Cancerassocierede fibroblaster er positivt korreleret med metastatisk potentiale af humane gastrisk cancers

cancerassocierede fibroblaster er positivt korreleret med metastatisk potentiale af humane gastriske cancere
Abstract
Baggrund
prognose mavecancerpatienter er vanskeligt at forudsige, fordi af mangler ved fastsættelse af kirurgisk-patologiske funktioner. Cancerassocierede fibroblaster (CAF) har vist sig at spille fremtrædende rolle i at fremme tumorvækst, invasion og metastase. Således hæver den hypotese, at omfanget af forekomsten CAF kan hjælpe til at etablere prognosen for mavecancerpatienter.
Metoder Salg Immunochemistry og realtime-PCR-forsøg blev udført for at sammenligne ekspressionen af ​​proteiner, som er specifikke markører for CAF eller udskilles af CAF i tumoren og normale vævsprøver. Omfanget af CAF 'prævalens blev gradueret efter immunokemisk farvning, og korrelation blev yderligere analyseret mellem CAF' prævalens og andre tumor egenskaber, som kan påvirke prognosen for mavecancerpatienter.
Resultater
Næsten 80 procent af normale gastriske væv var negative eller svage positive for CAF farvning, mens mere end 60 procent af mavekræft væv var moderat eller stærk positiv for CAF farvning. Realtime-PCR-resultater viste også signifikant forhøjede ekspression af FAP, SDF-1 og TGF-β1 i gastrisk cancer væv sammenlignet med normale gastriske væv. Yderligere analyse viste, at CAF 'prævalens var korreleret med tumorstørrelse, dybde af tumoren, lymfeknudemetastase, levermetastaser eller bughinde metastase.
Konklusioner
Reaktive cancerassocierede fibroblaster (CAF) blev ofte akkumuleret i gastrisk cancer væv, og prævalensen af ​​CAF var korreleret med tumorstørrelse, dybde af tumoren og tumormetastase, således give nogle understøtninger for etablering prognosen for de mavecancerpatienter.
Baggrund
mavekræft er den anden førende årsag til kræft- dødsfald på verdensplan [1]. Betydelige geografiske variationer findes i forekomsten af ​​mavekræft og det repræsenterer den mest almindelige cancer hos China [2]. Flere og flere gastric kræftpatienter er blevet diagnosticeret i de senere år med skiftende kost og livsstil samt udvikling af diagnostiske procedurer. Selvom kirurgisk behandling har vist sig at være effektive for nogle tidlige gastriske cancere, herunder total gastrektomi og udvidet radikal gastrektomi, prognosen for disse patienter er dårlig på grund af tilbagefald efter operation, i form af lymfatisk spredning, blodbåren metastase eller peritoneal formidling [3].
prognosen for patient med gastrisk cancer har vist sig at være påvirket af flere etablerede kirurgiske-patologiske træk, såsom den patologiske stadium, placeringen af ​​tumoren og den histologiske type og karakteren af ​​tumor [ ,,,0],4]. Mens Aurello et al. [5] har vist, at antallet af knuder, der er nødvendige for at konkludere n0 kan variere alt efter dybden af ​​tumor invasion (T), TNM klassifikationen kræver indhentning og analyse af mindst 15 lymfeknuder for præcis iscenesættelse. Men i de fleste tilfælde er antallet af knudepunkter dissekeret er mindre og kun 20 til 30% af patienterne har den anbefalede dissektion af 15 knuder. Accessorial indikatorer, som kan give yderligere informationer om prognose mavecancerpatienter er nødvendige.
Cancerassocierede fibroblast (CAF), en af ​​de vigtige stromale celler omfattende faste tumorer, har vist sig at spille fremtrædende rolle for at fremme tumorvækst og progression [6]. I modsætning til hvilende fibroblaster, CAF besidder en aktiveret fænotype og kan identificeres ved deres ekspression af fibroblast-specifikt protein 1 (FSP1), vimentin, desmin, og α-glat-muskel-actin [7]. CAF kommunikere indbyrdes og med kræftceller og inflammatoriske og immunceller direkte gennem celle kontakt og indirekte gennem parakrin /eksokrine signalering, proteaser, og modulering af den ekstracellulære matrix (ECM). Dette kompleks kommunikationsnet er afgørende for at skabe passende mikromiljø til at støtte tumorigenese, angiogenese og metastase [8, 9]. Derudover sammenlignet med transformerede tumorceller, CAF er mere genetisk homogen [10] og det er blevet påvist af Gastavo et al, at reaktiv stroma kan fungere som en forudsigelse af tilbagefald i prostatacancer [11], hvilket repræsenterer en attraktiv prædiktor og terapeutisk mål for tumor patienter.
i denne undersøgelse, vi samlet 100 tilfælde af kirurgisk resektion eksemplarer af primær mavekræft samt normale gastrisk væv (mere end 5 cm langt fra tumorvæv) fra januar 2007 til juni 2007 Anden Military Medical University tilknyttet Changhai hospital (Shanghai, Kina). Immunkemiske og RT-PCR-forsøg blev udført for at sammenligne ekspressionen af ​​proteiner, der er specifikke markører for CAF eller udskilles af CAF i tumoren og normale vævsprøver. Omfanget af CAF 'prævalens blev gradueret efter immunokemisk farvning, og korrelation blev yderligere analyseret mellem CAF' prævalens og andre tumor egenskaber, der kan påvirke prognosen for mavecancerpatienter.
Metoder
Kohorte Tilmelding
Et hundrede tilfælde af primære mavecancerpatienter blev indrulleret fra januar 2007 til juni 2007 Anden Military Medical University tilknyttet Changhai hospital. Alle patienter har givet en skriftlig informeret samtykke. Optagelseskriterier for denne undersøgelse omfatter: (a) ingen præoperativ kemoterapi behandling; (B) patologisk eller cytologisk valideret gastrisk adenocarcinom; (C) på mellem 18-85 år; (D) forventet levetid > 3 måneder; (E) WBC > 3,5 × 10 9 /l; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /l; Serumkreatinin ikke mere end 1,25 gange normale øvre grænse; GPT og ALP ikke mere end 1,25 gange normale øvre grænse; Total bilirubin ikke mere end 1,5 gange normal øvre grænse; PT < 12s; og (f) ikke alvorlig CNS sygdom.
Patologisk analyse
Alle prøver, herunder tumorvæv og normale gastriske væv, som var mere end 5 cm langt fra tumorvæv blev fikseret i 10% formalin inden for 30 minutter efter kirurgisk resektion. Paraffinindlejret serielle snit (4 um) blev fremstillet. Tumor differentiering blev karakteriseret ifølge WHO klassificering (2000), mens TNM klassifikationen blev udført i henhold til International Union Against Cancer, femte udgave (1997).
Immunochemistry
Antistof anvendes i denne procedure omfatter kanin anti-FSP1 polyklonale antistof ( Abcam, 01:50), muse-anti-α-SMA monoklonalt antistof (Sigma, 1A4, 1: 200), rotte-anti-procollagen I monoklonalt antistof (Chemicon, Mab1912, 1: 500), biotin-konjugeret rotte-anti-muse-IgG polyklonalt antistof (eBioscience, 13-4013, 1: 100), biotin-konjugeret muse anti-rotte IgG polyklonalt antistof (eBioscience, 13-4813, 1: 100) og biotin-konjugeret muse anti-kanin IgG polyklonalt antistof (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). Immunkemi analyse blev udført som tidligere beskrevet [12]. Kort beskrevet paraffinsnit blev de-paraffinized i xylen og en række graduerede alkoholopløsninger. Snittene blev derefter behandlet med 0,3% hydrogenperoxid (H2O2) i vand i 10 minutter for at standse enhver endogen peroxidaseaktivitet i vævet, og de ikke-specifikke bindingssteder blev blokeret med 0,5% bovint serumalbumin (BSA) i 10 minutter ved stuetemperatur . Derefter blev sektionerne inkuberet i 15 minutter i nærværelse af det primære antistof, og derefter blev glassene vasket i phosphatbufferet saltvand (PBS) indeholdende 0,1% Tween 20 (PBS /Tween) i 15 minutter, mens ændre opløsningen 3 gange før anvendelsen af ​​den sekundære biotinylerede antistof. Objektglassene blev inkuberet med det sekundære antistof i 15 minutter ved stuetemperatur, inden de blev vasket i 15 minutter i PBS /Tween, der blev ændret 3 gange. Snittene blev derefter inkuberet i 15 minutter med et avidin-biotinyleret peberrodsperoxidase-kompleks, og reaktionsblandingen visualiseret under anvendelse 0,02% 3,3'-diaminobenzidintetrahydrochlorid som et chromogen i en Tris-HCI-buffer, pH 7,6, indeholdende 0,03% H2O2. Hematoxylin blev anvendt til at modfarve kernerne.
Histologisk analyse
Til bedømmelse af niveauet af FSP1, α-SMA og prokollagen-I-ekspression, procentdelen af ​​positive-farvning af celler blev gradueret på en skala fra 0-3, med mindre end 5% positiv-farvning celler som klasse 0, 5-25% som grad 1, 26-50% som grad 2, og mere end 50% som kvalitet 3. og intensiteten af ​​farvning også ligger på en skala fra 0- 2, med negativ til svag intensitet som klasse 0, svag til moderat intensitet som grad 1, og moderat til stærk intensitet som klasse 2. Ti high-power felter blev udvalgt tilfældigt for hver dias og analyseret af to patologer selvstændigt. For hver markør, score på procentdel og intensitet var multipliceret og scores for disse tre markører blev tilføjet, da disse markører blev analyseret forening. Og det endelige resultat mellem 0-6 blev bestemt som negativ (-), score mellem 7-9 blev bestemt som svagt positive (+), blev score mellem 10-12 bestemt som moderat positive (++), og scorer højere end 13 blev bestemt som stærk positiv (+++).
Realtime-PCR
Totalt RNA blev ekstraheret fra tumor eller normalt væv efter Trizol-reagens (Invitrogen) og første-streng cDNA blev syntetiseret under anvendelse RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit ( Fermentas, USA) som tidligere beskrevet [13]. Realtime PCR blev udført ved anvendelse af LightCycler DNA Master SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Tyskland) ifølge producentens instruktioner. Kopierne af target-cDNA blev normaliseret ved GAPDH udtryk. Primere til FAP, SDF-1, blev TGF-β1 og GAPDH opført som følger:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5'- AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
for hvert mål cDNA, kopier af normale vævsprøver er et gennemsnit, og kopier af hver tumor vævsprøve divideret med gennemsnittet, så resultaterne af disse tre mål cDNA tilsættes for hver tumor vævsprøve. Hvis summen er lig med eller større end 8, så tumorvævet anses for at være positiv for CAF.
Statistisk analyse
Data er vist som gennemsnit og standardafvigelser. Statistiske analyser af dataene blev analyseret med den tosidede uafhængig Students t-test og χ 2 analyse af SPSS 12.0. Niveauet af statistisk signifikans blev sat til P < 0.05.
Resultater
Reaktive tumorassocierede fibroblaster var fremherskende i mavekræft væv
at bestemme omfanget af CAF 'udbredelse i gastrisk kræft væv, paraffin indlejrede sektioner af vævsprøver blev fremstillet og farvet for FSP1, α- SMA og prokollagen I-ekspression som beskrevet ovenfor. Desuden blev realtime-PCR udført for at bestemme ekspressionsniveauet af adskillige proteiner, der blev udtrykt eller udskilt af reaktive CAF, såsom FAP, SDF-1 og TGF-β1.
Resultater af immunkemi-farvning viste, at flere reaktive fibroblaster var til stede i gastrisk cancer væv end normale gastriske væv. Tyve fire ud af de 100 normale prøver var negative (-) for reaktive fibroblaster farvning og 55 normale prøver var svage positive (+). Og antallet af normale prøver, der var moderat (++) eller stærk positiv (+++) var 21 og 0, hhv. Mens om kræft væv, der var 13, 26, 25 og 36 prøver, der var negative (-), svagt positive (+), moderat positive (++) og stærk positiv (+++) for fibroblast farvning, henholdsvis (Fig 1a og figur 1b). Og hvis tumorprøver kategoriseret som negative eller svagt positive blev betragtet som negativ, og moderat eller stærkt positive blev betragtet som positive, var der en signifikant forskel mellem tumor og normale væv vedrørende positive rate af CAF (figur 1c). Figur 1 Immunochemistry analyse af kvalitet af CAF 'udbredelse i tumor og normale gastriske væv. Paraffin sektioner af kirurgisk resektion tumor og normalt væv fra de samme mavecancerpatienter (100 sager) blev farvet for FSP1, α-SMA og prokollagen-1-ekspression og CAF prævalens blev gradueret i henhold til den positive kurs og intensiteten af ​​den immunokemiske farvning. Antallet af tumor eller normale vævsprøver gradueret som -, +, ++ og +++ blev sammenlignet (a). Og fordelingen af ​​disse fire kvaliteter af CAF 'prævalens i 100 tumor eller normale vævsprøver blev analyseret (b). Grade - og + blev betragtet som negativ, mens klasse ++ og +++ blev betragtet som positiv for forekomsten CAF, så antallet af tumoren eller normale vævsprøver, som var positiv eller negativ for forekomst CAF 'blev sammenlignet (c). Hus til mRNA-ekspression af proteinerne, viste resultaterne, at ekspressionsniveauet af alle disse proteiner blev forhøjet i tumorprøver forhold til disse i normale væv. Idet FAP som eksempel, mRNA ekspressionsniveauet af FAP i tumorprøver var 4 gange højere end i normale væv (figur 2a). Og der var også 3 gange forøgelse af mRNA-ekspression plan vedrørende SDF-1 (fig 2b) eller TGF-β1 (Fig 2c). Figur 2 Realtime-PCR-analyse af secernerede proteiner ved CAF i tumor og normale gastriske væv. Totalt RNA blev ekstrakt og cDNA blev fremstillet ud fra kirurgisk resektion tumor og normalt væv fra de samme mavecancerpatienter (100 tilfælde). Realtime-PCR blev udført for at sammenligne ekspressionsniveauet af FAP (a), SDF-1 (b) og TGF-β1 (c) i tumor og normalt væv, de første to baner af elektroforetogram repræsenterede normale væv og de sidste to baner repræsenterede tumorvæv. *: P < 0.01.
Fra disse resultater kan vi konkludere, at reaktive CAF var fremherskende i gastrisk tumorvæv og hemmelige højt niveau af proteiner, som har vist sig at være afgørende for tumorvækst, invasion og metastase. Forekomst
CAF 'var tæt relateret til invasive og metastatiske egenskaber af gastrisk tumor
at afgøre, om karakteren af ​​CAF 'prævalens kan serveres som en prædiktor for prognosen for mavecancerpatienter blev korrelationsanalyse udført mellem kvalitet af CAF' prævalens og andre klinisk-patologisk parametre for gastriske cancere. Tumor prøver sorterede som negative eller svagt positive blev betragtet som negative, og moderat eller stærk positiv blev betragtet som positive i disse analyser. Patient- og tumor karakteristika blev beskrevet i tabel 1. Vi kan også finde i tabel 1, at der ikke var nogen korrelation mellem CAF 'prævalens og alder, køn af patienten eller placeringen af ​​tumoren. Der var en stigning på forekomsten CAF 'når tumoren differentiering faldet fra veldifferentieret (43,75%) til dårligt differentieret (64,00%), mens den positive rate af CAF i udifferentierede gastrisk kræft er kun 26,67%, meget mindre end i godt eller dårligt differentierede gastrisk kræft, så vi kunne ikke finde sammenhængen mellem CAF 'prævalens og tumor differentiering (P = 0,56). Mens vedrørende tumorstørrelse dybde af tumoren (T) og lymfeknudemetastaser (N), der viste statistisk signifikant korrelation mellem forekomsten af ​​CAF og disse tumor egenskaber, med højere positiv rate af CAF i større tumorer, mere invasive tumorer og tumorer med mere lymfeknudemetastase. Også vi kan finde, at den positive sats på CAF var høj i gastrisk kræft med levermetastaser (P < 0,01) eller bughinde metastase (P < 0,01) .table 1 patient og tumor egenskaber og deres forhold til CAF prævalens

N
Positiv for CAF N (%)
P-værdi
Alder (år)
2.77a
≤60
47
22 (46,81)
> 60
53
29 (54,72)
Sex
5.11a
Mand
57
32 (56,14)
Female
43
19 (44,19)
Placering af tumoren
1.35b
proksimale ende af maven (1/3)
13
9 (69,23)
Gastric krop (1/3)
19
9 (47.37)
fjernbetjening ende af maven (1/3)
51
22 (43,14)
Mere end 1/3 af den pågældende
17
11 (64,71) mave
Tumor differentiering
0.56b
Well differentieret
16
7 (43,75)
Moderat differentieret
44
24 (54.55)
Dårligt differentieret
25
16 (64.00)
Udifferentieret
15
4 (26,67 )
Tumor størrelse
0.02a
≤5 cm
62
16 (35,48)
> 5 cm
38
29 (76,32)
Dybde af tumor (T)
0.03b
Tis
4
1 (25.00)
T1
13
5 (38,46)
T2
39
19 (48,72)
T3
26
15 (57,69)
T4
18
11 (61.11)
lymfeknudemetastase (N)
< 0,01 en
n0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64,81)
levermetastaser
< 0.01A
Ja
12
9
Ingen
88
42
bughinde metastaser
< 0.01A
Ja
9
7 (77,77)
Nej
91
44 (48,35)
TNM Stage
< 0.01b
IA
15
3 (20)
IB
7
2 (28.57)
II
19
6 (31,58)
IIIA
23
11 (47,83)
IIIB
15
8 (53,33)
IV
21
14 (66,67)
en: Fisher eksakt test; b: Chi-Square Tests
endvidere i den situation, tumormetastase, uanset lymfeknudemetastase, fjernt metastase eller organ metastase, den positive procentsats for CAF er meget højere end hos dem uden metastase (71.93% vs. 25.58% , P < 0,01) (figur 3). Figur 3 Den procentdel af tumorprøver, som var positiv eller negativ for CAF 'prævalens i gruppen af ​​patienter med eller uden tumormetastase. De tumor prøver blev grupperet efter, om de gastrisk kræftpatienter havde tumor metastaser (uanset lymfeknude metastaser, fjernmetastaser eller organ metastase). Og den procentdel af de enheder, der var positiv (grad - eller + efter immunkemiske farvning) eller negativ (grad ++ eller +++ efter immunokemisk farvning) for forekomsten CAF 'blev analyseret (a). Og den immunokemiske farvning af α-SMA blev vist i normalt gastrisk væv, mavekræft væv uden metastaser og gastrisk cancer væv med metastaser (b).
Og vi analyserede også sammenhængen mellem mRNA niveau af FAP, SDF-1 og TGF-β1 og gastrisk cancer fase. Niveauet af disse proteiner blev bedømt som beskrevet i fremgangsmåderne og tumor- vævsprøver de blev bestemt til at være positivt, hvis scoren er lig med eller større end 8. Det blev konstateret, at den positive procentsats meget høj i store tumorer (> 5 cm, 32/38) end i små tumorer (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). Og den positive andel i tumor prøver med TNM stadie IA, IB, II, III A, III B og IV er 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) og 76,2 (16/21), henholdsvis viser, at forekomsten af ​​CAF er tæt korreleret med gastrisk cancer faser (p < 0,01). Disse resultater kraftigt antydet, at CAF 'prævalens kunne bidrage til opbygningen af ​​mavekræft fase og kan anvendes som en markør for prognosen for mavecancerpatienter.
Diskussion Nyt studier i molekylær- og cellebiologi har vist, at tumorvækst og metastase bestemmes ikke af cancerceller alene, men også ved en række forskellige stromale celler [14, 15]. Stroma tilvejebringer aktivt kontinuerlig støtte til carcinomceller i de forskellige patofysiologiske processer, der modulerer tumorprogression. Fibroblaster er en vigtig del af tumor stroma, som har fået øget opmærksomhed på grund af deres deltagelse i tumor udvikling, herunder vækst, invasion og metastase, såsom i prostatacancer [16, 17] eller brystkræft [18, 19]. Det er også blevet påvist i en gastrisk cancer musemodel, der aktiverede fibroblaster fremmer tumorangiogenese [20], og det er i overensstemmelse med ud resultater, der aktiverede fibroblaster blev akkumuleret i humane gastriske cancer væv.
Udtrykket fibroblast omfatter en række stromal celler med et stort set samme fænotype. De fleste tumorer indarbejde en indlysende biologisk aktivt, fibroblastisk celletype forskelligt kendt som reaktive fibroblaster, myofibroblaster, eller blot tumor-associerede fibroblaster. Glatmuskel α-actin (α-SMA) er den mest almindelige markør anvendes til at identificere CAF, mens dets ekspression også kan findes i glatte muskelceller og myoepitelcellerne [21]. Så andre markører bør anvendes i kombination med α-SMA at identificere CAF. Fibroblast-specifikt protein 1 (FSP1, S100A4), et medlem af familien af ​​Ca2 + -bindende S100-proteiner, konstitutivt udtrykt i cytoplasmaet af vævs- fibroblaster, og dets ekspression er yderst specifik for fibroblaster [22, 23]. Det er almindeligt accepteret at kombinere en-SMA og FSP1 til identifikation af tumorassocierede fibroblaster. Og i vores eksperiment, vi brugte også en tredje markør, prokollagen jeg, at identificere reaktive CAF med produktion af ekstracellulære matrix komponenter.
Vi har detekteret også mRNA ekspressionsniveauet af andre proteiner, der er udtrykt eller udskilles af CAF. FAP er et type II transmembranprotein celleoverfladeprotein tilhører den post-prolin dipeptidylaminopeptidase familie, med dipeptidylpeptidase og endopeptidase aktivitet, herunder en kollagenolytisk aktivitet stand til at nedbryde gelatine og kollagen type I [24, 25]. FAP udtrykkes selektivt ved CAF og pericytter i mere end 90% af humane epiteliale cancere undersøgt [26-30] og forskning er blevet rapporteret i dyremodel viser en terapeutisk virkning ved at hæmme FAP ekspression eller enzymatisk aktivitet [31]. Den næste protein vi valgt at detektere er SDF-1, som udskilles af CAF og stimulerer tumorceller proliferation, angiogenese, invasion og metastase gennem CXCR4-receptoren udtrykkes af tumorceller [32-34]. Andet udskilt protein vi har registreret er TGF-β1, som er en potent inducer for myofibroblasts differentiering [35], og kan spille en rolle i tumorinvasion-metastase kaskader [36]. Resultaterne af den foreliggende undersøgelse viste, at disse proteiner var opreguleret i gastrisk cancer væv, hvilket antyder deres potentielle rolle i at fremme gastrisk cancer progression.
Mavekræft er den næststørste årsag til cancer-associeret dødelighed i verden. Prognosen hos patienter med mavekræft er vanskeligt at fastslå, fordi det almindeligvis er diagnosticeret, når mavevæggen invasion og metastase er forekommet. Flere grupper har forsøgt at finde nogle biomarkører for prognosen af ​​gastrisk cancer. For eksempel ekspressionen af ​​flere ekstracellulære matrixmetalloproteinaser (MMP-2, 7 9,) vist sig, at være forhøjet i gastrisk cancer væv sammenlignet med raske gastriske væv. Og opregulering af disse MMP i mavekræft er blevet forbundet med en dårlig prognose og forhøjede invasive kapacitet [37]. Et andet eksempel er insulinlignende vækstfaktor-1-receptor (IGF-1R), blev det ofte udtrykt i gastriske cancere og var forbundet med tumorstørrelse mængde stroma, dybde væg invasion, lymfeknudemetastase, TNM stadier og differentiering status gastrisk cancer [38]. Og VEGF-C-ekspression ved tumor margener var også forbundet med nodal metastase, lymfe invasion fartøj, dårlig gentagelse overlevelse, og dårlig samlet overlevelse, og kunne fungere som en uafhængig prædiktor for patienter med gastrisk karcinom [39]. Vi kan finde, at disse prædiktorer er enten proteiner udskilt af CAF eller receptorer udtrykt af tumorceller, som binder proteinerne udskilt af CAF, så disse spor kan antyde, at forekomsten af ​​CAF i gastrisk cancer væv vil være en vigtig prædiktor for mavecancerpatienter. Og vores resultater bekræftede, at forekomsten af ​​CAF blev tæt forbundet med metastatisk potentiale mavekræft, og videre arbejde skal gøres for at bekræfte sammenhængen mellem CAF 'forekomst og overlevelse af mavecancerpatienter.
Konklusioner
Vores resultater rapporten her viser, at reaktive cancerassocierede fibroblaster (CAF) ofte blev akkumuleret i gastrisk cancer væv, og prævalensen af ​​CAF var korreleret med tumorstørrelse, dybde af tumoren og tumormetastase samt den overordnede TNM stadie, hvilket antyder, at CAF var kritiske for tumorvækst, invasion og metastase, og dermed give nogle understøtninger for prognosen for de mavecancerpatienter
Forkortelser
CAF:.
tumorassocierede fibroblaster
FAP:
fibroblast aktivering protein
SDF-1:
stromale celler afledt faktor 1
TGF-β1:
transformerende vækstfaktor beta 1
ECM:
ekstracellulær matrix
WBC:
hvide blodlegemer

PLT:
trombocyttal
Hb:
hæmoglobin
GPT:
glutaminsyre-pyrodruesyre-transaminase
ALP:
alkalisk fosfatase
PT:
protrombintid

CNS:
centrale nerver systemet
α-SMA:
α-glat-muskel aktin
FSP1:
fibroblast specifikt protein 1
GAPDH:
glyceraldehyd fosfat dehydrogenase
MMP:
matrixmetalloproteinase

VEGF:.
vaskulær endotel vækstfaktor
erklæringer
Taksigelser
Vi ønsker at takke professor Li Gao i afdelingen for patologi Changhai Hospital og Dr. Ni Zhu i Central Lab af Changhai Hospital for deres ekspert tekniske støtter for eksperimenterne. Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (30.672.046).
Forfattere 'oprindelige indsendt filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 2 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 3 konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.

• Etablering og karakterisering af en metastase model af menneskets mavekræft i nøgne mus
• Påvisning af sentinel og ikke-skildvagtslymfekirtel mikrometastaser ved fuldstændig seriel sektionering og immunhistokemisk analyse for gastrisk cancer