Analyse des protéines liées au cycle cellulaire dans intramuqueux gastrique cancers de type différencié basé sur mucine phénotypes: une nouvelle hypothèse de la cancérogenèse gastrique précoce basée sur mucine phénotype

Analyse des protéines liées au cycle cellulaire dans intramuqueux gastrique cancers de type différenciés sur la base de mucine phénotypes: une nouvelle hypothèse de la cancérogenèse gastrique précoce basée sur mucine phénotype
Résumé de l'arrière-plan
Anomalies de la cellule régulateurs du cycle sont des caractéristiques communes dans cancers humains, et plusieurs de ces facteurs sont associés au développement précoce des cancers gastriques. Cependant, des études récentes ont montré que la tumorigenèse du cancer gastrique a été caractérisée par la mucine expression. Ainsi, les profils d'expression des protéines liées au cycle cellulaire ont été étudiées dans la phase précoce des cancers gastriques de type différencié pour déterminer toutes les relations mécanistiques avec phénotypes mucine.
Méthodes
immunocoloration pour cyclines D1, A, E, et p21, p27, p53 et de β-caténine a été utilisé pour examiner les déficiences du cycle cellulaire dans les cancers gastriques 190 intramuqueux de type différencié. phénotypes mucine ont été déterminées par les expressions de MUC5AC, MUC6, MUC2 et CD10. Un taux positif Ki-67 (PR) a également été examiné.: Résultats
surexpressions de p53, la cycline D1 et de la cycline A étaient significativement plus fréquentes dans un phénotype gastrique qu'un phénotype intestinal. Cycline A a été surexprimé dans un phénotype mixte par rapport à un phénotype intestinal, tandis que p27 surexpression était plus fréquente dans un phénotype intestinal que dans un phénotype mixte. Réduction de la p21 est une caractéristique commune des cancers de type différencié intramuqueux gastrique Conclusions de examiné.
Nos résultats suggèrent que les niveaux de certains régulateurs du cycle cellulaire semblent être associés à la mucine phénotypes des cancers de type différencié gastrique précoce. Arrière-plan

la progression dans le cycle cellulaire et la prolifération cellulaire sont sous le contrôle d'une série de cyclines et kinases (CDK), des complexes cycline-dépendantes [1-3]. L'accumulation des données montre que la progression de la tumorigenèse implique fréquemment des anomalies dans les expressions de cyclines et d'autres gènes du cycle cellulaire liés [1-3]. Anomalies ont été trouvés pour les cyclines D1, A, E et leurs partenaires de coopération, tels que kinases cycline-dépendantes (CDK), qui favorisent la progression du cycle cellulaire [1, 3]. En outre, ces facteurs progressifs peuvent être inhibées par des inhibiteurs, tels que p21, p27 et p57, et un autre groupe de protéines inhibitrices, y compris p16, p15 et p18 [4-10]. La prolifération incontrôlée qui caractérise les cellules tumorales peut être expliquée en grande partie par le gain et /ou la perte des fonctions des protéines qui comprennent le cycle cellulaire. Règlement de ces protéines liées au cycle cellulaire est également régie par d'autres facteurs, y compris p53 et β-caténine, et leurs modifications nuisent aussi le cycle cellulaire, ce qui entraîne une prolifération incontrôlée [11-15].
De la cellule au-dessus de e Cycle des protéines apparentées, des régulateurs clés de la progression dans la phase G1 du cycle cellulaire sont cycline D1 et la cycline E, p53, p21 et p27 [1, 4, 6, 12]. Leurs expressions anormales ont été pensés pour jouer un rôle essentiel dans la progression de la tumorigenèse et ont été trouvés être dérangé dans un certain nombre de tumeurs malignes humaines. Cycline A est également un membre de la superfamille de protéines de la cycline qui peut être activé lors du passage de la G1 à la phase S du cycle cellulaire. expressions anormales de la cycline A sont corrélés avec des résultats médiocres dans divers cancers humains [8, 9]. En outre, l'expression nucléaire de la β-caténine est impliquée dans les cancers gastro-intestinaux [14, 15]. β-caténine dans le noyau accumule en raison d'une déficience de la voie de signalisation Wnt et son expression nucléaire favorise la progression du cycle cellulaire et la prolifération cellulaire [14, 15]. Cependant, à ce jour son activité n'a pas été démontré, d'affecter la pathogenèse des cancers gastriques de type différencié précoce.
Des études récentes ont montré que les expressions mucine cellulaires et les phénotypes tumoraux sont associés aux résultats et tumorigenèse clinico-pathologiques dans differentiated- taper les cancers gastriques [16-19]. Les phénotypes mucine de tumeurs ont été principalement classés en 3 types: phénotypes gastriques, intestinaux et mixtes [16, 17]. Le phénotype gastrique est caractérisée par des résultats médiocres, les caractéristiques histologiques distinctes et un sous-type spécifique d'altérations génétiques, y compris l'instabilité des microsatellites (MSI) [17, 18]. En revanche, le phénotype intestinal est d'un type très bien différenciée, avec une faible activité proliférative et un manque de MSI [17]. Les expressions de mucine par les cellules tumorales définissent les caractéristiques de la tumeur dans les cancers gastriques [16-19]. Ainsi, il est important pour la compréhension des premiers tumorigeneis des cancers gastriques pour examiner les altérations biologiques en fonction de ces phénotypes mucine [16-19].
Bien qu'un certain nombre d'études sur les expressions de facteurs liés au cycle cellulaire ont été rapportés [ ,,,0],3-7], les associations de cancers gastriques de type différencié précoce et leurs phénotypes mucine et des altérations des protéines liées à la cellule-cycle ne sont pas pleinement compris. Dans la présente étude, nous avons examiné des anomalies des protéines liées au cycle cellulaire de la phase précoce des cancers gastriques de type différenciés sur la base de mucine phénotypes.
Méthodes
patients des matériaux pour cette étude ont été obtenus à partir de 190 patients avec cancers gastriques précoces primaires qui ont été diagnostiqués à la Division de diagnostic moléculaire Pathologie, Département de pathologie, Université médicale Iwate, Morioka, Japon. Le consentement éclairé a été donné dans tous les patients que nous avons examinés. En outre, notre étude a été approuvée par notre comité d'éthique (titre, analyse moléculaire des tumeurs gastro-intestinales et de la muqueuse environnante; numéro de référence, H21-140, comité d'éthique de l'Université médicale Iwate). Ces tumeurs étaient compatibles avec les cancers de type différenciés intramuqueux, et ont été obtenus à partir d'échantillons de dissection sous-muqueuse endoscopique (ESD). Les critères histologiques utilisés pour faire des diagnostics histologiques étaient basées sur nos critères d'hospitalisation [16], qui ont été modifiés de ceux de la Société de recherche japonais pour les cancers gastriques [20], comme il existe des divergences dans les jugements histologiques entre les pathologistes japonais et occidentaux. Les données détaillées clinico-pathologique (l'âge du patient, le sexe, le site de la tumeur, la taille de la tumeur, le type et le degré de différenciation tumorale macroscopique) sont indiqués dans le fichier supplémentaire 1.
Dans cette étude, intramuqueux cancers de type différencié ont été sous-classés en 3 groupes selon le grade nucléaire de la tumeur: faible, intermédiaire ou élevé. Le grade de la tumeur a été déterminée selon des critères publiés antérieurement [17]. En bref, le cancer de bas grade a été diagnostiqué par la présence de cellules avec agrandies, des noyaux hyperchromatiques qui ont été largement confinées aux parties basales des cellules, mais qui avait des glandes plus irrégulières et complexes que les adénomes gastriques. Tumeurs qui contenaient des cellules ayant une perte évidente de la polarité, l'irrégularité nucléaire élevée, nucléole élargie et hyperchromatin ont été classés comme des cancers de haut grade. Les cancers de haut grade ont souvent montré significative atypie architecturale, tels que les distorsions architecturales élevées ou glandulaires. Résultats intermédiaires entre cancers bas et de haute qualité ont été reconnus comme des cancers intermédiaires. Cependant, la distinction histologique entre adénome gastrique et le cancer de bas grade était parfois très difficile. Les lames ont été évalués indépendamment par 2 pathologistes expérimentés (S. T. et N. S.); dans certains cas dans lesquels les évaluations ont fourni des résultats différents, une interprétation de consensus a été atteint après un nouvel examen.
immunohistochimie
Immédiatement après l'excision, les échantillons ont été fixés dans 20% du formol tamponné neutre, noyée dans la cire de paraffine, coupées en 3 um sections de paraffine et colorées avec de l'hématoxyline et de l'éosine (HE) pour la microscopie lumineuse de routine. Pour la coloration immunohistochimique, 3 um d'épaisseur des sections supplémentaires ont été découpés à partir de tissu inclus en paraffine, et placé sur des lames en verre de poly-L-lysine. En bref, les coupes ont été déparaffinées dans le xylène et déshydratées. Pour la détermination de la mucine phénotypes, immunocoloration a été fait pour CUM 2 (Ccp58, Novocastra Laboratories, Newcastle, Royaume-Uni), CD10 (56C6, Novocastra Laboratories), CUM 5AC (CLH2, Novocastra Laboratories) et CUM 6 (CLH5, Novocastra Laboratories, Newcastle , ROYAUME-UNI). En outre, immunocoloration a été fait pour p53 (clone, DO7, DAKO, Carpinteria, CA, USA), Ki-67 (MIB-1, Dako), p21 (SX118, Dako), p27 (SX53G8, Dako), la cycline D1 ( SP4, Nichirei Co., Tokyo), la cycline E (13A3, Novocastra Laboratories), la cycline A (6E6, Novocastra Laboratories) et β-caténine (BD, Transduction Laboratories).
immunohistochimie ont utilisé le système DAKO Envision +, composé de dextran Les polymères conjugués à la peroxydase de raifort (DAKO) comme décrit précédemment [16, 17]. Les échantillons ont été chauffés par micro-ondes dans un tampon citrate (pH 6,0) 3 fois pendant 5 minutes à chaque fois à 750W avant les réactions avec des anticorps (H2500, Micro-processeur, Bio Rad, États-Unis) comme décrit précédemment [16, 17]. Hématoxyline a été utilisé comme contre-coloration.
Évaluation de la mucine expression
Dans cette étude, les tumeurs gastriques ont été classés en 4 groupes en fonction de leurs habitudes de immunocoloration. Un phénotype gastrique est définie comme ayant des tumeurs intra-cytoplasmique prédominante mucine de type gastrique, tel que déterminé par immunocoloration avec la mucine gastrique humaine (MUC5AC) et /ou de la glande pylorique mucine (MUC6), mais sans MUC-2 des cellules positives. Un phénotype intestinal a été indiqué par une tumeur montrant des cellules MUC2-positives et /ou CD10 positive (avec une bordure en brosse). Ces tumeurs ont été différenciées à petites cellules absorbantes intestinales. tumeurs phénotypiques intestinales ont été sous-classés en 2 groupes: le type colique (positif pour CUM 2 seulement) et un petit type intestinal (positif pour CD10). Un phénotype mixte a été définie comme étant une tumeur ayant une immunocoloration compatible avec le type gastrique (cellules positives pour MUC5AC et /ou de la glande pylorique mucine), ainsi que le type mucine intestinal (cellules positives pour CD10 et /ou MUC2). Enfin, les tumeurs sans immunocoloration des phénotypes soit gastriques ou intestinaux ont été affectés à un type "non classés". résultats immunopositives pour > 5% des cellules tumorales ont été considérés comme des résultats positifs et immunopositives pour < 5% comme négatif, conformément aux rapports précédents [16, 17, 21].
Mesurer le taux positif Ki-67 (PR)
domaines choisis au hasard dans chaque échantillon ont été sélectionnés dans lequel compter Ki-67 noyaux positifs . Le taux positif Ki-67 a été calculé comme le pourcentage de Ki-67 noyaux des cellules tumorales positives déterminé dans 10 champs à fort grossissement (HPF, x 400), qui a été déterminée après le comptage des cellules tumorales d'au moins 500 pour chaque échantillon de la tumeur. Tumeur activité proliférative a été classé en 2 groupes: haute et basse. L'activité proliferative a été déterminée selon nos critères [16, 17]. En bref, PR du tissu a été mesurée à la fois dans le tissu tumoral et le tissu non néoplasique environnant. Prolifération élevée a été considéré comme si PR était plus élevée dans le tissu tumoral que dans le tissu non néoplasique. Faible prolifération a été jugée si PR était plus faible dans le tissu tumoral que dans le tissu non néoplasique.
Évaluation immunohistochimique des protéines liées au cycle cellulaire
La proportion de cellules tumorales par section a été évaluée à l'oeil et attribué un score aussi résumée dans 2A fichiers supplémentaires. Un total de 500 cellules ont été comptées dans les champs aléatoires à partir des zones représentatives de la lésion. Pour tous les marqueurs, seule coloration nucléaire a été considéré comme positif. L'intensité de la coloration a été estimée sur une échelle de 5 points (0 à 6+) et un score a été attribué en fonction de l'intensité (2B de fichier supplémentaire). L'indice de coloration était simple produit multiplicatif des scores de cellularité et de coloration. Ensuite, une expression élevée pour des cellules tumorales a été enregistrée si l'indice de coloration était plus élevée dans les cellules tumorales que dans son tissu non néoplasique environnant. En revanche, une faible expression pour les cellules tumorales a été enregistrée si l'indice de coloration est inférieur ou égal dans les cellules tumorales que dans les tissus non néoplasiques. Par exemple, une figure représentative est représentée sur la figure 1. Les critères originaux ont été décrits précédemment [22], et les présents critères ont été utilisés avec des modifications mineures. Deux sections ont été colorées et les valeurs sont basées sur la moyenne des résultats individuels 2. Figure 1 Exemple de intramuqueux gastrique de type différencié cancer. Alors que le score de l'indice pour la cycline D1 expression est 16 dans la muqueuse du cancer gastrique (b), le score est de 4 dans ses environs muqueuse non néoplasique (a). La tumeur qui est montré dans la figure 1b est considérée adénocarcinome ainsi différenciée par les pathologistes japonais, bien que cette tumeur est considérée comme adénome gastrique ou dysplasie par les pathologistes occidentaux.
Résultats de l'analyse statistique sont donnés à titre médiane ou des valeurs moyennes. L'analyse statistique a utilisé le test Tamhane des comparaisons entre les 3 groupes et des tests de chi carré pour les comparaisons entre les 2 groupes. La signification statistique a été établie à la p < Résultats de 0,05 niveau.
caractéristiques clinico-pathologiques
Comme le montre le fichier supplémentaire 3, des cancers de type différencié 190 intramuqueux gastrique, 23 (12,1%) étaient du phénotype gastrique, 85 (44,7%) ont été le phénotype intestinal et 79 (41,6%) ont été classés comme phénotypes mixtes. Seulement 3 (1,6%) des tumeurs étaient du type non classés. résultats clinico-pathologique sur la base des phénotypes mucine sont également répertoriés dans le fichier supplémentaire 3. Il n'y avait pas de différence significative pour l'âge, la taille de la tumeur, l'emplacement, le type microscopique ou le type histologique entre les 3 phénotypes. Toutefois, pour les phénotypes gastriques et mixtes, l'incidence des tumeurs de haut grade étaient significativement plus élevés pour les phénotypes gastriques et mixtes que le phénotype intestinal (p < 0,01 et p < 0,05, respectivement). En outre, le ratio hommes /femmes pour le phénotype mixte était eurs que pour les autres types (p < 0,05)
Dans la présente étude, les phénotypes gastriques ont été classés en 3 sous-phénotypes:. MUC5AC (+) /MUC6 (+), MUC5AC (+) /MUC6 (-) et MUC5AC (-) /MUC6 (+). Quinze (65,2%) avaient le MUC5AC (+) /MUC6 (+) modèle, 5 (21,7%) ont eu le MUC5AC (+) /MUC6 (-) motif et 3 (13,1%) ont été subdivisés comme MUC5AC (-) /MUC6 (+) modèle. Parmi les 3 sous-phénotypes gastriques, aucune différence clinicopathologiques ont été trouvés. En revanche, les phénotypes intestinaux ont été sous-divisés en intestin grêle (N = 67) et du côlon (n = 18) phénotypes. Il n'y avait pas de différences significatives entre les deux pour l'âge, la taille de la tumeur, l'emplacement, le type macroscopique ou type histologique.
Expressions de protéines liées au cycle cellulaire par mucine phénotypes
No p53 surexpression a été trouvé dans toute la muqueuse non néoplasique environnante. La surexpression de p53 a été observée dans 33 des 190 cas que nous avons examinés (17,4%), et a été le plus souvent vu dans le phénotype gastrique (10/23, 43,5%) par rapport aux 2 autres types (de phénotype intestinal, 13/85, 15,3 % et le phénotype mixte, 9/79, 11,4%). Bien que la différence entre les phénotypes gastriques et intestinaux n'a pas atteint une signification statistique (p = 0,054), l'estomac et les phénotypes mixtes ont fait apparaître une différence significative (p < 0,05). En outre, aucun p53 surexpression a été trouvé dans les cancers de bas grade (0/26). En revanche, p53 a été surexprimé dans 11 des 103 cancers de grade intermédiaire (10,7%) et 22 des 61 cancers de haut grade (36,1%). Des différences significatives entre le cancer de haute qualité et de faible grade ou cancers de grade intermédiaire ont été trouvés (p < 0,01).
p21 a été principalement exprimée dans l'épithélium superficiel de la glande métaplasie intestinale et l'épithélium fovéolaire gastrique. La fréquence de l'expression de p21 réduite était de 59 190 tumeurs (31,1%). expression de p21 réduit a été généralement observée dans les phénotypes gastriques, intestinaux et mixtes. Il n'y avait pas de différence significative pour les expressions de p21 réduits entre les 3 phénotypes.
L'expression de p27 a été confinée à l'épithélium superficiel et la base de la glande métaplasie intestinale. La fréquence de l'expression de p27 réduite était très faible dans les cancers gastriques que nous avons examinés (12/190, 6,3%). En revanche, la fréquence de p27 surexpression a été observée dans 53 des 190 tumeurs (27,9%). La fréquence de 27 p surexpression était plus élevée dans le phénotype intestinal (31/85, 36,5%) que dans l'estomac (23/06, 26,1%) et les phénotypes mixtes (16/79, 20,2%). Cependant, ces différences ne sont pas significatives.
Cycline D1 a été exprimée dans la moitié inférieure de la glande métaplasie intestinale. Dans les cancers gastriques examinés, 27 des 190 cas (14,2%) ont montré surexprimée cycline D1. La cycline D1 est surexprimée dans le phénotype gastrique chez 7 des 23 cas (30,4%). Par comparaison, la surexpression de la cycline D1 a été trouvé dans 11,8% (10/85) et 12,7% (10/79) des phénotypes intestinales et mixtes, respectivement. Aucune différence significative n'a été observée entre le phénotype gastrique et les autres types. Le plus expression de la cycline A était principalement limitée à la moitié inférieure de la glande métaplasie intestinale. coloration positive pour la cycline A a été détecté dans 42,1% (80/190). La fréquence de la cycline A surexpression était plus élevée dans le phénotype gastrique (16/23, 69,6%) que dans le phénotype intestinal (25/85, 29,4%; p < 0,01). Cependant, aucune différence significative n'a été trouvée entre la gastrique et phénotypes mixtes (39/79, 49,4%). Glandes
non néoplasiques étaient la plupart du temps négatif pour la cycline E. Dans les cancers gastriques examinés, la fréquence de la cycline E surexpression était très faible. Aucune différence significative entre les 3 phénotypes mucine a été vu.
Dans cette étude, seule l'expression nucléaire β-caténine a été considéré comme positif. Aucune expression nucléaire de la β-caténine a été observée dans la muqueuse non néoplasique environnant, à l'exception des glandes du pylore. La plupart des glandes pyloriques exprimées β-caténine nucléaire. expression β-caténine nucléaire a été trouvé dans 80 des 190 tumeurs (36,8%). Bien que le phénotype intestinal (44/85, 51,8%) a montré la plus haute fréquence pour β-caténine nucléaire parmi les 3 phénotypes, la différence n'a pas été significative.
Un taux élevé de prolifération de cellules tumorales a été montré plus de 30% Ki -67 PR dans la plupart des cancers gastriques que nous avons examinés. Selon nos critères, une prolifération élevée a été trouvée dans 101 des 190 tumeurs (53,2%). Forte prolifération des cellules tumorales a été plus fréquemment observés dans les phénotypes gastriques et mixtes par rapport au phénotype intestinal (p < 0,01 et p < 0,05). Nous avons résumé de ces résultats pour les protéines liées au cycle cellulaire basé sur le phénotype mucine sur la figure 2. En outre, un exemple représentatif est représenté sur la figure 3. La figure 2 Fréquences des cellules d'expressions de protéines liées au cycle dans l'estomac, l'intestin et les phénotypes mixtes. cancers phénotypiques gastriques sont caractérisés par p53 et cycline surexpressions A. Bien que la fréquence de p27 surexpression entre le phénotype et d'autres phénotypes intestinales n'a pas atteint différence statistique, ce qui peut être caractéristique du phénotype intestinal. Réduction de p21 et l'accumulation de β-caténine sont fréquemment observés dans les phénotypes 3. Ki-67 taux positif est plus élevé dans le phénotype gastrique ou phénotype mixte que dans le phénotype intestinal. Les comparaisons statistiques utilisées essais Tamhane pour les 3 phénotypes.
Figure 3 Un exemple représentatif de intramuqueux intestinal de type différencié cancer du phénotype gastrique. une. Vue de faible puissance du tissu tumoral. b. Vue de puissance élevée du tissu tumoral. c. p53 surexpression a été vu. ré. p21 a été réduit. e. p27 a été surexprimé. F. La surexpression de la cycline A. g. Faible expression de la cycline D1. h. Seulement muc2 a été exprimé dans cette tumeur, suggérant phénotype intestinal.
Discussion
En dépit d'une tendance à la baisse de l'incidence, le cancer gastrique reste un problème médical important dans le monde entier, et il est le néoplasme le plus courant au Japon. le cancer intramuqueux est définie comme étant une tumeur au stade le plus précoce du cancer gastrique. Il est essentiel d'examiner le cancer intramuqueux pour évaluer la pathogenèse du cancer gastrique. Il est largement admis qu'une cellule cancéreuse survient en raison d'anomalies de la régulation du cycle cellulaire, qui est constituée de plusieurs protéines liées au cycle cellulaires, tels que les cyclines, un inhibiteur de la kinase cycline-dépendante p53, et β-caténine. En outre, des études récentes ont montré que les résultats clinico-pathologiques distincts pour le cancer gastrique sont caractérisées par des expressions mucine. Nous avons étudié les expressions anormales de protéines liées au cycle de cellules qui favorisent la cancérogenèse gastrique sur la base de mucine phénotypes dans les cancers de type différenciés intramuqueux gastriques.
Dans la présente étude, l'immunohistochimie a été utilisée pour étudier les niveaux de protéines liées au cycle cellulaire expression. Immunopositivité pour des protéines liées au cycle cellulaire de tissu tumoral a été déterminé en comparant les niveaux entre le tissu tumoral et le tissu non néoplasique qui l'entoure. Selon ces critères, le niveau de immunopositivité du tissu tumoral peut être différent pour chaque cas. Cependant, la séparation des paramètres au sein de ces cancers en catégories «faible» et «élevé» basés sur des comparaisons de ces facteurs avec le tissu non néoplasique peut être une méthode non conventionnelle. Le tissu «non-néoplasique» comprend gastrite (chronique ou chronique active) et /ou métaplasie intestinale; les paramètres de ces divers tissus inflammatoires ou métaplasiques pourraient varier considérablement. Il peut être plus utile d'utiliser un taux absolu (à savoir, la réelle%), plutôt que cette valeur relative interne. Cependant, nous considérons que ce critère immunohistochimique est important pour trouver les activités potentielles des protéines liées au cycle cellulaire à un stade précoce des cancers de type différencié gastrique, étant donné que le tissu tumoral tissu non néoplasique environnante est étroitement associée au développement de la tumeur.
On a cru parmi les pathologistes que le phénotype gastrique du cancer gastrique montre atypie bas grade dans l'estomac cancers de type différencié intramuqueux (19). Toutefois, dans la présente étude, dans les cancers gastriques intramuqueux de type différencié que nous avons examinés, le phénotype gastrique a montré atypie de haute qualité. Bien que la raison reste inconnue, une raison possible est que le phénotype gastrique montrant atypie bas grade, qui ressemble à l'estomac fovéolaire épithélium histologiquement, peut avoir été inclus dans les études précédentes. Dans la présente étude, seule une telle tumeur a été observée. En outre, ces différences pourraient être dues au nombre d'échantillons ou à des facteurs ethniques ou étiologiques. Il est bien connu que p53 est corrélée avec une surexpression de grade tumoral. Dans la présente étude, nous suggérons qu'il est raisonnable de montrer une fréquence élevée de p53 surexpression du phénotype gastrique par rapport à d'autres phénotypes.
Dans cette étude, p53 surexpression était plus fréquemment trouvée dans le phénotype gastrique que dans l'intestin ou phénotypes mixtes. Cette découverte suggère que p53 surexpression joue un rôle essentiel, au moins dans le développement précoce du cancer du phénotype gastrique, bien que des études antérieures ont montré des augmentations progressives de p53 surexpression dans les cancers gastriques du début à des stades avancés [12]. Dans ce
étude, l'expression de p21 réduite a été observée dans environ 30% des 3 phénotypes mucine. Des études antérieures ont montré que la faible expression de p21 est corrélée avec le pronostic du patient dans le cancer gastrique [5, 6]. Cependant, on sait peu au sujet de l'expression de p21 par les cancers gastriques à base de mucine phénotypes. De plus, toute association de l'expression de p21 avec le stade tumoral (profondeur de la tumeur) reste inconnue. Notre découverte suggère que l'expression de p21 réduite joue un rôle commun dans le développement précoce des 3 phénotypes mucine des cancers de type différencié gastrique. Cependant, une étude antérieure a suggéré que la diminution progressive de l'expression de p21 a eu lieu dans une phase avancée de type différencié cancer gastrique de la phase précoce [6]. l'expression de p21 également corrélée avec l'expression d'autres protéines associées au cycle cellulaire, comme p27 et Ki-67, éventuellement par l'intermédiaire d'une voie dépendante de p53 [1, 5, 6]. Il a été émis l'hypothèse que p21 coopère avec p53 et, en conséquence, le cycle cellulaire est régulée par une voie dépendante de p53 [1, 5]. En outre, on pense que la p21 est également inhibée par la coopération avec p27 [1, 5]. Dans la présente étude, cependant, nous avons trouvé une corrélation ni de réduction de la p21 avec la réduction de la p27, ni une corrélation inverse de la réduction de p27 avec p53 surexpression (données non présentées). Nous suggérons qu'il existe une autre voie pour le contrôle du cycle cellulaire dans les cancers gastriques humaines.
Il est bien connu que p27 est un gène suppresseur de tumeur prototypique [1-3]. Cependant, une étude récente a montré que, alors que dans certains cas, p27 inhibe le cycle cellulaire, dans d'autres cas, il favorise la progression vers la phase suivante du cycle cellulaire [23]. Il a été rapporté que ce soit une perte ou une faible expression de p27 est en corrélation avec la progression tumorale ou de pronostic du patient [24, 25]. Contrairement à d'autres études, nous avons montré que la faible expression (réduction) de p27 avait une très faible fréquence dans notre série de cancers gastriques. D'après les résultats actuels, l'expression de p27 réduite joue un rôle mineur dans le développement des cancers gastriques de type différencié.
En revanche, la surexpression de p27 est fréquemment trouvée dans le phénotype intestinal par rapport aux 2 autres phénotypes, bien que la différence entre les deux n'a pas atteint un niveau statistiquement significatif. Si oui ou non cette surexpression de p27 est associée à une inhibition du cycle cellulaire ou de la progression du cycle cellulaire ne sont pas connus, bien que plusieurs explications sont proposées. La première est que p27 qui est surexprimée pour la suppression de la progression du cycle cellulaire dans les cellules tumorales résulte d'un mécanisme de rétroaction négative. A l'inverse, une seconde explication est que la surexpression de p27 est positivement associé à la progression du cycle cellulaire pour les cellules tumorales; qui est, p27 agit comme un facteur oncogène [23]. En outre, une étude récente a montré que l'expression de p27 est régulée par l'expression de Skp2, qui est une sous-unité p27 de l'ubiquitine ligase [26]. Selon ce rapport, l'expression de p27 a été inversement corrélée avec l'expression Skp2.
Cycline D1 surexpression seulement montré une basse fréquence dans le stade précoce des cancers de type différenciés gastriques (27/190, 14,2%). Cependant, bien que les différences ne sont pas parvenus à un niveau élevé, la fréquence de la cycline D1 surexpression était plus élevée dans le phénotype de l'estomac que dans l'intestin et les phénotypes mixtes. La cycline D1 a déjà été étudié dans plusieurs séries des cancers gastriques, avec une fréquence déclarée de 20 ~ 56% de la surexpression étant rapportés [27-29], différent de nos résultats. Comme raison possible pour ces différences de cycline D1 surexpression, bien que les cancers de type différencié précoce, à l'exception de phénotype gastrique, ne nécessitant pas une augmentation de la cycline D1, une fois que la tumeur a mis au point, les cellules tumorales ont besoin d'un niveau élevé de la cycline D1 la progression tumorale. La surexpression de Ceci suggère que la cycline D1 surexpression est corrélée avec le pronostic des patients dans les cancers gastriques [28]. De la cycline A était aussi plus répandue dans le gastrique et phénotypes mixtes par rapport au phénotype intestinal. Ceci suggère que la surexpression de la cycline A joue un rôle important dans la tumorigenèse de phénotypes gastriques et mixtes. Ainsi, dans les cancers gastriques, l'acquisition de l'expression de la mucine gastrique peut être associée à la cycline A surexpression, ce qui se traduit alors par une prolifération tumorale élevée. En outre, la cycline A a été étroitement associé à un pronostic du patient ou de l'agressivité de la tumeur [8, 9]. Cela peut indiquer que la cycline A surexpression est liée à la fois le développement et la progression tumorale dans environ la moitié des cancers gastriques de type différencié.
Dans la présente étude, la cycline E surexpression a montré les basses fréquences dans les 3 phénotypes. En revanche, des études antérieures ont montré que la surexpression de la cycline E est corrélée à un mauvais pronostic [4, 10], bien que des résultats contrastés ont été proposées [30]. Les présents résultats indiquent que la surexpression de la cycline E ne joue aucun rôle essentiel dans la tumorigenèse précoce des cancers gastriques de type différenciés. En outre, la surexpression de la cycline E peut surtout favoriser la progression des cancers gastriques. Ces résultats suggèrent que la prolifération élevée du phénotype gastrique peut être caractérisé par la surexpression de la cycline D1 et /ou de la cycline A, et que le phénotype mixte est associée à la cycline A surexpression.
Il est bien connu que l'expression de β-caténine régule à la hausse le cycle cellulaire et joue un rôle central dans la voie Wnt transduction du signal [14, 15]. Dans la présente étude, il est intéressant de noter que l'expression β-caténine est couramment observée dans les cancers gastriques de type différencié précoce que nous avons examinés. Il est déjà admis que l'expression β-caténine est critique pour le développement de adénome colique [31, 32]. Les résultats actuels et les études antérieures concernant l'adénome colorectal indiquent que l'expression β-caténine peut être une altération commune dans le développement précoce des tumeurs gastro-intestinales [31]. Ceci pourrait être expliqué par les conclusions que, dans les cancers gastriques, les promoteurs des gènes associés à la voie de signalisation Wnt sont fortement méthylé [32-34], ce qui entraîne l'accumulation nucléaire d'expression β-caténine. Conclusions de
Dans résumé, nous proposons que les phénotypes mucine cellulaires de intramuqueux adénocarcinomes de type différencié de l'estomac dépendent des altérations liées au cycle de cellules distinctes, et que les résultats clinico-pathologiques résultent de différentes voies en fonction de mucine expression: phénotypes gastriques, intestinaux et mixtes . La figure 4 illustre un modèle de carcinogenèse nouveau pour intramuqueux adénocarcinomes de type différencié qui repose sur leurs phénotypes mucine. En fonction des anomalies des protéines liées au cycle cellulaire, surexpressions de p53 et la cycline A caractériser les cancers gastriques phénotype, alors que la surexpression de p27 peut être associée à l'apparition de cancers de phénotype intestinaux. En revanche, les cancers mixtes phénotype sont caractérisés par la cycline A surexpression.

• Associations d'un PTPN11 G /A polymorphisme à intron 3 avec Helicobactor pyloriseropositivity, l'atrophie gastrique et cancer de l'estomac dans les associations Japanese
• Revue systématique et méta-analyse de la laparoscopie et la gastrectomie ouverte pour cancer