Syöpään liittyvän fibroblastit korreloivat positiivisesti metastaattista potentiaalia ihmisen syöpien

Syöpään liittyvän fibroblastit korreloivat positiivisesti metastaattista potentiaalia ihmisen syöpien
tiivistelmä
tausta
ennustetta mahasyöpäpotilaista on vaikea ennustaa, koska vikoja perustamisesta kirurgisen-patologinen ominaisuuksia. Syöpään liittyvän fibroblasteja (valuuttalisiin) on todettu pelata merkittävä rooli edistettäessä kasvaimen kasvua, invaasio ja metastaasi. Siten esiin hypoteesi, jonka laajuus valuuttalisiin esiintyvyys voi olla avuksi ennuste mahasyöpäpotilaista.
Menetelmät
Immunochemistry ja reaaliaikainen PCR kokeet suoritettiin vertaamaan proteiinien ekspression, jotka ovat spesifisiä markkereita valuuttalisien tai erittämät valuuttalisiin kasvain ja normaali kudosnäytteet. Laajuus valuuttalisiin 'esiintyvyys oli porrastettu immunokemiallisia värjäystä, ja korrelaatio analysoitiin edelleen välillä valuuttalisiin "levinneisyyden ja muiden kasvainten ominaisuuksiin, jotka voivat vaikuttaa ennustetta mahasyöpäpotilaista.
Tulokset
Lähes 80 prosenttia normaalista mahan kudoksissa olivat negatiivisia tai heikkoja positiivisia valuuttalisiin värjäystä, kun taas yli 60 prosenttia mahasyövän kudokset kohtalaista tai voimakasta positiivisia valuuttalisien värjäystä. Realtime-PCR Tulokset osoittivat myös merkittävästi kohonnut ilmentyminen FAP, SDF-1 ja TGF-β1 mahasyövän kudoksissa verrattuna normaaliin mahalaukun kudoksiin. Lisäksi analyysi osoitti, että valuuttalisiin "esiintyvyys korreloi kasvaimen koko, syvyys kasvain, imusolmuke etäpesäke, maksan etäpesäkkeen tai vatsakalvon etäpesäkkeitä.
Päätelmät
Reactive syöpään liittyvät fibroblasteissa (valuuttalisiin) on usein kerääntynyt mahasyövän kudoksissa, ja esiintyvyys valuuttalisiin korreloi kasvaimen koko, syvyys kasvaimen ja kasvaimen etäpesäke, mikä antaa joitakin tuet perustamisesta ennustetta mahalaukun syöpäpotilailla.
Tausta
mahalaukun syöpä on toiseksi suurin syy syöpää liittyvä kuolema maailmanlaajuisesti [1]. Huomattavia maantieteelliset vaihtelut olemassa esiintyvyys mahasyövän ja se edustaa yleisin syöpä Kiinassa [2]. Yhä useammat mahasyöpäpotilaista on diagnosoitu viime vuosina muuttuvien ruokavalion ja elämäntapa sekä kehittää diagnostisia toimenpiteitä. Vaikka kirurginen hoito on osoittautunut tehokkaaksi joitain syöpien, mukaan lukien yhteensä gastrectomy ja laajennettu radikaali gastrectomy, ennuste näiden potilaiden on heikkoa uusiutumisen leikkauksen jälkeen, muodossa imusuonten leviämisen, veren välityksellä etäpesäke tai vatsakalvon levitys [3].
ennuste potilaan mahalaukun syöpä on osoitettu vaikuttaa useat perustettiin kirurgisia-patologisia piirteitä, kuten patologinen vaiheessa sijainti kasvain ja histologinen tyyppi ja luokan kasvain [ ,,,0],4]. Vaikka Aurello et ai. [5] ovat osoittaneet, että solmujen määrä tarpeen tehdä N0 voivat vaihdella syvyyden kasvaimen invaasion (T), TNM luokittelu edellyttää hakemista ja analyysi ainakin 15 imusolmukkeet tarkkaan lavastus. Kuitenkin, useimmissa tapauksissa, solmujen määrä leikeltiin on pienempi ja vain 20-30%: lla potilaista on suositeltu vähintään leikkelyn 15 solmuja. Accessorial indikaattoreita, jotka voivat toimittaa tietoja ennustetta mahasyöpäpotilaista tarvitaan.
Cancer liittyvät fibroblasti (CAF), joka on yksi tärkeä stroomasoluissa, jossa on kiinteitä kasvaimia, on havaittu pelata merkittävä rooli tuumorin kasvun ja eteneminen [6]. Toisin kuin lepää fibroblastien, valuuttalisiin oltava aktivoitu fenotyyppi, ja ne voidaan tunnistaa niiden ilmentyminen fibroblasti-spesifisen proteiinin 1 (FSP1), vimentiinin, desmiini, ja α-sileän lihaksen aktiini [7]. Valuuttalisiin kommunikoida keskenään sekä syöpäsolujen ja tulehdus- ja immuunisolujen suoraan solukontakti ja välillisesti paracrine /eksokriinisessä signalointi, proteaaseja, ja modulaatio soluväliaineen (ECM). Tämä kompleksi viestintäverkko on keskeinen tarjoamaan asianmukaista microenvironment tukemaan tuumorigeneesiprosessin angiogeneesi, ja etäpesäkkeiden [8, 9]. Lisäksi, verrattuna transformoituja kasvainsoluja, valuuttalisiin ovat geneettisesti homogeeninen [10], ja se on osoitettu Gastavo et al, että reaktiivinen strooman voi toimia ennustaja uusiutumisen eturauhassyövän [11], mikä edustaa houkutteleva ennustaja ja terapeuttinen kohde kasvaimen potilaille.
tässä tutkimuksessa keräsimme 100 tapausta kirurginen resektio yksilöiden ensisijainen mahasyövän sekä normaali mahan kudoksissa (yli 5 cm kaukana kasvainkudoksen) tammikuusta 2007 kesäkuun 2007 toisen Military Medical University sidoksissa Changhai sairaala (Shanghai, Kiina). Immunokemian ja RT-PCR-kokeet suoritettiin vertaamaan proteiinien ekspression, jotka ovat spesifisten valuuttalisiin tai erittyy valuuttalisiin kasvaimen ja normaalin kudosnäytteiden. Laajuus valuuttalisiin 'esiintyvyys oli porrastettu immunokemiallisia värjäystä, ja korrelaatio analysoitiin edelleen välillä valuuttalisiin "levinneisyyden ja muiden kasvainten ominaisuuksiin, jotka voivat vaikuttaa ennustetta mahasyöpäpotilaista. Tool Menetelmät
kohortti Enrollment
Sata primaarisen mahasyövän potilasta otettiin tammikuusta 2007 kesäkuuhun 2007 toisen Military Medical University sidoksissa Changhai sairaala. Kaikki potilaat ovat kirjallisesti tietoista suostumusta. Entry kriteerit Tutkimuksen ovat: (a) ei preoperatiivinen kemoterapiaa; (B) patologisesti tai sytologisesti validoitu mahalaukun adenokarsinooman; (C) vuotiaista 18-85 vuotta; (D) odotettu käyttöikä > 3 kuukautta; (E) WBC > 3,5 x 10 9 /l; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /l; Seerumin kreatiniini enintään 1,25 kertaa normaalin yläraja; GPT ja ALP enintään 1,25 kertaa normaalin yläraja; Kokonaisbilirubiini enintään 1,5 kertaa normaalin yläraja; PT < 12s; ja (f) ei vakava keskushermoston sairaus.
patologinen analyysi
Kaikki yksilöt lukien kasvain kudosten ja normaali mahan kudoksissa mikä oli yli 5 cm kaukana kasvaimen kudokset kiinnitettiin 10% formaliinilla 30 minuutin kuluttua kirurgisen resektion. Parafiiniin leikesarjojen (4 pm) valmistettiin. Kasvaimen eriyttäminen leimasi mukaan WHO: n luokituksen (2000), kun taas TNM luokittelu tehtiin mukaan International Union Against Cancer, viides painos (1997).
Immunokemia
Vasta käyttää tässä menetelmässä käytetään kanin anti-FSP1 polyklonaalista vasta-ainetta ( Abcam, 1:50), hiiren anti-α-SMA monoklonaalinen vasta-aine (Sigma, 1A4, 1: 200), rotan anti-prokollageenin I monoklonaalista vasta-ainetta (Chemicon, Mab1912, 1: 500), biotiini-konjugoidun rotan anti-hiiri-IgG polyklonaalinen vasta-aine (ebioscience, 13-4013, 1: 100), biotiini-konjugoitu hiiren anti-rotta-IgG polyklonaalisella vasta-aineella (ebioscience, 13-4813, 1: 100) ja biotiini-konjugoitu hiiren anti-kani-lgG-polyklonaalista vasta-ainetta (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). Immunochemistry-analyysi suoritettiin, kuten aiemmin on kuvattu [12]. Lyhyesti, parafiini leikkeet de-paraffinized ksyleeniin ja sarja porrastettu alkoholin ratkaisuja. Sitten leikkeitä käsiteltiin 0,3% vetyperoksidia (H2O2) vedessä 10 minuutin ajan sammuttamaan mahdollinen endogeenisen peroksidaasin kudoksen sisällä, ja epäspesifinen sitoutumispaikat blokattiin 0,5% naudan seerumin albumiinia (BSA) 10 minuutin ajan huoneen lämpötilassa . Seuraavaksi leikkeitä inkuboitiin 15 minuutin ajan, kun läsnä on primaarisen vasta-aineen, ja sitten levyt pestiin fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa (PBS), joka sisälsi 0,1% Tween 20: tä (PBS /Tween) ja 15 minuutin ajan muuttamalla liuos 3 kertaa ennen soveltamisen toisen biotinyloitua vasta-ainetta. Levyjä inkuboitiin sekundäärisen vasta-aineen kanssa 15 minuuttia huoneen lämpötilassa, ennen kuin se pestiin 15 minuuttia PBS /Tween, joka vaihdetaan 3 kertaa. Sitten leikkeitä inkuboitiin 15 minuutin ajan, avidiini-biotinyloitu piparjuuriperoksidaasi monimutkainen, ja reaktio visualisoitiin käyttämällä 0,02% 3,3'-diaminobentsidiiniä tetrahydrochloride kromogeenina Tris-HCI-puskuria, pH 7,6, joka sisälsi 0,03% H2O2. Hematoksiliini käytettiin vastavärjäämiseksi ytimiin.
Histologinen analyysi
arvioimiseksi tasoa FSP1, α-SMA ja prokollageenin-I ilmaisun, prosenttiosuus positiivisten-värjäys solut arvostellaan asteikolla 0-3, jossa alle 5% positiivisia-värjäys solujen luokan 0, 5-25% luokkaa 1, 26-50% luokkaa 2, ja yli 50% luokkaa 3. ja värjäytymisen intensiteetti myös arvostellaan asteikolla 0- 2, negatiivinen heikon intensiteetin luokka 0, heikko tai kohtalainen intensiteetti luokkaa 1, ja kohtuullisesta voimakkaaseen intensiteetin luokka 2. Kymmenen suuritehoisia kentät valittiin satunnaisesti kullekin dioja ja analysoitiin kaksi patologia itsenäisesti. Kunkin merkki, pisteet prosenttiosuuden ja intensiteetti oli kerrotun ja tulokset näistä kolmesta merkkiaineiden lisättiin, kun näitä merkkiaineita analysoitiin conjointly. Ja lopputulos 0-6 määritettiin negatiiviseksi (-), pisteet välillä 7-9 määritettiin heikko positiivinen (+), pisteet 10-12 määritettiin kohtalainen positiivinen (++), ja pisteet suurempi kuin 13 määritettiin vahva positiivinen (+++).
Reaaliaikainen PCR
Kokonais-RNA uutettiin kasvain tai normaaleista kudoksista mukaan Trizol-reagenssia (Invitrogen) ja ensimmäisen juosteen cDNA syntetisoitiin käyttäen RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit ( Fermentas, USA), kuten aiemmin on kuvattu [13]. Reaaliaikainen PCR suoritettiin käyttäen LightCycler DNA Master SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Saksa) mukaan valmistajan ohjeiden. Kopiot kohde cDNA normalisoitiin GAPDH ilme. Alukkeet FAP, SDF-1, TGF-β1 ja GAPDH listattiin seuraavasti:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'- GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5'- AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'- TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
kullekin kohde-cDNA, kopiot normaalin kudosnäytteiden on keskimäärin, ja kopiot kunkin kasvaimen kudosnäyte on jaettuna keskimääräisellä, niin tulokset näistä kolmesta kohde-cDNA lisätään kunkin kasvaimen kudosnäytteestä. Jos summa on yhtä suuri tai suurempi kuin 8, niin kasvainkudos katsotaan olevan positiivinen valuuttalisiin.
Tilastollinen analyysi
Tiedot esitetään keskiarvot ja keskihajonnat. Tilastolliset analyysit Aineisto analysoitiin kahden tailed riippumatonta Studentin t-testiä ja χ 2 analyysiä SPSS 12.0. Taso tilastollista merkitsevyyttä asetettiin P < 0,05.
Tulokset
Reactive kasvaimeen liittyvä fibroblastit olivat yleisiä mahasyövän kudoksissa
määrittämiseksi, missä määrin valuuttalisiin "esiintyvyys mahasyövän kudoksissa, parafiiniin upotetut leikkeet kudosnäytteiden valmistettiin ja värjättiin FSP1, α- SMA ja prokollageenigeenin I ilmaisun edellä kuvatulla tavalla. Lisäksi, reaaliaikainen-PCR suoritettiin sen määrittämiseksi, ekspressiotason useita proteiineja, jotka on ilmaistu tai erittyy reaktiivinen valuuttalisiin, kuten FAP, SDF-1: n ja TGF-β1.
Tulokset immunokemian värjäys osoitti, että enemmän reaktiivisia fibroblastit oli läsnä mahasyövässä kudoksissa kuin normaali mahan kudoksissa. Kaksikymmentä neljä ulos 100 normaalin näytteet olivat negatiivisia (-) reaktiivisen fibroblasteissa värjäystä ja 55 normaali näytteet olivat heikkoja positiivisia (+). Ja määrä normaalin yksilöiden joista kohtalainen (++) tai vahva positiivinen (+++) olivat 21 ja 0, vastaavasti. Vaikka koskevat syöpä kudoksiin, oli 13, 26, 25 ja 36 yksilöt jotka olivat negatiivisia (-), heikko positiivinen (+), kohtalainen positiivinen (++) ja vahva positiivinen (+++) fibroblasti värjäystä, vastaavasti (kuvio 1a ja kuvio 1 b). Ja jos kasvain yksilöt arvostellaan negatiivinen tai heikko positiivinen pidettiin negatiivinen, ja kohtalainen tai voimakas positiivinen pidettiin positiivisena, oli merkittävä ero kasvain ja normaaleissa kudoksissa, jotka koskevat positiivisten määrä on valuuttalisiin (kuva 1c). Kuva 1 Immunokemia analyysi arvosana valuuttalisiin "esiintyvyys kasvain ja normaali mahan kudoksissa. Parafiinisektioista kirurgisesti toistoleikattiin kasvain ja normaaleissa kudoksissa samasta mahasyöpäpotilaista (100 tapausta) värjättiin FSP1, α-SMA ja prokollageenin-1 ilmentymisen ja valuuttalisiin yleisyys luokiteltiin mukaan positiivisen nopeuden ja voimakkuuden immunokemiallinen värjäystä. Määrä kasvain tai normaalin kudosnäytteiden luokitella -, +, ++ ja +++ verrattiin (a). Ja jakelu näiden neljän laatujen valuuttalisiin "esiintyvyys 100 kasvain tai normaali kudosnäytteiden analysoitiin (b). Grade - ja + pidettiin negatiivinen, kun taas luokan ++ ja +++ katsottiin positiiviseksi valuuttalisiin esiintyvyys, niin numero kasvaimen tai normaali kudosnäytteiden joka oli positiivinen tai negatiivinen valuuttalisiin 'esiintyvyys verrattiin (c).
varten mRNA: n ilmentymisen proteiinien, tulokset osoittivat, että ekspressiotaso kaikkien näiden proteiinien koholla Tuumorinäytteet verrattuna näiden normaaleissa kudoksissa. Ottaen FAP esimerkkinä, mRNA: n ekspression taso FAP Tuumorinäytteet oli 4 kertaa suurempi kuin normaaleissa kudoksissa (kuvio 2a). Ja oli myös 3 kertaa korkeus mRNA: n ilmentymisen tason suhteen SDF-1 (kuvio 2b) tai TGF-β1 (kuvio 2c). Kuvio 2 Realtime-PCR-analyysi erittyvien proteiinien valuuttalisiin kasvaimen ja normaaleissa mahan kudoksissa. Kokonais-RNA oli uutetta ja cDNA valmistettiin kirurgisesti toistoleikattiin kasvain ja normaaleissa kudoksissa samasta mahasyöpäpotilaista (100 tapausta). Reaaliaikainen PCR suoritettiin vertaamaan ilmentymistason FAP (a), SDF-1 (b) ja TGF-β1 (c) kasvaimen ja normaaleissa kudoksissa, kaksi ensimmäistä kaistaa ja elektroforeto- edustettuina normaaleista kudoksista, ja kaksi viimeistä kaistat edusti tuumorikudoksia. *: P < 0.01.
Näistä tuloksista voidaan päätellä, että reaktiivinen valuuttalisiin olivat vallalla mahakasvaimen kudoksissa ja salainen korkeatasoinen proteiinit, jotka on osoitettu olevan olennainen kasvaimen kasvua, invaasio ja metastaasi.
Valuuttalisiin "esiintyvyys oli tarkasti liittyvät invasiivisen ja metastaattisen ominaisuudet mahakasvaimen
sen määrittämiseksi, arvosanalla valuuttalisiin "esiintyvyys voidaan palveli ennustaja ennustetta mahasyöpäpotilaista, korrelaatio analyysi suoritettiin välissä arvosanalla valuuttalisiin" esiintyvyys ja muut kliinispatologiset parametrit mahasyövistä. Kasvain yksilöt luokiteltiin negatiivinen tai heikko positiivinen pidettiin negatiivinen, ja kohtalainen tai voimakas positiivinen katsottiin positiiviseksi näiden analyysien. Potilaan ja kasvainten ominaisuuksiin kuvattiin taulukossa 1. Voimme myös löytää taulukosta 1, että ei ollut korrelaatiota valuuttalisiin "esiintyvyys ja ikä, sukupuoli potilaan tai sijainti kasvain. Oli kasvua valuuttalisiin "esiintyvyys kun kasvain eriyttäminen laski hyvin erilaistunut (43.75%) ja huonosti erilaistunut (64.00%), kun taas positiivinen määrä valuuttalisiin eriytymättömissä mahasyövässä on vain 26,67%, paljon pienempi kuin vuonna hyvin tai huonosti eriytetty syöpien, joten emme löytäneet korrelaatiota valuuttalisiin "esiintyvyys ja kasvaimen erilaistumiseen (P = 0,56). Vaikka koskevat kasvaimen koko, syvyys kasvain (T) ja imusolmukkeen etäpesäke (N), että osoitti tilastollisesti merkittävää korrelaatiota esiintyvyys valuuttalisiin ja näiden kasvainten ominaisuuksiin, joilla on korkeampi positiivinen määrä valuuttalisiin suuremmissa kasvaimia, invasiivisten kasvaimet ja kasvaimet enemmän imusolmuke etäpesäke. Lisäksi voimme todeta, että positiivinen nopeus valuuttalisiin oli korkea mahasyövistä maksan etäpesäke (P < 0,01) tai vatsakalvon etäpesäkkeiden (P < 0,01) .table 1 Potilaan ja kasvaimen ominaisuuksista ja niiden suhteesta valuuttalisiin esiintyvyys

N
Positiivinen valuuttalisiin N (%)
P-arvo
Ikä (vuosi)
2.77a
≤60
47
22 (46.81) B > 60
53
29 (54,72)
Sex
5.11a
Male
57
32 (56,14) B Female
43
19 (44.19) B sijainti kasvain
1.35b
proksimaalinen pää mahaan (1/3)
13
9 (69,23) B mahalaukun runko (1/3)
19
9 (47,37) B Etäpää mahalaukun (1/3)
51
22 (43.14) B yli 1/3 vatsan mukana
17
11 (64.71) B kasvain eriyttäminen
0.56b
No eriytetty
16
7 (43.75) B Kohtalainen eriytetään
44
24 (54,55) B Huonosti eriytetään
25
16 (64,00) B eriyttämätön
15
4 (26.67 ) B Tuumorin koko
0.02a
≤5 cm
62
16 (35.48) B > 5 cm
38
29 (76,32) B Syvyys kasvaimen (T) B 0.03b
Tis
4
1 (25,00) B T1
13
5 (38.46) B T2
39
19 (48,72) B T3
26
15 (57,69) B T4
18
11 (61,11) B Imusolmuke etäpesäke (N) B < 0,01
N0
46
16 (34,78) B N1-3
54
35 (64.81)
Liver etäpesäke
< 0.01A
Kyllä
12
9
Ei
88
42
peritoneum etäpesäke
< 0.01A
Kyllä
9
7 (77,77) B o
91
44 (48.35)
TNM
< 0.01b
IA
15
3 (20) B IB
7
2 (28.57) B II
19
6 (31.58) B IIIA
23
11 (47.83) B IIIB
15
8 (53.33)
IV
21
14 (66,67)
a: Fisherin tarkkaa testiä; b: Chi-Square Tests
Lisäksi tilanteessa tuumorimetastaasin riippumatta imusolmuke etäpesäke, kaukainen etäpesäke tai elimen etäpesäke, positiivinen prosenttiosuus valuuttalisiin on paljon korkeampi kuin niissä ilman etäpesäkkeitä (71,93% vs. 25,58% P < 0,01) (kuvio 3). Kuva 3 prosenttiosuus kasvaimen yksilöiden mikä oli positiivinen tai negatiivinen valuuttalisiin "esiintyvyys potilasryhmässä tai ilman kasvaimen etäpesäke. Kasvain näytteet ryhmiteltiin vai ei mahasyövän potilailla oli tuumorietäpesäke (riippumatta imusolmuke etäpesäke, kaukainen etäpesäke tai elimen etäpesäke). Ja prosenttiosuus näytteistä oli positiivinen (luokka - tai + mukaan immunokemiallisia värjäytyminen) tai negatiivinen (arvosana ++ tai +++ mukaan immunokemialliset värjäys) varten valuuttalisiin 'esiintyvyys analysoitiin (a). Ja immunokemiallinen värjäytymisen α-SMA osoitettiin normaalilta mahan kudoksessa, mahalaukun syövän kudoksen ilman etäpesäke ja mahasyövän kudoksen etäpesäkkeitä (b).
Ja analysoimme myös korrelaatiota mRNA-tasolla FAP, SDF-1, ja TGF-β1 ja mahasyövän vaiheessa. Taso näitä proteiineja pisteytettiin, kuten on kuvattu menetelmät ja kasvaimen kudosnäytteet määritettiin olevan positiivinen, jos pistemäärä on yhtä suuri tai suurempi kuin 8. Todettiin, että positiivinen luku on paljon korkea suuria kasvaimia (> 5 cm, 32/38) kuin pienissä kasvaimissa (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). Ja positiivinen prosenttiosuus Tuumorinäytteissä kanssa TNM IA, IB, II, III ja IV ovat 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) ja 76,2 (16/21), vastaavasti, jotka osoittavat, että esiintyvyys valuuttalisiin läheisesti korreloi mahasyövän vaiheet (p < 0,01). Nämä tulokset viittasivat vahvasti siihen, että valuuttalisiin "esiintyvyys voisi auttaa luomaan mahasyövän vaiheessa ja voitaisiin käyttää markkerina ennustetta mahasyöpäpotilaista.
Keskustelu
Viimeaikaiset tutkimukset molekyyli- ja solubiologian ovat osoittaneet, että kasvaimen kasvu ja etäpesäkkeiden eivät määräydy syöpäsolujen yksin, mutta myös erilaisia ​​stroomasolujen [14, 15]. Strooman aktiivisesti antaa jatkuvasti tukea karsinoomasoluja kaikissa eri patofysiologisia prosesseja, jotka säätelevät syövän etenemiseen. Fibroblastit ovat tärkeä osa kasvaimen strooman, jotka ovat saaneet entistä enemmän huomiota, koska niiden osallistuminen kasvainten kehittymiseen, mukaan lukien kasvu, invaasio ja metastaasi, kuten eturauhasen syöpä [16, 17] tai rintasyövän [18, 19]. On myös osoitettu mahasyövän hiirimallissa että aktivoituneiden fibroblastien edistävät kasvaimen angiogeneesiä [20], ja se on yhdenmukainen pois tulokset aktivoitu fibroblasteja kerääntynyt ihmisen mahasyövän kudoksiin.
Termi fibroblastien sisältää joukon strooman solut suurin piirtein samanlainen fenotyyppi. Useimmat kasvaimet sisältävät ilmeinen biologisesti aktiivisia, fibroblastisolulinjoista tyyppi tunnetaan vaihtelevasti niin reaktiivisia fibroblasteissa, myofibroblasteja tai yksinkertaisesti kasvaimeen liittyviä fibroblasteissa. Sileän lihaksen α-aktiini (α-SMA) on yleisin merkki käyttää tunnistamaan valuuttalisiin, kun taas sen ilmentyminen voi löytyä myös sileän lihaksen soluissa ja myoepithelial soluihin [21]. Joten muita merkkejä pitäisi käyttää yhdessä α-SMA tunnistaa valuuttalisiin. Fibroblasti-spesifinen proteiini 1 (FSP1, S100A4), joka on perheenjäsen Ca2 +: aa sitova S100 proteiineja, konstitutiivisesti sytoplasmassa kudoksen fibroblastien, ja sen ilme on erittäin spesifinen fibroblasteissa [22, 23]. Se on laajalti hyväksytty yhdistää a-SMA ja FSP1 tunnistamista varten kasvaimeen liittyvien fibroblasteissa. Ja meidän kokeessa käytettiin myös kolmasosa markkeri, prokollageenin I tunnistaa reaktiivinen valuuttalisiin kanssa soluväliaineen komponentteja.
Myös havaita mRNA: n ekspression taso muita proteiineja, jotka on ilmaistu tai erittyy valuuttalisien. FAP on tyypin II transmembraani- solupintaproteiini kuuluvat proliinin jälkeen dipeptidyyliaminopeptidaasille perhe, jossa on dipeptidyylipeptidaasi ja endopeptidaasiaktiivisuutta, kuten collagenolytic aktiivisuus, joka pystyy hajottamaan gelatiinia ja tyypin I kollageenin [24, 25]. FAP ilmaistaan ​​valikoidusti valuuttalisiin ja perisyyteissä yli 90% ihmisen epiteelisyövissä tutkitaan [26-30] ja tutkimusta on raportoitu eläinmallissa osoittaa terapeuttista vaikutusta estämällä FAP ilmaisu tai entsyymiaktiivisuutta [31]. Seuraavan proteiini valikoitiin havaitsemiseksi on SDF-1, joka erittyy valuuttalisiin ja stimuloi kasvainsolujen proliferaatiota, angiogeneesiä, invaasion ja metastaasin kautta CXCR4-reseptorin ilmaistaan ​​tuumorisoluissa [32-34]. Toista eritettyä proteiinia havaitsimme on TGF-β1, joka indusoi varten myofibroblasteja erilaistumista [35], ja se voi olla rooli syövän leviämisen-etäpesäkkeiden laskeutuu [36]. Tulokset Esillä tutkimus osoitti, että nämä proteiinit olivat säädellään ylöspäin mahasyövän kudoksissa, mikä viittaa niiden mahdollinen rooli mahalaukun syövän etenemisessä.
Mahalaukun syöpä on toiseksi suurin syy syöpään liittyvien kuolleisuus maailmassa. Ennusteen potilailla mahalaukun syöpä on vaikea määritellä, koska se on yleisesti diagnosoitu, kun mahalaukun seinämän ja metastaasit ovat tapahtuneet. Useat ryhmät yrittäneet löytää biomarkkereita ennustetta mahasyövän. Esimerkiksi ilmaus useiden solunulkoisen matriksin metalloproteinaasien (MMP-2, 7, 9) on todettu olevan koholla mahasyövän kudoksissa verrattuna terveisiin mahalaukun kudoksiin. Ja ylössäätöä näiden MMP mahasyövän on liittynyt huonoon ennusteeseen ja kohonnut invasiivisen kapasiteettia [37]. Toinen esimerkki on insuliinin kaltainen kasvutekijä-1-reseptorin (IGF-1 R), se ilmaistaan ​​usein syöpien ja liittyi kasvaimen koko, määrä strooman syvyys seinän hyökkäystä, imusolmuke etäpesäke, TNM vaiheet ja erilaistumisen tilasta mahasyöpä [38]. Ja VEGF-C ilmentymisen kasvain marginaalit liittyi myös solmukohtien etäpesäkkeitä, imusuonien invaasio, huono toistuminen-elinaika, ja huono kokonaiseloonjääminen, ja voisi toimia itsenäisesti ennusta potilaiden mahalaukun syöpä [39]. Voimme todeta, että nämä ennustavat ovat joko erittämät proteiinit valuuttalisiin tai reseptorien ilmaistaan ​​kasvainsoluja, jotka sitovat erittämät proteiinit valuuttalisiin, joten nämä vihjeet voi ehdottaa, että esiintyvyys valuuttalisiin mahasyövän kudoksissa on tärkeä ennustaja mahasyöpäpotilaista. Ja tuloksemme vahvistivat, että esiintyvyys valuuttalisiin oli tiiviisti metastaattista potentiaalia mahasyövän, ja edelleen työ olisi tehtävä vahvistaa korrelaatio valuuttalisiin "esiintyvyys ja selviytymistä mahasyöpäpotilaista.
Johtopäätökset
Tuloksemme raportti täällä osoittaa, että reaktiivinen syöpään liittyvä fibroblasteja (valuuttalisiin) on usein kertynyt mahasyövässä kudoksissa, ja esiintyvyys valuuttalisiin korreloi kasvaimen koko, syvyys kasvaimen ja kasvaimen etäpesäke sekä yleistä TNM, mikä viittaa siihen, että valuuttalisien olivat kriittisiä kasvaimen kasvua, invaasio ja metastaasi, mikä antaa joitakin tuet ennustetta mahalaukun syöpäpotilailla.
lyhenteet
valuuttalisiin:
kasvaimeen liittyvä fibroblastit
FAP:
fibroblastien aktivoitumisen proteiini
SDF-1:
strooman-soluista saatu kerroin 1
TGF-β1:
transformoiva kasvutekijä beeta 1
ECM:
soluväliaineen
WBC:
valkosolujen määrä

PLT:
trombosyyttimäärä
Hb:
hemoglobiini
GPT:
glutamiinihappo-pyruvaattitransaminaasi-
ALP:
AFOS
PT:
protrombiiniaikaa

CNS:
keskeinen hermot järjestelmä
α-SMA:
α-sileän lihaksen aktiini
FSP1:
fibroblasti tiettyyn proteiiniin 1
GAPDH:
glyseraldehydi fosfaattidehydrogenaasin
MMP:
matriksimetalloproteinaasi

VEGF:
endoteelikasvutekijä.
julistukset
Kiitokset
Haluamme kiittää professori Li Gao osastolla patologian Changhai Hospital ja Dr. Ni Zhu Keski Lab Changhai sairaalan asiantuntevista tekninen tukee kokeita varten. Tätä työtä tukivat National Natural Science Foundation of China (30672046).
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 Kilpailevat edut
Kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.

• Perustaminen ja luonnehdinta etäpesäke malli ihmisen mahasyövän nude mice
• Havaitseminen kiinteän pisteen ja ei-vartijaimusolmukkeiden mikrometastaasien täydelliset mikrotomiamenetelmiä ja immunohistokemiallista analyysiä mahasyövän