Rákhoz kapcsolódó fibroblasztok pozitívan korrelál a metasztatikus potenciálja a humán gyomor cancers

rákhoz kapcsolódó fibroblasztok pozitívan korrelál a metasztatikus potenciálja a humán gasztrikus rák
Abstract
alapon
A gyomorrák prognózisa betegek nehéz megjósolni, mert hibák létrehozó sebészeti patológiai jellemzői. Rákhoz kapcsolódó fibroblasztok (CAF-eket) azt találtuk, hogy játszanak kiemelkedő szerepet a tumor növekedését, invázió és metasztázis. Így felveti a hipotézist, hogy a mértéke CAF-ek előfordulása segíthet az a gyomorrák prognózisa betegeknél.
Módszerek
immunkémiai és valós idejű PCR kísérleteket végeztünk, hogy összehasonlítsuk a fehérjék expresszióját, amelyek specifikus markerek A CAF-ek vagy által szekretált CAF-ek a tumor és a normális szövetmintákban. A mértéke CAF "prevalencia szerint osztályozzák immunkémiai festési, és összefüggést tovább vizsgáltuk között CAF elterjedtségére és más tumor tulajdonságokkal, amelyek befolyásolhatják a gyomorrák prognózisa betegek. Katalógusa Eredmények
csaknem 80 százaléka a normális gyomor szövetek negatív vagy gyenge pozitív CAF festés, míg több mint 60 százaléka a gyomorrák szöveteket közepes vagy erős pozitív CAF festés. Valós idejű PCR-eredmények is azt mutatták, szignifikánsan megnőtt expressziója FAP, SDF-1 és TGF-β1 gyomorrákban szövetekben, mint a normális gyomor szövetekben. További elemzés azt mutatta, hogy a CAF elterjedtségére korrelált a tumor mérete, mélysége a tumor, nyirokcsomó áttét, májmetasztázisos vagy hashártya áttét. Katalógusa Következtetések
Reaktív rákkal összefüggő fibroblasztok (CAF) is gyakran felhalmozott gyomorrák szövetekben, és prevalenciája CAF korrelált a tumor mérete, mélysége, a tumor metasztázis, így ad némi hordozók létrehozó prognózisa gyomorrákos betegek. katalógusa Háttér katalógusa gyomorrák a második vezető oka a rákkal összefüggő halálozás világszerte [1]. Jelentős földrajzi eltérések vannak a előfordulásának gyomorrák és ez jelenti a legelterjedtebb daganatos Kínában [2]. Egyre több gyomorrákos betegek diagnosztizáltak az utóbbi években a változó étrend és életmód, valamint a fejlődő diagnosztikai eljárások. Bár a sebészeti kezelés azt mutatta, hogy hatékony legyen néhány korai gyomor rákos megbetegedések, beleértve a teljes gastrectomia és a kiterjesztett radikális gastrectomián prognózisát ezen betegek gyenge köszönhető, hogy a kiújulás a műtét után, abban a formában a limfatikus elterjedt, vérrel terjedő metasztázis, vagy peritoneális terjesztés [3].
a prognózist beteg gyomorrák kimutatták, hogy befolyásolja számos létre sebészeti-patológiai jellemzői, mint például a kóros szakaszban, a helyét a tumor és a szövettani típusú és minőségű a tumor [ ,,,0],4]. Míg Aurello et al. [5] jelezte, hogy a csomópontok számát kell kötni N0 szerint változhat a mélység tumor invázió (T), a TNM osztályozási rendszer a visszakeresés és elemzés legalább 15 nyirokcsomó pontos staging. Azonban a legtöbb esetben, a csomópontok száma boncolt kisebb, és csak 20 és 30% -ánál van a javasolt minimális boncolás 15 csomópontok. Accessorial mutatókat, amelyek segítségével további információkat a gyomorrák prognózisa betegek van szükség.
Rákhoz kapcsolódó fibroblaszt (CAF), az egyik legfontosabb kötőszöveti sejtek, amely tartalmaz szilárd tumorok, azt találtuk, hogy játszanak kiemelkedő szerepet a tumor növekedés és a progressziója [6]. Ezzel szemben a nyugalmi fibroblasztok, CAF-ek rendelkeznek aktivált fenotípust, és lehet azonosítani azok expressziója fibroblaszt-specifikus protein 1 (FSP1), a vimentin, a dezmin, és α-simaizom-aktin [7]. CAF-ek kommunikálnak egymással, valamint a rákos sejtek és a gyulladásos és immunsejtek keresztül közvetlenül sejt kontaktus és közvetve parakrin /exokrin jelátvitel, proteázok, és a moduláció az extracelluláris mátrix (ECM). Ez a komplex kommunikációs hálózat döntő, hogy biztosítja a megfelelő mikrokörnyezet támogatására tumorigenezis, angiogenezis, és metasztázis [8, 9]. Továbbá, míg a transzformált tumorsejtek, CAF-ek több genetikailag homogén [10], és azt igazolták Gastavo és munkatársai, hogy a reaktív stroma működhet, mint egy előrejelzője kiújulás prosztatarák [11], így jelentenek vonzó prediktor és a terápiás cél a daganatos betegek.
Ebben a tanulmányban gyűjtöttünk 100 esetben sebészi eltávolítás példányainak elsődleges gyomorrák, valamint a normál gyomor szövetek (több mint 5 cm-re daganatos szövet) 2007 januárjától 2007 júniusáig a második Katonai Orvosi egyetemi kapcsolt Changhai kórház (Sanghaj, Kína). Immunkémiai és RT-PCR vizsgálatokat végeztünk, hogy összehasonlítsuk a fehérjék expresszióját, amelyek specifikus markerek A CAF-ek vagy kiválasztódik a CAF-ek a tumor és a normális szövetmintákban. A mértéke CAF "prevalencia szerint osztályozzák immunkémiai festési, és összefüggést tovább vizsgáltuk között CAF elterjedtségére és más tumor tulajdonságokkal, amelyek befolyásolhatják a gyomorrák prognózisa betegek. Katalógusa módszerek katalógusa Cohort Beiratkozás katalógusa Száz esetek elsődleges gyomorrák beteget vontak be 2007 januárjától 2007 júniusáig a második Katonai Orvostudományi Egyetem kapcsolt Changhai kórház. Minden beteg adtak írásos beleegyezését adta. Entry kritériumokat ebben a vizsgálatban a következők: (a) nem preoperatív kemoterápiás kezelést; (B) a kórosan vagy citológiailag validált gyomor-adenokarcinóma; (C) év közötti 18-85 év; (D) a várható élettartam > 3 hónap; (E) WBC > 3,5 × 10 9 /l; PLT > 10 11 /l; Hb > 100 g /l; A szérum kreatinin legfeljebb 1,25-szorosa a normális felső határ; GPT, ALP legfeljebb 1,25-szorosa a normális felső határ; Összesen bilirubin nem több, mint 1,5-szerese a normál felső határa; PT < 12s; és (F) nem súlyos központi idegrendszeri betegség.
Patológiai elemzés
Minden mintát, beleértve a tumor szövetekben és a normál gyomor szövetek, amelyek több, mint 5 cm távolságra daganatos szövetek fixáltuk 10% -os formaiinban 30 percen belül műtéti eltávolítása után. A paraffinba ágyazott metszeteket (4 um) készítettünk. Tumor differenciálódás jellemezte a WHO szerint a besorolás (2000), míg a TNM osztályozás szerint végeztük a Nemzetközi Rákellenes Unió, ötödik kiadás (1997). Katalógusa immunkémiai katalógusa antitest használják ezt az eljárást tartalmazza nyúl anti-FSP1 poliklonális antitesttel ( ABCAM, 1:50), egér anti-α-SMA monoklonális antitest (Sigma, 1A4, 1: 200), patkány anti-prokollagén I monoklonális antitest (Chemicon, Mab1912, 1: 500), a biotin-konjugált patkány anti-egér IgG-vel poliklonális antitest (ebioscience, 13-4013, 1: 100), a biotin-konjugált egér anti-patkány IgG poliklonális antitesttel (ebioscience, 13-4813, 1: 100) és a biotin-konjugált egér anti-nyúl IgG poliklonális antitesttel (BD Pharmingen, C101-167, 1: 100). Immunkémiai elemzést végeztünk a korábban leírtak [12]. Röviden, paraffin metszeteket de-paraffinized xilolban és egy sor osztályozott alkohol megoldásokat. A metszeteket ezután 0,3% -os hidrogén-peroxid (H2O2) vízben 10 percig, hogy oltja bármely endogén peroxidáz aktivitás a szöveten belül, és a nemspecifikus kötőhelyeket blokkoltuk 0,5% szarvasmarha szérum albumin (BSA) 10 percen át szobahőmérsékleten . Ezután a metszeteket 15 percig inkubáljuk a jelenlétében az elsődleges antitest, majd a lemezeket mostuk foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS), amely 0,1% Tween 20 (PBS /Tween) 15 percig, míg a változó az oldatot 3-szor, mielőtt alkalmazása a másodlagos biotinilált antitesttel. A tárgylemezeket inkubáltuk a szekunder antitest 15 percig szobahőmérsékleten mielőtt mostuk 15 percig PBS /Tween hogy változott 3-szor. A metszeteket ezután 15 percig inkubáljuk egy avidin-biotinilezett torma peroxidáz komplex, és a reakcióelegyet láthatóvá használatával 0,02% 3,3'-diamino-benzidin-tetrahidroklorid, mint egy kromogén egy Tris-HCl pufferben, pH = 7,6, amely 0,03% H2O2. Hematoxilin alkalmaztunk Counterstain a magok.
Hisztológiai analízis
szintjének értékelése a FSP1, α-SMA és prokollagén-I expresszió az aránya, pozitív-festés sejteket osztályozzák skálán 0-3, az kevesebb, mint 5% pozitív festésű sejtek grade 0, 5-25% 1. fokozatú, 26-50% -os 2-es fokozatú, és több mint 50% -kal, grade 3. és intenzitása festődés is osztályozzák skálán 0- 2, negatív gyenge intenzitású 0. fokozat, gyenge vagy mérsékelt intenzitású 1-es fokozatú, és közepesen erős intenzitású fokozat 2. Tíz nagy teljesítményű mezőt véletlenszerűen kiválasztott minden diák és elemeztük két patológusok függetlenül. Minden marker, a pontszám százalékos és intenzitása szorozni, és az eredmények e három markerek adunk, amikor ezeket a markereket vizsgáltuk conjointly. És a végeredmény 0-6 határoztuk negatív (-), pontszám 7-9 határoztuk gyenge pozitív (+), pontszám 10-12 határoztuk mérsékelten pozitív (++), és a pontszám magasabb, mint 13 határoztuk meg, mint az erős pozitív (+++).
Realtime-PCR
az összes RNS-t kivontuk a tumor vagy normális szövetekben Trizol reagens (Invitrogen) és az első cDNS-szálat szintetizáljuk RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit ( Fermentas, USA), a korábban leírtak szerint [13]. Valós idejű PCR alkalmazásával végeztük LightCycler DNA Master SYBR Green I Kit (Roche Diagnostics, Mannheim, Németország), a gyártó utasításai szerint. A másolatok cél cDNS normalizáltuk GAPDH kifejezést. Alapozók FAP, SDF-1, TGF-β1 és GAPDH felsorolt ​​a következő:

FAP F 5'-TGGGAATATTACGCGTCTGTCTAC-3 'katalógusa FAP R: 5'-GATAAGCCGTGGTTCTGGTCA-3' katalógusa SDF-1 F: 5'-CCGTCAGCCTGAGCTACA-3 '
SDF-1 R: 5'-GAAGGGCACAGTTTGGAG-3'
TGF-β1 F: 5'-GCAACAATTCCTGGCGATAC-3 '
TGF-β1 R: 5' AAGGCGAAAGCCCTCAAT-3 'katalógusa GAPDH F 5'-ATCAAGTTGCGTGCTGTG-3' katalógusa GAPDH R: 5'-TGCGAAATGAAAGGAGTGT-3 '
minden cél cDNS, és a másolatokat normális szövetminták átlagoljuk, és a másolatokat az egyes daganatos szövet minta osztva az átlagos, majd az eredményeket a három cél-cDNS adunk minden egyes daganat szöveti mintát. Ha az összeg egyenlő vagy nagyobb, mint 8, akkor a tumorszövet tekintik pozitívnak CAF-eket.
Statisztikai analízis
adatok jelennek középértékeit és standard deviációját. A statisztikai elemzések a elemeztük a két farkú független Student t-teszt és χ 2 elemzést az SPSS 12.0. A statisztikai szignifikancia szintjét állapították meg a P < 0.05.
Eredmények
Reaktív tumorasszociált fibroblasztok voltak jellemzőek a gyomorrák szövetekben
mértékének meghatározására CAF "előfordulása a gyomorrák szövetekben, paraffinba ágyazott metszeteken szöveti mintákat készítünk, és festettük FSP1, α- SMA és prokollagén I expressziót a fent leírtak szerint. Ezen kívül, a valós idejű-PCR-t végeztünk annak meghatározására, az expressziós szinten több fehérjék, amelyek fejeztük ki vagy szekretálódik reaktív CAF-ek, mint például a FAP, SDF-1 és TGF-β1.
Eredményei immunkémiai festési azt mutatta, hogy több reaktív fibroblasztok jelen voltak a gyomorrák szövetekben, mint a normál gyomor szövetekben. Huszonnégy ki a 100 normál minta volt negatív (-) reaktív fibroblasztok festést és 55 normál minta volt gyenge pozitív (+). És a szám a normál mintákat, amelyek mérsékelt (++) vagy erősen pozitív (+++) volt 21, illetve 0, ill. Míg vonatkozó rákos szövet, voltak 13, 26, 25 és 36 mintákat, amelyek a negatív (-), gyenge pozitív (+), közepes pozitív (++) és erősen pozitív (+++) fibroblaszt festéssel, illetve (1A ábra és 1B ábra). És ha daganatminták osztályozni, mint negatív vagy gyenge pozitív tekintették negatív, közepes vagy erős pozitív tekintették pozitív, nincs szignifikáns különbség a tumoros és normál szövetek kapcsolatos pozitív arány CAF (ábra 1c). 1. ábra immunkémiai vizsgálata fokozatú CAF "előfordulása a tumor és a normális gyomor szövetekben. Paraffin szakaszai műtétileg eltávolított tumor és normál szövetekben ugyanabból gyomorrákos betegek (100 eset) festettük FSP1, α-SMA és prokollagén-1 expresszió és CAF előfordulással szerint osztályozzák a pozitív sebessége és intenzitása a immunkémiai festési. A szám a tumor vagy normális szövetmintákban osztályozni, mint -, +, ++ és +++ hasonlították (A). És eloszlását a négy évfolyamon CAF elterjedtségére a 100 daganatos vagy normális szövetmintából elemeztük (b). Grade - és + tekintették negatívnak, grade ++ és +++ tekintették pozitívnak CAF prevalenciája, akkor a számot a tumor vagy normális szövetmintából amely pozitív vagy negatív CAF elterjedtségére hasonlították (c).
mRNS expressziója a fehérjék, az eredmények azt mutatták, hogy az expressziós szintje az összes ilyen fehérjéket emelkedett tumorminták összehasonlítva ezek a normál szövetekben. Figyelembe FAP példaként, az mRNS-expressziós szintjének FAP tumorminták volt 4-szer magasabb, mint a normál szövetekben (2A ábra). És ott volt még 3-szor magasabb szintű mRNS expressziós szintjét illetően SDF-1 (2B) vagy a TGF-β1 (2C ábra). 2. ábra Valós idejű-PCR analízise szekretált fehérjék által CAF-ek a tumor és a normális gyomor szövetekben. Teljes RNS-t kivonat és a cDNS-t állítottunk elő műtétileg eltávolított tumoros és normális szövetekben ugyanabból a gyomorrák beteg (100 eset). Valós idejű-PCR-t végeztünk, hogy összehasonlítsuk a expressziós szintjének FAP (A), az SDF-1 (B) és a TGF-β1 (C) a tumor és a normális szöveteket, az első két sávot az elektroforetogram képviselt normális szövetekben, és az utolsó két sávok képviselik daganatos szövetek. *: P < 0,01.
Ezekből az eredményekből arra következtethetünk, hogy a reaktív CAF-ek voltak jellemzőek a gyomor tumor szövetekben és titkos magas szintű proteinek, amelyek kimutatták, hogy esszenciális a tumor növekedését, invázió és metasztázis.
CAF-ek "előfordulása szorosan kapcsolatos invazív és metasztatikus tulajdonságai gyomor tumor katalógusa Annak meghatározására, hogy az osztály a CAF elterjedtségére lehet szolgált előrejelzője a gyomorrák prognózisa betegek korrelációs elemzést végeztünk közötti fokozatú CAF elterjedtségére és más klinikopatológiai paraméterei gyomorrák. Daganatmintákat osztályozni, mint negatív vagy gyenge pozitív tekintették negatív, közepes vagy erős pozitív volt pozitívnak tekintendő ilyen elemzést. A beteg és a tumor jellemzőit az 1. táblázat is találunk az 1. táblázatban, hogy nincs összefüggés a CAF elterjedtségére és kora, neme, a beteg vagy a helyét a tumor. Ott volt a növekedés CAF-ek "előfordulás, amikor a tumor differenciálódásának csökkent jól differenciált (43,75%) a gyengén differenciált (64,00%), míg a pozitív arány CAF-ek differenciálatlan gyomorrák csak 26,67%, sokkal kisebb, mint a jól vagy rosszul differenciált gyomorrák, így nem találtunk összefüggés a CAF elterjedtségére és a tumor differenciálás (P = 0,56). Míg kapcsolatos daganat mérete, mélysége a tumor (T) és a nyirokcsomó-metasztázis (N), ott mutatott statisztikailag szignifikáns összefüggést a prevalenciája CAF és ezek tumorjellemzők, nagyobb pozitív arány CAF nagyobb daganatok, az invazív tumorok, daganatok több nyirokcsomó áttétet. Mi is lehet találni, hogy a pozitív ráta CAF magas volt a gyomorrák májmetasztázisos (P < 0,01), illetve a hashártya áttét (P < 0,01) .table 1 beteg és a daganat jellemzői és kapcsolatuk CAF előfordulási katalógusa katalógusa N Matton Pozitív CAF N (%) Matton P érték Matton Életkor (év)
2.77a katalógusa ≤60 katalógusa 47 katalógusa 22 (46,81) hotelben > 60 katalógusa 53 katalógusa 29 (54,72) hotelben szex katalógusa 5.11a katalógusa Férfi katalógusa 57 katalógusa 32 (56,14) fiatal női katalógusa 43 katalógusa 19 (44,19) hotelben hely a daganat katalógusa 1.35b katalógusa közelebbi vége gyomor (1/3) katalógusa 13
9 (69.23) hotelben gyomor test (1/3) hotelben 19 katalógusa 9 (47.37) hotelben távoli vége gyomor (1/3) hotelben 51
22 (43.14) hotelben több mint 1/3 részét a gyomor érintett katalógusa 17 katalógusa 11 (64,71) hotelben tumor differenciálás katalógusa 0.56b katalógusa jól differenciált katalógusa 16 katalógusa 7. (43.75) hotelben Mérsékelt differenciált katalógusa 44 katalógusa 24 (54,55) hotelben rosszul differenciált katalógusa 25 katalógusa 16 (64,00) hotelben differenciálatlan
15 katalógusa 4 (26,67 ) hotelben daganat mérete katalógusa 0.02a katalógusa ≤5 cm katalógusa 62 katalógusa 16 (35.48) hotelben > 5 cm katalógusa 38 katalógusa 29 (76,32) hotelben Mélység a tumor (T) hotelben 0.03b katalógusa Tis
4 katalógusa 1 (25.00) hotelben T1 katalógusa 13 katalógusa 5 (38.46) hotelben T2 katalógusa 39
19 (48,72) hotelben T3 katalógusa 26 katalógusa 15 (57,69) hotelben T4 katalógusa 18 katalógusa 11 (61,11) hotelben nyirokcsomó áttét (N) hotelben < 0,01 egy fiatal N0 katalógusa 46 katalógusa 16 (34,78) hotelben N1-3 katalógusa 54 katalógusa 35 (64,81) hotelben májmetasztázisos katalógusa < 0.01A katalógusa Igen
12 katalógusa 9 katalógusa No katalógusa 88 katalógusa 42 katalógusa hashártya áttét katalógusa < 0.01A katalógusa Igen katalógusa 9 katalógusa 7 (77,77) hotelben Nem katalógusa 91 katalógusa 44 (48,35) hotelben TNM katalógusa < 0.01b katalógusa IA katalógusa 15 katalógusa 3 (20) hotelben IB
7 katalógusa 2 (28.57) hotelben II
19 katalógusa 6. (31.58) hotelben IIIA
23 katalógusa 11 (47.83) hotelben IIIB katalógusa 15 katalógusa 8 (53.33)
IV
21 katalógusa 14 (66.67) hotelben egy: Fisher egzakt teszt; B: Chi-négyzet próbát
Ezen felül, a helyzet a tumor metasztázis, bármi nyirokcsomó-metasztázis, távoli áttét vagy szerv metasztázis, a pozitív százalékos aránya CAF-ek sokkal magasabb, mint azoknál, akik nem metasztázis (71,93% vs. 25,58% P < 0,01) (3. ábra). 3. ábra A százalékos tumor minták amely pozitív vagy negatív CAF-ek "előfordulási gyakoriság az betegcsoportban vagy anélkül tumor metasztázis. A tumor minták szerint csoportosítottuk e vagy sem a gyomorrákos betegek tumor metasztázis (bármi nyirokcsomómetastasis, távoli áttét vagy szerv metasztázis). És a százalékos példányok, amelyek pozitív volt (grade - vagy + szerint immunkémiai festés), vagy negatív (grade ++ vagy +++ szerint immunkémiai festés) a CAF elterjedtségére elemeztük (a). És az immunkémiai festődése α-SMA-t mutatjuk be normális gyomor- szövetben, gyomorrák szövetben anélkül, metasztázis és gyomorrák szövet metasztázis (B).
És a mi is elemeztük az összefüggést az mRNS szintje FAP, SDF-1 és TGF-β1 és a gyomorrák színpadon. A szint ezen fehérjék pontoztuk leírt módszerek és a tumor szövetmintákat határoztuk meg, hogy pozitív, ha a pontszám egyenlő vagy nagyobb, mint 8. Azt találtuk, hogy a pozitív arány jóval magas nagy daganatok (> 5 cm, 32/38), mint a kis tumorok (≤5 cm, 20/62) (p < 0,05). És a pozitív százalékos tumor minták TNM-beosztása az IA, IB, II, IIIA, IIIB és IV 33,3% (5/15), 42,9% (07/03), 52,6% (10/19), 60,9% (14 /23), 73,3% (11/15) és 76,2 (16/21), illetve azt mutatja, hogy az előfordulási gyakorisága CAF szorosan összefügg a gyomorrák szakaszában (p < 0,01). Ezek az eredmények erősen azt javasolta, hogy a CAF-ek "előfordulás segíthet megállapítani a gyomorrák szakaszban, és fel lehet használni, mint a marker a gyomorrák prognózisa betegeknél.
Megbeszélés
A legújabb vizsgálatok a molekuláris és a sejtbiológia kimutatták, hogy a tumor növekedését és metasztázis nem határozza meg a rákos sejtek egyedül, hanem a különböző stromális sejtek [14, 15]. A stroma aktívan folyamatos támogatást nyújt karcinóma sejtek a különböző kórélettani folyamat moduláló tumor progresszióját. Fibroblasztok fontos eleme tumorstroma, amely egyre nagyobb figyelmet kap, mert a részvétel a daganat kialakulásában, beleértve a növekedést, invázió és metasztázis, mint például a prosztatarák [16, 17] vagy az emlőrák [18, 19]. Azt is kimutatták a gyomorrák egerek modell, hogy az aktivált fibroblasztok elősegítik a tumor angiogenezis [20], és ez összhangban áll ki az eredmények, amelyek aktivált fibroblasztokat felhalmozódott humán gyomorrák szövetekben.
A kifejezés fibroblaszt része számos stromális sejtek a nagyjából hasonló fenotípust. A legtöbb tumor bele egy nyilvánvaló, biológiailag aktív, fibroblaszt sejt típus ismert változóan reaktív fibroblasztok, miofibrobiastok, vagy egyszerűen csak a tumor-asszociált fibroblasztok. Simaizom α-aktin (α-SMA) a leggyakoribb marker azonosítására használnak CAF-ek, míg a kifejezés is megtalálható a simaizom sejtekben és myoepithelialis sejteket [21]. Így más markerekkel kell használni kombinálva α-SMA azonosítani CAF-ek. Fibroblaszt-specifikus protein 1 (FSP1, S100A4), tagja a család Ca2 + -kötő S100 proteinek, konstitutívan expresszált citoplazmájában szövet fibroblasztok, és az expressziója igen specifikus fibroblasztok [22, 23]. Széles körben elfogadott, hogy összekapcsolják a-SMA és FSP1 azonosítására tumorasszociált fibroblasztokban. És mi kísérletben is használtunk egy harmadik marker, prokollagén I azonosítani reaktív CAF termelés az extracelluláris mátrix komponensek. Katalógusa is kimutatható mRNS expressziós szintje más fehérjék, amelyek kifejezett vagy kiválasztódik a CAF. FAP egy II-es típusú transzmembrán sejtfelszíni fehérje tartozó poszt-prolin dipeptidil-aminopeptidáz család, dipeptidil-peptidáz és endopeptidáz aktivitással, beleértve a kollagenolitikus aktivitása lebontására képes zselatin és az I. típusú kollagén [24, 25]. FAP fejezzük szelektíven CAF-ek és periciták több mint 90% -a humán epiteliális rákok vizsgált [26-30], és a kutatás leírták állatmodellben mutató terápiás hatása, hogy gátolja a FAP expresszióját vagy enzimatikus aktivitása [31]. A következő fehérje választottunk kimutatására van az SDF-1, amely kiválasztódik CAF-ek és stimulálja a tumorsejtek proliferációját, angiogenezis, invázió és metasztázis keresztül CXCR4 receptor által kifejezett tumorsejtek [32-34]. Egy másik szekretált fehérje mi észlelt TGF-β1, amely egy hatásos induktora számára myofibroblastok differenciálódását [35], és szerepet játszhat a tumor invázió-metasztázis kaszkádok [36]. Az eredmények a jelen tanulmány kimutatta, hogy ezek a fehérjék voltak akár szabályozott gyomorkarcinómában szövetekben, ami arra utal, hogy potenciális szerepet játszhat gyomorrák progresszióját.
Gyomorrák a második vezető oka a rákhoz kapcsolódó mortalitás a világon. Kórjóslatát gyomorrák nehéz megállapítani, mert általában akkor diagnosztizálják, amikor a gyomor fala invázió és metasztázis történt. Több csoport próbált találni néhány biomarkerek a gyomorrák prognózisa. Például, a kifejezés a több extracelluláris mátrix metalloproteinázok (MMP-2, 7, 9) azt találtuk, hogy megemelkedett gyomorrák szövetekben, mint az egészséges gyomor szövetekben. És a felfelé-szabályozás ezen MMP-k a gyomorrák összefüggésbe hozták egy rossz prognózissal és emelkedett invazív képességét [37]. Egy másik példa az inzulin-szerű növekedési faktor-1 receptor (IGF-1R), ez volt gyakran kifejezve gyomor rákos megbetegedések és társult a daganat mérete, mennyisége stroma, mélysége fal invázió, nyirokcsomó-metasztázis, TNM szakaszok és differenciálódását állapotát gyomorrák [38]. És a VEGF-C expresszió tumor árrés is társult nyirokcsomó áttét, nyirokér invázió, szegény kiújulás-mentes túlélés és az általában gyenge túléléssel és szolgálhat független előrejelzője betegek gyomorrák [39]. Tudjuk, hogy ezek a kiszámítására vagy kiválasztott fehérjéket a CAF vagy receptorok tumorsejtek által, amelyek kötődnek a kiválasztott fehérjéket a CAF, így ezek a nyomok arra utalhat, hogy az előfordulási gyakorisága CAF gyomorrákban szövetekben lesz fontos előrejelzője a gyomorrákos betegek. És mi eredmények megerősítették, hogy az előfordulási gyakorisága CAF szoros kapcsolatban állnak a metasztatikus potenciálját gyomorrák, és a további munkát kell végezni, hogy erősítse meg az összefüggést a CAF elterjedtségére és túlélését gyomorrákos betegek.
Következtetések katalógusa Eredményeink jelentés itt azt mutatják, hogy a reaktív rákkal összefüggő fibroblasztok (CAF-eket) is gyakran felhalmozott gyomorrák szövetekben, és a gyakorisága a CAF-ek korrelációt mutatott a tumor mérete, mélysége a daganat és a tumor metasztázis, valamint a teljes TNM, ami arra utal, hogy a CAF-ek voltak a kritikus a tumor növekedését, invázió és metasztázis, így ad némi hordozók prognózisa a gyomorrákos betegek. katalógusa rövidítések katalógusa CAF: katalógusa tumorasszociált fibroblasztok
FAP: katalógusa fibroblaszt aktiváló protein
SDF-1: katalógusa stroma-sejt eredetű faktor 1
TGF-β1:
transzformáló növekedési faktor béta 1
ECM katalógusa extracelluláris mátrix
WBC: katalógusa fehérvérsejtszám
Matton PLT: katalógusa vérlemezkeszám
Hb: katalógusa hemoglobin
GPT:
glutamát-piruvát transzamináz
ALP: katalógusa alkalikus foszfatáz
PT: katalógusa prothrombin idő Matton
CNS: katalógusa központi idegrendszerre
α-SMA: katalógusa α-simaizom aktin
FSP1: katalógusa fibroblaszt specifikus fehérje 1
GAPDH: katalógusa gliceraldehid-foszfát-dehidrogenáz
MMP: mátrix metalloproteináz katalógusa
Matton VEGF: katalógusa vascularis endothelialis növekedési faktor.
nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa szeretnénk megköszönni Prof. Li Gao Tanszékén patológiája Changhai Kórház és Dr. Ni Zhu közép Lab Changhai Kórház a szakértői technikai támogatást a kísérletekhez. Ezt a munkát támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (30672046). Katalógusa A szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 13046_2010_313_MOESM1_ESM.pdf A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 13046_2010_313_MOESM2_ESM.pdf A szerzők eredeti fájl 2. ábrán 13046_2010_313_MOESM3_ESM.pdf A szerzők eredeti fájl 3. ábra Érdekütközés
A szerzők kijelentik, hogy nem ellentétes érdekek. Katalógusa

• Létrehozása és jellemzése egy metasztázis modell a humán gyomorrák meztelen egerekben
• Kimutatása sentinel és nem sentinel nyirokcsomó mikrometasztázi- által teljes sorozatszámot szakaszoló és immunhisztokémiai vizsgálatok gyomor cancer