Naujų oncolytic virusinė terapija ir vaizdo technika skrandžio vėžio naudojant genų inžinerijos raupų virusas, vežančių žmogaus natrio jodido symporter

romano oncolytic virusinės terapijos ir vaizdo technika skrandžio vėžio naudojant genų inžinerijos raupų virusas, vežančių žmogaus natrio jodido symporter
Anotacija
fone
Skrandžio vėžio prastos bendrą išgyvenimą nepaisant pastaraisiais pasiekimus pirmaisiais aptikimo metodų, endoskopinių rezekcijos metodus, ir chemoterapijos procedūros. Raupų ​​viruso gydymas buvo perspektyvus gydomąjį potencialą įvairių vėžio ir turi didelę saugumo profilį. Mes tyrėme gydomąjį veiksmingumą naują genetiškai inžinerijos raupų viruso apskaitinę žmogaus natrio jodido symporter (H
NNV) genų, GLV-1 h153, skrandžio vėžio ir galimą jo naudingumą vaizdavimo su 99mTc pertechnetatu scintigrafija 124I pozitronų emisijos tomografijos (PET).
metodai
GLV-1 h153 buvo išbandytas prieš penkis žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijas, naudodamos toksiškumą ir standartines virusinėmis apnašas tyrimų. In vivo
, poodinio šoninė navikai buvo sugeneruotas per nuogas pelių su žmogaus skrandžio vėžio ląsteles, MKN-74. Navikai vėliau buvo sušvirkšta arba GLV-1 h153 arba PBS ir po auglio augimą. 99mTc pertechnetatui scintigrafija ir 124I microPET vaizdo buvo atlikta.
Rezultatai
GFP išraiška, surogatas viruso užkrečiamumo, patvirtino virusinės infekcijos 24 valandas. Esant infekcijos darinys (MOI) iš 1, GLV-1 h153 pasiekti > 90% citotoksiškumo ir MNK-74, OCUM-2MD3 ir AGS per 9 dienas, ir > 70% citotoksiškumo į MNK- 45 ir TMK-1. In vivo
, GLV-1 h153 buvo veiksmingas gydant ksenoimplantai (p < 0,001) po 2 gydymo savaičių. GLV-1 h153 infekuotų navikai buvo lengvai nufotografuota 99mTc pertechnetatui scintigrafija ir 124I microPET vaizdo 2 dienas po gydymo.
Išvadose
GLV-1 h153 yra veiksmingas oncolytic virusas išreikšti h
NNV baltymas, kuris gali efektyviai regresuoti skrandžio navikai ir leisti giliai audinių vaizdus. Šie duomenys skatina savo nuolatinį tyrimą klinikinėje aplinkoje.
Raktiniai žodžiai
Oncolytic virusinė terapija GLV-1 h153 Skrandžio vėžys Žmogaus natrio jodidas symporter (H
NIS) Fonas
Skrandžio vėžys yra viena iš labiausiai paplitę piktybiniai navikai, ypač Azijos [1]. Nors pradžioje aptikimo metodai, plėtra endoskopinis ar chirurgine rezekcija, ir efektyviau chemoterapijos pagerino bendrą išgyvenamumą pacientų, sergančių skrandžio vėžiu, pacientų, sergantys išplitusiu skrandžio vėžiu prognozė vis dar prasta [2-4]. Dauguma tradicinių chemoterapijos gydymo parodė vidutinį efektyvumą. Vienas iš galimų paaiškinimų su skrandžio vėžio atsparumo su įprastiniu gydymu gali būti jos ne-jautrumas apoptozės [5]. Tačiau oncolytic virusai turi daug gydomąjį poveikį nuo vėžio ląsteles, kurios išreikšti aukšto lygio ribonukleotidreduktazei, DNR remonto fermentų, ir todėl atsparus apoptozės [6, 7]. Daugelis šių savybių, kurios daro skrandžio vėžio ląstelės atsparios chemoterapijai, kad jie jautrūs oncolytic virusinės terapija. Taigi, genų terapijos, naudojant oncolytic virusas siūlo patrauklią alternatyvą skrandžio vėžio [8] gydymui.
Oncolytic virusinis gydymas tirtas per pastarąjį šimtmetį ir parodė sėkmės Ikiklinikinių ir klinikinių bandymų kaip naują vėžio gydymo metodas [9 ]. Raupų ​​virusas (VACV) padermės yra ypač patrauklus, nes potencialių priešvėžiniai agentai, nes jie gali įtraukti didelį kiekį užsienio DNR nesumažinant jų atkartojimo efektyvumą. Be to, VACV parodė didelį saugumas žmonėms [10-12]. Galiausiai, be to, jo gydymo potencialą, VACV taip pat buvo naudojamas kaip neinvazinę vaizdo technika, leidžianti gydytojams sekti terapinio geno pristatymą organizme [10, 13].
Šiame leidinyje mes išnagrinėjo gydomąjį potencialą romano VACV išreikšti žmogaus natrio jodido symporter (h
NIS), GLV-1 h153, prieš skrandžio vėžio in vitro, parsisiųsti ir in vivo,
, ir išbandyti savo potencialą kaip vaizdavimo įrankis.
medžiagos ir metodai
Mobilaus ryšio linijos
žmogaus skrandžio vėžio AGS ląstelių (skrandžio adenokarcinoma epitelio ląstelių linija) buvo gauti iš Amerikos tipas kultūros kolekcijos (ATCC; Manassas, VA) ir buvo auginamos Ham "F-12 K Medium. Žmogaus OCUM-2MD3 ląstelės buvo dovana Dr. Marcus Yashiro (Osakos miesto universiteto medicinos mokyklos, Japonija) ir buvo auginami Dulbecco modifikuota Eagle terpė (DMEM). MKN-74 ir TMK-1 ląstelės buvo numatyta Dr. T. Suzuki (Fukušimos medicinos koledžo, Japonija) ir buvo auginamos Roswell Park memorialinis instituto (RPMI). MKN-45 buvo gauta kaip dovana nuo dr Yutaka Yonemura (Kanazawa universiteto, Japonija) ir išliko RPMI. Afrikos žalia beždžionė inkstų fibroblastų (Cercopithecus aethiops
; CV-1) ląstelės naudojamos virusinių apnašų tyrimai buvo įsigytas iš ATCC (Manassas, VA) ir auginami Minimali pagrindinė terpė (MEM). Visos terpės buvo papildytas 10% FBS, 1% penicilinui, ir 1% streptomicino.
Virus
GLV-1 h153 yra replikacijos kompetentinga rekombinantinis raupų virusas kilęs iš jo motininės padermės, GLV-1 h68, per homologiczne rekombinacija. Jame yra keturi įdėta kasetės koduojandias Renilla Aequorea
luciferase- žalia fluorescencinė baltymų (RUC-GFP) branduolių sintezės baltymas, atvirkščiai įdėta žmogaus transferino receptorių (rTfr
), beta galaktozidazės ir žmogaus natrio jodido symporter (h
NNV) į F14.5
, J2R
(kodavimas timidinkinazės) ir A56R
(kodavimas hemagliutinino) loci virusinės genome.GLV-1 h153 buvo pateikta Genelux Corporation (R & d įrenginys San Diegas, CA, JAV).
Citotoksiškumas tyrimas
4 × 10 4 ląstelės per šulinio kiekvienos ląstelių linijos buvo chromuotas į 12 duobučių plokšteles ir inkubuojami 5% CO 2 drėkinamas inkubatorių 37 ° C temperatūroje per naktį. GLV-1 h153 buvo įtraukta į kiekvieną duobutę kintant gausybė infekcija (Mõis) 0,01, 0,1 ir 1,0. Virusinė citotoksiškumo buvo išbandytas naudojant laktato dehidrogenazės (LDH) Analizės per parą. Ląstelės buvo plaunamos PBS vieną kartą, ir tada lizuojamos 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Ląstelėse LDH spaudai po lizės vėliau buvo matuojamas CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) dėl spektrofotometru (EL321e, bio- Tek Instruments), esant 490 nm bangos ilgiui. Rezultatai išreiškiami išlikusių ląstelių procentinė dalis, kuri buvo apskaičiuota kaip LDH išleidimo užkrėstų mėginių, palyginti su neužteršto kontrolę. Visos sąlygos buvo išbandytas trimis egzemplioriais.
Viruso replikacija tyrimas
supernatantus vieni iš infekuotų pat buvo surinkti per dieną ir iš karto užšaldyti -80 ° C temperatūroje. buvo serijiniu būdu atskiedus visų skysčių virš mėginių atlikti standartines virusinėmis apnašas tiriant susiliejantis CV-1 ląstelių. Visi mėginiai buvo matuojami trimis egzemplioriais.
In vivo
pelių šoninė naviko gydymas
Visi bandymai su gyvūnais buvo atliekami pagal patvirtintus protokolus ir laikantis etinių gairių institucinės gyvūnų priežiūrai ir naudojimui komiteto (IACUC) Memorial Sloan -Kettering Vėžys centras (MSKCC). MKN-74 ksenoimplantai buvo įkurta 6- 8 savaičių amžiaus Patelė nuogas pelėms (NVI: HSD: Athymic nuogas Nu, Harlan) pagal oda švirkščiamų 5 × 10 6 MKN-74 ląstelių į dešinio krašto. Naviko augimas užfiksuotas du kartus per savaitę, naudojant skaitmeninį kalibro ir naviko tūris buvo apskaičiuotas naudojant formulę, yra
× b
2 x 0.5,, kurioje parsisiųsti ir b
yra didžiausia ir mažiausias skersmuo, atitinkamai. Kai augliai pasiekė maždaug 6-8 mm skersmens 10 dienų, gyvūnai buvo suskirstyti į kontrolinę ir tiriamąsias grupes su teisingais naviko dydžio. Vienkartinės dozės 2 × 10 6 apnašų sudarančių vienetų skaičius (PFUs) Iš GLV-1 h153 iš 100 iL PBS arba 100 įxL PBS kaip kontrolės buvo intratumorally švirkščiamas į kiekvienos paskirtos naviko. Gyvūnai buvo stebimi kiekvieną dieną toksiškumo požymius, ir paaukoti kai jų augliai siekė maždaug 15 mm skersmens.
Fluorescencinis vaizdo ( "Maestro")
in vivo
GFP vaizdai buvo gauti naudojant CRi Maestro sistemos (Cambridge tyrimai ir Instrumentuotė, Woburn, MA), naudojant atitinkamus filtrus (sužadinimo = 445-490 nm, emisijos = 515 nm, ilgai praleidžiančio filtro, įsigijimo settings = 500-720 10 nm). Po buvo gautas kiekvienas vaizdas, tai buvo spektrinį nesumaišyti pašalinti fono fluorescenciją. Vaizdai buvo įvertinami naudojant regioną palūkanų (IG) analizės programinė įranga, kuri yra pateikta su Maestro sistema.
In vivo
vieno fotono emisijos kompiuterinės tomografijos SPECT
Penki MKN-74 ksenoimplantai buvo intratumorally švirkščiamas su 2 × 10 7 PFUs GLV-1 h153 ir 5 su PBS kaip kontrolės. Dvi dienas po infekcijos, 200 μCi iš 99mTc pertechnetato buvo skiriama per uodega venų injekcijos. 99mTc pertechnetatui vaizdai buvo gauti per 10 min, 3 valandas po radioaktyvų administracija. Vaizdo atlikta naudojant dvejopo detektoriaus gama kameros posistemė X-SPECT nedidelio gyvūnų SPECT-CT sistemos (gama Medica, Northridge, Kalifornija). X-SPECT γ-kamerų sistema buvo kalibruotas vaizdavimo pelės dydžio (30 ml) cilindro, pripildyto išmatuotos koncentracijos (MBq /ml) 99mTc naudojant fotopiką energijos langą 126 154 keV ir mažai energijos didelės raiškos kolimacinio. Gauti 99mTc vaizdai buvo eksportuojami į Interfile ir tada į ASIPro (Siemens ikiklinikinių Sprendimai, Knoxville, TN) vaizdo apdorojimo programinė įranga aplinkoje importuojama. Roi analizės sistema Kalibravimo koeficientas (CPM /pixel per MBq /ml) buvo gauta. Gyvūnų atvaizdai taip pat buvo eksportuojami į Interfile ir tada importuoti į ASIPro ir sparametryzowane požiūriu slopinimo koreguotas procentinio suleistos dozės vienam gramui (% ID /g), remiantis tuo, kas išdėstyta kalibravimo koeficiento administruoja veikla, laikas pavartojus vaizdavimo, ir vaizdas trukmė.
in vivo
PET vaizdo
Trys MKN-74 ksenoimplantai buvo suleistas intratumorally su 2 × 10 7 PFU GLV-1 h153 ir du su PBS. Dvi dienas po virusinės injekcijos, 300 μCi iš 124I buvo skiriama per uodega venų injekcijos. Vieną valandą po radioaktyvų administravimo, 3-dimensional sąrašas režimo duomenys buvo įsigyta naudojant energijos langą 350 iki 700 keV, o sutapimas laiko langas iš 6 nanosekundžių. Vaizdo atlikta naudojant fokusavimo 120 microPET skirtas smulkių gyvūnų PET skeneris (Concorde Microsystems "Inc", Knoxville TN). Šie duomenys buvo suskirstyti į 2-dimensional histogramos pagal Furjė rebinning. Grafas normos rekonstruotų vaizdų buvo perskaičiuotos aktyvumo koncentracijos (% ID /g), naudojant sistemos kalibravimo faktorius (MBq /ml per CPS /voxel), gautų iš vaizdo pelės dydžio fantomų alsuoja vienodą vandeninio tirpalo 18F. Vaizdo analizė atlikta naudojant ASIPro
statistinė analizė
Reikšmingi skirtumai tarp grupių buvo nustatoma naudojant Stjudento t
testą (Excel 2007; Microsoft, Redmond, WA, Jungtinės Amerikos Valstijos).. P-vertė < 0,05 buvo laikomas reikšmingu.
Rezultatai
citotoksiškumo tyrimo pervežimas visus penkis žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijų buvo jautrios oncolysis iki GLV-1 h153 (1 paveikslas). MKN-74, OCUM-2MD3 ir AGS ląstelių linijos buvo jautresni virusinės lizė, palyginti su MKN-45 ir TMK-1 ląstelių. Visi ląstelių linijas parodė dozės priklausomas atsakymą, su didesniu ir greitesniu ląstelių nužudyti aukštosiose Mois. Į MKN-74, OCUM-2MD3, ir AGS ląstelių linijų, daugiau nei 90% ląstelių žuvo bent iš 1. moi 9 dieną MKN-74 ląstelių linija buvo ypač jautrūs virusinės oncolysis, turintį daugiau kaip 77% ląstelių nužudyti mažiausia MOI 0,01 9 dieną. 1 pav citotoksiškumo GLV-1 h153 prieš 5 žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijų in vitro. Visi ląstelių linijos patyrė didelį toksiškumą esant 1 MOI, trys ląstelių linijos buvo jautrios už 0,1 MOI, ir dvi ląstelių linijos parodė išskirtinį jautrumą GLV-1 h153 net mažiausias VRM 0,01.
Viruso replikacija
Standartiniai virusinės apnašas tyrimai parodė veiksmingą virusų replikacijos GLV-1 h153 visų skrandžio vėžio ląstelių linijų yra 1 (2 paveikslas) prie. MKN-74 parodė aukščiausią virusinės titras su piko titras 1,06 × 10 6 PFUs per gerai, 26 kartų padidinimas nuo pradinės dozės, pagal dienos 7 2 pav in vitro kiekybinis viruso replikacija pagal GLV-1 h153 žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijas. Virusas buvo surinkta iš užkrėstų bent iš 1. Virusinė apnašų tyrimų MOI ląstelių šulinių parodė veiksmingą virusų replikaciją visose 5 ląstelių linijų, pasiekdamas aukščiausią virusinės platinimu (1,06 × 106 virusinės plokšteles formuojantys vienetai pagal 7 dieną) į ląstelių linijos , MKN-74, tai sudaro 26 kartus padidinti nuo pradinės dozės.
in vivo
pelių ksenoimplantai gydymą GLV-1 h153
nustatyti citolitinį poveikį GLV-1 h153 in vivo,
pelių MKN-74 ksenoimplantai buvo gydomi vieną dozę naviką injekcijos GLV-1 h153 arba PBS. Apdoroti navikai parodė ilgalaikis /nuolatinis naviko regresiją per keturių savaičių laikotarpį. 28 dieną, vidutinis naviko tūris gydymo grupėje buvo 221.6 mm 3 (3 paveikslas). Vienas gyvūnas parodė pilną naviko regresiją. Priešingai, visi kontrolės navikų ir toliau auga su vidutiniškai tūrio 1073.2 mm 3 28 dieną (T
-test, lyginant tiriamąją ir kontrolinę grupę dieną 28, p < 0,001). Nebuvo jokių reikšmingų kūno masės pokytis nei vienoje grupėje ir buvo nepastebėta sergamumą ar mirtingumą susiję su GLV-1 h153 gydymą. 3 GLV-1 h153 pav slopina MKN-74 naviko augimą. 2 × 106 virusinės dalelės GLV-1 h153 arba PBS buvo suleistas intratumorally į nuogas pelių poodinio krašto auglius MKN-74. Slopinimas naviko augimą, nes gydymo GLV-1 h153 pradėtas dieną 15 (p < 0,001). parodyta auglio apimtis atitinka vidutines apimtis nuo 5 pelių kiekvienoje gydymo grupėse.
in vitro ir in vivo

GFP išraiška
GFP išraiška buvo stebimas fluorescencijos mikroskopijos 1, 3, 5, 7 ir 9 dienų po virusinės infekcijos už 1,0 MOI. Dauguma MKN-74 ląstelių buvo užsikrėtę ir išreiškė GFP dieną 7 (4A pav). In vivo
GFP signalas gali būti nustatytas tik tuo ksenotransplantanto liejamo su GLV-1 h153 (4b paveikslas). Skaičius 4 Green fluorescuojančio baltymo (GFP) išraiška MKN-74 in vitro ir in vivo. A. MKN-74 ląstelių buvo užsikrėtę GLV-1 h153 ir parodė tvirtą žalią fluorescenciją 7 dieną, o tai rodo veiksmingą infekciją (priartinimas 100 x). B. MKN-74 šoninė navikai buvo gydomi 2 × 106 virusinių dalelių GLV-1 h153. Žalioji fluorescencija naviko su Maestro skaitytuvas rodo sėkmingą infekcija ir naviko konkrečių lokalizacijos GLV-1 h153.
Veikimas h
NIS išraiškos įamžintas 99mTc-pertechnetatui scintigrafija 124I PET
Visi MKN-74 ksenoimplantai švirkščiamas su GLV-1 h153 parodė lokalizuota kaupimosi 99mTc radioaktyvumo krašte auglių, o ne radioaktyvumas kumuliacija kontrolės navikų (5a pav.) GLV-1 h153 užsikrėtę MKN-74 augliai taip pat palengvino 124I radioaktyvaus jodo pasisavinimą ir leido vaizdavimo per PET (5b pav), o PBS-švirkščiamas navikai negalėjo būti matomos. 5 pav atominės vaizdo gavimas GLV-1 h153 infekuotų MKN-74 audiniuose,. A. 99mTc pertechnetatui skenavimas buvo atlikta 48 valandų po užsikrėtimo ir po 3 valandų radioaktyvų administracija. Navikų GLV-1 h153 virusas yra aiškiai vizualizuoti (rodyklę). Skrandžio ir skydliaukės yra vertinama dėl gimtosios išraiška NIS, ir šlapimo pūslės matyti iš išsiskyrimą iš radioaktyviojo. B. Ašinis, Karūna ir sagitalinėje peržiūros, kurių 124I PET vaizdo 48 valandą po GLV-1 h153 injekcijos rodo sustiprintas signalas GLV-1 h153 infekuotų MKN-74 navikų (rodyklės kryptimi).
Diskusijos
Skrandžio vėžys yra ketvirtoji dažniausia piktybinių navikų ir antra dažniausia vėžio susijusi mirtis visame pasaulyje [1, 14]. Pasikartojimas arba tolima metastazės yra vienas iš labiausiai paplitusių sutrikimų, o dažnai mirties [15] priežastis. O chemoterapija yra naudinga adjuvantas terapija, lyginant su vieno chirurginio gydymo, jo terapinis potencialą riboja [16]. Dauguma skrandžio vėžio yra atsparūs šiuo metu turimų chemoterapijos. Todėl naujų terapinių agentų, reikia gerinti rezultatus skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie nereaguoja į gydymą įprastiniais vaistiniais preparatais. Oncolytic virusinė terapija yra perspektyvi požiūris į vėžio gydymo, kuris priklauso nuo virusų gebėjimo užkrėsti, replikuotis per, ir Łyse ląstelės-šeimininkės, [17, 18]. Šiame tyrime mes apibūdino citotoksinis poveikis GLV-1 h153, romanas rekombinantinis VACV nešdami h
NIS geno, skrandžio vėžio ląsteles in vitro
. Mes taip pat parodė, kad GLV-1 h153 užsikrėtę skrandžio vėžio ksenoimplantai išreiškė veikiančią h
NIS baltymo leido neinvaziniai naviko ir taip pat vaizdo efektyviai naviko regresija in vivo
.
Virusų įvairovė turi parodyta oncolytic savybes, tarp jų adenovirusinė, herpes simplex virusas, Niukaslio ligos viruso, vezikulinio stomatito viruso, ir reoviruso [17]. Tarp iš oncolytic virusinių agentų įvairovė, karvių raupų virusas turi keletą privalumų. VACV tik atkartoja citoplazmoje nenaudojant šeimininko DNR sintezė technika, tokiu būdu sumažinant integracijos viruso genomo pavojus, kad į priimančiosios genomo [10]. Daug užsienio DNR (iki 25 kB) gali būti įtrauktas be žymiai sumažinti viruso replikacija efektyvumą [19]. Be to, raupų buvo įrodyta, kad turėti gerą saugumo profilis buvo istoriškai skiriamas milijonų per raupų vakcinacijos. Tai taip pat rodo, veiksmingą replikaciją ir platų šeimininko ląstelė tropisms [10]. Keli ikiklinikiniai tyrimai parodė, kad sisteminės injekcijos rekombinantinio VACV į audiniuose, lėmė didelis virusų titras tik navikų, nurodant naviko konkrečių kolonizaciją [11, 20, 21]. Yra nedidelis rūpestis, kad pacientai, kurie gavo skiepus nuo raupų praeityje turėti neutralizuojančių antikūnų prieš virusą. Tai potencialiai gali sukelti sutrikusi gydymo efektyvumą. Tačiau kraujyje, papildo vaidina svarbesnį vaidmenį neutralizuojant VACV nei neutralizuojančių antikūnų. Todėl mes prognozuojame, kad neutralizuojančių antikūnų buvimas pacientams neturėtų trukdyti VACV gydymą; Tačiau gali reikėti didesnės vaisto dozę.
genetinės inžinerijos VACVs parodė veiksmingas gydant įvairių žmogaus vėžio [12] gydymą. GLV-1 h168 jau įrodyta, kad veiksmingas diagnostikos ir gydymo vektorius keliose žmogaus navikų modelių, įskaitant krūties naviko, mezoteliomą, kasos vėžio ir suragėjusių ląstelių karcinoma [11] h pervežimas NIS baltymų, kurie yra neatskiriama membrana glikoproteinas, 13 spėjamo transmembranines srityse, aktyviai veža tiek Na + ir aš - jonai visoje ląstelių membranos [22]. Veikia val
NIS baltymų gali įsisavinti keletą komerciškai laisvų radijo nukleotidai, įskaitant 123I, 124I, 125I, 131I, 99mTc ir 188Re [22, 23 ]. Šiame tyrime GLV-1 h153 tarpininkaujant išraiška h pervežimas NIS baltymų užkrėstų MKN-74 audiniuose, lėmė lokalizuota 99mTc ir 124I radioaktyvų įsisavinimą. Mūsų rezultatai rodo, kad val
NNV genų ekspresijos per virusinis vektorius gali būti naudojamas kaip neinvazinė vaizdo modalumo stebėti naviko progresavimas ir gydymo poveikį.
Vieną naviką injekcijos GLV-1 h153 į MKN-74 audiniuose, eksponuojami lokalizuota naviką GFP ir h
NIS išraiška. Be to, ten buvo ne virusinės plitimo įrodymų, kitų organų, remiantis GFP vaizdavimo, 99mTc scintigrafija ir 124I PET, nurodant navikas konkrečių virusinė infekcija ir aktyvumo. Mes taip pat parodė, kad GLV-1 h153 yra veiksmingas ir saugus gydant skrandžio navikų pelių ksenografiniuose modelį. GLV-1 h153-tiriamoji grupė buvo nuolat tęsiamas tol, kol 35 dieną ir nebuvo navikas atauga (duomenys nėra rodomi nuo 35 28 dienos ir). Kontrolinė grupė turėjo būti paaukotas pagal mūsų patvirtintų gyvūnų Protokolo dėl dieną 28. Išreikšti H
NIS geno kitaip ne hNIS ekspresija audinio yra įdomu. Tai galėtų pasinaudoti gerai nustatyta radioaktyvaus jodo vaizdo ir terapijos kitose ne skydliaukės kilęs vėžio. Keletas tyrimų parodė daug žadančių rezultatų per navikų naudojant radioaktyvaus jodo gydymo per naviko konkrečių raiškos val pervežimas NIS geno, įskaitant meduliarinė skydliaukės karcinoma [24], prostatos vėžio [25], storosios žarnos vėžio [26], ir krūties įvairovė Vėžys [27]. Naviko konkrečių val
NNV išraiška naudojant GLV-1 h153 gali padidinti lokalizuota radioaktyvaus jodo kaupimosi ir sumažinti nespecifinį įsisavinimui kitus organus. Remiantis mūsų gerų rezultatų, tai būtų labai klinikinės svarbos įvertinti kombinuotas gydymas GLV-1 h153 ir radioaktyvaus jodo poveikis.
Išvada
Šio tyrimo metu demonstruoja romaną oncolytic VACV inžinerijos išreikšti h
NNV gali veiksmingai užkrėsti, atkartoti, kaip ir sukelti regresiją skrandžio vėžio pelių ksenografiniuose modelį. GFP išraiška gali tarnauti kaip virusinės užkrečiamumo pakaitalas. In vivo
, GLV-1 h153 infekuotų ląstelių gali būti lengvai Nuimti su 99mTc scintigrafija 124I PET vaizdų. Šie duomenys toliau teikti paramą būsimam tyrimui GLV-1 h153 kaip gydymo agento ir neinvazinė vaizdo įrankis klinikinių parametrų
Santrumpos
VACV:.
Raupų ​​virusas


hNIS: Rīga, žmogaus natrio jodidas symporter
ATCC: Rīga, Amerikietiško tipo kultūra kolekcija
RUC-GFP: Rīga, Renilla
liuciferazės-Aequorea
žalia fluorescencinio baltymo
LDH: Rīga, laktato dehidrogenazės ()
IACUC: Viesbutis The Institucinis gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas
MSKCC: Rīga, memorialinis Sloan-Kettering Cancer Center "
PFUs: Rīga, plokšteles formuojantys vienetai
MOI: Rīga, įvairovė infekcijos
PET: Rīga, pozitronų emisijos tomografijos

IG:
regiono interesų
rTfr: Rīga, Reverse įdėta žmogaus transferino receptorių
SPECT:.
vieno fotono emisijos kompiuterinės tomografijos
deklaracijų
Padėka
Techninės paslaugos, kurias teikia MSKCC Mažos gyvūnų vaizdo Core priemonę, iš dalies remiamą NIH smulkaus -Gyvūnų Vaizdo tyrimų programa (SAIRP) Subsidija Nėra R24 CA83084 ir NIH centras Grantas Nėra P30 CA08748, yra dėkinga pripažino.
autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų , 13046_2013_740_MOESM1_ESM.tiff Autorių originalus failas 1 pav 13046_2013_740_MOESM2_ESM.tiff Autorių originalaus failo 2 pav 13046_2013_740_MOESM3_ESM.tiff Autorių originalios 3 pav 13046_2013_740_MOESM4_ESM.tiff Autorių originalaus failo 4 pav 13046_2013_740_MOESM5_ESM.tiff Autorių originalaus failo 5 paveiksle konkuruojančių interesų
nėra konkuruojančios finansiniai interesai egzistuoja Kyong-Hwa Jun Tae-Jin Song Sepideh Gholami, Joyce Au, Dana Haddad Carson Jozuei, Chun-Hao Chen Kelly Mojica Pat Zanzonico ir Yuman Fong. Nanhai G. Chen Qian Zhang ir Aladar A. Szalay yra susijęs su Genelux Corporation.
Autorių įmokos
SG padeda su rašymo iki rankraštį. TS padeda in vivo
eksperimentų ir prisidėjo prie studijų dizainas. JA prisidėjo prie citotoksiškumo tyrimo. DH prisidėjo prie vivo pervežimas PET ir SPECT. JC prisidėjo prie fluorescencinio vaizdų. CK prisidėjo prie statistinės analizės duomenis. KM prisidėjo prie viruso replikacija tyrimu. PZ prisidėjo prie studijų dizainas ir radioaktyviųjų vaizdo eksperimentus. NC ir QZ prisidėjo prie virusinės sekos ir statyti. AS "ir" YF prisidėjo prie studijų dizainas ir užbaigimo rankraščio. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Klinikos ypatumai ir gydymo strategijos pradžioje skrandžio vėžiu: retrospektyvinė grupės tyrimas
• Atrankinis arilo angliavandenilių receptorių moduliatorius 3,3-Diindolylmethane slopina skrandžio vėžio ląstelių augimą