Synthesis, identifikation og in vivo studier af tumor-targeting middel peptid doxorubicin (PDOX) til behandling af peritoneal carcinomatose af mavekræft med lignende effekt, men reduceret toxicity

Synthesis, identifikation og in vivo studier af tumor-targeting middel peptid doxorubicin (PDOX) til behandling af peritoneal carcinomatose af mavekræft med lignende effekt, men reduceret toksicitet
Abstract
Baggrund
Dette arbejde har til formål at syntetisere en cathepsin B (CTSB) spaltelig tumor-targeting prodrug peptid doxorubicin (PDOX) og studere in vivo effekt og toksicitet i en dyremodel af gastrisk peritoneal carcinomatose (PC). Salg Metoder
PDOX blev syntetiseret ved anvendelse doxorubicin (DOX) fastgørelse til en CTSB-spaltelig dipeptid Ac-Phe-Lys og en para-amino-benzyloxycarbonyl (PABC) spacer. Pc-model blev etableret ved injektion af VX2 tumorceller i den gastriske sub-mucosa på 40 kaniner, som derefter blev randomiseret i 4 grupper: Control (n = 10) uden behandling, den HIPEC (n = 10), der modtager cytoreduktiv kirurgi (CRS) plus hypertermisk intraperitoneal kemoterapi (HIPEC), den PDOX (n = 10) og DOX (n = 10), der modtager systemisk kemoterapi med PDOX 50,0 mg /kg eller DOX 5,0 mg /kg, efter CRS + HIPEC.
Resultater Salg The mediane overordnede overlevelse (OS) var 23,0 d (95% CI: 19,9 d - 26,1 d) i Control, 41,0 d (36,9 d - 45,1 d) i HIPEC, 65,0 d (44,1 d - 71,9 d) i PDOX, og 58,0 d (39,6 d - 54,4 d) i DOX. Sammenlignet med kontrolgruppen, blev OS udvidet med 70% i HIPEC (p
< 0,001) og yderligere forlænget med 40% i DOX (p
= 0,029), og med 58% i PDOX (p =
0,021), og PC sværhedsgraden faldt i HIPEC og faldt yderligere i PDOX og DOX. Dyr, der modtager DOX behandling viste hæmatologiske toksiciteter med markant reduktion af hvide blodlegemer og blodplader, samt hjerte-toksiciteter med betydelige stigninger i kreatinkinase mb isoenzym, tydelige myocardium koagulationsnekrose, betydelig nukleare degeneration, peri-kerne mitokondrier sletning, mitokondrier-pyknosis, og unormale indskudte diske. Men disse toksiciteter var ikke indlysende i PDOX.
Konklusioner
PDOX er en nyligt syntetiseret tumor-targeting prodrug af DOX. Sammenlignet med DOX, PDOX har lignende effekt, men reduceret hæmatologiske og hjerte toksiciteter i behandling kanin model af gastrisk PC.
Nøgleord
Peritoneal carcinomatose mavekræft peptid doxorubicin cytoreduktive kirurgi hypertermisk intraperitoneal kemoterapi Baggrund
GC er en af ​​de mest fælles maligniteter i udviklingslandene, hvor det ligger på andenpladsen i form af incidensrate og tredje i form af dødelighed blandt den mandlige befolkning, og rangerer fjerde både incidensraten og dødelighed blandt den kvindelige befolkning, ifølge den seneste globale statistikker [1, 2]. GC er også den tredje hyppigste årsag til kræft dødelighed i Kina [3], hvor over 70% af GC er allerede blevet klinisk fremføres ved tidspunktet for kirurgisk undersøgelse, således kirurgisk resektion alene er ikke længere helbredende [4].
PC i GC har længe været betragtet som en dødelig klinisk enhed. Det er defineret som implantation af tumorceller i hele den peritoneale kavitet og karakteriseret ved tilstedeværelsen af ​​tumorknuder af forskellig størrelse, antal og fordeling på den peritoneale overflade samt malign ascites, hvilket ofte resulterer i locoregional sygelighed uden bredere systemiske metastaser. Patienter med gastrisk PC står en trist resultat, med en median overlevelse på omkring 6 måneder [5].
Der er ingen standard behandling for gastrisk PC. Aktuelle behandlinger for sådan PC er systemisk kemoterapi, bedste support pleje og palliativ behandling. For at løse dette problem, en ny behandlingsmodalitet kaldet CRS plus HIPEC er blevet udviklet over de sidste 3 årtier, idet fordele for kirurgi for at reducere synlige tumor byrde, og regional hypertermisk kemoterapi at udrydde mikrometastaser [6]. Stigende beviser har antydet, at kombinationen af ​​CRS og HIPEC kunne bringe overlevelse fordel for udvalgte patienter med gastrisk PC. I vores tidligere eksperimentelle undersøgelse [5], har vi også vist, at CRS + HIPEC faktisk kunne bringe overlevelse fordel med acceptabel sikkerhed, giver beviser til støtte for denne kombinerede strategi til behandling af udvalgte patienter med gastrisk PC.
Under udviklingen af ​​PC, GC-celler udskiller enzymer for at lette cancerceller podning og kolonisering på bughinden. CTSB er en af ​​de vigtigste enzymer i denne kritiske proces, over-udtrykt i GC samt andre kræftformer [7-9] og aktivt involveret i kræft invasion [10-12]. På den anden side er det ekstremt lave udtrykt i normale celler og inaktive eller taber aktivitet, så snart den er dispergeret i vandige medier væk fra celler [13]. Således CTSB har længe været betragtet som en kandidat target i kræftbehandling [14].
Det er blevet fastslået i MAGIC retssagen, at antracyklin-indeholdte regime er et nyttigt kemoterapi for GC [15]. DOX er en typisk repræsentant for antracykliner. Selvom DOX er et vigtigt stof i kemoterapi, dets toksicitet er indlysende, såsom hjerte-toksiciteter og knoglemarvsdepression. For at bevare den terapeutiske virkning samtidig reducere bivirkningerne, Dubowchik et al [16-18] designet en smart prodrug af DOX, PDOX (figur 1). I denne modificerede DOX, Ac-Phe-Lys er et dipeptid specifik for CTSB, og PABC (para-aminobenzyloxycarbonyl) er en selvstændig opofrende spacer [16]. Prodruget er inaktiv, når der er lidt CTSB aktivitet, såsom normale væv og perifert blod, og dermed undgå de bivirkninger på normalt væv. Under cancer invasion, aktiveres CTSB overudtrykt på den udvendige membran af invaderende cancerceller [19, 20], som spalter Ac-Phe-Lys dipeptid på Lys-PABC-binding [16]. Så den udsatte PABC spacer kan selv-hydrolysere ved deacylering [21] og fri DOX-molekyler frigives, hvilket resulterer i direkte drab af de invaderende cancerceller [16]. Figur 1 PDOX struktur (vist i boksen), kemisk syntese og virkningsmekanisme. PDOX blev succesfuldt syntetiseret efter 7-trins kemisk proces. Dens kemiske struktur er Ac-Phe-Lys-PABC-Dox-HCl (vist i boksen), og den molekylære formel er C52H60ClN5O16. PDOX indeholder en CTSB-spaltelige dipeptid Ac-Phe-Lys (dobbelt røde skråstreger) en PABC spacer (rød skråstreg) og anti-cancer stof DOX. Når PDOX når CTSB-beriget område som invasionen forsiden af ​​cancer, er Ac-Phe-Lys dipeptid spaltes af CTSB på Lys-PABC binding, udsætte PABC spacer, som derefter hydrolyseres spontant (rød skråstreg), frigiver fri DOX ved cancer invasion front. Således kunne PDOX udøve cytotoksicitet at invadere kræftceller og samtidig beskytte normale celler fra overdreven eksponering narkotika, en strategi kaldet passiv målrettet terapi. CTSB:. Cathepsin B.
I denne undersøgelse, vi syntetiserede den PDOX og evalueret effekten og sikkerheden af ​​CRS + HIPEC med molekylær målrettet terapeutisk regimen PDOX for målrettet behandling af kanin model af gastrisk PC
Resultater
Synthesis og identifikation af PDOX
PDOX blev succesfuldt syntetiseret ifølge den tidligere rapporterede 7-trins kemisk proces (figur 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-Dox · HCI) var en rød fast pulver med molekylvægt på 1046,51 (MS: m /z beregnet for C 52H 60ClN 5O 16: 1046,52, fundet: 1046,50), kemisk renhed på 99,1% (ved HPLC) , struktur C 52H 60ClN 5O 16 (ved begge H 1-NMR og C 13-NMR) (figur 2) og smeltepunkt på 180 ° C (sønderdeling), som er stabil ved -5 ° C til 0 ° C i 36-54 måneder, omgivelsestemperatur i 24 måneder, løses i vand, delvis løses i methanol og ethanol. PDOX anvendt i denne undersøgelse blev opbevaret i mørke, tørt område ved 4 ° C. Figur 2 Struktur identifikationer bekræftet ved H 1 -NMR (A) og C 13-NMR (B).
pc-model byggeri og histopatologiske karakteristika
Kanin model af gastrisk PC blev etableret i alle dyr (100%, 40/40). På d 8 efter tumor celler inokulation, små, hårde og gennemsigtige tumorknuder udviklet på større omentum, og typiske ulcerativ cancer ca. 0,5-1,0 cm i diameter dannet på antrum i maven. Nr ascites blev observeret. Ingen indlysende PC blev fundet i andre regioner. Der var ingen forskelle i PC sværhedsgrad blandt alle kaninerne. Dette kunne være ækvivalent med klinisk fase I PC ved Gilly kriterier [22] (figur 3A).
Alle undersøgte tumor prøver viste omfattende invasiv vækst og ødelagt væv. Tumorerne, om større krumning af gastrisk antrum, gennemtrænges den mucosale lag til dannelse sår. Histopatologisk undersøgelse viste tumor reder gennemtrænger hele mavevæggen, med typiske invasion i en muskel lag og de gastriske kirtler (figur 3B). Tumorcellerne er runde, ovale eller atypisk morfologi med mange patologiske mitotiske figurer. Der var også iøjnefaldende infiltration af lymfocytter, plasmaceller og andre inflammatoriske celler (figur 3C). Apoptotiske og nekrotiske tumorceller blev observeret i den centrale region af tumorknuder (figur 3D). Typisk PC præsenteret som tumorknuder på overfladen af ​​omentum (figur 3E) og intraperitoneal lymfeknudemetastaser blev også observeret (figur 3F).
Typisk ulcerativ cancer med iagttoges PC obduktioner patologiske undersøgelser af kaniner i kontrollen. Mavevæggen var fuldstændig invaderet af tumoren for at skabe kræft ulcus indkapslet af sammenflydende knuder på det større omentum og danner en stor tumor blok. Bugvæggen og membran var fuldstændig invaderet af tumoren. Mange tumorknuder dannet på tarmvæggen, mesenteriet og retroperitoneum. Bloody ascites kunne være mere end 100 ml. Alle funktionerne ligner clinicopathologic karakteristika gastrisk PC i patienter (figur 3G). Figur 3 Egenskaberne ved kaninmodel af gastrisk PC og HE farvede mikrografer. (A) Billedet af tidlig kaninmodel af gastrisk PC hvor iøjnefaldende tumorknuder spredt på bughinden og den større krumning af maven; (B) billeder af ulcerøs GC; (C &D) HE farvede billede under mikroskop viser den invasive vækst af tumor celle reder infiltrerer den gastriske væg (panel C, 400 ×) og nekrotiske tumorceller på området utilstrækkelig blodforsyning (felt D, 400 ×); (E) tumorknuder på overfladen af ​​omentum (200 ×); (F) intraperitoneale lymfeknudemetastaser (200 ×); (G) post mortem patologiske undersøgelser af en kanin.
Survival
Animal blev observeret at optage OS. To lange overlevende kaniner (en i PDOX og en anden i DOX, levende mere end 100 d) blev aflivet på den 100. dag med en overdosis injektion af 2% pentobarbital natrium. Den mediane (95% konfidensinterval, CI) OS var 23,0 d (19,9-26,1 d) i Control, 41,0 d (36,9-45,1 d) i HIPEC, 65,0 d (44,1-71,9 d) i PDOX og 58,0 d (39,6-54,4 d) i DOX. Sammenlignet med kontrolgruppen, blev OS udvides med mindst 70% i HIPEC (p
< 0,001, log rank test). Sammenlignet med den HIPEC blev OS yderligere udvidet med 40% i DOX (p =
0,029, log rank test) og med 58% i PDOX (p =
0,021, log rank test) (figur 4A ). Figur 4 In vivo effekter af PDOX på kanin pc-model. (A) Kaplan-Meier-overlevelseskurver for kontrol, HIPEC, PDOX og DOX; (B) Organ vægt ændringer i disse grupper.
Tumor byrde på overlevelse endpoint
Ved undersøgelsen endpoint, tumor byrde i Control var tungeste, med tumor vægt (137,51 ± 16,09) g, tumor-bærende forholdet (tumorvægt til legemsvægt) af (7,88 ± 0,85)%, blodige ascites af (65,50 ± 33,45) ml, og EPCI score på (9,50 ± 2,17). Sammenlignet med kontrolgruppen, havde HIPEC væsentligt reduceret tumor vægt (76,50 ± 11,41) g (p =
0,007) og tumor-bærende ratio (3,94 ± 0,54)% (p =
0,001), men ikke EPCI score (9,50 ± 2,17)% (p = 0,420
) og blodige ascites [(29.16 ± 15.30) mL, p =
0,085]. Sammenlignet med den HIPEC blev PC sværhedsgraden yderligere reduceret i både PDOX og DOX, med EPCI score (6,40 ± 2,07, p =
0,020 i både PDOX og DOX vs. HIPEC) og blodige ascites (0,00 ml, p
< 0,001 i PDOX og DOX vs. HIPEC); mens der var ingen signifikante forskelle i tumor vægt [(65,30 ± 14,55) g, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (48,74 ± 16,31) g, p =
0.180, DOX vs. HIPEC)] og tumor-bærende-forholdet [(2,91 ± 0,69)%, p =
0,552, PDOX vs. HIPEC; (2,13 ± 0,78)%, p =
0.180, DOX vs. HIPEC]. Der var ingen signifikante forskelle i tumor byrde mellem PDOX og DOX (Tabel 1) .table 1 EPCI score på overlevelse endpoint i 4 grupper af kaniner [interval (median)]
Kontrol (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
EPCI score i forskellige regioner
Region jeg
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
region II
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
Region III
1 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (1)
Region IV
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
Ascites (ml) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0,0 ~ 0,0 (0,0)
0,0 ~ 0,0 (0,0)
EPCI score§
7 ~ 13 (11)
5 ~ 12 (9)
3 ~ 9 (6)
3 ~ 9 (6)
* Ascites: p
= 0,323, HIPEC vs. kontrol; p
< 0,001, PDOX vs. HIPEC; p
< . 0.001, DOX vs. HIPEC
§The EPCI score: p
= 0,073, HIPEC vs. kontrol; p
= 0,020, PDOX vs. HIPEC; p
= 0,020, DOX vs. HIPEC; p
= 0,474, blev PDOX vs DOX.
Kropsvægt ændringer
kropsvægt hvert dyr registreres hver 4 d. Ingen signifikante forskelle blev fundet i indledende kropsvægt på 4 grupper, før behandlingen. Perioperativ kropsvægt faldt i alle grupper på grund af den faste natten over. I Kontrol, kropsvægten inddrives, når fødeindtagelse blev genoptaget, men igen faldt gradvist indtil forsøgets afslutning. I de 3 behandlingsgrupper, postoperativ kropsvægt faldet betydeligt efter model byggeri og til det laveste 4 d efter CRS + HIPEC, og derefter forblev på et lavt niveau i den postoperative fase indtil kemoterapi var afsluttet. Kropsvægten begyndte at stige ved d 44 i HIPEC og d 56 i både PDOX og DOX, og gradvist øges til et højere niveau, som var relateret til både tumorvækst af de levende tumorbærende kaniner og død af fiasko kaniner med mindre kropsvægt. Derefter kropsvægt faldt gradvist igen, indtil undersøgelsen endpoint i både PDOX og DOX (figur 4B).
Obduktion patologiske undersøgelser
På tidspunktet for dyrets død, detaljerede oplysninger om postmortem patologiske undersøgelser blev opført i tabel 2 .
Ud over systematiske undersøgelser af alle anatomiske lokaliteter til mulige kræft metastaser, blev lagt særlig vægt på lunge- og levermetastaser. Som vist i figur 5, i kontrol blev omfattende levermetastaser observeret i 8 dyr, men ingen lungemetastaser var tydelige i alle dyr, på grund af de meget aggressive vækst adfærd af tumoren førte til korte OS i denne gruppe af dyr (figur 5 A2, B2). I HIPEC, da dyrene levede meget længere på grund af CRS + HIPEC blev færre levermetastaser observeret i 4 dyr, men betydeligt meget mere pulmonal metastaser blev observeret i 7 dyr (figur 5 A3, B3). I PDOX og DOX, dyr udviklet langt færre metastaser i både lever og lunger, selvom OS blev yderligere forbedret bemærkelsesværdigt, fordi dyrene modtog ikke kun CRS + HIPEC at styre lokale regionale metastaser, men også systemisk kemoterapi til at styre hæmatogene metastaser og lymfe metastaser (figur 5 A4, B4, A5, B5) .table 2 Resultater af post mortem patologisk undersøgelse i 4 grupper, udtrykt som% af kaniner
kontrol (n = 10)
HIPEC (n = 10)
PDOX (n = 10)
DOX (n = 10)
p en
p 2

s 3
p 4
Colitis GC
100,0
100,0
100,0
100,0
NS
NS
NS
NS
Incisionssteder metastaser
100.0
30,0
30,0
20,0
0.001
NS
NS
NS
lungemetastaser
0,0
70,0
30,0
30,0
0.001
NS
NS
NS
brystvæggen metastaser
0,0
20,0
10,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Pleuraeffusion
10,0
70,0
30,0
30,0
0,008
NS
NS
NS
Virchow lymfeknuder metastaser
30,0
70,0
60,0
40,0
NS
NS
NS
NS
hjertesækken metastaser
0,0
20,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Kræft membran
100,0
70,0
20,0
20,0
NS
0,028
0,028
NS
Større omentum kage
100,0
80,0
40,0
50,0
NS
NS
NS
NS
levermetastaser
80,0
40,0
30,0
30,0
NS
NS
NS
NS
milt metastaser
0,0
0,0
20,0
0,0
NS
NS
NS
NS
retroperitoneum metastaser
100.0
60,0
60,0
50,0
0,029
NS
NS
NS
Venstre nyre metastaser
0,0
10,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
højre nyre metastaser
0,0
0,0
0,0
0,0
NS
NS
NS
NS
Nyre kapsel invasion
100,0
50,0
0,0
20,0
0,012
0,012
NS
NS
Tarm væg såning
100,0
80,0
20,0
10.0
NS
0,009
0,002
NS
mesenterium såning
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028
0,002
NS
Abdominal væg kræft
100,0
60,0
30,0
0,0
0,029
NS
0,004
NS
Bækken såning
100,0
50,0
30,0
10,0
0,170
NS
NS
NS
Blære brud
0,0
0,0
20,0
10,0
NS
NS
NS
NS
Urin fastholdelse
50,0
50,0
30,0
10,0
NS
NS
NS
NS
Ved 2-sidet chi-square (χ
2) test. p
1, HIPEC vs. kontrol; p
2, PDOX vs. HIPEC; p
3, DOX vs. HIPEC; P.
4, PDOX vs. DOX
NS:. Ingen betydning
sammenlignet med kontrolgruppen, blev PC sværhedsgrad signifikant reduceret i indsnit metastaser, pulmonale metastaser, pleural effusion, retroperitoneale metastaser, nyre kapsel invasion, abdominal væg cancer og bækken podning i HIPEC. Sammenlignet med den HIPEC blev PC sværhedsgrad signifikant reduceret i den cancerøse membran, nyre kapsel invasion, tarmvæg såning og mesenteriet såning i PDOX, og i den cancerøse mellemgulvet, tarmvæg såning, mesenterium såning og bugvæggen kræft i DOX. Der var ingen statistiske forskelle mellem PDOX og DOX i systemiske metastaser.
Figur 5 lungemetastaser (panel A) og levermetastaser (panel B) i denne undersøgelse. (A1) (B1) viste nøjagtige antal lunge- og levermetastaser i hver kanin af de 4 grupper henholdsvis; (A2 til A5) viste repræsentative lungemetastaser i kontrolcenteret, den HIPEC, den PDOX og DOX, henholdsvis; (B2 til B5) viste repræsentative levermetastaser i kontrolcenteret, den HIPEC, den PDOX og DOX, henholdsvis; (A6) viste mikrografier af lungemetastaser i HIPEC, karakteriseret ved cancer invasion, lungevæv undertrykkelse, intravaskulær tumor trombedannelse og iøjnefaldende inflammatoriske celler infiltration (A6-1, HE plet, 200 ×) (A6-2, HE plette, 400 ×). (B6) viste mikrografier af levermetastaser i kontrolcenteret, karakteriseret ved omfattende levervæv ødelæggelse, invaderende cancerceller, inflammatoriske celler infiltration, og blødning i levervæv (B6-1, HE plette, 100 ×) (B6-2, HE plette , 200 ×).
perifert blod profil og store biokemi ændringer
Der var ingen forskelle i perifere blodlegemer på d 2, d 6 og d 14 blandt de 4 grupper, men de hvide blodlegemer og blodplader var signifikant faldt på d 36 efter systemisk kemoterapi i DOX (p
< 0,05). Der var ingen forskelle i de hepatiske og renale funktioner i hele forsøget blandt de 4 grupper. Med hensyn til hjertefunktion parametre, var der ingen forskel i kreatinkinase og kreatinkinase mb isoenzym på d 2, d 6 og d 14 blandt de 4 grupper, men kreatinkinase mb isoenzym blev øget markant på d 36 efter systemisk kemoterapi i DOX (p
< 0,05). Af særlig opmærksomhed, 2 dyr i DOX med kort OS på 47 d og 53 d havde usædvanligt højere serum kreatinkinaseindholdet mb isoenzym niveauer, 467,5 U /l og 656,4 U /l, (p
< 0,05) (tabel 3) .table 3 Blood rutineundersøgelser og biokemiske testresultater i 4 grupper af kaniner [interval (median)]
Group
D2
D6
D14

D36 *
n
Value
p
n
Value
p

n
Value
p
n
Value
p
røde blodlegemer ( T /L)
Kontrol
10
5,03-6,93 (6.26)
0,849
10
5,08-7,76 (6.07)
0,494
10
4.29 -6,32 (5,54)
0,382
0 -
0,203
HIPEC
10
5,13-7,58 (6,48)
10
4,66-7,15 (5,65 )
10
3,54-7,30 (5,68)
7
4,28-7,36 (5,28)
PDOX
10
4,17-7,16 (5,94)
10
4,97-6,49 (5,61)
10
4,38-5,82 (5,05)
10
4,46-6,03 (5,47)
DOX
10
5,03-6,84 (6,09)
10
5,03-6,70 (5,88)
10
3,65-6,36 (5,08)
9
4,12-6,40 (4,94) og hvid blodlegemer (G /L)
Kontrol
10
5,3-9,6 (8,6)
0,785
10
4,5-14,1 (9,9)
0,446
10
6,0-10,3 (7,8 )
0,601
0 -
0,013
HIPEC
10
4,4-12,3 (7,4)
10
4,5-12,7 (9,3)
10
3,2-12,1 (10,7)
7
6,9-13,7 (7,5)
PDOX
10
5,9-13,2 (8,2)
10
6,1-12,5 (8,8)
10
4,6-14,4 (9,0)
10
4,9-11,1 (7,7)
DOX
10
3,6-10,5 (7,8)
10
4,7-12,2 (7,3)
10
4,6-12,5 (10.2)
9
3,9-6,4 (5,3)
Blodplader (G /L)
Kontrol
10
387-579 (480)
0,494
10
317-836 (555)
0,362
10
451-917 (657)
0,601
0 -
0,009
HIPEC
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489)
7
262-598 (451)
PDOX
10
382-592 (456)
10
395-856 (493)
10
328-1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476)
10
363-878 (464)
10
390-939 (654)
9
115-319 (244)
alaninaminotransferase (U /L)
Kontrol
10
31-52 (38)
0,463
10
34-54 (41)
0,525
10
21-54 (37)
0,245
0
-
0,838
HIPEC
10
24-47 (40)
10
21-62 (35)
10
31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10
28-52 (40)
10
24-59 (37)
10
32 -55 (45)
9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35)
10
30-59 (39)
10
34-61 (48)
8
26-76 (42)
aspartat transaminase (U /L)
Kontrol
10
19-54 (35 )
0,895
10
30-52 (36)
0,525
10
37-58 (43)
0,309
0 -
0,473
HIPEC
10
23-59 (38)
10
11-55 (35)
10
27-78 (34)
7
25-50 (36)
PDOX
10
22-47 (37)
10
17-49 (39)
10
27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37)
10
24-49 (30)
10
23-86 (36)
8
31-60 (39)
Blood urea nitrogen (mmol /L)
Kontrol
10
4,40-5,80 (4,80)
0,206
10
4,51-10,44 (4,81)
0,525
10
3,29-9,82 (6.32)
0,185
0 -
0,473
HIPEC
10
3,70-8,14 (5.10)
10
3,57-11,04 (5.35)
10
4,32-9,29 (7,50)
7
5,25-8,67 (6.38)
PDOX
10
3,58-7,66 (5,82)
10
3,32-11,58 (6,68)
10
6,52-13,58 (7,63)
9
4,71-8,05 (5,35)
DOX
10
1,76-7,90 (5,01)
10
3,32-10,00 (5,59)
10
1,76-10,53 ( 7,80)
8
4,50-9,26 (6.27)
kreatinin (mmol /l)
Kontrol
10
45,05-64,50 (60,50)
0,736
10
22,10-73,20 (55.00)
0,736
10
41,40-71,40 (50,25)
0,083
0 -
0,838
HIPEC
10
43,30-80,65 (57,35)
10
22,20-81,55 (46,97)
10
31,10-83,37 (52,96)
7
59,87-76,84 (66,51)
PDOX
10
42,80-75,80 (61,87)
10
22,13-86,25 (69,65)
10
45,30-75,80 (66,25)
9
44,38-79,56 (62,47)
DOX
10
22,30-69,30 (55,81)
10
27,28-75,90 (63,45)
10
42,38-73,76 (69,37)
8
47,72-78,64 (59.50)
Kreatin kinase (U /L)
Kontrol
10
74,3 til 205,6 (131,6)
0,864
10
81,3 til 247,8 (147,9)
0,878
10
71,4 til 182,1 (138,9)
0,968
0 -
0,473
HIPEC
10
78,8 til 259,2 (137,8)
10
66,8 til 248,9 (145,3)
10
63,4 til 225,2 (141,8)
7
98,3 til 265,1 (153,0)
PDOX
10
87,9 til 194,2 (139,4)
10
69,9 til 256,1 (144,4)
10
70,0 til 240,8 (130,6)
9
109,2-251,5 (195,2)
DOX
10
98,3 til 256,1 (152,4)
10
56,4 til 250,2 (135,8)
10
80,5 til 261,2 (133,8)
8
101.1- 407,6 (228,1)
kreatinkinase mb isoenzym (U /L)
Kontrol
10
73,0 til 162,5 (129,8)
0,717
10
62,5 til 195,6 (127,2)
0,878
10
57,0 til 199,8 (119,8)
0,509
0 -
0,040
HIPEC
10
74,2 til 228,2 (137,3)
10
42,9 til 219,8 (129,7)
10
52,8 til 237,7 (146,5)
7
50,2 til 188,1 (126,1)
PDOX
10
59,2 til 228,1 (133,9)
10
42,5 til 197,7 (133,2)
10
74,9 til 241,5 (158,2)
9
58,9 til 209,8 (143,7)
DOX
10
94,3 til 207,7 (122,1)
10
53,9 til 202,3 (128,2)
10
94,3 til 238,6 (148,4)
8
106,2-656,5 (259,3 )
* En del af data er ikke tilgængelige på grund af dyr død på det indstillede tidspunkt
ved 2-sidet parametrisk test og hvid blodlegemer på D 36, sammenligning mellem grupper:.. p =
0,001, DOX vs. HIPEC; p =
1.000, PDOX vs. HIPEC; p =
0,005, PDOX vs. DOX; Blodplader på D 36, sammenligning mellem grupperne: p =
0,041, DOX vs. HIPEC; p =
0,637, PDOX vs. HIPEC; p =
0,070, PDOX vs. DOX; Kreatin kinase mb isoenzym på D 36, sammenligning mellem grupperne: p =
0,012, DOX vs. HIPEC; p =
0,593, PDOX vs. HIPEC; . P =
0,131, PDOX vs. DOX
hæmatologisk toksicitet med markant reduktion i hvide blodlegemer (p
< 0,05) og blodplader (s Salg < 0,05), samt hjerte-toksiciteter med betydelige stigninger i kreatinkinase mb isoenzym (p
< 0,05). blev observeret på d 36 efter systemisk kemoterapi i DOX
detaljerede undersøgelser på myocardium toksiciteter
Histopatologiske undersøgelser under både lysmikroskop og transmissions elektron mikroskop blev ikke fundet nogen myokardiet toksiciteter i kontrolcenteret, den HIPEC og PDOX, men signifikante histopatologiske ændringer i myocardium blev fundet i alle dyr (100%, 10/10) i DOX, herunder koagulationsnekrose af myokardiet med dyb rød farvet cytoplasma, og den karyopyknosis (figur 6 C1, H1, P1, D1 sorte pile). Electron transmission mikrografer viste, at normal myocardium med rigelige mitokondrier pakket omkring normal kerne i Control og HIPEC, rige normal, men med lidt udvidede cristae mitokondrier spredt rundt normal kerne i PDOX, næsten fraværende mitokondrier omkring morfologisk senil og degenerative kerne i DOX. Desuden delvis myokardiet-lytiske nekrose (gul pil) og mitokondrier-pyknosis væk fra kernen (rød pil) var også tydeligt i DOX. Komplet, klare og kontinuerlige linjer af normale interkalerede diske i Control, den HIPEC og PDOX, men obskure, miste og diskontinuerlige interkalerede skiver blev fundet i DOX (hvide pile). Figur 6 lysmikrografer og elektron transmission mikrografier af kanin myocardium. Top panel (HE pletten, 400 ×), rutinemæssige histopatologiske træk af kanin myocardium ved længdesnit (skær på det øverste højre hjørne, sagittal afsnit), hvor C1, H1 og P1 demonstrerede rene og klare normale myokardie fibre i ordnede arrays, men D1 viste koagulationsnekrose af myocardiet med dybrøde farvede cytoplasma og karyopyknosis af myokardiet. Midterste øverste panel (10.000 ×), elektron transmission mikrografier af myokardiet med fokus på de elementer i kerner og peri-nuklear mitokondrier, hvor C2, H2 viste rigelige mitokondrier pakket omkring normal kerne, viste P2 rige mitokondrier spredt rundt normal kerne, men D2 viste næsten fraværende mitokondrier omkring morfologisk senil og degenerative kerne (gul stjerne viser forstørret kerne på grund af hævelse og den excentriske sammenlægning af heterochromatin, og grønne pile viser iøjnefaldende indad sammentrækning af den nukleare membran). Desuden delvis myokardium-lytisk nekrose (gul pil) og mitokondrier-pyknosis væk fra kernen (rød pil) var også tydeligt i DOX-behandlede dyr. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Usædvanlige erhvervet gastrisk stikkontakt obstruktion i barndommen: en case-rapport
• Vellykket behandling af en primær gastrisk plasmacytom efterligne umedgørlig mavesår ved hjælp af højdosis dexamethason terapi: en case-rapport