Analýza proteínov bunkového cyklu súvisiacimi s žalúdočnej intramucosal diferencované typu rakoviny na báze mucín fenotypmi: nová hypotéza čoskoro žalúdočné karcinogenézy založený na mucínu Analýza phenotype

proteínov bunkového cyklu súvisiacimi s intramucosal diferencované typu rakoviny žalúdka na základe mucín fenotypmi: a nová hypotéza skoré žalúdočné karcinogenéze založený na mucín fenotyp
abstraktné
pozadia
abnormality bunkových regulátorov cyklu sú spoločné znaky ľudských nádorov, a niekoľko z týchto faktorov sú spojené s ranom vývoji karcinómov žalúdka. Avšak, nedávne štúdie ukázali, že rakovina žalúdka vzniku nádorov bol charakterizovaný mucín expresie. Tak, expresné vzory proteínov bunkového cyklu súvisiace boli skúmané v počiatočnej fáze karcinómov žalúdka diferencované typu zistiť akékoľvek Mechanistické vzťahy s mucínu fenotypmi.
Metódy
imunologické farbenie pre cyklin D1, A, E, a p21, p27, p53 a β-katenin bolo vyšetrených zníženie hodnoty bunkového cyklu v žalúdku 190 intramucosal rakoviny diferencované typu. Mucín fenotypy boli stanovené prejavov MUC5AC, MUC6, MUC2 a CD10. bolo tiež skúmalo Ki-67 pozitívnych rýchlosť (PR).
Výsledky
Overexpressions p53, cyklin D1 a cyklin A boli významne častejšie u žalúdočné fenotypu než črevné fenotypu. Cyklin A bol nadmerne exprimovaný v zmiešanom fenotyp v porovnaní s fenotypom črevnej, zatiaľ čo p27 nadmerná expresia bola v črevnej fenotype častejšie než v zmiešanej fenotypu. Zníženie p21 bol obyčajný rys žalúdočné intramucosal karcinómov diferencované typu
skúmaná. Závery
Naše výsledky naznačujú, že hladiny niektorých regulátorov bunkového cyklu sa zdajú byť spojené s mucín fenotypmi karcinómov žalúdka skorých diferencované typu.
pozadí
progresie prostredníctvom bunkového cyklu a bunkové proliferácie sú pod kontrolou radu cyklin a cyklin-dependentnej kinázy (CDK), komplexu [1-3]. Hromadia sa dôkazy ukazujú, že progresia nádorového ochorenia často zahŕňa abnormality v prejavoch cyklin a ďalších génov bunkového cyklu v spojení [1-3]. Abnormality boli nájdené u cyklin D1, A, E a ich spolupracujúcich partnerov, ako sú cyklin-dependentnej kinázy (CDK), ktoré podporujú progresie bunkového cyklu [1, 3]. Navyše tieto progresívne faktory môžu byť inhibovaná blokátory, ako je napríklad p21, p27 a P57, a iné skupiny inhibítora proteínov, vrátane p16, p15 a P18 [4-10]. Nekontrolované proliferácie, ktorá charakterizuje nádorové bunky môžu byť z veľkej časti vysvetliť zisk a /alebo stratu proteínov funkcií, ktoré obsahujú bunkový cyklus. Regulácia týchto proteínov bunkového cyklu súvisiace sa riadia aj ďalšie faktory, vrátane p53 a beta-kateninu a ich zmien tiež narušiť bunkový cyklus, čo vedie k nekontrolovanej proliferácii [11-15].
Z uvedenej bunkovej cyklu je príbuzných proteínov, kľúčové regulátory progresie cez G1 fáze bunkového cyklu sú cyklin D1 a cyklin E, p53, p21 a p27 [1, 4, 6, 12]. Ich abnormálne prejavy boli, že hrá kľúčovú úlohu v progresii vzniku nádorov a zistilo sa, že je narušený v rade ľudských malignít. Cyklin A je tiež členom superrodiny proteínov cyklin, ktorý môže byť aktivovaný v priebehu prechodu z G1 do S fázy bunkového cyklu. Abnormálne prejavy cyklin A sú v korelácii s zlými výsledkami v rôznych ľudských nádorov [8, 9]. Okrem toho, nukleárnej expresie beta-kateninu sa podieľa na gastrointestinálne rakoviny [14, 15]. β-katenin akumuluje v jadre z dôvodu znehodnotenia signálu dráhy Wnt, a jeho jadrový expresie podporuje progresiu bunkového cyklu a bunkovej proliferácie [14, 15]. Avšak, k dnešnému dňu, jej činnosť nebolo preukázané, že ovplyvňujú patogenéze skorých karcinómov žalúdka diferencované typu.
Nedávne štúdie ukázali, že bunkové mucín výrazy a nádorové fenotypmi sú spojené s klinicko-patologické nálezy a vzniku nádorov v differentiated- napíšte rakoviny žalúdka [16-19]. Na mucín fenotypy nádorov boli primárne rozdelené do 3 skupín: žalúdočné, črevné a zmiešané fenotyp [16, 17]. Žalúdočné fenotyp je charakterizovaný zlými výsledkami, odlišné histologické črty a špecifický subtyp genetických zmien, vrátane mikrosatelitních nestabilita (MSI) [17, 18]. Naproti tomu črevnej fenotyp je veľmi dobre diferencovaný typu, s nízkou proliferačnej aktivitou a nedostatok MSI [17]. Vyjadrenie mucínu nádorovými bunkami nádorových definovať vlastnosti v karcinómov žalúdka [16-19]. Preto je dôležité pre pochopenie raných tumorigeneis z karcinómov žalúdka skúmať biologické zmeny v súlade s týmito mucínu fenotypov [16-19].
Aj keď rad štúdií týkajúcich sa prejavov faktory bunkového cyklu súvisiace boli popísané [ ,,,0],3-7], združenia skorých karcinómov žalúdka diferencované typu a ich mucín fenotypmi a zmeny proteínov bunkového cyklu súvisiacich nie sú úplne objasnené. V tejto štúdii sme skúmali abnormality proteínov bunkového cyklu súvisiacich skorej fáze karcinómov žalúdka diferencované typu založené na mucín fenotypmi.
Metódy
pacientov
materiály pre túto štúdiu boli získané od 190 pacientov s primárnej skoré rakoviny žalúdka, ktoré boli diagnostikované na oddelení molekulárnej diagnostické patológia, Ústav patológie, Iwate Medical University, Morioka, Japonsko. Informovaný súhlas bol daný u všetkých pacientov, ktoré sme skúmali. Navyše, naše štúdia bola schválená etickou komisiou naše (názov, molekulárnej analýzu gastrointestinálnych nádorov a okolité sliznice, referenčné číslo, H21-140, etická komisia Iwate lekárskej univerzity). Tieto nádory boli v súlade s intramucosal rakoviny diferencované typu, a boli získané zo vzoriek endoskopické podslizničním pitvy (ESD). Histologické kritériá používané pri výrobe histologické diagnózy boli zostavené na základe našich nemocníc kritérií [16], ktoré boli upravené od tých japonskej spoločnosti pre výskum pre karcinómov žalúdka [20], pretože existujú rozdiely v histologické rozsudkov medzi japonskými a západnej patológov. Detailné klinicko-patologická dáta (vek pacienta, pohlavie, miesto nádoru, veľkosť nádoru, makroskopické typ a stupeň diferenciácie nádoru) sú uvedené v ďalšej súbor 1.
v tejto štúdii, intramucosal rakoviny diferencované typu boli sub-rozdelené do 3 skupín podľa nádoru jadrovej triedy: nízke, stredné alebo vysoké. Stupeň nádoru bol stanovený podľa skôr publikovaných kritérií [17]. Stručne povedané, rakovina nízkeho stupňa bola diagnostikovaná prítomnosť buniek s rozšírenou, hyperchromatická jadra, ktoré boli do značnej miery obmedzené na bazálnej časti bunky, ale mal viac nepravidelné a komplexné žľazy ako žalúdočné adenómov. Nádory, ktoré obsahovali bunky, ktoré majú zjavnú stratu polarity, vysokú jadrové nezrovnalosti, zväčšený jadierko a hyperchromatin boli klasifikované ako vysoko kvalitných druhov rakoviny. Vysoko kvalitná rakoviny často vykázali významný architektonický atypiu, ako je napríklad vysoké architektonické alebo žliaz skreslenie. Intermediate nálezy medzi nízkymi a high-grade karcinómov boli uznané ako medziprodukty rakoviny. Avšak, histologický rozdiel medzi žalúdočné adenómu a karcinómu nízkeho stupňa bolo niekedy veľmi ťažké. Sklíčka sa nezávisle hodnotená 2 skúsenými patológov (S. T. a N. S.); v niektorých prípadoch, v ktorých hodnotenie podľa rôzne výsledky, je výklad zhody bolo dosiahnuté po opätovnom vyšetrení.
Imunohistochémia
Bezprostredne po jeho excízii, vzorky boli fixované v 20% neutrálnom formalínu pufrovanom, vložené do parafínu, znížiť na 3 um parafínové rezy a zafarbené hematoxylínom a eosínu (HE) pre rutinné svetelným mikroskopom. Pre imunohistochemické farbenie, ďalšie 3 um hrubé rezy boli narezané z parafínu zaliate tkaniva a umiestnené na sklíčka poly-L-lyzínom potiahnuté. Stručne povedané, rezy boli zbavené parafínu v xylénu a dehydratácii. Pre stanovenie mucín fenotypy, imunologické bolo robené pre MUC 2 (Ccp58, Novocastra Laboratories, Newcastle, Veľká Británia), CD10 (56C6, Novocastra Laboratories), MUC 5AC (CLH2, Novocastra Laboratories) a MUC 6 (CLH5, Novocastra Laboratories, Newcastle , UK). Okrem toho imunologické bolo vykonané pre p53 (klon, DO7, DAKO, Carpinteria, CA, USA), Ki-67 (MIB-1, Dako), p21 (SX118, Dako), p27 (SX53G8, Dako), cyklin D1 ( SP4, Nichirei Co., Tokyo), cyklin E (13A3, Novocastra Laboratories), cyklin a (6E6, Novocastra Laboratories) a β-katenin (BD, transduction Laboratories). Imunohistochemické
systém používa DAKO Envision +, pozostávajúce z dextranu polyméry konjugovanej s chrenovou peroxidázou (DAKO), ako bolo opísané skôr [16, 17]. Vzorky sa zahrieva v mikrovlnnej rúre v citrátovom pufri (pH 6,0), 3x po dobu 5 minút pri každej 750W pred reakciou s protilátkami (H2500, mikrovlnná rúra procesor, Bio Rad, USA), ako bolo opísané skôr [16, 17]. Hematoxylin bol použitý ako kontrastným farbivom.
Vyhodnotenie mucín expresiu
V tejto štúdii, gastrických nádorov boli rozdelené do 4 skupín podľa ich imunologickej vzory. Žalúdočné fenotyp bol definovaný ako nádory, ktoré majú prevládajúce intracytoplasmatická mucín žalúdočné typu, ako bolo stanovené imunobarvením s ľudským žalúdočného hlienu (MUC5AC) a /alebo pyloru žľazy mucínu (MUC6), ale bez MUC-2 pozitívnych buniek. Črevné fenotyp bol indikovaný nádorom ukazujúci MUC2-pozitívne bunky a /alebo CD10 pozitívne (spolu s okrajom kefu). Tieto nádory boli odlíšené tak, aby tenkého čreva absorpčných buniek. Črevné fenotyp nádory boli sub-rozdelené do 2 skupín: hrubého typ (pozitívne pre MUC 2 iba) a tenkého čreva typu (pozitívny na CD10). Zmesový fenotyp bol definovaný ako nádor, ktorý má v súlade s imunobarvení žalúdočné typu (pozitívnych buniek pre MUC5AC a /alebo pyloru mucínu žľazy) rovnako ako črevné typu mucínu (pozitívnych buniek na CD10 a /alebo MUC2). Konečne, nádory bez imunologické farbenie buď žalúdočným alebo črevným fenotypy boli priradené k "unclassified" typu. Immunopositive výsledky pre > 5% nádorových buniek, boli považované za pozitívne, a immunopositive výsledky pre < 5% ako negatívne, v súlade s predchádzajúcimi správami [16, 17, 21].
Meranie Ki-67 pozitívna rýchlosť (PR)
Náhodné oblasti z každej vzorky, bolo vybraných na to, aby počet Ki-67 pozitívnych jadier , Ki-67 pozitívnych rýchlosť bola vypočítaná ako percento z Ki-67 pozitívnych bunkových jadier nádorových stanovené v 10 s vysokým výkonom polí (HPF, × 400), ktorý bol stanovený po spočítaní aspoň 500 nádorových buniek na vzorku nádoru. Nádor proliferačnej aktivita bola klasifikovaná do 2 skupín: vysoké a nízke. Proliferačnej aktivita bola stanovená v súlade s našimi kritérií [16, 17]. Stručne povedané, PR tkaniva bola meraná ako v nádorovom tkanive a jeho obklopujúce nenádorových tkanív. Vysoká proliferácia bola považovaná, pokiaľ PR bol v nádorovom tkanive vyššie ako v non-neoplastické tkaniva. Nízka proliferácie bolo posudzované, či PR bol v nádorovom tkanive nižší ako v non-neoplastické tkanive.
Imunohistochemické posúdenie proteínov bunkového cyklu v súvislosti s
Podiel nádorových buniek v sekcii bola hodnotená voľným okom a pridelí skóre tak zhrnuté v ďalší súbor 2A. Celkom 500 buniek bol počítaný v náhodných polí z reprezentatívnych oblastí lézie. Pre všetky markery, iba nukleárna farbenie bol považovaný za pozitívny. Intenzita sfarbenia bola odhadnutá na 5-bodovej škále (0 až 6+) a skóre bolo pridelené podľa intenzity (Ďalší súbor 2B). Index farbenie bol jednoduchý multiplikatívnej produkt bunkovom a farbenie skóre. Ďalej, vysoká expresia nádorových buniek bola zaznamenaná v prípade, že index farbenie bola vyššia v nádorových bunkách ako v jeho blízkom nenádorových tkanív. Na rozdiel od toho nízka expresia nádorových buniek bola zaznamenaná v prípade, že index farbenie bola nižšia alebo rovná v nádorových bunkách ako v non-neoplastické tkaniva. Napríklad reprezentatívne údaj je znázornené na obrázku 1. Pôvodné kritériá boli popísané skôr [22], a existujúce kritériá sa použili s drobnými úpravami. Dve sekcie boli zafarbené a hodnoty boli založené na priemere zo 2 jednotlivých výsledkov. Obrázok 1 Príklad žalúdočné intramucosal rakoviny diferencované typu. Zatiaľ čo index skóre pre cyklin D1 výrazu je 16 v žalúdočnej sliznici rakoviny (B), je skóre 4 vo svojom blízkom nenádorových sliznice (a). Nádor, ktorý je zobrazený na obrázku 1B je považovaný za dobre diferencovaných adenokarcinóm japonskými patológov, aj keď tento nádor je považovaný za žalúdočné adenóm alebo dysplázia západnej patológovia.
Štatistická analýza
Výsledky sú uvedené ako stredné hodnoty a stredné hodnoty. Štatistická analýza používal Tamhane test pre porovnanie medzi skupinami 3 a Chi-kvadrát testy pre porovnanie medzi 2 skupinami. Štatistická významnosť bola stanovená na p < 0.05 úrovni.
Výsledky
klinicko-patologickými charakteristikami
Ako je ukázané na ďalší súbor 3 190 žalúdočné intramucosal diferencované typu karcinómov, 23 (12,1%) bolo žalúdočné fenotypu, 85 (44,7%) boli črevné fenotyp a 79 (41,6%) bolo klasifikované ako zmiešané fenotypu. Iba 3 (1,6%) nádory boli z neutajovaných typu. Klinicko-patologické nálezy založené na mucínu fenotypu sú tiež uvedené v ďalšej súbor 3. Neboli zistené žiadne významné rozdiely na veku, veľkosti nádoru, umiestnenie, mikroskopické typu alebo histologického typu medzi 3 fenotypmi. Avšak, pre žalúdočné a zmiešaných fenotypy, bol výskyt vysokého stupňa nádorov boli významne vyššie u žalúdočných a zmiešané fenotypmi ako črevnú fenotyp (p < 0,01 a p menšie ako 0,05, v tomto poradí). Okrem toho, pomer muži /ženy pre zmiešané fenotyp bol ower než pre ostatné typy (p menšie ako 0,05),
v tejto štúdii, žalúdočné fenotypy boli rozdelené do 3 čiastkových fenotypov :. MUC5AC (+) /MUC6 (+), MUC5AC (+) /MUC6 (-) a MUC5AC (-) /MUC6 (+). Pätnástich (65,2%) mal MUC5AC (+) /MUC6 (+) vzor, ​​5 (21,7%) mal MUC5AC (+) /MUC6 (-) vzor a 3 (13,1%), boli ďalej členené ako MUC5AC (-) /MUC6 (+) vzor. Medzi 3 žalúdočných čiastkových fenotypov, neboli zistené žiadne rozdiely klinicko-patologické. Na rozdiel od toho črevnej fenotypy boli rozdelené do tenkého čreva (N = 67) a hrubého čreva (n = 18), fenotypy. Neboli zistené žiadne významné rozdiely medzi nimi na veku, veľkosti nádoru, umiestnenie, makroskopické typu alebo histologického typu.
Vyjadrenie proteínov bunkového cyklu v súvislosti s tým, mucín fenotypmi
č ​​p53 zvýšená expresia bola nájdená v každom okolitom non-neoplastických sliznice. Nadmerná expresia p53 bola pozorovaná u 33 zo 190 prípadov, ktoré sme sa zaoberali (17,4%) a bola častejšie vidieť v žalúdočnej fenotypu (10/23, 43,5%) v porovnaní s ostatnými typmi 2 (črevné fenotypu, 13/85, 15,3 % a zmiešané fenotyp, 9/79, 11,4%). Aj keď rozdiel medzi žalúdočné a črevné fenotypmi nedosiahol štatistickú významnosť (p = 0,054), žalúdočné a zmiešané fenotypmi vykazovali významný rozdiel (p menšie ako 0,05). Okrem toho, žiadna nadmerná expresia p53 bola nájdená v nízkeho stupňa rakoviny (0/26). Na rozdiel od toho p53 bol nadmerne exprimovaný v 11 zo 103 so stredným stupňom rakoviny (10,7%) a 22 z 61 vysoko kvalitných druhov rakoviny (36,1%). Neboli nájdené významné rozdiely medzi rakovinou vysoko kvalitné a nízkej kvality alebo stredným rakoviny (p < 0,01).
P21 bol primárne vyjadrená v povrchovej epitelu črevnej metaplastického žľazy a žalúdočné foveolární epitelu. Frekvencia zníženej expresie p21 bola 59 190 nádorov (31,1%). Znížená expresia p21 bolo všeobecne pozorované v žalúdočných, črevných a zmiešané fenotypmi. Nebol žiadny významný rozdiel pre zníženie prejavov p21 medzi 3 fenotypmi.
Expresia p27 bola obmedzená na povrchové epitelu a spodnej časti črevného metaplastického žľazy. Frekvencia zníženou expresiou p27 bol v žalúdočných rakoviny, ktoré sme sa zaoberali (12/190, 6,3%), veľmi nízka. Na rozdiel od toho je frekvencia pre nadmernú expresiu p27 bola pozorovaná u 53 z 190 nádorov (27,9%). Frekvencia P 27 nadmernej expresie bola vyššia v črevnom fenotype (tridsať jedna osemdesiat pätiny, 36,5%) ako v žalúdku (6/23, 26,1%) a zmiešané fenotypy (16/79, 20,2%). Tieto rozdiely však neboli štatisticky významné.
Cyklín D1 bol vyjadrený v dolnej polovici črevnej metaplastického žľazy. V karcinómov žalúdka vyšetrených, 27 190 prípadov (14,2%) bolo nadmerné expresiu cyklin D1. Cyklin D1 bola nadmerne vystavený v žalúdočnej fenotypu u 7 z 23 prípadov (30,4%). Pre porovnanie, nadmerná expresia cyklin D1 bola nájdená u 11,8% (10/85) a 12,7% (10/79), črevné a zmiešané fenotypy, v danom poradí. Žiadny významný rozdiel bol zistený medzi žalúdočné fenotyp a ostatné typy.
Expresia cyklin A bol primárne obmedzená na dolnej polovici črevnú metaplastického žľazy. Pozitívne farbenie na cyklin A, bola zistená u 42,1% (80/190). Frekvencia cyklin A zvýšenú expresiu bola vyššia v žalúdočnej fenotypu (16/23, 69,6%) než v črevnom fenotypu (25/85, 29,4%; p 0,01). Avšak, nebol nájdený žiadny významný rozdiel medzi žalúdočné a zmiešané fenotypov (39/79, 49,4%).
Nenádorových žľazy boli väčšinou negatívne na cyklin E. V karcinómov žalúdka vyšetrených, frekvencia cyklin E nadmernej expresie je veľmi nízka. Žiadny významný rozdiel medzi 3 mucínu fenotypy pozorované.
V tejto štúdii len nukleárnej výraz pre beta-kateninu boli považované za pozitívne. Žiadny jadrový expresie beta-kateninu bol pozorovaný v okolitom nenádorových sliznici, s výnimkou pyloru žliaz. Väčšina pyloric žľazy vyjadril jadrovej beta-katenin. Jadrová expresie β-katenin bola nájdená u 80 z 190 nádorov (36,8%). Aj keď je črevná fenotyp (44/85, 51,8%), ukázala, že najvyššiu frekvenciu pre jadrovú beta-kateninu medzi 3 fenotypy, rozdiel nebol významný.
Vysoká miera proliferácie nádorových buniek bolo preukázané u viac ako 30% Ki -67 PR vo väčšine karcinómov žalúdka, ktoré sme skúmali. Podľa našich kritérií, vysoká proliferácie bola nájdená u 101 190 nádorov (53,2%). Vysoká proliferácie nádorových buniek bola častejšie pozorovaná u žalúdočných a zmiešané fenotyp v porovnaní s fenotypom črevnej (p < 0,01 a p menšie ako 0,05). Sme zhrnuli tieto výsledky pre proteíny bunkového cyklu súvisiace založených na mucín fenotyp na obrázku 2. Okrem toho sa reprezentatívny príklad je znázornený na obrázku 3. Obrázok 2 frekvenciách proteín bunkového cyklu výrazov súvisiacich s žalúdočné, črevné a zmiešané fenotypov. Žalúdočné fenotyp rakoviny sú charakterizované tým, p53 a cyklin A overexpressions. Hoci frekvencia p27 nadmernej expresie medzi črevné fenotypu a ďalších fenotypov nedosiahol štatistické rozdiely, môže to byť charakteristické pre črevné fenotypu. Zníženie p21 a akumulácie beta-kateninu sú bežne pozorované v 3 fenotypov. Ki-67 pozitívnych rýchlosť je v žalúdočnej fenotypu alebo zmiešané fenotypu vyššia ako v črevnej fenotypu. Štatistická porovnanie použité Tamhane testy pre všetky 3 fenotypmi.
Obrázok 3 Ako reprezentatívny príklad črevnej intramucosal rakoviny diferencované typu žalúdočné fenotypu. a. Nízky pohľad sila nádorového tkaniva. b. Vysoký výkon pohľad na nádorové tkanivá. c. p53 nadmerná expresia bol videný. d. p21 bol znížený. e. p27 bol nadmerne vystavený. f. Nadmerná expresia cyklin A. g. Nízka expresia cyklin D1. h. Iba Muc2 bol exprimovaný v tomto nádoru, čo naznačuje, črevné fenotyp.
Diskusia
Aj napriek klesajúci trend výskytu, rakovina žalúdka zostáva významným zdravotným problémom na celom svete, a to je najčastejší nádor v Japonsku. rakovina Intramucosal je definovaná ako nádor na najviac ranej fáze rakoviny žalúdka. Je nevyhnutné skúmať intramucosal rakoviny pre vyhodnotenie patogenéze rakoviny žalúdka. Je všeobecne uznáva, že rakovinové bunky vzniká v dôsledku abnormalít v regulácii bunkového cyklu, ktorý sa skladá z niekoľkých proteínov cyklu súvisiacich buniek, ako sú napríklad cyklin, cyklin inhibítory kinázy závislé, p53 a beta-kateninu. Navyše nedávne štúdie ukázali, že rôzne klinicko-patologické nálezy rakoviny žalúdka sa vyznačujú mucínu výrazy. Študovali sme abnormálne prejavy proteínov bunkového cyklu súvisiace, ktoré podporujú žalúdočné karcinogenéze založené na mucín fenotypmi v intramucosal rakoviny žalúdka diferencované typu.
V tejto štúdii, imunohistochemické vyšetrenie bola použitá na sledovanie hladiny expresie proteínov bunkového cyklu účely. Immunopositivity pre proteíny bunkového cyklu súvisiacich nádorovom tkanive bola stanovená porovnaním hladín medzi nádorovú tkanív a jeho okolie nenádorových tkanív. Podľa týchto kritérií, úroveň immunopositivity nádorového tkaniva sa môžu líšiť pre každý prípad. Avšak, oddeľujúce parametre v rámci týchto druhov rakoviny na "nízke" a kategórie "high" na základe porovnania týchto faktorov s non-neoplastické tkaniva môže byť nekonvenčné metódy. "Non-neoplastickým" tkanivo obsahuje gastritídu (chronické alebo chronickej aktívnej) a /alebo črevné metapláziou; parametre v týchto rôznych zápalových alebo metaplastického tkanivách by sa značne líšia. To môže byť väčší zmysel iba absolútnu mieru, (to znamená, že skutočný%), skôr než táto vnútorná relatívnej hodnoty. Avšak, domnievame sa, že tento imunohistochemické kritérium je dôležité pre zistenie potenciálnych aktivity proteínov bunkového cyklu v súvislosti s už v ranom štádiu karcinómov žalúdka diferencované typu, vzhľadom na to, že non-neoplastickým tkanivo obklopujúce nádorového tkaniva je úzko spojený s vývojom nádorov.
To bolo veril, medzi patológmi, že žalúdočné fenotyp karcinómu žalúdka vykazuje nízky stupeň atypiu v rakoviny žalúdka intramucosal diferencované typu (19). Avšak, v tejto štúdii, v žalúdočných intramucosal diferencované typu karcinómov, ktoré sme skúmali, žalúdočné fenotypu vykazovali vysoko kvalitné atypiu. Hoci je dôvod, prečo zostáva neznámy, jedným z možných dôvodov je, že žalúdočné fenotyp ukazujúci low-grade atypiu, ktorý sa podobá žalúdočné výstelky foveolární histologicky, môže byť zahrnuté v predchádzajúcich štúdiách. V tejto štúdii, bol pozorovaný iba jeden taký nádor. Okrem toho, tieto rozdiely by mohli byť vzhľadom na počet vzoriek alebo k etnickým alebo etiologických faktorov. Je dobre známe, že nadmerná expresia p53 je v korelácii s diferenciáciou tumoru. V tejto štúdii sme naznačujú, že je vhodné, aby vykazujú vysokú frekvenciu Nadmerná expresia p53 na žalúdočné fenotyp v porovnaní s inými fenotypmi.
V tejto štúdii, p53 nadmerná expresia sa častejšie vyskytujú v žalúdku fenotypu než v črevnej alebo v zmesi fenotypmi. Toto zistenie naznačuje, že nadmerná expresia p53 hrá zásadnú úlohu, aspoň v ranom vývoji rakoviny žalúdka fenotypu, keď predchádzajúce štúdie ukázali progresívne zvýšenie Nadmerná expresia p53 v karcinómov žalúdka od začiatku do pokročilých štádiách [12]. V tomto
štúdie, znížená expresia p21 bola pozorovaná približne u 30% z 3 mucínu fenotypmi. Predchádzajúce štúdie ukázali, že nízka expresia p21 koreluje s prognózou pacienta v karcinómu žalúdka [5, 6]. Avšak, len málo je známe o expresia p21 u karcinómov žalúdka založených na mucín fenotypmi. Navyše akékoľvek združenie expresie p21 s nádorom štádia nádoru (hĺbka) zostáva neznámy. Naše zistenia naznačujú, že znížená expresia p21 hrá spoločné úlohu v ranom vývoji 3 mucínu fenotypmi karcinómov žalúdka diferencované typu. Avšak, predchádzajúce štúdie naznačila, že progresívne pokles expresie p21 došlo v pokročilej fáze rakoviny žalúdka diferencované typu od ranej fáze [6]. p21 expresie tiež v korelácii s prejavmi iných proteínov bunkového cyklu súvisiacich, ako je napríklad p27 a Ki-67, prípadne prostredníctvom dráhy p53-závislej [1, 5, 6]. Bola vyslovená hypotéza, že p21 spolupracuje s p53, a, ako výsledok, bunkový cyklus je riadený prostredníctvom dráhy p53-závislej [1, 5]. Ďalej sa predpokladá, že p21 je tiež inhibovaná spoluprácu s p27 [1, 5]. V tejto štúdii sme však objavená ani koreláciu zníženie p21 s redukciou p27 ani inverzný korelácia redukcia p27 p53 s nadmernou expresiou (dáta nie sú uvedené). Navrhujeme, že existuje iná cesta pre riadenie bunkového cyklu v ľudských karcinómov žalúdku.
Je dobre známe, že p27 je typický nádorový supresorový gén [1-3]. Avšak, nedávna štúdia ukázala, že, že v niektorých prípadoch, p27 inhibuje bunkový cyklus, v iných prípadoch podporuje prechod do ďalšej fázy bunkového cyklu [23]. Bolo oznámené, že jeden alebo strata nízka expresie p27 je v korelácii s progresiou nádoru alebo prognózu pacienta [24, 25]. Na rozdiel od iných štúdiách sme ukázali, že nízka expresia (zníženie) p27 mal veľmi nízku frekvenciu v našej radu karcinómov žalúdka. Podľa súčasných zistení, znížená expresia p27 hrá podradnú úlohu v rozvoji rakoviny žalúdka diferencované typu.
Naopak, nadmerná expresia p27 sa často nachádza v črevnej fenotypu v porovnaní s inými fenotypy 2, aj keď je rozdiel medzi nimi nedosiahli štatisticky významné úrovne. Či je tento nadmerná expresia p27 súvisí s inhibíciu bunkového cyklu alebo progresie bunkového cyklu nie je známa, aj keď niekoľko vysvetlení sú navrhnuté. Prvý z nich je, že p27, ktorý je nadmerne exprimovaný pre potlačenie progresie bunkového cyklu u nádorových buniek vedie z mechanizmu negatívnej spätnej väzby. Naopak, druhý vysvetlením je, že nadmerná expresia p27 je pozitívne spojená s progresiou bunkového cyklu u nádorových buniek; to znamená, že p27 pôsobí ako onkogénne faktor [23]. Navyše nedávna štúdia ukázala, že expresia p27 je regulovaná expresia Skp2, ktorý je ubiquitin ligázu podjednotku p27 [26]. Podľa tejto správy, expresia p27 bola nepriamo úmerná Skp2 výrazom.
Cyklín D1 nadmerná expresia preukázali iba nízke frekvencie v počiatočnom štádiu rakoviny žalúdka diferencovaných typu (27/190, 14,2%). Avšak, aj keď rozdiely nedosiahli významné úrovne, frekvencia cyklin D1 nadmernej expresie bola v žalúdočnej fenotypu vyššia ako v črevnej a zmiešané fenotypmi. Cyklin D1 bol predtým skúmal v niekoľkých sériách karcinómov žalúdka, s hlásené frekvenciou 20 ~ 56% z nadmernej expresie je hlásených [27-29], odlišné od našich výsledkov. Ako možný dôvod pre tieto rozdiely v cyklin D1 zvýšenej expresii, keď rakoviny čoskoro diferencované typu, s výnimkou žalúdka fenotyp, nevyžaduje zvýšenie cyklin D1, akonáhle vyvinul nádor, nádorové bunky potrebujú vysokú úroveň cyklin D1 progresie nádoru. To naznačuje, že cyklin D1 nadmerná expresia koreluje s prognózou pacienta v karcinómov žalúdka [28].
Nadmerná expresia cyklin A bola tiež viac prevláda v žalúdku a zmiešané fenotypov v porovnaní s črevnej fenotypu. To naznačuje, že nadmerná expresia cyklin A hrá hlavnú úlohu pri tvorbe nádorov žalúdka a zmiešaných fenotypmi. Teda v karcinómov žalúdka, získavanie žalúdočného hlienu expresie môže byť spojená so zvýšenou expresiu cyklin A, ktorý potom vedie k vysokým nádorového bujnenia. Okrem toho, cyklin A bol blízko spojený s prognózou pacienta alebo nádorové agresivita [8, 9]. To môže znamenať, že nadmerná expresia cyklin A závisí ako od vývoja nádoru a progresie približne polovicu karcinómov žalúdka diferencované typu.
V tejto štúdii, cyklin E nadmerná expresia vykazovali nízke frekvencie v 3 fenotypmi. Na rozdiel od predchádzajúcej štúdie ukázali, že zvýšená expresia cyklin E korelovala s zlou prognózou [4, 10], aj keď kontrastné výsledky boli navrhnuté [30]. Súčasné výsledky ukazujú, že nadmerná expresia cyklin E nehrá žiadnu významnú rolu v ranom tumorigenezi gastrických nádorov diferencované typu. Okrem toho, že nadmerná expresia cyklin E sa môže v prvom rade podporovať progresiu karcinómov žalúdka. Tieto zistenia naznačujú, že vysoké proliferácia žalúdočné fenotypu môžu byť charakterizované nadmernou expresiu cyklin D1 a /alebo cyklin A, a toho, že zmiešané fenotyp je spojená s nadmernou expresiu cyklin A.
Je dobre známe, že β-katenin expresie zvyšuje reguláciu bunkového cyklu a hrá ústrednú úlohu v Wnt signálna transdukcia [14, 15]. V tejto štúdii, je zaujímavé poznamenať, že β-katenin expresie bola bežne pozorované v skorých karcinómov žalúdka diferencované typu, ktoré sme skúmali. Je už pripustil, že β-katenin vyjadrenie je zásadný pre rozvoj hrubého adenómy [31, 32]. Súčasné výsledky a predchádzajúce štúdie týkajúce kolorektálneho adenómu naznačujú, že β-katenin expresie môže byť spoločný zmena v ranom vývoji gastrointestinálnych nádorov [31]. Možno to vysvetliť tým, zistenie, že v žalúdku rakoviny, génovej promótory spojené s signálnej dráhy Wnt sú veľmi metylovaných [32-34], čo vedie k jadrovej akumulácie β-katenin expresie.
Závery
zhrnutie, navrhujeme, aby bunkové mucín fenotypmi intramucosal diferencované typu adenokarcinóme žalúdka sú závislé na odlišných zmeny bunkového cyklu súvisiacich, a že klinicko-patologické nálezy vyplývajú z rôznych ciest na základe mucín výraz: žalúdočné, črevné a zmiešané fenotyp , Obrázok 4 znázorňuje nový Karcinogenéza model pre intramucosal adenokarcinómov diferencované typu, ktorá sa opiera o ich mucínu fenotypu. na abnormality proteínov bunkového cyklu súvisiacich na báze overexpressions p53 a cyklin A charakterizovať fenotyp rakoviny žalúdka, vzhľadom na to, že nadmerná expresia p27 môže byť spojená s rozvojom fenotypových rakoviny čriev.

• Združenie sa PTPN11 G /A polymorfizmus v IntronA 3 s Helicobactor pyloriseropositivity, žalúdočné atrofia a rakoviny žalúdka v japončine
• Systematický prehľad a metaanalýza laparoskopickej a otvorenej gastrektómii pre pokročilú rakovinou žalúdka