Синтез, идентификация и Исследования in vivo опухолевого нацеливания агента пептида доксорубицина (PDOX) для лечения перитонеального карциноматозе рака желудка с одинаковой эффективностью, но уменьшил toxicity

синтеза, идентификации и в естественных условиях исследования опухоли нацеливания агента пептида доксорубицина (PDOX) для лечения перитонеального карциноматоз рака желудка с одинаковой эффективностью, но снижается токсичность
Аннотация
Справочная информация
Эта работа, направленная синтезировать катепсина B (CTSB) -cleavable опухоль таргетирования пролекарство пептида доксорубицин (PDOX) и исследование эффективность in vivo и токсические на животной модели желудочного перитонеального карциноматоза (ПК).
Методы
PDOX синтезировали с использованием доксорубицина (DOX) прикрепление к CTSB-расщепляемого дипептида Ас-Phe-Lys, и пара-амино-бензилоксикарбонил (PABC) проставка. Модель PC была создана путем инъекции опухолевых VX2 клеток в желудке к югу слизистой оболочки 40 кроликов, которые затем были рандомизированы на 4 группы: контроль (п = 10) без лечения, HIPEC (п = 10) получение циторедуктивной операции (CRS) плюс гипертермическая внутрибрюшинного химиотерапии (HIPEC), то PDOX (п = 10) и DOX (п = 10), получавших системной химиотерапии с PDOX 50,0 мг /кг или DOX 5,0 мг /кг, соответственно, после CRS + HIPEC.
Результаты
медиана пережитки (ОС) были 23,0 г (95% ДИ: 19,9 г - 26,1 г) в контроле, 41,0 г (36,9 г - 45,1 г) в HIPEC, 65,0 г (44,1 г - 71,9 г) в PDOX и 58,0 г (39,6 г - 54,4 г) в DOX. По сравнению с контрольной, операционная система была расширена на 70% в HIPEC (р
&л; 0,001) и дополнительно продлен на 40% в DOX (р = 0,029
) и на 58% в PDOX (р =
0,021), а также тяжесть ПК была снижена в HIPEC и понижали в PDOX и DOX. Животные, получающие лечение DOX показали гематологические токсичностью с заметным уменьшением белых кровяных клеток и тромбоцитов, а также сердечных токсичностью со значительным увеличением креатинкиназы мб изофермента, очевидном миокарда коагуляции некроза, значительного ядерного перерождения, пери-ядра удаления митохондрии, митохондрии-пикноза, и аномальные интеркалирован- диски. Но эти токсические не были очевидны в PDOX.
Выводы
PDOX является вновь синтезированный опухоль таргетирования пролекарством DOX. По сравнению с DOX, PDOX имеет одинаковую эффективность, но уменьшил гематологических и сердечной токсичностью при лечении кролика модель желудка ПК.
Ключевые слова
перитонеального карциноматоз рак желудка Пептид доксорубицин Циторедуктивная хирургия гипертермическая внутрибрюшинного химиотерапия Справочная
GC является одним из самых общие злокачественных новообразований в развивающихся странах, где она занимает второе место по заболеваемости и третье место по смертности среди мужского населения, и занимает четвертое место с точки зрения заболеваемости и смертности среди женского населения, в соответствии с самым последним глобальным статистика [1, 2]. GC не является третьей ведущей причиной смертности от рака в Китае [3], где более 70% GC уже стала клинически выдвинутая во время хирургического исследования, в одиночку, таким образом, хирургическая резекция больше не целебным [4].
PC в ГК уже давно считается как фатальная клинической сущности. Она определяется как имплантации опухолевых клеток по брюшной полости и характеризуется наличием опухолевых узелков различного размера, числа и распределения на поверхности брюшины, а также злокачественных асцит, часто приводит к локорегионального заболеваемости без широких системных метастазов. У больных с желудочной ПК сталкиваются с удручающие результаты, медиана выживаемости около 6 месяцев [5].
Там нет стандартного лечения желудка ПК. Современные методы лечения для таких ПК являются системная химиотерапия, лучший уход за поддержку и паллиативной терапии. Для того, чтобы решить эту проблему, новый метод лечения называется CRS плюс HIPEC была разработана в течение последних 3-х лет, принимая преимущества хирургии для уменьшения видимой опухолевой и региональной гипертермии химиотерапии для ликвидации микрометастазов [6]. Растущие доказательства предположил, что сочетание CRS и HIPEC может принести пользу для выживания отдельных больных с желудочной ПК. В нашем предыдущем экспериментальном исследовании [5], мы также доказали, что CRS + HIPEC действительно может принести пользу выживания с приемлемой безопасности, предоставляя доказательства в поддержку этой комбинированной стратегии для лечения отобранных пациентов с желудочным ПК.
При разработке ПК, GC клетки секретируют ферменты для облегчения раковых клеток высева и колонизация на брюшине. CTSB является одним из ключевых ферментов в этот критический процесс, сверхвыражен в GC, а также других видов рака [7-9] и принимает активное участие в инвазии рака [10-12]. С другой стороны, чрезвычайно низко выражена в нормальных клетках и неактивен или теряет активность, как только она диспергируют в водной среде от клеток [13]. Таким образом, CTSB уже давно рассматривается в качестве цели кандидата в терапии рака [14].
Установлено в исследовании MAGIC, что антрациклинов содержится схема является полезной химиотерапии для GC [15]. DOX является типичным представителем антрациклинов. Хотя DOX является важным лекарством при химиотерапии, его токсические очевидны, такие как сердечные заболевания, токсические и подавление костного мозга. Для сохранения лечебного эффекта при одновременном снижении побочных эффектов, Dubowchik и др [16-18] разработан смарт-пролекарство DOX, PDOX (рисунок 1). В этом модифицированном DOX, Ac-Phe-Lys является дипептид специфическим для CTSB и PABC (пара-aminobenzyloxycarbonyl) является самостоятельным immolative проставка [16]. Пролекарство неактивна, когда имеется мало активности CTSB, такие, как нормальные ткани и периферической крови, таким образом, избежать побочных эффектов на нормальные ткани. Во время вторжения рака, активированный CTSB закончен экспрессируется на внешней мембране раковых клеток вторгшийся [19, 20], который расщепляет дипептида Ac-Phe-Lys в связи Lys-PABC [16]. Затем подвергается PABC распорка может самостоятельно гидролизу на деацилированием [21] и свободных молекул DOX освобождены, в результате прямого убийства раковых клеток вторжения [16]. Рисунок 1 Структура PDOX (как показано в коробке), химический синтез и механизм действия. PDOX успешно синтезировали в соответствии с химическим процессом 7-ступенчатой. Его химическое строение является Ac-Phe-Lys-PABC-Dox • HCl (показано в коробке), а молекулярная формула C52H60ClN5O16. PDOX содержит CTSB-расщепляемую дипептид Ac-Phe-Lys (двойные красные Slashes) с PABC распорку (красная слэш) и противораковый препарат DOX. Когда PDOX достигает CTSB обогащенной области, такой как фронт вторжения рака, дипептид Ac-Phe-Lys расщепляется CTSB в связи Lys-PABC, обнажая PABC прокладку, которая затем подвергают гидролизу самопроизвольно (красный слэш), выпустив бесплатный DOX при инвазии рака фронта. Таким образом, PDOX может оказать цитотоксичность вторжение раковых клеток, защищая нормальные клетки от чрезмерного воздействия наркотиков, стратегия называется пассивным таргетной терапии. CTSB:. Катепсина Б.
В этом исследовании мы синтезировали PDOX и оценивали эффективность и безопасность CRS + HIPEC с молекулярной целевой терапевтической схемы PDOX для целенаправленного лечения кролика модели желудка ПК
Результаты
Синтез и идентификация PDOX
PDOX успешно синтезировали в соответствии с ранее представленными 7-ступенчатой ​​химического процесса (рисунок 1) [16-18].
PDOX (Ac-Phe-Lys-PABC-DOX · HCl) был красный твердый порошок с молекулярной массой 1046.51 (МС: м /Z, вычисленная для с <суб> 52H <суб> 60ClN <суб> 5О <суб> 16: 1046,52, найдено: 1046,50), химическая чистота 99,1% (по данным ВЭЖХ) , структура C <суб> 52H <суб> 60ClN <югу> 5О <суб> 16 (обоими H 1-ЯМР и C 13-ЯМР) (рисунок 2) и температура плавления 180 ° с (с разложением), который устойчив при температуре от -5 ° с до 0 ° с в течение 36-54 месяцев, температура окружающей среды в течение 24 месяцев, решаемой в воде, частично решаемая в метаноле и этаноле. PDOX используемый в данном исследовании хранили в темном, сухом месте при температуре 4 ° С. Рисунок 2 Структура идентификаций подтверждается H 1 H-ЯМР (а) и с 13 -ЯМР (В). строительство
ПК модель и гистологические характеристики
была создана Кролик модель желудка ПК у всех животных (100%, 40/40). На D 8 после инокуляции опухолевых клеток, маленькие, твердые и прозрачные узелки опухоли, разработанных на более сальником и типичного язвенного рака около 0,5-1,0 см в диаметре, сформированный на полости желудка. Не наблюдалось асцит. Не очевидно компьютер не был найден и в других регионах. Там не было никаких различий в тяжести ПК среди всех кроликов. Это может быть эквивалентно клинической стадии I PC по критериям Gilly [22] (рис 3А).
Все исследуемые образцы опухолей показали обширную инвазивный рост и тканей разрушения. Опухоли, на большой кривизне антрального отдела желудка, проник в слизистом слое, с образованием язвы. Гистопатологическая исследование показало опухоль гнёзда, проникающие всю стенку желудка, с типичной инвазии в мышечный слой и желудочных желез (рис 3б). Опухолевые клетки круглые, овальные или атипичная морфология со многими патологическими фигурами митоза. Были также заметные инфильтрацией лимфоцитов, плазматических клеток и других воспалительных клеток (рис 3C). Апоптотическая и некротические клетки опухоли наблюдались в центральной области опухолевых узлов (рис 3D). Типичные PC представлены в виде узелков опухоли на поверхности сальником (рис 3Е) и внутрибрюшинных метастазов в лимфатических узлах также наблюдались (рис 3F).
Типичный язвенный рак с PC наблюдалась в посмертном патологических осмотров кроликов в контроле. Стенка желудка была полностью захвачена опухолью, чтобы создать язву рака, заключенная по конфлюэнтны узелки на большой сальник, образуя большой блок опухоли. Брюшной стенки и диафрагмы были полностью захвачена опухолью. Многие опухолевые узелки образуются на стенке кишечника, брыжейки и забрюшинного пространства. Кровавый асцит может быть более 100 мл. Все функции аналогичны характеристикам клиникопатологическими желудка ПК у больных (рис 3G). Рисунок 3 Характеристики кролика модели желудочного PC и HE окрашивали микрофотографии. (A) Картина ранней модели кролика желудка ПК, где заметные опухолевые узлы, разбросанные по брюшине и большой кривизны желудка; (B) картины язвенного GC; (C &Amp; D) Его окрашивали картину под микроскопом, показывая инвазивный рост опухолевых клеток гнездах, пропитывающих стенки желудка (панель C, 400 ×) и некротических опухолевых клеток в зоне недостаточного кровоснабжения (панели D, 400 ×); (Е) опухолевые узелки на поверхности сальнике (200 ×); (F) внутрибрюшинные метастазами в лимфатических узлах (200 ×); (G) аутопсии патологические осмотры кролика.
Выживания
животных наблюдалась для записи ОС. Два длинных кроликов выживающие (один в PDOX, а другой в DOX, живущих более чем на 100 г) были подвергнуты эвтаназии на 100-й день передозировкой инъекции 2% пентобарбитала натрия. Медиана (95% доверительный интервал, ДИ) ОС была 23,0 г (19,9 - 26,1 г) в контроле, 41,0 г (36,9 - 45,1 г) в HIPEC, 65,0 г (44,1 - 71,9 г) в PDOX и 58,0 г (39.6-54.4 г) в DOX. По сравнению с контрольной, операционная система была расширена, по крайней мере, на 70% в HIPEC (р
&л; 0,001, логарифмический ранговый). По сравнению с HIPEC, ОС было продлено на 40% в DOX (р = 0,029
, логарифмический ранговый) и на 58% в PDOX (р = 0,021
, логарифмический ранговый) (рис 4A ). Рисунок 4 В естественных условиях эффектов PDOX на модели кролика ПК. (A) Кривые выживаемости Каплана-Мейера для управления, HIPEC, PDOX и DOX; (Б) изменение массы тела у этих групп.
Опухоль бремя на выживание конечной точки
На конечной точке исследования, бремя опухоли в контроле был самым тяжелым, с весом опухоли (137,51 ± 16,09), г-опухоленосителей соотношение (вес опухоли к массе тела) (7,88 ± 0,85)%, геморрагический асцит из (65,50 ± 33,45) мл и EPCI балл (9,50 ± 2,17). По сравнению с контрольной, то HIPEC значительно уменьшенный вес опухоли (76,50 ± 11,41) г (р = 0,007
) и отношение несущей опухоль (3,94 ± 0,54)% (р = 0,001
), но не EPCI оценка (9,50 ± 2,17)% (р = 0,420
) и кровавый асцит [(29,16 ± 15,30) мл, р = 0,085
]. По сравнению с HIPEC, тяжесть PC была еще уменьшена в обоих PDOX и DOX с EPCI балла (6,40 ± 2,07, р = 0,020
в обоих PDOX и DOX против HIPEC) и кровавых асцита (0.00 мл, р
&л; 0,001 в PDOX и DOX против HIPEC); в то время как не было никаких существенных различий в весе опухоли [(65,30 ± 14,55) г, р = 0,552
, PDOX против HIPEC; (48,74 ± 16,31) г, р = 0,180
, DOX против HIPEC)] и отношение несущих опухоли [(2,91 ± 0,69)%, р = 0,552
, PDOX против HIPEC; (2.13 ± 0.78)%, р = 0,180
, DOX против HIPEC]. Там не было никаких существенных различий в опухолевой между PDOX и DOX (таблица 1) .table 1 EPCI оценка выживаемости в конечной точке в 4-х группах кроликов [диапазон (медиана)]

Control (п = 10)

HIPEC (п = 10)

PDOX (п = 10)

DOX (п = 10)

Счет EPCI в различных регионах <бр> Регион I
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (2)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
области II
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
3 ~ 3 (3)
Регион III
1 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (1)
Регион IV
0 ~ 3 (3)
0 ~ 3 (1)
0 ~ 3 (0)
0 ~ 3 (0)
асцит (мл) *
12,0 ~ 113,4 (56,0)
0,0 ~ 94,0 (18,1)
0.0 ~ 0.0 (0.0)
0.0 ~ 0.0 (0.0)
EPCI score§
7 ~ 13 (11)
5 ~ 12 (9)
3 ~ 9 (6)
3 ~ 9 (6)
* Асцит: р = 0,323
, HIPEC по сравнению с контролем; р
&л; 0,001, PDOX против HIPEC; р
&л; . 0.001, DOX против HIPEC
§The EPCI счет: р = 0,073
, HIPEC по сравнению с контролем; р = 0,020
, PDOX против HIPEC; р = 0,020
, DOX против HIPEC; р
= 0,474, PDOX против DOX.
изменения Вес тела
вес тела каждого животного регистрировали каждые 4 д. Не были обнаружены значительные различия в исходной массы тела 4-х групп до лечения. Периоперационная масса тела снизилась во всех группах из-за ночного голодания. В контроле, вес тела восстанавливается, как только прием пищи было возобновлено, но опять постепенно уменьшается до конечной точки исследования. В 3-х группах лечения, послеоперационная масса тела значительно снизилась после построения модели и до минимума 4 дней после CRS + HIPEC, а затем остался на низком уровне в течение послеоперационной фазы до химиотерапии не была завершена. Масса тела начала увеличиваться при D 44 в HIPEC и D 56 в обоих PDOX и DOX, и постепенно увеличивается до более высокого уровня, что связано как к росту опухоли живых опухолевого роста кроликов и смерти неудачи кролики с меньшей массой тела. После этого масса тела постепенно снова убывала до конечной точки исследования в обоих PDOX и DOX (рис 4б).
Посмертных патологические экзамены
К моменту смерти животного, подробная информация о посмертных патологических экзаменов была приведены в таблице 2 .
Помимо систематических обследований всех анатомических участков для возможных метастазов рака, особое внимание было уделено легких и печени метастазов. Как показано на рисунке 5, в контроле, наблюдались обширные метастазы в печень у 8 животных, но не Метастазы не были очевидны во всех животных, из-за очень агрессивного поведения роста опухоли привело к короткой ОС в этой группе животных (рис 5 A2, B2). В HIPEC, как животные жили гораздо дольше из-за CRS + HIPEC, наблюдалось меньшее количество метастазов в печень в 4-х животных, но наблюдались значительно намного более Метастазы в 7 животных (рисунок 5 A3, B3). В PDOX и DOX, животных развивались значительно меньше метастазы в обоих печени и легких, хотя операционная система была дополнительно улучшена замечательно, потому что животные получали не только CRS + HIPEC контролировать местные региональные метастазы, но и системной химиотерапии для управления Hematogenous метастаз и лимфатической метастазы (Рисунок 5 A4, B4, A5, B5) .table 2 Результаты посмертного патологического исследования в 4 группах, выраженное в% кроликов

Control (п = 10)

HIPEC (п = 10)

PDOX (п = 10)

DOX (п = 10)

р 1

р 2
<бр> р 3

р 4

язвенный GC
100,0 100,0

100,0 100,0

NS
NS NS

NS
метастазы
разрезов 100.0
30,0
30,0
20,0
0.001
NS
NS
NS
метастазы
0,0
70,0
30,0
30,0
0.001
NS
NS NS

стенки грудной клетки метастаз
0,0
20,0 10,0

0,0
NS
NS NS

NS
плевральной выпот
10,0
70,0
30,0
30,0
0,008
NS
NS
NS
Вирхов лимфатических узлов метастазами
30,0
70,0
60,0
40,0
NS
NS NS

NS
перикарда метастазы
0.0 <бр> 20,0
0,0
0,0
NS
NS
NS NS

Раковые диафрагма
100,0
70,0 20,0

20,0
NS
0.028
0,028
NS
торт большим сальником
100,0
80,0
40,0
50,0
NS NS

NS
NS
метастазы в печень
80,0
40,0
30,0
30,0
NS
NS NS

NS
Селезенка метастазы
0.0
0,0
20,0
0,0
NS
NS
NS NS

забрюшинного метастазы
100,0
60,0
60,0
50,0
0,029
NS NS

NS
левой почечной метастазы
0,0
10,0
0.0
0.0
NS
NS NS

NS
правой почечной метастазы
0.0
0.0
0.0
0.0
NS
NS
NS
NS
почки капсула нашествие
100.0 <бр> 50,0
0,0
20,0
0,012
0,012
NS
NS
Кишечник стены высева
100,0
80,0
20,0
10,0 <бр> NS
0,009
0,002
NS
Брыжейка высева
100,0
80,0
30,0
10,0
NS
0,028
0,002
NS
брюшной рак стены
100.0
60,0
30,0
0.0
0,029
NS
0,004
NS
тазового высева
100.0 <бр> 50,0
30,0
10,0
разрыв 0,170
NS
NS NS

мочевой пузырь
0,0
0,0
20,0 10,0

NS
NS
NS NS

Моча удерживания
50,0
50,0
30,0
10,0
NS
NS NS

NS
По 2-сторонней хи-квадрат (χ 2)
теста. р
1, HIPEC по сравнению с контролем; р
2, PDOX против HIPEC; р
3, DOX против HIPEC; Стр.
4, PDOX против DOX не
NS:. Никакого значения изображения по сравнению с контролем, тяжесть ПК была значительно уменьшена в насечек метастазов, легочных метастазов, плеврит, забрюшинных метастазов, капсулы почки вторжения, брюшной рак стенки и тазового высева в HIPEC. По сравнению с HIPEC, тяжесть ПК была значительно уменьшена в раковой диафрагмы, почек капсулы инвазии, стенки кишечника и брыжейки высева посевом в PDOX, и в раковой диафрагмы, стенки кишечника, брыжейки высева высева и брюшной стенки рака в DOX. Там не было никаких статистически значимых различий между PDOX и DOX в системных метастазов.
Рисунок 5 Метастазы (панель А) и метастазы в печени (панель В) в данном исследовании. (А1) (В1) показал точное число легочных и печеночных метастазов в каждой самки кролика из 4-х групп, соответственно; (А2 до А5) показал представительные метастаз легкого в контроле, в HIPEC, в PDOX и DOX, соответственно; (В2 B5) показал, представительные метастазы в печени в контроле, в HIPEC, в PDOX и DOX, соответственно; (A6) показали микрофотографии легочных метастазов в HIPEC, характеризующихся инвазии рака, подавление легочной ткани, образования внутрисосудистых тромбов опухоли и показного воспалительных клеток инфильтрации (А6-1, Его пятно, 200 ×) (A6-2, HE Stain, 400 ×). (B6) показали микрофотографии метастазов в печени в контроле, характеризующихся обширной деструкцией ткани печени, вторгаясь раковые клетки, воспалительные клетки инфильтрацию и кровоизлияния в ткани печени (B6-1, HE испачкать, 100 ×) (B6-2, HE испачкать , 200 ×).
Peripheral профиль крови и основные изменения биохимического
Там не было никаких различий в анализах периферической крови клеток на D 2, D 6 и D 14 среди 4-х групп, но белых кровяных клеток и тромбоцитов были значительно снизился на 36 г после системной химиотерапии в DOX (р
< 0,05). Там не было никаких различий в печени и функции почек на протяжении всего эксперимента среди 4-х групп. С точки зрения параметров функций сердца, не было никаких различий в креатинкиназы и креатинкиназы MB изофермента на D 2, D 6 и D 14 среди 4-х групп, но креатинкиназы мб изофермента была значительно увеличена на D 36 после системной химиотерапии в DOX (р
&л; 0,05). Особого внимания, 2 животных в DOX с короткой ОС 47 г и 53 г имели исключительно выше в сыворотке крови креатинкиназы MB изофермент уровни, 467,5 Ед /л и 656,4 Ед /л соответственно (р &
Lt; 0,05) (табл 3) .table 3 рутинные анализы крови и биохимические результаты испытаний в 4-х группах кроликов [диапазон (медиана)]
Группа

D2

D6

D14 <Ьг>
D36 *

п

Значение

р

п



Value р <бр>
п

Значение

р

п

Значение

р

Эритроциты ( T /L)
управления
10
5.03-6.93 (6.26)
0,849
10
5.08-7.76 (6.07)
0,494
10
4,29 -6,32 (5,54)
0,382
0
-
0,203
HIPEC
10
5.13-7.58 (6.48)
10
4.66-7.15 (5.65 )
10
3.54-7.30 (5.68)
7
4.28-7.36 (5.28)
PDOX
10
4.17-7.16 (5.94)
10 <бр> 4.97-6.49 (5.61)
10
4.38-5.82 (5.05)
10
4.46-6.03 (5.47)
DOX
10
5.03-6.84 (6.09)
10
5.03-6.70 (5.88)
10
3.65-6.36 (5.08)
9
4.12-6.40 (4.94)
белых клеток крови (г /л)
управления
10
5.3-9.6 (8.6)
0,785
10
4.5-14.1 (9.9)
0,446
10
6.0-10.3 (7.8 )
0,601
0
-
0,013
HIPEC
10
4.4-12.3 (7.4)
10
4.5-12.7 (9.3)
10
3.2-12.1 (10.7)
7
6.9-13.7 (7.5)
PDOX
10
5.9-13.2 (8.2)
10
6.1-12.5 (8.8)
10
4.6-14.4 (9.0)
10
4.9-11.1 (7.7)
DOX
10
3.6-10.5 (7.8) 10

4.7-12.2 (7.3)
10
4.6-12.5 (10.2)
9
3.9-6.4 (5.3)
Тромбоциты (G /L)
управления <бр> 10
387-579 (480)
0,494
10
317-836 (555)
0,362
10
451-917 (657)
0,601
0
-
0,009
HIPEC
10
229-634 (373)
10
363-758 (408)
10
390- 709 (489)
7
262-598 (451)
PDOX
10
382-592 (456)
10
395-856 (493)
10
328-1002 (500)
10
201-532 (363)
DOX
10
330-647 (476)
10
363-878 (464)
10
390-939 (654)
9
115-319 (244)
аланинаминотрансфераза (U /L)
Control
10
31-52 (38)
0,463
10
34-54 (41)
0,525
10
21-54 (37)
0,245
0 <бр> -
0,838
HIPEC
10
24-47 (40) 10

21-62 (35)
10
31-66 (42)
7
30-59 (48)
PDOX
10
28-52 (40) 10

24-59 (37)
10
32 -55 (45)
9
25-79 (40)
DOX
10
29-59 (35)
10
30-59 (39) <бр> 10
34-61 (48)
8
26-76 (42)
аспартаттрансаминазу (U /L)
управления
10
19-54 (35 )
0,895
10
30-52 (36)
0,525
10
37-58 (43)
0,309
0
- Знакомства 0,473
HIPEC
10
23-59 (38)
10
11-55 (35)
10
27-78 (34)
7 <бр> 25-50 (36)
PDOX
10
22-47 (37)
10
17-49 (39)
10
27-69 (36)
9
20-41 (30)
DOX
10
24-47 (37)
10
24-49 (30)
10
23-86 (36)
8
31-60 (39)
азота мочевины крови (ммоль /л)
управления
10
4.40-5.80 (4.80)
0,206
10
4.51-10.44 (4.81)
0,525
10
3.29-9.82 (6.32)
0,185
0
-
0,473
HIPEC
10
3.70-8.14 (5.10)
10
3.57-11.04 (5.35)
10
4.32-9.29 (7.50)
7
5.25-8.67 (6.38)
PDOX
10
3.58-7.66 (5.82)
10
3.32-11.58 (6.68)
10
6.52-13.58 (7.63)
9
4.71-8.05 (5.35)
DOX
10
1.76-7.90 (5.01)
10
3.32-10.00 (5.59)
10
1.76-10.53 ( 7,80)
8
4.50-9.26 (6.27)
Креатинин (мкмоль /л)
управления
10
45.05-64.50 (60.50)
0,736
10
22.10-73.20 (55.00)
0,736
10
41.40-71.40 (50.25)
0,083
0
-
0,838
HIPEC
10
43.30-80.65 (57.35)
10
22.20-81.55 (46.97)
10
31.10-83.37 (52.96)
7
59.87-76.84 (66.51)
PDOX
10
42.80-75.80 (61.87)
10
22.13-86.25 (69.65)
10
45.30-75.80 (66.25)
9
44.38-79.56 (62.47)
DOX
10
22.30-69.30 (55.81)
10
27.28-75.90 (63.45)
10
42.38-73.76 (69.37)
8
47.72-78.64 (59.50)
креатинкиназы (U /L)
Control
10
74.3-205.6 (131,6)
0,864
10
81.3-247.8 (147,9)
0,878
10
71.4-182.1 (138,9)
0,968
0
-
0,473
HIPEC
10
78.8-259.2 (137.8) 10

66.8-248.9 (145,3)
10
63.4-225.2 (141,8)
7
98.3-265.1 (153,0)
PDOX
10
87.9-194.2 (139,4)
10
69.9-256.1 (144,4)
10
70.0-240.8 (130,6)
9
109.2-251.5 (195.2) <бр> DOX
10
98.3-256.1 (152,4)
10
56.4-250.2 (135,8)
10
80.5-261.2 (133,8)
8
101.1- 407,6 (228,1)
креатинкиназы МБ изофермент (U /L)
управления
10
73.0-162.5 (129,8)
0,717
10
62.5-195.6 (127,2)
0,878
10
57.0-199.8 (119,8)
0,509
0
-
0,040
HIPEC
10
74.2-228.2 (137,3)
10
42.9-219.8 (129,7)
10
52.8-237.7 (146,5)
7
50.2-188.1 (126,1)
PDOX
10
59.2-228.1 (133,9)
10
42.5-197.7 (133,2)
10
74.9-241.5 (158,2)
9
58.9-209.8 (143,7)
DOX
10
94.3-207.7 (122,1)
10
53.9-202.3 (128,2)
10
94.3-238.6 (148,4)
8
106.2-656.5 (259,3 )
* Часть данных не доступна из-за смерти животных в установленное время Ру по 2-сторонний непараметрического теста
Белые клетки крови на D 36, сравнение между группами:.. р =
0,001, DOX против HIPEC; р =
1.000, PDOX против HIPEC; р = 0,005
, PDOX против DOX; Тромбоциты на D 36, сравнение между группами: р = 0,041
, DOX против HIPEC; р = 0,637
, PDOX против HIPEC; р = 0,070
, PDOX против DOX; Креатинкиназа Мб изофермента на D 36, сравнение между группами: р = 0,012
, DOX против HIPEC; р = 0,593
, PDOX против HIPEC; . Р = 0,131
, PDOX против DOX
токсичностью с гематологическими заметное снижение белых кровяных клеток (р
&л; 0,05) и тромбоцитов (р
≪ 0,05), а также сердечных токсичностью со значительным увеличением креатинкиназы мб изофермента (р
≪ 0,05). наблюдались на 36 г после системной химиотерапии в DOX
Детальные исследования на миокард токсичностью
Гистопатологическая исследования под микроскопом как в легком и просвечивающего электронного микроскопа не найдено ни одного миокард токсичностью в контроле, в HIPEC и PDOX, но значительные гистопатологические изменения миокарда были обнаружены у всех животных (100%, 10/10) в DOX, в том числе коагуляционного некроза миокарда с глубоким красным окрашенного цитоплазме, и кариопикноза (рис 6 C1, H1, P1, D1 черные стрелки). микрофотографии передачи электронов показали, что нормальный миокард с обильным митохондриях упакованными вокруг нормального ядра в контроле и HIPEC, богатые нормально, но с немного растягиванные крист митохондрии разбросаны вокруг нормального ядра в PDOX, практически отсутствуют митохондрии вокруг морфологически старческого и дегенеративных ядра в DOX. Кроме того, частично миокард-литический некроз (желтая стрелка) и митохондрии-пикноз от ядра (красная стрелка) также были очевидны в DOX. Полные, четкие и непрерывные линии нормальных интеркалированных дисков в контроле, в HIPEC и PDOX, но малоизвестных, теряющих и разрывными интеркалированных дисков были обнаружены в DOX (белые стрелки). Рисунок 6 Light микрофотографии и микрофотографии передачи электронов кролика миокарда. Верхняя панель (HE пятно, 400 ×), обычные гистологические особенности кролика миокарда в продольном сечении (вставки на верхнем правом углу, в сагиттальном разрезе), где C1, H1 и P1 продемонстрировали чистые и четкие нормальные волокон миокарда в упорядоченных массивах, но D1 показал коагуляционного некроза миокарда с темно-красным окрашенного цитоплазмой и кариопикноза миокарда. Средний верхняя панель (10000 ×), микрофотографии передачи электронов миокарда с упором на особенности ядер и пери-ядерных митохондрий, где С2, Н2 показали обильные митохондрии упакованы вокруг нормального ядра, P2 показали богатые митохондрии разбросанные вокруг нормального ядра, но D2 показал, практически отсутствуют митохондрии вокруг морфологически старческого и дегенеративных ядра (желтые звезды, показывающие увеличенное ядро ​​из-за отека и эксцентричного агрегации гетерохроматина и зеленые стрелки, показывающие заметное внутреннее сжатие ядерной мембраны). Кроме того, частично миокард-литический некроз (желтая стрелка) и митохондрии-пикноз от ядра (красная стрелка) также были очевидны в DOX лечение животных. После подготовки кожи и дезинфекции, опухоль вырезали из кролика-носителя и помещали в ледяной 0,9% раствором хлорида натрия. Брюшной кожа была очищены и продезинфицированы. Брюшной кожа была очищены и продезинфицированы. Post Mortem патологические обследования, которые входят серьезной патологии, такие как размер опухоли и распределений; Двухсторонняя р
&л; Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Необычное приобрела желудка обструкции в младенческом возрасте: доклад случай
• Успешное лечение первичного желудка плазмоцитоме, имитирующей неразрешимыми язвы желудка с помощью высоких…