Synthesis, tunnistaminen ja in vivo tutkimuksissa kasvaimeen kohdistamisaineena peptidi doksorubisiini (PDOX) hoitoon vatsakalvon carcinomatosis mahalaukun syövän yhtä tehokas, mutta vähemmän myrkyllisiä

Synthesis, tunnistaminen ja in vivo tutkimuksissa kasvaimeen kohdistamisaineena peptidi doksorubisiini (PDOX) hoitoon vatsakalvon carcinomatosis mahalaukun syövän yhtä tehokas, mutta vähemmän myrkyllisiä
tiivistelmä
tausta
työn, jolla tiivistetään katepsiini B ( CTSB) -cleavable kasvaimeen kohdistaminen aihiolääke peptidi doksorubisiini (PDOX) ja tutkia in vivo teho ja toksisuuksia on eläinmallissa mahalaukun vatsakalvon carcinomatosis (PC). Tool menetelmät
PDOX syntetisoitiin käyttäen doksorubisiinin (DOX) kiinnittämällä CTSB-katkaistavissa dipeptidi Ac-Phe-Lys, ja para-amino-bentsyylioksikarbonyyli (PABC) spacer. PC kautta luotiin ruiskuttamalla VX2 kasvainsoluja mahan Saharan limakalvon 40 kaneja, jotka sitten jaettiin satunnaisesti 4 ryhmään: Control (n = 10) ilman hoitoa, HIPEC (n = 10) sai sytoreduktiivisen leikkaus (CRS) plus hypertermistä vatsaonteloon kemoterapiaa (HIPEC), The PDOX (n = 10) ja DOX (n = 10) saavat systeemistä kemoterapiaa kanssa PDOX 50,0 mg /kg tai DOX 5,0 mg /kg, vastaavasti, sen jälkeen, kun CRS + HIPEC.
tulokset
mediaani yleinen eloon jäämisestä (OS) oli 23,0 d (95% CI: 19,9 d - 26,1 d) Control, 41,0 d (36,9 d - 45,1 d) HIPEC, 65,0 d (44,1 d - 71,9 d) että PDOX, ja 58,0 d (39,6 d - 54,4 d) DOX. Kontrolliin verrattuna, OS laajennettiin 70% vuoden HIPEC (p
< 0,001) ja edelleen jatkettu 40% DOX (p
= 0,029) ja 58% vuoden PDOX (p =
0,021), ja PC vaikeusaste väheni HIPEC ja edelleen vähentynyt PDOX ja DOX. Eläimet, jotka saivat DOX hoito osoitti luuydintoksisuuden huomattavista väheneminen valkosolujen ja verihiutaleiden sekä sydämen toksisuuksista merkitsevää kreatiinikinaasiarvojen mb isoentsyymin, ilmeinen sydänlihaksessa hyytyminen kuolion merkittäviä ydin- rappeuma, peri-tuma mitokondrioiden poisto, mitokondriot-pyknosis, ja epänormaali intercalated levyjä. Mutta nämä toksisuudet eivät ilmeistä PDOX.
Johtopäätökset
PDOX on juuri syntetisoidun kasvaimeen kohdistaminen aihiolääke DOX. Verrattuna DOX, PDOX on yhtä tehokas, mutta pienentää hematologisten ja sydäntoksisuutta hoidettaessa kanimallilla mahalaukun PC.
Avainsanat
Peritoneaalisille carcinomatosis Mahasyöpää Peptide doksorubisiini sytoreduktiivisen leikkauksen hypertermistä vatsaonteloon kemoterapiaa Taustaa
GC on yksi yhteinen maligniteetit kehitysmaissa, joissa se on toisella sijalla suhteen esiintyvyys ja kolmanneksi suurin kuolleisuus miespuolisesta väestöstä, ja on neljäntenä kannalta sekä esiintyvyys ja kuolleisuus naisväestön mukaan viimeisimmän maailmanlaajuisen tilastoista [1, 2]. GC on myös kolmanneksi suurin syy syöpään kuolleisuus Kiinassa [3], jossa yli 70% GC on jo tullut kliinisesti edennyt mennessä kirurgisen etsintä, mikä kirurginen resektio yksin ei ole enää parantavaa [4].
PC GC on pitkään pidetty kohtalokas kliininen kokonaisuus. Se määritellään kiinnittymisestä syöpäsolujen koko vatsaonteloon ja ominaista läsnäolo kasvaimen kyhmyjä eri laajuus, ja jakelu vatsakalvon pinnalla sekä pahanlaatuinen askites, usein tuloksena Paikallista sairastuvuuteen ilman laajempaa systeemistä etäpesäkkeitä. Potilaat, joilla on mahalaukun PC kohtaavat synkkä tulos, joiden mediaanielossaolosta noin 6 kuukautta [5].
Ei ole standardi hoitoa mahan PC. Nykyiset hoidot kuten PC ovat systeemistä kemoterapiaa, parhaiten tukea hoitoa ja lievittävä hoito. Jotta Tämän ongelman ratkaisemiseksi, uusi hoitomuoto kutsutaan CRS plus HIPEC on kehittynyt viimeisen 3 vuosikymmeninä hyödyntämästä leikkaus vähentää näkyvää kasvaintaakkaa, ja alueelliset hypertermistä kemoterapiaa hävittämiseksi micrometastases [6]. Lisääntyvä tutkimusten mukaan yhdistelmä CRS ja HIPEC voisi eloonjäämishyötyä valituille potilaille mahalaukun PC. Edellisessä kokeellinen tutkimus [5], olemme myös osoittaneet, että CRS + HIPEC voisi todellakin tuoda eloonjäämishyötyä turvallisuuden ollessa hyväksyttävää, joka tarjoaa todisteita tukemaan tätä yhdistettyä strategiaa hoitoon valikoiduilla potilailla mahalaukun PC.
Kehittämisen aikana PC, GC solut erittävät entsyymejä helpottamiseksi syöpäsolut kylvö ja kolonisaatio on vatsakalvon. CTSB on yksi tärkeimmistä entsyymeistä tässä kriittinen prosessi, yli-ilmaistuna GC sekä muita syöpiä [7-9] ja osallistuu aktiivisesti syövän invaasio [10-12]. Toisaalta, se on erittäin alhainen ilmentyy normaaleissa soluissa ja ei-aktiivinen tai menettää aktiivisuuden heti, kun se on dispergoitu vesiväliaineeseen päässä soluihin [13]. Näin CTSB on pitkään pidetty ehdokkaana kohteena syövän hoidossa [14].
On perustettu MAGIC tutkimuksessa että antrasykliini-sisälsi hoito on hyödyllinen kemoterapiaa GC [15]. DOX on tyypillinen edustaja antrasykliinien. Vaikka DOX on tärkeä lääke kemoterapiassa, sen toksisuuksia ovat ilmeisiä, kuten sydämen toksisuutta ja luuytimen tukahduttaminen. Jos haluat säilyttää terapeuttinen vaikutus ja vähentää sivuvaikutuksia, Dubowchik et al [16-18] suunniteltu älykäs esiastetta DOX, PDOX (kuva 1). Tässä muunnetussa DOX, Ac-Phe-Lys on dipeptidi spesifinen CTSB, ja PABC (para-aminobenzyloxycarbonyl) on itsestään immolative spacer [16]. Aihiolääke on ei-aktiivinen silloin, kun on vain vähän CTSB toimintaa, kuten normaaleissa kudoksissa ja ääreisverenkierron, jolloin vältetään sivuvaikutukset normaalia kudosta. Aikana syöpä invaasio, aktivoitu CTSB on yli ilmaistaan ​​ulkoapäin kalvo hyökkääviä syöpäsolujen [19, 20], joka pilkkoo Ac-Phe-Lys dipeptidi Lys-PABC bond [16]. Sitten altistuvat PABC välike voi itse hydrolysoida upon deasylointivaihe [21] ja vapaa DOX molekyylit vapautuvat, jolloin suora tappaminen hyökkääviä syöpäsolujen [16]. Kuvio 1 PDOX rakenne (esitetty laatikossa), kemiallinen synteesi ja toiminta mekanismi. PDOX onnistui syntetisoidaan 7-vaiheen kemiallinen prosessi. Sen kemiallinen rakenne on Ac-Phe-Lys-PABC-Dox-HCl (esitetty laatikossa), ja molekyylikaava on C52H60ClN5O16. PDOX sisältää CTSB lohkaistava dipeptidi Ac-Phe-Lys (double punainen kauttaviivaa) PABC välike (punainen vinoviiva) ja syöpälääkettä DOX. Kun PDOX saavuttaa CTSB rikastettu alueella, kuten hyökkäyksen edessä syövän, Ac-Phe-Lys dipeptidi lohkaistaan ​​CTSB on Lys-PABC sidos, paljastaen PABC välike, joka hydrolysoidaan sitten spontaanisti (punainen vinoviiva), vapauttaen vapaata DOX at syövän invaasio edessä. Näin PDOX voisi käyttää sytotoksisuus hyökkääviä syöpäsoluja samalla suojella normaalit solut liialliselta lääkeainealtistukseen, strategia nimeltään passiivinen täsmähoitoihin. CTSB: katepsiini B.
Tässä tutkimuksessa syntetisoimme PDOX ja arvioidaan tehoa ja turvallisuutta CRS + HIPEC molekyylikaavan kohdennettuja terapeuttinen hoito PDOX kohdennettua hoitoon kani malli mahalaukun PC.
Tulokset
Synthesis ja tunnistaminen PDOX
PDOX onnistuneesti syntetisoitu aiemmin raportoitu 7-vaiheen kemiallinen prosessi (kuvio 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCl) oli punainen kiinteä aine molekyylipainolla 1046,51 (MS: m /z laskettu C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, havaittu: 1046,50), kemiallinen puhtaus 99,1% (HPLC) , rakenne C 52H 60ClN 5O 16 (molemmat H 1-NMR ja C 13-NMR) (kuvio 2) ja sulamispiste 180 ° C (hajoaa), joka on stabiili lämpötilassa -5 ° C: sta 0 ° C: ssa 36-54 kuukautta, ympäristön lämpötilassa 24 kuukautta, ratkaistavissa veteen, osittain ratkaistavissa metanoliin ja etanoliin. PDOX Tässä tutkimuksessa käytetyt säilytettiin pimeässä ja kuivassa tilassa 4 ° C: ssa. Kuvio 2 Rakenne tunnisteiden varmistettiin H 1 NMR (A) ja C 13 NMR (B).
PC malli rakentaminen ja histopatologiset ominaisuudet
Rabbit malli mahalaukun PC perustettiin kaikissa eläimissä (100%, 40/40). On d 8 jälkeen tuumorisolujen inokulaation pieni, kova ja läpinäkyvä kasvaimen kyhmyjä kehitetty suuremman omentum, ja tyypillinen haavainen syövän noin 0,5-1,0 cm halkaisijaltaan muodostettu antrum vatsaan. Ei askites havaittu. Ei selvää PC löytynyt muilla alueilla. Ei ollut eroja PC vakavuus joukossa kaikki kanit. Tämä voisi olla vastaa kliinisen vaiheen I PC Gilly kriteerien [22] (kuvio 3A).
Kaikki tutkittiin kasvaimen näytteet osoittivat laajaa invasiivista kasvua ja kudosvaurio. Kasvaimet, on suurempi kaarevuus mahalaukkua, tunkeutui limakalvo muodostaa haavaumia. Histopatologisia tutkimus osoitti kasvain pesiä tunkeutuu koko mahan seinään, tyypillinen invaasio lihakseen kerros ja maharauhanen (kuvio 3B). Kasvain solut ovat pyöreitä, soikeita tai morfologisesti epätyypillisiä monia patologisia mitoottisiin lukuja. Oli myös näkyvään soluttautumista lymfosyyttien, plasmasolujen ja muiden tulehdussolujen (kuvio 3C). Apoptoottinen ja nekroottinen kasvainsoluja havaittiin keskialueella kasvaimen kyhmyjä (kuvio 3D). Tyypillinen PC esitetään kasvaimen kyhmyjä pintaan omentum (kuvio 3E) ja vatsaonteloon imusolmukemetastaaseja havaittiin myös (kuvio 3F).
Tyypillinen haavainen syövän PC havaittiin post mortem patologisten tutkimusten kanien Control. Vatsa seinä oli täysin valtasivat kasvain luoda syövän haavauma koteloitu yhtenäisiksi kyhmyt suurempi omentum muodostaen iso kasvain lohko. Vatsan ja pallean olivat täysin valtasivat kasvain. Monet kasvain kyhmyt muodostettu suolen seinämän, suoliliepeen sekä retroperitoneum. Bloody Askites voi olla yli 100 ml. Kaikki ominaisuudet ovat samanlaisia ​​kuin ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia mahalaukun PC potilailla (kuvio 3G). Kuva 3 ominaisuudet kanin malli mahalaukun PC ja HE värjätään micrographs. (A) Kuva varhain kani malli mahalaukun PC jossa näkyvään kasvaimen kyhmyjä hajallaan vatsakalvon ja suurempi kaarevuus vatsaan; (B) kuvat haavaisen GC; (C &D) HE värjättyä kuva mikroskoopilla osoittaa invasiivisen kasvun tuumorisolun pesiä tunkeutuu mahalaukun seinämän (paneeli C, 400 x) ja nekroottinen kasvainsolujen alalla riittämätön verenkierto (paneeli D, 400 x); (E) kasvaimen kyhmyt pinnalla omentum (200 x); (F) vatsaonteloon imusolmukemetastaaseja (200 x); (G) post mortem patologisten tutkimusten kanin.
Survival
Animal havaittiin tallentaa käyttöjärjestelmän. Kaksi pitkää eloon jäänyt kanit (yksi PDOX ja toinen DOX, elävät yli 100 d) tapettiin 100. päivänä yliannostus injektoimalla 2% pentobarbitaalinatriumia. Mediaani (95% luottamusväli, CI) OS oli 23,0 d (19,9-26,1 d) Control, 41,0 d (36,9-45,1 d) HIPEC, 65,0 d (44,1-71,9 d) PDOX ja 58,0 d (39,6-54,4 d) DOX. Kontrolliin verrattuna, OS laajennettiin vähintään 70% vuoden HIPEC (p
< 0,001, log rank -testi). Verrattuna HIPEC, OS edelleen jatkettu 40% DOX (p =
0,029, log rank -testi) ja 58% vuonna PDOX (p =
0,021, log rank -testi) (kuvio 4A ). Kuva 4 In vivo vaikutuksia PDOX kanin tietokoneen mallista. (A) Kaplan-Meier eloonjäämiskäyriä Control, HIPEC, PDOX ja DOX; (B) Paino muutoksia näihin ryhmiin.
Tuumorirasitusta at selviytyminen päätepisteen
Tällä tutkimuksen päättyessä, tuumorikuormitusta Control oli raskain, jossa kasvaimen paino (137,51 ± 16,09) g, kasvain suhde (kasvaimen paino kehon paino) (7,88 ± 0,85)%, verinen askites of (65,50 ± 33,45) ml, ja ePCI pisteet (9,50 ± 2,17). Verrattuna valvontavaliokunnan, HIPEC oli alentanut merkittävästi kasvaimen paino (76,50 ± 11,41) g (p =
0,007) ja kasvain suhde (3,94 ± 0,54)% (p =
0,001), mutta ei ePCI pisteet (9,50 ± 2,17)% (p =
0,420) ja verinen askites [(29.16 ± 15,30) ml, p =
0,085]. Verrattuna HIPEC, PC vakavuus vähenivät edelleen sekä PDOX ja DOX, jossa ePCI pisteet (6,40 ± 2,07, p =
0,020 sekä PDOX ja DOX vs. HIPEC) ja verinen askites (0,00 ml, p
< 0,001 PDOX ja DOX vs. HIPEC); vaikka ei ollut merkittäviä eroja kasvaimen paino [(65,30 ± 14,55) g, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (48,74 ± 16,31) g, p =
0,180, DOX vs. HIPEC)] ja kasvain suhde [(2,91 ± 0,69)%, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (2,13 ± 0,78)%, p =
0,180, DOX vs. HIPEC]. Ei ollut merkittäviä eroja kasvaintaakkaa välillä PDOX ja DOX (taulukko 1) .table 1 ePCI maalin selviytyminen päätepisteen 4 ryhmässä kanien [alue (mediaani)]
Ohjaus (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10) B
ePCI pisteet eri alueilla
Region I
0 ~ 3 (3) B-0 ~ 3 (2) B-0 ~ 3 (0) B 0 ~ 3 (0) B Alue II
3 ~ 3 (3) B-3 ~ 3 (3) B-3 ~ 3 (3) B-3 ~ 3 (3) B-alueen III
1 ~ 3 (3) B-0 ~ 3 (3) B-0 ~ 3 (1) B-0 ~ 3 (1) B-alue IV
0 ~ 3 (3) B-0 ~ 3 (1) B-0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0) B Askites (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0) B 0.0 ~ 94,0 (18,1) B 0,0 ~ 0,0 (0,0) B 0,0 ~ 0,0 (0,0)
ePCI score§
7 ~ 13 (11) B-5 ~ 12 (9) B-3 ~ 9 (6) B-3 ~ 9 (6)
* Askites: p
= 0,323, HIPEC vs. valvonta; p
< 0,001, PDOX vs. HIPEC; p
< 0.001, DOX vs. HIPEC.
§The ePCI pisteet: p
= 0,073, HIPEC vs. valvonta; p
= 0,020, PDOX vs. HIPEC; p
= 0,020, DOX vs. HIPEC; p
= 0,474, PDOX vs. DOX.
Paino muutoksia
Kehon paino kunkin eläimen tallennettiin joka 4. d. Merkittävää eroa ei havaittu alkupaino 4 ryhmään ennen käsittelyä. Perioperative kehon paino laski kaikissa ryhmissä, koska yön yli paasto. Control, kehon painon takaisin kerran ravinnon jatkettiin mutta jälleen laski vähitellen asti tutkimuksen päättyessä. Vuonna 3 hoitoryhmässä, leikkauksen jälkeinen kehon paino väheni merkittävästi sen jälkeen, kun malli rakentamisen ja alin 4 d kuluttua CRS + HIPEC, ja sitten pysyi alhaisella tasolla aikana leikkauksen jälkeinen vaihe ennen kemoterapiaa oli saatu päätökseen. Kehon paino alkoivat nousta d 44 on HIPEC ja d 56 sekä PDOX ja DOX, ja vähitellen nousi korkeammalle tasolle, joka liittyy sekä kasvaimen kasvua elävien kasvain kanit ja kuolema epäonnistumisen kaneja pienempi paino. Tämän jälkeen kehon paino laski vähitellen uudelleen ennen kuin tutkimuksen päättyessä sekä PDOX ja DOX (kuva 4B).
Postmortem patologisten tutkimusten
Mennessä eläimen kuolema, yksityiskohtaiset tiedot jälkipuinti patologisten tutkimusten oli taulukossa 2 .
lisäksi systemaattinen tutkimus kaikille anatominen sivustojen mahdollisia syövän etäpesäkkeiden, erityistä huomiota kiinnitettiin keuhko- ja maksametastaaseja. Kuten kuviossa 5, Control, laaja maksametastaaseista havaittiin 8 eläimillä, mutta ei keuhkometastaasien näkyivät kaikki eläimet, sillä hyvin aggressiivista kasvua käyttäytymistä kasvaimen johti lyhyitä käyttöjärjestelmä tällä eläinryhmälle (kuva 5 A2, B2). Vuonna HIPEC, koska eläimet elivät paljon pidempään, koska CRS + HIPEC, vähemmän maksametastaaseista havaittiin 4 eläimillä, mutta huomattavasti enemmän keuhkometastaasien havaittiin 7 eläimillä (kuvio 5 A3, B3). Vuonna PDOX ja DOX, eläimille kehittyi paljon vähemmän etäpesäkkeitä sekä maksan ja keuhkot, vaikka OS kehitettiin edelleen huomattavasti, koska eläimet saivat paitsi CRS + HIPEC valvoa kunnalliset etäpesäkkeitä mutta myös systeemistä kemoterapiaa valvoa hematogenous etäpesäkkeitä ja lymfaattinen etäpesäkkeitä (kuva 5 A4, B4, A5, B5) .table 2 tulokset post mortem patologinen tutkimus 4 ryhmässä ilmaistuna% kania
ohjaus (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
p 1
p 2

p 3
p 4
haavainen GC
100,0
100,0
100,0
100,0
NS
NS
NS
NS
Viilto etäpesäkkeitä
100,0
30,0
30,0
20,0
0,001
NS
NS
NS
Keuhkojen etäpesäkkeet
0,0
70.0
30,0
30,0
0,001
NS
NS
NS
Rintakehän etäpesäkkeitä
0,0
20,0
10,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Pleuraeffuusio
10,0
70,0
30,0
30,0
0,008
NS
NS
NS
virchow imusolmukkeiden etäpesäkkeet
30,0
70,0
60,0
40,0
NS
NS
NS
NS
pericardium etäpesäkkeitä
0,0
20,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
syöpä kalvo
100,0
70,0
20,0
20,0
NS
0,028
0,028
NS
Greater omentum kakku
100,0
80,0
40,0
50,0
NS
NS
NS
NS
maksametastaaseista
80,0
40,0
30,0
30,0
NS
NS
NS
NS
Perna etäpesäkkeitä
0,0
0.0
20,0
0,0
NS
NS
NS
NS
retroperitoneum etäpesäkkeitä
100,0
60,0
60,0
50,0
0,029
NS
NS
NS
Vasen munuaisten etäpesäkkeitä
0,0
10,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Oikea munuaisten etäpesäkkeitä
0,0
0,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Munuainen kapseli invaasio
100,0
50,0
0,0
20,0
0,012
0,012
NS
NS
suolenseinämä kylvö
100,0
80,0
20,0
10,0
NS
0,009
0,002
NS
suoliliepeen kylvö
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028
0,002
NS
vatsan syöpä
100,0
60,0
30,0
0,0
0,029
NS
0,004
NS
Lantion kylvö
100,0
50,0
30,0
10,0
0,170
NS
NS
NS
Virtsarakon repeämä
0,0
0,0
20,0
10,0
NS
NS
NS
NS
virtsan säilyttämisestä
50,0
50,0
30,0
10,0
NS
NS
NS
NS
By 2-puolinen chi-square (χ
2) testi. p
1, HIPEC vs. valvonta; p
2, PDOX vs. HIPEC; p
3, DOX vs. HIPEC; p
4, PDOX vs. DOX.
NS: ei merkitystä.
kontrolliin verrattuna, PC vakavuus väheni merkittävästi viilto etäpesäkkeitä, keuhkojen etäpesäkkeet, pleuraeffuusio, retroperitoneaalinesteeseen etäpesäkkeitä, munuainen kapseli invaasio, vatsan seinä syöpä ja lantion kylvö on HIPEC. Verrattuna HIPEC, PC vakavuus väheni merkittävästi cancerous pallean, munuainen kapseli invaasio, suolenseinämä kylvön ja suolilieve kylvö on PDOX, ja syöpä- pallean, suolenseinämä kylvö, suoliliepeen kylvö ja vatsan syövän DOX. Ei ollut tilastollista eroja PDOX ja DOX systeemistä etäpesäkkeitä.
Kuva 5 Keuhkojen etäpesäkkeet (paneeli A) ja maksametastaaseista (paneeli B) tässä tutkimuksessa. (A1) (B1) osoitti tarkka lukumäärä keuhko- ja maksametastaaseista kussakin kani on 4 ryhmää, vastaavasti; (A2-A5) osoitti edustaja keuhko etäpesäkkeitä valvontavaliokunnan, HIPEC The PDOX ja DOX, vastaavasti; (B2 B5) osoitti edustaja maksassa etäpesäkkeitä valvontavaliokunnan, HIPEC The PDOX ja DOX, vastaavasti; (A6) osoitti micrographs keuhkojen etäpesäkkeitä HIPEC, tunnettu syövän invaasio, keuhkokudoksessa tukahduttaminen, suonensisäinen kasvaimen trombinmuodostus ja näkyvään tulehdussolujen infiltraatiota (A6-1, HE tahra, 200 x) (A6-2, HE tahrata, 400 x). (B6) osoitti micrographs maksametastaaseista Control, tyypillisiä laajat maksakudosta tuhoa, tunkeutuvat syöpäsolut, tulehdussolujen infiltraatio, ja verenvuoto maksakudoksessa (B6-1, HE tahrata, 100 x) (B6-2, HE tahrata , 200 x).
perifeerisen veren profiilin ja suurten biokemia muutokset
ei ollut eroja perifeerisessä verisolujen d 2, d 6 ja d 14 joukossa 4 ryhmää, mutta valkosolujen ja verihiutaleiden olivat merkittävästi pieneni d 36 jälkeen systeemistä kemoterapiaa DOX (p
< 0,05). Ei ollut eroja maksan ja munuaisten toimintoja koko kokeen kesken 4 ryhmää. Mitä sydämen toiminnan parametrit, ei ollut eroja kreatiinikinaasitason ja kreatiinikinaasin mb isoentsyymin on d 2, d 6 ja d 14 joukossa 4 ryhmää, mutta kreatiinikinaasi mb isoentsyymin oli kasvoi merkittävästi d 36 jälkeen systeemistä kemoterapiaa DOX (p
< 0,05). Erityisen huomiota, 2 eläimet DOX lyhyillä OS 47 d ja 53 d oli poikkeuksellisen korkeampi seerumin kreatiinikinaasin mb isoentsyymin tasolla, 467,5 U /l ja 656,4 U /L, vastaavasti (p
< 0,05) (taulukko 3) .table 3 Veri rutiinikokeet ja biokemiallisia testitulokset 4 kaniinien ryhmässä [alue (mediaani)]
Ryhmä
D2
D6
D14

D36 *
n
Arvo
p
n
Arvo
p

n
Arvo
p
n
Arvo
s
punasoluja ( T /L) B Ohjaus
10
5,03-6,93 (6,26) B 0,849
10
5,08-7,76 (6,07) B 0,494
10
4,29 -6,32 (5,54)
0,382
0 -
0,203
HIPEC
10
5,13-7,58 (6,48)
10
4,66-7,15 (5,65 )
10
3,54-7,30 (5,68)
7
4,28-7,36 (5,28) B PDOX
10
4,17-7,16 (5,94)
10
4,97-6,49 (5,61)
10
4,38-5,82 (5,05)
10
4,46-6,03 (5,47)
DOX
10
5,03-6,84 (6,09)
10
5,03-6,70 (5,88)
10
3,65-6,36 (5,08) B 9
4,12-6,40 (4,94)
valkosolut (G /L)
Ohjaus
10
5,3-9,6 (8,6) B 0,785
10
4,5-14,1 (9,9) B 0,446
10
6,0-10,3 (7,8 )
0,601
0 -
0,013
HIPEC
10
4,4-12,3 (7,4)
10
4,5-12,7 (9,3) B 10
3,2-12,1 (10,7) B 7
6,9-13,7 (7,5) B PDOX
10
5,9-13,2 (8,2)
10
6,1-12,5 (8.8) B 10
4,6-14,4 (9,0)
10
4,9-11,1 (7,7)
DOX
10
3,6-10,5 (7,8)
10
4,7-12,2 (7,3)
10
4,6-12,5 (10,2) B 9
3,9-6,4 (5,3) B Verihiutaleet (G /L) B ohjaus
10
387-579 (480) B 0,494
10
317-836 (555) B 0,362
10
451-917 (657) B 0,601
0 -
0,009
HIPEC
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489) B-7
262-598 (451) B PDOX
10
382-592 (456)
10
395-856 (493) B 10
328-1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476)
10
363-878 (464)
10
390-939 (654) B-9
115-319 (244) B-alaniini transaminaasin (U /l) B Ohjaus
10
31-52 (38) B 0,463
10
34-54 (41) B 0,525
10
21-54 (37) B 0,245
0
-
0,838
HIPEC
10
24-47 (40) B-10
21-62 (35) B-10
31-66 (42)
7
30-59 (48) B PDOX
10
28-52 (40) B-10
24-59 (37) B-10
32 -55 (45) B-9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35) B-10
30-59 (39)
10
34-61 (48) B-8
26-76 (42) B aspartaattitransaminaasi (U /l) B Ohjaus
10
19-54 (35 )
0,895
10
30-52 (36) B 0,525
10
37-58 (43) B 0,309
0 -
0,473
HIPEC
10
23-59 (38) B-10
11-55 (35) B-10
27-78 (34) B-7
25-50 (36) B PDOX
10
22-47 (37) B-10
17-49 (39) B-10
27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37) B-10
24-49 (30) B-10
23-86 (36) B-8
31-60 (39) B Veren ureatyppi (mmol /l) B Ohjaus
10
4,40-5,80 (4,80) B 0.206
10
4,51-10,44 (4,81) B 0,525
10
3,29-9,82 (6,32)
0,185
0 -
0,473
HIPEC
10
3,70-8,14 (5,10)
10
3,57-11,04 (5,35)
10
4,32-9,29 (7,50) B 7
5,25-8,67 (6.38) B PDOX
10
3,58-7,66 (5,82)
10
3,32-11,58 (6,68)
10
6,52-13,58 (7,63) B 9
4,71-8,05 (5,35)
DOX
10
1,76-7,90 (5,01)
10
3,32-10,00 (5,59)
10
1,76-10,53 ( 7,80) B 8
4,50-9,26 (6,27) B Kreatiniini (mikromol /l) B Ohjaus
10
45,05-64,50 (60.50) B 0,736
10
22,10-73,20 (55,00)
0,736
10
41,40-71,40 (50,25) B 0,083
0 -
0,838
HIPEC
10
43,30-80,65 (57.35)
10
22,20-81,55 (46,97)
10
31,10-83,37 (52,96) B 7
59,87-76,84 (66.51) B PDOX
10
42,80-75,80 (61.87)
10
22,13-86,25 (69,65)
10
45,30-75,80 (66,25) B 9
44,38-79,56 (62.47)
DOX
10
22,30-69,30 (55.81)
10
27,28-75,90 (63,45)
10
42,38-73,76 (69,37) B 8
47,72-78,64 (59.50) B Kreatiinikinaasimääritys (U /l) B Ohjaus
10
74,3-205,6 (131,6) B 0,864
10
81,3-247,8 (147,9) B 0,878
10
71,4-182,1 (138,9)
0,968
0 -
0,473
HIPEC
10
78,8-259,2 (137,8)
10
66,8-248,9 (145.3)
10
63,4-225,2 (141,8) B 7
98,3-265,1 (153,0) B PDOX
10
87,9-194,2 (139,4)
10
69,9-256,1 (144,4)
10
70,0-240,8 (130,6) B 9
109,2-251,5 (195,2)
DOX
10
98,3-256,1 (152,4)
10
56,4-250,2 (135,8)
10
80,5-261,2 (133,8) B 8
101.1- 407,6 (228,1) B Kreatiinikinaasimääritys mb isoentsyymi (U /l) B Ohjaus
10
73,0-162,5 (129,8) B 0,717
10
62,5-195,6 (127,2)
0,878
10
57,0-199,8 (119,8)
0,509
0 -
0,040
HIPEC
10
74,2-228,2 (137,3)
10
42,9-219,8 (129,7)
10
52,8-237,7 (146,5) B 7
50,2-188,1 (126,1) B PDOX
10
59,2-228,1 (133,9)
10
42,5-197,7 (133,2)
10
74,9-241,5 (158,2) B 9
58,9-209,8 (143,7) B DOX
10
94,3-207,7 (122,1)
10
53,9-202,3 (128,2)
10
94,3-238,6 (148,4)
8
106,2-656,5 (259,3 ) B * osa tiedoista ei ole käytettävissä, koska eläinten kuolemaan asetettuun aikaan.
By 2-puolinen nonparametric testi.
Valkosolut D 36, ryhmien väliseen vertailuun: p =
0,001, DOX vs. HIPEC; p =
1.000, PDOX vs. HIPEC; p =
0,005, PDOX vs. DOX; Verihiutaleet D 36, ryhmien väliseen vertailuun: p =
0,041, DOX vs. HIPEC; p =
0,637, PDOX vs. HIPEC; p =
0,070, PDOX vs. DOX; Kreatiinikinaasi mb isoentsyymin D 36, ryhmien väliseen vertailuun: p =
0,012, DOX vs. HIPEC; p =
0,593, PDOX vs. HIPEC; p =
0,131, PDOX vs. DOX.
luuydintoksisuuden kanssa vähentynyt selvästi valkosolujen (p
< 0,05) ja verihiutaleiden (p
< 0,05), sekä sydämen toksisuudet merkittävään kasvuun kreatiinikinaasiarvojen mb isoentsyymin (p
< 0,05) havaittiin d 36 jälkeen systeemistä kemoterapiaa DOX.
Tarkemmat tutkimukset sydänlihakseen toksisuuksia
Histopatologiset tutkimukset alla sekä kevyen mikroskoopilla ja transmissioelektronimikroskoopin löytynyt mitään sydänlihas toksisuudessa valvonnan, HIPEC ja PDOX, mutta merkittävä histopatologisia muutoksia sydänlihaksen havaittiin kaikissa eläimissä (100%, 10/10) kun DOX, kuten hyytyminen nekroosia sydänlihaksen syvä punainen petsattu solulimassa, ja karyopyknosis (kuva 6 C1, H1, P1, D1 mustat nuolet). Electron siirto micrographs osoittivat, että normaali sydänlihaksen runsaasti mitokondrioita pakattu noin normaalin tuman Control ja HIPEC, rikas normaali mutta hieman laajentuneet kristat mitokondrioita hajallaan normaalin tuman että PDOX, lähes poissa mitokondriot ympäri morfologisesti seniili ja rappeuttavat ydintä DOX. Lisäksi osittaista sydänlihaksen lyyttinen kuolion (keltainen nuoli) ja mitokondrioiden-pyknosis pois nucleus (punainen nuoli) olivat myös ilmeistä DOX. Täydellinen, selkeä ja jatkuva linjat normaalin intercalated levyjä valvontavaliokunnan, HIPEC ja PDOX, mutta hämärä, menettämistä ja katkonaista intercalated levyjä löytyivät DOX (valkoiset nuolet). Kuva 6 Kevyt micrographs ja elektroni siirto micrographs kanin sydänlihaksessa. Ylälevy (HE tahra, 400 x), rutiinien histopatologisten ominaisuudet kanin sydänlihaksessa at pitkittäisleikkauksen (insertit oikeassa yläkulmassa, sagittaalinen osa), jossa C1, H1 ja P1 osoittanut puhdas ja kirkas normaali sydänlihaksen kuituja hallitusti paneelit, mutta D1 osoittivat hyytyminen nekroosia sydänlihaksen syvä punainen värjätään solulimassa ja karyopyknosis sydänlihaksen. Lähi yläpaneeli (10,000 x), elektroni siirto micrographs sydänlihaksen keskittyen ominaisuuksia ytimet ja peri-ydin- mitokondrioita, joissa C2, H2 osoitti runsaasti mitokondrioita pakattu noin normaali tuma, P2 osoitti rikas mitokondrioita hajallaan normaali ydintä, mutta D2 osoitti lähes poissa mitokondriot ympäri morfologisesti seniili ja rappeuttavat nucleus (keltainen tähti osoittaa suurennettu tumassa johtuu turvotuksesta ja eksentrinen yhdistäminen heterochromatin, ja vihreät nuolet osoittavat näkyvään sisäänpäin supistuminen tumakalvoa). Lisäksi osittaista sydänlihaksen lyyttinen kuolion (keltainen nuoli) ja mitokondrioiden-pyknosis pois nucleus (punainen nuoli) oli ilmeistä myös DOX hoidetuilla eläimillä. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Epätavallinen osti mahalaukun pistorasiaan tukkeuma varhaislapsuudessa: tapaus report
• Onnistunut hoito ensisijaisen mahalaukun plasmasytooma- matkimalla hankala mahahaava käyttämällä deksametasonia suurina annoksina hoito: tapaus report