Syntese, identifisering og in vivo studier av tumor-målsøkende middel peptid doxorubicin (PDOX) for å behandle peritoneal karsinomatose av magekreft med tilsvarende effekt, men redusert toksisitet

Syntese, identifisering og in vivo studier av tumor-målsøkende middel peptid doxorubicin (PDOX) for å behandle peritoneal karsinomatose av magekreft med tilsvarende effekt, men redusert toksisitet
Abstract
Bakgrunn
Dette arbeidet forsøkte å syntetisere et cathepsin B ( CTSB) spaltbare tumor målretting prodrug peptid doxorubicin (PDOX) og studere in vivo effekt og toksisitet på en dyremodell av mage peritoneal karsinomatose (PC).
Metoder
PDOX ble syntetisert ved hjelp av doxorubicin (DOX) feste til en CTSB-spaltbar dipeptid Ac-Phe-Lys og en para-amino-benzyloksykarbonyl (PABC) spacer. PC-modellen ble etablert ved å injisere VX2 tumorceller inn i mage- sub-mucosa på 40 kaniner, som deretter ble randomisert inn i 4 grupper: Control (n = 10) uten behandling, HIPEC (n = 10) mottok cytoreduktiv kirurgi (CRS) pluss hyper intraperitoneal kjemoterapi (HIPEC), den PDOX (n = 10) og den DOX (n = 10) som mottar systemisk kjemoterapi med PDOX 50,0 mg /kg eller DOX 5.0 mg /kg, henholdsvis, etter CRS + HIPEC.
Resultater
median total overlevelse (OS) var 23,0 d (95% KI: 19,9 d - 26.1 d) i Control, 41,0 d (36,9 d - 45.1 d) i HIPEC, 65,0 d (44,1 d - 71,9 d) i PDOX, og 58,0 d (39,6 d - 54.4 d) i DOX. Sammenlignet med kontrollgruppen, ble OS forlenget med 70% i HIPEC (p
< 0,001) og ytterligere utvidet ved 40% i DOX (p
= 0,029) og med 58% i PDOX (p =
0,021), og PC alvorligheten var redusert i HIPEC og ytterligere redusert i PDOX og DOX. Dyr som får DOX behandling viste hematologisk toksisitet med markert reduksjon av hvite blodlegemer og blodplater, samt hjertetoksisitet med betydelige økninger i kreatin kinase mb isoenzymet, tydelig hjertemuskelen koagulering nekrose, betydelig atom degenerasjon, peri-kjerne mitokondriene sletting, mitokondriene-pyknosis, og unormale interkalerte plater. Men de toksiske effektene var ikke tydelig i PDOX.
Konklusjoner
PDOX er et nylig syntetisert svulst målretting prodrug av DOX. Sammenlignet med DOX, har PDOX lignende effekt, men redusert hematologiske og hjertetoksisitet i behandling av kanin modell av mage PC.
Nøkkelord
Peritoneal karsinomatose Magekreft Peptide doxorubicin cytoreduserende kirurgi hyper intraperitoneal kjemoterapi Bakgrunn
GC er en av de mest vanligste kreftformen i utviklingsland, hvor det rangerer andre i form av forekomsten og tredje i form av dødelighet blant den mannlige befolkningen, og rangerer fjerde i form av både forekomst og dødelighet blant den kvinnelige befolkningen, ifølge den nyeste globale statistikk [1, 2]. GC er også den tredje ledende årsak til kreft dødelighet i Kina [3], hvor over 70% av GC har allerede blitt klinisk avanserte ved tidspunktet for kirurgisk undersøkelse, er således kirurgisk reseksjon alene ikke lenger kurativ [4].
PC i GC har lenge vært ansett som en dødelig klinisk enhet. Det er definert som implantering av tumorceller i hele bukhulen, og karakteriseres ved nærværet av tumorknuter av forskjellige størrelser, antall og fordeling på den peritoneale overflaten, så vel som malign ascites, ofte resulterer i lokoregional sykelighet uten bredere systemiske metastaser. Pasienter med mage PC står overfor en forferdelig kamp utfallet, med en median overlevelse på ca 6 måneder [5].
Det finnes ingen standard behandling for mage PC. Aktuelle behandlinger for en slik PC er systemisk kjemoterapi, best støtte pleie og lindrende behandling. For å takle dette problemet, en ny behandlingsform som heter CRS pluss HIPEC har blitt utviklet i løpet av de siste 3 tiår, tar fordeler av kirurgi for å redusere synlige tumorbyrde, og regional hyper cellegift for å utrydde mikrometastaser [6]. Økende bevis tyder på at kombinasjonen av CRS og HIPEC kunne bringe overlevelsesgevinst for utvalgte pasienter med mage PC. I vår forrige eksperimentell studie [5], har vi også vist at CRS + HIPEC kan faktisk ta overlevelsesgevinst med akseptabel sikkerhet, for å underbygge denne kombinerte strategien for å behandle utvalgte pasienter med mage PC.
Under utviklingen av PC, GC cellene skiller ut enzymer for å legge til rette for kreftceller seeding og kolonisering på bukhinnen. CTSB er en av de viktigste enzymer i denne kritisk prosess, over-uttrykt i GC, så vel som andre kreft [7-9] og aktivt involvert i kreft invasjon [10-12]. På den annen side er det ekstremt lav uttrykt i normale celler og inaktive eller taper aktivitet så snart den er dispergert i vandige media fra celler [13]. Dermed CTSB har lenge vært ansett som en kandidat mål i kreftbehandling [14].
Det har blitt etablert i MAGIC rettssaken at antracyklin-inneholdt diett er en nyttig kjemoterapi for GC [15]. DOX er en typisk representant for antracykliner. Selv DOX er et viktig stoff i kjemoterapi, dets toksisitet er tydelig, for eksempel hjertetoksisitet og benmargsdepresjon. For å beholde den terapeutiske effekten samtidig redusere bivirkningene, Dubowchik et al [16-18] utviklet en smart prodrug av DOX, PDOX (figur 1). I denne modifiserte DOX, er Ac-Phe-Lys et dipeptid bestemt for CTSB, og PABC (para-aminobenzyloxycarbonyl) er en selv immolative spacer [16]. Prodrogen er inaktivt når det er lite CTSB aktivitet, slik som normale vev og perifert blod, og dermed unngår bivirkninger på normale vev. I løpet av kreft invasjon, aktiveres CTSB løpet uttrykt på den ytre membran av invaderende kreftceller [19, 20], som spalter Ac-Phe-Lys dipeptid ved Lys-PABC binding [16]. Da utsettes PABC spacer kan selvhydrolysere på deacylering [21] og gratis DOX molekyler er utgitt, noe som resulterer i direkte drap av de invaderende kreftceller [16]. Figur 1 PDOX struktur (vist i boksen), kjemisk syntese og handling mekanisme. PDOX ble med hell syntetisert i henhold til en 7-trinns kjemisk prosess. Dens kjemiske struktur er Ac-Phe-Lys-PABC-DOX-HCl (vist i ramme), og molekylformelen er C52H60ClN5O16. PDOX inneholder en CTSB-spaltbare dipeptid Ac-Phe-Lys (doble røde skråstreker) en PABC spacer (rød strek) og anti-kreft narkotika DOX. Når PDOX når CTSB-beriket området som invasjonen fronten av kreft, er Ac-Phe-Lys dipeptid spaltes av CTSB på Lys-PABC obligasjon, utsette PABC spacer som deretter hydrolyseres spontant (rød strek), slippe fri DOX på kreft invasjonen fronten. Dermed kunne PDOX utøve cytotoksisitet å invadere kreftceller samtidig beskytte normale celler fra overdreven legemiddeleksponering, en strategi kalt passiv målrettet terapi. CTSB. Cathepsin B.
I denne studien, syntetiserte vi PDOX og evaluerte effekt og sikkerhet av CRS + HIPEC med molekylær målrettet terapeutisk regime PDOX for målrettet behandling av kanin modell av mage PC
Resultater
Synthesis og identifisering av PDOX
PDOX ble med hell syntetisert i henhold til det som tidligere er rapportert 7-trinns kjemisk prosess (figur 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-DOX-HCl) var en rødt fast stoff pulver med molekylvekt på 1046,51 (MS: m /z beregnet for C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, funnet: 1046,50), kjemisk renhet på 99,1% (ved HPLC) , struktur av C 52H 60ClN 5O 16 (av begge H 1-NMR og C 13-NMR) (figur 2) og smeltepunkt på 180 ° C (dekomponering), som er stabil ved -5 ° C til 0 ° C i 36-54 måneder, omgivelsestemperatur i 24 måneder, løses i vann, delvis løses i metanol og etanol. PDOX anvendt i denne studien ble lagret i mørke, tørt område ved 4 ° C. Figur 2 Struktur identifikasjoner bekreftet ved H en -NMR (A) og C 13 -NMR (B).
PC-modell konstruksjon og histopatologiske egenskaper
Rabbit modell av mage PC ble etablert i alle dyr (100%, 40/40). På d 8 etter tumorceller inokulering, små, harde og gjennomsiktige tumorknuter utviklet på større omentum, og typisk ulcerøs kreft ca. 0,5-1,0 cm i diameter dannet på antrum av magen. Ingen ascites ble observert. Ingen åpenbare PC ble funnet i andre regioner. Det var ingen forskjeller i PC alvorlighetsgrad blant alle kaniner. Dette kan være tilsvarende klinisk stadium I PC ved Gilly kriterier [22] (figur 3A).
Alle undersøkt vevsprøver viste omfattende invasiv vekst og vev ødeleggelse. Svulster, på den større krumning av gastrisk antrum, trengt inn i slimhinnen under dannelse av magesår. Histopatologisk undersøkelse viste tumor reir trengende hele magesekken, med typiske invasjon inn i muskelen lag og mage kjertler (Figur 3B). Tumorcellene er rund, oval eller atypisk morfologi med mange patologiske mitotiske figurer. Det var også påfallende infiltrasjon av lymfocytter, plasmaceller og andre betennelsesceller (Figur 3C). Apoptotiske og nekrotiske tumorceller ble observert i det sentrale område av tumorknuter (figur 3D). Typisk PC presentert som tumornoduler på overflaten av omentum (figur 3E) og intraperitoneal lymfeknutemetastaser ble også observert (figur 3F).
Typisk ulcerøs kreft med PC ble observert i post mortem patologiske undersøkelser av kaninene i Control. Veggen i magesekken ble helt invadert av tumoren for å skape kreft sår omsluttet av konfluente knuter på større omentum, danner en stor svulst-blokk. Bukveggen og membranen ble helt invadert av tumoren. Mange tumorknuter dannet på tarmveggen, mesenteriet og retroperitoneum. Blodig ascites kan være mer enn 100 ml. Alle funksjonene er lik clinicopathologic kjennetegn ved gastric PC i pasienter (Figur 3G). Figur 3 Karakteristikken av kanin modell av mage PC og HE farget mikrografer. (A) Et bilde av den tidlige kaninmodell av mave PC hvor lett synlige tumorknuter spredt på peritoneum og den store kurvatur av magen; (B) bildene av ulcerøs GC; (C &D) HE farget bilde under mikroskop viser invasive veksten av tumorcelle reir infiltrerer den gastriske vegg (panel C, 400 x) og nekrotiske tumorceller i området av utilstrekkelig blodtilførsel (panel D, 400 x); (E) tumorknuter på overflaten av det omentum (200 x); (F) intraperitoneale lymfeknutemetastaser (200 x); (G) post mortem patologiske undersøkelser av en kanin.
Survival
Animal ble observert å ta opp OS. To lange gjenlevende kaniner (en i PDOX og en annen i DOX, stue mer enn 100 d) ble avlivet på 100. dagen etter en overdose injeksjon av 2% pentobarbital natrium. Median (95% konfidensintervall, KI) OS var 23,0 d (19,9 til 26,1 d) i Control, 41,0 d (36,9 til 45,1 d) i HIPEC, 65,0 d (44,1 til 71,9 d) i PDOX og 58,0 d (39,6 til 54,4 d) i DOX. Sammenlignet med kontroll ble OS forlenget med minst 70% i HIPEC (p
< 0,001, log rank test). Sammenlignet med HIPEC ble OS ytterligere utvidet med 40% i DOX (p =
0,029, log rank test) og med 58% i PDOX (p =
0,021, log rank test) (Figur 4A ). Figur 4 In vivo effekter av PDOX på kanin PC-modell. (A) Kaplan-Meier overlevelseskurver for kontroll, HIPEC, PDOX og DOX; (B) Kroppsvekt endringer i disse gruppene.
Tumor byrde på overlevelse endepunkt
Ved studieslutt, den tumorbelastning i kontroll var tyngste, med tumorvekt (137,51 ± 16,09) g, tumorbærende ratio (tumor vekt til kroppsvekt) av (7,88 ± 0,85)%, blodig ascites av (65,50 ± 33,45) ml, og EPCI score på (9,50 ± 2,17). Sammenlignet med kontroll, hadde HIPEC betydelig redusert tumorvekt (76,50 ± 11,41) g (p = 0,007
) og tumorbærende forholdet (3,94 ± 0,54)% (p =
0,001), men ikke EPCI- stillingen (9,50 ± 2,17)% (p = 0,420
) og blodig ascites [(29,16 ± 15,30) ml, p = 0,085
]. Sammenlignet med HIPEC, ble PC alvorlighetsgraden ytterligere redusert i både PDOX og DOX, med EPCI score (6,40 ± 2,07, p =
0.020 i både PDOX og DOX vs. HIPEC) og blodig ascites (0,00 ml, p
< 0,001 i PDOX og DOX vs. HIPEC); mens det var ingen signifikante forskjeller i tumorvekt [(65,30 ± 14,55) g, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (48,74 ± 16,31) g, p =
0.180, DOX vs. HIPEC)] og tumorbærende ratio [(2.91 ± 0.69)%, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (2,13 ± 0,78)%, p =
0.180, DOX vs. HIPEC]. Det var ingen signifikante forskjeller i tumorbelastning mellom PDOX og DOX (tabell 1) .table en EPCI poengsum på overlevelse endepunkt i 4 grupper av kaniner [rekkevidde (median)]
Kontroll (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
EPCI score i ulike regioner
Region I
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Region II
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
Region III
1 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (1)
Region IV
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Ascites (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0,0 ~ 0,0 (0,0)
0,0 ~ 0,0 (0,0)
EPCI score§
7 ~ 13 (11)
5 ~ 12 (9)
3 ~ 9 (6)
3 ~ 9 (6)
* Ascites: p
= 0,323, HIPEC vs. kontroll; p
< 0.001, PDOX vs. HIPEC; p
< . 0.001, DOX vs. HIPEC
§The EPCI poengsum: p
= 0,073, HIPEC vs. kontroll; p
= 0,020, PDOX vs. HIPEC; p
= 0,020, DOX vs. HIPEC; p
= 0,474, ble PDOX vs. DOX.
Kroppsvekt endringer
kroppsvekten til hvert dyr registrert hver 4 d. Ingen signifikante forskjeller ble funnet i opprinnelige kroppsvekt på 4 grupper før behandlingen. Perioperative kroppsvekten gått ned i alle grupper på grunn av den faste over natten. I Control, kroppsvekten gjenopprettes når matinntaket ble gjenopptatt, men igjen redusert gradvis til studiet endepunkt. I de 3 behandlingsgruppene, redusert postoperativ kroppsvekt betraktelig etter modell konstruksjon og til det laveste 4 d etter CRS + HIPEC, og bodde da på et lavt nivå i løpet av den postoperative fasen før kjemoterapi var gjennomført. Kroppsvekt begynte å øke ved d 44 i HIPEC og d 56 i både PDOX og DOX, og gradvis økes til et høyere nivå, som ble knyttet til både tumorvekst av de levende tumorbærende kanin og død av svikt kaniner med mindre kroppsvekt. Deretter, redusert kroppsvekt gradvis igjen før studieslutt i både PDOX og DOX (figur 4B).
Post mortem patologiske undersøkelser
Ved tidspunktet for dyr død, detaljert informasjon om postmortem patologiske undersøkelser ble oppført i tabell 2 .
i tillegg til systematiske undersøkelser av alle anatomiske områder for mulige kreftmetastaser, ble det lagt særlig vekt på lunge- og levermetastaser. Som vist i figur 5, i Control, ble det gjennomført omfattende levermetastaser ble observert i 8 dyr, men ingen lungemetastaser ble påvist i alle dyr, på grunn av de meget aggressive vekst oppførsel av tumoren førte til kort OS i denne gruppe av dyr (figur 5 A2, B2). I HIPEC, som dyr levde mye lenger på grunn av CRS + HIPEC, ble færre levermetastaser observert i 4 dyr, men betydelig mye mer lungemetastaser ble observert i 7 dyr (figur 5 A3, B3). I PDOX og DOX, dyr utviklet mye færre metastaser i både lever og lunger, selv om OS ble ytterligere forbedret bemerkelsesverdig, fordi dyrene fikk ikke bare CRS + HIPEC å kontrollere lokale regionale metastaser, men også systemisk kjemoterapi til å kontrollere hematogene metastaser og lymfatiske metastaser (Figur 5 A4, B4, A5, B5) .table 2 Resultater av post mortem patologisk undersøkelse i 4 grupper, uttrykt som% av kaniner
Control (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
p en
p 2

p 3
p 4
Ulcerøs GC
100,0
100,0
100,0
100,0
NS
NS
NS
NS
snitt metastaser
100,0
30,0
30,0
20,0
0,001
NS
NS
NS
lungemetastaser
0,0
70.0
30,0
30,0
0,001
NS
NS
NS
brystveggen metastaser
0,0
20,0
10,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Pleuraeffusjon
10,0
70,0
30,0
30,0
0,008
NS
NS
NS
Virchow lymfeknuter metastaser
30,0
70,0
60,0
40,0
NS
NS
NS
NS
posen metastaser
0,0
20,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Cancerous membran
100,0
70,0
20,0
20,0
NS
0,028
0,028
NS
Greater omentum kake
100,0
80,0
40,0
50,0
NS
NS
NS
NS
levermetastaser
80,0
40,0
30,0
30,0
NS
NS
NS
NS
Miltmetastaser
0,0
0.0
20,0
0,0
NS
NS
NS
NS
retroperitoneum metastaser
100,0
60,0
60,0
50,0
0,029
NS
NS
NS
Venstre nyremetastaser
0,0
10,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Høyre nyremetastaser
0,0
0,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Nyre kapsel invasjon
100,0
50,0
0,0
20,0
0,012
0,012
NS
NS
tarmveggen seeding
100,0
80,0
20,0
10,0
NS
0,009
0,002
NS
mesentery seeding
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028
0,002
NS
bukveggen kreft
100,0
60,0
30,0
0,0
0,029
NS
0,004
NS
bekken seeding
100,0
50,0
30,0
10,0
0,170
NS
NS
NS
blære ruptur
0,0
0,0
20,0
10,0
NS
NS
NS
NS
Urin retensjon
50,0
50,0
30,0
10,0
NS
NS
NS
NS
By 2-sidig chi-square (χ
2) test. p
1, HIPEC vs. kontroll; p
2, PDOX vs. HIPEC; p
3, DOX vs. HIPEC; S.
4, PDOX vs. DOX
NS. Ingen betydning
sammenlignet med kontrollgruppen, ble PC alvorlighetsgraden betydelig redusert i snitt metastaser, lungemetastaser, pleuravæske, retroperitoneale metastaser, nyrekapslen invasjon, mage vegg kreft og bekken seeding i HIPEC. Sammenlignet med HIPEC, ble PC alvorlighetsgraden betydelig redusert i kreftgulvet, nyrekapslen invasjon, tarmveggen seeding og mesentery seeding i PDOX, og i kreftgulvet, tarmveggen seeding, mesenteriet seeding og bukveggen kreft i DOX. Det var ingen statistisk signifikante forskjeller mellom de PDOX og DOX i systemiske metastaser.
Figur 5 lungemetastaser (panel A) og levermetastaser (panel B) i denne studien. (A1) (B1) viste eksakte antall lunge- og levermetastaser i hver kanin av de 4 grupper, henholdsvis; (A2 til A5) viste representative lungemetastaser i kontroll, HIPEC, den PDOX og DOX, henholdsvis; (B2 til B5) viste representative levermetastaser i kontroll, HIPEC, den PDOX og DOX, henholdsvis; (A6) viste mikrografer av lungemetastaser i HIPEC, preget av kreft invasjon, lungevevet undertrykkelse, intra svulst blodpropp dannelse og iøynefallende betennelsesceller infiltrasjon (A6-1, HE flekken, 200 ×) (A6-2, HE flekken, 400 ×). (B6) viste mikrografer av levermetastaser i kontroll, preget av omfattende levervev ødeleggelse, invadere kreftceller, inflammatorisk celler infiltrasjon og blødning i levervev (B6-1, HE beis, 100 ×) (B6-2, HE flekken 200 ×).
perifere blodprofil og store biokjemi endringer
Det var ingen forskjell i perifere blodceller på d 2, d6 og d 14 blant de 4 gruppene, men de hvite blodceller og blodplater var signifikant redusert på d 36 etter systemisk kjemoterapi i DOX (p
< 0,05). Det var ingen forskjeller i lever- og nyrefunksjoner hele eksperimentet blant de 4 gruppene. I form av hjertefunksjon parametre, var det ingen forskjeller i kreatin kinase og kreatin kinase mb isoenzymet på d 2, d6 og d 14 blant de 4 gruppene, men kreatin kinase mb isoenzymet ble betydelig økt på d 36 etter systemisk kjemoterapi i DOX (p
< 0,05). Av spesiell oppmerksomhet, 2 dyr i DOX med kort OS på 47 d og 53 d hadde eksepsjonelt høyere serum kreatin kinase mb isoenzym nivåer, 467,5 U /L og 656,4 U /L, henholdsvis (p
< 0,05) (Tabell 3) .table 3 Blood rutinemessige tester og biokjemiske testresultater i 4 grupper av kaniner [rekkevidde (median)]
Gruppe
D2
D6
D14

D36 *
n
Verdi
p
n
Verdi
p

n
Verdi
p
n
Verdi
p product: Red blodceller ( T /L)
Kontroll
10
5,03 til 6,93 (6,26)
0,849
10
5,08 til 7,76 (6,07)
0,494
10
4,29 -6,32 (5,54)
0,382
0 -
0,203
HIPEC
10
5,13 til 7,58 (6,48)
10
4,66 til 7,15 (5,65 )
10
3,54 til 7,30 (5,68)
7
4,28 til 7,36 (5,28)
PDOX
10
04.17 til 07.16 (5,94)
10
4,97 til 6,49 (5,61)
10
4,38 til 5,82 (5,05)
10
4,46 til 6,03 (5,47)
DOX
10
5,03 til 6,84 (6,09)
10
5,03 til 6,70 (5,88)
10
3,65 til 6,36 (5,08)
9
4,12 til 6,40 (4,94)
Hvite blodceller (G /L)
Kontroll
10
5.3 til 9.6 (8.6)
0,785
10
4,5 til 14,1 (9,9)
0,446
10
6,0 til 10,3 (7,8 )
0,601
0 -
0,013
HIPEC
10
04.04 til 12.03 (7.4)
10
04.05 til 12.07 (9.3)
10
03.02 til 12.01 (10,7)
7
6,9 til 13,7 (7,5)
PDOX
10
5,9 til 13,2 (8,2)
10
06.01 til 12.05 (8.8)
10
4,6 til 14,4 (9,0)
10
04.09 til 11.01 (7.7)
DOX
10
03.06 til 10.05 (7.8)
10
04.07 til 12.02 (7.3)
10
04.06 til 12.05 (10,2)
9
3.9 til 6.4 (5.3)
Blodplater (G /L)
kontroll
10
387-579 (480)
0,494
10
317-836 (555)
0,362
10
451-917 (657)
0,601
0 -
0,009
HIPEC
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489)
7
262-598 (451)
PDOX
10
382-592 (456)
10
395-856 (493)
10
328-1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476)
10
363-878 (464)
10
390-939 (654)
9
115-319 (244)
alanin transaminase (U /L)
Kontroll
10
31-52 (38)
0,463
10
34-54 (41)
0,525
10
21-54 (37)
0,245
0
-
0,838
HIPEC
10
24-47 (40)
10
21-62 (35)
10
31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10
28-52 (40)
10
24-59 (37)
10
32 -55 (45)
9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35)
10
30-59 (39)
10
34-61 (48)
8
26-76 (42)
aspartattransaminase (U /L)
Kontroll
10
19-54 (35 )
0,895
10
30-52 (36)
0,525
10
37-58 (43)
0,309
0 -
0,473
HIPEC
10
23-59 (38)
10
11-55 (35)
10
27-78 (34)
7
25-50 (36)
PDOX
10
22-47 (37)
10
17-49 (39)
10
27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37)
10
24-49 (30)
10
23-86 (36)
8
31-60 (39)
Blood urea nitrogen (mmol /L)
Kontroll
10
4,40 til 5,80 (4,80)
0,206
10
4,51 til 10,44 (4,81)
0,525
10
3,29 til 9,82 (6,32)
0,185
0 -
0,473
HIPEC
10
3,70 til 8,14 (5,10)
10
3,57 til 11,04 (5,35)
10
4,32 til 9,29 (7,50)
7
5,25 til 8,67 (6.38)
PDOX
10
3,58 til 7,66 (5,82)
10
3,32 til 11,58 (6,68)
10
6,52 til 13,58 (7,63)
9
4,71 til 8,05 (5,35)
DOX
10
1,76 til 7,90 (5,01)
10
3,32 til 10,00 (5,59)
10
1,76 til 10,53 ( 7.80)
8
4,50 til 9,26 (6,27)
Kreatinin (mikromol /L)
Kontroll
10
45,05 til 64,50 (60,50)
0,736
10
22,10 til 73,20 (55,00)
0,736
10
41,40 til 71,40 (50,25)
0,083
0 -
0,838
HIPEC
10
43,30 til 80,65 (57,35)
10
22,20 til 81,55 (46,97)
10
31,10 til 83,37 (52,96)
7
59,87 til 76,84 (66,51)
PDOX
10
42,80 til 75,80 (61,87)
10
22,13 til 86,25 (69,65)
10
45,30 til 75,80 (66,25)
9
44,38 til 79,56 (62,47)
DOX
10
22,30 til 69,30 (55,81)
10
27,28 til 75,90 (63,45)
10
42,38 til 73,76 (69,37)
8
47,72 til 78,64 (59,50)
kreatin kinase (U /L)
Kontroll
10
74,3 til 205,6 (131,6)
0,864
10
81,3 til 247,8 (147,9)
0,878
10
71,4 til 182,1 (138,9)
0,968
0 -
0,473
HIPEC
10
78,8 til 259,2 (137,8)
10
66,8 til 248,9 (145,3)
10
63,4 til 225,2 (141,8)
7
98,3 til 265,1 (153,0)
PDOX
10
87,9 til 194,2 (139,4)
10
69,9 til 256,1 (144,4)
10
70,0 til 240,8 (130,6)
9
109,2 til 251,5 (195,2)
DOX
10
98,3 til 256,1 (152,4)
10
56,4 til 250,2 (135,8)
10
80,5 til 261,2 (133,8)
8
101.1- 407,6 (228,1)
kreatin kinase mb isoenzym (U /L)
Kontroll
10
73,0 til 162,5 (129,8)
0,717
10
62,5 til 195,6 (127,2)
0,878
10
57,0 til 199,8 (119,8)
0,509
0 -
0,040
HIPEC
10
74,2 til 228,2 (137,3)
10
42,9 til 219,8 (129,7)
10
52,8 til 237,7 (146,5)
7
50,2 til 188,1 (126,1)
PDOX
10
59,2 til 228,1 (133,9)
10
42,5 til 197,7 (133,2)
10
74,9 til 241,5 (158,2)
9
58,9 til 209,8 (143,7)
DOX
10
94,3 til 207,7 (122,1)
10
53,9 til 202,3 (128,2)
10
94,3 til 238,6 (148,4)
8
106,2 til 656,5 (259,3 ) product: * Deler av data er ikke tilgjengelig på grunn av dyr død på det angitte tidspunktet
ved 2-sidig nonparametric test
Hvite blodlegemer på D 36, sammenligning mellom grupper:.. p =
0.001, DOX vs. HIPEC; p =
1.000, PDOX vs. HIPEC; p =
0.005, PDOX vs. DOX; Blodplater på D 36, sammenligning mellom grupper: p =
0,041, DOX vs. HIPEC; p =
0,637, PDOX vs. HIPEC; p =
0.070, PDOX vs. DOX; Kreatin kinase mb isoenzymet på D 36, sammenligning mellom grupper: p =
0,012, DOX vs. HIPEC; p =
0,593, PDOX vs. HIPEC; . P =
0.131, PDOX vs. DOX
hematologisk toksisitet med markert reduksjon i hvite blodceller (p
< 0,05) og blodplater (p
< 0,05), samt hjertetoksisitet med betydelige økninger i kreatin kinase mb isoenzymet (p
< 0,05). ble observert på d 36 etter systemisk kjemoterapi i DOX
detaljerte studier på myokard toksisitet
histopatologiske undersøkelser i henhold til både lysmikroskop og transmisjonselektronmikroskop fant ingen myokard toksisitet i kontroll, HIPEC og PDOX, men signifikante histopatologiske forandringer i hjertemuskelen ble funnet i alle dyr (100%, 10/10) i DOX, inkludert koagulering nekrose av hjertemuskelen med dyp rød farget cytoplasma, og den karyopyknosis (Figur 6 C1, H1, P1, D1 svarte piler). Elektron overføring mikrografer viste at normal hjertemuskelen med rikelig mitokondrier pakket rundt normal kjernen i kontroll og HIPEC, rike normalt, men med litt utvidede cristae mitokondriene spredt rundt normal kjernen i PDOX, nesten fraværende mitokondrier rundt morfologisk senil og degenerative kjernen i DOX. I tillegg delvis myokard-lytisk nekrose (gul pil) og mitokondrier-pyknosis bort fra kjernen (rød pil) var også tydelig i DOX. Komplette, klare og sammenhengende linjer med normal interkalerte plater i kontroll, HIPEC og PDOX, men obskure, miste og usammenhengende interkalerte plater ble funnet i DOX (hvite piler). Figur 6 Lys mikrografer og elektronoverføringsmikrografer av kanin myokard. Topplate (HE flekken, 400 ×), rutinemessige histopatologiske trekk kanin hjertemuskelen på lengdesnitt (innstikk i øverste høyre hjørne, sagittal seksjon), hvor C1, H1 og P1 demonstrert rene og klare normale hjerteinfarkt fibre i ordnede rekker, men D1 viste koagulering nekrose av hjertemuskelen med dyp rød farget cytoplasma og karyopyknosis av myokard. Midt øvre panel (10000 ×), elektronoverføringsmikrografer av hjertemuskelen med fokus på funksjonene i kjerner og peri-atom mitokondriene, hvor C2, H2 viste rikelig mitokondrier pakket rundt normal cellekjernen, viste P2 rike mitokondriene spredt rundt normal cellekjernen, men D2 viste nesten fraværende mitokondrier rundt morfologisk senil og degenerative nucleus (gul stjerne viser forstørret kjerne på grunn av hevelse og den eksentriske aggregering av heterochromatin og grønne piler som viser påfallende innover sammentrekning av kjernemembranen). I tillegg delvis myokard-lytisk nekrose (gul pil) og mitokondrier-pyknosis bort fra kjernen (rød pil) var også tydelig i DOX behandlede dyr. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Uvanlig ervervet mage utsalgsstedet hindringer i spedbarnsalder: en sak report
• Vellykket behandling av en primær mage plasmacytoma ligne vanskelige magesår ved hjelp av høy-dose deksametason terapi: en kasuistikk