fibroblastos associados ao câncer são positivamente correlacionados com o potencial metastático de fibroblastos associados ao câncer gástrico cancers

humanos são positivamente correlacionados com potencial metastático de cancros gástricos humanos da arte abstracta
Fundo
O prognóstico dos pacientes com câncer gástrico é difícil de prever, porque de defeitos de estabelecer as características cirúrgico-patológicos. fibroblastos associada a cancro (FAC) tenha sido encontrada a desempenhar um papel importante na promoção do crescimento do tumor, invasão e metástase. Assim, levanta a hipótese de que o grau de prevalência FAC pode ajudar a estabelecer o prognóstico de pacientes com câncer gástrico.
Métodos
Imunoquímica e experiências em tempo real-PCR foram realizadas para comparar a expressão de proteínas que são marcadores específicos de FAC ou secretado por FAC no tumor e amostras de tecidos normais. A extensão da FAC 'prevalência foi graduada de acordo com a coloração imunoquímico, e correlação foi ainda analisada entre FAC' prevalência e outras características tumorais que podem influenciar o prognóstico dos pacientes com câncer gástrico.
Resultado
Quase 80 por cento dos tecidos gástricos normais foram negativos ou fraco positivo para FAC coloração, enquanto mais de 60 por cento dos tecidos com cancro gástrico foram moderada ou forte positivo para FAC coloração. Resultados Tempo Real-PCR também apresentaram expressão elevada significativa do FAP, SDF-1 e TGF-β1 em tecidos de cancro gástrico em comparação com tecidos normais gástricas. Outras análises mostraram que a prevalência do FAC 'foi correlacionada com o tamanho do tumor, a profundidade do tumor, metástase linfonodal, metástases hepáticas ou metástase peritônio.
Conclusões
cancro associado fibroblastos reativos (CAFS) eram frequentemente acumulado em tecidos de câncer gástrico, e a prevalência de FAC foi correlacionada com o tamanho do tumor, a profundidade do tumor e metástases do tumor, assim, dar alguns apoios para o estabelecimento do prognóstico dos doentes com cancro gástrico.
fundo
cancro gástrico é a segunda principal causa de câncer morte relacionada em todo o mundo [1]. existem variações geográficas substanciais na incidência de câncer gástrico e representa o câncer mais comum na China [2]. pacientes com câncer mais e mais gástricos foram diagnosticados nos últimos anos com a mudança de dieta e estilo de vida, bem como desenvolver procedimentos de diagnóstico. Embora o tratamento cirúrgico tem mostrado ser eficaz para alguns tipos de cancro gástrico precoce, incluindo gastrectomia total e gastrectomia radical estendida, o prognóstico destes pacientes é deficiente devido à recorrência após a cirurgia, na forma de disseminação linfática, metástase transmitidas pelo sangue, ou peritoneal difusão [3].
o prognóstico de paciente com cancro gástrico tem sido mostrado para ser influenciada por várias características cirúrgicos-patológica estabelecidos, tais como a fase patológica, a localização do tumor e o tipo histológico e grau do tumor [ ,,,0],4]. Enquanto Aurello et ai. [5] indicaram que o número de nós necessários para concluir N0 pode variar de acordo com a profundidade de invasão do tumor (T), a classificação TNM requer a recuperação e análise de, pelo menos, 15 nódulos linfáticos para estadiamento preciso. No entanto, na maioria dos casos, o número de gânglios dissecados é menor e apenas 20 a 30% dos pacientes têm a dissecção mínima recomendada de 15 nós. são necessários indicadores acessórias que podem fornecer mais informações sobre o prognóstico de pacientes com câncer gástrico.
fibroblastos Cancer-associado (CAF), uma das células do estroma importantes que compreendem tumores sólidos, foi encontrado a desempenhar papel de destaque na promoção do crescimento do tumor e progressão [6]. Em contraste com os fibroblastos em repouso, possuem um fenótipo FAC activado e podem ser identificados pela sua expressão de proteínas específicas do fibroblasto 1 (FSP1), vimentina, desmina, actina e α-do músculo liso [7]. FAC comunicar entre si, bem como com as células cancerígenas e as células inflamatórias e imunitárias directamente através do contacto celular e indirectamente através parácrino /sinalização exócrina, proteases, e modulação da matriz extracelular (ECM). Esta complexa rede de comunicações é fundamental para proporcionar o microambiente adequada para apoiar tumorigênese, angiogênese e metástase [8, 9]. Além disso, em comparação com células de tumor transformadas, FAC são geneticamente mais homogénea [10] e foi demonstrado por Gastavo et ai que o estroma reactivo pode actuar como um preditor de recorrência no cancro da próstata [11], assim, representar um preditor atraente e alvo terapêutico para pacientes com tumor.
neste estudo, foram coletadas 100 casos de espécimes de ressecção cirúrgica de câncer gástrico primário, bem como tecidos gástricos normais (mais de 5 cm longe de tecido tumoral) a partir de Janeiro de 2007 a Junho de 2007 no Second Medical Militar Universidade afiliada Changhai hospitalar (Xangai, China). Immunochemistry e RT-PCR foram realizadas experiências para comparar a expressão de proteínas que são marcadores específicos de FAC ou segregada por FAC no tumor e amostras de tecidos normais. A extensão da FAC 'prevalência foi graduada de acordo com a coloração imunoquímico, e correlação foi ainda analisada entre FAC' prevalência e outras características tumorais que podem influenciar o prognóstico dos pacientes com câncer gástrico.
Métodos
Cohort inscrição
Cem casos de pacientes com câncer gástrico primários foram inscritos entre Janeiro de 2007 a Junho de 2007 no hospital Changhai segunda Universidade médica Militar filiados. Todos os pacientes apresentaram um consentimento informado por escrito. critérios de entrada para este estudo incluem: (a) sem tratamento quimioterapia pré-operatória; (B) patologicamente ou citologia validado gástrica-adenocarcinoma; (C) com idade entre 18-85 anos; (D) esperado vida > 3 meses; (E) WBC > 3,5 x 10 9 /l; PLT > 10 11 /L; Hb > 100 g /L; creatinina sérica não mais do que 1,25 vezes do limite superior normal; GPT e ALP não mais do que 1,25 vezes do limite superior normal; bilirrubina total não superior a 1,5 vezes do limite superior normal; PT < 12s; e (f) qualquer doença grave do SNC.
análise patológica
Todas as amostras, incluindo tecidos tumorais e tecidos gástricos normal que foi mais do que 5 cm distante de tecidos tumorais foram fixados em formalina a 10% dentro de 30 minutos após a ressecção cirúrgica. Foram preparados cortes seriados embutidos de parafina (4 mm). diferenciação do tumor foi caracterizado de acordo com a classificação da OMS (2000), enquanto que a classificação TNM foi feito de acordo com a União Internacional Contra o Câncer, quinta edição (1997).
Imunoquímica
anticorpo utilizado neste procedimento inclui anticorpo policlonal de coelho anti-FSP1 ( Abcam, 01:50), rato anticorpo anti-α-SMA monoclonal (Sigma, 1A4, 1: 200), de rato anti-procolagénio I anticorpo monoclonal (Chemicon, Mab1912, 1: 500), IgG de rato conjugado com biotina anti-murganho anticorpo policlonal (eBioscience, 13-4013, 1: 100), anticorpo policlonal de IgG anti-rato conjugado com biotina (eBioscience, 13-4813, 1: 100) e anticorpo conjugado com biotina de ratinho anti-IgG de coelho policlonal (BD PharMingen, C101-167, 1: 100). análise imunoquímica foi realizada como previamente descrito [12]. Resumidamente, secções de parafina foram de-parafinado em xileno e uma série de soluções de álcool graduado. As secções foram então tratadas com peróxido de hidrogénio a 0,3% (H2O2) em água durante 10 minutos para extinguir qualquer actividade de peroxidase endógena no interior do tecido, e os locais de ligação não específicos foram bloqueadas com 0,5% de albumina de soro bovino (BSA) durante 10 minutos à temperatura ambiente . Em seguida, as secções foram incubadas durante 15 minutos na presença do anticorpo primário, e, em seguida, as lâminas foram lavadas em solução salina de fosfato tamponada (PBS) contendo 0,1% de Tween 20 (PBS /Tween) durante 15 minutos enquanto se ajusta a solução 3 vezes antes a aplicação do anticorpo biotinilado secundário. As lâminas foram incubadas com o anticorpo secundário por 15 minutos à temperatura ambiente antes de serem lavadas durante 15 minutos em PBS /Tween que foi mudado 3 vezes. As secções foram então incubadas durante 15 minutos com um complexo de peroxidase de rábano biotinilada-avidina, e a reacção foi visualizada utilizando 0,02% de 3,3'-diaminobenzidina como um cromogénio tetracloridrato num tampão de Tris-HCl, pH 7,6, contendo 0,03% de H2O2. Hematoxilina contracoloração foi usada para os núcleos.
Análise histológica
Para avaliar o nível de FSP1, α-SMA e expressão de procolagénio-I, a percentagem de células positivas de coloração foram classificadas numa escala de 0-3, com a menos de 5% de células de coloração positivo com grau 0, 5-25% com o grau 1, 26-50% como grau 2, e mais de 50% como grau 3. e a intensidade de coloração também classificadas numa escala de 0- 2, com a negativa a fraca intensidade como grau 0, fraco a moderada intensidade como grau 1, e intensidade moderada a forte como grau 2. Dez campos de alta potência foram selecionados aleatoriamente para cada lâminas e analisadas por dois patologistas de forma independente. Para cada marcador, a pontuação da porcentagem e intensidade foi multiplicado e as pontuações para estas três marcadores foi adicionado quando estes marcadores foram analisados ​​conjuntamente. E a pontuação final entre 0-6 foi determinada como negativo (-), pontuação entre 7-9 foi determinada como positiva fraca (+), pontuação entre 10-12 foi determinada como positiva moderada (++), e pontuação superior a 13 foi determinada como fortemente positiva (+++).
em tempo real
-PCR O ARN total foi extraído a partir de tumores ou tecidos normais por Trizol reagente (Invitrogen) e o ADNc da primeira cadeia foi sintetizado utilizando o kit RevertAid First Strand cDNA Synthesis ( Fermentas, EUA) como descrito anteriormente [13]. Em tempo real de PCR foi realizada utilizando ADN LightCycler mestre SYBR Green I kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Alemanha) de acordo com as instruções do fabricante. As cópias de ADNc alvo foram normalizados por expressão de GAPDH. Primers para FAP, SDF-1, TGF-β1 e GAPDH foram listados como se segue:

FAP F: 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 '
FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3'
SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 de R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5'- AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 '
GAPDH F: 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3'
GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
Para cada cDNA-alvo, as cópias de amostras de tecidos normais é em média, e as cópias de cada amostra de tecido tumoral é dividido pela média, em seguida, os resultados destes três ADNc alvo é adicionada para cada amostra de tecido tumoral. Se a soma é igual a ou maior do que 8, em seguida, o tecido tumoral é considerada positiva para FAC.

Análise estatística Os dados são apresentados como médias e desvios-padrão. A análise estatística dos dados foram analisados ​​com o teste t de Student independente de duas caudas e χ 2 Análise por SPSS 12.0. O nível de significância estatística foi estabelecido em P < 0.05.
Resultados
tumorais fibroblastos associados reativas foram predominantes em tecidos com câncer gástrico
Para determinar a extensão da prevalência 'FAC em tecidos com câncer gástrico, foram preparadas de parafina seções embutidos de amostras de tecido e coradas para FSP1, α- SMA e expressão do procolagénio I tal como descrito acima. Além disso, em tempo real-PCR foi realizado para determinar o nível de várias proteínas que foi expresso ou secretadas por FAC reactivos, tais como PAF, SDF-1 e TGF-β1 expressão.
Resultados da coloração imuno-química mostrou que os fibroblastos mais reactivos estavam presentes em tecidos de câncer gástrico do que tecidos gástricos normais. Vinte e quatro das 100 amostras normais foram negativas (-) para os fibroblastos reativos que mancham e 55 amostras normais foram fracamente positivo (+). E o número de espécimes normais que foram moderada (++) ou positivo forte (+++) foram 21 e 0, respectivamente. Enquanto relativa tecidos de cancro, foram 13, 26, 25 e 36 amostras que foram negativas (-), fracamente positiva (+), moderadamente positiva (++) e fortemente positiva (+++) para a coloração de fibroblastos, respectivamente (Fig 1a e A figura 1b). E se as amostras tumorais classificados como negativo ou positivo fraco foram consideradas negativas e moderada ou forte positiva foram considerados positivos, houve uma diferença significativa entre os tumores e tecidos normais relativos à taxa positiva de FAC (Fig 1c). Figura 1 Análise de Imunoquímica do grau de prevalência FAC 'no tumor e dos tecidos gástricos normais. As secções de parafina de tumor cirurgicamente ressecado e tecidos normais dos mesmos pacientes com câncer gástrico (100 casos) foram coradas para FSP1, α-SMA ea prevalência procolágeno-1 expressão e FAC foi classificada de acordo com a taxa positiva e intensidade da coloração imunoquímica. O número de amostras de tumores ou tecidos normais classificados como -, +, ++ e +++ foi comparada (a). E a distribuição desses quatro graus de prevalência 'FAC na 100 tumor ou amostras de tecidos normais foram analisados ​​(b). Série - e + foi considerada negativa, enquanto o grau ++ e +++ foi considerada positiva para a prevalência FAC, em seguida, o número do tumor ou amostras de tecido normal que foi positivo ou negativo para prevalência 'FAC foi comparada (c).
para a expressão de ARNm das proteínas, os resultados mostraram que o nível de todas estas proteínas foram expressão elevada em amostras de tumor comparativamente a estes em tecidos normais. Tomando FAP como um exemplo, o nível de expressão de ARNm de FAP em amostras de tumores foi 4 vezes mais elevada do que nos tecidos normais (Fig 2A). E também foram 3 vezes elevação do nível de expressão de ARNm em relação SDF-1 (Figura 2B) ou TGF-β1 (Figura 2c). Figura 2 Análise de PCR em Tempo Real-de proteínas secretadas por FAC em tecidos tumorais e normais gástricas. O ARN total foi extracto e o ADNc foi preparado a partir do tumor cirurgicamente ressecado e tecidos normais provenientes dos mesmos doentes com cancro gástrico (100 casos). Tempo Real-PCR foi realizada para comparar o nível de FAP (a), SDF-1 (b), e TGF-β1 (c) expressão em tecidos tumorais e normais, as duas primeiras pistas do electroforetograma representado tecidos normais e os dois últimos pistas representado tecidos tumorais. *: P < 0,01.
A partir destes resultados, podemos concluir que as FAC reativas foram predominantes em tecidos tumorais gástricas e alto nível segredo de proteínas que se demonstrou ser essencial para o crescimento do tumor, invasão e metástase. Prevalência
'FAC era estreitamente relacionadas com propriedades invasivas e metastáticas de
tumor gástrico para determinar se o grau de FAC 'prevalência pode ser servido como um preditor para o prognóstico de pacientes com câncer gástrico, análise de correlação foi realizada entre o grau de FAC' prevalência e outro clínico-patológico parâmetros de cancros gástricos. tumor espécimes classificados como negativo ou positivo fraco foram consideradas negativas, e moderada ou forte positiva foram considerados positivos nestas análises. Paciente e tumorais características foram descritas na Tabela 1. Também pode encontrar na Tabela 1 que não houve correlação entre a prevalência 'FAC e a idade, o sexo do paciente ou a localização do tumor. Houve um aumento da prevalência 'FAC quando a diferenciação do tumor diminuiu de bem diferenciado (43,75%) a pouco diferenciadas (64,00%), enquanto a taxa positiva de FAC em cancro gástrico indiferenciada só é 26,67%, muito menor do que na bem ou câncer gástrico pouco diferenciados, portanto, não conseguimos encontrar a correlação entre a prevalência e tumor diferenciação dos FAC (P = 0,56). Enquanto a respeito do tamanho do tumor, profundidade do tumor (T) e metástase ganglionar (N), não mostrou correlação estatisticamente significativa entre a prevalência da FAC e essas características do tumor, com maior taxa positiva de FAC em tumores maiores, tumores mais invasivos e tumores com mais metástases linfonodais. Também podemos achar que a taxa positiva de FAC foi elevada em cancros gástricos com metástase hepática (P < 0,01) ou metástase peritônio (P < 0,01) .table 1 doente e tumorais características e sua relação com a FAC prevalência

N
positiva para FAC N (%)
valor P
Idade (anos)
2.77a
≤60
47
22 (46,81) Art > 60
53
29 (54,72) Sexo seguro
5.11a
Masculino
57
32 (56,14)
Feminino
43
19 (44.19)
localização do tumor
1.35b
extremidade proximal do estômago (1/3)
13
9 (69,23)
corpo gástrico (1/3)
19
9 (47,37)
final remoto de estômago (1/3)
51
22 (43,14)
Mais de 1/3 do estômago envolvidos
17
11 (64,71)
Tumor diferenciação
0.56b
Bem diferenciado
16
7 (43,75)
Moderado diferenciado
44
24 (54,55)
pouco diferenciado
25
16 (64.00)
indiferenciado
15 página 4 (26,67 )
Tumor tamanho
0.02A
≤5 cm
62
16 (35,48) Art > 5 cm
38
29 (76,32)
Profundidade de tumor (T)
0.03b
Tis 4
1 (25,00)
T1
13
5 (38.46)
T2
39
19 (48,72)
T3
26
15 (57,69)
T4
18
11 (61,11)
metástase linfonodal (N) Art < 0,01 um
N0
46
16 (34,78)
N1-3
54
35 (64,81)
metástase hepática Art < 0.01A
Sim
12
9
Sem
88
42
Peritoneum metástase Art < 0.01A
Sim
9
7 (77,77)
Não
91
44 (48.35)
TNM Stage Restaurant < 0.01b
IA
15 Sims 3 (20)
IB
7 Página 2 (28,57)
II
19
6 (31,58)
IIIA
23
11 (47,83)
IIIB
15
8 (53,33)
IV
21
14 (66,67) of a: teste exato de Fisher; b: qui-quadrado
Além disso, na situação de metástase de tumor, o que quer metástase linfonodal, metástases à distância ou metástase órgão, o percentual positivo para FAC é muito maior do que naqueles sem metástase (71,93% vs 25,58% , P < 0,01) (Figura 3). A Figura 3 A percentagem de espécies de tumores que se mostrou positivo ou negativo para prevalência 'FAC no grupo de pacientes com ou sem metástases do tumor. As amostras de tumor foram agrupados de acordo com se ou não os pacientes com câncer gástrico tinha metástases de tumores (metástase tudo o linfonodo, metástases à distância ou metástase órgão). E a percentagem de amostras que foi positivo - foi analisado (grau ou + de acordo com a coloração imunoquímica) ou negativo (grau ++ ou +++ de acordo com a coloração imunoquímica) para prevalência 'FAC (a). E a coloração imunoquímico de α-SMA foi mostrado no tecido gástrico normal, tecidos de câncer gástrico sem metástase e tecido câncer gástrico com metástase (b).
E nós também analisada a correlação entre o nível de mRNA de FAP, SDF-1 e TGF-β1 e a fase do cancro gástrico. O nível destas proteínas foram marcados, tal como descrito nos métodos e as amostras de tecido de tumor foram determinados como sendo positiva se o resultado for igual ou superior a 8. Verificou-se que a percentagem positiva é muito mais elevada em tumores grandes (> 5 cm, 32/38) do que em tumores pequenos (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). E o percentual positivo em amostras de tumores em estágio TNM IA, IB, II, III e IV são 33,3% (5/15), 42,9% (3/7), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) e 76.2 (16/21), respectivamente, mostrando que a prevalência de FAC está estreitamente correlacionada com as fases do cancro gástrico (p < 0,01). Estes resultados sugerem fortemente que a prevalência FAC 'poderia ajudar a determinar a fase do cancro gástrico e podem ser utilizados como um marcador para o prognóstico dos doentes com cancro gástrico.

Discussão Estudos recentes na biologia molecular e celular têm mostrado que o crescimento tumoral metástases e não são determinadas por células cancerosas por si só, mas também por uma variedade de células estromais [14, 15]. O estroma activamente fornece suporte contínuo para as células de carcinoma ao longo dos diferentes processos patofisiológicos que modulam a progressão do tumor. Os fibroblastos são um importante componente do estroma tumoral, que têm recebido maior atenção por causa da sua participação no desenvolvimento do tumor, incluindo o crescimento, invasão e metástase, tal como no cancro da próstata [16, 17] ou o cancro da mama [18, 19]. Também tem sido demonstrado em um modelo de ratos com câncer gástrico que ativou fibroblastos promover a angiogênese do tumor [20], e é consistente com os resultados fora que ativados fibroblastos foram acumulados nos tecidos com cancro gástrico humanos.
O termo de fibroblastos engloba uma série de estroma as células com um fenótipo muito semelhante. A maioria dos tumores incorporar um tipo de célula óbvia biologicamente ativo, fibroblástica conhecida também como fibroblastos reativos, miofibroblastos, ou fibroblastos simplesmente tumor-associados. Musculares lisas α-actina (α-SMA) é o marcador mais utilizado para identificar FAC, enquanto a sua expressão, também pode ser encontrada nas células do músculo liso e células mioepiteliais [21]. Portanto, outros marcadores devem ser usadas em combinação com α-SMA para identificar FAC. proteína específica-1 Fibroblastos (FSP1, S100A4), um membro da família de proteínas de Ca2 + S100 liga�o ao, expresso constitutivamente no citoplasma dos fibroblastos dos tecidos, e a sua expressão é altamente específica para fibroblastos [22, 23]. É amplamente aceite para combinar a-SMA e FSP1 para a identificação de fibroblastos associados a tumores. E em nosso experimento, foi também utilizado um terceiro marcador, procolágeno I, para identificar FAC reactivos com produção de componentes da matriz extracelular.
Nós também detectado o nível de expressão de mRNA de outras proteínas que se expressa ou secretadas por FAC. FAP é uma proteína de tipo II da superfície celular transmembrana pertencente ao pós-prolina família dipeptidil aminopeptidase, com dipeptidil peptidase e atividade endopeptidase, incluindo uma actividade colagenolítica capazes de degradar gelatina e colágeno tipo I [24, 25]. FAP é expresso selectivamente por FAC e pericitos em mais de 90% dos cancros epiteliais humanos examinados [26-30] e de investigação tem sido relatada em modelo animal que apresente um efeito terapêutico através da inibição da expressão ou actividade enzimática FAP [31]. A proteína seguinte que é seleccionado para detectar SDF-1, que é secretada por FAC e estimula a proliferação de células de tumor, angiogénese, invasão e metástase através do receptor CXCR4 expresso por células de tumor [32-34]. Outra proteína segregada que é detectado TGF-β1, que é um indutor potente de diferenciação miofibroblastos [35], e pode desempenhar um papel na invasão de tumor cascatas de metástases [36]. Os resultados do presente estudo demonstraram que estas proteínas foram sobre-reguladas em tecidos de cancro gástrico, o que sugere o seu potencial papel na promoção da progressão do cancro gástrico.
Cancro gástrico é a segunda principal causa de mortalidade associada a cancro em todo o mundo. O prognóstico em pacientes com cancro gástrico é difícil de estabelecer uma vez que é normalmente diagnosticada quando invasão e metástase parede gástrica ter ocorrido. Diversos grupos tentaram encontrar alguns biomarcadores para o prognóstico de câncer gástrico. Por exemplo, a expressão de várias metaloproteinases de matriz extracelular (MMP-2, 7, 9), foi encontrada para ser elevado em tecidos de cancro gástrico em comparação com tecidos saudáveis ​​gástricas. E o aumento da regulação destes MMPs em câncer gástrico tem sido associada a um mau prognóstico e elevou a capacidade invasiva [37]. Outro exemplo é o receptor de insulina-like growth factor-1 (IGF-1R), foi frequentemente expresso em cancros gástricos e foi associada com o tamanho do tumor, a quantidade de estroma, profundidade de invasão da parede, metástase de nódulo linfático, as fases TNM e estado de diferenciação de câncer gástrico [38]. E expressão VEGF-C no margens do tumor também foi associado com metástase nodal, invasão de vasos linfáticos, a sobrevida livre de recorrência pobres, ea sobrevida global pobres, e poderia servir como um preditor independente para pacientes com carcinoma gástrico [39]. Podemos achar que estes indicadores são ou proteínas secretadas por FAC ou receptores expressos por células tumorais que se ligam às proteínas secretadas por FAC, assim que estas pistas podem sugerir que a prevalência da FAC em tecidos com câncer gástrico será um importante preditor de pacientes com câncer gástrico. E os nossos resultados confirmam que a prevalência da FAC foi intimamente associado com o potencial metastático do câncer gástrico, e mais trabalho deve ser feito para confirmar a correlação entre a prevalência e sobrevivência de pacientes com câncer gástrico 'FAC.
Conclusões
Nossas descobertas relatório aqui demonstram que o cancro associado fibroblastos reactivos (FAC) foram frequentemente acumulado em tecidos de cancro gástrico, e a prevalência de FAC foi correlacionada com o tamanho do tumor, a profundidade do tumor e metástases de tumores, bem como a fase global de TNM, sugerindo que o FAC foram críticos para o crescimento tumoral, invasão e metástase, assim, dar alguns apoios para o prognóstico dos pacientes com câncer gástrico
abreviações
FAC:.
associados a tumores fibroblastos
FAP:
proteína ativação de fibroblastos
SDF-1: fator derivado de células do estroma
1
TGF-β1:
fator transformador de crescimento beta 1
ECM:
matriz extracelular
WBC:
glóbulo branco contagem

PLT:
contagem de plaquetas
Hb:
hemoglobina
GPT:
glutâmico-pirúvica transaminase
ALP:
fosfatase alcalina
PT:
tempo de protrombina

CNS:
sistema nervos central,
α-SMA: actina
α-de músculo liso
FSP1:
fibroblastos proteína específica 1
GAPDH:
fosfato desidrogenase gliceraldeído
MMP:
metaloproteinase

VEGF:.
fator de crescimento endotelial vascular
Declarações
Agradecimentos
queremos agradecer a Prof. Li Gao do Departamento de patologia da Changhai Hospital e Dr. Ni Zhu no Laboratório Central de Changhai Hospital de seus suportes técnicos especializados para os experimentos. Este trabalho foi financiado pela National Science Foundation Natural da China (30.672.046).
Autores 'original apresentada arquivos para imagens
Abaixo estão os links para os autores' arquivos submetidos original para imagens. 'arquivo original para a figura 1 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf Autores' 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf Autores arquivo original para a figura 2 arquivo original 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf Autores 'para a figura 3 Conflito de interesses
Os autores declaram que não têm interesses conflitantes.

• Estabelecimento e caracterização de um modelo de metástases de cancro gástrico humano em ratinhos nus
• Detecção de sentinela e não-sentinela micrometástases em linfonodos por cortes seriados completa e análise de imuno-histoquímica para detecção de cancer