Syntéza, identifikácia a in vivo štúdie nádorové-zameriavači činidlo peptidu doxorubicínu (PDOX) na liečbu peritoneálnej karcinomatózu žalúdočné rakoviny s podobnou účinnosťou, ale zníženou toxicitu

Syntéza, identifikácia a in vivo štúdie nádorové-zameriavači činidlo peptidu doxorubicínu (PDOX) na liečbu peritoneálnej karcinomatózu žalúdočné rakoviny s podobnou účinnosťou, ale zníženou toxicitu
abstraktné
pozadia
práce zamerané syntetizovať katepsinu B ( CTSB) -cleavable tumor zacielenie prekurzor peptidu doxorubicín (PDOX) a štúdie in vivo účinnosť in a toxicity na zvieracom modeli žalúdočné peritoneálnej karcinosou (PC).
Metódy
PDOX sa syntetizuje za použitia doxorubicínu (DOX) prislúchajúce k CTSB štiepny dipeptid Ac-Phe-Lys a para-amino-benzyloxykarbonyl (PABC) spacer. Model PC bola založená vstrekovaním VX2 nádorové bunky do žalúdočnej čiastkové sliznicu 40 králikov, ktoré sa potom boli náhodne zaradení do 4 skupín: kontrolná (n = 10) bez liečby sa hipec (n = 10), prijímajúci cytoreduktívnej operáciu (CRS) a hyperthermic intraperitoneálna chemoterapia (hipec) sa PDOX (n = 10) a DOX (n = 10) s celkovou chemoterapiou s PDOX 50,0 mg /kg alebo DOX 5,0 mg /kg, v príslušnom poradí, po CRL + hipec.
Výsledky
medián celkového ktoré prežili (OS) bolo 23,0 d (95% CI: 19,9 d - 26,1 d) v konaní, 41,0 d (36,9 d - 45,1 d) v hipec, 65,0 d (44,1 d - 71,9 d) v PDOX a 58,0 d (39,6 d - 54,4 d) v DOX. V porovnaní s kontrolou, OS bol rozšírený o 70% v hipec (p Hotel <0,001) a ďalej rozšírená o 40% v centre DOX (p
= 0,029) a 58% v PDOX (str =
0,021), a na závažnosti PC bola znížená v hipec a v PDOX a DOX sa ďalej znížil. Zvieratá dostávajú liečbu DOX ukázal hematologickej toxicity s výraznému zníženiu bielych krviniek a krvných doštičiek, rovnako ako srdcové toxicity s významným zvýšením kreatínkinázy mb izoenzýmu evidentné myokardu koagulačné nekróza, významné jadrové degenerácia, delécií mitochondriálnej peri-jadro, mitochondrie-pyknosis, a abnormálne intercalated disky. Ale tieto toxické účinky neboli viditeľné v PDOX.
Závery
PDOX je novo syntetizovaný prekurzor tumor zacielenie DOX. V porovnaní s DOX, PDOX má podobnú účinnosť, ale zníženú hematologických a srdcovej toxicity pri liečbe králičie model žalúdočné PC.
Kľúčové
peritoneálnej Karcinomatóza Karcinóm žalúdka Peptidy doxorubicín cytoredukčnými chirurgia Hypertermická intraperitoneálnej chemoterapia pozadie
GC je jedným z najviac spoločné malignity v rozvojových krajinách, kde sa radí na druhé miesto z hľadiska miery výskytu a tretie miesto, pokiaľ ide o úmrtnosť mužskej populácie, a radí na štvrté miesto z hľadiska miery výskytu a úmrtnosť ženskej populácie, podľa najnovšej celosvetová štatistiky [1, 2]. GC je treťou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu v Číne [3], kde viac ako 70% GC sa už stal klinicky pokročilý v čase chirurgického prieskume, čím chirurgický postup je sám už liečebná [4].
PC v GC bola dlho považovaná za fatálne klinickej entity. Je definovaný ako implantácii nádorových buniek v priebehu peritoneálnej dutine a charakterizovaná prítomnosťou nádorových uzlíkov rôzne veľkosti, počtu a rozdelenie na peritoneálnej povrchu, rovnako ako malígny ascites, často vedie k lokoregionálnej chorobnosti bez širších systémových metastáz. Pacienti s žalúdočné PC čelia žalostný výsledok, s mediánom prežitia asi 6 mesiacov [5].
Neexistuje žiadna štandardná liečba žalúdočné PC. Súčasná liečba takéhoto počítače sú systémová chemoterapia, najlepšie podpora starostlivosti a paliatívna liečba. Za účelom riešenia tohto problému nová liečebná metóda s názvom CRS a hipec bola vyvinutá v priebehu posledných 3 rokov, pričom výhody chirurgického zákroku znížiť viditeľnú nádorovú záťaž, a regionálne Hypertermická chemoterapia vykoreniť mikrometastatické [6]. Pribúdajú dôkazy, navrhol, že kombinácia CRS a hipec by mohla priniesť prínos pre prežitie u vybraných pacientov so žalúdočnými PC. V našom predchádzajúcom experimentálnej štúdii [5], sme tiež dokázali, že CRS + hipec by skutočne mohlo priniesť výhodu prežitia s prijateľnou bezpečnosťou, ktoré poskytujú dôkazy na podporu tohto kombinovaného stratégiu pre liečbu vybraných pacientov so žalúdočnými PC.
Počas vývoja PC, GC bunky vylučujú enzýmy pre uľahčenie rakovinové bunky siatie a kolonizácie na pobrušnice. CTSB je jedným z kľúčových enzýmov v tejto kritickej procese, nadmerne exprimovaný v GC, ako aj ďalších nádorových ochorení [7-9] a aktívne sa podieľa na inváziu nádorových ochorení [10-12]. Na druhej strane, to je extrémne nízky exprimovaný v normálnych bunkách a neaktívne alebo stráca účinnosť, akonáhle sa disperguje vo vodnom prostredí od buniek [13]. Takto CTSB bola dlho považovaná za cieľ XIV v liečbe rakoviny [14].
Bolo zistené, v MAGIC štúdii, že antracyklín obsahoval režim je vhodný pre GC chemoterapia [15]. DOX je typickým predstaviteľom antracyklínov. Aj keď DOX je dôležitý liek v chemoterapii, jeho toxicity sú evidentné, ako je napríklad srdcové toxicity a supresie kostnej drene. Na udržanie terapeutického účinku pri súčasnom znížení vedľajších účinkov, Dubowchik et al [16 až 18] navrhnutá inteligentný prodrug DOX, PDOX (Obrázok 1). V tejto modifikovanej DOX, Ac-Phe-Lys je dipeptid špecifická pre CTSB a PABC (para-aminobenzyloxykarbonyl) je self-immolative spacer [16]. Neaktívne prekurzor účinnej látky je neaktívny, ak je málo CTSB činnosť, ako je napríklad normálne tkanív a periférnej krvi, čím sa zabráni nežiaduce účinky na normálne tkanivá. Pri rakovine invázie, aktivovaný CTSB je cez exprimovaný na vonkajšej membráne nádorových buniek inváziu [19, 20], ktorá štiepi dipeptidu na väzbe Lys-PABC [16] Ac-Phe-Lys. Potom je vystavený PABC dištančné môže self-hydrolyzovať na deacylací [21] a voľný DOX molekulami sú uvoľňované, čo má za následok priame usmrtenie nádorových buniek inváziu [16]. Obrázok 1 Štruktúra PDOX (uvedené v rámčeku), chemická syntéza a mechanika. PDOX bola úspešne syntetizuje v súlade s chemickým procesom 7 krokoch. Jeho chemická štruktúra je Ac-Phe-Lys-PABC-Dox HCl (zobrazené v poli) a molekulárnej vzorec je C52H60ClN5O16. PDOX obsahuje CTSB štiepny dipeptid Ac-Phe-Lys (dvojité červené lomky) na PABC vložku (červená lomítko) a protinádorový liek DOX. Pri PDOX dosiahne CTSB obohatené oblasti, ako je invázia pred rakovinou, Ac-Phe-Lys dipeptidu je štiepený CTSB na väzbe Lys-PABC, vystavovať PABC vložku, ktorá sa potom hydrolyzuje spontánne (červená lomka), uvoľňovať voľný DOX u rakoviny invázne prednej strane. PDOX tak mohol vykonávať cytotoxicitu k invázii rakovinových buniek a zároveň chráni normálne bunky pred nadmerným vystavením s drogami, stratégia zvané pasívne cielená liečba. CTSB :. Katepsin B.
V tejto štúdii sme syntetizované na PDOX a hodnotila účinnosť a bezpečnosť CRL + hipec s molekulárnym cieleného liečebného režimu PDOX pre cielenú liečbu králičieho modelu žalúdočné PC
Výsledky
Synthesis a identifikácia PDOX
PDOX bola úspešne syntetizuje v súlade s predtým publikovaného chemickým procesom 7-kroku (obrázok 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCl) bol červená pevná látka v prášku s molekulovou hmotnosťou 1046.51 (MS: m /z vypočítané pre C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, nájdené: 1046,50), chemickou čistotou 99,1% (podľa HPLC) , štruktúra C 52H 60ClN 5 ° 16 (obaja H 1-NMR a C 13-NMR) (obrázok 2) a teplotu topenia 180 ° C (za rozkladu), ktorá je stabilná pri teplote -5 ° C do 0 ° C počas 36-54 mesiacov, teploty miestnosti po dobu 24 mesiacov, riešiteľná vo vode, čiastočne riešiteľná v metanole a etanole. PDOX použitý v tejto štúdii bol uložený v tme, suchom prostredí pri teplote 4 ° C. Obrázok 2: Štruktúra identifikácia potvrdené H 1 NMR (A) a C 13 NMR (B). Konštrukcia modelov
PC a histopatologické charakteristiky
Králik model žalúdočné PC vznikla u všetkých zvierat (100%, 40/40). Na D 8 po inokulácii nádorových buniek, malých, pevných a transparentných nádorových uzlíkov vyvinutých na väčšie omentum a typické ulcerózna rakoviny asi 0,5 až 1,0 cm v priemere vytvorený na antra žalúdka. Nebola pozorovaná žiadna ascites. Žiadne zjavné PC bol nájdený v iných regiónoch. Neboli zistené žiadne rozdiely v závažnosti PC medzi všetkými králikov. To by mohlo byť ekvivalentom klinickej fáze I, PC pomocou kritérií Gilly [22] (obrázok 3A).
Všetkých skúmaných nádorových vzorky vykazovali rozsiahlu invazívne rast a tkanivovú deštrukcii. Nádory, na väčšie zakrivenie žalúdočné dutine, prenikol slizničnej vrstvu za vzniku vredov. Histopatologické štúdia ukázala, nádorové hniezda prenikajúce kompletnú žalúdočnú stenu, s typickým invázia do svalovej vrstvy a žalúdočných žliaz (obrázok 3b). Nádorové bunky sú guľaté, oválne alebo atypické morfológia s mnohými patologickými mitotických čísel. Tam bol tiež viditeľný infiltráciu lymfocytov, plazmatických buniek a ďalších zápalových buniek (obrázok 3C). Apoptotické a nekrotické nádorové bunky boli pozorované v strednej oblasti nádorových uzlíkov (obrázok 3D). Typický PC prezentované ako nádorových uzlíkov na povrchu omentum (obrázok 3e) a intraperitoneálnej metastáz lymfatických uzlín boli pozorované (obrázok 3F).
Typická ulcerózna rakoviny s PC bola pozorovaná u post mortem patologické vyšetrenia králikov v ovládacom prvku. Žalúdok stena bola úplne napadnutá nádorom na vytvorenie rakoviny vredu obalené konfluentní uzlíky na väčšie omentum, ktoré tvoria veľkú nádorovú blok. Brušná stena a membrána bola úplne napadnutá nádorom. Mnoho nádorové uzlíky vytvorené na črevnej stene, hrubého a retroperitonea. Krvavé ascites môže byť viac ako 100 ml. Všetky tieto funkcie sú podobné patologickým charakteristikám žalúdočné PC u pacientov (obr 3G). Obrázok 3 Charakteristiky králičieho modelu žalúdočné PC a HE zafarbených Mikrograf. (A) Na obrázku včasné modeli králičieho žalúdka PC, kde nápadné nádorové uzlíky rozptýleného na peritoneum a väčšie zakrivenie žalúdka; (B) obrázky ulcerózna GC; (C a D) HE zafarbia obrázok pod mikroskopom znázorňujúci invazívny rast nádorových bunkových hniezd infiltrujúcich žalúdočnú stenu (panel C, 400 ×) a nekrotické nádorové bunky v oblasti nedostatočného zásobovania krvou (panel D, 400 x); (E) nádorové uzlíky na povrchu omentum (200 x); (F), intraperitoneálnej metastázy do lymfatických uzlín (200 x); (G) po porážke patologické vyšetrenia králika.
Survival
Zviera bolo pozorované nahrávať OS. Dva dlhé prežívajúce králiky (jeden v PDOX a ďalší v centre DOX, žijúcim viac než 100 D) bolo vynakladanie na 100. deň od predávkovanie injekcií 2% pentobarbitalu sodného. Medián (95% interval spoľahlivosti, CI) OS bol 23,0 d (19,9-26,1 d) v konaní, 41,0 d (36,9-45,1 d) v hipec, 65,0 d (44,1-71,9 d) v PDOX a 58,0 ad (39,6 až 54,4 d) v DOX. V porovnaní s kontrolou, OS bol rozšírený o aspoň 70% v hipec (p Hotel < 0,001, log rank test). V porovnaní s hipec, OS bol ďalej rozšírený o 40% v DOX (p = 0,029
, log rank test) a o 58% v PDOX (p = 0,021
, log rank test) (Obrázok 4A ). Obrázok 4 In vivo účinky PDOX na modeli králika PC. (A) Kaplan-Meierove krivky prežitia pre kontrolu, hipec, PDOX a DOX; (B) zmeny hmotnosti tela v týchto skupinách.
Nádoru na
prežitie koncový bod na konečnom výsledku štúdie, nádor záťaž v konaní bolo najťažšie, s nádorovú hmotnosti (137,51 ± 16,09) g, nádorové ložisko pomer (hmotnosť nádoru na telesnej hmotnosti) (7,88 ± 0,85)%, krvavé ascites (65,50 ± 33,45) ml a EPCI skóre (9,50 ± 2,17). V porovnaní s kontrolou sa hipec sa výrazne znižuje hmotnosť tumoru (76,50 ± 11,41), g (p = 0,007
) a pomer s nádorom (3,94 ± 0,54)% (p = 0,001
), ale nie EPCI skóre (9,50 ± 2,17)% (p = 0,420
) a krvavé ascites [(29,16 ± 15,30) ml, p = 0,085
]. V porovnaní s hipec, závažnosť PC sa ďalej znížila v oboch PDOX a DOX, s EPCI skóre (6,40 ± 2,07, p = 0,020
v oboch PDOX a DOX vs. hipec) a krvavých ascitu (0,00 ml, p
< 0,001 v PDOX a DOX vs. hipec); zatiaľ čo tam boli žiadne významné rozdiely v hmotnosti nádoru [(65,30 ± 14,55) g, p = 0,552
, PDOX vs. hipec; (48,74 ± 16,31) g, p = 0,180
, DOX verzus hipec)] a pomer nádoru [(2,91 ± 0,69)%, p = 0,552
, PDOX vs. hipec; (2,13 ± 0,78)%, p = 0,180
, DOX vs. hipec]. Neboli zistené žiadne významné rozdiely v objeme nádoru medzi PDOX a DOX (tabuľka 1) .Table 1 EPCI skóre na prežitie sledovanú v 4 skupinách králikov [rozsah (medián)]
Control (n = 10)
hipec (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
EPCI skóre v rôznych regiónoch
Region Aj
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
kraji II Sims 3 ~ 3 (3) Sims 3 ~ 3 (3) Sims 3 ~ 3 (3) Sims 3 ~ 3 (3)
1 ~ 3 (3)
kraj III 0 ~ 3 (3)
0 až 3 (1)
0 až 3 (1)
oblasť IV
0 ~ 3 (3)
0 až 3 (1)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Ascites (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0,0 ~ 0.0 (0.0)
0,0 ~ 0,0 (0,0)
EPCI score§
7 ~ 13 (11)
5 ~ 12 (9) Sims 3 ~ 9 (6) Sims 3 ~ 9 (6)
* Ascites: p = 0,323
, hipec vs. riadenie; p Hotel < 0,001, PDOX vs. hipec; p Hotel < . 0.001, DOX vs. hipec
§The EPCI skóre: p = 0,073
, hipec vs. riadenie; p = 0,020
, PDOX vs. hipec; p = 0,020
, DOX vs. hipec; p = 0,474
, PDOX vs. DOX.
zmeny hmotnosti tela
telesnej hmotnosti každého zvieraťa zaznamená každé 4 d. Bez významné rozdiely boli nájdené v počiatočnej telesnej hmotnosti 4 skupín pred liečbou. Perioperačná telesná hmotnosť znížila vo všetkých skupinách, pretože cez noc pôstu. V Control, telesná hmotnosť obnoviť, akonáhle príjem potravy bol obnovený, ale opäť postupne znižoval až do ukončenia štúdie. V skupinách 3 ošetrenie, pooperačné telesnej hmotnosti výrazne po modelárstvo a znížila na najnižšiu 4 dni po CRS + hipec, a potom zostal na nízkej úrovni v priebehu pooperačnej fáze, kým sa dokončenie chemoterapie. Telesná hmotnosť sa začal zvyšovať d 44 v hipec a d 56 v oboch PDOX a DOX, a postupne sa zvyšuje na vyššiu úroveň, ktorá bola v súvislosti s ako pre rast nádoru z králikov živých nesúcich nádory a smrti zlyhanie králiky s nižšou telesnou hmotnosťou. Potom, telesná hmotnosť opäť postupne znižoval až do ukončenia štúdie v oboch PDOX a DOX (Obrázok 4B).
Posmrtné patologické vyšetrenia
podľa čase smrti zvierat, podrobnejšie informácie o posmrtné patologické vyšetrenia bol uvedený v tabuľke 2 .
Okrem systematických prehliadok všetkých anatomických miest pre možné metastázy rakovinových osobitná pozornosť bola venovaná pľúc a pečeňových metastáz. Ako je znázornené na obrázku 5, v konaní, rozsiahle pečeňové metastázy boli pozorované u 8 zvierat, ale nie pľúcne metastázy boli viditeľné u všetkých zvierat, z dôvodu veľmi agresívne rastovej správanie nádoru viedli k krátkej OS u tejto skupiny zvierat (obr 5 A2, B2). V hipec, ako zvierat žila oveľa dlhšie, pretože CRS + hipec, menej pečeňové metastázy boli pozorované u 4 zvierat, ale podstatne oveľa pľúcne metastázy boli pozorované v 7 zvierat (obrázok 5 A3, B3). V PDOX a DOX, zvieratá vyvinula oveľa menej metastázy v oboch pečene a pľúc, aj keď operačný systém sa ďalej výrazne zlepšená, pretože zvieratá dostala nielen CRS + hipec kontrolovať miestne regionálne metastázy, ale aj systémovú chemoterapiu pre ovládanie hematogénne metastázy a lymfatické metastázy (obrázok 5 A4, B4, A5, B5) .Table 2 Výsledky postmortálnom patologické štúdie v 4 skupinách, vyjadrené ako% králikov
kontrolu (n = 10)
hipec (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
p 1
p 2

p 3
p 4
ulcerózna GC
100,0 100,0
100,0 100,0
NS
NS NS
NS
rezom metastázy
100,0
30,0
30,0
20,0
0,001
NS NS
NS
Pľúcne metastázy
0,0
70,0
30,0
30,0
0,001
NS
NS NS
hrudnej steny metastázy
0,0
20,0
10,0
0,0
NS NS
NS NS
Pleurálny výpotok
10,0
70,0
30,0
30,0
0,008
NS
NS NS

Virchow lymfatické uzliny metastázy
30,0
70,0
60,0
40,0
NS NS
NS NS
osrdcovníka metastázy
0.0
20,0
0,0
0,0
NS NS
NS NS
rakovinových membrána
100,0
70,0
20,0
20,0
NS
0,028 0,028
NS
Greater omentum tortu
100,0
80,0
40,0
50,0
NS
NS NS
NS
pečeňové metastázy
80,0
40,0
30,0
30,0
NS NS
NS NS
Spleen metastázy
0.0
0,0
20,0
0,0
NS NS
NS NS
retroperitoneum metastázy
100,0
60,0
60,0
50,0
0.029
NS NS
NS
Ľavé obličkovej metastázy
0,0
10,0
0,0
0,0
NS NS
NS NS

pravá obličková metastázy
0,0
0,0
0,0
0,0
NS NS
NS NS
Kidney kapsule invázie
100,0
50,0
0.0
20,0
0,012 0,012
NS NS
črevo stena siatie
100,0
80,0
20,0
10,0
NS
0,009 0,002
NS
okružie siatie
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028 0,002
NS
brušnej rakoviny stena 100,0
60,0
30,0
0,0
0,029
NS
0,004
NS
Pánvové siatie
100,0
50,0
30,0
10,0
0,170
NS NS
NS močového mechúra
prasknutie
0.0
0,0
20,0
10,0
NS NS
NS NS
zadržiavanie moču
50,0
50,0
30,0
10,0
NS NS
NS NS

podľa 2stranném chi-kvadrát (χ
2) test. p
1, hipec vs. riadenie; p
2, PDOX vs. hipec; p Sims 3, DOX vs. hipec; P.
4, PDOX vs. DOX
NS :. Žiadny význam
v porovnaní s kontrolnou, závažnosť PC bola významne znížená u rezných metastázy, pľúcne metastázy, pleurálneho výpotku, retroperitoneálna metastáz, kapsula obličiek invázie, brušné rakovina steny a panvové siatie v hipec. V porovnaní s hipec, závažnosť PC bola významne znížená v rakovinových membrány, obličiek kapsule invázie, črevo stena siatie a okružie siatie vo PDOX, a v rakovinových membrány, črevá steny siatie, mezentéria, siatie a brušnej steny rakoviny v DOX. Neboli zaznamenané žiadne štatistické rozdiely medzi PDOX a DOX v systémových metastáz.
Obrázok 5 pľúcnej metastázy (panel A) a pečeňové metastázy (panel B) v tejto štúdii. (A1) (B1) ukázala, presný počet pľúcnych a pečeňových metastáz v každej králika zo 4 skupín, v tomto poradí; (A2 až A5) ukázala reprezentatívne pľúcnych metastáz v kontrole, hipec, na PDOX a DOX, v uvedenom poradí; (B2 až B5) ukázala reprezentatívne pečeňových metastáz v kontrole, hipec, na PDOX a DOX, v uvedenom poradí; (A6) ukazuje mikrofotografie pľúcnych metastáz v hipec, vyznačujúci sa tým, rakoviny inváziou, potlačenie pľúcneho tkaniva intravaskulárnej tvorby tumor trombu a viditeľnom infiltráciou zápalových buniek (A6-1, HE škvrna, 200 x) (A6-2, HE škvrna, 400 ×). (B6) ukázala mikrofotografie pečeňových metastáz v ovládacom prvku, vyznačujúci sa tým, rozsiahlou deštrukciou tkaniva pečene, napádať rakovinové bunky, zápalové bunky infiltrácie a krvácania v tkanive pečene (B6-1, HE škvrny, 100 x) (B6-2, HE škvrny , 200 ×).
obvodového profilu krvi a zásadné zmeny biochémie
neboli zistené žiadne rozdiely v počtoch periférnych krviniek na d2, d 6 a d 14 medzi 4 skupín, ale biele krvinky a krvné doštičky došlo k podstatnému poklesla o d 36 potom, čo systémovou chemoterapiou v centre DOX (p Hotel < 0,05). Neboli zistené žiadne rozdiely v pečeňových a obličkových funkcií v priebehu experimentu medzi 4 skupín. Z hľadiska parametrov a srdcových funkcií, neboli zistené žiadne rozdiely v kreatínkinázy a kreatínkinázy MB izoenzýmu na d2, d 6 a D 14 medzi 4 skupín, ale kreatínkináza MB izoenzýmu bola významne zvýšená o d 36 potom, čo systémovou chemoterapiou v DOX (p
menšie ako 0,05). Venovaná osobitná pozornosť, 2 zvieratá v DOX s krátkym OS 47 d a 53 d mal výnimočne vyšší sérové ​​kreatínkinázy MB izoenzým úrovní, 467,5 U /L a 656.4 U /L (p Hotel &0,05) (tabuľka 3) .Table 3 Blood rutinné testy a biochemické výsledky testov v 4 skupinách králikov [rozsah (medián)]
Group
D2
D6
D14

D36 *
n
hodnota
p
n
hodnota
p

n
Hodnota
p
n
Hodnota
p
Červené krvinky ( T /L)
Control
10
5,03 až 6,93 (6,26)
0,849
10
5,08 až 7,76 (6,07)
0,494
10
4,29 -6,32 (5,54)
0,382 NETHRY.cz 0 -
0,203
hipec
10
5,13 až 7,58 (6,48)
10
4,66 až 7,15 (5,65 )
10
3,54 až 7,30 (5,68)
7
4.28-7.36 (5,28)
PDOX
10
17 /04-16 /07 (5,94)
10
4,97 až 6,49 (5,61)
10
4,38 až 5,82 (5,05)
10
4,46 až 6,03 (5,47)
DOX
10
5,03 až 6,84 (6,09)
10
5,03 až 6,70 (5,88)
10
3,65 až 6,36 (5,08)
9
4,12 až 6,40 (4,94)
bielych krviniek (g /l)
Control
10
5.3-9.6 (8.6)
0,785
10
4.5-14.1 (9,9)
0,446
10
6.0-10.3 (7,8 )
0,601 NETHRY.cz 0 -
0,013
hipec
10
04.4.-3.12. (7,4)
10
5.4.-7.12. (9,3)
10
2.3.-1.12. (10,7)
7
6,9-13,7 (7,5)
PDOX
10
5,9-13,2 (8,2)
10
6.1-12.5 (8.8)
10
4,6-14,4 (9,0)
10
09.4.-01.11. (7,7)
DOX
10
3.6-10.5 (7,8)
10
07.04.-02.12. (7,3)
10
4.6-12.5 (10.2)
9
09 /03-4 /6 (5.3)
Krvné doštičky (G /L)
ovládanie
10
387-579 (480)
0,494
10
317-836 (555)
0,362
10
451-917 (657)
0,601
0 -
0,009
hipec
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489)
7
262-598 (451)
PDOX
10
382-592 (456)
10
395-856 (493)
10
328-1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476)
10
363-878 (464)
10
390-939 (654)
9
115-319 (244)
alanínaminotransferázy (U /L)
kontroly
10
31 až 52 (38)
0,463
10
34-54 (41)
0,525
10
21 až 54 (37)
0,245
0
-
0,838
hipec
10
24-47 (40)
10
21 až 62 (35)
10
31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10
28 - 52 (40)
10
24-59 (37)
10
32 -55 (45)
9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35)
10
30-59 (39)
10
34 až 61 (48)
8
26-76 (42)
aspartátaminotransferázy (U /L)
Control
10
19-54 (35 )
0,895
10
30-52 (36)
0,525
10
37-58 (43)
0,309
0 -
0,473
hipec
10
23-59 (38)
10
11-55 (35)
10
27-78 (34)
7
25-50 (36)
PDOX
10
22 - 47 (37)
10
17-49 (39)
10
27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37)
10
24-49 (30)
10
23-86 (36)
8
31-60 (39)
dusíka močoviny v krvi (mmol /l)
Control
10
4,40 až 5,80 (4,80)
0,206
10
4,51 - 10,44 (4,81)
0,525
10
3,29 až 9,82 (6,32)
0,185 NETHRY.cz 0 -
0,473
hipec
10
3,70 až 8,14 (5,10)
10
3.57-11.04 (5,35)
10
4,32 až 9,29 (7,50)
7
5,25-8,67 (6.38)
PDOX
10
3,58 až 7,66 (5,82)
10
3,32 - 11,58 (6,68)
10
6.52-13.58 (7,63)
9
4,71 až 8,05 (5,35)
DOX
10
1,76 až 7,90 (5,01)
10
3.32-10.00 (5.59)
10
1.76-10.53 ( 7.80)
8
4,50 až 9,26 (6,27)
kreatinínu (pmol /l)
Control
10
45,05 - 64,50 (60,50)
0,736
10
22,10 - 73,20 (55,00)
0,736
10
41.40-71.40 (50.25)
0,083 NETHRY.cz 0 -
0,838
hipec
10
43,30 - 80,65 (57,35)
10
22,20 - 81,55 (46,97)
10
31,10 - 83,37 (52,96)
7
59,87 - 76,84 (66,51)
PDOX
10
42,80 - 75,80 (61,87)
10
22,13 - 86,25 (69,65)
10
45,30 - 75,80 (66,25)
9
44,38-79,56 (62,47)
DOX
10
22,30 - 69,30 (55,81)
10
27,28 - 75,90 (63,45)
10
42,38 - 73,76 (69,37)
8
47,72 - 78,64 (59,50)
Kreatínkináza (U /L)
kontroly
10
74,3 do 205,6 (131,6)
0,864
10
81,3-247,8 (147,9)
0,878
10
71,4 do 182,1 (138,9)
0,968 NETHRY.cz 0 -
0,473
hipec
10
78.8-259.2 (137,8)
10
66,8 do 248,9 (145,3)
10
63.4-225.2 (141,8)
7
98,3 do 265,1 (153,0)
PDOX
10
87,9 do 194,2 (139,4)
10
69,9 do 256,1 (144,4)
10
70.0-240.8 (130,6)
9
109,2 až 251,5 (195,2)
DOX
10
98,3 do 256,1 (152,4)
10
56,4 do 250,2 (135,8)
10
80,5 do 261,2 (133,8)
8
101.1- 407,6 (228,1)
kreatínkinázy MB izoenzým (U /L)
Control
10
73.0-162.5 (129,8)
0,717
10
62.5-195.6 (127,2)
0,878
10
57,0 do 199,8 (119,8)
0,509 NETHRY.cz 0 -
0,040
hipec
10
74,2 do 228,2 (137,3)
10
42,9 do 219,8 (129,7)
10
52,8 do 237,7 (146,5)
7
50,2 do 188,1 (126,1)
PDOX
10
59,2 - 228,1 (133,9)
10
42,5 do 197,7 (133,2)
10
74,9 do 241,5 (158,2)
9
58,9 do 209,8 (143,7)
DOX
10
94,3 do 207,7 (122,1)
10
53,9 do 202,3 (128,2)
10
94,3 do 238,6 (148,4)
8
106.2-656.5 (259,3 )
* Časť údajov nie je k dispozícii z dôvodu úmrtia zvierat v nadstavenom čase
podľa 2stranném neparametrické testu
Biele krvinky na D 36, porovnanie medzi jednotlivými skupinami: .. p =
0,001, DOX vs. hipec; p = 1,000
, PDOX vs. hipec; p = 0,005
, PDOX vs. DOX; Krvné doštičky na D 36, porovnanie medzi jednotlivými skupinami: p = 0,041
, DOX vs. hipec; p = 0,637
, PDOX vs. hipec; p = 0,070
, PDOX vs. DOX; Kreatínkináza mb izoenzýmu na D 36, porovnanie medzi jednotlivými skupinami: p = 0,012
, DOX vs. hipec; p = 0,593
, PDOX vs. hipec; . P = 0,131
, PDOX vs. DOX
hematologickej toxicity s výrazným znížením počtu bielych krviniek (p Hotel < 0,05) a krvných doštičiek (str Hotel &0,05), rovnako ako srdcové toxicity s významným zvýšením kreatínkinázy izoenzýmu mb (p Hotel &0,05). boli pozorované na D 36 po tom, čo systémovou chemoterapiou v centre DOX
podrobných štúdií na myokardu toxicitou
Histopatologické štúdie vzťahujúcich sa ku svetelným mikroskopom a transmisného elektrónového mikroskopu nebola nájdená žiadna myokardu toxicity na kontrolu, hipec a PDOX, ale významné histopatologické zmeny myokardu boli nájdené u všetkých zvierat (100%, 10/10) v DOX, vrátane koagulačné nekróza myokardu s tmavo červené farebné cytoplazme, a karyopyknosis (Obrázok 6 C1, H1, P1, D1 čierne šípky). Elektrónovej transmisný mikroskopia ukázala, že normálne myokardu s hojnými mitochondrie zabalené okolo normálneho jadra v riadení a hipec, bohaté normálne, ale s mierne rozšírené cristae mitochondrie roztrúsené po celom normálneho jadra v PDOX, takmer neprítomné mitochondrií okolo morfologicky senilnej a degeneratívnym jadra v DOX. Okrem toho čiastkové myokard-lytická tkaniva (žltá šípka) a mitochondrie-pyknosis od jadra (červená šípka) boli tiež zrejmé v DOX. Kompletné jasné a súvislé línie normálnych interkalovaných diskov v kontrole, hipec a PDOX, ale temný, stratových a nespojitých interkalovaných disky boli nájdené v centre DOX (biele šípky). Obrázok 6 Light mikrofotografie a transmisného elektrónového mikroskopu králičieho myokardu. Top panel (HE farbenie, 400 ×), rutinné histopatologické rysy králičieho myokardu v pozdĺžnom reze (vložky na pravom hornom rohu, sagitálnej rez), kde C1, H1 a P1 preukázaná čisté a jasné normálny myokardu vlákna v riadnych polí, ale D1 ukázal, koagulačné nekróza myokardu s tmavo červené farebné cytoplazme a karyopyknosis myokardu. Stredná horný panel (10,000 ×), transmisný elektrónové mikroskopia myokardu so zameraním na vlastnostiach jadier a peri-nukleárnej mitochondrií, kde C2, H2 ukazovali hojnej mitochondrie zabalená okolo normálneho jadra, P2 ukázal bohaté mitochondrie roztrúsené okolo normálneho jadra, ale D2 ukázalo takmer chýbajúce mitochondrie okolo morfologicky senilnej a degeneratívnych jadra (žltá hviezda znázorňujúci zväčšený jadro v dôsledku opuchu a excentrického agregácie heterochromatinem a zelenej šípky ukazujúce nápadné dovnútra kontrakcii jadrovej membrány). Okrem toho čiastkové myokard-lytická tkaniva (žltá šípka) a mitochondrie-pyknosis od jadra (červená šípka) bolo tiež evidentné v DOX liečených zvierat. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Nezvyčajné získal žalúdočné obštrukcie výtoku počas detstva: Správa o prípad
• Úspešná liečba primárneho žalúdočné plazmocytóm napodobňovanie nepoddajný žalúdočný vred pomocou dexametazónu terapiu vysokými dávkami: prípad report