Synthesis, identificatie en in vivo studies van tumor richtend middel-peptide doxorubicine (PDOX) behandeling peritoneale carcinomatose maagkanker met gelijke werkzaamheid maar verminderde toxicity

synthese, identificatie en in vivo studies van tumor richtend middel-peptide doxorubicine (PDOX) behandeling peritoneale carcinomatosa van maagkanker met een vergelijkbare werkzaamheid maar verminderde toxiciteit
Abstracte achtergrond
Deze werkzaamheden gericht op een cathepsine B (CTSB) splitsbare-tumor targeting prodrug peptide doxorubicine (PDOX) synthetiseren en de studie van de in vivo werkzaamheid en toxiciteiten op een diermodel van gastrische peritoneale metastasen (PC).
Methods
PDOX werd gesynthetiseerd met behulp doxorubicine (DOX) verbonden aan een CTSB afsplitsbare dipeptide Ac-Phe-Lys en een para-amino-benzyloxycarbonyl (PABC) spacer. PC model werd vastgesteld door het injecteren VX2 tumorcellen in de maag submucosa van 40 konijnen, die vervolgens werden willekeurig verdeeld in 4 groepen: controle (n = 10) zonder behandeling, de HIPEC (n = 10) die cytoreductieve chirurgie (CRS) plus hyperthermische intraperitoneale chemotherapie (HIPEC), de PDOX (n = 10) en DOX (n = 10) die met systemische chemotherapie met PDOX 50,0 mg /kg DOX of 5,0 mg /kg, respectievelijk, na CRS + HIPEC.
Results
de mediane totale overleving (OS) waren 23,0 d (95% CI: 19,9 d - 26,1 d) in de controlegroep, 41,0 d (36,9 d - 45,1 d) in de HIPEC, 65,0 d (44,1 d - 71,9 d) in de PDOX en 58,0 d (d 39,6 - 54,4 d) in DOX. In vergelijking met de controle, werd het OS uitgebreid met 70% in de HIPEC (p Restaurant < 0,001) en verder uitgebreid met 40% in de DOX (p
= 0,029), en met 58% in de PDOX (p =
0,021) en de PC ernst was verminderd in de HIPEC en verder daalde in het PDOX en DOX. Dieren die DOX behandeling vertoonden hematologische toxiciteit met een duidelijke vermindering van de witte bloedcellen en bloedplaatjes, evenals cardiale toxiciteit met een aanzienlijke stijging van creatine kinase mb iso-enzym, blijkt myocard coagulatie necrose aanzienlijke nucleaire degeneratie, peri-kern mitochondriën deletie, mitochondria-pyknose, en abnormale geïntercaleerde discs. Maar deze toxiciteiten waren niet duidelijk in de PDOX.
Conclusies
PDOX is een nieuw gesynthetiseerde-tumor targeting prodrug van DOX. Vergeleken met DOX, PDOX heeft vergelijkbare werkzaamheid maar verminderde hematologische en cardiale toxiciteit bij de behandeling van maag konijnenmodel PC.
Sleutelwoorden
peritoneale metastasen Maagkanker Peptide doxorubicine Cytoreductieve chirurgie Hypertherme intraperitoneale chemotherapie Achtergrond
GC is een van de meest voorkomende kwaadaardige tumoren in ontwikkelingslanden, waar het op de tweede plaats in termen van incidentie en de derde in termen van sterfte onder de mannelijke bevolking, en op de vierde plaats in termen van zowel de incidentie en sterfte onder de vrouwelijke bevolking, volgens de meest recente wereldwijde statistieken [1, 2]. GC is ook de derde hoofdoorzaak van sterfte bij China [3], waar meer dan 70% van GC reeds klinisch geworden bevorderd door de tijd van chirurgisch onderzoek, waardoor chirurgische resectie alleen niet meer curatief [4].
PC GC is lang beschouwd als een fatale klinische entiteit. Het wordt gedefinieerd als de implantatie van tumorcellen gehele peritoneale holte en gekenmerkt door de aanwezigheid van tumoren van verschillende grootte, aantal en distributie op het peritoneale oppervlak als maligne ascites, vaak resulterend in locoregionale ziekte zonder bredere systemische metastasen. Patiënten met maag-PC worden geconfronteerd met een somber resultaat, met een mediane overleving van ongeveer 6 maanden [5].
Er is geen standaard behandeling voor maag-PC. Huidige behandelingen voor dergelijke PC zijn systemische chemotherapie, beste ondersteuning zorg en palliatieve therapie. Om dit probleem aan te pakken, een nieuwe behandelingsmethode genoemd CRS plus HIPEC is ontwikkeld over de afgelopen decennia 3, waarbij de voordelen van de operatie zichtbaar tumorlast en regionale hyperthermische chemotherapie verminderen micrometastasen roeien [6]. Steeds meer bewijs heeft gesuggereerd dat de combinatie van CRS en HIPEC overlevingsvoordeel zou kunnen brengen voor de geselecteerde patiënten met een maag-PC. In onze vorige experimentele studie [5], hebben we ook bewezen dat CRS + HIPEC inderdaad zou kunnen brengen overlevingsvoordeel met aanvaardbare veiligheid, het bewijs om deze gecombineerde strategie om de geselecteerde patiënten met maag PC behandelen ondersteunen.
Tijdens de ontwikkeling van de PC, GC cellen scheiden enzymen kankercellen vergemakkelijken zaaien en kolonisatie op het buikvlies. CTSB is een van de belangrijkste enzymen in dit kritieke proces overexpressie gebracht in GC en andere kankers [7-9] en actief betrokken zijn bij kankerinvasie [10-12]. Anderzijds is het zeer lage expressie in normale cellen en inactieve of activiteit verliest zodra gedispergeerd in waterige media verwijderd van cellen [13]. Zo CTSB is lang beschouwd als kandidaat doelwit bij kankertherapie [14].
Vastgesteld is in de MAGIC proef die de anthracycline bevatte regime is een nuttig chemotherapie voor GC [15]. DOX is een typische vertegenwoordiger van anthracyclinen. Hoewel DOX is een belangrijk middel in de chemotherapie, de toxiciteit zijn evident, zoals cardiale toxiciteit en beenmergsuppressie. Om het therapeutisch effect te behouden terwijl het verminderen van de bijwerkingen, Dubowchik et al [16-18] ontwierp een slimme prodrug van DOX, PDOX (figuur 1). In deze gewijzigde DOX, Ac-Phe-Lys is een dipeptide specifiek voor CTSB en PABC (para-aminobenzyloxycarbonyl) is een zelf-immolative spacer [16]. De prodrug inactief wanneer er weinig CTSB activiteit, zoals normale weefsels en perifeer bloed, dus het vermijden van neveneffecten op normaal weefsel. Tijdens kankerinvasie wordt geactiveerd CTSB overexpressie gebracht op het uitwendige membraan van de binnendringende kankercellen [19, 20], die splitst de Ac-Phe-Lys dipeptide op Lys-PABC binding [16]. Dan de blootgestelde PABC spacer kan zelf hydrolyseren bij deacylering [21] en DOX vrije moleculen vrijkomen en directe doding van de binnendringende kankercellen [16]. Figuur 1 PDOX structuur (in de doos), chemische synthese en het werkingsmechanisme. PDOX succes gesynthetiseerd volgens de stappen 7-chemisch proces. De chemische structuur Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCl (in de doos) en de moleculaire formule is C52H60ClN5O16. PDOX bevat een CTSB-splitsbaar dipeptide Ac-Phe-Lys (dubbele rode slashes) een PABC spacer (rode streep) en anti-kanker medicijn DOX. Wanneer PDOX bereikt CTSB verrijkte gebied als de invasie voor kanker, is het Ac-Phe-Lys dipeptide gesplitst door CTSB de Lys-PABC binding, waardoor de PABC afstandhouder die vervolgens spontaan (rood slash) gehydrolyseerd, het vrijgeven vrij DOX de kanker invasiefront. Zo PDOX kon cytotoxiciteit uit te oefenen om een ​​invasie van kankercellen terwijl de bescherming van normale cellen tegen overmatige blootstelling aan het geneesmiddel, een strategie genaamd passieve gerichte therapie. CTSB:. Cathepsine B.
In deze studie hebben we gesynthetiseerd de PDOX en evalueerde de werkzaamheid en veiligheid van CRS + HIPEC met moleculaire gerichte therapeutische regime PDOX voor gerichte behandeling van konijn model van de maag PC
Resultaten
Synthesis en identificatie van PDOX
PDOX succesvol gesynthetiseerd volgens de eerder gerapporteerde 7 stappen chemisch proces (figuur 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-DOX-HCl) werd een rode vaste stof poeder met een molecuulgewicht van 1046,51 (MS: m /z berekend voor C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, gevonden: 1046,50), chemische zuiverheid van 99,1% (volgens HPLC) , structuur C 52H 60ClN 5O 16 (op beide H 1-NMR en C 13-NMR) (figuur 2) en een smeltpunt van 180 ° C (ontleding), die stabiel is bij -5 ° C tot 0 ° C gedurende 36-54 maanden, omgevingstemperatuur gedurende 24 maanden, oplosbaar in water, gedeeltelijk oplosbaar in methanol en ethanol. PDOX gebruikt in deze studie werd in het donker bewaard, droge plaats bij 4 ° C. Figuur 2 Structuur identificaties bevestigd door H 1 -NMR (A) en 13 C -NMR (B).
PC modelbouw en histopathologische kenmerken
Rabbit model van de maag PC werd opgericht in alle dieren (100%, 40/40). Op 8 d tumorcellen na inoculatie kleine, harde en transparante tumornoduli ontwikkeld op omentum majus, en typische ulceratieve kanker ongeveer 0,5-1,0 cm in diameter gevormd op het antrum van de maag. Geen ascites waargenomen. Geen duidelijke PC gevonden in andere gebieden. Er waren geen verschillen in de ernst PC onder alle konijnen. Dit kan gelijk aan de klinische fase I PC door Gilly criteria [22] (figuur 3A) zijn.
Al onderzocht tumor monsters toonde uitgebreide invasieve groei en weefsel. De tumoren op de grotere kromming van de maag antrum drongen de mucosale laag om zweren te vormen. Histopathologisch onderzoek toonde tumor nesten penetreren van de gehele maagwand, met typische invasie in de spierlaag en de maagklieren (Figuur 3B). De tumorcellen zijn rond, ovaal of atypische morfologie met vele pathologische mitotische figuren. Er waren ook opvallend infiltratie van lymfocyten, plasmacellen en andere inflammatoire cellen (Figuur 3C). Apoptotische en necrotische tumorcellen waargenomen in het centrale gebied van de tumoren (Figuur 3D). Standaard PC gepresenteerd als tumornoduli op het oppervlak van het omentum (figuur 3E) en intraperitoneale metastasen werden ook waargenomen (Figuur 3F).
Typische ulceratieve kanker met PC in post mortem pathologische onderzoeken van konijnen in de controle werd waargenomen. De maagwand werd volledig binnengevallen door de tumor tot kanker zweer ingekapseld door confluent knobbeltjes op de grotere omentum, de vorming van een grote tumor blok te creëren. De buikwand en het diafragma waren volledig binnengevallen door de tumor. Veel tumor knobbeltjes gevormd op de darmwand, het mesenterium en retroperitoneum. Bloedige ascites kunnen meer dan 100 ml. Alle functies zijn gelijk aan de clinicopathologic kenmerken van maag PC patiënten (Figuur 3G). Figuur 3 De kenmerken van konijn model van de maag PC en de HE gekleurd microfoto. (A) Het beeld van vroege konijnenmodel van gastrische PC waarop opvallende tumornoduli verspreid over het peritoneum en de grotere kromming van de maag; (B) de foto's van ulceratieve GC; (C &D) HE gekleurd beeld onder microscoop toont de invasieve groei van tumorcellen nesten infiltreren de maagwand (paneel C, 400 X) en necrotische tumorcellen in het gebied van onvoldoende bloedtoevoer (paneel D, 400 x); (E) tumornoduli op het oppervlak van het omentum (200 x); (F) intraperitoneale lymfkliermetastasen (200 ×); (G) post mortem pathologische onderzoek van een konijn.
Survival
Animal werd waargenomen dat OS op te nemen. Twee lange overlevende konijnen (een in de PDOX en een in de DOX, leven meer dan 100 d) werden gedood op de 100ste dag door een overdosis injectie van 2% natriumpentobarbital. De mediaan (95% betrouwbaarheidsinterval, CI) OS was 23,0 d (19,9-26,1 d) in de controlegroep, 41,0 d (36,9-45,1 d) in de HIPEC, 65,0 d (44,1-71,9 d) in het PDOX en 58,0 d (39,6-54,4 d) in de DOX. In vergelijking met de controle, werd het OS uitgebreid met ten minste 70% in de HIPEC (p Restaurant < 0,001, log rank test). In vergelijking met de HIPEC, werd het besturingssysteem verder uitgebreid met 40% in de DOX (p = 0,029
, log rank test), en met 58% in de PDOX (p = 0,021
, log rank test) (Figuur 4A ). Figuur 4 In vivo effecten van PDOX op konijnen pc-model. (A) Kaplan-Meier survival curves voor de Control, HIPEC, PDOX en DOX; (B) veranderingen in het lichaamsgewicht van die groepen.
Tumor lasten op de survival eindpunt
Aan het eindpunt van de studie, de tumor last in het Control was zwaarste, met tumor gewicht (137,51 ± 16,09) g, tumor-dragende ratio (tumorgewicht aan het lichaamsgewicht) van (7,88 ± 0,85)%, bloederige ascites van (65,50 ± 33,45) ml en EPCI score van (9.50 ± 2.17). In vergelijking met de controle was de HIPEC aanzienlijk verminderd tumor gewicht (76.50 ± 11.41) g (p = 0,007
) en tumor-dragende ratio (3,94 ± 0,54)% (p =
0.001), maar niet EPCI score (9,50 ± 2,17)% (p =
0.420) en bloedige ascites [(29.16 ± 15.30) ml, p = 0,085
]. In vergelijking met de HIPEC, werd PC ernst verder afgenomen in zowel de PDOX en de DOX, met EPCI score (6,40 ± 2,07, p = 0,020
in zowel PDOX en DOX vs. HIPEC) en bloedige ascites (0,00 ml, p
< 0,001 in PDOX en DOX vs. HIPEC); terwijl er geen significante verschillen in tumorgewicht [(65,30 ± 14,55) g, p = 0,552
, PDOX vs. HIPEC; (48.74 ± 16.31) g, p = 0,180
, DOX vs. HIPEC)] en tumor-dragende verhouding [(2,91 ± 0,69)%, p = 0,552
, PDOX vs. HIPEC; (2,13 ± 0,78)%, p = 0,180
, DOX vs. HIPEC]. Er waren geen significante verschillen in de tumor lasten tussen de PDOX en de DOX (tabel 1) .table 1 De EPCI score op overleving eindpunt in 4 groepen van konijnen [range (mediaan)]
Controle (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
De EPCI score in verschillende regio's
Regio I
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Region II
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
Region III
1 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (1)
de regio IV
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Ascites (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0.0 ~ 0.0 (0.0)
0.0 ~ 0.0 (0.0)
EPCI score§
7 ~ 13 (11)
5 ~ 12 (9)
3 ~ 9 (6)
3 ~ 9 (6)
* Ascites: p
= 0.323, HIPEC vs. controle; p
< 0,001, PDOX vs. HIPEC; p
< . 0,001, DOX vs. HIPEC
§ Het EPCI score: p
= 0,073, HIPEC vs. controle; p
= 0,020, PDOX vs. HIPEC; p
= 0,020, DOX vs. HIPEC; p
= 0,474, PDOX vs. DOX.
Lichaamsgewicht veranderingen
Het lichaamsgewicht van elk dier werd opgenomen om de 4 d. Er werden geen significante verschillen waargenomen in het oorspronkelijke lichaamsgewicht van 4 groepen vóór de behandeling. Perioperatieve lichaamsgewicht daalden in alle groepen als gevolg van de nacht vasten. In de Control, het lichaamsgewicht hersteld zodra voedselinname werd hervat, maar nogmaals daalde geleidelijk tot het eindpunt van de studie. In de 3 behandelingsgroepen, postoperatieve lichaamsgewicht daalde aanzienlijk na modelbouw en de laagste 4 d na CRS + HIPEC, en vervolgens bleef op een laag niveau tijdens de post-operatieve fase tot chemotherapie was afgerond. Het lichaamsgewicht gedaan werd op d 44 in de HIPEC en d 56 in zowel de PDOX en de DOX en geleidelijk verhoogd tot een hoger niveau, dat is gerelateerd aan zowel tumorgroei van de levende tumordragende konijnen en dood van de storing konijnen met minder lichaamsgewicht. Daarna lichaamsgewicht daalde geleidelijk weer tot het eindpunt van de studie in zowel de PDOX en de DOX (Figuur 4B).
Postmortaal pathologisch onderzoek
Tegen de tijd van het dier dood, gedetailleerde informatie over postmortem pathologisch onderzoek werd in tabel 2 .
Naast systematisch onderzoek van alle anatomische plaatsen voor mogelijke kanker uitzaaiingen, werd bijzondere aandacht besteed aan de longen en de lever uitzaaiingen. Zoals getoond in figuur 5, in de controle werden uitgebreide levermetastasen waargenomen bij 8 dieren, maar geen pulmonaire metastasen zichtbaar bij alle dieren, vanwege de zeer agressieve groei gedrag van de tumor tot korte OS in deze groep dieren (fig 5 A2, B2). In de HIPEC, als dieren leefden veel langer vanwege de CRS + HIPEC, werden minder leveruitzaaiingen in 4 dieren waargenomen, maar aanzienlijk veel meer longmetastasen waargenomen in 7 dieren (Figuur 5 A3, B3). In de PDOX en DOX, dieren ontwikkelden veel minder uitzaaiingen in zowel de lever en de longen, hoewel het besturingssysteem verder opmerkelijk werd verbeterd, omdat de dieren kregen niet alleen de CRS + HIPEC aan de lokale regionale metastasen, maar ook systemische chemotherapie om hematogene metastasen controle te beheersen en lymfatische metastasen (Figuur 5 A4, B4, A5, B5) .table 2 Resultaten van de post mortem pathologische studie in 4 groepen, uitgedrukt in% van de konijnen
control (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
p 1
p 2

p 3
p 4
Colitis GC
100,0
100,0
100,0
100,0
NS
NS
NS
NS
Incision uitzaaiingen
100,0
30,0
30,0
20,0
0.001
NS
NS
NS
Pulmonale metastasen
0,0
70,0
30,0
30,0
0.001
NS
NS
NS
Borstwand uitzaaiingen
0.0
20,0
10,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Pleuravocht
10,0
70,0
30,0
30,0
0.008
NS
NS
NS
Virchow lymfeklieren uitzaaiingen
30,0
70,0
60,0
40,0
NS
NS
NS
NS
Pericardium uitzaaiingen
0.0
20,0
0.0
0.0
NS
NS
NS
NS
Cancerous middenrif
100,0
70,0
20,0
20,0
NS
0.028
0,028
NS
Greater omentum cake
100,0
80,0
40,0
50,0
NS
NS
NS
NS
leveruitzaaiingen
80,0
40,0
30,0
30,0
NS
NS
NS
NS
Spleen uitzaaiingen
0,0
0.0
20,0
0.0
NS
NS
NS
NS
retroperitoneum uitzaaiingen
100,0
60,0
60,0
50,0
0.029
NS
NS
NS
Left renale uitzaaiingen
0.0
10,0
0.0
0.0
NS
NS
NS
NS
Right renale uitzaaiingen
0.0
0,0
0,0
0.0
NS
NS
NS
NS
Nier capsule invasie
100,0
50.0
0.0
20,0
0,012
0,012
NS
NS
darmwand zaaien
100,0
80.0
20,0
10,0
NS
0.009
0.002
NS
Mesenterium zaaien
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028
0.002
buikwand NS
kanker
100,0
60,0
30,0
0.0
0.029
NS
0.004
NS
Pelvic zaaien
100,0
50.0
30,0
10,0
0.170
NS
NS
NS
Bladder breuk
0.0
0.0
20,0
10,0
NS
NS
NS
NS
Urine retentie
50,0
50,0
30,0
10,0
NS
NS
NS
NS
Door 2-zijdig chi-kwadraat (χ Pagina 2) te testen. p
1, HIPEC vs. controle; p verhuur 2, PDOX vs. HIPEC; p
3, DOX vs. HIPEC; . P verhuur 4, PDOX vs. DOX
NS:. Geen betekenis
vergelijking met de controlegroep, werd PC ernst significant verminderd in incisie metastasen, pulmonale metastasen, borstvliesuitstroming, retroperitoneale metastasen, nier capsule invasie, abdominale wall kanker en bekken zaaien in de HIPEC. Vergeleken met de HIPEC, werd PC ernst significant verminderd bij de kankerachtige diafragma, nier capsule invasie, darmwand zaaien en mesenterium zaaien in de PDOX en in de kankercellen membraan, darmwand zaaien, mesenterium zaaien en buikwand kanker in de DOX. Er waren geen statistische verschillen tussen de PDOX en DOX systemische metastasen.
Figuur 5 longmetastasen (paneel A) en levermetastasen (paneel B) in deze studie. (A1) (B1) toonde precieze aantal long- en levermetastasen in elk konijn van de 4 groepen, respectievelijk; (A2 tot A5) toonde vertegenwoordiger longmetastasen in de controle, de HIPEC, de PDOX en de DOX respectievelijk; (B2 naar B5) toonde vertegenwoordiger leveruitzaaiingen in de Control, de HIPEC, de PDOX en de DOX respectievelijk; (A6) toonde microfoto van longmetastasen in de HIPEC, gekenmerkt door kanker invasie, longweefsel onderdrukking, intravasculaire tumorvorming thrombus en opvallende ontstekingscellen infiltratie (A6-1, HE vlek, 200 ×) (A6-2, HE vlek, 400 x). (B6) toonde microfoto van leveruitzaaiingen in de Control, gekenmerkt door uitgebreide leverweefsel vernietiging, binnendringende kankercellen, ontstekingscellen infiltratie, en bloedingen in leverweefsel (B6-1, HE vlek, 100 x) (B6-2, HE vlekken , 200 x).
perifere bloedbeeld en belangrijke biochemische veranderingen
Er waren geen verschillen in perifere bloedcellen op 2 d, d d 6 en 14 tussen de 4 groepen, maar de witte bloedcellen en bloedplaatjes waren significant daalden op d 36 na systemische chemotherapie in de DOX (p Restaurant < 0,05). Er waren geen verschillen in de lever- en nierfunctie gedurende het experiment tussen de 4 groepen. In termen van de hartfunctie parameters, waren er geen verschillen in creatine kinase en creatine kinase mb iso op d 2, d 6 en d 14 tussen de 4 groepen, maar creatine kinase MB isoenzym werd significant verhoogd op d 36 na systemische chemotherapie in de DOX (p Restaurant < 0,05). Van bijzondere aandacht, 2 dieren in de DOX met korte OS van 47 d en 53 d hadden uitzonderlijk hogere serum creatine kinase mb iso-levels, 467,5 U /L en 656,4 U /L, respectievelijk (p Restaurant < 0,05) (Tabel 3) .table 3 Blood routinetests en biochemische testresultaten in 4 groepen van konijnen [range (mediaan)]
Group
D2
D6
D14

D36 *
n
Waarde
p
n
Waarde
p

n
Waarde
p
n
Waarde
p
Rode bloedcellen ( T /L) de kwaliteitscontrole
10 | 5,03-6,93 (6.26)
0,849
10 | 5,08-7,76 (6.07)
0,494
10 | 4,29 -6,32 (5,54)
0.382
0
- 0,203
HIPEC
10 | 5,13-7,58 (6,48)
10 | 4,66-7,15 (5,65 )
10
3,54-7,30 (5,68)
7
4,28-7,36 (5.28)
PDOX
10 | 4,17-7,16 (5,94)
10
4,97-6,49 (5,61)
10 | 4,38-5,82 (5.05)
10 | 4,46-6,03 (5.47)
DOX
10 | 5,03-6,84 (6,09)
10
5,03-6,70 (5,88)
10 | 3,65-6,36 (5,08)
9
4,12-6,40 (4,94)-witte bloedcellen (G /L)
Controle
10 | 5,3-9,6 (8.6)
0,785
10 | 4,5-14,1 (9.9)
0,446
10 | 6,0-10,3 (7.8 )
0,601
0
- 0,013
HIPEC
10 | 4,4-12,3 (7.4)
10 | 4,5-12,7 (9.3)
10 | 3,2-12,1 (10,7)
7
6,9-13,7 (7,5)
PDOX
10 | 5,9-13,2 (8.2)
10 | 6,1-12,5 (8.8)
10 | 4,6-14,4 (9.0)
10 | 4,9-11,1 (7.7)
DOX
10 | 3,6-10,5 (7.8)
10
4,7-12,2 (7.3)
10 | 4,6-12,5 (10.2)
9
3,9-6,4 (5.3)
Bloedplaatjes (G /L) de kwaliteitscontrole
10 | 387-579 (480)
0,494
10 | 317-836 (555)
0,362
10 | 451-917 (657)
0,601
0 -
0.009
HIPEC
10 | 229-634 (373)
10 | 363-758 (408)
10 | 390- 709 (489)
7
262-598 (451)
PDOX
10 | 382-592 (456)
10 | 395-856 (493)
10 | 328-1002 (500)
10 | 201-532 (363)
DOX
10 | 330-647 (476)
10 | 363-878 (464)
10 | 390-939 (654)
9
115-319 (244)
alaninetransaminase (S /L) de kwaliteitscontrole
10 | 31-52 (38)
0,463
10 | 34-54 (41)
0,525
10 | 21-54 (37)
0,245
0
-
0,838
HIPEC
10 | 24-47 (40)
10 | 21-62 (35)
10 | 31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10 | 28-52 (40)
10 | 24-59 (37)
10 | 32 -55 (45)
9
25-79 (40)
DOX
10 | 29-59 (35)
10 | 30-59 (39)
10 | 34-61 (48)
8
26-76 (42)
aspartaattransaminase (S /L) de kwaliteitscontrole
10 | 19-54 (35 )
0,895
10 | 30-52 (36)
0,525
10 | 37-58 (43)
0,309
0
- 0,473
HIPEC
10 | 23-59 (38)
10 | 11-55 (35)
10 | 27-78 (34)
7
25-50 (36)
PDOX
10 | 22-47 (37)
10 | 17-49 (39)
10 | 27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10 | 24-47 (37)
10 | 24-49 (30)
10 | 23-86 (36)
8
31-60 (39)
Bloedureum stikstof (mmol /l) de kwaliteitscontrole
10 | 4,40-5,80 (4,80)
0,206
10 | 4,51-10,44 (4,81)
0,525
10 | 3,29-9,82 (6.32)
0,185
0
- 0,473
HIPEC
10
3,70-8,14 (5.10)
10 | 3,57-11,04 (5,35)
10 | 4,32-9,29 (7,50)
7
5,25-8,67 (6.38)
PDOX
10 | 3,58-7,66 (5,82)
10 | 3,32-11,58 (6.68)
10 | 6,52-13,58 (7,63)
9
4,71-8,05 (5,35)
DOX
10 | 1,76-7,90 (5,01)
10 | 3,32-10,00 (5,59)
10 | 1,76-10,53 ( 7.80)
8
4,50-9,26 (6.27)
creatinine (umol /L) de kwaliteitscontrole
10 | 45,05-64,50 (60,50)
0,736
10
22,10-73,20 (55.00)
0,736
10 | 41,40-71,40 (50,25)
0.083
0
- 0,838
HIPEC
10
43,30-80,65 (57,35)
10 | 22,20-81,55 (46,97)
10 | 31,10-83,37 (52,96)
7
59,87-76,84 (66,51)
PDOX
10
42,80-75,80 (61,87)
10 | 22,13-86,25 (69,65)
10 | 45,30-75,80 (66,25)
9
44,38-79,56 (62,47)
DOX
10 | 22,30-69,30 (55,81)
10 | 27,28-75,90 (63,45)
10 | 42,38-73,76 (69,37)
8
47,72-78,64 (59.50)
creatine kinase (S /L) de kwaliteitscontrole
10 | 74,3-205,6 (131,6)
0,864
10
81,3-247,8 (147,9)
0,878
10 | 71,4-182,1 (138,9)
0,968
0
- 0,473
HIPEC
10
78,8-259,2 (137,8)
10 | 66,8-248,9 (145,3)
10 | 63,4-225,2 (141,8)
7
98,3-265,1 (153,0)
PDOX
10
87,9-194,2 (139,4)
10 | 69,9-256,1 (144,4)
10 | 70,0-240,8 (130,6)
9
109,2-251,5 (195,2)
DOX
10 | 98,3-256,1 (152,4)
10 | 56,4-250,2 (135,8)
10 | 80,5-261,2 (133,8)
8
101.1- 407,6 (228,1)
Creatinekinase mb iso (S /L) de kwaliteitscontrole
10 | 73,0-162,5 (129,8)
0,717
10 | 62,5-195,6 (127,2)
0,878
10 | 57,0-199,8 (119,8)
0,509
0
- 0.040
HIPEC
10 | 74,2-228,2 (137,3)
10 | 42,9-219,8 (129,7)
10 | 52,8-237,7 (146,5)
7
50,2-188,1 (126.1)
PDOX
10 | 59,2-228,1 (133,9)
10 | 42,5-197,7 (133,2)
10 | 74,9-241,5 (158,2)
9
58,9-209,8 (143,7)
DOX
10 | 94,3-207,7 (122,1)
10 | 53,9-202,3 (128,2)
10 | 94,3-238,6 (148,4)
8
106,2-656,5 (259,3 )
* Een deel van de gegevens is niet beschikbaar omdat van dierlijke dood op de ingestelde tijd
door 2-zijdige parametrische testen-witte bloedcellen op D 36, vergelijking tussen de groepen:.. p =
0,001, DOX vs. HIPEC; p = 1,000
, PDOX vs. HIPEC; p =
0.005, PDOX vs. DOX; Bloedplaatjes op D 36, vergelijking tussen de groepen: p = 0,041
, DOX vs. HIPEC; p = 0,637
, PDOX vs. HIPEC; p = 0,070
, PDOX vs. DOX; Creatine kinase mb iso op D 36, vergelijking tussen de groepen: p = 0,012
, DOX vs. HIPEC; p = 0,593
, PDOX vs. HIPEC; . P = 0,131
, PDOX vs. DOX
hematologische toxiciteit met een duidelijke daling van de witte bloedcellen (p Restaurant < 0,05) en bloedplaatjes (p Restaurant < 0,05), evenals cardiale toxiciteit met een aanzienlijke stijging van creatine kinase mb iso (p Restaurant < 0,05). werden waargenomen op d 36 na systemische chemotherapie in de DOX
gedetailleerde studies op myocard toxiciteit
Histopathologisch studies onder beide lichtmicroscoop en transmissie-elektronenmicroscoop gevonden myocardium geen toxiciteit in de controle, de HIPEC en PDOX, maar significante histopathologische veranderingen myocardium werden gevonden in alle dieren (100%, 10/10) in de DOX, waaronder coagulatie necrose van het myocard met dieprood gekleurd cytoplasma en de karyopyknosis (Figuur 6 C1, H1, P1, D1 zwarte pijlen). Electron transmissie microfoto's toonden aan dat de normale hartspier met een overvloed aan mitochondriën verpakt rond normale kern in de controle en HIPEC, rijk normaal, maar met een iets verwijde cristae mitochondria verspreid over normale kern in de PDOX, bijna afwezig mitochondria rond het morfologisch seniele en degeneratieve nucleus in de DOX. Bovendien, gedeeltelijke myocard-lytische necrose (gele pijl) en mitochondriën-pyknose afstand van de kern (rode pijl) waren ook duidelijk in de DOX. Volledig, duidelijk en ononderbroken lijnen van de normale geïntercaleerde schijven in de Control, de HIPEC en de PDOX, maar obscure, het losmaken en discontinue geïntercaleerde schijven werden gevonden in de DOX (witte pijlen). Figuur 6 licht microfoto en elektronenmicroscopie transmissie microfoto van konijn hartspier. Bovenpaneel (HE vlek, 400 ×), routine histopathologische kenmerken van konijn hartspier in langsdoorsnede (inzetstukken op de rechterbovenhoek, sagittale doorsnede), waarbij C1, H1 en P1 aangetoond schoon en helder normale myocard vezels in ordelijke arrays, maar D1 toonde coagulatie necrose van de hartspier met diepe rood gekleurde cytoplasma en de karyopyknosis van het myocard. Middelste bovenpaneel (10.000 x), elektronen transmissie microfoto van myocardium gericht op het gebruik van kernen en peri-nucleaire mitochondria, waarbij C2, H2 toonde overvloedige mitochondria ruimte rond normale kern, P2 toonde rijke mitochondria verspreid over normale kern, maar D2 toonde bijna afwezig mitochondria rond het morfologisch seniele en degeneratieve nucleus (gele ster toont vergrote nucleus als gevolg van zwelling en de excentrieke aggregatie van heterochromatine, en groene pijlen die opvallend naar binnen samentrekking van de nucleaire membraan). Bovendien, gedeeltelijke myocard-lytische necrose (gele pijl) en mitochondriën-pyknose afstand van de kern (rode pijl) waren ook duidelijk in DOX behandelde dieren. Na huidpreparaat en ontsmetting werd de tumor uitgesneden uit de drager konijn en geplaatst in ijskoude 0,9% natriumchlorideoplossing. De buikhuid werd gereinigd en ontsmet. De buikhuid werd gereinigd en ontsmet. Post Mortem pathologisch onderzoek opgenomen bruto pathologie zoals tumorgrootte en uitkeringen; Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Ongebruikelijke verworven maag obstructie tijdens de kinderschoenen: een case report
• Succesvolle behandeling van een primair maag plasmacytoom nabootsen hardnekkige maagzweer door het gebruik van een hoge dosis dexamethason therapie: een case report