En hidtil ukendt onkolytisk viral behandling og billeddannelse teknik til gastrisk cancer ved anvendelse af en genetisk manipuleret vacciniavirus der bærer det humane natriumiodid symporter

En hidtil ukendt onkolytisk viral behandling og billeddannelse teknik til gastrisk cancer ved anvendelse af en genetisk manipuleret vacciniavirus der bærer det humane natriumiodid symporter
Abstract
Baggrund
Gastric kræftformer har dårlig samlet overlevelse trods af de seneste fremskridt inden for tidlig påvisning metoder, endoskopiske resektion teknikker og kemoterapi behandlinger. Vaccinia viral terapi har haft lovende terapeutisk potentiale for forskellige kræftformer og har en stor sikkerhedsprofil. Vi undersøgte den terapeutiske effekt af en roman genetisk manipuleret vacciniavirus bærer den menneskelige natriumjodid symporter (h
NIS) gen, GLV-1 h153, på gastrisk kræft og dens potentielle nytte til billeddannelse med 99mTc pertechnetat scintigrafi og 124I positronemissionstomografi (PET).
Metoder
GLV-1 h153 blev testet mod fem menneskelige gastrisk kræft cellelinjer hjælp cytotoksicitet og standard virale plakanalyser. In vivo
blev subkutane flank tumorer frembragt i nøgne mus med humane gastriske cancerceller, MKN-74. Tumorer blev efterfølgende injiceret med enten GLV-1 h153 eller PBS og fulgt i tumorvækst. 99mTc pertechnetat scintigrafi og 124I microPET billeddannelse blev udført.
Resultater
GFP udtryk, et surrogat for viral infektivitet, bekræftede virusinfektion med 24 timer. Ved en infektionsmultiplicitet (MOI) på 1, GLV-1 h153 opnås > 90% cytotoksicitet i MNK-74, OCUM-2MD3, og AGS over 9 dage, og > 70% cytotoksicitet i MNK- 45 og TMK-1. In vivo
, GLV-1 h153 var effektiv til behandling af xenotransplantater (p < 0,001) efter 2 ugers behandling. GLV-1 h153-inficerede tumorer blev let afbildet af 99mTc pertechnetat scintigrafi og 124I microPET billeddannelse 2 dage efter behandling.
Konklusioner Salg GLV-1 h153 er en effektiv onkolytisk virus, der udtrykker h
NIS-protein, som effektivt kan relatere gastriske tumorer og tillade dybtliggende væv billeddannelse. Disse data opmuntrer sin fortsatte undersøgelse i kliniske omgivelser.
Nøgleord
onkolytiske viral behandling GLV-1 h153 mavekræft Menneskelig natriumjodid symporter (h
NIS) Baggrund
mavekræft er en af ​​de mest udbredte maligne tumorer, især i Asien [1]. Selvom tidlig påvisningsmetoder, udvikling af endoskopisk eller kirurgisk resektion, og mere effektive kemoterapier har forbedret samlet overlevelse hos patienter med mavekræft, prognosen for patienter med fremskreden mavekræft er stadig fattige [2-4]. De fleste konventionelle kemoterapibehandlinger har vist moderat effektivitet. En mulig forklaring på modstanden af ​​mavekræft på konventionel behandling kan være sin ikke-følsomhed over for apoptose [5]. Men oncolytiske vira har store terapeutiske virkninger mod cancerceller, der udtrykker høje niveauer af ribonukleotidreduktase, DNA-reparation enzymer, og er således modstandsdygtige over for apoptose [6, 7]. Mange af disse egenskaber, der gør gastriske cancerceller resistente over for kemoterapi, gør dem modtagelige for onkolytisk viral behandling. Således genterapi hjælp onkolytiske virus tilbyder et attraktivt alternativ til behandling af gastrisk kræft [8].
Onkolytiske viral behandling er blevet undersøgt i løbet af det sidste århundrede og vist succes i præklinisk og klinisk afprøvning som en ny kræftbehandling modalitet [9 ]. Vacciniavirus (VACV) stammer er særligt attraktive som potentielle antitumormidler, da de kan inkorporere store mængder af fremmed DNA uden at reducere deres replikation effektivitet. Desuden har VACV vist stor sikkerhedsprofil hos mennesker [10-12]. Endelig foruden sin terapeutiske potentiale, VACV er også blevet anvendt som en ikke-invasiv billeddannelse teknik tillader klinikere at spore terapeutisk genafgivelse i kroppen [10, 13].
I denne publikation, undersøgte vi det terapeutiske potentiale af en ny VACV udtrykker det humane natriumiodid symporter (h
NIS), GLV-1 h153, mod gastriske cancere in vitro
og in vivo
, og afprøvet dens potentiale som et billeddannende værktøj.
Materialer og metoder Salg Cellelinier
Humant gastrisk cancer AGS celler (en gastrisk adenocarcinom epithelial cellelinie) blev opnået fra American Type Culture Collection (ATCC; Manassas, VA) og blev dyrket i Hams F-12 K Medium. Human OCUM-2MD3 celler en gave fra Dr. Masakazu Yashiro (Osaka City University Medical School, Japan) og blev dyrket i Dulbeccos modificerede Eagles medium (DMEM). MKN-74 og TMK-1-celler blev tilvejebragt af Dr. T. Suzuki (Fukushima Medical College, Japan) og blev dyrket i Roswell Park Memorial Institute (RPMI). MKN-45 blev opnået som en gave fra Dr. Yutaka Yonemura (Kanazawa University, Japan) og blev opretholdt i RPMI. Afrikansk grøn abe nyre fibroblast (Cercopithecus aethiops
, CV-1) celler til virale plakanalyser blev købt fra ATCC (Manassas, VA) og dyrket i Minimum Essential Medium (MEM). Alle medier blev suppleret med 10% FBS, 1% penicillin og 1% streptomycin.
Virus
GLV-1 h153 er en replikationskompetent, rekombinant vacciniavirus, der opnås ved parentale stamme, GLV-1 H68, via homolog rekombination. Den indeholder fire indsatte kassetter koder Renilla Aequorea
luciferase- grønt fluorescerende protein (RUC-GFP) fusionsprotein, en omvendt indsat humant transferrin receptor (rTfr
), β-galactosidase og humant natriumiodid symporter (h
NIS) i F14.5
, J2R
(der koder for thymidinkinase), og A56R
(kodende hemagglutinin) loci af det virale genome.GLV-1 h153 blev leveret af Genelux Corporation (R &D facilitet i San Diego, CA, USA).
Cytotoksicitetsassay
4 × 10 4 celler pr brønd af hver cellelinje blev udpladet i 12-brønds plader og inkuberet i en CO 5% 2 befugtet inkubator ved 37 ° C natten over. GLV-1 h153 blev tilsat til hver brønd ved varierende infektionsmultiplicitet (MOI) på 0,01, 0,1 og 1,0. Viral cytotoksicitet blev testet under anvendelse af en lactat dehydrogenase (LDH) assay dagligt. Celler blev vasket med PBS én gang, og derefter lyseret med 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Den intracellulære LDH frigivelse efter lyse blev efterfølgende målt med CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) på et spektrofotometer (EL321e, Bio- Tek Instruments) ved 490 nm. Resultater er udtrykt som procentdelen af ​​overlevende celler, der blev beregnet som LDH frigivelse af inficerede prøver sammenlignet med uinficeret kontrol. Alle betingelser blev testet tredobbelt.
Viral replikation assay Salg Supernatanter fra hver inficeret brønd blev indsamlet dagligt og straks nedfrosset ved -80 ° C. Seriefortyndinger af alle supernatant prøver blev foretaget for at udføre standard virale plaque assays på sammenflydende CV-1-celler. Alle prøver blev målt i tre eksemplarer. Salg In vivo
murine flanke tumor terapi
Alle eksperimenter dyr blev udført under godkendte protokoller og i overensstemmelse med etiske retningslinjer for Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC) på Memorial Sloan -Kettering Cancer center (MSKCC). MKN-74 xenotransplantater blev etableret i 6- til 8-uger gammel kvinde nøgne mus (NCI: Hsd: athymiske nøgne-nu, Harlan) ved subkutan injektion 5 × 10 6 MKN-74 celler i højre flanke. Tumorvækst blev indspillet to gange om ugen ved hjælp af en digital kaliber og tumor volumen blev beregnet ved hjælp af ligningen, en
× b
2 × 0,5, hvor en
og b
er den største og mindste diametre henholdsvis. Når tumorerne nåede en diameter på ca. 6-8 mm i 10 dage blev dyrene grupperet i kontrol- og behandlingsgrupper med rimelige tumorstørrelser. En enkelt dosis på 2 × 10 6 plakdannende enheder (PFU) af GLV-1 h153 i 100 pi PBS eller 100 pi PBS som kontrol blev injiceret intratumoralt for hver udpeget tumor. Dyrene blev observeret dagligt for tegn på toksicitet, og aflivet, når deres tumorer nåede en diameter på ca. 15 mm.
Fluorescent imaging (Maestro) Salg In vivo
GFP billeder blev opnået ved hjælp af CRi Maestro-systemet (Cambridge Forskning og instrumentering, Woburn, MA) ved hjælp af passende filtre (excitation = 445-490 nm, emission = 515 nm lang-pass filter, indstillinger erhvervelse = 500-720 i 10 nm). Efter hvert billede blev opnået, var det spektralt ublandet at fjerne baggrundsfluorescens. Billeder blev kvantificeret ved hjælp af region af interesse (ROI) analyse software, der leveres sammen med Maestro-systemet. Salg In vivo
enkelt foton emissions computeriseret tomografi SPECT
Fem MKN-74 xenotransplantater blev intratumoralt injiceret med 2 × 10 7 PFU GLV-1 h153 og 5 med PBS som kontrol. To dage efter infektion blev 200 pCi 99mTc pertechnetat administreret via haleveneinjektion. 99mTc pertechnetat billeder blev opnået i løbet af 10 minutter, 3 timer efter radiotracer administration. Billeddannelse blev udført ved anvendelse af dual-detektor gammakamera undersystem af X-SPECT små dyr SPECT-CT-systemet (Gamma Medica, Northridge, CA). X-SPECT γ-kamerasystem blev kalibreret ved afbildning af et muse-størrelse (30 ml) cylinder fyldt med en målt koncentration (MBq /ml) af 99mTc ved anvendelse af en photopeak energi vindue på 126 til 154 keV og lavenergi høj opløsning kollimering. De resulterende 99mTc billeder blev eksporteret til Interfile og derefter importeres i ASIPro (Siemens Prækliniske Solutions, Knoxville, TN) billedbehandling software miljø. Ved ROI analyse blev et system kalibrering faktor (i cpm /pixel pr MBq /ml) afledt. Animal billeder blev ligeledes eksporteret til Interfile og derefter importeret til ASIPro og parametreres med hensyn til forfald-korrigerede procentdel injicerede dosis pr gram (% ID /g) baseret på ovenstående kalibreringsfaktor, den indgivne aktivitet, tiden efter administration af billedbehandling, og varighed billedet. Salg In vivo
PET imaging
Tre MKN-74 xenotransplantater blev injiceret intratumoralt med 2 × 10 7 PFU GLV-1 h153 og to med PBS. To dage efter viral injektion, 300 uCi 124I blev indgivet via haleveneinjektion. En time efter radiotracer indgivelse blev 3-dimensionelle liste-mode data erhvervet ved anvendelse af en energi vindue på 350 til 700 keV, og en tilfældighed timing vindue af 6 nanosekunder. Billeddannelse blev udført ved hjælp af en Focus 120 microPET dedikeret lille dyr PET-scanner (Concorde Microsystems Inc, Knoxville, TN). Disse data blev sorteret i to-dimensionelle histogrammer ved Fourier rebinning. De tællehastighederne i de rekonstruerede billeder blev omdannet til aktivitet koncentration (% ID /g) ved hjælp af et system, kalibrering faktor (MBq /ml per cps /voxel) afledt af billeddannelse af en mus størrelse fantom fyldt med en ensartet vandig opløsning af 18F. Billedanalyse blev udført ved anvendelse ASIPro
Statistiske analyser
Signifikante forskelle mellem grupper blev bestemt ved anvendelse Students t
test (Excel 2007, Microsoft, Redmond, WA, USA).. En p-værdi < 0,05 blev betragtet som signifikant.
Resultater Salg Cytotoksicitetsassay
Alle fem humane gastriske cancercellelinier var modtagelige for onkolyse af GLV-1 h153 (figur 1). Den MKN-74, OCUM-2MD3, og AGS cellelinier var mere følsomme over for viral lysis sammenlignet med MKN-45 og TMK-1-celler. Alle cellelinier viste en dosisafhængig reaktion, med større og hurtigere celledrab ved højere MOI. I MKN-74, OCUM-2MD3, og AGS cellelinier, blev mere end 90% af cellerne dræbes efter dag 9 ved en MOI på 1. MKN-74 cellelinien var særligt modtagelige for viral onkolyse, med mere end 77% celledrab ved dag 9 ved den laveste MOI på 0,01. Figur 1 cytotoksicitet GLV-1 h153 mod 5 humane gastrisk kræft cellelinier in vitro. Alle cellelinier opretholdt signifikant cytotoksicitet ved en MOI på 1, tre cellelinier var følsomme ved en MOI på 0,1, og to cellelinjer demonstrerede en udsøgt følsomhed over for GLV-1 h153 selv ved den laveste MOI på 0,01.
Viral replikation
Standard virale plakanalyser påviste effektive viral replikation af GLV-1 h153 i alle gastriske cancercellelinier ved en MOI på 1 (figur 2). MKN-74 viste den højeste virale titer med en toptiter på 1,06 × 10 6 PFU'er per brønd, en 26-dobling fra initialdosis, ved dag 7. Figur 2 In vitro kvantificering af viral replikation af GLV-1 h153 i humane gastriske cancercellelinier. Virus blev opsamlet fra brøndene i celler inficeret ved en MOI på 1. Viral plakanalyser påviste effektive viral replikation i alle 5 cellelinjer, nåede det højeste viral proliferation (1,06 × 106 virale plakdannende enheder ved dag 7) i cellelinjen , MKN-74, hvilket svarer til en 26-dobling fra sin oprindelige dosis. Salg In vivo
murine xenografter behandling med GLV-1 h153
at etablere de cytolytiske virkninger af GLV-1 h153 in vivo
, mus bærende MKN-74 xenotransplantater blev behandlet med en enkelt dosis af intratumoral injektion af GLV-1 h153 eller PBS. Behandlede tumorer viste vedvarende /kontinuerlig tumorregression over en periode på fire uger. På dag 28 var det gennemsnitlige tumorvolumen af ​​behandlingsgruppen var 221.6 mm 3 (figur 3). Ét dyr viste en fuldstændig tumorregression. I modsætning hertil alle de styringsmuligheder tumorer fortsatte med at vokse med en gennemsnitlig volumen på 1073.2 mm 3 ved dag 28 (t
-test, sammenligne behandling og kontrolgruppen på dag 28, s < 0,001). Der var ingen signifikant ændring i kropsvægt i nogen af ​​grupperne, og blev ikke observeret nogen sygelighed eller dødelighed relateret til GLV-1 h153 behandling. Figur 3 GLV-1 h153 undertrykker MKN-74 tumorvækst. 2 × 106 viruspartikler af GLV-1 h153 eller PBS blev injiceret intratumoralt i nøgne mus der bar subkutane tumorer af flank MKN-74. Inhibering af tumorvækst på grund af behandling med GLV-1 h153 startede med dag 15 (p < 0,001). Tumorvolumener viste repræsenterer middelværdier mængder fra 5 mus i hver behandlingsgruppe. Salg In vitro
og in vivo
GFP-ekspression
GFP-ekspression blev overvåget ved fluorescensmikroskopi 1, 3, 5, 7 og 9 dage efter virusinfektion ved en MOI på 1,0. De fleste MKN-74-celler blev inficeret og udtrykte GFP på dag 7 (figur 4A). In vivo kan
GFP signal detekteres kun på xenotransplantat injiceret med GLV-1 h153 (figur 4B). Figur 4 grønt fluorescerende protein (GFP) ekspression af MKN-74 in vitro og in vivo. A. MKN-74 celler blev inficeret med GLV-1 h153 og viste stærk grøn fluorescens ved dag 7, demonstrerer effektiv infektion (forstørrelse 100 ×). B. MKN-74 flank tumorer blev behandlet med 2 × 106 viruspartikler af GLV-1 h153. Grøn fluorescens af tumor med Maestro scanneren indikerer vellykket infektion og tumor-specifikke lokalisering af GLV-1 h153.
Fungerende h
NIS udtryk afbildet af 99mTc-pertechnetat scintigrafi og 124I PET
Alle MKN-74 xenotransplantater injiceret med GLV-1 h153 viste lokaliseret ophobning af 99mTc radioaktivitet i flanken tumorer, mens ingen radioaktivitet kumulation i kontrol tumorer (figur 5A). GLV-1 h153-inficerede MKN-74 tumorer også lettet 124I radioaktivt iod optagelse og tilladt til billeddannelse via PET (figur 5B), mens PBS-injicerede tumorer ikke kunne visualiseres. Figur 5 Nuklear billeddannelse af GLV-1 h153-inficerede MKN-74 xenotransplantater. A. 99mTc pertechnetat scanning blev udført 48 timer efter infektion og 3 timer efter radiotracer administration. Tumorer behandlet med GLV-1 h153 virus er klart visualiseret (pil). Maven og skjoldbruskkirtlen ses på grund af nativ ekspression af NIS, og blæren er set fra udskillelse af radiotraceren. B. Axial, koronale og sagittale visninger af en 124I PET billede 48 timer efter GLV-1 h153 injektion viser forbedret signal i GLV-1 h153-inficerede MKN-74 tumorer (pil).
Diskussion
mavekræft er den fjerde mest almindelige malignitet og den næsthyppigste årsag til cancer-relaterede dødsfald på verdensplan [1, 14]. Recidiv eller fjernmetastaser er en af ​​de mest almindelige komplikationer og ofte dødsårsagen [15]. Mens kemoterapi er et nyttigt adjuverende behandling sammenlignet med kirurgisk terapi alene, er dets terapeutiske potentiale begrænsede [16]. De fleste gastriske kræftformer er resistente over for i øjeblikket er tilgængelige kemoterapi. Derfor er der behov hidtil ukendte terapeutiske midler til forbedring af resultaterne for mavekræft patienter, som ikke responderer på konventionel behandling. Onkolytisk viral terapi er en lovende fremgangsmåde til cancerbehandling, der afhænger af evnen af ​​virus til at inficere, replikere i og lyserer en værtscelle [17, 18]. I denne undersøgelse beskrev vi de cytotoksiske virkninger af GLV-1 h153, et hidtil ukendt rekombinant VACV bærer h
NIS-gen, på gastriske cancerceller in vitro
. Vi endvidere vist, at GLV-1 h153-inficerede mavekræft implanteret udtrykt fungerende h
NIS protein, der er tilladt for ikke-invasiv billeddannelse af tumoren, og også effektiv tumorregression in vivo
.
En række vira har vist onkolytiske egenskaber, herunder adenovirus, herpes simplex-virus, Newcastle disease-virus, vesikulær stomatitis-virus, og reovirus [17]. Blandt en række onkolytiske virale midler, vacciniavirus har flere fordele. VACV udelukkende replikerer i cytoplasmaet uden brug værtens DNA-syntese maskiner og derved mindske risikoen for integration af det virale genom i værtsgenomet [10]. En stor mængde af fremmed DNA (op til 25 kb) kan inkorporeres uden væsentlig reduktion af viral replikation effektivitet [19]. Desuden har vaccinia vist sig at have en god sikkerhedsprofil, som det har været historisk givet til millioner under koppevaccination. Det viser også effektiv replikation og en bred vifte af værtscellelinier tropismer [10]. Flere prækliniske undersøgelser har vist, at systemisk injektion af rekombinant VACV til xenotransplantater resulterede i høje virale titre i kun tumorer, hvilket indikerer tumorspecifik kolonisering [11, 20, 21]. Der er en lille bekymring, at patienter, der har modtaget koppevaccination i fortiden har neutraliserende antistof mod virus. Dette kan potentielt resultere i kompromitteret behandlingseffekt. Men i blodet, komplement spiller, en mere vigtig rolle i at inaktivere VACV end neutraliserende antistoffer. Vi forudser derfor, at tilstedeværelsen af ​​neutraliserende antistoffer hos patienter ikke bør hindre VACV behandling; dog kan en højere dosis behandling være nødvendig.
Gensplejsede VACVs har vist effektivitet ved behandling af en lang række humane cancere [12]. GLV-1 h168 har allerede vist sig at være en effektiv diagnostisk og terapeutisk vektor i flere humane tumormodeller, herunder brysttumor, mesotheliom, pancreascancer, og pladecellecarcinom [11] h
NIS-protein, som er en iboende membran glycoprotein med 13 formodede transmembrandomæner, aktivt transporterer både Na + og i - ioner over cellemembranen [22]. Fungerende h
NIS protein optagelse flere kommercielt tilgængelige radio-nukleotider, herunder 123I, 124I, 125I, 131I, 99mTc og 188Re [22, 23 ]. I denne undersøgelse GLV-1 h153-medieret ekspression af h
NIS-protein i inficerede MKN-74 xenotransplantater resulterede i en lokaliseret 99mTc og 124I radiotracer-optagelse. Vores resultater antyder, at h
NIS-genekspression via viral vektor kan anvendes som en ikke-invasiv billeddannelse modalitet til at overvåge tumorprogression og behandlingsvirkninger.
En enkelt intratumoral injektion af GLV-1 h153 i MKN-74 xenotransplantater udviste lokaliseret intratumoral GFP og h
NIS udtryk. Desuden var der ingen tegn på viral spredning til andre organer baseret på GFP billeddannelse, 99mTc scintigrafi, og 124l PET, hvilket indikerer tumorspecifik virusinfektion og aktivitet. Vi viste også, at GLV-1 h153 er effektiv og sikker til behandling af gastriske tumorer i en murin xenograft model. GLV-1 h153-behandlede gruppe blev kontinuert fulgt indtil dag 35, og der var ingen genvækst af tumor (data ikke vist mellem dag 28 og 35). Kontrolgruppen skulle ofres i overensstemmelse med vores godkendte dyr protokol på dag 28. Udtrykke h
NIS-gen i en ellers ikke-hNIS-udtrykkende væv er spændende. Det kunne potentielt gøre brug af de veletablerede radioaktivt jod og terapi i andre ikke-skjoldbruskkirtel stammer cancere. Adskillige undersøgelser har vist lovende resultater i en lang række tumorer under anvendelse radioaktivt iod behandling via tumorspecifik ekspression af h
NIS-gen, herunder medullære thyroid carcinoma [24], prostatacancer [25], tyktarmskræft [26], og bryst kræft [27]. Tumor-specifikke h
NIS udtryk ved hjælp GLV-1 h153 kan maksimere lokaliseret radioaktivt jod ophobning og minimere ikke-specifik optagelse i andre organer. Baseret på vores lovende resultater, ville det være af væsentlig klinisk betydning for at vurdere effekten af ​​kombinationsbehandling af GLV-1 h153 og radioaktivt iod.
Konklusion
Denne undersøgelse viser en roman onkolytisk VACV manipuleret til at udtrykke h
NIS effektivt kan inficere, replikere i og forårsage regression af gastrisk cancer i en murin xenograft model. GFP-ekspression kan tjene som et surrogat for viral infektivitet. In vivo
, GLV-1 h153 inficerede celler kan let afbildes med 99mTc scintigrafi og 124I PET billeddannelse. Disse data giver yderligere støtte til fremtidig undersøgelse af GLV-1 h153 som en behandling agent og en ikke-invasiv billeddannelse værktøj i de kliniske indstillinger
Forkortelser
VACV:.
Vacciniavirus


hNIS:
Menneskelig natriumjodid symporter
ATCC:
American Type Culture Collection
RUC-GFP:
Renilla
luciferase-Aequorea
grønt fluorescerende protein
LDH:
lactatdehydrogenase ()
IACUC:
Institutional Animal Care og brug Udvalg
MSKCC:
Memorial Sloan-Kettering Cancer center
PFU:
Plaque-dannende enheder
MOI:
multiplicitet af infektion
PET:
positronemissionstomografi

ROI:
Region interesse
rTfr:
Reverse indsat human transferrin receptor
SPECT:.
Single foton emission computertomografi
erklæringer
Anerkendelser
Tekniske tjenester leveres af MSKCC Small-Animal Imaging Core Facility, delvist understøttet af NIH Lille -Animal Imaging Research Program (SAIRP) Tilskud Ingen R24 CA83084 og NIH center Grant Ingen P30 CA08748 er taknemmeligt anerkendt.
forfattere 'originale filer indsendt til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder . 13046_2013_740_MOESM1_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13046_2013_740_MOESM2_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 2 13046_2013_740_MOESM3_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 3 13046_2013_740_MOESM4_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 4 13046_2013_740_MOESM5_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 5 konkurrerende interesser
findes ingen konkurrerende finansielle interesser for Kyong-Hwa jun, Tae-Jin Song, Sepideh Gholami, Joyce Au, Dana Haddad, Carson Joshua, Chun-Hao Chen, Kelly Mojica, Pat Zanzonico, og Yuman Fong. Nanhai G. Chen, Qian Zhang, og Aladar A. Szalay er tilknyttet Genelux Corporation.
Forfattere bidrag
SG bistået med skrive op af manuskriptet. TS bistået i in vivo
eksperimenter og bidraget til undersøgelsen design. JA bidrog til cytotoksicitetsassayet. DH bidrog til in vivo
PET og SPECT. JC bidrog til fluorescerende billeddannelse. CC bidrog til den statistiske analyse af data. KM bidrog til den virale replikation assay. PZ bidraget til undersøgelsen design og radioaktive billeddannende eksperimenter. NC og QZ bidrog til den virale sekvens og konstruktion. AS og YF bidraget til undersøgelsen design og færdiggørelse af manuskriptet. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Klinisk-patologisk karakteristika og behandlingsstrategier i tidlig gastrisk cancer: en retrospektiv kohorteundersøgelse
• En selektiv aryl hydrocarbon receptor modulator 3,3-diindolylmethane hæmmer mavekræft cellevækst