cáncer gástrico.
El cáncer gástrico es la segunda causa principal de mortalidad asociada al cáncer en el mundo. El pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico es difícil de establecer, ya que se diagnostica generalmente cuando se han producido invasión de la pared gástrica y metástasis. Varios grupos intentaron encontrar algunos biomarcadores para el pronóstico del cáncer gástrico. Por ejemplo, la expresión de varias metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMP-2, 7, 9) se ha encontrado para ser elevados en los tejidos de cáncer gástrico en comparación con los tejidos gástricos sanos. Y la sobre regulación de estas MMPs en el cáncer gástrico se ha asociado con un mal pronóstico y elevada capacidad invasiva [37]. Otro ejemplo es similar a la insulina factor de crecimiento-1 receptor (IGF-1R), se expresa frecuentemente en cánceres gástricos y se asoció con el tamaño del tumor, la cantidad de estroma, la profundidad de invasión de la pared, la metástasis de los ganglios linfáticos, estadios TNM y el estado de diferenciación de cáncer gástrico [38]. Y la expresión de VEGF-C en los márgenes del tumor también se asoció con metástasis ganglionar, la invasión de vasos linfáticos, la mala supervivencia libre de recurrencia, y la mala supervivencia global, y podría servir como un predictor independiente para los pacientes con carcinoma gástrico [39]. Podemos encontrar que estos predictores son o bien las proteínas secretadas por los CAF o receptores expresados ​​por las células tumorales que se unen las proteínas secretadas por los CAF, por lo que estas pistas puede sugerir que la prevalencia de la CAF en los tejidos de cáncer gástrico será un predictor importante de pacientes con cáncer gástrico. Y nuestros resultados confirman que la prevalencia de los CAF estaba estrechamente asociado con el potencial metastásico del cáncer gástrico, y otros trabajos, se debe hacer para confirmar la correlación entre la prevalencia y la supervivencia de pacientes con cáncer gástrico CAF.
Conclusiones Nuestros resultados
informe aquí demuestran que el cáncer asociado fibroblastos reactivos (CAF) con frecuencia se acumulan en los tejidos de cáncer gástrico, y la prevalencia de los CAF se correlacionó con el tamaño del tumor, la profundidad del tumor y la metástasis del tumor, así como la etapa general TNM, lo que sugiere que los CAF fueron críticos para el crecimiento tumoral, invasión y metástasis, por lo tanto dar algunos soportes para el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico
abreviaciones
CAF:.
fibroblastos asociados al tumor
FAP:
proteína de activación de fibroblastos
SDF-1:
de células estromales derivadas de factor de 1
TGF-β1:
factor de crecimiento transformante beta 1
ECM:
matriz extracelular
WBC:
recuento de leucocitos

PLT:
recuento de plaquetas
Hb: hemoglobina

GPT:
glutámico pirúvico transaminasa-
ALP:
fosfatasa alcalina
PT: tiempo de protrombina


SNC:
sistema nervios central de
α-SMA: actina
α-músculo liso
FSP1:
fibroblastos proteína específica 1
GAPDH:
gliceraldehído fosfato deshidrogenasa
MMP:
metaloproteinasas de matriz

VEGF:.
factor de crecimiento vascular endotelial
Declaraciones
Agradecimientos
queremos agradecer al Prof. Li Gao en el Departamento de patología de Changhai hospital y el doctor Zhu Ni en el Laboratorio central del hospital de Changhai por sus soportes técnicos expertos para los experimentos. Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (30672046).
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A continuación se presentan los enlaces a los archivos de los autores presentados original para imágenes. 'archivo original para la figura 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf autores 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf Autores archivo original de la figura 2 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf archivo original de los autores para la figura 3 Conflicto de intereses México La autores declaran que no tienen intereses en competencia.

• Establecimiento y caracterización de un modelo de metástasis de cáncer gástrico humano en mice
• La detección de micrometástasis y centinela de los ganglios linfáticos no centinela de seccionamiento de serie completo y el análisis inmunohistoquímico para el cáncer gástrico