Роман онколитический вирусная терапия и визуализация техника для рака желудка с использованием генной инженерии вируса коровьей оспы, несущий йодистого натрия человека symporter

романа онколитической вирусной терапии и визуализации методики для лечения рака желудка с использованием генной инженерии вируса коровьей оспы, несущий йодида натрия человек Симпортер
Аннотация
фон
рака желудка имеют плохую общую выживаемость, несмотря на недавние достижения в области методов раннего выявления, эндоскопических методов резекции и химиотерапии. Коровьей вирусная терапия была многообещающий терапевтический потенциал для различных видов рака и имеет большой профиль безопасности. Мы исследовали терапевтическую эффективность нового генетически сконструированного вируса коровьей оспы, несущий человека йодида натрия Симпортер (ч
NIS) гена, ГЛВ-1 h153, на рака желудка и его потенциальной полезности для визуализации с помощью 99mTc пертехнетата сцинтиграфии и 124I позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ).
Методы
ГЛВ-1 h153 был протестирован против пяти желудочных линий раковых клеток человека с использованием цитотоксичности и стандартных вирусных анализов бляшек. В естественных условиях
подкожные опухоли фланговые были получены у голых мышей с клеток рака желудка человека, MKN-74. Опухоли были впоследствии вводили либо ГЛВ-1 h153 или PBS и последующим для роста опухоли. 99mTc пертехнетатом сцинтиграфии и 124I microPET изображения были выполнены.

Результаты экспрессии GFP, суррогат вирусной инфекционности, подтвердили вирусную инфекцию 24 часов. При множественности инфекции (MOI) 1, ГЛВ-1 h153 достигается > 90% цитотоксичность в МНК-74, OCUM-2MD3 и АГС в течение 9 дней, и > 70% цитотоксичность в MNK- 45 и ТМК-1. В естественных условиях
, ГЛВ-1 h153 был эффективен при лечении ксенотрансплантатов (р &лт; 0,001) после 2 недель лечения. ГЛВ-1 h153-инфицированные опухоли легко изображается с помощью 99mTc пертехнетатом сцинтиграфии и изображения 124I microPET через 2 дня после
лечения. Выводы
ГЛВ-1 h153 является эффективным онколитический вирус, выражающее час <бр> NIS белок, который может эффективно регресс опухоли желудка и позволяют визуализации глубоких тканей. Эти данные стимулирует его дальнейшее исследование в клинических условиях.
Ключевые слова
онколитической вирусная терапия ГЛВ-1 h153 Рак желудка йодида натрия Симпортер Человека (ч
NIS) Справочная информация
Рак желудка является одним из наиболее распространенных злокачественных опухоли, особенно в Азии [1]. Хотя методы раннего выявления, развития эндоскопической или хирургической резекции, а также более эффективные химиотерапевтические препараты улучшили общую выживаемость у пациентов с раком желудка, прогноз у пациентов с распространенным раком желудка остается низким [2-4]. Большинство обычных процедур химиотерапии продемонстрировали умеренную эффективность. Одним из возможных объяснений сопротивления рака желудка к обычной терапии может быть его неиспользованием восприимчивость к апоптозу [5]. Тем не менее, онколитические вирусы имеют большие терапевтические эффекты против раковых клеток, которые экспрессируют высокие уровни рибонуклеотидредуктазы, репарации ДНК ферментами, и, таким образом, устойчивы к апоптозу [6, 7]. Многие из этих характеристик, которые делают Клетки рака желудка устойчивы к химиотерапии, делает их восприимчивыми к онколитической вирусной терапии. Таким образом, генная терапия с использованием онколитической вирус предлагает привлекательную альтернативу для лечения рака желудка [8].
Онколитической вирусная терапия была изучена в течение прошлого века и показал успех в доклинических и клинических испытаний в качестве метода лечения рака романа [9 ]. вирус коровьей оспы (VACV) штаммы являются особенно привлекательными в качестве потенциальных агентов противоопухолевых, так как они могут включать большие количества чужеродной ДНК, не снижая их эффективность репликации. Кроме того, VACV показал отличный профиль безопасности у людей [10-12]. И наконец, в дополнение к его терапевтический потенциал, VACV также был использован в качестве неинвазивного метода визуализации, позволяющий врачам отслеживать терапевтический доставку генов в организме [10, 13].
В этой публикации мы рассмотрели терапевтический потенциал романа VACV, выражающее йодида натрия Симпортер человек (ч
NIS), ГЛВ-1 h153, против рака желудка в пробирке
и в естественных условиях
и тестируют его потенциал в качестве инструмента визуализации.
Материалы и методы
Клеточные линии
Человеческий рак желудка AGS клетки (желудочный клеточной линии аденокарциномы эпителиальный) были получены из американской коллекции типовых культур (АТСС, Manassas, VA) и культивировали в Хэма F-12, K Medium. Человек OCUM-2MD3 клетки были подарком от доктора Масакадзу Ясиро (Osaka City University Medical School, Япония) и выращивали в модифицированной Дульбекко среде Игла (DMEM). MKN-74 и клетки ТМК-1 были предоставлены доктором Т. Сузуки (Фукусима медицинский колледж, Япония) и культивировали в Roswell Park Memorial института (RPMI). MKN-45 был получен в дар от доктора Ютака Yonemura (Канадзава университет, Япония) и поддерживали в среде RPMI. Африканской зеленой фибробласты почек обезьяны (Cercopithecus aethiops
; CV-1) клетки, используемые для вирусных анализов бляшки были приобретены у АТСС (Manassas, VA) и выращивают в минимальной основной среде (MEM). Все средства массовой информации, дополненной 10% FBS, 1% пенициллина и 1% стрептомицина.
Вирус
ГЛВ-1 h153 является к репликации, рекомбинантный вирус коровьей оспы, полученный из его родительского штамма, ГЛВ-1 H68, с помощью гомологичной рекомбинации. Он содержит четыре кассеты, вставленные кодирующие Renilla Aequorea
luciferase- зеленый флуоресцентный белок (ККО-GFP) слитый протеин, вставленный в противоположном направлении рецептор трансферрина человека (rTfr
), бета-галактозидазу и человеческий йодида натрия Симпортер (час <бр> NIS) в F14.5
, J2R
(кодирующий тимидинкиназы) и A56R
(кодирование гемагглютинин) локусы вирусного genome.GLV-1 h153 была предоставлена ​​Genelux Corporation (R &Amp; D центр в Сан-Диего, Калифорния, США).
цитотоксичности
4 × 10 4 клеток на лунку каждой клеточной линии высевали в 12-луночные планшеты и инкубировали в 5% CO <югу> 2 увлажненном инкубаторе при температуре 37 ° С в течение ночи. ГЛВ-1 h153 добавляли в каждую лунку при различной множественность инфекции (MOIS) от 0,01, 0,1 и 1,0. Вирусный цитотоксичности испытывали с использованием лактатдегидрогеназы (ЛДГ) анализа ежедневно. Клетки промывали PBS один раз, а затем лизируют с 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Внутриклеточным высвобождением ЛДГ следующие лизис затем измеряли с CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) на спектрофотометре (EL321e, Био- Tek Instruments) при 490 нм. Результаты выражены как процент выживающих клеток, рассчитанные как высвобождение ЛДГ зараженных образцов по сравнению с неинфицированными контролем. Все условия были протестированы в трех экземплярах.
Вирусный анализ репликации
супернатанатах каждого зараженного хорошо ежедневно собирали и немедленно замораживали при -80 ° С. были сделаны серийные разведения всех супернатантных образцов для выполнения стандартных анализов вирусных бляшек на сливающихся клеток CV-1. Все образцы были измерены в трех экземплярах.
В естественных условиях
мышиный флангом терапия опухолей
Все эксперименты на животных были проведены в соответствии с утвержденными протоколами и в соответствии с этическими рекомендациями по уходу и использованию комитета Institutional животных (IACUC) в Memorial Sloan -Kettering Cancer Center (MSKCC). MKN-74 ксенотрансплантаты были созданы в 6-ти до 8-недельного возраста самка голых мышей (NCI: Hsd: бестимусной Ню-ню, Харлан) с помощью подкожно инъекционного 5 × 10 6 MKN-74 клеток в правый бок. Рост опухоли регистрировали два раза в неделю с использованием цифрового калибра и опухоли объем был рассчитан с использованием уравнения, а
× B
2 × 0,5, в котором
и б
являются самыми крупными и маленькие диаметры, соответственно. Когда опухоли достигали диаметра приблизительно 6-8 мм в течение 10 дней, животные были сгруппированы в контрольной и получавшей соединение групп с равноправным размеров опухоли. Одна доза 2 × 10 6 бляшкообразующих единиц (БоЕ) ГЛВ-1 h153 в 100 мкл PBS или 100 мкл PBS в качестве контроля вводили внутриопухолево каждому указанному опухоли. Животные ежедневно наблюдали каких-либо признаков токсичности, и принесена в жертву, когда их опухоли достигали диаметра приблизительно 15 мм.
Флуоресцентная томография (Maestro)
В естественных условиях
GFP изображения были получены с использованием системы CRi Maestro (Кембридж Исследования и измерительные приборы, Woburn, MA), используя соответствующие фильтры (возбуждения = 445-490 нм, эмиссия = 515 нм длиной фильтра верхних частот, параметры сбора = 500-720 в 10 нм). После того, как было получено каждое изображение, оно было спектрально несмешанные для удаления фоновой флуоресценции. Изображения были количественно с использованием области интереса (ROI) анализа программного обеспечения, которое поставляется с системой Maestro.
В естественных условиях
однофотонная эмиссионная компьютерная томография ОФЭКТ визуализации
Пять MKN-74 ксенотрансплантаты были внутриопухолево инъекции 2 × 10 7 Pfus ГЛВ-1 h153 и 5 с PBS в качестве контроля. Через два дня после заражения, 200 мкКи 99mTc пертехнетатом вводили путем инъекции в хвостовую вену. 99mTc пертехнетата изображения были получены в течение 10 мин, через 3 часа после введения РФП. Визуализацию проводили с использованием двойного детектора гамма-камеры суб-систему мелких животных системы X-ОФЭКТ ОФЭКТ-КТ (Гамма-Медика, Northridge, CA). Система γ-камера Х-ОФЭКТ была откалибрована с помощью получения изображения мышиной размера (30 мл) цилиндр, наполненный измеренной концентрации (МБк /мл) 99mTc с помощью окна фотопику энергии 126 до 154 кэВ и низкоэнергетических с высоким разрешением коллимации. Полученные в результате 99mTc изображения были экспортированы в Interfile, а затем импортировать в ASIPro (Siemens доклинических Solutions, Ноксвилл, штат Теннесси) программного обеспечения для обработки изображений окружающей среды. В результате анализа ROI, коэффициент калибровки системы (в имп /пиксель на МБк /мл) была получена. Изображения животных также были экспортированы в Interfile, а затем импортировать в ASIPro и параметризованных с точки зрения распада скорректированный процент вводили дозы на грамм (% ID /г) на основании коэффициента Вышеизложенное калибровки, вводимая активность, время после введения визуализации, и продолжительность изображения.
В естественных условиях
ПЭТ
Три MKN-74 ксенографты вводили внутриопухолево с 2 × 10 7 PFU ГЛВ-1 h153 и два с PBS. Через два дня после вирусной инъекции, 300 мкКи 124I вводили путем инъекции в хвостовую вену. Через час после введения РФП, 3-мерные данные списка режима были приобретены с использованием окна энергии от 350 до 700 кэВ и синхронизации окна совпадение 6 наносекунд. Визуализацию осуществляли с использованием фокуса 120 microPET посвященный ПЭТ-сканер небольшое животное (Concorde Microsystems Inc, Ноксвилл, штат Теннесси). Эти данные были отсортированы в 2-мерных гистограмм по ребининга Фурье. Скорости счета в реконструированных изображений были преобразованы в концентрации активности (% ID /г) с использованием калибровочного коэффициента системы (МБк /мл на сП /вокселе), полученного из визуализации размера мыши фантом, заполненный с равномерным водным раствором 18F. Анализ изображений проводили с использованием ASIPro
Статистический анализ
значимых различий между группами определяли с использованием т
Стьюдента (Excel 2007, Microsoft, Редмонд, штат Вашингтон, США).. Р-значение &л; 0,05 считается значительным.
Результаты
цитотоксичности
Все пять желудка линий раковых клеток человека были чувствительны к онколиза по ГЛВ-1 h153 (рисунок 1). MKN-74, OCUM-2MD3 и AGS клеточные линии были более чувствительны к вирусным лизисом по сравнению с MKN-45 и ТМК-1 клеток. Все клеточные линии продемонстрировали дозозависимый ответ, с большей и быстрее убить клетки при более высоких множественностью инфекции. В MKN-74, OCUM-2MD3 и AGS клеточных линий, более чем 90% клеток были убиты 9-й день при MOI, равным 1. Клеточная линия MKN-74 была особенно восприимчивы к вирусным онколиза, с более чем 77% гибели клеток по 9-й день на самом низком MOI 0,01. Рисунок 1 Цитотоксичность ГЛВ-1 h153 против 5 желудочных линий раковых клеток человека в лабораторных условиях. Все клеточные линии выдержал значительную цитотоксичность при MOI 1, три клеточные линии были чувствительны при MOI 0,1, и две клеточные линии продемонстрировали изысканную чувствительность к GLV-1 h153 даже при самых низких MOI 0,01.
Вирусную репликацию
Стандартные вирусные анализы бляшек продемонстрировали эффективную вирусную репликацию ГЛВ-1 h153 во всех желудочных линий раковых клеток при MOI 1 (рисунок 2). MKN-74 продемонстрировали самую высокую титра вируса с пиком титра 1,06 × 10 6 Pfus на лунку, 26-кратное увеличение по сравнению с первоначальной дозы, днем ​​7. Рисунок 2 В пробирке Количественное репликации вируса по ГЛВ-1 h153 в желудочном линий раковых клеток человека. Вирус собирали из лунок клеток, инфицированных при УМВД 1. Вирусный анализов бляшек продемонстрировали эффективную репликацию вируса во всех 5 клеточных линий, достигнув высшей пролиферации вируса (1,06 × 106 вирусных бляшкообразующих единиц на 7-й день) в клеточной линии , MKN-74, который представляет собой 26-кратное увеличение по сравнению с его первоначальной дозы.
в естественных условиях
мышиный ксенографтов терапии с ГЛВ-1 h153
установить цитолитического эффекты ГЛВ-1 h153 в естественных условиях <бр>, мышей, несущих MKN-74 ксенографты обрабатывали одной дозой внутриопухолевой инъекции ГЛВ-1 h153 или PBS. Обработанные опухоли продемонстрировали устойчивый /непрерывная регрессию опухоли в течение четырех недель. К 28-й день, средний объем опухоли в группе лечения была 221.6 мм 3 (рис 3). Одно животное продемонстрировало полной регрессии опухоли. В противоположность этому, все контрольные опухоли продолжали расти со средним объемом 1073.2 мм 3 на 28-й день (т
-test, сравнивая лечение и контрольной группы на 28-й день, р &ЛТ; 0,001). Там не было никаких существенных изменений в массе тела ни в одной группе, и не наблюдалось заболеваемости и смертности, связанные с ГЛВ-1 h153 лечения. Рисунок 3 ГЛВ-1 h153 подавляет рост опухоли MKN-74. 2 × 106 вирусных частиц ГЛВ-1 h153 или PBS вводили внутрь опухоли в голых мышей, несущих подкожные фланговых опухоли MKN-74. Ингибирование роста опухоли вследствие обработки ГЛВ-1 h153 начата 15-й день (р &ЛТ; 0,001). Объемы опухолей показаны представляют собой средние объемы от 5 мышей в каждой группе лечения.
В пробирке
и в естественных условиях
экспрессии GFP
экспрессии GFP контролировали с помощью флуоресцентной микроскопии 1, 3, 5, 7 и 9 дней после вирусной инфекции при MOI 1,0. Большинство клеток MKN-74 были инфицированы и выражали GFP на 7-й день (рис 4А). В естественных условиях,
GFP, сигнал может быть обнаружен только на ксенотрансплантаты вводили ГЛВ-1 h153 (фиг.4В). Рисунок 4 Зеленый флуоресцентный белок (GFP) экспрессия MKN-74 в пробирке и в естественных условиях. А. MKN-74 клетки инфицируют ГЛВ-1 h153 и показал сильную зеленую флуоресценцию на 7 день, демонстрируя эффективное инфекции (увеличение 100 ×). B. MKN-74 опухоли фланговые обрабатывали 2 × 106 вирусных частиц ГЛВ-1 h153. Зеленый флуоресцентный опухоли со сканером Maestro свидетельствует об успешном окончании инфекции и локализации опухоли специфичный ГЛВ-1 h153.
Функционирующие ч
выражение NIS изображаемого с помощью 99mTc-пертехнетата сцинтиграфии и 124I ПЭТ
Все MKN-74 ксенотрансплантаты инъекционные с ГЛВ-1 h153 показал локализованы накопление 99mTc радиоактивности в опухолях фланговых пока не радиоактивность кумуляции в контрольных опухолей (рис 5А). ГЛВ-1 h153-инфицированных MKN-74 опухоли также способствует поглощению радиоактивного йода 124I и позволил для визуализации с помощью ПЭТ (рис 5б), в то время как PBS-инъецированные опухоли не могут быть визуализированы. Рисунок 5 Ядерная визуализация ГЛВ-1 h153-инфицированных MKN-74 ксенотрансплантации. А. 99mTc пертехнетатом сканирование проводили через 48 часов после заражения и через 3 часа после введения РФП. Опухоли, обработанные ГЛВ-1 h153 вируса четко визуализируются (стрелка). Желудка и щитовидной железы наблюдаются в связи с нативной экспрессии NIS, и мочевой пузырь видно из выведения РФП. B. Осевая, корональной и сагиттальной вид на 124I ПЭТ изображения 48 часов после ГЛВ-1 h153 инъекции показывает повышенную сигнал в ГЛВ-1 h153-инфицированных MKN-74 опухолей (стрелка).
Обсуждение
Желудочный рака четвертым самым распространенным злокачественным и второй наиболее частой причиной рака, связанных смерти во всем мире [1, 14]. Рецидив или отдаленных метастазов является одним из наиболее распространенных осложнений и часто причиной смерти [15]. В то время как химиотерапия является полезным адъювантной терапии по сравнению с одним хирургической терапии, его терапевтический потенциал ограничен [16]. Большинство видов рака желудка устойчивы к имеющимся в настоящее время химиотерапии. Таким образом, новые терапевтические агенты необходимы для улучшения результатов для больных раком желудка, которые не реагируют на обычные методы лечения. Онколитической вирусная терапия является перспективным подходом к лечению рака, который зависит от способности вирусов инфицировать, реплицировать в пределах, и лизировать клетки [17, 18] хоста. В данном исследовании мы описали цитотоксическое действие ГЛВ-1 h153, роман рекомбинантный VACV несущий час
гена NIS, на клеток рака желудка в пробирке
. Кроме того, мы показали, что ГЛВ-1 h153-инфицированных желудка ксенотрансплантаты рака выражается функционирующую час
NIS белка, что позволило неинвазивной визуализации опухоли, а также эффективной регрессии опухоли в естественных условиях
.
Различные вирусы показаны онколитические свойства, включая аденовирус, вирус простого герпеса, вирус болезни Ньюкасла, вируса везикулярного стоматита и реовирус [17]. Среди множества онколитическими вирусных агентов, вирус коровьей оспы, имеет несколько преимуществ. VACV исключительно размножается в цитоплазме без использования ДНК-синтез машины хозяина, тем самым снижая риск интеграции вирусного генома в геном хозяина [10]. Большое количество чужеродной ДНК (до 25 кб) могут быть включены без значительного снижения вирусной репликации эффективности [19]. Кроме того, коровью было доказано, чтобы иметь хороший профиль безопасности, как это было исторически дано миллионам во время вакцинации против оспы. Он также демонстрирует эффективную репликацию и широкий спектр тропизмов клетки-хозяина [10]. Несколько доклинические исследования показали, что системное введение рекомбинантного VACV в ксенографтов привело к высокой вирусной титрами только в опухолях, что указывает на колонизацию опухоли специфические [11, 20, 21]. Существует небольшое опасение, что пациенты, которые получили прививку против оспы в прошлом, нейтрализующего антитела против вируса. Это потенциально может привести к скомпрометированных эффективности лечения. Тем не менее, в крови, комплемента играет более важную роль в инактивации VACV, чем нейтрализующих антител. Поэтому мы предсказать, что наличие нейтрализующих антител у больных, не должны мешать лечению VACV; Тем не менее, более высокие дозы лечение может потребоваться.
Генетически сконструированные VACVs показали эффективность в лечении широкого спектра злокачественных опухолей человека [12]. ГЛВ-1 H168 уже показала свою эффективность диагностических и терапевтических вектор в нескольких моделях опухолей человека, в том числе опухоли молочной железы, мезотелиомы, рака поджелудочной железы и плоскоклеточного рака [11] ч
белка NIS, которая является внутренней мембраной гликопротеин с 13 предполагаемыми доменами трансмембранных, активно транспортирует как Na + и I - ионов через клеточную мембрану [22]. Функционирование ч
белка NIS может поглощать несколько коммерчески доступных радио-нуклеотиды, в том числе 123i, 124I, 125I, 131I, 99mTc и 188Re [22, 23 ]. В этом исследовании, ГЛВ-1 h153-опосредованной экспрессии белка ч
NIS в инфицированных MKN-74 ксенографтов привело к локализованным 99mTc и 124I поглощение РФП. Наши результаты свидетельствуют о том, что экспрессия гена ч
NIS с помощью вирусного вектора может быть использован в качестве неинвазивного метода визуализации для контроля опухоли прогрессии и лечения эффектов.
Одиночный внутриопухолевой инъекции ГЛВ-1 h153 в MKN-74 ксенографтов выставлялась локализованный внутриопухолевые GFP и ч
экспрессии NIS. К тому же, не было никаких доказательств вирусного распространения каких-либо других органов, основанных на визуализации GFP, 99mTc сцинтиграфии и 124I ПЭТ, что указывает на опухоль-специфических вирусной инфекции и активности. Мы также показали, что ГЛВ-1 h153 является эффективным и безопасным при лечении опухолей желудка в мышиной модели ксенотрансплантата. ГЛВ-1 h153-группе, получавшей лечение не непрерывно наблюдали до 35-й день, и не было возобновление роста опухоли (данные не показаны между 28 и 35). Контрольная группа должна была быть принесена в жертву в соответствии с нашим утвержденным протоколом животных на 28-й день Выражая час
гена NIS в противном случае, не hNIS экспрессирующей ткани является захватывающим. Это потенциально может сделать использование хорошо налаженной радиойодной визуализации и терапии в других не-щитовидной железы возник рака. Несколько исследований показали обнадеживающие результаты в различных опухолей с использованием лечение радиоактивным йодом с помощью экспрессии опухолеспецифичного гена NIS ч
, в том числе медуллярной карциномы щитовидной железы [24], рак предстательной железы [25], рак толстой кишки [26], и груди рак [27]. Опухоль конкретным выражением ч
NIS с помощью ГЛВ-1 h153 может максимизировать локализованное накопление радиоактивного йода и минимизировать неспецифическую поглощение в других органах. На основании наших многообещающих результатов, это будет иметь существенное клиническое значение для оценки эффекта комбинированной терапии ГЛВ-1 h153 и радиойодом.
Заключение
Это исследование демонстрирует новый онколитической VACV, сконструированные для экспрессии Н
NIS может эффективно заражать, реплицировать в пределах, и вызывать регрессию рака желудка в мышиной модели ксенотрансплантата. Выражение GFP может служить в качестве суррогата вирусной инфекционности. В естественных условиях
, ГЛВ-1 h153 инфицированные клетки могут быть легко визуализируют с помощью 99mTc сцинтиграфии и визуализации 124I ПЭТ. Эти данные обеспечивают дополнительную поддержку для дальнейшего исследования ГЛВ-1 h153 в качестве агента для обработки и неинвазивной визуализации инструмента в клинических условиях
Сокращения
VACV:.
Вирус коровьей


hNIS:
Человеческий натрия йодида Симпортер


АТСС:
American Type Culture Collection


ККО-GFP:
Renilla
люциферазой Aequorea
зеленый флуоресцентный белок


ЛДГ:
лактатдегидрогеназы ()


IACUC:
Институциональная Уход за животными и использование комитета


MSKCC:
Memorial Sloan-Kettering Cancer Center


Pfus:
бляшкообразующих единиц


MOI:
множественность инфекции


ПЭТ:
Позитронно-эмиссионная томография


ROI:
области интереса


rTfr:
Обратный вставленный рецептор трансферрина человека


ОФЭКТ:.
однофотонной эмиссионной компьютерной томографии


декларациях
Выражение признательности
Технические услуги, предоставляемые в MSKCC Small-животных визуализации основной комплекс, поддержанный частично NIH малого -Animal Программа исследований обработки изображений (SAIRP) грант № R24 CA83084 и NIH Центр грант № P30 CA08748, которые с благодарностью.
авторов оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинальных представленных файлов для изображений , 'Исходный файл для Рисунок 1 13046_2013_740_MOESM2_ESM.tiff Авторского 13046_2013_740_MOESM1_ESM.tiff авторов исходного файла для "исходного файла для фигурного 3 13046_2013_740_MOESM4_ESM.tiff Авторского Рисунок 2 13046_2013_740_MOESM3_ESM.tiff Авторского исходного файла для фигурного 4 исходного файла 13046_2013_740_MOESM5_ESM.tiff Авторского на рисунке 5 конкурирующие интересы
не существует конкурирующие между собой финансовые интересы для Гён-хва июня, Tae-Jin Song, Sepideh Gholami, Джойс Au, Дана Хаддад, Карсон Джошуа, Chun-Хао Чен, Келли Мохики, Пэт Zanzonico и Yuman Фонг. Наньхай Г. Чэнь, Чжан Цянь, и Aladar А. Салаи аффилированы с Genelux Corporation.
Вклад авторов
SG помощь с подправить рукописи. TS помощь в естественных условиях
экспериментов в области и внесли свой вклад в дизайн исследования. JA вклад в анализе на цитотоксичность. DH внесли свой вклад в естественных условиях
ПЭТ и ОФЭКТ изображений в. JC способствовали флуоресцентной визуализации. СС способствовало статистического анализа данных. КМ способствовало анализа вирусной репликации. PZ внесли свой вклад в дизайн исследования и эксперименты радиоактивных изображений. NC и QZ способствовали вирусной последовательности и конструкции. AS и YF внесли свой вклад в дизайн исследования и завершения рукописи. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Клинико-патологическими характеристики и стратегии лечения в ранних стадиях рака желудка: исследование ретр…
• Рецептор модулятор селективный арилуглеводородному 3,3-Diindolylmethane ингибирует рост раковых клеток желудка