Analyse av cellesyklusrelaterte proteiner i mage intramucosal differensiert-type kreft basert på mucin fenotyper: en roman hypotesen om tidlig magekreftutvikling basert på mucin fenotype

Analyse av cellesyklusrelaterte proteiner i mage intramucosal differensiert-type kreft basert på mucin fenotyper: en roman hypotesen om tidlig magekreftutvikling basert på mucin fenotype
Abstract
Bakgrunn
Unormale cellesyklus regulatorer er fellestrekk i humane kreftformer, og flere av disse faktorene er assosiert med tidlig utvikling av gastrisk kreft. Imidlertid har nyere studier vist at magekreft tumorigenesis var preget av slimstoffekspresjon. Dermed ble uttrykk mønstre av cellesyklusrelaterte proteiner undersøkt i den tidlige fasen av differensiert-type mage kreft å fastslå noen mekanistiske relasjoner med slimstoff fenotyper.
Metoder
Farging for Cykliner D1, A, E og p21, p27, p53 og β-catenin ble anvendt for å undersøke svekkelser av cellesyklus i 190 gastrisk intramucosal differensiert-type kreft. Mucin fenotyper ble bestemt av de uttrykk for MUC5AC, MUC6, MUC2 og CD10. En Ki-67 positive rate (PR) ble også undersøkt.
Resultater
Overexpressions av p53, cyclin D1 og cyclin A var signifikant hyppigere i en gastric fenotype enn en intestinal fenotype. Cyklin A ble overuttrykt i et blandet fenotype sammenlignet med en tarm fenotype, mens p27 overekspresjon var hyppigere i tarm-fenotype enn i en blandet fenotype. Reduksjon av p21 var et fellestrekk ved gastrisk intramucosal differensiert-type kreft undersøkt.
Konklusjoner
Våre resultater tyder på at nivåene av enkelte cellesyklus regulatorer synes å være assosiert med mucin fenotyper av tidlig mage differensiert-type kreft.
Bakgrunn
progresjon gjennom cellesyklusen og cellulær proliferasjon er under kontroll av en serie av cykliner og cyklin-avhengige kinase (CDK) -komplekser [1-3]. Samle bevis viser at utviklingen av tumorigenesis innebærer ofte unormalt i uttrykk av cykliner og andre celle-syklus relaterte gener [1-3]. Avvik er funnet for cykliner D1, A, E og deres samarbeidspartnere, for eksempel cyclin-avhengig kinase (CDK), som fremmer cellesyklusprogresjon [1, 3]. I tillegg kan disse progressive faktorene bli inhibert ved å blokkere, slik som p21, p27 og p57, og en annen gruppe av inhibitor proteiner, inkludert p16, p15 og p18 [4-10]. Den ukontrollerte proliferasjonen som kjennetegner tumorceller kan i stor grad forklares med forsterkningen og /eller tap av proteinfunksjoner som utgjør cellesyklusen. Regulering av disse cellesyklusrelaterte proteiner styres også av andre faktorer, inklusive p53 og β-catenin, og deres endringer også svekke cellesyklus, noe som resulterer i ukontrollert spredning [11-15].
Av ovennevnte celle cycle- beslektede proteiner, viktige regulatorer av progresjon gjennom G1-fasen av cellesyklusen er cyklin D1 og cyclin E, p53, p21 og p27 [1, 4, 6, 12]. Deres unormale uttrykk har vært antatt å spille sentral rolle i utviklingen av tumordannelse og har blitt funnet å bli forstyrret i en rekke humane maligniteter. Cyklin A er også et medlem av superfamilien cyclin-proteinet som kan aktiveres ved overgangen fra G1 til S-fasen av cellesyklusen. Unormale uttrykk for cyclin A er korrelert med dårlige resultater i ulike kreft hos mennesker [8, 9]. I tillegg er atom ekspresjon av β-catenin implisert i gastrointestinale cancere [14, 15]. β-catenin akkumuleres i kjernen på grunn av svekkelser av Wnt signalveien, og dets atom ekspresjon fremmer progresjonen av cellesyklusen og cellulær proliferasjon [14, 15]. Men til dags dato, aktiviteten er ikke vist å påvirke patogenesen av tidlige differensiert-type mage kreft.
Nyere studier har vist at mobilnettet mucin uttrykk og tumor fenotyper er knyttet til klinisk-patologiske funn og tumorigenesis i differentiated- skriver mage kreft [16-19]. Mucin fenotyper av svulster er primært klassifisert i 3 typer: mage, tarm og blandede fenotyper [16, 17]. Den mage fenotype er preget av dårlige resultater, distinkte histologiske funksjoner og en bestemt subtype av genetiske endringer, inkludert mikro ustabilitet (MSI) [17, 18]. I motsetning til dette, er tarm fenotypen et meget godt differensiert type, med lav proliferativ aktivitet og mangel på MSI [17]. Uttrykkene av slimstoffer av kreftceller definere tumor egenskaper i mage kreft [16-19]. Derfor er det viktig for forståelsen av tidlige tumorigeneis av mage kreft for å undersøke biologiske endringer i henhold til disse slimstoff fenotyper [16-19].
Selv om en rekke studier angående uttrykk for cellesyklusrelaterte faktorer har blitt rapportert [ ,,,0],3-7], foreninger av tidlige differensiert-type mage kreft og deres mucin fenotyper og endringer av cellesyklusrelaterte proteiner er ikke fullt ut forstått. I denne studien undersøkte vi forandringer av cellesyklusrelaterte proteiner av den tidlige fasen av differensiert-type mage kreft basert på mucin fenotyper.
Metoder
Pasienter
Materialer for denne studien ble hentet fra 190 pasienter med primære tidlig mage kreft som ble diagnostisert ved Divisjon for molekylær diagnostisk patologi, Avdeling for patologi, Iwate Medical University, Morioka, Japan. Informert samtykke ble gitt i alle pasienter som vi undersøkte. I tillegg ble vår studie godkjent av vår etisk komité (tittel, molekylær analyse av gastrointestinale svulster og de omkringliggende slimhinnen, referansenummer, H21-140, etikk komité av Iwate Medical University). Disse svulstene var i samsvar med intramucosal differensiert-type kreft, og ble hentet fra prøver av endoskopisk submucosal disseksjon (ESD). De histologiske kriterier som brukes til å lage histologiske diagnoser var basert på våre sykehus kriterier [16], som ble endret fra de av den japanske Research Society for Gastric Kreft [20], som avvik i histologiske dommer eksisterer mellom japanske og vestlige patologer. Detalj klinisk-patologiske data (pasientens alder, kjønn, stedet for svulst, tumor størrelse, makroskopisk type og grad av tumor differensiering) er vist i tilleggsfiler 1.
I denne studien intramucosal differensiert-type kreft ble sub-klassifisert i 3 grupper i henhold til svulsten atom karakter: lav, middels eller høy. Tumoren karakter ble bestemt i henhold til tidligere publiserte kriterier [17]. I korte trekk, ble lav grad av cancer diagnostisert ved tilstedeværelsen av celler med forstørrede, hyperchromatic kjerner som i stor grad var begrenset til basal partier av cellene, men som hadde mer uregelmessig og komplekse kjertler enn gastrisk adenomer. Svulster som inneholdt celler som har et åpenbart tap av polaritet, høy kjerne uregelmessighet, ble forstørret kjerne og hyperchromatin klassifisert som høy grad av kreft. Den høye grad av kreft viste ofte betydelig arkitektonisk atypi, for eksempel høy arkitektonisk eller kjertel forvrengninger. Mellom funn mellom lav og høy grad av kreft ble anerkjent som mellom kreft. Men den histologiske skillet mellom mage adenom og lav grad av kreft var noen ganger veldig vanskelig. Glassene ble uavhengig evaluert av 2 erfarne patologer (S. T. og N. S.); i noen tilfeller der evalueringene gitt ulike resultater, ble en enighet tolkning nådd etter re-eksamen.
Immunohistochemistry
Umiddelbart etter utskjæring, ble prøvene fiksert i 20% nøytral bufret formalin, innstøpt i parafinvoks, skåret i tre mikrometer parafinsnitt og farget med hematoksylin og eosin (HE) for rutine lysmikroskopi. For immunhistokjemisk farging, ble ytterligere 3 mikrometer tykke seksjoner kuttet fra parafin-embedded vev og plassert på poly-L-lysin-belagte glassplater. I korte trekk ble snittene deparaffinized i xylen og dehydrert. For bestemmelse av mucin fenotyper, ble farging gjort for MUC 2 (Ccp58, Novocastra Laboratories, Newcastle, UK), CD10 (56C6, Novocastra Laboratories), MUC 5AC (CLH2, Novocastra Laboratories) og MUC 6 (CLH5, Novocastra Laboratories, Newcastle , UK). I tillegg ble farging gjort for p53 (klone, DO7, DAKO, Carpinteria, CA, USA), Ki-67 (MIB-1, Dako), p21 (SX118, Dako), p27 (SX53G8, Dako), cyclin D1 ( SP4, Nichirei Co., Tokyo), cyclin E (13A3, Novocastra Laboratories), cyclin A (6E6, Novocastra Laboratories) og β-catenin (BD, Transduction Laboratories).
Immunohistochemistry brukte DAKO Envision + system, bestående av dekstran polymerer konjugert med pepperrot peroksydase (DAKO) som tidligere beskrevet [16, 17]. Prøvene ble varmet opp ved mikrobølge i citrat-buffer (pH 6,0) 3 ganger i 5 minutter hver ved 750 W før reaksjonene med antistoffer (H2500, Mikrobølgeovn prosessor, Bio Rad, USA) som tidligere beskrevet [16, 17]. Hematoxylin ble brukt som counterstain.
Evaluering av slimstoffekspresjon
I denne studien ble mage svulster klassifisert i 4 grupper etter deres farging mønstre. En gastrisk fenotype ble definert som tumorer som har fremherskende intracytoplasmatisk mucin av gastrisk typen, som bestemt ved farging med human gastrisk mucin (MUC5AC) og /eller pyloric kjertel mucin (MUC6), men uten MUC-2-positive celler. En intestinal fenotype ble indikert ved en tumor som viser MUC2-positive celler og /eller CD10 positive (sammen med en børstegrense). Disse svulstene ble differensiert til tynntarms absorberende celler. Tarm fenotype svulster ble sub-klassifisert inn i 2 grupper: colonic type (positiv for MUC 2 bare) og små intestinal type (positive for CD10). En blandet fenotype ble definert som en tumor som har farging i samsvar med gastrisk type (positive celler for MUC5AC og /eller pyloric kjertel mucin), samt tarmtypen mucin (positive celler for CD10 og /eller MUC2). Til slutt, ble tumorer uten farging for enten mage-tarm-fenotyper som er tilordnet en "kategorier" type. Immunopositive resultater for > 5% av tumorcellene ble betraktet som positive, og immunopositive resultater for < 5% som negativ, i overensstemmelse med tidligere rapporter [16, 17, 21].
Måling av Ki-67 positive rate (PR)
Tilfeldige områder fra hver prøve ble valgt som å telle Ki-67 positive kjerner . Ki-67 positive hastigheten ble beregnet som prosentandelen av Ki-67 positive tumorcellekjerner bestemt i 10 høy strøm felt (HPF, x 400) som ble bestemt etter telling på minst 500 tumorceller per tumorprøve. Tumor proliferativ aktivitet ble klassifisert i 2 grupper: høy og lav. Den proliferative aktivitet ble bestemt i henhold til kriteriene [16, 17]. I korte trekk, ble PR av vev målt både i tumorvev og dets omkringliggende ikke-neoplastisk vev. Høy proliferasjon ble betraktet som om PR var høyere i svulstvev enn i den ikke-neoplastisk vev. Lav proliferasjon ble bedømt hvis PR var lavere i svulstvev enn i den ikke-neoplastisk vev.
Immunohistokjemisk vurdering av cellesyklusrelaterte proteiner
andel av tumorceller avdeling ble vurdert ved øyet og tildelt en poengsum som oppsummert i tilleggsfiler 2A. Totalt 500 celler ble tellet i tilfeldig felt fra representative områder av lesjonen. For alle markører, ble bare nukleær farging vurderes som positive. Den fargeintensitet ble estimert på en 5-punkts skala (0 til 6 +) og en score ble tildelt i henhold til intensitet (tilleggsfiler 2B). Farging Indeksen var en enkel multiplikative produkt av cellularitet og farging score. Deretter ble høy ekspresjon i tumorceller registrert hvis fargingen indeksen var høyere i de tumorceller enn i dets omkringliggende ikke-neoplastisk vev. I motsetning til dette ble lav ekspresjon i tumorceller registrert hvis fargingen indeksen var lavere eller lik i tumorcellene enn i den ikke-neoplastisk vev. For eksempel er en representant figur vist i figur 1. Den opprinnelige kriteriene ble tidligere beskrevet [22], og de foreliggende kriterier ble anvendt med mindre modifikasjoner. To seksjoner ble farget og verdier ble basert på gjennomsnittet av de 2 individuelle resultater. Figur 1 Eksempel på mage intramucosal differensiert-type kreft. Mens indeksen score for cyclin D1 uttrykk er 16 i magekreft slimhinnen (b), er stillingen 4 i dens omkringliggende ikke-neoplastisk slimhinnen (a). Svulsten som er vist i figur 1b regnes som godt differensiert adenokarsinom av japanske patologer, selv om denne svulsten er ansett mage adenom eller dysplasi av vestlige patologer.
Statistisk analyse
Resultatene er gitt som median eller middelverdier. Statistisk analyse brukt Tamhane Test for sammenligninger mellom 3 grupper og chi-kvadrat tester for sammenligninger mellom 2 grupper. Statistisk signifikans ble etablert på p < 0,05 nivå.
Resultater
klinisk-patologiske egenskaper
Som vist i tilleggsfiler tre, av de 190 gastric intramucosal differensiert-type kreft, 23 (12,1%) var av mage fenotype, 85 (44,7%) ble tarm fenotype og 79 (41,6%) ble klassifisert som blandede fenotyper. Bare 3 (1,6%) svulster var av Uklassifisert type. Klinisk-patologiske funn basert på mucin fenotyper er også oppført i tilleggsfiler 3. Det var ingen signifikante forskjeller for alder, tumor størrelse, beliggenhet, mikroskopisk type eller histologisk type mellom de 3 fenotyper. Men for mage og blandede fenotyper, forekomst av svulster høy klasse var signifikant høyere for mage og blandede fenotyper enn tarm fenotype (p < 0,01 og p < 0,05, henholdsvis). I tillegg er mann /kvinne ratio for blandet fenotype var ower enn for de andre typene (p < 0,05)
I denne studien, ble mage fenotyper klassifisert i 3 sub-fenotyper:. MUC5AC (+) /MUC6 (+), MUC5AC (+) /MUC6 (-) og MUC5AC (-) /MUC6 (+). Femten (65,2%) hadde den MUC5AC (+) /MUC6 (+) mønster, 5 (21,7%) hadde den MUC5AC (+) /MUC6 (-) mønster og 3 (13,1%) ble underklassifiseres som MUC5AC (-) /MUC6 (+) mønster. Blant de 3 mage under fenotyper, ble det ikke clinicopathological forskjeller funnet. I motsetning til dette, intestinal fenotyper var oppdelt i tynntarmen (N = 67) og tarm (N = 18) fenotyper. Det var ingen signifikante forskjeller mellom dem for alder, tumor størrelse, beliggenhet, makroskopisk type eller histologisk type.
Uttrykk for cellesyklusrelaterte proteiner ved mucin fenotyper
Ingen p53 overekspresjon ble funnet i noen omkringliggende ikke-neoplastisk slimhinnen. Overekspresjon av p53 ble observert i 33 av 190 saker som vi undersøkte (17,4%), og ble oftere sett i mage fenotype (10/23, 43,5%) sammenlignet med de andre 2 typer (intestinal fenotype, 13/85, 15,3 % og blandet fenotype, 9/79, 11,4%). Selv om forskjellen mellom den gastriske og intestinale fenotyper ikke nådde statistisk signifikans (p = 0,054), mage og blandede fenotyper gjorde viser en signifikant forskjell (p 0,05). I tillegg ble ingen p53 overekspresjon funnet i lavgradig kreft (0/26). I kontrast, ble p53 overexpressed i 11 av 103 middels grad av kreft (10,7%) og 22 av 61 høyverdig kreft (36,1%). Vesentlige forskjeller mellom høyverdig kreft og lav grad eller middels grad av kreft ble funnet (p < 0,01).
P21 ble først og fremst uttrykt i overflateepitel tarmmetaplastiske kjertel og foveolar gastrisk epitel. Hyppigheten av redusert p21-ekspresjon var 59 av 190 svulster (31,1%). Redusert p21 uttrykk ble ofte observert i mage, tarm og blandede fenotyper. Det var ingen signifikant forskjell for redusert p21 uttrykk mellom 3 fenotyper.
Ekspresjon av p27 ble begrenset til overflateepitel og bunnen av intestinal metaplastiske kjertel. Hyppigheten av redusert p27 ekspresjon var meget lav i mage kreft som vi undersøkte (12/190, 6,3%). I motsetning til dette ble det observert at frekvensen for p27 overekspresjon i 53 av 190 svulster (27,9%). Hyppigheten av p 27 overekspresjon var høyere i tarm fenotypen (31/85, 36,5%) enn i den gastriske (6/23, 26,1%) og blandet fenotyper (16/79, 20,2%). Men disse forskjellene var ikke signifikante.
Cyclin D1 ble uttrykt ved den nedre halvdel av intestinal metaplastiske kjertel. I mage kreft undersøkte 27 av 190 tilfeller (14,2%) viste uttrykt Cyclin D1. Cyclin D1 ble overuttrykt i mage fenotype for 7 av 23 tilfeller (30,4%). Til sammenligning ble overekspresjon av cyclin D1 funnet i 11,8% (10/85) og 12,7% (10/79) av de intestinale og blandede fenotyper, respektivt. Ingen signifikant forskjell ble funnet mellom den gastriske fenotype og de andre typene.
Ekspresjon av cyklin A ble i hovedsak begrenset til den nedre halvdel av den intestinale metaplastiske kjertel. Positiv farging for cyklin A ble funnet i 42,1% (80/190). Hyppigheten av cyklin A overekspresjon var høyere i den gastriske fenotypen (16/23, 69,6%) enn i tarm fenotypen (25/85, 29,4%; p < 0,01). Imidlertid, ingen signifikant forskjell ble funnet mellom den gastriske og blandede fenotyper (39/79, 49,4%).
Ikke-neoplastiske kjertlene var hovedsakelig negative for cyclin E. I mage kreft undersøkes, hyppigheten av Cyclin E overekspresjon var meget lav. Ingen signifikant forskjell mellom de 3 slimstoff fenotyper ble sett.
I denne studien bare atom uttrykk for β-catenin ble ansett som positivt. Ingen ekspresjon av kjernefysisk β-catenin ble observert i den omgivende ikke-neoplastiske mucosa, med unntak av pyloric kjertler. De fleste pylorusstenose kjertler uttrykt kjernefysisk β-catenin. Nuclear β-catenin ekspresjon ble funnet i 80 av 190 svulster (36,8%). Selv om intestinal fenotype (44/85, 51,8%) viste den høyeste frekvens for atom β-catenin blant de 3 fenotyper, forskjellen var ikke signifikant., En høy formeringshastigheten av tumorceller ble vist på mer enn 30% Ki -67 PR i de fleste av gastrisk kreft som vi undersøkt. I henhold til våre kriterier, ble høy spredning funnet i 101 av 190 svulster (53,2%). Høy spredning av tumorceller ble oftere observert i mage og blandet fenotyper sammenlignet med tarm fenotype (p < 0,01 og p < 0,05). Vi oppsummerer disse resultater for cellesyklusrelaterte proteiner basert på mucin fenotype i figur 2. I tillegg er et representativt eksempel som er vist i figur 3. Figur 2 Frekvensene av cellesyklusrelaterte proteiner uttrykk i mage, tarm og blandet fenotyper. Gastric fenotype kreft er preget av p53 og cyclin A overexpressions. Selv om hyppigheten av p27 overekspresjon mellom tarm fenotype og andre fenotyper ikke nådde statistisk forskjell, kan dette være karakteristisk for intestinal fenotype. Reduksjon av p21 og akkumulering av β-catenin blir ofte observert i de 3 fenotyper. Ki-67 positive hastighet er høyere i den gastriske fenotype eller blandet fenotype enn i tarm fenotype. Statistiske sammenligninger brukt Tamhane tester for alle 3 fenotyper.
Figur 3 Et representativt eksempel på intestinal intramucosal differensiert-type kreft i mage-fenotype. en. Lavt strømforbruk visning av svulstvev. b. Høy effekt visning av svulstvev. c. p53 overekspresjon ble sett. d. p21 ble redusert. e. p27 ble overexpressed. f. Overekspresjon av cyclin A. g. Lav uttrykk for cyclin D1. h. Bare Muc2 ble uttrykt i denne svulsten, noe som tyder på tarm fenotype.
Diskusjon
På tross av en fallende trend i forekomst, er fortsatt magekreft et viktig medisinsk problem over hele verden, og det er den vanligste svulst i Japan. Intramucosal kreft er definert som en tumor på det mest tidlig stadium av magekreft. Det er viktig å undersøke intramucosal kreft for å vurdere patogenesen av magekreft. Det er allment akseptert at en kreftcelle oppstår på grunn av forandringer av cellesyklusregulering, som består av flere cellesyklusrelaterte proteiner, slik som cykliner, cyklinavhengig kinaseinhibitor, p53 og β-catenin. I tillegg har nyere studier vist at distinkte klinisk-patologiske funn for magekreft er preget av mucin uttrykk. Vi studerte unormale uttrykk for cellesyklusrelaterte proteiner som fremmer magekreftutvikling basert på mucin fenotyper i mage intramucosal differensiert-type kreft.
I denne studien, immunhistokjemi ble brukt til å undersøke uttrykket nivåer av cellesyklusrelaterte proteiner. Immunopositivity for cellesyklusrelaterte proteiner av svulstvev ble bestemt ved å sammenligne nivået mellom svulstvev og dens omkringliggende ikke-neoplastisk vev. I henhold til disse kriterier, kan nivået av immunopositivity av tumorvev være forskjellig for hvert enkelt tilfelle. Men skille parametrene innenfor disse kreftformene inn i "lav" og "høy" kategorier basert på sammenligninger av disse faktorene med ikke-neoplastisk vev kan være en ukonvensjonell metode. Den "ikke-neoplastisk" tissue omfatter gastritt (kronisk eller kronisk aktiv) og /eller intestinal metaplasi; parametrene i de ulike inflammatoriske eller metaplastiske vev kan variere betydelig. Det kan være mer meningsfylt å bruke en absolutt hastighet (dvs. den faktiske%), snarere enn denne interne relativ verdi. Imidlertid anser vi at dette immunhistokjemisk kriterium er viktig for å finne potensielle aktiviteter av cellesyklusrelaterte proteiner på et tidlig stadium av gastriske differensiert-type kreftformer, gitt at det ikke-neoplastisk vev som omgir tumorvevet er nært forbundet med tumorutvikling.
det har vært antatt blant patologer at mage fenotype av magekreft viser lav grad av atypi i mage intramucosal differensiert-type kreft (19). Men i denne studien, i mage intramucosal differensiert-type kreft som vi undersøkte, mage fenotype viste høy grad av atypi. Selv om årsaken er fortsatt ukjent, er en mulig årsak til at en gastric fenotype som viser lav grad av atypi, som ligner mage foveolar epitel histologisk, kan ha blitt tatt med i tidligere studier. I den foreliggende undersøkelse, ble bare en slik svulst observert. I tillegg kan disse forskjellene skyldes antallet prøver eller til etnisk eller etiologiske faktorer. Det er vel kjent at p53 overekspresjon er korrelert med tumor karakter. I den foreliggende undersøkelse, foreslår vi at det er rimelig å vise en høy frekvens av p53 overekspresjon for gastrisk fenotype når sammenlignet med andre fenotyper.
I denne studien ble p53 overekspresjon oftere finnes i mage-fenotypen enn i tarm eller blandet fenotyper. Dette funnet tyder på at p53 overekspresjon spiller en viktig rolle, i hvert fall i den tidlige utviklingen av mage fenotype kreft, selv om tidligere studier har vist en progressiv økning i p53 overekspresjon i mage kreftformer fra tidlig til avanserte stadier [12].
I denne studie, redusert p21-ekspresjon ble observert hos ca. 30% av 3 slimstoff fenotyper. Tidligere studier har vist at lave ekspresjon av p21 har sammenheng med pasientens prognose i magekreft [5, 6]. Men lite er kjent om p21 uttrykk av mage kreft basert på mucin fenotyper. I tillegg kan enhver sammenslutning av p21 uttrykk med tumorstadium (tumor dybde) er fortsatt ukjent. Våre funn tyder på at redusert p21 uttrykk spiller en vanlig rolle i den tidlige utviklingen av de 3 slimstoff fenotyper av mage differensiert-type kreft. Men en tidligere studie antydet at en progressiv reduksjon av p21 ekspresjonen skjedde i en fremskreden fase av mave differensiert-type kreft fra den tidlige fase [6]. p21 ekspresjon også korrelert med de uttrykk for andre cellesyklusrelaterte proteiner, slik som p27 og Ki-67, eventuelt gjennom en p53-avhengig reaksjonsvei [1, 5, 6]. Det har blitt antatt at p21 samarbeider med p53 og, som et resultat, blir cellesyklusen styres ved hjelp av en p53-avhengig reaksjonsvei [1, 5]. Videre er det antatt at p21 er også inhibert av samarbeid med p27 [1, 5]. I denne studien, men vi fant verken en korrelasjon av p21 reduksjon med p27 reduksjon eller en invers korrelasjon av p27 reduksjon med p53 overekspresjon (data ikke vist). Vi foreslår at en annen bane som finnes for regulering av cellesyklusen i humane gastriske cancere.
Det er vel kjent at p27 er et prototypisk tumorsuppressorgen [1-3]. Imidlertid har en nyere studie vist at, mens det i noen tilfeller inhiberer p27 cellesyklus, i andre tilfeller fremmer den progresjon til den neste fase av cellesyklusen [23]. Det har blitt rapportert at enten et tap eller en lav ekspresjon av p27 er korrelert med tumorprogresjon eller pasient prognose [24, 25]. I motsetning til andre studier, viste vi at lav uttrykket (reduksjon) av p27 hadde en meget lav frekvens i vår serie av gastrisk kreft. I henhold til foreliggende funn, spiller redusert p27 ekspresjon en mindre rolle i utviklingen av differensierte typen gastrisk kreft.
I motsetning til dette ble overekspresjon av p27 ofte funnet i tarm fenotypen sammenlignet med de andre 2 fenotyper, selv om forskjellen mellom disse nådde ikke statistisk signifikant nivå. Hvorvidt denne overekspresjon av p27 er assosiert med cellesyklus hemming eller cellesyklusprogresjon er ikke kjent, selv om flere forklaringer er foreslått. Først er at p27 som blir overuttrykt for undertrykkelse av cellesyklusprogresjon i tumorceller resultatene fra en negativ feedback-mekanisme. Motsatt, er en annen forklaring på at overekspresjon av p27 er positivt assosiert med progresjonen av cellesyklusen for tumorceller; det vil si, P27 fungerer som en onkogen faktor [23]. I tillegg er en nyere studie vist at ekspresjon av p27 er regulert ved ekspresjon av Skp2, som er et ubikvitin-ligase subenhet av p27 [26]. Ifølge denne rapporten, ble ekspresjon av p27 omvendt korrelert med Skp2 uttrykk.
Cyclin D1 overekspresjon viste bare en lav frekvens i den tidlige fasen av mage differensierte typen kreft (27/190, 14,2%). Imidlertid, selv om forskjellene ikke nådde en betydelig grad, hyppigheten av cyclin D1 overekspresjon var høyere i den gastriske fenotypen enn i den intestinale og blandede fenotyper. Cyclin D1 ble tidligere undersøkt i flere serier av mage kreft, med en rapportert frekvens på 20 ~ 56% av overekspresjon blir rapportert [27-29], forskjellig fra resultatene. Som en mulig årsak til disse forskjeller av cyklin D1 overekspresjon, selv om tidlig differensierte-type krefttyper, med unntak av gastrisk fenotype, ikke krever en økning av cyclin D1, når svulsten har utviklet seg, tumorcellene trenger en høy grad av cyklin D1 for tumorprogresjon. Dette tyder på at cyklin D1 overekspresjon har sammenheng med pasientens prognose i mage-kreft [28].
Overekspresjon av cyklin A var også mer utbredt i mage og blandet fenotyper sammenlignet med intestinal fenotype. Dette tyder på at overekspresjon av cyclin A spiller en stor rolle i tumordannelse av mage og blandede fenotyper. Således, i gastriske cancere, anskaffelse av gastrisk mucin ekspresjon kan være forbundet med syklin A overekspresjon, som deretter resulterer i høye tumor proliferasjon. I tillegg ble cyklin A nært forbundet med pasientprognose eller tumor aggressivitet [8, 9]. Dette kan tyde på at cyklin A overekspresjon er relatert til både svulst utvikling og progresjon i omtrent halvparten av differensiert-type mage kreft.
I denne studien, viste cyclin E overekspresjon lave frekvenser i de 3 fenotyper. I motsetning til dette har tidligere undersøkelser vist at cyclin E overekspresjon ble korrelert med dårlig resultat [4, 10], selv om kontrasterende resultater er blitt foreslått [30]. De foreliggende resultater indikerer at cyclin E overekspresjon ikke spiller noen vesentlig rolle i den tidlige tumorigenesis av differensierte-type gastrisk kreft. Dessuten kan overekspresjon av syklin E primært fremme utviklingen av gastrisk kreft. Disse funnene tyder på at den høye spredning av gastrisk fenotype kan være kjennetegnet ved overekspresjon av cyclin D1 og /eller cyklin A, og at den blandede fenotype er forbundet med syklin A overekspresjon.
Det er velkjent at β-catenin ekspresjon oppregulerer cellesyklusen og spiller en sentral rolle i Wnt signaltransduksjonsbane [14, 15]. I denne studien, er det interessant å merke seg at β-catenin uttrykk ble ofte observert i begynnelsen av differensiert-type mage kreft som vi undersøkte. Det er allerede akseptert at β-catenin uttrykk er avgjørende for colonic adenom utvikling [31, 32]. De foreliggende resultater og tidligere studier angående kolorektal adenom indikerer at β-catenin ekspresjon kan være en felles endring i den tidlige utviklingen av gastrointestinale tumorer [31]. Dette kan forklares med funnene som i mage kreft, er genet arrangører forbundet med Wnt signalveien høyt metylert [32-34], noe som resulterer i atom akkumulering av β-catenin uttrykk.
Konklusjoner
I Oppsummert, foreslår at de cellulære mucin fenotypene av intramucosal differensierte-type adenokarsinomer i mage er avhengig av forskjellige cellesyklusrelaterte endringer, og at de klinisk-patologiske funn resultere fra forskjellige baner basert på slimstoffekspresjon: mage, tarm og blandede fenotyper . Figur 4 illustrerer en ny modell for carcinogenese intramucosal differensiert-type adenokarsinomer som er avhengig av deres fenotyper mucin. Basert på forandringer av cellesyklusrelaterte proteiner, overexpressions av p53 og cyklin A karakterisere mage-fenotype krefttyper, mens overekspresjon av p27 kan være forbundet med utvikling av intestinal fenotype kreft. I motsetning til dette blir blandet fenotype kreft, karakterisert ved cyklin A overekspresjon.

• Sammenslutninger av en PTPN11 G /A polymorfisme på intron 3 med Helicobacter pyloriseropositivity, gastrisk atrofi og magekreft i Japanese
• Systematisk gjennomgang og meta-analyse av laparoskopisk og åpen gastrektomi for avansert mage cancer