Novú protinádorovej vírusovej terapie a zobrazovacia technika pre rakovinu žalúdka za použitia genetického inžinierstva vírus kiahní nesúca ľudský jodid sodný symporter

Román protinádorovej vírusová terapia a zobrazovacia metóda pre rakovinu žalúdka pomocou genetického inžinierstva vírus kiahní nesúca ľudský jodid sodný symporter
abstraktné
pozadia
karcinómov žalúdka majú zlú celkové prežívanie aj napriek nedávnej pokroky v skorých detekčných metód, endoskopická resekcia techniky a chemoterapia liečby. Vakcinie vírusová terapia má sľubný terapeutický potenciál rôznych druhov rakoviny a má veľký bezpečnostný profil. Skúmali sme terapeutickú účinnosť nových geneticky modifikovaných-vírus kiahní nesúca ľudský jodid sodný symporter (h
NIS) génu, GLV-1 h153, na karcinómov žalúdka a jej potenciálne využitie pre zobrazovanie s 99m pertechnetate scintigrafie a 124I pozitrónová emisná tomografia (PET).
metódy
GLV-1 h153 bola testovaná proti piatim ľudských nádorových bunkových línií za použitia žalúdočnej cytotoxicitu a štandardných testov vírusových plakov. In vivo
, podkožný bokov nádory boli vytvorené v nahých myší s ľudským buniek karcinómu žalúdka, MKN-74. Nádory boli následne podaná injekcia buď Gly-1 h153 alebo PBS a následne na rast nádoru. 99m technecistanu scintigrafie a
124I microPET imaging boli vykonávané. Výsledky
Expresia GFP, náhradou pre vírusovú infekčnosť, potvrdila, vírusové infekcie o 24 hodín. Pri multiplicitě infekcie (MOI) 1, GLV-1 h153 dosiahnutý > 90% cytotoxicity v MNK-74, OCUM-2MD3 a AGS počas 9 dní, a > 70% cytotoxicity v MNK- 45 a TMK-1. In vivo
, GLV-1 h153 bol účinný v liečbe xenotransplantátov (p 0,001) po 2 týždňoch liečby. GLV-1 h153 infikovaných nádory boli ľahko imaged 99m technecistanu scintigrafie a 124I microPET zobrazovacie 2 dni po ukončení liečby.
Závery
GLV-1 h153 je efektívna protinádorovej vírus vyjadrujúce h
NIS proteín, ktorý môže efektívne ustúpiť nádorov žalúdka a umožniť hĺbkové imaging. Tieto údaje podporuje jej pokračujúce vyšetrovanie v klinickom prostredí.
Kľúčové
protinádorového vírusová terapia GLV-1 h153 Karcinóm žalúdka Human jodid sodný symporter (h
NIS) Pozadie
rakovinou žalúdka je jedným z najviac prevládajúce zhubný nádory, najmä v Ázii [1]. Hoci metódy skoré odhalenie, vývoj endoskopické alebo chirurgickej resekcii a účinnejšie chemoterapia zlepšila celkové prežívanie u pacientov s rakovinou žalúdka, prognóza pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka je stále zlá [2-4]. Väčšina tradičných chemoterapeutickej liečby preukázali miernu účinnosť. Jedno možné vysvetlenie pre odpor rakoviny žalúdka na konvenčnej terapii môže byť jeho non-náchylnosť k apoptóze [5]. Avšak, Protinádorovými vírusy majú veľké terapeutické účinky proti rakovine bunky, ktoré exprimujú vysoké hladiny ribonukleotid reduktázy, reparácia DNA, enzýmy, a sú teda rezistentné voči apoptóze [6, 7]. Mnohé z týchto vlastností, ktoré robia buniek karcinómu žalúdka rezistentné voči chemoterapii, aby boli citlivé na onkolytického vírusovej terapie. Tak, génová terapia pomocou protinádorového vírus ponúka atraktívnu alternatívu pre liečbu rakoviny žalúdka [8].
Onkolytických vírusová terapia bola študovaná v minulom storočí a je znázornené úspechu v predklinických a klinických skúšok ako nové liečebné modality rakoviny [9 ]. kmene vírusu kiahní (VACV) sú obzvlášť atraktívne ako potenciálny protinádorová činidlá, pretože môžu obsahovať veľké množstvo cudzej DNA, bez toho aby sa znížila ich účinnosť replikácie. Okrem toho, VACV ukázala veľkú bezpečnostný profil u človeka [10-12]. A konečne, okrem jeho terapeutickým potenciálom, VACV použil aj ako neinvazívne zobrazovacie technikou, ktorá umožňuje lekárom sledovať terapeutický prenos génov v tele [10, 13].
V tejto publikácii sme skúmali terapeutický potenciál románu VACV vyjadruje ľudský jodid sodný symporter (h
NIS), GLV-1 h153, proti žalúdočnej rakoviny in vitro a in vivo
, a testované jeho potenciál ako zobrazovacie nástroj.
materiály a metódy
bunkové línie
ľudskej rakoviny žalúdka AGS bunky (a adenokarcinóme žalúdka epiteliálne bunková línia) boli získané z American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA) a boli kultivované v Hamově F-12, K médiá. Ľudský OCUM-2MD3 bunky boli darom od Dr. Masakazu Yashiro (Osaka City University Medical School, Japonsko) a boli kultivované v Dulbeccova modifikovanom Eaglovho média (DMEM). MKN-74 a bunky TMK-1 boli poskytnuté Dr. T. Suzuki (Fukushima Medical College, Japonsko) a boli kultivované v Roswell Park Memoriál Institute (RPMI). MKN-45 bol získaný ako dar od Dr Yutaka Yonemura (Kanazawa University, Japonsko) a bol udržiavaný v RPMI. Africký mačiak obličiek fibroblastov (Cercopithecus aethiops
; CV-1) bunky použité pre vírusové plaku testy boli zakúpené od ATCC (Manassas, VA) a pestované v Minimum Essential Medium (MEM). Všetky médiá bola doplnená 10% FBS, 1% penicilín a streptomycín 1%.
Vírus
GLV-1 h153 je replikačné kompetentný, rekombinantný vírus kiahní odvodený od rodičovského kmeňa, Gly-1 H68, cez k homológne rekombináciu. Obsahuje štyri vložené kazety kódujúce Renilla Aequorea
fúzny proteín luciferase- zelený fluorescenčný proteín (GFP ručným), čo je obrátene vloženou transferínu ľudský receptor (rTfr
), p-galaktozidázu a ľudský jodid sodný symporter (h
NIS) do F14.5
, J2R
(kódujúce tymidín-kináza), a A56R
(kódujúce hemaglutinín) loci vírusového genome.GLV-1 h153 poskytla Genelux Corporation (R &D zariadení v San Diego, CA, USA).
test cytotoxicity
4 x 10 4 buniek na jamku každej bunkovej línie boli umiestnené do 12-jamkových doštičiek a inkubujú v 5% CO 2 zvlhčený inkubátor pri teplote 37 ° C cez noc. GLV-1 h153 bolo pridané do každej jamky na rôzne multiplicitě infekcie (MOI) 0,01, 0,1, a 1,0. Vírusová cytotoxicita bola testovaná za použitia laktátdehydrogenázy (LDH) testu denne. Bunky boli premyté PBS raz, a potom lyžovanie 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Intracelulárne uvoľňovanie LDH po rozklade sa následne meria CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) na spektrofotometra (EL321e, biotechnológií Tek Instruments) pri 490 nm. Výsledky sú vyjadrené ako percento prežívajúcich buniek, ktoré boli vypočítané ako uvoľnenie LDH infikovaných vzoriek v porovnaní s kontrolou neinfikovaných. Všetky podmienky boli testované v triplikátech.
Vírusové test replikácie
supernatanty z každej infikovaného tiež boli zhromaždené denne a ihneď zmrazený pri -80 ° C. bola vykonaná sériová riedenie všetkých vzorky supernatantu vykonať štandardné vírusových plakov testov na konfluentní bunky CV-1. Všetky vzorky boli merané v troch vyhotoveniach.
In vivo
myšou boku nádor terapia
Všetky pokusy na zvieratách boli vykonané podľa schválených protokolov a v súlade s etickými smernicami používanie a ošetrovanie výboru Institutional zvierat (IACUC) pri Memorial Sloan -Kettering Cancer Center (MSKCC). MKN-74 xenografe bola založená v 6 až 8 týždňov staré samice nahých myší (NCI: HSD: athymických Nude-nu, Harlan) podľa podkožne injekčné 5 x 10 6 MKN-74 buniek do pravého boku. Rast nádoru bol zaznamenaný dvakrát týždenne za použitia digitálneho objemu kalibru a nádoru sa vypočítal pomocou rovnice, sa
x Bo
2 x 0,5, v ktorom a a b
sú najväčšie a najmenší priemer, resp. Keď nádory dosiahli priemere približne 6-8 mm za 10 dní, bola zvieratá rozdelená do kontrolných a ošetrovaných skupín s vyváženým veľkosti nádoru. Jedna dávka 2 x 10 6 plak tvoriacich jednotiek (PFUs) zo GLV-1 h153 v 100 ul PBS a 100 ul PBS ako kontroly boli injekčne do nádoru na každú určenú nádoru. Zvieratá bola pozorovaná denne akékoľvek známky toxicity, a obetoval keď ich nádory dosiahli priemer približne 15 mm.
Fluorescenčné imaging (Maestro)
In vivo
GFP obrazy boli získané pomocou systému CRI Maestro (Cambridge výskum a meracej techniky, Woburn, MA) s použitím vhodných filtrov (excitácia = 445 až 490 nm, emisia = 515 nm dlho-pass filter, nastavenie akvizičné = 500-720 v 10 nm). Potom, čo bola získaná každý obraz, bola spektrálne Unmixed odstrániť fluorescencie pozadia. Snímky boli kvantifikované pomocou oblasti záujmu (ROI) analytického softvéru, ktorý je dodávaný so systémom Maestro.
In vivo
jednofotónová emisná tomografia SPECT
päť MKN-74 xenografe bolo do nádoru podali 2 x 10 7 PFUs GLV-1 h153 a 5 PBS ako kontroly. Dva dni po infekcii, 200 učí 99m technecistanu bol podávaný injekčne chvostovej žily. 99mTc technecistanu snímky boli získané v priebehu 10 minút, 3 hodiny po podaní rádioaktívne. Zobrazovanie boli vykonávané s použitím dual-detektora gama kamery sub-systém malých zvierat systému X-SPECT SPECT-CT (Gamma Medica, Northridge, CA). Systém γ-kamera X-SPECT bol kalibrovaný pomocou zobrazovacieho myšou veľkosti (30 ml) valec naplnený namerané koncentrácie (MBq /ml) 99mTc pomocou okna photopeak energie 126 až 154 keV a nízkoenergetické s vysokým rozlíšením collimation. Výsledné 99mTc snímky boli exportované do Interfile a potom importované do ASIPro (Siemens predklinických Solutions, Knoxville, TN) pre spracovanie obrazu softvérového prostredia. Tým analýzu návratnosti investícií, bol odvodený kalibračný systém faktor (v cpm /pixel za MBq /ml). obrázky zvierat boli tiež exportované do Interfile a potom importovať do ASIPro a parametrizovať z hľadiska útlmu korigovaná percentuálny injekčne podanej dávky na gram (% ID /g) na základe uvedenej kalibračného faktora, podanej aktivity, čas po podaní zobrazovanie a trvanie obraz.
In vivo
PET imaging
boli tri MKN-74 xenoimplantáty injekčne do nádoru s 2 × 10 7 PFU GLV-1 h153 a dva s PBS. Dva dni po injekcii vírusového, 300 učí 124I bol podávaný injekčne chvostovej žily. Jednu hodinu po podaní rádioaktívne, 3-rozmerné údajov zoznam režim boli získané pomocou okna energie 350 až 700 keV, a to náhoda časové okno 6 nanosekúnd. Imaging bola vykonaná za použitia ostrenie 120 microPET venovanú malé zviera PET skenera (Concorde Microsystems Inc, Knoxville, TN). Tieto údaje boli rozdelené do 2-rozmerné histogramy Fourier rebinning. Tieto Počet ceny v rekonštruovaných obrazov sa prevedú na objemovej aktivity (% ID /g), s použitím kalibračný systém faktor (MBq /ml na cps /voxel) odvodené od zobrazovania veľkosti myší fantómu naplnené jednotnú vodným roztokom 18F. obrazová analýza bola vykonaná pomocou ASIPro
Štatistická analýza
Významné rozdiely medzi skupinami boli stanovené pomocou Studentov testu
(Excel 2007, Microsoft, Redmond, WA, USA) .. Hodnota p < 0,05 bola považovaná za významnú.
Výsledky testu cytotoxicity
všetkých päť ľudských nádorových bunkových línií žalúdka boli citlivé na oncolysis od Gly-1 h153 (obrázok 1). MKN-74, OCUM-2MD3, a AGS bunkové línie boli citlivejší na vírusovú lýze v porovnaní s MKN-45 a TMK-1 buniek. Všetky bunkové línie vykazovali odozvu v závislosti na dávke, s väčší a rýchlejší usmrtených buniek pri vyšších MOI. V MKN-74, OCUM-2MD3 a AGS bunkové línie, viac ako 90% buniek bolo zabitých do 9 dní pri MOI 1. Bunková línia MKN-74 bol obzvlášť citlivý na vírusovú oncolysis, s viac ako 77% usmrtených buniek do 9 dní pri najnižšej MOI 0,01. Obrázok 1 Cytotoxicita GLV-1 h153 proti 5 rakovina žalúdka u ľudí bunkových línií in vitro. Všetky bunkové línie trvalo významnú cytotoxicitu pri MOI 1, tri bunkové línie boli citlivé pri MOI 0,1 a dve bunkové línie preukázali vynikajúcu citlivosť na Gly-1 h153 aj pri najnižších MOI 0,01.
Replikáciu vírusu
Štandardné vírusové plaky testy preukázali efektívne vírusovú replikáciu Gly-1 h153 vo všetkých bunkových línií karcinómu žalúdka pri MOI 1 (obrázok 2). MKN-74 preukázali najvyššiu vírusový titer s vrcholom titra 1,06 × 10 6 PFUs na jamku, 26-násobný nárast oproti počiatočnej dávke, v 7. Obrázok 2 In vitro kvantifikácia vírusovej replikácie podľa GLV-1 h153 v ľudských nádorových bunkových línií žalúdka. Vírus sa oddelí z jamiek buniek infikovaných pri MOI 1. Vírusové plaku testy preukázali účinnú replikáciu vírusu vo všetkých 5 bunkových línií a dosiahlo najvyššiu vírusovú proliferáciu (1,06 x 106 vírusových plakotvorné jednotky od 7. dňa) v bunkovej línii , MKN-74, čo predstavuje 26-násobné zvýšenie z jeho počiatočnej dávky.
in vivo myší
xenoimplantáty terapie Gly-1 h153
Pre stanovenie cytolytickej účinky Gly-1 h153 in vivo
, myši nesúci MKN-74 xenoimplantáty boli ošetrené jednou dávkou intratumorální injekciu Gly-1 h153 alebo PBS. Ošetrené nádorov preukázala trvalý /kontinuálne regresii nádoru po dobu štyroch týždňov. 28. deň sa stredný objem nádoru liečenej skupiny bola 221,6 mm 3 (obrázok 3). Jedno zviera preukázala úplnú regresiu nádoru. Na rozdiel od toho všetky kontrolné nádorov pokračovali v raste o objeme strednej 1073.2 mm 3 do 28. dňa (t-test
, porovnanie ošetrenie a kontrolnej skupiny v deň 28, p 0,001). Došlo k žiadnej významnej zmene telesnej hmotnosti v jednej skupine, a nebola pozorovaná žiadna chorobnosť a úmrtnosť súvisiace s nákladným listom 1 h153 liečby. Obrázok 3 GLV-1 h153 potláča rast MKN-74 nádoru. 2 x 106 vírusových častíc z Gly-1 h153 alebo PBS boli injikované do nádoru do nahých myší nesúcich podkožný boku nádorov MKN-74. Inhibícia rastu nádoru v dôsledku liečby Gly-1 h153 vyslaný deň 15 (p 0,001). Nádorové objemy uvedené predstavujú priemerné objemy od 5 myší v každej liečených skupín.
In vitro a in vivo
GFP expresie
expresie GFP bola sledovaná pomocou fluorescenčnej mikroskopie 1, 3, 5, 7, a 9 dní po vírusovej infekcii pri MOI 1,0. Väčšina MKN-74 bunky boli infikované a vyjadril GFP cez deň 7 (obrázok 4A). In vivo,
GFP signál môže byť detekovaný iba na štepu so vstrekovaním Gly-1 h153 (obrázok 4B). Obrázok 4 zelený fluorescenčný proteín (GFP) expresie MKN-74 in vitro a in vivo. A. MKN-74 bunky boli infikované GLV-1 h153 a ukázala silnú zelenú fluorescenciu od 7. dňa, čo demonštruje účinnú infekcii (zväčšenie 100 x). B. MKN-74 bokov nádory boli liečené 2 x 106 vírusových častíc GLV-1 h153. Zelená fluorescencie nádoru s Maestro skenerom indikuje úspešné infekciu a lokalizáciu nádoru špecifickú GLV-1 h153.
Fungujúce h
NIS prejavu imaged 99m-technecistanu scintigrafie a 124I PET
Všetky MKN-74 xenoimplantáty injekčne s GLV-1 h153 vykazovali lokalizované nahromadenie 99m rádioaktivity do boku nádorov, zatiaľ čo žiadna rádioaktivita kumulácia u kontrolných nádorov (obrázok 5A). GLV-1 h153 infikovaných MKN-74 nádory tiež uľahčiť zavádzanie 124I rádiojódu a umožnila zobrazovanie pomocou PET (obrázok 5B), zatiaľ čo PBS vstrekovaním nádory nebolo možné vizualizovať. Obrázok 5 Jadrová zobrazovania GLV-1 h153 infikovaných MKN-74 xenoimplantátů. A. 99m technecistanu skenovanie bolo vykonané 48 hodín po infekcii a 3 hodiny po podaní rádioaktívne. Nádory ošetrené GLV-1 h153 vírusu sú jasne vizualizované (šípka). Žalúdok a štítnej žľazy sú vidieť vzhľadom k natívnej expresie NIS a močového mechúra je vidieť z vylučovanie rádioizotopu. B. axiálne, koronálnej a sagitálnej pohľady na 124I PET obrazu 48 hodín po Sprievodca nákladným listom 1 h153 injekciu vykazuje lepší signál v GLV-1 h153-infikovaných MKN-74 nádorov (šípka).
Diskusia
žalúdočné rakoviny štvrtou najčastejšou zhubné bujnenie a druhou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu spojených s celosvetovo [1, 14]. Recidívy alebo vzdialené metastázy, je jednou z najčastejších komplikácií a často príčinou úmrtí [15]. Kým chemoterapia je vhodný adjuvantnej terapie v porovnaní s chirurgickou liečbou samotným, jeho terapeutický potenciál je obmedzený [16]. Väčšina karcinómov žalúdka sú odolné voči súčasnej dobe k dispozícii chemoterapie. Z tohto dôvodu sú potrebné nové terapeutické látky na zlepšenie výsledkov u pacientov s karcinómom žalúdka, ktorí nereagujú na konvenčnú liečbu. Protinádorovej vírusovej terapie je sľubným prístupom na liečbu rakoviny, ktoré závisí od schopnosti vírusov infikovať, replikáciu v rámci, a lyžovať hostiteľskej bunky [17, 18]. V tejto štúdii sme popísali cytotoxické účinky Gly-1 h153, nový rekombinantný VACV nesúci h
NIS génu, na buniek karcinómu žalúdka in vitro
. Ďalej sme preukázali, že GLV-1 h153-infikovaných rakovinou žalúdka xenoimplantáty vyjadril fungujúci h
NIS proteín, ktorý je povolený pre neinvazívne zobrazovanie nádoru a tiež efektívne regresii nádoru in vivo
.
Rôzne vírusy zobrazenej Protinádorovými vlastnosti vrátane adenovírus, herpes simplex vírus, vírus pseudomoru choroby, vírus vezikulárnej stomatitídy, a reovirus [17]. Medzi rôznymi onkolytických vírusových agens, vírus kiahní, má niekoľko výhod. VACV výhradne replikuje v cytoplazme bez použitia DNA-syntéza stroje hostiteľa, čím sa znižuje riziko integrácie vírusového genómu do genómu hostiteľa [10]. Veľké množstvo cudzej DNA (až 25 kb) môžu byť začlenené, bez toho aby sa významne zníži účinnosť vírusovej replikácie [19]. Okrem toho, vaccinia bolo preukázané, že majú dobrý bezpečnostný profil, ako to bolo v minulosti venovaná miliónov ľudí počas očkovania proti kiahňam. To tiež ukazuje, účinnú replikáciu a širokú škálu bunkových tropisms hostiteľských [10]. Niekoľko predklinických štúdií ukázali, že systémová injekcia rekombinantného VACV do xenoimplantátů malo za následok vysoké vírusové titre v iba nádorov, čo ukazuje, nádorovo špecifické kolonizáciu [11, 20, 21]. K dispozícii je malá obava, že pacienti, ktorí dostali očkovanie proti kiahňam v minulosti majú neutralizačné protilátky proti vírusu. Táto skutočnosť by mohla mať za následok zníženú účinnosť liečby. Avšak, v krvi, komplement hrá viac dôležitú úlohu v inaktiváciu VACV než neutralizujúcich protilátok. Preto predpokladáme, že prítomnosť neutralizačných protilátok u pacientov, by nemalo brániť liečbu VACV; Avšak, môže byť požadovaná vyššie dávky liečby.
Geneticky VACVs preukázali účinnosť pri liečbe širokého rozsahu ľudských nádorov [12]. GLV-1 h168 už ukázal byť efektívna diagnostické a terapeutické vektor v niekoľkých ľudských nádorových modelov, vrátane prsníka nádor, mezotelióm, rakoviny pankreasu a karcinómu z dlaždicových buniek [11] h
NIS proteín, ktorý je neoddeliteľnou membrána glykoproteínu s 13 domnelej transmembránovej domény, aktívne transportuje ako sodným + a aj - iónov cez bunkovú membránu [22]. Fungujúce h
NIS proteínu môže vychytávania niekoľko komerčne dostupné rádiové-nukleotidy, vrátane 123I, 124I, 125I, 131 I, 99mTc a 188r [22, 23 ]. V tejto štúdii, GLV-1 h153 sprostredkovanú expresiu h
NIS proteínu v infikovaných MKN-74 xenoimplantátů následok lokalizované 99mTc a 124I vychytávania rádioaktívne. Naše výsledky naznačujú, že h
NIS génovej expresie pomocou vírusového vektora, môže byť použitý ako neinvazívne zobrazovacie režim pre sledovanie progresie nádoru a relaxačné účinky.
Jediný intratumorální injekciu Gly-1 h153 v MKN-74 xenoimplantátů vystavený lokalizované intratumorová GFP a h
NIS výrazu. Navyše neexistuje žiadny dôkaz šírenia vírusov na iné orgány pre GFP zobrazovanie, 99mTc scintigrafie, a 124I PET, čo naznačuje, tumor-špecifické vírusové infekcie a aktivity. Tiež sme preukázali, že GLV-1 h153 je účinná a bezpečná pre liečbu žalúdočných nádorov v myšiam modeli s xenoštěpem. GLV-1 h153 ošetrené skupiny bola nepretržite sledovaná až 35. deň a nebola tumor opätovný rast (dáta nie sú uvedené medzi dnom 28 a 35). Kontrolná skupina musela byť obetovaná v súlade so schváleným našej zvieracie protokolu v deň 28. Vyjadrenia h
NIS génu v inak non-hnis-exprimujúce tkaniva je vzrušujúce. Mohlo by potenciálne využívajú osvedčeného rádiojódu a terapiu v iných non-štítnej žľazy vznikla rakoviny. Niekoľko štúdií ukázalo sľubné výsledky v rôznych nádorov s použitím ošetrenia rádiojódu prostredníctvom špecifickej pre nádor expresie NIS génu h
vrátane medulárnej karcinóm štítnej žľazy [24], rakoviny prostaty [25], rakoviny hrubého čreva [26], a prsníka rakoviny [27]. Nádorovo špecifické h
NIS expresie pomocou GLV-1 h153 môžu maximalizovať lokalizované akumulácie rádiojódu a minimalizáciu nešpecifickej vychytávania v iných orgánoch. na našich sľubných výsledkov vyplýva, že by to mať významný klinický význam pre vyhodnotenie účinku kombinovanej terapie GLV-1 h153 a rádioaktívneho jódu.
Záver
Táto štúdia ukazuje nový protinádorového VACV inžinierstva pre expresiu h
NIS môžu účinne infikovať, replikáciu v rámci, a spôsobiť regresiu rakoviny žalúdka v myšiam modeli s xenoštěpem. Expresia GFP môže slúžiť ako náhrada vírusovej infekčnosti. In vivo
, GLV-1 h153 infikované bunky môžu byť ľahko zachytený s 99m scintigrafie a 124I PET zobrazovania. Tieto dáta poskytujú ďalšiu podporu pre budúce vyšetrovanie GLV-1 h153 ako činidlá pre ošetrovanie a neinvazívne zobrazovacie nástroj v klinickej praxi
Skratky
VACV :.
kiahne vírus

hnis:
Human jodid sodný symporter
ATCC:
American Type Culture Collection
RUC-GFP:
Renilla
luciferázy-Aequorea
zelený fluorescenčný proteín
LDH:
Laktátdehydrogenasa ()
IACUC:
Care and Use výboru Institutional Animal
MSKCC:
Memorial Sloan-Kettering Cancer Center
PFUs:
plakotvorné jednotky
MOI:
multiplicita infekcie
PET:
pozitrónová emisná tomografia

ROI:
oblasti záujmu
rTfr:
Reverzný vložený transferínu ľudský receptor
SPECT :.
Single emisná tomografia
deklarácia
Poďakovanie
Technické služby poskytované MSKCC malé Animal Imaging Core zariadenia, podporovaný z časti NIH malej -živočíšna Imaging Research Program (SAIRP) Grant č R24 CA83084 a NIH centrum Grant Nie P30 CA08748, sú vďačne uznal.
autorov pôvodné predloženej súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodných predložených súborov pre obrázky , "Pôvodný súbor na obrázku 1 13046_2013_740_MOESM2_ESM.tiff autorského 13046_2013_740_MOESM1_ESM.tiff autorov pôvodného súboru pre" pôvodného súboru pre Obrázok 3 13046_2013_740_MOESM4_ESM.tiff autorského Obrázok 2 13046_2013_740_MOESM3_ESM.tiff autorského pôvodného súboru na Obrázok 4 pôvodného súboru 13046_2013_740_MOESM5_ESM.tiff autorského na obrázku 5 konkurenčné záujmy
žiadne konkurenčné finančné záujmy pre Kyong-Hwa Jun, Tae-Jin Song, Sepideh Gholami, Joyce Au, Dana Haddad, Carson Joshua, Chun-Hao Chen, Kelly Mojica, Pat Zanzonico a Yuman Fong existujú. Nanhai G. Chen, Qian Zhang a Aladár A. Szalay je spojený s Genelux Corporation.
Príspevky autorov
SG pomáhal pri spísať rukopisu. TS asistovanej in vivo
pokusov in a prispel k návrhu štúdie. JA prispel k testu cytotoxicity. DH prispel k vivo
PET a SPECT in. JC prispel k fluorescenčného zobrazovania. CC prispel k štatistickú analýzu dát. KM prispel k testu replikácie vírusu. PZ prispel k návrhu štúdie a rádioaktívnych zobrazovacie experimenty. NC a QZ prispel k vírusovej sekvencie a konštrukt. AS a YF prispel k návrhu štúdie a dokončenie rukopisu. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Klinicko-patologické charakteristiky a liečebnej stratégie v ranej rakoviny žalúdka: retrospektívnej kohortnej štúdii
• Receptor selektívny modulátor aryl uhľovodík 3,3-diindolylmetan inhibuje žalúdočné rakovinové bunky growth