Påvirkning av HRH2 promoter polymorfisme på avvikende DNA metylering av DAPK og CDH1in mage epitel

Påvirkning av HRH2
promoter polymorfisme på avvikende DNA metylering av DAPK Hotell og CDH1
i mage epitel
Abstract
Bakgrunn
Avvikende metylering mønstre i CpG island er kjent for å være innflytelsesrike i genet lyddemping. Histamin spiller viktige fysiologiske roller i øvre mage-tarmkanalen og virker via H2-reseptor. Vi rapporterer en undersøkelse av effekten av HRH2
promoter polymorfisme (rs2607474 G > A) på metylering av DAPK Hotell og CDH1
Metoder
Non kreftmageslimhinnen prøver ble hentet fra. 115 pasienter med magekreft (GC) og 412 ikke-kreft fag (ikke-GC). Metylering status av gener ble bestemt ved MSP. Den genotyping av rs2607474 ble utført av PCR-SSCP.
Resultater
metylering av DAPK Hotell og CDH1
ble observert i 296 og 246 fag, henholdsvis. Hyppigheten av CDH1
metylering i fagene med GC var betydelig lavere i kreft lesjon enn hos ikke kreft slimhinner, mens det av DAPK
metylering var ikke annerledes. Den allel fordeling av rs2607474 var 401GG, 119GA og 7AA. GG homozygot var assosiert med en signifikant økt risiko for metylering av både DAPK Hotell og CDH1 product: (p < 0,0001 og p = 0,0009, henholdsvis). I den ikke-GC fag eller mer enn 60 år, ble GG homozygot tettere knyttet til både DAPK Hotell og CDH1
metylering. Men denne genotype ikke viser en økt risiko for utvikling av metylering av begge gener i pasienter med GC. I H. pylori
negative fag, viste GG homozygot en økt risiko for metylering av både DAPK Hotell og CDH1 product: (p = 0,0074 og p = 0,0016, henholdsvis), mens denne genotypen var assosiert med økt risiko for utvikling av DAPK
metylering i H. pylori
positive pasienter (p = 0,0018). I tillegg, i fag som er eldre enn 60 år, atrofi og metaplasi score var signifikant høyere i GG homozygot (p = 0,011 og p = 0,039, henholdsvis) og en signifikant korrelasjon ble observert mellom alder og atrofi eller metaplasi.
konklusjoner
Våre resultater tyder på at rs2607474 GG homozygot ensidige betydelig økt risiko for alders- og betennelsesrelaterte DAPK Hotell og CDH1
metylering.
nøkkelord
HRH2 Genetisk polymorfisme Aberrant DNA metylering bakgrunn
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP er en av de mest vanlige kreftformer over hele verden og er forbundet med en høy dødelighet [1, 2]. Flere kreftformer, inkludert mage svulster, viser metylering av flere gener, inkludert E-cadherin (CDH1
); Eksporter døden-assosiert protein kinase (DAPK
) og cyclin-avhengig kinase inhibitor 2A (CDKN2A
) [3, 4]. Metylering av promoter CpG øyer fører til DNA strukturelle endringer, og consequentially, geninaktivering [5]. Mange studier har identifisert dette lyddemping ved DNA-metylering som en mekanisme ansvarlig for tumor suppressor inaktivering. Imidlertid er noen gener også metylert i ikke-neoplastiske vev på grunn av aldring [6, 7], og det har også blitt foreslått at genet metylering oppstår under kronisk inflammasjon i forskjellige vev [8-10]. I mageslimhinnen, er det blitt postulert at metylering av CpG øy er indusert av Helicobacter pylori
(H. pylori
) infeksjon hos ikke-kreft mucosa [11, 12] og betraktes som de forstadier til kreft i mage-carcinogenese [ ,,,0],1. 3]. Blant flere gener, DAPK
, CDH1
og CDKN2A
er kjent for å være hyppig metylert i ikke-neoplastiske mageslimhinne, og dette metylering er knyttet til alder, H. pylori-infeksjon
, histologiske grad av gastritt og magekreft [11, 13, 14].
imidlertid histamin, en av de aktive aminer utgitt i respons på en rekke fysiologiske stimuli, er vidt fordelt i mage-tarmkanalen inkludert i magesekken og er involvert i patogenesen av gastro-duodenal magesår og magebetennelse [15]. I magesekken, H2-reseptorer, selv om vidt distribuert i kroppsvev, synes å ha en sentral rolle i reguleringen av syresekresjon, som bekreftet ved den utbredte bruk av H2-reseptorantagonister ved behandling av syrerelaterte lidelser [16, 17] . Histamin spiller en viktig rolle i gastrisk inflammasjon som virker via den H2-reseptor, selv om H. pylori-infeksjon
er en av de viktigste faktorer som bidrar til utvikling av gastro-duodenal inflammasjon [18]. Nylig har sammenhengen mellom genetisk polymorfisme av histamin reseptor gener og mottakelighet for schizofreni, og klinisk respons på klozapin behandling undersøkt [19]. Denne undersøkelse av polymorfismer av HRH2
, koding for H2-reseptor, avslører sammenhengen mellom genotype på HRH2
-1018 G /A locus (rs2607474) og klinisk respons på klozapin behandling. I tillegg har denne rapporten vist at rs2607474 er plassert i et forsterkerelement av den HRH2
genpromoter [19, 20] og det er derfor sannsynlig at denne varianten induserer endringer i ekspresjonen av reseptorer. Ifølge HapMap-JPT, er det bare en koblingsulikevekt (LD) blokk, som består av rs686874, rs2067474, rs678591, rs645574, rs2890892 og rs11954815, i HRH2. Alle de andre SNP er mindre polymorfismer. Derfor spekulert vi at dette LD blokken påvirke ekspresjon og /eller funksjon av histamin H2-reseptor og er valgt rs2607474 som en Tag SNP. Det har ennå ikke vært noen rapport om rs2607474 innvirkning på utvikling og progresjon av gastrointestinale forstyrrelser. Vi antok at rs2607474 kan påvirke utviklingen av avvikende DNA metylering mønstre i mageslimhinnen.
I denne studien undersøkte vi sammenhengen mellom HRH2
promoter polymorfisme (rs2607474) og DNA metylering av DAPK Hotell og CDH1
i ikke-cancerous gastrisk epitel. Forskjellen på DNA metylering status blant mage kreftpasienter og ikke-kreft fag ble også undersøkt.
Metoder
Vevsprøver, DNA-ekstraksjon og Helicobacter pylori infeksjon status
Vår studerte befolkningen består 527 individer (412 uten ondartet svulster og 115 med magekreft) rekruttert fra Endoscopy Center of Fujita Health universitetssykehus eller Kanazawa Medical University Hospital. Pasienter med systemiske alvorlige sykdommer ble ekskludert fra denne studien. De med aktivt magesår eller duodenalsår ble også ekskludert. Alle fag gjennomgikk øvre endoskopi med biopsi fra ikke-kreft slimhinnen. I 115 pasienter med magekreft, ble biopsiprøve også hentet fra kreft lesjon. Deler av hver prøve ble umiddelbart frosset og lagret ved -80 ° C, mens noen av de andre delen ble fiksert i 10% bufret formalin og innstøpt i parafin. Senere ble Genomisk DNA hentet direkte fra frosne prøver med standard fenol /kloroform metode etter proteinase K fordøyelsen. I 296 av 412 individer uten magekreft, ble alvorlighetsgraden av kronisk gastritt klassifisert i henhold til den oppdaterte Sydney system [21] av en patolog som hadde ingen tilgang til klinisk informasjon. H. pylori
infeksjonsstatus ble vurdert ved serologi, histologi, eller urea pusteprøve. Forsøkspersonene ble diagnostisert som infisert når minst én av de diagnostiske testene var positive.
Den etiske komiteer av Fujita Health University og Kanazawa Medical University godkjent protokollen, og før, skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle deltakende fag.
bisulfite modifikasjon og metylering spesifikke PCR (MSP)
å undersøke DNA metylering, ble genomisk DNA behandlet med natriumbisulfitt hjelp BislFast DNA Modification Kit for denaturert DNA Detection (Toyobo, Co., Ltd., Osaka, Japan). MSP for DAPK Hotell og CDH1
ble utført ved hjelp av metodene som er rapportert av Katzenellenbogen et al. [22] og Herman et al. . [23], henholdsvis
I korte, MSP reaksjoner ble utført med følgende primerpar bruker EX Taq HS (Takara Bio, Inc., Shiga, Japan)
Primer parene.
DAPK: metylert framover; 5 '- ggatagtcggatcgagttaacgtc-3 '
omvendt; 5 '- ccctcccaaacgccga-3 ', etter DAPK: unmethylated fremover; 5 '- ggaggatagttggattgagttaatgtt-3 ', etter omvendt; 5 '- caaatccctcccaaacaccaa-3 ', etter CDH1: metylert fremover; 5 '- ttaggttagagggttatcgcgt-3 ', etter omvendt; 5 '- taactaaaaattcacctaccgac-3 ', etter CDH1: unmethylated fremover; 5 '- taattttaggttagagggttattgt-3 ', etter omvendt; 5 '- cacaaccaatcaacaacaca-3 ', etter avspenning temperatur og tider ble bestemt ved hjelp av DNA fra perifert blod fra en ung person uten H. pylori
infeksjon som en negativ kontroll, og dette DNA denaturert med SSSI metylase (New England Biolabs Inc., Beverly, MA) som en positiv kontroll. MSP ble utført i et volum på 20 pl inneholdende 0,1 ug av bisulfitt-modificated DNA. DNA ble denaturert ved 95 ° C i 5 minutter, etterfulgt av 35 sykluser ved 95 ° C i 30 sekunder, 64 eller 65 ° C (for CDH1
eller DAPK
, henholdsvis) i 1 minutt, og 72 ° C i 1 minutt med en endelig forlengelse ved 72 ° C i 5 minutter. Båndene av MSP ble påvist ved elektroforese i 3,0% agarosegeler farget med ethdium bromid. Hypermethylation ble definert som tilstedeværelse av en positiv metylering bånd som viser signaler tilnærmet lik eller større enn den for størrelsesmarkør (10 ng /ul: 100 bp DNA-stige, Takara Bio, Inc., Shiga, Japan), uavhengig av tilstedeværelsen av unmethylated band [4].
Genotyping av HRH2 polymorfisme
rs2607474 ble genotypet ved PCR-SSCP som rapportert tidligere [24, 25]. For å detektere genotype, ved å bruke primerpar (forover: 5 '- acctgacccttttctgaaaaagtttgtc-3 ', og omvendt: 5 '- ctactcctctgaagtgctgagaaccat-3 '), PCR ble utført i et volum på 20 ul inneholdende 0,1 pg av genomisk DNA. DNA ble denaturert ved 95 ° C i 3 minutter, etterfulgt av 35 sykluser ved 96 ° C i 15 sekunder, 60 ° C i 30 sekunder og 72 ° C i 30 sekunder, med endelig forlengelse ved 72 ° C i 5 minutter. Deretter ble 2 ul av PCR produkt denaturert med 10 ul formamid (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) ved 95 ° C i 5 minutter. SSCP ble utført ved 6 ° C ved hjelp av en GenePhor DNA separasjonssystem med GeneGel Excel 12,5 /24 (GE Healthcare, USA), hvoretter de denaturerte enkelt tråd DNA-bånd ble påvist ved hjelp av en DNA Silver Farging Kit (GE Healthcare). Vi bekreftet at enkelttråd DNA ble klart atskilt av denne tilstanden [25]. SSCP resultatene ble bekreftet ved hjelp av positive DNA-fragmenter som er utarbeidet av nested-PCR som rapportert tidligere [24, 26].
Statistisk analyse
Alder og oppdaterte Sydney system score ble uttrykt som gjennomsnitt ± SD. Mean alder mellom to grupper ble sammenlignet med Student t
test. Forholdet mellom kjønn, ble H. pylori
infeksjon og DNA metylering sammenlignet ved hjelp av Fishers eksakte test. Allelet teller ble også sammenlignet mellom metylert og unmethylated grupper ved Fishers eksakte test. Justerte Ors ble beregnet ved bruk av logistisk regresjonsanalyse etter justering for alder, kjønn og H. pylori
infeksjonsstatus. Hver oppdatert Sydney system score blant 2 grupper ble sammenlignet med Mann Whitney U
-test. Korrelasjonen mellom alder og hver oppdaterte Sydney system resultatet ble bedømt ved ANOVA. For alle analysene, ble signifikansnivået satt til p
< 0.05.
Resultater
Fag, En total av 412 ikke-kreft (ikke-GC) fag og 115 magekreft (GC) pasienter deltok i denne studien. Disse egenskapene er oppsummert i tabell 1. Den midlere alder og hann /hunn-forhold på GC-gruppen var signifikant høyere enn i den ikke-GC-gruppe. H. pylori
positiv forholdet av GC-gruppen var også signifikant høyere enn den for den ikke-GC-gruppe. Videre frekvensene av CpG metylering av både DAPK Hotell og CDH1
var signifikant høyere i GC-gruppen enn i de ikke-GC group.Table 1 Kjennetegn på fagene og frekvenser av genet metylering
Samlet
ikke-GC
GC
p-verdi *
antall fag
527
412
115
gjennomsnittsalder ± SD
61,0 ± 13,7
60,0 ± 13,8
66,2 ± 9,7
0,0019
male: female
319: 208
235: 177
84:31
0,0018
h.pylori positiv ratio
338/527
249/412
89/115
0,00091
DAPK metylert forholdet
296/527
201/412
95/115
< 0,0001
CDH1 metylert forholdet
246/527
150/412
96/115
< 0,0001 product: *:. non-GC gruppe vs. GC gruppe
Frekvensene rs2607474 genotyper blant DAPK denaturert og unmethylated grupper
distribusjon av denne genotypen i alle 527 fag var 401GG, 119GA og 7AA og var i Hardy -Weinberg likevekt (p = 0,70). Gjennomsnittsalderen, H. pylori
positive forhold og GC /ikke-GC forholdet var signifikant høyere i DAPK
metylert enn i unmethylated gruppene, mens den mannlige /kvinnelige forholdet mellom de to gruppene ikke var signifikant forskjellig ( tabell 2). Den mindre allelet hyppigheten av rs2607474 i det metylerte gruppen var signifikant lavere enn det i den unmethylated (p < 0,0001, innstilling α = 0,05, 1-βpower = 0,978). I tillegg er frekvensen av GG homozygot var signifikant høyere i metylert gruppen enn i unmethylated gruppen (p < 0,0001) .table 2 Frekvensen av genotyper blant DAPK denaturert og unmethylated grupper
DAPK unmethylated

DAPK metylert
p-verdi *
antall fag
231
296
gjennomsnittsalder ± SD
59,6 ± 13,4
62,1 ± 13,8
0,035
male: female
137: 94
182: 114
NS
H. pylori positivitet
122/231
216/296
< 0,0001
ikke-GC: GC
211: 20
201: 95
< 0,0001
HRH2 rs2607474 genotype
GG
155
246
< 0,0001 #
GA
72
47
AA
4
3
En allelfrekvens
17,3%
9,0%
< 0,0001 product: *:.. unmethylated vs. denaturert, #: hyppigheten av GG homozygot
NS: ikke signifikant
Frekvensene rs2607474 genotyper blant CDH1 denaturert og unmethylated grupper
H. pylori
positive forhold og GC /ikke-GC forholdet var signifikant høyere i CDH1
metylert gruppen enn i unmethylated gruppen, mens gjennomsnittsalder og mannlig /kvinnelig forholdet mellom de to gruppene var ikke signifikant forskjellige (Tabell 3). Den mindre allelet hyppigheten av rs2607474 i det metylerte gruppen var signifikant lavere enn det i den unmethylated gruppe (p = 0,0004, innstilling α = 0,05, 1-βpower = 0,946), og frekvensen av den GG homozygot var signifikant høyere i det metylerte gruppen enn i unmethylated gruppen (p = 0,013) .table 3 Hyppigheten av genotyper blant CDH1 denaturert og unmethylated grupper
CDH1 unmethylated
CDH1 metylert
p-verdi *

antall fag
281
246
gjennomsnittsalder ± SD
60,6 ± 14,0
61,4 ± 13,3
NS
male: female
165: 116
154: 92
NS
H. pylori positivitet
152/281
186/246
< 0,0001
ikke-GC: GC
262 : 19
150: 96
< 0,0001
HRH2 rs2607474 genotype
G /G
197
204
0,013 #
G /A
78
41
A /A
6
1 A allelfrekvens
16,0%
8,7%
0,0004 product: *: unmethylated vs. denaturert, #: frekvens av GG homozygot
NS:.. ikke signifikant
risikoen rs2607474 GG homozygot for DAPK og CDH1 metylering
Totalt rs2607474 GG homozygot dratt en svært betydelig økt risiko for utvikling av DAPK
metylering ( OR, 2.43; 95% KI, 1,60 til 3,69; p < 0,0001; Tabell 4). I den ikke-GC fag, GG homozygot viste også en betydelig økt risiko for utvikling av DAPK
metylering (OR 2,61; 95% CI, 1,62 til 4,20; p < 0,0001). Men vises det verken en betydelig risiko i ikke cancerous slimhinner eller i kreft lesjon i fag med GC (tabell 4). Hyppigheten av DAPK
metylering var ikke signifikant forskjellig mellom ikke-kreft slimhinner og kreft lesjon hos individer med GC (95/115 vs. 104/115, p = 0,12) .table 4 Fare for -1018 GG homozygote for utvikling av DAPK metylering
Totalt (527)
GG
GA
AA
GG vs A bærer; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (231)
155
72
4
referanse -
metylert (296 )
246
47
3
2,43 (1,60 til 3,69)
< 0,0001
ikke-GC (412)
unmethylated (211)
138
69
4
referanse -
metylert (201)
167
31
3
2,61 (1,62 til 4,20)
< 0,0001
GC (115) plakater (ikke cancerous slimhinnen)
unmethylated (20)
17
3
0
referanse -
metylert (95)
79
16
0
0,825 (0,379 til 3,73)
0,78 product: (kreft lesjon)
unmethylated (11)
10
1 0
referanse -
metylert (104)
86
18
0
0,598 (0,069 til 5,19)
0,64
av logistisk regresjonsanalyse etter justering for alder, kjønn og H. pylori-infeksjon status plakater ():.. det antall individer
på den annen side ble rs2607474 GG homozygot forbundet med en betydelig økt risiko for utvikling av CDH1
, samt DAPK
, metylering (OR, 2.07; 95% KI, 1,35 til 3,17; p = 0,0009; Tabell 5). I den ikke-GC fag, ble GG homozygot også forbundet med en betydelig økt risiko for utvikling av CDH1
metylering (OR 2,25; 95% CI, 1,35 til 3,75; p = 0,0019). Men det viste hverken en betydelig risiko i ikke kreft mucosa og heller ikke i kreft lesjon hos individer med GC (tabell 5). Hyppigheten av CDH1
metylering i fagene med GC var betydelig lavere i kreft lesjon enn hos ikke kreft slimhinnen (78/115 versus 96/115, p = 0,009) .table 5 Fare for -1018 GG homozygot for utvikling av CDH1 metylering
Totalt (527)
GG
GA
AA
GG vs A bærer; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (281)
197
78
6
referanse -
metylert (246 )
204
41
1 2,07 (1,35 til 3,17)
0,0009
ikke-GC (412)
unmethylated (262)
180
76
6
referanse -
metylert (150)
125
24
1 2,25 (1,35 til 3,75)
0,0019
GC (115 ) plakater (ikke cancerous slimhinnen)
unmethylated (19)
17
2
0
referanse -
metylert (96)
79
17
0
0,579 (0,120 til 2,80)
0,50 product: (kreft lesjon)
unmethylated (37)
30
7
0
referanse
-
metylert (78)
66
12
0
1,50 (0,507 til 4,42)
0,47
av logistisk regresjonsanalyse etter justering for alder, kjønn og H. pylori-infeksjon status product: (). antall faget
Risikoen rs2607474 GG homozygote for utvikling av DNA metylering i fag over og under 60 år
Hos pasienter yngre enn 60 år. , rs2607474 GG homozygot tillagt en litt, men betydelig økt risiko for DAPK
metylering (OR, 2.12; 95% KI, 1,13 til 3,98; p = 0,020, Tabell 6), mens ikke for CDH1
metylering. Men GG homozygot viste en betydelig økt risiko for utvikling av både DAPK Hotell og CDH1
metylering i fag som er eldre enn 60 år (OR 2,72; 95% CI, 1,55 til 4,80; p = 0,0005 og OR, 2,81; 95% CI, 1,53 til 5,17; p = 0,0009, henholdsvis tabell 6) .table 6 Fare for rs2697474 GG homozygot hos yngre eller eldre personer
DAPK metylering


= < 60 (233)
GG
GA
AA
GG vs GA + AA; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (115)
80
32
3
referanse -
metylert (118)
96
21
1 2,12 (1,13 til 3,98)
0,020
60 < (294)
unmethylated (116)
75
40
1 referansen -
metylert (178)
150
26
2
2,72 (1,55 til 4,80)
0,0005
CDH1 metylering
= < 60 (233)
GG
GA
AA
GG vs A bærer; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (121)
88
29
4
referanse -
metylert (112)
88
24
0
1,55 (0,827 til 2,91)
0,17
60 < (294)
unmethylated (160)
109
49
2
referanse -
metylert (134)
116
17
1
2,81 (1,53 til 5,17)
0,0009
av logistisk regresjonsanalyse etter justering for alder, kjønn og H. pylori status product: ():.. det antall individer
Risiko knyttet rs2607474 GG homozygote for utvikling av DNA metylering i H. pylori negative eller positive pasienter
i H. pylori
negative personer ble rs2607474 GG genotype assosiert med økt risiko for metylering av både DAPK Hotell og CDH1
(OR 2,70; 95% CI, 1,31 til 5,57; p = 0,0074, og OR, 4.43; 95% CI, 1,76 til 11,1; p = 0,0016, henholdsvis tabell 7). Imidlertid viste det GG homozygot en økt risiko for utvikling av DAPK
metylering i H. pylori
positive pasienter (OR 2,29; 95% CI, 1,36 til 3,86; p = 0,0018), men ikke for CDH1
methylation.Table 7 Fare for rs2607474 GG homozygot i H. pylori positive eller negative fag
DAPK metylering

H. pylori negative ( 189)
GG
GA
AA
GG vs GA + AA; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (109)
73
35
1 referansen -
metylert (80)
67
12
1 2,70 (1,31 til 5,57)
0,0074
H. pylori positive (338)
unmethylated (122)
82
37
3
referanse -
metylert (216)
179
35
2
2,29 (1,36 til 3,86)
0,0018
CDH1 genet metylering
H. pylori negative (189)
GG
GA
AA
GG vs A bærer; OR (95% CI)
p-verdi
unmethylated (129)
86
41
2
referanse -
metylert (60)
54
6
0
4,43 (1,76 til 11,1)
0,0016
H. pylori positive (338)
unmethylated (152)
111
37
4
referanse -
metylert (186)
150
35
1
1,50 (0,900 til 2,51)
0,12
av logistisk regresjonsanalyse etter justering for alder og kjønn product: ():.. det antall individer
Association mellom Sydney system score og rs2607474
Totalt var det ingen signifikante forskjeller i atrofi eller metaplasi skårer mellom GG homozygot og GA + AA genotype (figur 1). Men i fag som er eldre enn 60 år, både score var signifikant høyere i GG homozygot enn i GA + AA genotype. Figur 1 Sammenligninger av Sydney system score blant GG homozygot og GA + AA genotype. Totalt sett, verken atrofi eller metaplasi score var signifikant forskjellig mellom GG homozygot og GA + AA genotype. Men i de fagene som er eldre enn 60 år, både score var betydelig høyere i GG homozygot enn i GA + AA genotype
Begge atrofi og metaplasi score var sterkt korrelert med alder i GG homozygot (begge p. ≪ 0,0001 ved ANOVA Figur 2a, b), mens det var ingen slik korrelasjon mellom alder og enten score i GA + AA genotype (p = 0,76 og p = 0,69, henholdsvis, figur 2c, d). Figur 2 Sammenhengen mellom rs2607474 og mage mucosal atrofi. a: Sammenheng mellom alder og atrofi score i GG homozygot Atrofi poengsum var signifikant korrelert til alder (p = 0,0001 ved ANOVA, n = 233). b: Sammenheng mellom alder og metaplasi score i GG homozygot Metaplasi poengsum var signifikant korrelert til alder (p < 0,0001 ved ANOVA). c: Sammenheng mellom alder og atrofi score i GA + AA genotype. Det var ingen signifikant korrelasjon (p = 0,47 ved ANOVA, n = 63). d: Sammenheng mellom alder og metaplasi score i GA + AA genotype. Det var ingen signifikant korrelasjon (p = 0,48 ved ANOVA).
Diskusjon
Vi har tidligere rapportert at CpG øy metylering av både DAPK
og CDH1
, i ikke-neoplastiske gastrisk mucosa, tilsvarte en økt risiko for magekreft [4]. I denne studien, hyppigheten av metylering i begge genene var betydelig høyere i de fagene med GC enn uten GC. Imidlertid frekvensen av CDH1
metylering i kreft lesjonen var signifikant lavere enn i ikke-kreft mukosa i individer med GC, selv om frekvensen av DAPK
metyleringen var ikke. Fra disse funnene, synes CDH1
metylering å ta litt del i utviklingen av magekreft. I våre studert fag, kan genet metylering ikke nødvendigvis uttrykk for protein eller mRNA, selv om noen tidligere studier viser at disse genet metyleringer bidra til avtagende nivåer av protein og mRNA [27-30]. En annen mulighet er at svulsten kan utvikle seg gjennom E-cadherin uavhengige trasé for kreftutvikling. Mekanismen for kreftutvikling via genet metylering er fortsatt uklart. Men vi ta hensyn til det faktum at akkumulering av genet metylering faktisk viser en økt risiko of Carcinogenesis så mange studier har indikert [3, 4, 6, 7, 11-14, 31, 32], selv om metylering av CDH1
kanskje ikke direkte påvirke kreftutvikling.
det er få rapporter som viser en påvirkning av polymorfismer av HRH2
på risikoen for menneskelige lidelser, men de er det rapport ingen sammenheng mellom rs2607474 og nevrologiske eller psykiske lidelser, for eksempel som schizofreni eller Parkinsons sykdom [19, 20, 33]. Vi er klar over eventuelle tidligere rapporter om sammenhengen mellom denne polymorfisme og mage disorders.In denne studien undersøkte vi sammenhengen mellom rs2607474 og utviklingen av CpG island metylering av både DAPK Hotell og CDH1
i ikke-kreft mageslimhinnen. Vår nåværende studie viser at rs2607474 GG genotype ble positivt assosiert med utvikling av CpG island metylering av både gener. I tillegg har vi også avsløre at mage mucosal atrofi er mer alvorlig i relativt eldre GG homozygot enn GA + AA genotype, og at mage mucosal atrofi utvikler seg med alderen bare i GG homozygot.
En av de viktigste faktorene som forårsaker genet metylering i magen er H. pylori-infeksjon
[4]. Infeksjon med H. pylori
første induserer kronisk overfladisk gastritt, som kan utvikle seg til kronisk atrofisk gastritt, intestinal metaplasi, og dysplasi som kan føre magekreft [34]. De faktorer som fremmer H. pylori
formidlet gastrisk atrofi er noe mer kontroversielt. H. pylori
infeksjon resulterer i en økning av serum gastrin nivå, i tidlig stadium av infeksjon, og går til utvikling av atrofisk gastritt. Flertallet av kliniske studier har imidlertid akseptert at protonpumpehemmere (PPI), som induserer aklorhydri og hypergastrinemi, akselerere utbruddet av atrofisk gastritt i H. pylori
positive pasienter [35-37]. Derfor synes hypergastrinemi for å fremme den mukosale gastrisk atrofi som er påvirket av H. pylori-infeksjon
. Interstingly, langtidsbehandling av rotter og mus med loxtidine, en potent H2-reseptorantagonister induserer ECL-celle hyperplasi, (som gjør omeprazol), ikke resulterte i tap av parietalceller, men i stedet ut til å resultere i økte parietalceller [38, 39]. I tillegg HDC knockout mus holdt på en lav-histamin diett viste en utvidet parietalcellen basseng tross stiller merket hypergastrinemi [40]. Disse resultater antyder at det er opp-regulering av histamin, ikke aklorhydri heller ikke hypergastrinemi, som bidrar til den gradvise nedregulering av parietal celleantall og gastrisk atrofi. I vår nåværende studie, mage mucosal atrofi kommet med alder i rs2607474 GG homozygot årsklasse, mens i GA + AA genotype det ikke. I tillegg er graden av gastrisk mukosal atrofi var høyere hos eldre individer som GG homozygot enn i de som var GA + AA genotype. I vår forrige undersøkelse, har en sammenheng mellom tarm metaplasi og genet metylering av ulike gener er bekreftet [4]. Vi foreslår derfor at genet metylering utvikler seg raskere parallelt med mage mucosal atrofi i GG homozygot enn i GA + AA genotype. Videre er det mulig at virkningen av histamin er oppregulert i GG homozygot. Men det har vært noen studier for virkningene av rs2607474 på funksjon eller uttrykk for H2-reseptorer og vår genetiske statistisk studie ikke avsløre dem. Dette er en av begrensningene i vårt studium.

• Fettsyresammensetning av subkutane fettvev og gastrisk mucosa: er der en forbindelse med gastrisk sårdannelse
• Lokalt tilbakefall av magekreft etter total gastrektomi: en uvanlig presentation