Analyysi solusyklin-sukuiset proteiinit mahalaukun intramucosal eriytettyä-tyypin syöpien perustuu musiinituoton fenotyyppejä: uusi hypoteesi varhaisen mahasyövän perustuu musiinituoton fenotyyppiin

Analyysi solusyklin-sukuiset proteiinit mahalaukun intramucosal eriytetty-tyypin syöpien perustuu musiinituoton fenotyyppejä: uusi hypoteesi varhaisen mahasyövän perustuu musiinituoton fenotyyppiin
tiivistelmä
tausta
poikkeavuudet solukierron sääntelyviranomaiset ovat yhteisiä piirteitä ihmisen syöpien, ja useat näistä tekijöistä liittyy varhaista kehitystä syöpien. Kuitenkin viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että mahalaukun syövän kasvainten synnyssä karakterisoitiin musiiniekspressiota. Siten ilmaus malleja solukierron-sukuiset proteiinit tutkittiin alkuvaiheessa eriytetty tyyppisten syöpien osoittamaan mitään mekanistisiin suhteita musiinituoton fenotyyppejä. Tool Menetelmät
immuunivärjäykseen Sykliinit D1, A, E, ja p21, P27, p53 ja β-kateniinin käytettiin tutkimaan arvonalennukset solusyklin 190 mahalaukun intramucosal eriytetyn-tyypin syöpiä. Musiini fenotyypit määritettiin ilmauksia MUC5AC, MUC6, MUC2 ja CD10. Ki-67 positiivisten määrä (PR) tarkasteltiin.
Tulokset
Overexpressions p53, sykliini D1 ja sykliini A: olivat merkitsevästi useammin mahalaukun fenotyyppiin kuin suoliston fenotyyppi. Sykliini yliekspressoitui sekoitetussa fenotyyppiä verrataan suoliston fenotyypin, kun taas p27 yli-ilmentyminen oli yleisempää suoliston fenotyyppi kuin sekoitetussa fenotyypin. Vähentäminen p21 oli yhteinen piirre mahalaukun intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä tutkitaan.
Johtopäätökset
Tuloksemme viittaavat siihen, että veren tiettyjen solusyklin sääntelyviranomaiset näyttävät liittyvän musiinituoton fenotyypit varhaisen mahalaukun eriytetyn-tyypin syöpiä.
Taustaa
Progression solusyklin läpi ja solujen lisääntymistä ovat valvonnassa joukon sykliinien ja sykliini-riippuvaisen kinaasin (CDK) kompleksit [1-3]. Kertyvät näyttöä siitä, että etenemistä tumorigeneesin liittyy usein poikkeavuuksia ilmaisuja Sykliinien ja muut solusykliä liittyviä geenejä [1-3]. Poikkeavuuksia on löydetty sykliinejä D1, A, E ja niiden yhteistyökumppaneina, kuten sykliiniriippuvainen kinaasi (CDK), jotka edistävät solusyklin etenemistä [1, 3]. Lisäksi nämä progressiivinen tekijät voidaan estää salpaajat, kuten p21, P27 ja P57, ja toinen ryhmä estäjän proteiineja, kuten p16, p15 ja p18 [4-10]. Valvomattoman leviämisen, joka luonnehtii kasvainsolut voidaan selittää pitkälti vahvistusta ja /tai tappio proteiinin toimintoja, jotka muodostavat solusyklin. Asetus näistä solukierron-sukuiset proteiinit ohjaavat myös muut tekijät, kuten p53 ja β-kateniinin, ja niiden muutoksia myös heikentää solusyklin, jolloin hallitsematon leviäminen [11-15].
Yllä solu cycle- liittyviä proteiineja, avain sääntelyviranomaisten etenemisensä G1 vaiheen solusyklin ovat sykliini D1 ja sykliini E, p53, p21 ja p27 [1, 4, 6, 12]. Heidän epänormaali ilmaisuja on arvellaan keskeisiä rooleja etenemisessä tumorigeneesin ja on todettu tulla häirityksi useissa ihmisen syöpäsairauksia. Sykliini A on myös jäsen sykliini proteiinin superperheen, jotka voidaan aktivoida siirtymistä G1 S vaiheen solusyklin. Epänormaali ilmauksia sykliini A korreloivat huono tuloksia erilaisissa ihmisen syövissä [8, 9]. Lisäksi ydin- ilmentyminen β-kateniinin on osallisena gastrointestinaalisten syöpien [14, 15]. β-kateniinin kerääntyy tumaan johtuen lievempiä Wnt signaalireitin, ja sen ydin- ilmentyminen edistää etenemistä solusyklin ja soluproliferaatiota [14, 15]. Tähän mennessä, sen aktiivisuus ei ole osoitettu vaikuttavan patogeneesiin varhaisen eriytetyn tyyppisten syöpien.
Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että solujen musiinin ilmaisuja ja kasvaimen fenotyypit jotka liittyvät kliinis-patologisia löydöksiä ja tuumorigeneesiä differentiated- tyypin syöpien [16-19]. Limakalvon fenotyypit kasvaimia on pääasiassa luokiteltu 3 tyyppiä: mahalaukun, suoliston ja sekoitetaan fenotyyppejä [16, 17]. Mahalaukun fenotyyppi on ominaista huono tuloksia, erillisiä histologiset piirteet ja erityinen alatyyppi geneettisiä muutoksia, mukaan lukien mikrosatelliittien epävakaus (MSI) [17, 18]. Sen sijaan suoliston fenotyyppi on hyvin eriytetty tyyppi, joilla on alhainen proliferatiivinen aktiivisuus ja puute MSI [17]. Ilmaukset musiineja kasvaimen solut määritellä kasvaimen ominaisuudet mahasyövistä [16-19]. Näin ollen on tärkeää, että käsitys varhaisen tumorigeneis mahasyövistä tutkia biologisia muutoksia mukaan nämä musiinituoton fenotyypit [16-19].
Vaikka useita tutkimuksia koskien ilmaisuja solusyklin liittyvät tekijät on ilmoitettu [ ,,,0],3-7], yhdistysten varhaisen eriytetyn-tyypin syöpien ja niiden musiinin fenotyyppien ja korjauksilla solusyklin liittyviä proteiineja ei täysin ymmärretä. Esillä olevassa tutkimuksessa tutkimme poikkeavuuksia solukierron liittyviä proteiineja varhaisessa vaiheessa eriytetty-tyypin syöpien perustuu musiinituoton fenotyyppejä. Tool Menetelmät
Potilaat
Materiaalit Tässä tutkimuksessa saatiin 190 potilasta, joilla ensisijainen varhain mahasyövistä jotka diagnosoitiin osastolla of Molecular Diagnostic Pathology, Patologian osasto, Iwate Medical University, Morioka, Japani. Tietoon perustuva suostumus annettiin kaikille potilaille, jotka tutkimme. Lisäksi tutkimuksemme hyväksyi meidän eettinen komitea (otsikko, molekyylitason analyysi ruoansulatuskanavan kasvaimet ja ympäröivän limakalvon, viitenumero, H21-140, eettisen komitean Iwate Medical University). Nämä kasvaimet olivat yhdenmukaisia ​​intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä, ja saatiin näytteistä endoskoopeille submukosaalisen leikkely (ESD). Histologinen kriteerit tehdä histologisia diagnoosit perustuvat sairaalassa kriteerien [16], joita muutettiin seikat kuin Japani Research Society for mahasyövistä [20], kuten ristiriitaisuudet histologinen tuomioissa välillä Japani ja Länsi patologian. Yksityiskohtainen kliinis-patologisten data (potilaan ikä, sukupuoli, Kasvainimplan-, kasvaimen koon, makroskooppinen tyyppiä ja astetta kasvaimen erilaistumiseen) esitetään Additional tiedostoon 1.
Tässä tutkimuksessa intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä Saharan luokiteltu 3 ryhmää mukaan kasvain Reaktoriluokan: matala-, keski- tai korkea. Kasvain arvosana määräytyi aiemmin julkaistu kriteerien [17]. Lyhyesti, heikompilaatuisen syöpä diagnosoitiin läsnäolo solujen laajentuneen, hyperchromatic ytimiä, jotka oli lähinnä pohjapinta osia soluja, mutta se oli enemmän epäsäännöllinen ja monimutkaisia ​​rauhaset kuin mahan adenoomia. Kasvaimet, jotka sisälsivät soluja, joiden ilmeinen menetys polaarisuus, ydinvoiman epäsäännöllisyys, laajentuneen nucleolus ja hyperchromatin luokiteltiin korkealaatuista syöpiä. Korkealuokkaisesta syövät usein osoitti merkittäviä arkkitehtonisia atypia, kuten korkea arkkitehtoninen tai rauhas vääristymiä. Intermediate havainnot välillä matala ja korkea-asteen syöpiä tunnustettiin väli syöpiä. Kuitenkin histologiset eroa mahan adenooma ja heikompilaatuisen syöpä oli joskus hyvin vaikeaa. Levyjä itsenäisesti arvioitiin 2 kokeneet patologit (S. T. ja N. S.); joissakin tapauksissa, joissa antamien arvioiden erilaisia ​​tuloksia, yksimielisyyteen tulkinta saavutettiin uudelleen tutkimisen jälkeen.
immunohistokemia
Heti poiston, näytteet fiksoitiin 20% neutraalissa puskuroituun formaliiniin, valettiin parafiini, leikataan 3 um parafiinileikkeillä ja värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (HE) rutiiniluonteisia valomikroskoopilla. Immunohistokemiallista värjäystä vielä 3 um: n paksuisia leikkeitä leikattiin parafinoidut kudosten ja asetettiin poly-L-lysiinillä päällystettyihin objektilaseille. Lyhyesti, leikkeet parafiini ksyleeniin ja kuivattu. Määrittämiseksi musiinin fenotyyppien, immunovärjäystä tehtiin MUC 2 (Ccp58, Novocastra Laboratories, Newcastle, UK), CD10 (56C6, Novocastra Laboratories), MUC 5AC (CLH2, Novocastra Laboratories) ja MUC 6 (CLH5, Novocastra Laboratories, Newcastle , UK). Lisäksi, immunovärjäystä tehtiin p53 (klooni, DO7, DAKO, Carpinteria, CA, USA), Ki-67 (MIB-1, Dako), p21 (SX118, Dako), p27 (SX53G8, Dako), sykliini D1 ( SP4, Nichirei Co., Tokio), sykliini E (13A3, Novocastra Laboratories), sykliini A (6E6, Novocastra Laboratories) ja β-kateniinin (BD, Transduction Laboratories).
immunohistokemia käytti DAKO Kuvitella + järjestelmä, joka koostuu dekstraani polymeerit konjugoitu piparjuuriperoksidaasiin (DAKO), kuten aiemmin on kuvattu [16, 17]. Näytteet kuumennettiin mikroaalloilla sitraattipuskurissa (pH 6,0), 3 kertaa 5 min kukin 750W ennen reaktioiden vasta-aineita (H2500, Microwave Processor, Bio Rad, USA), kuten aiemmin on kuvattu [16, 17]. Hematoksyliini käytettiin vastavärinä.
Arviointi musiiniekspressiota
Tässä tutkimuksessa, mahalaukun kasvaimet luokitellaan 4 ryhmään niiden immunovärjäyksen kuvioita. Maha- fenotyyppi määriteltiin kasvaimet, joissa hallitseva intrasytoplasmista mukiinia mahalaukun, jotka määritettiin immunovärjäämällä ihmisen mahalaukun mukiinia (MUC5AC) ja /tai mahaportin rauhanen mukiinia (MUC6), mutta ilman MUC-2-positiiviset solut. Suoliston fenotyyppi osoitetaan kasvaimeen esittää MUC2-positiivisia soluja ja /tai CD10 positiivinen (yhdessä harjareunusten). Näitä kasvaimia eriyttää ohutsuolen vastaanottokyky soluja. Suoliston fenotyypin kasvaimia sub-luokiteltu 2 ryhmään: paksusuolen tyyppi (positiivinen MUC 2 vain) ja ohutsuolen tyyppi (positiivinen CD10). Seka-fenotyyppi määriteltiin kasvain ottaa immunovärjäys sopusoinnussa mahalaukun tyyppi (positiivisia soluja varten MUC5AC ja /tai mahanportin rauhanen mukiinia) sekä suoliston tyypin mukiinia (positiivisia soluja varten CD10 ja /tai MUC2). Lopuksi, kasvaimet ilman immunovärjäyty- joko maha- tai suolen fenotyypit, liitetään "luokkiin" tyyppi. Immunopositiivista tulokset > 5%: ssa syöpäsoluista pidettiin positiivisina, ja immunopositiivista tulokset < 5% negatiivisina mukaisesti aikaisempien raporttien [16, 17, 21].
Mittaaminen Ki-67 positiivisten määrä (PR)
Random alueet kunkin näytteen valittiin joka luottaa Ki-67 positiivista ytimet . Ki-67 positiivisten määrä laskettiin prosenttiosuutena Ki-67 positiivinen kasvain soluytimet määritettiin 10 korkean tehon kenttiä (HPF, × 400), joka määritettiin sen jälkeen, kun laskenta vähintään 500 kasvainsoluja kohti kasvaimen näyte. Kasvaimen lisääntymisaktiivisuus luokiteltiin 2 ryhmään: korkea ja matala. Proliferatiivinen aktiivisuus määritettiin mukaan meidän kriteerien [16, 17]. Lyhyesti, PR kudoksen mitattiin sekä kasvainkudoksessa ja sen ympärillä ei-kasvainkudoksessa. Korkea lisääntymistä pidettiin jos PR oli suurempi kasvainkudoksessa kuin ei-kasvainkudoksessa. Alhainen leviämisen arvioitiin jos PR oli pienempi kasvain kudoksen kuin ei-kasvainkudoksessa.
Immunohistokemiallinen arviointi solukierron liittyvien proteiinien
osuus kasvainsolujen lohkolle arvioitiin silmämääräisesti ja jaetaan pisteet niin yhteenvetona Muita tiedostoon 2A. Yhteensä 500 solut laskettiin sattumanvaraisesti kentille edustavalla vaurio. Kaikkien markkereita, vain tumavärjäystä pidettiin positiivisena. Värjäytymisintensiteettiä arvioitiin 5 pisteen asteikolla (0 6+) ja pisteet jaettiin voimakkuuden mukaan (Additional tiedosto 2B). Värjäytyminen indeksi oli yksinkertainen multiplikatiivinen tuote sellulaarisuus ja värjäys tulokset. Seuraavaksi korkea ekspressio tuumorisoluihin kirjattiin jos värjäytyminen indeksi oli suurempi kasvainsoluissa kuin sen ympärillä ei-kasvainkudoksessa. Sitä vastoin, alhainen ilmaisu kasvainsolujen kirjattiin jos värjäytyminen indeksi oli pienempi tai yhtä suuri kuin kasvainsoluissa kuin ei-kasvainkudoksessa. Esimerkiksi edustava on esitetty kuviossa 1. Alkuperäinen kriteerit on kuvattu aikaisemmin [22], ja esillä oleva käytetyt perusteet vähäisin muutoksin. Kaksi leikkeitä värjättiin ja arvot perustuivat keskiarvo 2 yksittäiset tulokset. Kuva 1 Esimerkki mahalaukun intramucosal eriytetty-tyyppinen syöpä. Kun taas indeksin pisteet sykliini D1 ilmentyminen on 16. mahasyövän limakalvon (b), pisteet on 4 sen ympäröivän ei-neoplastisia limakalvon (a). Kasvain, joka on esitetty kuvassa 1b pidetään hyvin eriytetty adenokarsinooma japanilaisen, patologia, vaikka kasvain pidetään mahalaukun adenooman tai dysplasian Western patologia.
Tilastollinen analyysi
Tulokset on annettu mediaani tai keskiarvot. Tilastollinen analyysi käytti Tamhane Test välisessä vertailussa 3 ryhmien ja chi-neliö testit vertailua 2 ryhmää. Tilastollinen merkitsevyys määritettiin tasolla p < 0,05 tasolla.
Tulokset
kliinis-patologisten ominaisuuksien
Kuten esitetään Additional tiedostoon 3, on 190 mahalaukun intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä, 23 (12,1%) oli mahalaukun fenotyypin, 85 (44,7%) olivat suoliston fenotyyppi ja 79 (41,6%) luokiteltiin sekoitettu fenotyyppejä. Vain 3 (1,6%) kasvaimet olivat luokittamattoman tyyppiä. Kliinis-patologisia löydöksiä perustuu limakalvon fenotyypit on lueteltu myös Additional tiedostoon 3. ei ollut merkittäviä eroja iän, kasvaimen koko, sijainti, mikroskooppinen tyyppi tai histologinen tyyppi välillä 3 fenotyyppejä. Kuitenkin mahalaukun ja sekoitetaan fenotyyppejä, ilmaantuvuus korkealuokkaisesta kasvaimet olivat merkittävästi korkeammat mahalaukun ja sekoitetaan fenotyyppien kuin suoliston fenotyyppi (p < 0,01 ja p < 0,05, vastaavasti). Lisäksi mies /nainen suhde sekoitetun fenotyyppi oli assa kuin muiden tyyppien (p < 0,05).
Tässä tutkimuksessa, mahalaukun fenotyypit luokiteltiin 3 sub-fenotyypit: MUC5AC (+) /MUC6 (+), MUC5AC (+) /MUC6 (-) ja MUC5AC (-) /MUC6 (+). Viisitoista (65,2%) oli MUC5AC (+) /MUC6 (+) kuvio, 5 (21,7%) oli MUC5AC (+) /MUC6 (-) malli ja 3 (13,1%) oli eritellään, kuten MUC5AC (-) /MUC6 (+) kuvio. Niistä 3 mahalaukun sub-fenotyyppejä, ei kliinis eroja löytynyt. Sen sijaan, suoliston fenotyypit olivat jaettu ohutsuolen (N = 67) ja paksusuolen (N = 18) fenotyypit. Ei ollut merkittäviä eroja iän, kasvaimen koko, sijainti, makroskooppisten tyyppi tai histologinen tyyppi.
Ilmaisujen solukierron liittyvien proteiinien musiinituoton fenotyypit
Ei p53 yli-ilmentyminen havaittiin kaikki ympäröivät ei-neoplastisia limakalvoa. Yli-ilmentyminen p53 havaittiin 33 190 tapausta, jotka tutkimme (17,4%), ja sen useammin nähty mahan fenotyypin (10/23, 43,5%) verrattuna muihin 2 tyypit (suoliston fenotyyppi, 13/85, 15,3 % ja sekoitetaan fenotyyppi, 9/79, 11,4%). Vaikka ero mahan ja suoliston fenotyypit eivät tilastollisesti merkitsevä (p = 0,054), mahalaukun ja sekoitetaan fenotyyppien teki osoittanut merkittävää eroa (p < 0,05). Lisäksi mitään p53 yli-ilmentyminen havaittiin huonolaatuisen syöpiä (0/26). Sen sijaan, p53 yli-ilmentynyt 11 103 keskiasteinen syöpiä (10,7%) ja 22 61 korkealaatuisesta syöpiä (36,1%). Merkittävät erot korkealaatuisesta syövän ja matala-asteinen tai väli-grade syöpiä havaittiin (p < 0,01).
P21 oli ensisijaisesti ilmaistu pintaepiteelissä suoliston metaplastiset rauhanen ja mahan foveolar epiteelin. Taajuus vähennetään p21: n ilmentyminen oli 59 190 kasvaimia (31,1%). Alennettu p21 ilmentymistä yleisesti havaittu mahan, suoliston ja sekoitetaan fenotyyppejä. Ei ollut merkittävää eroa pienennetään p21 ilmaisuja välillä 3 fenotyyppien.
Ilmentyminen p27 rajoittui pintaepiteelissä ja pohjan suoliston metaplastiset rauhanen. Taajuus vähennetään p27 ekspressio oli hyvin alhainen mahasyövistä että selvitimme (12/190, 6,3%). Sen sijaan, taajuus p27 yli-ilmentyminen havaittiin 53 190 kasvaimia (27,9%). Taajuus p 27 yli-ilmentyminen oli suurempi suoliston fenotyypin (31/85, 36,5%) kuin mahalaukun (6/23, 26,1%) ja sekoitettiin fenotyypit (16/79, 20,2%). Nämä erot eivät olleet merkittäviä.
Sykliini D1 ilmaistiin alemman puoli suolen metaplastiset rauhanen. Vuonna mahasyövistä tutki, 27 190 tapausta (14,2%) osoitti yliekspressoidun sykliini D1. Sykliini D1 yliekspressoitui mahalaukun fenotyypin 7 23 tapausta (30,4%). Vertailun yliekspressio sykliini D1 todettiin 11,8% (10/85) ja 12,7% (10/79) suoliston ja sekoitetaan fenotyyppejä, vastaavasti. Ei havaittu merkittävää eroa välillä mahalaukun fenotyypin ja muita tyyppejä.
Ilmentäminen sykliini A rajoittuu ensisijaisesti alemman puoliskon suoliston metaplastiset rauhanen. Positiivinen värjäys sykliini A: havaittiin 42,1% (80/190). Taajuus sykliini A: yli-ilmentymisen oli suurempi mahalaukun fenotyypin (16/23, 69,6%) kuin suoliston fenotyypin (25/85, 29,4%; p < 0,01). Ei kuitenkaan havaittu merkittävää eroa välillä mahan ja sekoitettu fenotyypit (39/79, 49,4%).
Ei-neoplastisia rauhaset olivat enimmäkseen negatiivisia sykliini E. mahalaukun syövistä tutki, taajuus sykliini E yli-ilmentymisen oli hyvin matala. Ei merkittävää eroa 3 musiinituoton fenotyyppien nähtiin.
Tässä tutkimuksessa vain ydin- lauseke β-kateniinin pidettiin positiivisena. O ydin- ilmentyminen β-kateniinin havaittiin ympäröivän ei-neoplastisia limakalvon, paitsi mahanportin rauhaset. Useimmat mahanportin rauhaset ilmaistuna ydin- β-kateniinin. Nuclear β-kateniinin ilmentymistä havaittiin 80 190 kasvaimia (36,8%). Vaikka suolen fenotyyppi (44/85, 51,8%) osoitti korkeimman taajuuden ydin- β-kateniinin joukossa 3 fenotyyppejä, ero ei ollut merkitsevä.
Korkea leviämisen nopeus kasvainsolujen osoitettiin yli 30% Ki -67 PR useimmissa syöpien että tutkimme. Mukaan meidän kriteerit, korkea leviämisen löydettiin 101 190 kasvaimia (53,2%). Korkea kasvainsolujen lisääntymistä havaittiin useammin mahalaukun ja sekoitetaan fenotyyppejä verrattuna suoliston fenotyyppi (p < 0,01 ja p < 0,05). Olemme tiivistää nämä tulokset solusyklin liittyviä proteiineja perustuu musiinituoton fenotyyppiin kuvassa 2. Lisäksi edustava esimerkki on esitetty kuvassa 3. Kuva 2 Taajuudet solusykliaktiivisuuden kaltainen proteiini ilmaisuja mahan, suoliston ja sekoitetaan fenotyyppejä. Mahalaukun fenotyyppi syövät ovat ominaista p53 ja sykliini A: overexpressions. Vaikka taajuus p27 yli-ilmentymisen välillä suoliston fenotyyppi ja muita fenotyyppejä ei saavuttanut tilastollista eroa, tämä voi olla ominaisuus suoliston fenotyypin. Vähentäminen p21 ja kertymistä β-kateniinin yleisesti havaittu 3 fenotyypit. Ki-67 positiivisten määrä on suurempi mahalaukun fenotyypin tai seka fenotyyppi kuin suoliston fenotyypin. Tilastollinen vertailut käytetään Tamhane testit kaikille 3 fenotyyppien.
Kuva 3 Tyypillinen esimerkki suoliston intramucosal eriytetty-tyyppinen syöpä mahan fenotyypin. a. Pienitehoiset näkymä kasvainkudoksen. b. Suuritehoiset näkymä kasvainkudoksen. c. p53 yli-ilmentyminen havaittiin. d. p21 vähennettiin. e. p27 yliekspressoitui. f. Yliekspressio sykliini A. g. Alhainen ilmentyminen sykliini D1. h. Vain Muc2 ilmaistiin tämän kasvain, mikä viittaa suoliston fenotyyppi.
Keskustelu
huolimatta laskeva ilmaantuvuus, mahasyövän edelleen tärkeä lääketieteellinen ongelma kaikkialla maailmassa, ja se on yleisin kasvain Japanissa. Intramucosal syöpä määritellään kasvaimen kaikkein varhaisessa vaiheessa syöpään. On välttämätöntä tutkia intramucosal syövän arvioimiseksi synnyssä mahasyövän. On yleisesti hyväksytty, että syöpäsolu syntyy johtuen poikkeavuuksia solukierron säätelyssä, joka koostuu useista solukierron liittyviä proteiineja, kuten sykliinejä, sykliiniriippuvainen estäjät, p53 ja β-kateniinin. Lisäksi viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että erillisiä kliinis-patologisia löydöksiä mahasyövän on ominaista mucin ilmaisuja. Olemme tutkineet epänormaali ilmaisuja solusyklin liittyviä proteiineja, jotka edistävät mahasyövän perustuu musiinituoton fenotyyppejä mahalaukun intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä.
Esillä olevassa tutkimuksessa, immunohistokemia käytettiin tutkimaan ekspressiotasoja solusyklin liittyviä proteiineja. Immunopositivity solusyklin-sukuiset proteiinit kasvainkudoksen määritettiin vertaamalla tasojen kasvainkudoksen ja sen ympärillä ei-kasvainkudoksessa. Niiden mukaan, taso immunopositivity kasvainkudoksen voivat vaihdella tapauskohtaisesti. Kuitenkin erottamalla parametreja näiden syöpien osaksi "matala" ja "korkea" luokkaan sen vertailua näiden tekijöiden ei-kasvainkudoksessa voi olla epäsovinnainen menetelmä. "Ei-neoplastisia" kudos sisältää gastriitti (krooninen tai krooninen aktiivinen) ja /tai suoliston metaplasiaa; parametrit näiden eri tulehdus- tai metaplastiset kudoksia voivat vaihdella huomattavasti. Se voi olla mielekästä käyttää absoluuttista nopeudella (eli todellinen%), sen sijaan, että tämä sisäinen suhteellinen arvo. Olemme kuitenkin sitä mieltä, että tämä immunohistokemiallinen kriteeri on tärkeää löytää mahdollisia aktiviteetteja solukierron-sukuiset proteiinit varhaisessa vaiheessa mahalaukun eriytetyn-tyypin syöpiä, kun otetaan huomioon, että ei-kasvainkudoksessa ympäröivä kasvain kudos liittyy läheisesti kasvainten kehittymiseen.
on uskottu, joukossa patologian että mahalaukun fenotyyppi mahasyövän osoittaa heikompilaatuisen atypia mahalaukun intramucosal eriytetty-tyypin syöpiä (19). Kuitenkin tässä tutkimuksessa, mahalaukun intramucosal eriytettyä-tyyppinen syöpiä, jotka selvitimme, mahalaukun fenotyyppi osoitti korkealaatuisesta atypia. Vaikka syy on edelleen tuntematon, yksi mahdollinen syy on se, että mahalaukun fenotyyppi osoittaa huonolaatuista atypia, joka muistuttaa mahalaukun foveolar epiteelin histologisesti, ehkä on sisällytetty aiemmissa tutkimuksissa. Esillä olevassa tutkimuksessa, vain yksi tällainen kasvain havaittiin. Lisäksi nämä erot voivat johtua näytteiden määrä tai etnisen tai etiologic tekijöihin. On hyvin tunnettua, että p53 yli-ilmentyminen korreloi kasvaimen. Tässä tutkimuksessa, ehdotamme, että on järkevää näyttää tiheä p53 yli-ilmentymisen varten mahan fenotyyppi verrattuna muihin fenotyyppejä.
Tässä tutkimuksessa p53 yli-ilmentyminen oli useammin mahalaukun fenotyypin kuin suoliston tai sekoitettuna fenotyyppejä. Tämä havainto viittaa siihen, että p53 yli-ilmentyminen on olennainen rooli, ainakin alussa kehittämiseen mahalaukun fenotyypin syöpä, vaikka aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet asteittaista nousua p53 yli-ilmentymisen syöpien alkaen aikaista vaiheissa [12].
Tässä tutkimus, vähensi p21 ilmentymistä havaittiin noin 30% 3 musiinituoton fenotyyppejä. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että alhainen ilmentyminen p21 korreloi potilaan ennusteeseen mahasyövän [5, 6]. Kuitenkin hyvin vähän tiedetään p21 ilmentymistä mahasyövistä perustuen musiinituoton fenotyyppejä. Lisäksi yhteenliittymää p21 ilmaisun kanssa kasvain vaiheessa (kasvain syvyys) on edelleen tuntematon. Meidän havainto viittaa siihen, että alentunut p21 ilmaus näyttelee yhteinen rooli varhaista kehitystä 3 musiinituoton fenotyypit mahalaukun eriytetyn-tyypin syöpiä. Kuitenkin aiemman tutkimuksen mukaan progressiivinen väheneminen p21 ilmaisun tapahtunut kehittynyt vaiheeseen mahalaukun eriytetyn-tyyppinen syövän varhaisessa vaiheessa [6]. p21 ilmentyminen korreloi myös ilmaisuja muiden solusyklin liittyvät proteiinit, kuten p27 ja Ki-67, mahdollisesti p53-riippuvaisen reitin kautta [1, 5, 6]. On oletettu, että p21 toimii yhteistyössä p53: n kanssa ja, sen seurauksena, solusyklin ohjataan p53-riippuvaisen reitin kautta [1, 5]. Lisäksi uskotaan, että p21 inhiboi myöskin yhteistyö P27 [1, 5]. Esillä olevassa tutkimuksessa, kuitenkin, löysimme ole korrelaatiota p21 pelkistämällä p27 vähentäminen tai käänteinen korrelaatio p27 pelkistämällä p53 yli-ilmentyminen (dataa ei esitetty). Ehdotamme, että eri reitti on olemassa ohjaamiseksi solusyklin ihmisen syöpien.
On hyvin tunnettua, että p27 on prototyyppiä tuumorisuppressorigeenin [1-3]. Kuitenkin tuore tutkimus on osoittanut, että, kun taas joissakin tapauksissa p27 estää solusyklin muissa tapauksissa se edistää etenemistä seuraavaan vaiheeseen solusyklin [23]. On raportoitu, että joko tappiolla tai alhainen ilmentyminen p27 korreloi kasvaimen etenemiseen tai potilaan ennusteeseen [24, 25]. Päinvastoin kuin muissa tutkimuksissa, osoitimme, että heikkoa ilmentymistä (vähennys) p27 oli hyvin matalataajuista meidän sarjassa mahasyövistä. Esillä olevan havaintojen vähensi p27 ilmaus on vain vähäinen rooli kehitettäessä eriytetyn tyypin syöpien.
Sen sijaan yli-ilmentyminen p27 oli usein löytyy suoliston fenotyypin verrattuna muihin 2 fenotyyppejä, vaikka ero niiden välillä ei saavuttanut tilastollisesti merkitsevä tasolla. Onko tämä yliekspressio p27 liittyy solusyklin inhibitio tai solusyklin etenemistä ei tunneta, vaikka useita selityksiä ovat ehdottaneet. Ensimmäinen on se, että p27, joka on yli-ilmentynyt tukahduttamista solusyklin etenemisen tuumorisoluissa johtuu negatiivista palautetta mekanismia. Toisaalta, toinen selitys on, että yli-ilmentyminen p27 on positiivisesti liittyy etenemistä solusyklin kasvaimen solut; toisin sanoen p27 toimii onkogeenisessä tekijänä [23]. Lisäksi viimeaikainen tutkimus on osoittanut, että ilmentymistä p27 säätelee ilmaus Skp2, joka on ubikitiinipromoottori ligaasilla alayksikköä p27 [26]. Tämän raportin mukaan, ilmaus p27 oli korreloi käänteisesti Skp2 ilme.
Sykliini D1 yli-ilmentyminen vain osoitti matalataajuista alkuvaiheessa mahalaukun eriytetyn tyypin syöpiä (27/190, 14,2%). Vaikka erot eivät saavuttaneet merkittävää tasoa, taajuus sykliini D1 yli-ilmentymisen oli suurempi mahalaukun fenotyypin kuin suolen ja sekoitetaan fenotyyppejä. Sykliini D1 on aiemmin tutkittu useita sarjan mahasyövistä Raportoitu taajuus 20 ~ 56% on yli-ilmentymisen on raportoitu [27-29], poikkeavat meidän tuloksia. Mahdollisena syynä näihin eroihin sykliini D1 yli-ilmentymisen, vaikka alussa eriytetty-tyypin syöpiä, lukuun ottamatta mahalaukun fenotyyppi, eivät vaadi kasvua sykliini D1, kun kasvain on kehittynyt, kasvaimen solut tarvitsevat korkeatasoista sykliini D1 syövän etenemiseen. Tämä viittaa siihen, että sykliini D1 yli-ilmentyminen korreloi potilaan ennustetta mahasyövistä [28].
Yliekspressio sykliini A oli myös yleisempää mahalaukun ja sekoitetaan fenotyyppejä verrattuna suoliston fenotyyppi. Tämä viittaa siihen, että yli-ilmentyminen sykliini A: lla on merkittävä rooli kasvainten synnyssä maha- ja sekoittaa fenotyyppejä. Näin ollen syöpien, hankinta mahan musiinia ilmentyminen voi liittyä sykliini A: n yliekspressio, joka sitten johtaa korkeaan kasvaimen leviämisen. Lisäksi sykliini A tiiviisti potilaan ennusteeseen tai kasvaimen aggressiivisuus [8, 9]. Tämä voi osoittaa, että sykliini yliekspressio liittyy sekä kasvainten kehittymistä ja etenemistä noin puolet eriytetyn tyyppisten syöpien.
Tässä tutkimuksessa, sykliini E yli-ilmentyminen osoitti matalia taajuuksia 3 fenotyypit. Sen sijaan, aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että sykliini E yli-ilmentyminen korreloi huonon lopputuloksen kanssa [4, 10], vaikka vastakkaisia ​​tuloksia on ehdotettu [30]. Esillä olevat tulokset osoittavat, että sykliini E yli-ilmentyminen lla ei tärkeä rooli varhaisessa kasvainten synnyssä on eriytetty tyyppisten syöpien. Lisäksi yliekspressio sykliini E voi pääasiassa edistää etenemistä mahasyövistä. Nämä havainnot viittaavat siihen, että suuri lisääntyminen mahalaukun fenotyyppi voi olla tunnusomaista, että yli-ilmentyminen sykliini D1 ja /tai sykliini A, ja että sekoitettu fenotyyppi liittyy sykliini A: n yliekspressio.
On hyvin tunnettua, että β-kateniinin ilmentymistä ylössäätelee solusyklin ja sillä on keskeinen rooli Wnt signaalinvälitysreitin [14, 15]. Esillä olevassa tutkimuksessa, on mielenkiintoista huomata, että β-kateniinin ilmentymistä yleisesti havaittu varhaisessa eriytettyä-tyypin syöpien, että me tutkimme. Se on jo hyväksytty, että β-kateniinin ilmentyminen on kriittinen koolonadenooma kehittämiseen [31, 32]. Tämänhetkiset tulokset ja aiemmat tutkimukset koskien suolen kasvainten osoittavat, että β-kateniinin ilmentyminen voi olla yhteinen muutos varhaista kehitystä ruoansulatuskanavan kasvaimet [31]. Tämä voi selittyä havainnot, että syöpien, geenipromoottorit liittyy Wnt signaalireitin ovat korkeasti metyloitu [32-34], joka johtaa ydinaseiden kertyminen β-kateniinin ilme.
Johtopäätökset
Yhteenvetona, ehdotamme, että solun musiinin fenotyypit intramucosal eriytetyn-tyyppinen adenokarsinoomia vatsan ovat riippuvaisia ​​erillisiä solusyklin liittyviä muutoksia, ja että kliinis-patologisia löydöksiä johtua erilaisista poluista, jotka perustuvat musiiniekspressiota: mahalaukun, suoliston ja sekoitetaan fenotyypit . Kuvio 4 esittää uutta karsinogeneesin malli intramucosal eriytetyn-tyypin adenokarsinoomat, joka perustuu niiden musiinia fenotyypit. Perustuu poikkeavuuksia solusyklin liittyviä proteiineja, overexpressions p53 ja sykliini A: luonnehtivat mahalaukun fenotyyppi syöpiä, kun taas yli-ilmentyminen p27 voi liittyä kehittämiseen suoliston fenotyypin syöpiä. Sen sijaan, mixed-fenotyyppi syövät ovat ominaista sykliini A: yli-ilmentymisen.

• Associations of a PTPN11 G /A polymorfismin introni 3 kanssa Helicobacter pyloriseropositivity, mahalaukun surkastuminen ja mahasyövän Japanese
• Järjestelmällinen katsaus ja meta-analyysi laparoskooppisia ja avoin gastrectomy pitkälle mahasyövän