Una nuova tecnica oncolytic virale terapia e di imaging per il cancro gastrico con un virus vaccinico geneticamente modificato che trasporta il symporter ioduro di sodio umana

Una tecnica di terapia e di imaging romanzo oncolytic virale per il cancro gastrico con un virus vaccinico geneticamente modificato che trasporta il ioduro di sodio umana symporter
Abstract
sfondo
tumori gastrici hanno scarsa sopravvivenza globale nonostante i recenti progressi nei metodi di diagnosi precoce, resezione endoscopica tecniche e trattamenti di chemioterapia. Vaccino terapia virale ha avuto potenziale terapeutico promettente per vari tipi di cancro e ha un grande profilo di sicurezza. Abbiamo studiato l'efficacia terapeutica di un nuovo virus vaccino geneticamente modificato che trasporta il symporter ioduro di sodio umano gene (h
NIS), GLV-1 H153, su tumori gastrici e la sua potenziale utilità per l'imaging con 99mTc pertecnetato la scintigrafia e 124I ad emissione di positroni di positroni (PET).
Metodi
GLV-1 H153 è stato testato contro le cinque linee di cellule di cancro gastrico umano mediante citotossicità e saggi placca virali standard. In vivo
, tumori fianco sottocutanei sono stati generati in topi nudi con le cellule di cancro gastrico umano, MKN-74. I tumori sono stati successivamente iniettate sia con GLV-1 H153 o PBS e seguiti per la crescita del tumore. 99mTc pertecnetato la scintigrafia e di imaging 124I microPET sono state eseguite
. Risultati
espressione GFP, un surrogato di infettività virale, hanno confermato l'infezione virale da 24 ore. Ad una molteplicità di infezione (MOI) di 1, GLV-1 H153 raggiunto > 90% citotossicità in MNK-74, OCUM-2MD3, e AGS nell'arco di 9 giorni, e > 70% citotossicità in MNK- 45 e TMK-1. In vivo
, GLV-1 H153 è stato efficace nel trattamento di xenotrapianti (p < 0,001) dopo 2 settimane di trattamento. tumori GLV-1 H153-infetti sono stati prontamente ripreso da 99mTc pertecnetato la scintigrafia e di imaging 124I microPET 2 giorni dopo il trattamento.
Conclusioni
GLV-1 H153 è un virus oncolitico efficace esprimere l'h
proteina NIS che può regredire in modo efficiente i tumori gastrici e consentire l'imaging dei tessuti profondi. Questi dati incoraggia la sua continua ricerca in ambito clinico.
Parole
oncolitici terapia virale GLV-1 H153 cancro gastrico sodio umana ioduro symporter (h
NIS) Sfondo
cancro gastrico è uno dei più diffusi maligni tumori, specialmente in Asia [1]. Anche se i metodi di diagnosi precoce, lo sviluppo di endoscopica o la resezione chirurgica, e chemioterapie più efficaci hanno migliorato la sopravvivenza generale nei pazienti con cancro gastrico, la prognosi dei pazienti con carcinoma gastrico avanzato è ancora scarsa [2-4]. La maggior parte dei trattamenti chemioterapici convenzionali hanno dimostrato l'efficienza moderata. Una possibile spiegazione per la resistenza del cancro gastrico alla terapia convenzionale potrebbe essere la sua non suscettibilità all'apoptosi [5]. Tuttavia, i virus oncolitici hanno grandi effetti terapeutici contro le cellule tumorali che esprimono alti livelli di ribonucleotide reduttasi, gli enzimi di riparazione del DNA, e sono quindi resistenti all'apoptosi [6, 7]. Molte di queste caratteristiche che rendono le cellule di cancro gastrico resistenti alla chemioterapia, renderli sensibili alla terapia virale oncolitici. Così, la terapia genica utilizzando virus oncolitici offre una valida alternativa per il trattamento del cancro gastrico [8].
Terapia virale oncolitici è stata studiata nel corso dell'ultimo secolo e dimostrato il successo nella sperimentazione preclinica e clinica come modalità romanzo trattamento del cancro [9 ]. virus vaccinia (VACV) ceppi sono particolarmente interessanti come potenziali agenti antitumorali, in quanto possono incorporare grandi quantità di DNA estraneo senza ridurre l'efficienza di replica. Inoltre, VACV ha dimostrato un grande profilo di sicurezza negli esseri umani [10-12]. Infine, oltre al suo potenziale terapeutico, VACV è stato anche utilizzato come tecnica di imaging non invasiva che permette ai medici di seguire la consegna gene terapeutico nel corpo [10, 13].
In questa pubblicazione, abbiamo esaminato il potenziale terapeutico di un romanzo VACV esprimendo il ioduro di sodio symporter umano (h
NIS), GLV-1 H153, contro i tumori gastrici in vitro e in vivo

, e testato il suo potenziale come strumento di imaging.
Materiali e metodi
linee cellulari
cellule AGS di cancro gastrico umano (una linea cellulare di adenocarcinoma epiteliali gastriche) sono stati ottenuti da American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA) e sono state coltivate in Ham di F-12 K Media. Le cellule umane OCUM-2MD3 erano un dono del Dr. Masakazu Yashiro (Osaka City University Medical School, Giappone) e sono state coltivate in Modified mezzo di Eagle Dulbecco (DMEM). MKN-74 e le cellule TMK-1 sono stati forniti dal Dr. T. Suzuki (Fukushima Medical College, Giappone) e sono state coltivate in Roswell Park Memorial Institute (RPMI). MKN-45 è stato ottenuto in dono dal Dr. Yutaka Yonemura (Kanazawa University, Giappone) ed è stato mantenuto in RPMI. Africano verde fibroblasti rene di scimmia (Cercopithecus aethiops
; CV-1) celle utilizzate per le analisi di placca virali sono state acquistate da ATCC (Manassas, VA) e coltivate in mezzo essenziale minimo (MEM). Tutti i mezzi sono stati integrati con il 10% FBS, 1% di penicillina e la streptomicina 1%.
Virus
GLV-1 H153 è un virus vaccinico ricombinante competenti per la replicazione derivato dal suo ceppo parentale, GLV-1 H68, via ricombinazione omologa. Esso contiene quattro cassette inseriti codificano Renilla Aequorea
proteina fluorescente verde luciferase- (RUC-GFP) proteina di fusione, un recettore della transferrina umana in senso inverso inserito (RTFR
), β-galattosidasi, e symporter ioduro di sodio umano (h
NIS) nel F14.5
, J2R
(che codifica timidina chinasi), e A56R
(codifica emoagglutinina) loci del virale genome.GLV-1 H153 è stata fornita da Genelux Corporation (R & D stabilimento di San Diego, CA, USA).
citotossicità test Pagina 4 × 10 4 cellule per pozzetto di ciascuna linea cellulare sono stati placcati in piastre da 12 pozzetti e incubate in un CO 5% 2 umidificata incubatore a 37 ° C durante la notte. GLV-1 H153 è stato aggiunto a ciascun pozzetto alla variabile molteplicità di infezione (MOI) di 0,01, 0,1 e 1,0. citotossicità virale è stata testata utilizzando un lattato deidrogenasi (LDH) al giorno. Le cellule sono state lavate con PBS, una volta, e poi lisate con 1,35% Triton X-100 (Sigma, St. Louis, MO). Il rilascio di LDH seguente lisi intracellulare è stato successivamente misurato con CytoTox 96® (Promega, Madison, WI) su uno spettrofotometro (EL321e, Bio-Tek Instruments) a 490 nm. I risultati sono espressi come percentuale di cellule sopravvissute, che sono stati calcolati come il rilascio di LDH di campioni infetti rispetto al controllo non infetto. Tutte le condizioni sono stati testati in triplicato.
Virali saggio replica
sopranatanti da ogni infetta, così sono stati raccolti tutti i giorni ed immediatamente congelati a -80 ° C. diluizioni seriali di tutti i campioni surnatante sono stati fatti per eseguire test placca virali standard sul confluenti CV-1 le cellule. Tutti i campioni sono stati misurati in triplicato.
In vivo
murino fianco terapia dei tumori
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti secondo protocolli approvati e in conformità con le linee guida etiche del Comitato Istituzionale Animal Care e Usa (IACUC) al Memorial Sloan -Kettering Cancer center (MSKCC). MKN-74 xenotrapianti sono stati stabiliti in 6 a 8 settimane di età femminile topi nudi (NCI: Hsd: atimici Nude-nu, Harlan) per via sottocutanea iniezione di 5 × 10 6 MKN-74 cellule nel fianco destro. La crescita del tumore è stata registrata due volte a settimana con un volume di calibro e del tumore digitale è stato calcolato utilizzando l'equazione,
a × b
2 × 0.5, in cui un
e B Quali sono i più grande e piccoli diametri, rispettivamente. Quando i tumori hanno raggiunto un diametro di circa 6-8 mm in 10 giorni, gli animali sono stati raggruppati in gruppi di controllo e di trattamento con dimensioni tumorali equi. Una singola dose di 2 × 10 6 unità formanti placca (PFUs) di GLV-1 H153 a 100 microlitri di PBS o 100 ml di PBS come controllo sono stati iniettati intratumorally per ogni tumore designato. Gli animali sono stati osservati quotidianamente per rilevare eventuali segni di tossicità, e si sono sacrificati quando i loro tumori hanno raggiunto un diametro di circa 15 mm.
Di imaging fluorescente (Maestro)
in vivo
immagini GFP sono state ottenute utilizzando il sistema CRi Maestro (Cambridge ricerca e Strumentazione, Woburn, MA) utilizzando i filtri appropriati (eccitazione = 445-490 nm, emissione = 515 nm filtro passa-lungo, le impostazioni di acquisizione = 500-720 a 10 nm). Dopo ogni immagine è stata ottenuta, era spettralmente non miscelato per rimuovere la fluorescenza di fondo. Le immagini sono state quantificate utilizzando regione di interesse (ROI) software di analisi che viene fornito con il sistema di Maestro.
In vivo
emissione di singolo fotone tomografia computerizzata delle immagini SPECT
Cinque MKN-74 xenotrapianti sono stati intratumorally iniettati con 2 × 10 7 PFUs GLV-1 H153 e 5 con PBS come controlli. Due giorni dopo l'infezione, 200 pCi di 99mTc pertecnetato veniva somministrato per via vena della coda. 99mTc immagini Pertecnetato sono state ottenute su 10 min, 3 ore dopo la somministrazione radiofarmaco. Imaging è stata effettuata utilizzando il dual-detector sottosistema gamma camera del piccolo animale SPECT-CT sistema X-SPECT (Gamma Medica, Northridge, CA). Il sistema di γ-camera X-SPECT è stato calibrato per l'imaging di un mouse dimensioni (30 mL) cilindro riempito con una concentrazione misurata (MBq /mL) di 99mTc utilizzando una finestra energetica fotopicco del 126 al 154 keV e bassa energia ad alta risoluzione collimazione. I risultanti Immagini 99mTc sono stati esportati Interfile e poi importati nei ASIPro (Soluzioni Siemens pre-clinici, Knoxville, TN) ambiente software di elaborazione delle immagini. Con analisi ROI, un fattore di calibrazione del sistema (in cpm /pixel per MBq /mL) è stato derivato. immagini di animali sono stati ugualmente esportati in Interfile e poi importato in ASIPro e parametrizzato in termini di dose decadimento corretta percentuale iniettata per grammo (% ID /g) sulla base del fattore di calibrazione precede, l'attività somministrata, il tempo dopo la somministrazione di immagini, e la durata dell'immagine.
in vivo l'imaging PET
Tre MKN-74 xenotrapianti sono state iniettate intratumorally con 2 × 10 7 PFU GLV-1 H153 e due con PBS. Due giorni dopo l'iniezione virale, 300 pCi di 124I veniva somministrato per via vena della coda. Un'ora dopo la somministrazione radiotracer, dati dell'elenco modalità 3-dimensionali sono state acquisite utilizzando una finestra di energia da 350 a 700 keV e una coincidenza temporizzazione finestra 6 nanosecondi. Imaging è stata effettuata utilizzando un Focus 120 microPET dedicato PET scanner per piccoli animali (Concorde Microsystems Inc, Knoxville, TN). Questi dati sono stati ordinati in istogrammi 2-dimensionali di Fourier rebinning. Le velocità di conteggio delle immagini ricostruite sono stati convertiti in concentrazione di attività (% ID /g) utilizzando un fattore di calibrazione del sistema (MBq /mL per cps /voxel) derivato dalle immagini di un fantoccio dimensioni del mouse riempito con una soluzione acquosa uniforme 18F. L'analisi delle immagini è stata effettuata utilizzando ASIPro analisi statistica

differenze significative tra i gruppi sono state determinate utilizzando il test t di Student
(Excel 2007, Microsoft, Redmond, WA, USA).. Un valore di p < 0.05 è stato
considerato significativo. Risultati
citotossicità saggio impara tutte le cinque linee di cellule di cancro gastrico umano erano suscettibili di oncolisi da GLV-1 H153 (Figura 1). Le linee cellulari AGS MKN-74, OCUM-2MD3, ed erano più sensibili alla lisi virale rispetto alle cellule MKN-45 e TMK-1. Tutte le linee cellulari hanno dimostrato una risposta dose-dipendente, con una maggiore e più veloce uccisione cellulare a MOI superiori. In MKN-74, OCUM-2MD3, e linee cellulari AGS, più del 90% delle cellule sono stati uccisi dal giorno 9 ad un MOI di 1. La linea di cellule MKN-74 era particolarmente suscettibili di oncolisi virale, con più del 77% uccisione delle cellule di giorno 9 al MOI più basso di 0,01. Figura 1 citotossicità di GLV-1 H153 contro 5 linee di cellule di cancro gastrico umano in vitro. Tutte le linee cellulari sostenuti significativa citotossicità ad una MOI di 1, tre linee cellulari erano sensibili ad una MOI di 0,1, e due linee cellulari hanno dimostrato una sensibilità squisito per GLV-1 H153 anche a basso MOI di 0,01.
Replicazione virale
saggi placca virali standard dimostrato replicazione virale efficiente GLV-1 H153 in tutte le linee di cellule di cancro gastrico ad un MOI di 1 (Figura 2). MKN-74 ha dimostrato il più alto titolo virale con un picco titolo di 1,06 × 10 6 PFUs per bene, un aumento di 26 volte da dose iniziale, di giorno 7. Figura 2 quantificazione in vitro di replicazione virale di GLV-1 H153 in linee cellulari di cancro gastrico umano. Virus è stato raccolto dai pozzi di cellule infettate ad una MOI di 1. saggi placca virali hanno dimostrato la replicazione virale efficace in tutte le 5 linee di cellule, raggiungendo il più alto proliferazione virale (1,06 × 106 unità virali formanti placca di giorno 7) nella linea cellulare , MKN-74, che rappresenta un aumento di 26 volte dalla sua dose iniziale.
in vivo
murino xenotrapianti la terapia con GLV-1 H153
Per stabilire gli effetti citolitica di GLV-1 H153 in vivo
, topi portatori MKN-74 xenotrapianti sono stati trattati con una singola dose di iniezione intratumorale di GLV-1 H153 o PBS. tumori trattati hanno dimostrato sostenuta /continua regressione del tumore nel corso di un periodo di quattro settimane. Di giorno 28, il volume del tumore medio del gruppo di trattamento era 221,6 mm 3 (Figura 3). Un animale ha dimostrato una completa regressione del tumore. Al contrario, tutti i tumori di controllo continuato a crescere con un volume medio di 1073.2 mm 3 per giorno 28 (t-test
, confrontando trattato e di controllo il giorno 28, p < 0,001). Non vi è stato alcun cambiamento significativo del peso corporeo in entrambi i gruppi, e non è stata osservata morbilità o mortalità correlata al GLV-1 H153 trattamento. Figura 3 GLV-1 H153 sopprime MKN-74 la crescita del tumore. 2 × 106 particelle virali di GLV-1 H153 o PBS sono stati iniettati intratumorally in topi nudi che portano tumori fianco sottocutanee di MKN-74. L'inibizione della crescita tumorale a causa di un trattamento con GLV-1 H153 iniziato il giorno 15 (p < 0,001). volumi tumorali indicati rappresentano i volumi medi da 5 topi in ogni gruppi di trattamento.
in vitro e in vivo

GFP espressione
espressione GFP è stata monitorata dalla microscopia a fluorescenza 1, 3, 5, 7 e 9 giorni dopo l'infezione virale ad una MOI di 1,0. La maggior parte delle cellule MKN-74 sono stati infettati e hanno espresso la GFP dal giorno 7 (Figura 4A). In vivo,
segnale GFP può essere rilevato solo al xenotrapianto iniettato con GLV-1 H153 (Figura 4B). Figura 4 Green proteina fluorescente (GFP) espressione di MKN-74 in vitro e in vivo. A. MKN-74 cellule sono state infettate con GLV-1 H153 e hanno mostrato una forte fluorescenza verde di giorno 7, dimostrando l'infezione efficace (ingrandimento 100 ×). B. MKN-74 tumori fianco sono stati trattati con 2 × 106 particelle virali di GLV-1 H153. Verde di fluorescenza del tumore con lo scanner Maestro indica l'infezione di successo e la localizzazione tumore-specifica di GLV-1 H153.
Funzionamento h
espressione di NIS ripreso dalla scintigrafia con 99mTc-pertecnetato e 124I PET in tutte le nazioni MKN-74 xenotrapianti iniettati con GLV-1 H153 hanno mostrato localizzata accumulo di 99mTc radioattività nei tumori fianco mentre nessuna radioattività cumulo in tumori di controllo (Figura 5A). GLV-1 H153-infettati MKN-74 tumori anche facilitato 124I captazione dello iodio radioattivo e permessi per l'imaging tramite PET (figura 5B), mentre i tumori PBS-iniettati non potevano essere visualizzati. Figura 5 imaging nucleare di GLV-1 H153 con infezione da MKN-74 xenotrapianti. scansione pertecnetato 99mTc A. è stata eseguita 48 ore dopo l'infezione e 3 ore dopo la somministrazione radiofarmaco. I tumori trattati con GLV-1 H153 virus sono chiaramente visualizzate (freccia). Lo stomaco e della tiroide sono visti a causa di espressione nativo di NIS, e la vescica è visto dalla escrezione del radiofarmaco. B. assiale, coronale e sagittale vista di un 124I PET immagine 48 ore dopo GLV-1 H153 iniezione mostra migliorata del segnale in GLV-1 H153-infetti MKN-74 tumori (freccia).
Discussione
cancro gastrico è la quarta neoplasia più comune e la seconda causa più frequente di morte per cancro in tutto il mondo [1, 14]. Recidiva o metastasi a distanza è una delle complicanze più comuni e spesso la causa della morte [15]. Mentre la chemioterapia è una terapia adiuvante utile rispetto alla terapia chirurgica da sola, il suo potenziale terapeutico è limitato [16]. La maggior parte dei tumori gastrici sono resistenti ai regimi chemioterapici attualmente disponibili. Pertanto, sono necessari nuovi agenti terapeutici per migliorare i risultati per i pazienti affetti da cancro gastrico che non rispondono alle terapie convenzionali. La terapia virale oncolitici è un approccio promettente per il trattamento del cancro che dipende dalla capacità del virus di infettare, replicarsi all'interno, e la lisi una cellula ospite [17, 18]. In questo studio, abbiamo descritto gli effetti citotossici di GLV-1 H153, un romanzo VACV ricombinante che porta la h
NIS gene, in cellule di cancro gastrico in vitro
. Abbiamo inoltre dimostrato che GLV-1 H153-infetti xenotrapianti cancro gastrico espressi funzionante h
NIS proteina che ha permesso per l'imaging non invasiva del tumore e anche efficiente regressione del tumore in vivo
.
Una varietà di virus hanno mostrati proprietà oncolitici tra adenovirus, herpes simplex virus, virus della malattia di Newcastle, virus della stomatite vescicolare, e reovirus [17]. Tra una varietà di agenti virali oncolitici, virus vaccinia ha diversi vantaggi. VACV replica esclusivamente nel citoplasma senza utilizzare macchinari DNA sintesi dell'ospite, riducendo così il rischio di integrazione del genoma virale nel genoma dell'ospite [10]. Una grande quantità di DNA estraneo (fino a 25 kb) può essere incorporato senza ridurre significativamente l'efficienza replicazione virale [19]. Inoltre, vaccino ha dimostrato di avere un buon profilo di sicurezza come è stato storicamente dato a milioni di persone durante la vaccinazione contro il vaiolo. Essa dimostra anche la replicazione efficiente e una vasta gamma di tropismi cellula ospite [10]. Diversi studi preclinici hanno dimostrato che l'iniezione sistemica di VACV ricombinante in xenotrapianti provocato alti titoli virali in soli tumori, indicando colonizzazione tumore-specifica [11, 20, 21]. C'è un piccolo problema che i pazienti che hanno ricevuto la vaccinazione contro il vaiolo in passato hanno anticorpi neutralizzanti contro il virus. Questo potrebbe potenzialmente causare l'efficacia del trattamento compromessa. Tuttavia, nel sangue, complemento gioca un ruolo più importante nel inattivando VACV di anticorpi neutralizzanti. Prevediamo quindi che la presenza di anticorpi neutralizzanti nei pazienti che non dovrebbe ostacolare il trattamento VACV; tuttavia, una dose di trattamento più elevato potrebbe essere necessaria. VACVs
geneticamente ingegnerizzati hanno dimostrato efficacia nel trattamento di una vasta gamma di tumori umani [12]. GLV-1 H168 ha già dimostrato di essere un vettore diagnostico e terapeutico efficace in vari modelli di tumori umani, tra cui tumore al seno, il mesotelioma, tumori pancreatici, e carcinoma a cellule squamose [11] Il h
proteina NIS, che è una membrana intrinseca glicoproteina con 13 domini transmembrana putativi, trasporta attivamente sia Na + e - ioni attraverso la membrana cellulare [22]. Funzionamento h
proteina NIS può assorbimento diversi radiofoniche-nucleotidi disponibili in commercio, tra cui 123I, 124I, 125I, 131 99mTc e 188Re [22, 23 ]. In questo studio, espressione di h
NIS proteine ​​nella infetti MKN-74 eterotrapianti GLV-1 H153 mediata comportato una localizzato 99mTc e 124I radiotracer assorbimento. I nostri risultati suggeriscono che l'espressione h
NIS gene tramite vettore virale può essere usato come una modalità di imaging non invasivo per monitorare tumore progressione e trattamento effetti.
Una singola iniezione intratumorale di GLV-1 H153 in MKN-74 xenotrapianti esposto localizzata GFP intratumorale e h
espressione di NIS. Inoltre, non vi era alcuna evidenza di diffusione virale ad altri organi sulla base di immagini GFP, 99mTc la scintigrafia, e 124I PET, indicando infezione virale tumore-specifica e l'attività. Abbiamo inoltre dimostrato che GLV-1 H153 è efficace e sicuro nel trattamento dei tumori gastrici in un modello murino xenotrapianto. Il GLV-1 gruppo H153-trattato è stato continuamente seguita fino al giorno 35 e non c'era la ricrescita del tumore (dati non riportati tra il giorno 28 e 35). Il gruppo di controllo doveva essere sacrificato in base al nostro protocollo animale approvato il giorno 28. Esprimendo la h
NIS gene in un tessuto altrimenti non hNIS esprimono è eccitante. Si potrebbe potenzialmente far uso del imaging con iodio radioattivo consolidata e la terapia in altri non-tiroide origine tumori. Diversi studi hanno mostrato risultati promettenti in una varietà di tumori che utilizzano il trattamento con iodio radioattivo attraverso l'espressione tumore-specifica del gene h
NIS, tra cui il carcinoma midollare della tiroide [24], il cancro alla prostata [25], il cancro del colon [26], e della mammella cancro [27]. espressione h
NIS tumore-specifici utilizzando GLV-1 H153 può massimizzare l'accumulo di iodio radioattivo localizzato e ridurre al minimo l'assorbimento non specifico in altri organi. Sulla base dei nostri risultati promettenti, sarebbe di notevole importanza clinica per valutare l'effetto della terapia di combinazione di GLV-1 H153 e radioiodio.
Conclusione
Questo studio dimostra un romanzo VACV oncolytic ingegnerizzato per esprimere l'h
NIS può effettivamente infettare, replicarsi all'interno, e causare la regressione del cancro gastrico in un modello murino xenotrapianto. espressione GFP può servire come un surrogato di infettività virale. In vivo
, GLV-1 H153 cellule infettate possono essere facilmente ripreso con 99mTc la scintigrafia e l'imaging 124I PET. Questi dati forniscono ulteriore supporto per la futura ricerca di GLV-1 H153 come agente di trattamento e uno strumento di imaging non invasivo nelle impostazioni cliniche
Abbreviazioni
VACV:.
Virus vaccinico

hNIS:
sodio umana ioduro symporter
ATCC:
Type Culture Collection americano
RUC-GFP:
Renilla
luciferasi-Aequorea
proteina fluorescente verde
LDH:
lattato deidrogenasi ()
IACUC:
La cura e l'uso Comitato istituzionale Animal
MSKCC:
Memorial Sloan-Kettering Cancer center
PFUs:
unità formanti placca
MOI:
molteplicità di infezione
PET:
positroni tomografia ad emissione di

ROI: regione della interesse
RTFR:
Reverse recettore della transferrina umana inserita
SPECT:.
emissione di fotone singolo tomografia computerizzata
Dichiarazioni
Ringraziamenti
servizi tecnici forniti dal Fondo MSKCC piccola Animal Imaging principali, sostenuti in parte dal NIH Piccolo di origine animale, Imaging Research Program (SAIRP) non rilasciano R24 CA83084 e NIH centro di Grant No P30 CA08748, si ringrazia.
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Non esistono concorrenti interessi finanziari per Kyong-Hwa Jun, Tae-Jin song, Sepideh Gholami, Joyce Au, Dana Haddad, Carson Joshua, Chun-Hao Chen, Kelly Mojica, Pat Zanzonico, e Yuman Fong. Nanhai G. Chen, Qian Zhang, e Aladar A. Szalay sono affiliati a Genelux Corporation.
Contributi degli autori
SG assistito con la scrittura fino del manoscritto. TS assistiti nelle vivo
esperimenti in e hanno contribuito al disegno dello studio. JA ha contribuito al test di citotossicità. DH ha contribuito al vivo PET e SPECT imaging. JC ha contribuito a immagini a fluorescenza. CC contribuito all'analisi statistica dei dati. KM contribuito al test replicazione virale. PZ contribuito al disegno dello studio e gli esperimenti di imaging radioattivi. NC e QZ contribuito alla sequenza virale e costrutto. AS e YF contribuito al disegno dello studio e il completamento del manoscritto. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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