fibroblasti cancro-associata sono positivamente correlati con potenziale metastatico dei cancers

gastrica fibroblasti cancro-associata umani sono correlati positivamente con il potenziale metastatico dei tumori gastrici umani
Abstract
sfondo
La prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico è difficile da prevedere, perché di difetti di stabilire le caratteristiche chirurgica-patologiche. fibroblasti cancro-associata (CAF) sono stati trovati a svolgere il ruolo di primo piano nel promuovere la crescita del tumore, invasione e metastasi. Così solleva l'ipotesi che l'entità del CAF prevalenza può aiutare a stabilire la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico
. Metodi
Immunochimica e gli esperimenti in tempo reale-PCR sono state effettuate per confrontare l'espressione di proteine ​​che sono marcatori specifici di CAF o secreto dalla CAF nel tumore e campioni di tessuto normale. L'entità della CAF 'la prevalenza è stata classificata in base alla colorazione immunochimica, e la correlazione è stato ulteriormente analizzato tra il CAF' prevalenza e altre caratteristiche del tumore, che possono influenzare la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico.
Risultati
Quasi l'80 per cento dei normali tessuti gastrici erano negativi o deboli positivo per CAF colorazione, mentre oltre il 60 per cento dei tessuti di cancro gastrico sono stati moderati o forti positivo per CAF colorazione. risultati in tempo reale-PCR hanno mostrato significativa espressione elevata di FAP, SDF-1 e TGF-β1 nei tessuti di cancro gastrico rispetto ai normali tessuti gastrici. Ulteriori analisi hanno dimostrato che la prevalenza CAF 'è stata correlata con le dimensioni del tumore, la profondità del tumore, metastasi linfonodali, metastasi epatiche o di metastasi del peritoneo.
Conclusioni
reattivi di cancro associato fibroblasti (CAF) sono stati spesso accumulati nei tessuti di cancro gastrico, e la prevalenza di CAF è stata correlata con le dimensioni del tumore, la profondità del tumore e tumore metastasi, quindi dare alcuni supporti per stabilire la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico.
Sfondo
cancro gastrico è la seconda causa di cancro morte correlate in tutto il mondo [1]. Esistono variazioni geografiche sostanziali in termini di incidenza di cancro gastrico e rappresenta il tumore più comune in Cina [2]. Sempre più pazienti affetti da cancro gastrico sono stati diagnosticati negli ultimi anni, con il cambiamento di dieta e stile di vita, così come lo sviluppo di procedure diagnostiche. Anche se il trattamento chirurgico ha dimostrato di essere efficace per alcuni tipi di cancro gastrico precoce, tra cui gastrectomia totale e prolungato gastrectomia radicale, la prognosi di questi pazienti è scarsa a causa della recidiva dopo l'intervento chirurgico, in forma di diffusione linfatica, metastasi ematica, o peritoneale diffusione [3].
la prognosi di pazienti con cancro gastrico ha dimostrato di essere influenzato da diverse caratteristiche chirurgici-patologiche consolidate, come la fase patologico, la posizione del tumore e il tipo istologico e grado del tumore [ ,,,0],4]. Mentre Aurello et al. [5] hanno indicato che il numero di nodi necessari per concludere N0 può variare in funzione della profondità di invasione tumorale (T), la classificazione TNM richiede il recupero e l'analisi di almeno 15 linfonodi per la stadiazione accurata. Tuttavia, nella maggior parte dei casi, il numero di nodi sezionato è più piccolo e solo il 20 al 30% dei pazienti hanno la dissezione minimo raccomandato di 15 nodi. Sono necessari indicatori accessorie che possono fornire ulteriori informazioni della prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico.
cancro-associata fibroblasti (CAF), uno dei più importanti cellule stromali che comprendono tumori solidi, è stato trovato per svolgere il ruolo di primo piano nel promuovere la crescita del tumore e progressione [6]. A differenza di fibroblasti di riposo, CAF possiedono un fenotipo attivato e possono essere identificati dalla loro espressione di specifici fibroblasti della proteina 1 (FSP1), vimentina, desmina e actina α-muscolatura liscia [7]. CAF comunicano tra loro nonché con le cellule tumorali e cellule infiammatorie ed immunitarie direttamente attraverso il contatto cellulare e indirettamente attraverso paracrino /segnalazione esocrina, proteasi, e modulazione della matrice extracellulare (ECM). Questa rete di comunicazione complesso è fondamentale per fornire il microambiente opportuno sostenere tumorigenesi, l'angiogenesi, e le metastasi [8, 9]. Inoltre, rispetto alle cellule tumorali trasformate, CAF sono più geneticamente omogenee [10] ed è stato dimostrato da Gastavo et al che stroma reattiva può agire come un fattore predittivo di recidiva nel carcinoma della prostata [11], in tal modo rappresentare un predittore attraente e target terapeutico per i pazienti con tumori.
in questo studio, abbiamo raccolto 100 casi di campioni di resezione chirurgica del cancro gastrico primaria così come normali tessuti gastrici (più di 5 cm dalla tessuto tumorale) da gennaio 2007 a giugno 2007, la seconda Military Medical Università affiliata Changhai Hospital (Shanghai, Cina). esperimenti immunochimica e RT-PCR sono state effettuate per confrontare l'espressione di proteine ​​che sono marcatori specifici del CAF o secreto dalla CAF nel tumore e campioni di tessuto normale. L'entità della CAF 'la prevalenza è stata classificata in base alla colorazione immunochimica, e la correlazione è stato ulteriormente analizzato tra il CAF' prevalenza e altre caratteristiche del tumore, che possono influenzare la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico.
Metodi
coorte iscrizione
Cento casi di pazienti affetti da cancro gastrico primari sono stati arruolati da gennaio 2007 al giugno 2007 in ospedale Changhai seconda Università medica militare affiliato. Tutti i pazienti hanno fornito un consenso informato scritto. criteri di ammissione per questo studio includono: (a) nessun trattamento di chemioterapia preoperatoria; (B) patologico o citologicamente convalidato gastrico-adenocarcinoma; (C) di età compresa tra i 18-85 anni; (D) prevede che la vita > 3 mesi; (E) WBC > 3,5 × 10 9 /L; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /L; Creatinina sierica non più di 1,25 volte il limite superiore di normalità; GPT e ALP non più di 1,25 volte il limite superiore di normalità; bilirubina totale non più di 1,5 volte il limite superiore di normalità; PT < 12s; e (f) nessuna malattia del sistema nervoso centrale grave.
analisi patologica
Tutti i campioni, tra cui tessuti tumorali e tessuti gastrici normali che era più di 5 cm lontano da tessuti tumorali sono stati fissati in formalina al 10% entro 30 minuti dopo la resezione chirurgica. sono stati preparati paraffina sezioni seriali embedded (4 micron). differenziazione del tumore è stata caratterizzata in base alla classificazione WHO (2000), mentre la classificazione TNM è stato fatto secondo le norme dell'Unione Internazionale Contro il Cancro, quinta edizione (1997)
. Immunochimica
anticorpo utilizzato in questa procedura comprende coniglio anti-FSP1 anticorpo policlonale ( Abcam, 01:50), topo anti-α-SMA anticorpo monoclonale (Sigma, 1A4, 1: 200), ratto anti-procollagene I anticorpo monoclonale (Chemicon, Mab1912, 1: 500), biotina-coniugato topo anti-IgG di topo anticorpo policlonale (eBioscience, 13-4013, 1: 100), topo anti-ratto anticorpo policlonale IgG biotina-coniugato (eBioscience, 13-4813, 1: 100) e topo anti-coniglio anticorpo policlonale IgG biotina-coniugato (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). analisi immunochimica è stata eseguita come precedentemente descritto [12]. Brevemente, sezioni di paraffina sono state de-paraffinized in xilene e una serie di soluzioni alcoliche graduate. Le sezioni sono state quindi trattate con perossido di idrogeno allo 0,3% (H2O2) in acqua per 10 minuti per spegnere qualsiasi attività perossidasica endogena all'interno del tessuto, ed i siti di legame non specifici sono stati bloccati con 0,5% di albumina di siero bovino (BSA) per 10 minuti a temperatura ambiente . Successivamente, le sezioni sono state incubate per 15 minuti in presenza dell'anticorpo primario, e quindi i vetrini sono stati lavati in tampone fosfato salino (PBS) contenente 0,1% di Tween 20 (PBS /Tween) per 15 minuti mentre si cambia la soluzione 3 volte prima l'applicazione dell'anticorpo biotinilato secondario. I vetrini sono state incubate con l'anticorpo secondario per 15 minuti a temperatura ambiente prima di essere lavati per 15 minuti in PBS /Tween che è stato modificato 3 volte. Le sezioni sono state poi incubate per 15 minuti con un complesso di rafano perossidasi avidina-biotina, e la reazione visualizzati utilizzando 0,02% 3,3'-diaminobenzidina tetraidrocloride come cromogeno in tampone Tris-HCl, pH 7,6, contenente 0,03% H2O2. Ematossilina stato utilizzato per colorazione di contrasto nuclei.
Istologica analisi
Per valutare il livello di FSP1, α-SMA ed espressione procollagene-I, la percentuale di cellule positive-colorazione sono stati classificati su una scala di 0-3, con meno del 5% di cellule positive-colorazione come grado 0, 5-25% di grado 1, 26-50% come grado 2, e più del 50% di grado 3. e l'intensità della colorazione classificati anche su una scala 0- 2, con negativo a debole intensità di grado 0, debole intensità moderata, come di grado 1, e da moderata a forte intensità di grado 2. Dieci campi ad alta potenza sono stati selezionati in modo casuale per ogni diapositive e analizzati da due patologi indipendentemente. Per ogni indicatore, il punteggio di percentuale e l'intensità è stata moltiplicata ed i punteggi per questi tre marcatori è stato aggiunto quando questi marcatori sono stati analizzati congiuntamente. E il punteggio finale tra 0-6 è stata determinata come negativo (-), il punteggio tra 7-9 è stato determinato come positivo debole (+), il punteggio tra 10-12 è stato determinato come positivo moderato (++), e il punteggio superiore a 13 è stato determinato come fortemente positivo (+++)
. Realtime-PCR
RNA totale è stato estratto da tumore o normali tessuti di reagente Trizol (Invitrogen) e cDNA primo filamento, venne sintetizzato utilizzando kit RevertAid First Strand cDNA Synthesis ( Fermentas, USA), come descritto in precedenza [13]. Realtime PCR è stata effettuata utilizzando LightCycler DNA Maestro SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Germania) secondo le istruzioni del produttore. Le copie di cDNA bersaglio sono stati normalizzati per GAPDH espressione. Primer per FAP, SDF-1, TGF-β1 e GAPDH sono stati elencati come segue:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5'- AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
Per ogni cDNA bersaglio, le copie dei normali campioni di tessuto è media, e le copie di ciascun campione di tessuto tumorale è diviso per la media, allora i risultati di questi cDNA tre bersaglio viene aggiunto per ogni campione di tessuto tumorale. Se la somma è uguale o superiore a 8, quindi il tessuto tumorale è considerato positivo per CAF.
Analisi statistica
dati sono mostrati come medie e deviazioni standard. Le analisi statistiche dei dati sono stati analizzati con il test t di Student indipendente a due code e χ 2 analisi per SPSS 12.0. Il livello di significatività statistica è stato fissato a P < 0.05.
Risultati
reattivi tumorali fibroblasti associati erano prevalenti nei tessuti di cancro gastrico
Per determinare l'entità della prevalenza CAF 'nei tessuti di cancro gastrico, paraffina sezioni integrate di campioni di tessuto sono stati preparati e colorate per FSP1, α- SMA e di espressione procollagene io come descritto sopra. Inoltre, in tempo reale-PCR è stato effettuato per determinare il livello di espressione di diverse proteine ​​che fu manifestarsi o secreti mediante CAF reattivi, come FAP, SDF-1 e TGF-β1.
Risultati dell'immunochimica colorazione dimostrarono che fibroblasti più reattivi erano presenti nei tessuti di cancro gastrico rispetto ai normali tessuti gastrici. Venti quattro dei 100 campioni normali sono risultati negativi (-) per fibroblasti reattivi colorazione e 55 campioni normali sono risultati positivi debole (+). E il numero di esemplari normali che erano moderata (++) o fortemente positivo (+++) erano, rispettivamente, 21 e 0,. Mentre relativa tessuti tumorali, c'erano 13, 26, 25 e 36 campioni che erano negativi (-), debolmente positivo (+), moderato positivo (++) e fortemente positivo (+++) per fibroblasti colorazione, rispettivamente (Fig 1a e Fig 1b). E se i campioni tumorali classificati come negativi o deboli positivi sono stati considerati come negativi, e moderata o forte positivi sono stati considerati positivi, vi era una differenza significativa tra tumore e tessuti normali riguardanti il ​​tasso positivo di CAF (Fig 1c). Figura 1 analisi immunochimica del grado di diffusione CAF 'nel tumore e tessuti gastrici normali. Sezioni in paraffina di tumore chirurgicamente asportato e tessuti normali dagli stessi pazienti affetti da cancro gastrico (100 casi) sono state colorate per FSP1, α-SMA e procollagene-1 espressione e CAF prevalenza è stata classificata in base al tasso positivo e l'intensità della colorazione immunochimica. Il numero di tumore o campioni di tessuto normale classificate come -, +, ++ e +++ stato confrontato (a). E la distribuzione di questi quattro gradi di prevalenza CAF 'nei 100 tumore o campioni di tessuto normale sono stati analizzati (b). Grado - e + è stato considerato come negativo, mentre quelle di grado ++ e +++ è stato considerato positivo per CAF prevalenza, allora il numero di tumore o di campioni di tessuto normale, che è stato positivo o negativo per la prevalenza CAF 'stato confrontato (c).
per l'espressione mRNA delle proteine, i risultati hanno dimostrato che il livello di espressione di tutte queste proteine ​​erano elevati in campioni tumorali rispetto a questi in tessuti normali. Prendendo FAP come esempio, il livello di espressione di mRNA di FAP in campioni tumorali era 4 volte superiore a quello nei tessuti normali (Fig 2a). E c'erano anche 3 volte elevazione del livello di espressione di mRNA in materia di SDF-1 (Fig 2b) o TGF-β1 (Fig 2c). Figura 2 l'analisi in tempo reale-PCR delle proteine ​​secrete da CAF nel tumore gastrico e tessuti normali. L'RNA totale è stato estratto e cDNA è stato preparato da tumore chirurgicamente asportato e tessuti normali dagli stessi pazienti affetti da cancro gastrico (100 casi). Realtime-PCR è stata effettuata per confrontare il livello di espressione di FAP (a), SDF-1 (b) e TGF-β1 (c) nei tessuti tumorali e normali, i primi due corsie della electrophoretogram rappresentati tessuti normali e gli ultimi due corsie rappresentati tessuti tumorali. *: P < 0.01.
Da questi risultati, possiamo concludere che CAF reattivi erano prevalenti nei tessuti tumorali gastriche e segreta alto livello di proteine ​​che hanno dimostrato di essere essenziale per la crescita del tumore, invasione e metastasi. Prevalenza
CAF 'era strettamente in relazione con le proprietà invasive e metastatici del tumore gastrico
per determinare se il grado di CAF 'prevalenza può essere servita come un fattore predittivo per la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico, analisi di correlazione è stata realizzata tra il grado di CAF' prevalenza e altri clinicopatologici parametri di tumori gastrici. campioni tumorali classificati come negativi o deboli positivi sono stati considerati come negativi, e moderata o forte positivi sono stati considerati positivi in ​​queste analisi. Paziente e del tumore caratteristiche sono state descritte nella Tabella 1. troviamo anche nella tabella 1 che non vi era alcuna correlazione tra la prevalenza CAF 'e l'età, il sesso del paziente o la posizione del tumore. C'è stato un aumento della prevalenza CAF 'quando la differenziazione del tumore è diminuita da ben differenziato (43,75%) per poco differenziato (64,00%), mentre il tasso positivo di CAF in cancro gastrico indifferenziata è solo 26,67%, molto inferiore a quella in bene o tumori gastrici scarsamente differenziati, quindi non siamo riusciti a trovare la correlazione tra i CAF 'prevalenza e tumore differenziazione (P = 0,56). Mentre relativa dimensione del tumore, la profondità del tumore (T) e metastasi linfonodali (N), non ha mostrato statisticamente significativa correlazione tra la prevalenza di CAF e queste caratteristiche tumorali, con alto tasso positivo di CAF in tumori più grandi, tumori più invasive e tumori con più metastasi linfonodali. Inoltre possiamo trovare che il tasso positivo di CAF è stata elevata nei tumori gastrici con metastasi epatiche (P < 0,01) o metastasi del peritoneo (P < 0,01) .table 1 paziente e del tumore caratteristiche e il loro rapporto con i CAF prevalenza

N
positivo per il CAF N (%)
valore P
Età (anno)
2.77a
≤60
47
22 (46.81)
> 60
53
29 (54.72)
Sex
5.11a
Maschio
57
32 (56.14)
femminile
43
19 (44.19)
posizione del tumore
1.35b
fine prossimale dello stomaco (1/3)
13
9 (69.23)
corpo gastrico (1/3)
19
9 (47.37)
fine a distanza di stomaco (1/3)
51
22 (43.14)
più di 1/3 dello stomaco coinvolti
17
11 (64.71)
Tumore differenziazione
0.56b
ben differenziato
16
7 (43.75)
Moderato differenziato
44
24 (54.55)
scarsamente differenziato
25
16 (64.00)
indifferenziato
15 Pagina 4 (26.67 )
dimensioni del tumore
0.02A
≤5 cm
62
16 (35.48)
> 5 cm
38
29 (76.32)
Profondità di tumore (T)
0.03b
Tis 4
1 (25.00)
T1
13
5 (38.46)
T2
39
19 (48.72)
T3
26
15 (57.69)
T4
18
11 (61.11)
metastasi linfonodali (N)
< 0,01
a N0
46
16 (34.78)
N1-3
54
35 (64.81)
metastasi epatiche
< 0,01
Sì
12
9
No
88
42
peritoneo metastasi
< 0,01
Sì
9 Pagina 7 (77.77)
No
91
44 (48.35)
TNM fase
< 0.01b
IA
15 Pagina 3 (20)
IB
7 Pagina 2 (28.57)
II
19
6 (31.58)
IIIA
23
11 (47.83)
IIIB
15 Pagina 8 (53.33)
IV
21
14 (66.67)
una: test esatto di Fisher; B: chi-quadrato Test
Inoltre, nella situazione di metastasi tumorali, qualunque sia metastasi linfonodali, metastasi a distanza o metastasi organo, la percentuale positiva per CAF è molto superiore a quella nei pazienti senza metastasi (71.93% vs 25.58% , P < 0,01) (Figura 3). Figura 3 La percentuale di campioni tumorali che era positivo o negativo per la prevalenza CAF 'nel gruppo di pazienti con o senza metastasi tumorali. I campioni tumorali sono stati raggruppati in base alla se i pazienti affetti da cancro gastrico hanno avuto metastasi tumorali (qualunque metastasi linfonodali, metastasi a distanza o metastasi organo). E la percentuale dei campioni che è stata positiva (grado - o + secondo colorazione immunochimico) o negativo (grado ++ o +++ secondo colorazione immunochimica) per prevalenza CAF 'stato analizzato (a). E la colorazione immunochimico di α-SMA è stato mostrato nel tessuto gastrico normale, tessuto cancro gastrico senza metastasi e tessuti cancro gastrico con metastasi (b).
E abbiamo anche analizzato la correlazione tra il livello di mRNA di FAP, SDF-1 e TGF-β1 e la fase di cancro gastrico. Il livello di queste proteine ​​sono stati segnati come descritto nei metodi e campioni di tessuto tumorale sono stati determinati ad essere positivo se il punteggio è uguale o superiore a 8. Si è riscontrato che la percentuale positivo è molto più elevata in tumori di grandi dimensioni (> 5 cm, 32/38), quello in piccoli tumori (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). E la percentuale positivo in campioni tumorali con stadio TNM IA, IB, II, III A, III B e IV sono il 33,3% (5/15), il 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) e 76,2 (16/21), rispettivamente, mostrando che la prevalenza del CAF è strettamente correlata con gli stadi di cancro gastrico (p < 0,01). Questi risultati suggeriscono fortemente che la prevalenza CAF 'potrebbe contribuire a stabilire la fase di cancro gastrico e potrebbe essere utilizzato come marker per la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico.
Discussione
Recenti studi di biologia molecolare e cellulare hanno dimostrato che la crescita tumorale e metastasi non sono determinate dai soli ma anche le cellule tumorali da una varietà di cellule stromali [14, 15]. Lo stroma fornisce attivamente supporto continuo di cellule di carcinoma in tutti i diversi processi fisiopatologici che modulano la progressione del tumore. I fibroblasti sono una componente importante di stroma del tumore, che hanno ricevuto una maggiore attenzione a causa della loro partecipazione nello sviluppo del tumore, tra cui la crescita, invasione e metastasi, come ad esempio nel cancro alla prostata [16, 17] o il cancro al seno [18, 19]. E 'stato dimostrato anche in un topo di cancro gastrico modello che attivano i fibroblasti promuovere l'angiogenesi tumorale [20], ed è coerente con i risultati fuori che attivano i fibroblasti sono stati accumulati nei tessuti di cancro gastrico umano.
Il termine fibroblasti comprende una serie di stromale cellule con un fenotipo sostanzialmente simile. La maggior parte dei tumori incorporano una, tipo di cellula evidente biologicamente attiva fibroblastica conosciuta variamente come fibroblasti reattivi, miofibroblasti, fibroblasti o semplicemente associata al tumore. Muscolo liscio α-actina (α-SMA) è il marcatore più comune utilizzato per identificare i CAF, mentre la sua espressione si possono trovare anche in cellule muscolari lisce e cellule mioepiteliali [21]. Così altri marcatori devono essere utilizzati in combinazione con α-SMA per identificare CAF. specifici fibroblasti della proteina 1 (FSP1, S100A4), un membro della famiglia di Ca2 + -Binding proteine ​​S100, costitutivamente espressa nel citoplasma di fibroblasti del tessuto, e la sua espressione è altamente specifico per i fibroblasti [22, 23]. È ampiamente accettato per combinare a-SMA e FSP1 per l'identificazione di fibroblasti associati al tumore. E nel nostro esperimento, abbiamo usato anche un terzo marcatore, procollagene I, per identificare i CAF reattivi con la produzione di componenti della matrice extracellulare.
Abbiamo inoltre rilevato il livello di espressione di mRNA di altre proteine ​​che si esprime o secreti dal CAF. FAP è una proteina di tipo II superficie cellulare transmembrana appartenente alla famiglia dipeptidil aminopeptidasi post-prolina, con dipeptidil peptidasi e l'attività endopeptidasi, compresa un'attività collagenolitica capace di degradare gelatina e collagene di tipo I [24, 25]. FAP è espressa in modo selettivo dal CAF e periciti in più del 90% dei tumori epiteliali umane esaminato [26-30] e la ricerca è stata riportata in modello animale che mostra un effetto terapeutico inibendo l'espressione FAP o attività enzimatica [31]. La prossima proteine ​​abbiamo selezionato per rilevare è SDF-1, che viene secreto dalla CAF e stimola la proliferazione delle cellule tumorali, l'angiogenesi, invasione e metastasi attraverso il recettore CXCR4 espressa dalle cellule tumorali [32-34]. Un'altra proteina secreta abbiamo rilevato è TGF-β1, che è un potente induttore di miofibroblasti differenziazione [35], e può svolgere un ruolo nel tumore cascate invasione-metastasi [36]. I risultati di questo studio hanno dimostrato che queste proteine ​​sono up-regolati nei tessuti di cancro gastrico, suggerendo il loro possibile ruolo nel promuovere la progressione del cancro gastrico.
Cancro gastrico è la seconda causa di mortalità per cancro-associata in tutto il mondo. La prognosi in pazienti con cancro gastrico è difficile da stabilire perché è comunemente diagnosticata quando l'invasione parete gastrica e le metastasi si sono verificati. Diversi gruppi hanno tentato di trovare alcuni biomarcatori per la prognosi del cancro gastrico. Ad esempio, l'espressione di diversi metalloproteinasi della matrice extracellulare (MMP-2, 7, 9) è stato trovato per essere elevati nei tessuti cancro gastrico rispetto ai tessuti sani gastriche. E l'up-regolazione di questi MMP a cancro gastrico è stato associato ad una prognosi sfavorevole ed elevate capacità invasiva [37]. Un altro esempio è insulin-like growth factor-1 receptor (IGF-1R), si è spesso espresso in tumori gastrici ed è stata associata con le dimensioni del tumore, la quantità di stroma, profondità dell'invasione muro, metastasi linfonodali, stadi TNM e lo stato di differenziazione delle cancro gastrico [38]. E l'espressione di VEGF-C a margini del tumore è stata anche associata con metastasi linfonodali, l'invasione dei vasi linfatici, scarsa sopravvivenza libera da recidiva, e la scarsa sopravvivenza globale, e potrebbe servire come un fattore predittivo indipendente per i pazienti con carcinoma gastrico [39]. Possiamo trovare che questi predittori sono o proteine ​​secrete da CAF o recettori espressi dalle cellule tumorali che si legano alle proteine ​​secrete dai CAF, per cui questi indizi possono suggerire che la prevalenza della CAF nei tessuti di cancro gastrico sarà un importante fattore predittivo di pazienti affetti da cancro gastrico. E i nostri risultati hanno confermato che la prevalenza di CAF è stato strettamente associato con il potenziale metastatico del cancro gastrico, e l'ulteriore lavoro dovrebbe essere fatto per confermare la correlazione tra prevalenza e sopravvivenza dei pazienti affetti da cancro gastrico CAF.
Conclusioni
I nostri risultati Riporto qui dimostrano che reattivi cancro associato fibroblasti (CAF) sono stati spesso accumulati nei tessuti di cancro gastrico, e la prevalenza di CAF è stata correlata con le dimensioni del tumore, la profondità del tumore e metastasi del tumore, nonché la fase di generale TNM, suggerendo che CAF erano critiche per la crescita del tumore, invasione e metastasi, quindi dare alcuni supporti per la prognosi dei pazienti affetti da cancro gastrico
Abbreviazioni
CAF:.
tumore associato fibroblasti
FAP:
proteina attivazione dei fibroblasti
SDF-1:
cellule stromali derivate fattore 1
TGF-β1:
fattore di crescita trasformante beta 1
ECM:
matrice extracellulare
WBC:
globuli bianchi conta

PLT:
conta piastrinica
Hb:
emoglobina
GPT:
glutammico-piruvico transaminasi
ALP:
fosfatasi alcalina
PT:
tempo di protrombina

CNS:
sistema nervoso centrale
α-SMA: actina
α-muscolatura liscia
FSP1:
fibroblasti specifica proteina 1
GAPDH:
gliceraldeide fosfato deidrogenasi
MMP:
metalloproteinasi della matrice

VEGF:.
fattore di crescita vascolare endoteliale
Dichiarazioni
Ringraziamenti
vogliamo ringraziare il Prof. Li Gao presso il Dipartimento di patologia del Changhai Hospital e il dottor Zhu Ni nel laboratorio centrale di Changhai Hospital per il loro supporto tecnico di esperti per gli esperimenti. Questo lavoro è stato sostenuto dal National Science Foundation naturale della Cina (30.672.046).
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Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.

• Creazione e caratterizzazione di un modello metastasi del cancro gastrico umano in topi nudi
• Rilevazione di sentinella e non sentinella micrometastasi linfonodali di sezionamento di serie completa e analisi immunoistochimica per la rilevazione cancer