Síntesis, identificación y estudios in vivo del péptido doxorrubicina como agente de metas de tumor (PDOX) para el tratamiento de la carcinomatosis peritoneal del cáncer gástrico con una eficacia similar pero reducen toxicity

síntesis, la identificación y los estudios in vivo del péptido doxorrubicina como agente de metas de tumor (PDOX) para tratar peritoneal carcinomatosis de cáncer gástrico con una eficacia similar pero menor toxicidad
Resumen Antecedentes

Este trabajo tuvo como objetivo sintetizar una catepsina B (CTSB) hidrolizable doxorrubicina péptido profármaco de metas de tumor (PDOX) y estudiar la eficacia in vivo y toxicidades en un modelo animal de carcinomatosis peritoneal gástrico (PC).
Métodos
PDOX se sintetizó usando doxorrubicina (DOX) unir a un dipéptido CTSB escindible Ac-Phe-Lys y un para-amino-benciloxicarbonilo (PABC) espaciador. modelo PC se estableció mediante la inyección de células tumorales VX2 en la gástrico sub-mucosa de 40 conejos, que después fueron aleatorizados en 4 grupos: el Control (n = 10) sin tratamiento, la HIPEC (n = 10) que recibieron cirugía citorreductora (CRS) más quimioterapia intraperitoneal hipertérmica (HIPEC), el PDOX (n = 10) y de la DOX (n = 10) que reciben quimioterapia sistémica con PDOX 50,0 mg /kg o DOX 5,0 mg /kg, respectivamente, después de CRS + HIPEC.
resultados Empresas el supervivencias promedio general (SG) fueron 23,0 d (IC del 95%: 19,9 d - 26.1 d) en el control, 41.0 d (36,9 d - 45.1 d) de la HIPEC, 65.0 d (44,1 d - 71.9 d) en el PDOX, y 58.0 d (39,6 d - 54.4 d) en el DOX. En comparación con el control, el sistema operativo se amplió en un 70% en el HIPEC (p Hotel < 0,001) y amplió en un 40% en el DOX (p = 0,029
) y en un 58% en el PDOX (p =
0.021), y de la gravedad PC se redujo en el HIPEC y la disminución adicional en la PDOX y DOX. Los animales que recibieron tratamiento DOX mostraron toxicidades hematológicas con marcada reducción de los glóbulos blancos y las plaquetas, así como efectos tóxicos cardiacos con aumentos significativos de la creatina mb quinasa isoenzima, evidente necrosis de coagulación miocardio, degeneración nuclear significativa, peri-núcleo eliminación mitocondrias, mitocondrias-picnosis, y discos intercalados anormales. Pero estas toxicidades no eran evidentes en el PDOX.
Conclusiones
PDOX es un profármaco de metas de tumor recién sintetizado de DOX. En comparación con DOX, PDOX tiene una eficacia similar pero reducida toxicidad hematológica y cardíaca en el tratamiento de modelo de conejo de PC gástrico.
Palabras clave
La carcinomatosis peritoneal del cáncer La cirugía gástrica Péptido doxorrubicina citorreductora hipertérmica quimioterapia intraperitoneal Antecedentes
GC es uno de los más cánceres comunes en los países en desarrollo, donde ocupa el segundo lugar en términos de la tasa de incidencia y el tercero en términos de tasa de mortalidad entre la población masculina, y ocupa el cuarto lugar en términos de tasa de incidencia y la tasa de mortalidad entre la población femenina, de acuerdo con lo global más reciente estadísticas [1, 2]. GC es también la tercera causa de mortalidad por cáncer en China [3], donde más del 70% de GC ya se ha convertido clínicamente avanzados para el momento de la exploración quirúrgica, por tanto, la resección quirúrgica sola ya no es curativa [4].
PC en GC ha sido considerado como una entidad clínica fatal. Se define como la implantación de las células tumorales a través de la cavidad peritoneal y se caracteriza por la presencia de nódulos tumorales de varios tamaños, el número y la distribución en la superficie peritoneal, así como la ascitis maligna, con frecuencia resulta en la morbilidad locorregional sin metástasis sistémicas más amplias. Los pacientes con PC gástrica se enfrentan a un resultado desalentador, con una supervivencia media de aproximadamente 6 meses [5].
No existe un tratamiento estándar para PC gástrico. Los tratamientos actuales para tales PC son la quimioterapia sistémica, mejor cuidado de apoyo y terapia paliativa. Para hacer frente a este problema, una nueva modalidad de tratamiento llamado CRS además HIPEC se ha desarrollado durante los últimos 3 décadas, tomando ventajas de la cirugía para reducir la carga tumoral visible, y la quimioterapia hipertérmica regional para erradicar las micrometástasis [6]. La evidencia creciente sugiere que la combinación de CRS y HIPEC podría traer beneficio de supervivencia para pacientes seleccionados con PC gástrico. En nuestro estudio experimental anterior [5], también hemos demostrado que CRS + HIPEC de hecho podría traer beneficio en la supervivencia con una seguridad aceptable, proporcionando evidencia para apoyar esta estrategia combinada para el tratamiento de pacientes seleccionados con PC gástrico.
Durante el desarrollo de la PC, células GC secretan enzimas para facilitar la siembra de células cancerosas y la colonización en el peritoneo. CTSB es una de las enzimas clave en este proceso crítico, sobre-expresado en GC, así como otros tipos de cáncer [7-9] y participa activamente en la invasión del cáncer [10-12]. Por otra parte, es extremadamente bajo expresa en células normales y inactivo o pierde actividad tan pronto como se dispersa en un medio acuoso de distancia a partir de células [13]. Por lo tanto CTSB ha sido considerado como un objetivo candidato en la terapia del cáncer [14].
Se ha establecido en el ensayo MAGIC que el régimen de antraciclina contenida es una quimioterapia útil para GC [15]. DOX es un representante típico de las antraciclinas. Aunque DOX es un fármaco importante en la quimioterapia, sus toxicidades son evidentes, tales como toxicidad cardíaca y depresión de la médula ósea. Para mantener el efecto terapéutico mientras que reduce los efectos secundarios, Dubowchik et al [16-18] diseñado un profármaco inteligente de DOX, PDOX (Figura 1). En este modificado DOX, Ac-Phe-Lys es un dipéptido específico para CTSB, y PABC (para-aminobenzyloxycarbonyl) es un autodestructiva espaciador [16]. El profármaco es inactivo cuando hay poca actividad CTSB, como los tejidos normales y en la sangre periférica, evitando así los efectos secundarios en el tejido normal. Durante la invasión del cáncer, que se activa CTSB se sobre expresa en la membrana exterior de las células de cáncer invasor [19, 20], que escinde el dipéptido Ac-Phe-Lys en el enlace Lys-PABC [16]. A continuación, el espaciador PABC expuesta puede auto-hidrolizar a desacilación [21] y las moléculas de DOX libre son liberados, lo que resulta en la muerte directa de las células cancerosas invasoras [16]. Figura 1 Estructura PDOX (que se muestra en el cuadro), síntesis química y mecanismo de acción. PDOX se sintetizó con éxito de acuerdo con el proceso químico 7 a paso. Su estructura química es Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCl (que se muestra en la caja), y la fórmula molecular es C52H60ClN5O16. PDOX contiene un dipéptido CTSB escindible Ac-Phe-Lys (dobles barras rojas) un espaciador PABC (barra roja) y el fármaco contra el cáncer de DOX. Cuando PDOX alcanza el área CTSB-enriquecido como el frente de invasión de cáncer, el dipéptido Ac-Phe-Lys es escindida por CTSB en el enlace Lys-PABC, exponiendo el espaciador PABC que luego se hidroliza espontáneamente (barra roja), la liberación de DOX libre en el frente de invasión del cáncer. Por lo tanto PDOX podría ejercer citotoxicidad a la invasión de las células cancerosas al tiempo que protege las células normales de la exposición al fármaco excesiva, una estrategia denominada terapia dirigida pasiva. CTSB:. Catepsina B.
En este estudio, se sintetizaron los PDOX y evaluó la eficacia y seguridad de CRS + HIPEC con PDOX régimen terapéutico molecular dirigida para el tratamiento específico de modelo de conejo de PC gástrica
Resultados
Síntesis y la identificación de PDOX
PDOX se sintetizó con éxito según el procedimiento previamente informado de 7 a paso químico (Figura 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCl) fue una polvo sólido rojo con un peso molecular de 1046.51 (MS: m /z calculado para C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, encontrado: 1046,50), la pureza química de 99,1% (por HPLC) , la estructura de C 52H 60ClN 5O 16 (por ambos H 1-RMN y C 13-RMN) (Figura 2) y el punto de 180 ° de fusión C (descomposición), que es estable a -5 ° C a 0 ° C durante 36-54 meses, la temperatura ambiente durante 24 meses, soluble en agua, parcialmente soluble en metanol y etanol. PDOX utilizado en este estudio se almacenó en la zona oscura y seco, a 4 ° C. Figura 2 Estructura de identificaciones confirmadas por H-RMN 1 (A) y C 13 NMR (B). construcción
PC modelo y características histopatológicas
se estableció modelo de conejo de PC gástrica en todos los animales (100%, 40/40). En d 8 después de tumor de células de la inoculación, los nódulos pequeños y duros y transparentes tumorales desarrolladas en el epiplón mayor, y el cáncer ulcerosa típica aproximadamente 0,5 a 1,0 cm de diámetro formadas en el antro del estómago. No se observó ascitis. Sin PC obvia fue encontrado en otras regiones. No hubo diferencias en la gravedad PC entre todos los conejos. Esto podría ser equivalente al estadio clínico I PC por criterios Gilly [22] (Figura 3A).
Todas las muestras tumorales investigadas mostraron una destrucción significativa el crecimiento y el tejido invasivo. Los tumores, en la curvatura mayor del antro gástrico, penetraron en la capa mucosa para formar úlceras. El estudio histopatológico mostró nidos tumorales penetran en toda la pared del estómago, con la invasión típico en la capa muscular y las glándulas gástricas (Figura 3B). Las células tumorales son redondos, ovalados o morfología atípica con muchas figuras mitóticas patológicos. También hubo infiltración notable de linfocitos, células plasmáticas y otras células inflamatorias (Figura 3C). Apoptóticas y células tumorales necróticas se observaron en la región central de los nódulos tumorales (Figura 3D). PC típica presenta como nódulos tumorales en la superficie del epiplón (Figura 3E) y metástasis de ganglios linfáticos intraperitoneal también se observó (Figura 3F).
Cáncer ulcerosa típico con PC se observó en las autopsias patológicos de conejos en el control. La pared del estómago estaba totalmente invadida por el tumor para crear úlcera cáncer encerrado por confluentes nódulos en el epiplón mayor, formando un bloque del tumor grande. La pared abdominal y el diafragma fueron totalmente invadidos por el tumor. Muchos nódulos tumorales formadas en la pared intestinal, el mesenterio y retroperitoneo. ascitis hemorrágica podrían ser más de 100 ml. Todas las características son similares a las características clínico-patológicas de PC gástrica en pacientes (Figura 3G). Figura 3 Las características del modelo de conejo de PC gástrico y las micrografías HE manchados. (A) La imagen del modelo de conejo temprana de PC gástrica donde nódulos tumorales visibles dispersos en el peritoneo y la curvatura mayor del estómago; (B) las imágenes de GC ulcerosa; (C & D) manchó la imagen bajo el microscopio que muestra el crecimiento invasivo de los nidos de células tumorales que infiltran la pared gástrica (panel C, 400 ×) y las células tumorales necróticas en el área de suministro insuficiente de sangre (panel D, 400 ×); (E) nódulos tumorales sobre la superficie de la epiplón (200 ×); (F) metástasis en los ganglios linfáticos intraperitoneal (200 ×); (G) post mortem exámenes patológicos de un conejo.
Supervivencia
animal se observó para grabar OS. Dos conejos que sobreviven largos (una en el PDOX y otro en el DOX, que viven más de 100 d) fueron sacrificados en el día 100 por una inyección sobredosis de pentobarbital sódico al 2%. La mediana (intervalo de confianza del 95%; IC) SG fue 23,0 d (19.9 - el 26,1 d) en el control, 41.0 d (36,9 a 45,1 d) en el HIPEC, 65.0 d (44,1 a 71,9 d) en el PDOX y 58.0 d (39,6-54,4 d) en el DOX. En comparación con el control, el sistema operativo se extendió por al menos el 70% en el HIPEC (p Hotel < 0,001, test de rangos logarítmicos). En comparación con el HIPEC, el sistema operativo se amplió en un 40% en el DOX (p = 0,029
, prueba de log rank) y en un 58% en el PDOX (p = 0,021
, log rank test) (Figura 4A ). Figura 4 En vivo efectos de PDOX en modelo de conejo PC. (A) de Kaplan-Meier de supervivencia para el Control, HIPEC, PDOX y DOX; (B) cambios de peso corporal en esos grupos.
La carga tumoral en el punto final de supervivencia
Al final del estudio, la carga tumoral en el control era más pesado, con el peso del tumor de (137.51 ± 16.09) g, portadores de tumores relación (peso del tumor de peso corporal) de (7,88 ± 0,85)%, ascitis hemorrágica de (65.50 ± 33.45) ml, y la puntuación de EPCI (9,50 ± 2,17). En comparación con el control, la HIPEC había reducido significativamente el peso del tumor (76,50 ± 11,41) g (p = 0,007
) y la relación que tiene un tumor (3,94 ± 0,54)% (p = 0,001
), pero no la puntuación EPCI (9,50 ± 2,17)% (p = 0,420
) y ascitis hemorrágica [(29.16 ± 15.30) ml, p = 0,085
]. En comparación con el HIPEC, la gravedad de PC se redujo aún más, tanto en el PDOX y la DOX, con la puntuación EPCI (6,40 ± 2,07, p = 0,020
tanto en PDOX y DOX vs. HIPEC) y ascitis hemorrágica (0,00 ml, p
< 0,001 en PDOX y DOX vs. HIPEC); mientras que no hubo diferencias significativas en el peso del tumor [(65,30 ± 14,55) g, p = 0,552
, PDOX vs. HIPEC; (48.74 ± 16.31) g, p = 0,180
, DOX vs. HIPEC)] y 2,91 ± 0,69)% portador de un tumor ratio [(p = 0,552
, PDOX vs. HIPEC; (2,13 ± 0,78)%, p = 0,180
, DOX vs. HIPEC]. No hubo diferencias significativas en la carga tumoral entre el PDOX y la DOX (Tabla 1) Puntuación .Tabla 1 El EPCI en el punto final de supervivencia en 4 grupos de conejos [intervalo (mediana)]
de control (n = 10)
HIPEC (n = 10) guía empresas PDOX (n = 10) guía empresas DOX (n = 10)
La puntuación EPCI en diferentes regiones
Región I
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Región II página 3 ~ 3 (3) página 3 ~ 3 (3) página 3 ~ 3 (3) página 3 ~ 3 (3)
Región III
1 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (1)
Región IV
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (0): perfil 0 ~ 3 (0)
ascitis (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0.0 ~ 0.0 (0.0)
0.0 ~ 0.0 (0.0) Francia El EPCI score§ página 7 ~ 13 (11) página 5 ~ 12 (9) página 3 ~ 9 (6) página 3 ~ 9 (6)
* La ascitis: p = 0,323
, HIPEC vs. control; p Hotel < 0,001, PDOX vs. HIPEC; p Hotel < . 0.001, DOX vs. HIPEC
puntuación §El EPCI: p = 0,073
, HIPEC vs. Control; p = 0,020
, PDOX vs. HIPEC; p = 0,020
, DOX vs. HIPEC; p = 0,474
, PDOX vs. DOX. cambios de peso corporal
El peso corporal de cada animal se registró cada 4 d. No se encontraron diferencias significativas en el peso corporal inicial de 4 grupos antes del tratamiento. peso corporal perioperatorio disminuyó en todos los grupos a causa del ayuno durante la noche. En el control, el peso corporal, una vez recuperado se reanudó la ingesta de alimentos, pero de nuevo se redujo progresivamente hasta el final del estudio. En los 3 grupos de tratamiento, el peso corporal disminuyó considerablemente postoperatoria después de la construcción del modelo y de la más baja 4 días después de la CRS + HIPEC y, a continuación, se mantuvo en un nivel bajo durante la fase postoperatoria hasta que se haya completado la quimioterapia. El peso corporal comenzó a aumentar en d 44 en el HIPEC y d 56 tanto en el PDOX y de la DOX, y se incrementa gradualmente a un nivel superior, que se relaciona tanto con el crecimiento del tumor de los conejos portadores de tumores de vida y la muerte de la falla conejos con un peso corporal menor. A partir de entonces, el peso corporal disminuyó progresivamente hasta que el punto final del estudio, tanto en el PDOX y la DOX (Figura 4B).
Exámenes patológicos postmortem fotos: por el momento de la muerte del animal, información detallada sobre los exámenes patológicos postmortem fue incluido en la Tabla 2 .
Además de los exámenes sistemáticos de todos los sitios anatómicos para posibles metástasis del cáncer, se ha prestado especial atención a las metástasis de pulmón e hígado. Como se muestra en la Figura 5, en el control, se observaron extensas metástasis hepáticas en 8 animales, pero no hay metástasis pulmonares fueron evidentes en todos los animales, debido a los comportamientos de crecimiento muy agresivos del tumor llevado a OS corto en este grupo de animales (Figura 5 A2, B2). En la HIPEC, como animales vivían mucho más tiempo debido a CRS + HIPEC, se observó un menor número de metástasis hepáticas en 4 animales, pero no se observaron metástasis considerablemente mucho más pulmonar en 7 animales (Figura 5 A3, B3). En el PDOX y DOX, los animales desarrollaron mucho menos metástasis tanto en el hígado y los pulmones, aunque el sistema operativo se ha mejorado aún más notable, ya que los animales recibieron no sólo CRS + HIPEC para controlar las metástasis regionales locales, sino también a la quimioterapia sistémica para el control de las metástasis hematógenas y metástasis linfáticas (Figura 5 A4, B4, A5, B5) .Tabla 2 resultados del estudio post mortem patológica en 4 grupos, expresados ​​como% de conejos
de control (n = 10) guía empresas HIPEC (n = 10) guía empresas PDOX (n = 10) guía empresas DOX (n = 10) guía empresas p 1 p 2


p 3 p
4
ulcerosa GC
100,0 100,0

100,0 100,0

NS NS

NS
NS
metástasis incisión
100,0 30,0

30,0 20,0

0,001
NS NS

NS
metástasis pulmonares
0.0
70.0
30,0 30,0

0,001
NS NS

NS
metástasis de la pared torácica
0.0
20,0 10,0

0.0
NS NS

NS NS

derrame pleural
10,0 70,0

30,0 30,0

0,008
NS NS

NS
Virchow ganglios linfáticos metástasis
30,0 70,0

60,0 40,0

NS NS

NS NS

metástasis Pericardio
0.0
20,0
0.0 0.0

NS NS

NS NS

diafragma canceroso
100,0 70,0

20,0 20,0

NS
0,028 0,028

NS
Mayor torta epiplón
100,0 80,0

40,0 50,0

NS NS

NS
NS
Las metástasis hepáticas
metástasis 80,0 40,0

30,0 30,0

NS NS

NS NS

bazo
0.0
0.0
20,0
0.0
NS NS

NS NS

metástasis retroperitoneo
100,0 60,0

60,0 50,0

0,029
NS NS

NS
metástasis renal izquierda
0.0
10,0
0.0 0.0

NS NS

NS NS

metástasis renal derecha
0.0 invasión
0.0 0.0

0.0
NS NS

NS NS

cápsula renal
100,0
50,0
0.0
20,0
0,012 0,012

NS NS

Intestino siembra muro Añadir 100,0 80,0

20,0 10,0

NS
0,009 0,002

NS
Mesenterio siembra
100,0 80,0

30,0 10,0

NS
0,028 0,002

NS
cáncer de la pared abdominal
100,0
60,0 30,0

0.0
0,029
NS NS
0,004

siembra pélvico
100,0
50,0 30,0

10,0
0.170
NS NS

NS
vejiga ruptura
0.0 0.0

20,0 10,0

NS NS

NS NS

La retención de orina
50,0 50,0

30,0 10,0

NS NS

NS NS
fotos: por prueba de 2 caras de chi-cuadrado (χ página 2). p
1, HIPEC vs. Control; p página 2, PDOX vs. HIPEC; p página 3, DOX vs. HIPEC; . P página 4, PDOX vs. DOX
NS:.
Ninguna importancia con respecto al testigo, la gravedad de PC se redujo significativamente en las metástasis de incisión, las metástasis pulmonares, derrame pleural, metástasis retroperitoneales, invasión cápsula renal, abdominales cáncer de pared y la siembra de la pelvis en el HIPEC. En comparación con el HIPEC, la gravedad PC se redujo significativamente en la siembra diafragma canceroso, riñón invasión de la cápsula, la siembra pared del intestino y el mesenterio en el PDOX, y en el diafragma canceroso, la siembra pared del intestino, la siembra mesenterio y el cáncer de la pared abdominal en la DOX. No hubo diferencias estadísticas entre el PDOX y DOX en metástasis sistémicas.
Figura 5 metástasis pulmonares (panel A) y metástasis hepáticas (panel B) en este estudio. (A1) (B1) mostró número exacto de metástasis de pulmón y de hígado en cada conejo de los 4 grupos, respectivamente; (A2 a A5) mostró metástasis pulmonares de representación en el control, la HIPEC, el PDOX y la DOX, respectivamente; (B2 a B5) mostró metástasis hepáticas de representación en el control, la HIPEC, el PDOX y la DOX, respectivamente; (A6) mostró micrografías de las metástasis pulmonares en la HIPEC, que se caracteriza por la invasión del cáncer, la supresión del tejido pulmonar, la formación del trombo tumoral intravascular y la infiltración de células inflamatorias visibles (A6-1, Tinción HE, × 200) (A6-2, Tinción HE, 400 ×). (B6) mostró micrografías de las metástasis hepáticas en el control, que se caracterizan por la destrucción del tejido hepático extenso, la invasión de las células cancerosas, la infiltración de células inflamatorias y hemorragia en el tejido hepático (B6-1, Tinción HE, × 100) (B6-2, Tinción , 200 ×). | perfil la sangre periférica y los principales cambios bioquímicos
No hubo diferencias en los recuentos de células de sangre periférica en 2 d, d d 6 y 14 entre los 4 grupos, pero los glóbulos blancos y las plaquetas fueron significativamente disminución en el día 36 después de la quimioterapia sistémica en el DOX (p Hotel < 0,05). No hubo diferencias en las funciones hepática y renal lo largo del experimento entre los 4 grupos. En cuanto a los parámetros de las funciones cardíacas, no hubo diferencias en la creatina cinasa y creatina quinasa isoenzima MB de d 2, d 6 d 14 entre los 4 grupos, pero la creatina quinasa isoenzima MB, fue significativamente superior en el día 36 después de la quimioterapia sistémica en el DOX (p
< 0,05). De particular atención, 2 animales en el DOX con OS corto de 47 dy 53 d tenían excepcionalmente alto de creatina quinasa sérica mb niveles de isoenzimas, 467,5 U /L y 656,4 U /L, respectivamente (p Hotel < 0,05) (Tabla 3) .table 3 pruebas rutinarias de sangre y resultados de pruebas bioquímicas en 4 grupos de conejos [rango (mediana)]
Grupo
D2
D6
D14

D36 *
n
Valor
p
n
Valor
p

n
Valor
p
n
células
Valor
p
de sangre roja ( T /L)
control
10
5,03 a 6,93 (6,26)
0.849
10
5,08 a 7,76 (6,07)
0,494
10
4.29 -6,32 (5,54)
0.382
0 -
0,203
HIPEC
10
5,13 a 7,58 (6,48)
10
4,66 a 7,15 (5,65 )
10
3,54 a 7,30 (5,68) página 7
4,28 a 7,36 (5,28)
PDOX
10
4.17 a 7.16 (5.94)
10
4,97 a 6,49 (5,61)
10
4,38 a 5,82 (5,05)
10
4,46 a 6,03 (5,47)
DOX
10
5,03 a 6,84 (6,09)
10
5,03 a 6,70 (5,88)
10
3,65 a 6,36 (5,08) página 9
4,12 a 6,40 (4,94): perfil células blancas de la sangre (g /l)
control
10
5.3 hasta 9.6 (8.6)
0,785
10
4,5 a 14,1 (9,9) 0,446

10
6,0 a 10,3 (7,8 ): perfil del 0,601
0 -
0,013
HIPEC
10
04.04 a 12.03 (7.4): perfil 10
4.5 a 12.7 (9.3)
10
03.02 a 12.01 (10.7) página 7
6,9 a 13,7 (7,5)
PDOX
10
5,9 a 13,2 (8,2)
10
06.01 a 12.05 (8.8)
10
4,6 a 14,4 (9,0)
10
4.9 a 11.1 (7.7)
DOX
10
3.6 a 10.5 (7.8): perfil 10
4.7 a 12.2 (7.3)
10
04.06 a 12.05 (10.2) página 9
3.9 a 6.4 (5.3)
plaquetas (G /L)
control
10
387 a 579 (480) 0.494

10
317 a 836 (555) 0.362

10
451 a 917 (657) 0.601

0 -
0,009
HIPEC
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489) página 7
262-598 (451)
PDOX
10
382 a 592 (456): perfil 10
395-856 (493)
10
328 a 1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476) 363-878
10
(464)
10
390-939 (654) página 9
115-319 (244)
alanina transaminasa (U /L)
control
10
31-52 (38)
0,463
10
34-54 (41)
0,525
10
21-54 (37)
0,245
0
-
0.838
HIPEC
10
24-47 (40)
10
21-62 (35)
10
31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10
28-52 (40)
10
24-59 (37)
10 32
-55 (45) página 9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35)
10
30-59 (39)
10
34-61 (48) página 8
26-76 (42)
aspartato transaminasa (U /L)
control
10
19-54 (35 ): perfil del 0,895
10
30-52 (36)
0,525
10
37-58 (43)
0,309
0 -
0,473
HIPEC
10
23-59 (38)
10
11-55 (35)
10
27-78 (34) página 7
25-50 (36)
PDOX
10
22-47 (37)
10
17-49 (39)
10
27-69 (36) página 9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37)
10
24-49 (30): perfil 10
23-86 (36) página 8
31-60 (39)
nitrógeno ureico en sangre (mmol /L)
control
10
4,40 a 5,80 (4,80)
0,206
10
4,51 a 10,44 (4,81)
0,525
10
3,29 a 9,82 (6,32)
0,185
0 -
0,473
HIPEC
10
3,70 a 8,14 (5,10)
10
3,57 a 11,04 (5,35)
10
4,32 a 9,29 (7,50) página 7
5,25-8,67 (6,38)
PDOX
10
3,58 a 7,66 (5,82)
10
3,32 a 11,58 (6,68)
10
6,52 a 13,58 (7,63) página 9
4,71 a 8,05 (5,35)
DOX
10
1,76 a 7,90 (5,01)
10
3,32 a 10,00 (5,59)
10
1,76-10,53 ( 7,80) página 8
4,50 a 9,26 (6,27)
creatinina (mmol /L)
control
10
45,05 a 64,50 (60,50)
0,736
10
22,10 a 73,20 (55,00)
0,736
10
41,40 a 71,40 (50,25)
0,083
0 -
0.838
HIPEC
10
43,30 a 80,65 (57,35)
10
22,20 a 81,55 (46,97)
10
31,10 a 83,37 (52,96) página 7
59,87 a 76,84 (66,51)
PDOX
10
42,80 a 75,80 (61,87)
10
22,13 a 86,25 (69,65)
10
45,30 a 75,80 (66,25) página 9
44,38-79,56 (62.47)
DOX
10
22,30 a 69,30 (55,81)
10
27,28 a 75,90 (63,45)
10
42,38 a 73,76 (69,37) página 8
47,72 a 78,64 (59,50)
creatina quinasa (U /L)
control
10
74,3 a 205,6 (131,6)
0.864
10
81,3-247,8 (147.9)
0,878
10
71,4 a 182,1 (138,9)
0,968
0 -
0,473
HIPEC
10
78,8-259,2 (137.8) 10

66,8 a 248,9 (145,3)
10
63,4 a 225,2 (141,8) página 7
98,3 a 265,1 (153,0)
PDOX
10
87,9 a 194,2 (139,4)
10
69,9 a 256,1 (144,4)
10
70,0 a 240,8 (130,6) página 9
109,2 a 251,5 (195,2)
DOX
10
98,3 a 256,1 (152,4)
10
56,4 a 250,2 (135,8)
10
80,5 a 261,2 (133,8) página 8
101.1- 407,6 (228,1)
creatina quinasa isoenzima MB (U /L)
control
10
73,0 a 162,5 (129,8)
0.717
10
62,5 a 195,6 (127,2)
0,878
10
57,0 a 199,8 (119,8)
0,509
0 -
0.040
HIPEC
10
74,2 a 228,2 (137,3)
10
42,9 a 219,8 (129,7)
10
52,8 a 237,7 (146,5) página 7
50,2 a 188,1 (126,1)
PDOX
10
59,2 a 228,1 (133,9)
10
42,5 a 197,7 (133,2)
10
74,9 a 241,5 (158,2) página 9
58,9 a 209,8 (143,7)
DOX
10
94,3 a 207,7 (122,1)
10
53,9 a 202,3 (128,2)
10
94,3 a 238,6 (148,4) página 8
106,2 a 656,5 (259,3 )
* Una parte de los datos no está disponible debido a la muerte de los animales a la hora fijada fotos: por 2 caras prueba no paramétrica
glóbulos blancos en D 36, la comparación entre los grupos:.. p =
0,001, frente a DOX HIPEC; p = 1,000
, PDOX vs. HIPEC; p = 0,005
, PDOX vs. DOX; Las plaquetas en D 36, la comparación entre los grupos: p = 0,041
, DOX vs. HIPEC; p = 0,637
, PDOX vs. HIPEC; p = 0,070
, PDOX vs. DOX; La creatina quinasa isoenzima MB de D 36, la comparación entre los grupos: p = 0,012
, DOX vs. HIPEC; p = 0,593
, PDOX vs. HIPEC; . P = 0,131
, PDOX vs. DOX
toxicidades hematológicas con marcada reducción de las células blancas de la sangre (p Hotel < 0,05) y plaquetas (p Hotel < 0,05), así como los efectos tóxicos cardiacos con aumentos significativos en la creatina quinasa isoenzima MB (p Restaurant < 0,05). se observaron en el día 36 después de la quimioterapia sistémica en el DOX estudios detallados sobre
toxicidades miocardio
estudios histopatológicos tanto bajo el microscopio microscopio electrónico de transmisión y la luz encontrados que no se encontraron efectos tóxicos miocardio en el control, la HIPEC y la PDOX, pero los cambios histopatológicos significativos de miocardio en todos los animales (100%, 10/10) en el DOX, incluyendo necrosis por coagulación del miocardio con profunda citoplasma teñido de rojo, y la cariopicnosis (Figura 6 C1, H1, P1, D1 flechas negras). micrografías electrónica de transmisión mostró que el miocardio normal con abundantes mitocondrias empaquetadas alrededor del núcleo normal en el Control y HIPEC, ricos normal, pero con mitocondrias cristae ligeramente dilatados dispersa alrededor del núcleo normal en el PDOX, las mitocondrias casi ausente alrededor del núcleo morfológicamente senil y degenerativa en la DOX. Además, el miocardio-lítico parcial de necrosis (flecha amarilla) y las mitocondrias-picnosis lejos del núcleo (flecha roja) también eran evidentes en el DOX. líneas completas, claras y continuas de intercalado discos normales en el control, la HIPEC y la PDOX, pero intercalado discos oscuros, que pierden y discontinuos fueron encontrados en el DOX (flechas blancas). Figura 6 micrografías de luz y micrografías de electrones de transmisión de miocardio de conejo. Panel superior (tinción HE, 400 ×), características histopatológicas rutinarias de miocardio de conejo en sección longitudinal (inserciones en la esquina superior derecha, corte sagital), donde C1, H1 y P1 demostraron fibras miocárdicas normales limpias y claras en matrices ordenadas, pero D1 mostró necrosis de coagulación del miocardio con profunda citoplasma teñido de rojo y el cariopicnosis del miocardio. El panel medio superior (10.000 x), micrografías de transmisión de electrones del miocardio se centra en las características de los núcleos y mitocondrias peri-nuclear, donde C2, H2 mostraron abundantes mitocondrias lleno alrededor del núcleo normales, P2 mostró mitocondrias ricos esparcidos alrededor del núcleo normal, pero D2 mostró mitocondrias casi ausentes alrededor del núcleo morfológicamente senil y degenerativa (estrella amarilla que muestran núcleo ampliada debido a la hinchazón y la acumulación excéntrica de la heterocromatina, y las flechas verdes que muestran la contracción hacia el interior visible de la membrana nuclear). Además, el miocardio-lítico parcial necrosis (flecha amarilla) y las mitocondrias-picnosis lejos del núcleo (flecha roja) también fueron evidentes en los animales tratados con DOX. De dos caras p Hotel < Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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