En roman onkolytiske viral behandling og avbildningsteknikk for magekreft ved hjelp av en genmodifisert vacciniavirus bære den menneskelige natriumjodid symporter

En roman onkolytiske viral behandling og avbildningsteknikk for magekreft ved hjelp av en genmodifisert vacciniavirus bære den menneskelige natriumjodid symporter
Abstract
Bakgrunn
Gastric kreftformer har dårlig total overlevelse til tross for siste fremskritt i tidlig deteksjonsmetoder, endoskopisk reseksjon teknikker, og kjemoterapi. Vaccinia viral terapi har hatt lovende terapeutisk potensial for ulike kreftformer og har en stor sikkerhetsprofil. Vi undersøkte den terapeutiske effekten av en roman genetisk konstruert vaccinia virus som bærer den menneskelige natriumjodid symporter (h
NIS) genet, GLV-en h153, på mage kreft og dets potensial verktøy for bildebehandling med 99mTc perteknetat scintigrafi og 124I positronemisjonstomografi (PET).
Metoder
GLV-en h153 ble testet mot fem menneskelige mage kreft cellelinjer ved hjelp av cytotoksisitet og standard virale plakk analyser. In vivo
, ble subkutane flanke svulster generert på hårløse mus med menneskelige mage kreftceller, MKN-74. Svulster ble deretter injisert med enten GLV-1 h153 eller PBS og etterfulgt av tumorvekst. 99mTc perteknetat scintigrafi og resultater
GFP uttrykk 124I microPET bildebehandling ble utført.
, Et surrogat for viral smittsomhet, bekreftet virusinfeksjon av 24 timer. Ved en multiplisitet av infeksjon (MOI) på 1, GLV-1 h153 oppnådd > 90% cytotoksisitet i MNK-74, OCUM-2MD3, og AGS løpet av 9 dager, og ved 70% cytotoksisitet i MNK- 45 og TMK-1. In vivo
, GLV-en h153 var effektive i behandling av transplantater (p < 0,001) etter 2 ukers behandling. GLV-en h153-infiserte tumorer ble lett fotografert av 99mTc perteknetat scintigrafi og 124I microPET bildebehandling 2 dager etter behandling.
Konklusjoner
GLV-en h153 er en effektiv onkolytiske virus som uttrykker h
NIS protein som effektivt kan regress mage svulster og la dype vev imaging. Disse dataene oppfordrer dens fortsatte etterforskning i kliniske settinger.
Nøkkelord
Onkolytiske viral behandling GLV-en h153 Magekreft Menneskelig natriumjodid symporter (h
NIS) Bakgrunn
Magekreft er en av de mest utbredte ondartet tumorer, spesielt i Asia [1]. Selv tidlig deteksjonsmetoder, utvikling av endoskopisk eller kirurgisk fjerning og mer effektive chemotherapies har forbedret total overlevelse hos pasienter med magekreft, er prognosen for pasienter med avansert magekreft fortsatt dårlig [2-4]. De fleste konvensjonelle kjemoterapi behandlinger har vist moderat effektivitet. En mulig forklaring på motstanden av magekreft til konvensjonell terapi kan være dets ikke-mottakelighet for apoptose [5]. Imidlertid onkolytiske virusene har stor terapeutisk virkning mot kreftceller som uttrykker høye nivåer av ribonukleotid-reduktase, DNA-reparasjonsenzymer, og er derfor motstandsdyktig mot apoptose [6, 7]. Mange av disse egenskaper som gjør magekreftceller resistente overfor kjemoterapi, gjør dem utsatt for onkolytisk viral terapi. Dermed genterapi ved hjelp onkolytiske virus tilbyr et attraktivt alternativ for behandling av magekreft [8].
Onkolytiske viral behandling har blitt studert over det siste århundret og vist suksess i preklinisk og klinisk testing som en roman kreftbehandling modalitet [9 ]. Vaccinia virus (VACV) stammer er spesielt attraktive som potensielle antitumormidler, som de kan inneholde store mengder av fremmede DNA-replikasjon uten å redusere deres effektivitet. Videre har VACV vist en stor sikkerhetsprofil hos mennesker [10-12]. Til slutt, i tillegg til dets terapeutiske potensial, VACV har også blitt brukt som en ikke-invasiv avbildningsteknikk som tillater klinikere å spore terapeutisk genavlevering i legemet [10, 13].
I denne publikasjonen, undersøkte vi det terapeutiske potensialet av en roman VACV uttrykker det humane natriumjodid symporter (h
NIS), GLV-en h153, mot magekreft in vitro Hotell og in vivo
, og testet sitt potensial som en avbildningsverktøy.
Materiale og metode
celle~~POS=TRUNC linjer~~POS=HEADCOMP
human gastrisk kreft AGS-celler (en gastrisk adenokarsinom epitelial cellelinje) ble oppnådd fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA) og ble dyrket i Hams F-12 K-Medium. Menneskelig OCUM-2MD3 celler var en gave fra Dr. Masakazu Yashiro (Osaka City University Medical School, Japan) og ble dyrket i Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM). MKN-74 og TMK-1 celler ble gitt av Dr. T. Suzuki (Fukushima Medical College, Japan) og ble dyrket i Roswell Park Memorial Institute (RPMI). MKN-45 ble erholdt som en gave fra Dr. Yutaka Yonemura (Kanazawa University, Japan) og ble opprettholdt i RPMI. Afrikansk grønn ape nyre fibroblast (Cercopithecus aethiops
; CV-1) celler brukes for virale plakk analysene ble kjøpt fra ATCC (Manassas, Virginia) og dyrket i Minimum Essential Medium (MEM). Alle media ble supplert med 10% FBS, 1% penicillin og streptomycin 1%.
Virus
GLV-1 h153 er en replikasjonskompetente, rekombinant vaccinia virus avledet fra dens moderstamme, GLV-1 H68, via homolog rekombinasjon. Den inneholder fire innsatte kassetter som koder for Renilla Aequorea
luciferase- grønt fluorescerende protein (GFP RUC-) fusjonsprotein, en human transferrin reseptor omvendt innsatt (rTfr
), β-galaktosidase, og human natriumjodid symporter (h
NIS) i F14.5
, J2R product: (koding tymidin kinase), og A56R plakater (koding hemagglutinin) loci av virus genome.GLV-en h153 ble gitt av Genelux Corporation (R & D anlegget i San Diego, CA, USA).
Cytotoksisitet assay
4 x 10 4 celler pr brønn av hver cellelinje ble sådd ut i 12-brønners plater og inkubert i en 5% CO 2 fuktet inkubator ved 37 ° C over natten. GLV-1 h153 ble tilsatt til hver brønn ved å variere infeksjonsmultiplisitet (måneder) på 0,01, 0,1, og 1,0. Viral cytotoksisitet ble testet ved bruk av en laktat-dehydrogenase (LDH) assay daglig. Cellene ble vasket med PBS en gang, og deretter lysert med 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Den intracellulære LDH meldingen etter lyse ble senere målt med CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) på et spektrofotometer (EL321e, Biosystems Tek Instruments) ved 490 nm. Resultater er uttrykt som prosentandelen av overlevende celler, som ble beregnet som LDH-frigivelse av infiserte prøvene sammenlignet med uinfisert kontroll. Alle betingelser ble testet i triplikat.
Viral replikasjon assay
Supernatanter fra hver infiserte vel ble samlet daglig og umiddelbart frosset ved -80 ° C. Serielle fortynninger av alle supernatantprøver ble gjort for å utføre standard viral plakk-analyser på konfluente CV-1-celler. Alle prøvene ble målt i tre paralleller.
In vivo
murine flanke tumor terapi
Alle dyreforsøk ble utført under godkjente protokoller og i samsvar med etiske retningslinjer Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved Memorial Sloan -Kettering Cancer Center (MSKCC). MKN-74 xenografter ble etablert i 6- til 8-ukers gammel kvinne naken mus (NCI: Hsd: atymiske nakne-nu, Harlan) etter subkutan injeksjon 5 × 10 6 MKN-74 celler i høyre flanke. Tumorvekst ble spilt to ganger i uken ved hjelp av en digital kaliber og tumor volum ble beregnet ved hjelp av ligningen, en
× b
2 × 0,5, der en
og b
er den største og minste diametre, henholdsvis. Når tumorer nådde en diameter på ca. 6-8 mm i 10 dager, ble dyrene gruppert i kontroll- og behandlingsgrupper med likeverdige tumorstørrelser. En enkelt dose på 2 x 10 6 plaque-dannende enheter (PFUs) av GLV-1 h153 i 100 ul PBS eller 100 ul av PBS som kontroll ble injisert intratumorally til hver betegnet tumor. Dyrene ble observert daglig for tegn på toksisitet, og ofret når deres tumorer nådde en diameter på ca 15 mm.
Fluorescent imaging (Maestro)
In vivo
GFP bildene ble innhentet ved hjelp SFI Maestro system (Cambridge forskning og instrumentering, Woburn, MA) ved hjelp av egnede filtre (eksitasjon = 445-490 nm, emisjon = 515 nm lange pass filter, oppkjøp innstillinger = 500-720 i 10 nm). Etter at hvert bilde ble oppnådd, var det spektralt ublandet å fjerne bakgrunnsfluorescens. Bilder ble kvantifisert ved hjelp av regionen av interesse (ROI) analyse programvare som følger med Maestro-system.
In vivo
SPECT SPECT
Fem MKN-74 xenografter ble intratumorally injisert med 2 × 10 7 PFUs GLV-1 h153 og 5 med PBS som kontroller. To dager etter infeksjon, ble 200 uCi 99mTc pertechnetat administrert via haleveneinjeksjon. 99mTc perteknetat bildene ble tatt over 10 min, 3 timer etter radiotracer administrasjon. Imaging ble utført ved anvendelse av dual-detektoren gammakamera sub-system av X-SPECT small-animal SPECT-CT-systemet (Gamma Medica, Northridge, CA). X-SPECT γ-kamerasystem ble kalibrert ved å avbilde et mus-størrelse (30 ml) sylinder fylt med en målt konsentrasjon (MBq /ml) av 99mTc ved hjelp av et photopeak energivindu av 126-154 keV og lav-energi høyoppløselig kollimasjon. De resulterende 99mTc bildene ble eksportert til Interfile og deretter importert inn i ASIPro (Siemens Pre-kliniske Solutions, Knoxville, TN) bildebehandling miljø. Ved avkastningsanalyse, ble et system kalibreringsfaktor (i kpm /pixel per MBq /ml) utledet. Animal bilder ble også eksportert til Interfile og deretter importert til ASIPro og parametriseres i form av forfallet korrigerte prosent injisert dose per gram (% ID /g) basert på foregående kalibreringsfaktoren, administrert aktivitet, tid etter administrering av bildediagnostikk, og bildet varighet.
In vivo
PET avbildning
Tre MKN-74 xenografter ble injisert intratumorally med 2 × 10 7 PFU GLV-en h153 og to med PBS. To dager etter viral injeksjon, 300 uCi 124I ble administrert via halevenen injeksjon. En time etter radiotracer administrasjon, ble 3-dimensjonale liste rende data ervervet ved hjelp av et energivindu 350-700 keV, og et sammentreff timing vinduet 6 nanosekunder. Imaging ble utført ved hjelp av en Focus 120 microPET dedikert lite dyr PET skanner (Concorde Microsystems Inc, Knoxville, TN). Disse dataene ble sortert i to-dimensjonale histogrammer av Fourier rebinning. Telleratene i de rekonstruerte bilder ble omdannet til aktivitetskonsentrasjon (% ID /g) ved anvendelse av et system kalibreringsfaktor (MBq /ml pr cps /voxel) avledet fra avbildning av en mus størrelse fantom fylt med en jevn, vandig oppløsning av 18F. Bildeanalyse ble utført ved hjelp ASIPro
statistisk analyse
Vesentlige forskjeller mellom gruppene ble bestemt ved hjelp av Student t
test (Excel 2007, Microsoft, Redmond, WA, USA).. En p-verdi < 0,05 ble betraktet som signifikant.
Resultater
Cvtotoksisitetsmålinq
Alle fem menneskelige mage kreft cellelinjer ble utsatt for oncolysis av GLV-en h153 (figur 1). Den MKN-74, OCUM-2MD3, og AGS cellelinjer var mer følsomme for viral lyse forhold til MKN-45 og TMK-1 celler. Alle cellelinjer viste en doseavhengig respons, med større og raskere celledrap ved høyere Mois. I MKN-74, OCUM-2MD3, og AGS cellelinjer, ble mer enn 90% av cellene drept ved dag 9 ved en MOI på 1. MKN-74 cellelinjen var spesielt utsatt for viral oncolysis, med mer enn 77% celledrap ved dag 9 på det laveste MOI på 0,01. Figur 1 Cytotoksisitet av GLV-1 h153 mot 5 humane magecancercellelinjer in vitro. Alle cellelinjer opprettholdt signifikant cytotoksisitet ved en MOI på 1, tre cellelinjer var følsomme ved en MOI på 0.1, og to cellelinjer viste en utsøkt følsomhet for GLV-1 h153 selv ved den laveste MOI på 0,01.
Viral replikasjon
Standard virale plakk analyser demonstrerte effektiv virusreplikasjon av GLV-en h153 i alle magekreftcellelinjer ved en MOI av 1 (figur 2). MKN-74 viste den høyeste viral titer med en topp titer på 1,06 × 10 6 PFUs per brønn, en 26-dobling fra første dose, etter dag 7. Figur 2 In vitro kvantifisering av viral replikasjon av GLV-en h153 i humane mage kreft cellelinjer. Virus ble samlet opp fra brønnene til celler som er infisert ved en MOI på 1. viral plakk-analyser viste effektiv virusreplikasjon i alle 5 cellelinjer, nådde den høyeste virusformering (1,06 x 106 viral plaque-dannende enheter ved dag 7) i cellelinjen , MKN-74, som representerer en 26-dobling fra sin første dose.
in vivo
murine xenografter behandling med GLV-en h153
å etablere cytolytiske effekten av GLV-en h153 in vivo
, mus med MKN-74 xenotransplantater ble behandlet med en enkelt dose av intratumoral injeksjon av GLV-1 h153 eller PBS. Behandlet svulster viste vedvarende /kontinuerlig tumor regresjon over en fire ukers periode. Ved dag 28, det midlere tumorvolum i behandlingsgruppen var 221,6 mm 3 (figur 3). Ett dyr viste en fullstendig tumor regresjon. I motsetning til alle de kontrolltumorer fortsatte å vokse med et midlere volum på 1073.2 mm 3 ved dag 28 (t
-test, sammenligning av behandlingsgruppen og kontrollgruppen på dag 28, p < 0,001). Det var ingen signifikant endring i kroppsvekt i hver gruppe, og ble ikke observert noen sykelighet eller dødelighet forbundet med GLV-1 h153 behandling. Figur 3 GLV-1 h153 undertrykker MKN-74 tumorvekst. 2 × 106 viruspartikler av GLV-en h153 eller PBS ble injisert intratumorally inn nakne mus med subkutane flanke svulster i MKN-74. Hemming av tumorvekst som følge av behandling med GLV-en h153 startet etter dag 15 (p < 0,001). Tumorvolumer vist representerer middelvolumer fra 5 mus i hver av behandlingsgruppene.
In vitro og in vivo

GFP uttrykk
GFP-ekspresjon ble overvåket ved fluorescensmikroskopi 1, 3, 5, 7, og 9 dager etter virusinfeksjon ved en MOI på 1,0. De fleste MKN-74 celler ble infisert og uttrykt GFP dag 7 (Figur 4A). In vivo, kan
GFP signal detekteres bare ved xenograft injisert med GLV-1 h153 (figur 4B). Figur 4 grønt fluorescerende protein (GFP) ekspresjon av MKN-74 in vitro og in vivo. A. MKN-74 celler ble infisert med GLV-en h153 og viste sterk grønn fluorescens etter dag 7, noe som viser effektiv infeksjon (forstørrelse 100 ×). B. MKN-74 flanke tumorer ble behandlet med 2 x 106 virale partikler av GLV-1 h153. Grønn fluorescens av svulst med Maestro skanneren indikerer vellykket infeksjon og tumor-spesifikke lokalisering av GLV-en h153.
Fungerende h
NIS uttrykk fotografert av 99mTc-pertechnetat scintigrafi og 124I PET
alle MKN-74 xenografter injisert med GLV-en h153 viste lokalisert akkumulering av 99mTc radioaktivitet i flanke svulster mens ingen radioaktivitet kumulasjon i kontroll tumorer (figur 5A). GLV-en h153-infisert MKN-74 svulster også tilrettelagt 124I radiojodopptak og lov for bildebehandling via PET (figur 5B), mens PBS-injiserte svulster ikke kunne bli visualisert. Figur 5 Nuclear avbildning av GLV-1 h153-infiserte MKN-74 xenografter. A. 99mTc perteknetat skanning ble utført 48 timer etter infeksjon og 3 timer etter radiotracer administrasjon. Tumorer behandlet med GLV-1 h153 virus er tydelig visualisert (pil). Magen og thyroid er sett på grunn av naturlig ekspresjon av NIS, og blæren er sett fra utskillelse av radiomerkings. B. Axial, koronale og sagittale visninger av en 124I PET bilde 48 timers etter GLV-en h153 injeksjon viser forbedret signal i GLV-1 h153-infiserte MKN-74 svulster (pil).
Diskusjon
Magekreft er den fjerde vanligste kreftformen og den nest hyppigste årsaken til kreft-dødsfall på verdensbasis [1, 14]. Tilbakefall eller fjern metastase er en av de mest vanlige komplikasjonene og ofte dødsårsak [15]. Mens kjemoterapi er et nyttig adjuvant behandling i forhold til kirurgisk behandling alene, er dens terapeutiske potensialet begrenset [16]. De fleste mage kreft er motstandsdyktig mot tilgjengelige kjemoterapiregimer. Derfor er nye terapeutiske midler som trengs for å forbedre resultatene for mage kreftpasienter som ikke responderer på konvensjonell terapi. Onkolytisk viral terapi er en lovende tilnærming til kreftbehandling som avhenger av evnen av virus til å infisere, replikere innenfor, og lyserer en vertscelle [17, 18]. I denne studien, beskrev vi de cytotoksiske effektene av GLV-1 h153, en ny rekombinant VACV bærer h
NIS-genet, på magekreftceller in vitro
. Vi videre vist at GLV-1 h153-infiserte magekreft xenografter uttrykt fungerende h
NIS protein som er tillatt for ikke-invasiv bildediagnostikk av svulsten og også effektiv tumor regresjon in vivo
., En rekke virus har vist onkolytiske egenskaper inkludert adenovirus, herpes simplex virus, Newcastle disease-virus, vesikulært stomatitis virus, reovirus og [17]. Blant et utvalg av onkolytiske virale midler, har vacciniavirus flere fordeler. VACV utelukkende replikerer i cytoplasma uten å bruke vertens DNA-syntesemaskiner, og dermed redusere risikoen for integrasjonen av virusgenomet i vertsgenomet [10]. En stor mengde av fremmed DNA (opp til 25 kb) kan inkorporeres uten i betydelig grad å redusere den virale replikasjonseffektiviteten [19]. Videre har vaccinia vist seg å ha en god sikkerhetsprofil som det har vært historisk gitt til flere millioner løpet av kopper vaksinasjon. Det demonstrerer også effektiv replikering og et bredt spekter av vertscelle tropisms [10]. Flere prekliniske studier har vist at systemisk injeksjon av rekombinant VACV inn i xenografter resulterte i høye virale titere i bare tumorer, noe som indikerer tumor-spesifikke kolonisering [11, 20, 21]. Det er en liten bekymring for at pasienter som har fått kopper vaksinasjon i det siste har nøytraliserende antistoff mot viruset. Dette kan potensielt føre til nedsatt behandlingseffekt. Men i blodet, spiller komplement en viktigere rolle i å inaktivere VACV enn nøytraliserende antistoffer. Vi har derfor forutsi at nærværet av nøytraliserende antistoffer hos pasienter som ikke bør hindre VACV behandling; imidlertid kan det kreves en høyere behandlingsdosen.
Genetisk modifiserte VACVs har vist effekt i behandlingen av et bredt spekter av humane cancere [12]. GLV-1 h168 har allerede vist seg å være en effektiv diagnostisk og terapeutisk vektor i flere humane tumormodeller, inkludert brystsvulst, mesothelioma, bukspyttkjertel kreft, og platecelle-karsinom [11] h
NIS-protein, noe som er en iboende membran glykoprotein med 13 antatte trans domener, transporterer aktivt både Na + og jeg - ioner over cellemembranen [22]. Fungerende h
NIS protein kan opptak flere kommersielt tilgjengelige radio nukleotider, inkludert 123I, 124I, 125I, 131I, 99mTc og 188Re [22, 23 ]. I denne studien, GLV-1 h153-mediert ekspresjon av h
NIS protein i infiserte MKN-74-xenografter resulterte i en lokalisert 99mTc og 124I radiotracer opptak. Våre resultater tyder på at h
NIS genekspresjon via viral vektor kan brukes som en ikke-invasiv avbildning modalitet for å overvåke tumorprogresjon og behandlingseffekter., En enkelt intratumoral injeksjon av GLV-1 h153 i MKN-74 xenotransplantater viste lokaliserte intratumoral GFP og h
NIS uttrykk. Dessuten var det ingen tegn på viral spredning til andre organer basert på GFP bildebehandling, 99mTc scintigrafi, og 124I PET, som indikerer tumor-spesifikke virusinfeksjon og aktivitet. Vi har også vist at GLV-en h153 er effektivt og trygt i behandling av mage svulster i en murine xenograft modell. Den GLV-1 h153-behandlede gruppe ble kontinuerlig fulgt inntil dag 35, og det var ingen tumorveksten (data ikke vist mellom dag 28 og 35). Kontrollgruppen måtte ofres i henhold til vår godkjent dyr protokollen på dag 28. uttrykke h
NIS-genet i en ellers ikke-hNIS-uttrykke vev er spennende. Det kan potensielt gjøre bruk av den veletablerte radiojod og terapi i andre ikke-thyroid stammer kreft. Flere studier har vist lovende resultater i en rekke av tumorer ved hjelp av radiojod behandling via tumorspesifikk ekspresjon av h
NIS-gen, som blant annet medullær thyroid karsinom [24], prostatakreft [25], tykktarmskreft [26], og bryst kreft [27]. Tumorspesifikt h
NIS-ekspresjon ved hjelp av GLV-1 h153 kan maksimere lokalisert radiojod-akkumulering og minimere ikke-spesifikt opptak i andre organer. Basert på våre lovende resultater, vil det være av vesentlig klinisk betydning å evaluere effekten av kombinasjonsbehandling av GLV-en h153 og radiojod.
Konklusjon
Denne studien viser en roman onkolytiske VACV konstruert for å uttrykke h
NIS effektivt kan infisere, replikere innenfor, og føre til regresjon av magekreft i en murine xenograft modell. GFP uttrykk kan tjene som et surrogat for viral infektivitet. In vivo
, GLV-en h153 infiserte celler lett kan avbildes med 99mTc scintigrafi og 124I PET billeddiagnostikk. Disse dataene gir ytterligere støtte for fremtidig etterforskning av GLV-en h153 som behandlingsmiddel og en ikke-invasiv bildediagnostikk verktøy i kliniske settinger
Forkortelser
VACV.
Vacciniavirus
<.no> hNIS:
Menneskelig natriumjodid symporter
ATCC:
American Type Culture Collection
RUC-GFP:
Renilla
luciferase-Aequorea
grønt fluorescerende protein
LDH:
laktat dehydrogenase ()
IACUC:
Institutional Animal Care og bruk komité
MSKCC:
Memorial Sloan-Kettering Cancer Center
PFUs:
Plaque-dannende enheter
MOI:
mangfaldet av infeksjon
PET:
Positronemisjonstomografi

ROI:
Region av interesse
rTfr:
Omvendt satt human transferrin reseptor
SPECT.
SPECT
Erklæringer
Takk
Tekniske tjenester levert av MSKCC Small-Animal Imaging Core Facility, støttet delvis av NIH Small -Animal Imaging Research Program (SAIRP) Grant Ingen R24 CA83084 og NIH Senter Grant Ingen P30 CA08748, er takknemlig erkjent.
forfatternes opprinnelige innsendte filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes originale innsendte filer for bilder . 13046_2013_740_MOESM1_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 1 13046_2013_740_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 13046_2013_740_MOESM3_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 3 13046_2013_740_MOESM4_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 4 13046_2013_740_MOESM5_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 5 konkurrerende interesser
Ingen konkurrerende økonomiske interesser eksisterer for Kyong-Hwa Jun, Tae-Jin Song, Sepideh Gholami, Joyce Au, Dana Haddad, Carson Joshua, Chun-Hao Chen, Kelly Mojica, Pat Zanzonico, og Yuman Fong. Nanhai G. Chen, Qian Zhang, og Aladar A. Szalay er tilknyttet Genelux Corporation.
Forfatternes bidrag
SG bistått med skrive opp av manuskriptet. TS bistått i in vivo
eksperimenter og bidratt til studien design. JA bidro til cytotoksisitet analysen. DH bidratt til in vivo
PET og SPECT. JC bidratt til fluorescerende bildebehandling. CC bidratt til statistisk analyse av dataene. KM bidro til den virale replikasjonsanalysen. PZ bidratt til studiedesign og radioaktive bildebehandling eksperimenter. NC og QZ bidratt til viral sekvens og konstruksjon. AS og YF bidratt til studien design og gjennomføring av manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Clinicopathological egenskaper og behandlingsstrategier i tidlig magekreft: en retrospektiv kohort study
• En selektiv aryl hydrokarbon reseptor modulator 3,3-Diindolylmethane hemmer magekreft celle growth