Indflydelse af HRH2 promotor polymorfi på afvigende DNA-methylering af DAPK og CDH1in det gastriske epitel

Indflydelse af HRH2
promotor polymorfi på afvigende DNA methylering af DAPK
og CDH1
i gastriske epithel
Abstract
Baggrund
Afvigende methylering mønstre i CpG ø er kendt for at være indflydelsesrige i gen lyddæmpning. Histamin spiller vigtige fysiologiske roller i den øvre mavetarmkanal og virker via H2-receptoren. Vi rapporterer en undersøgelse af effekten af ​​HRH2
promotor polymorfi (rs2607474 G > A) på methylering af DAPK
og CDH1
Metoder
ikke kræft maveslimhinden prøver blev opnået fra. 115 individer med gastrisk cancer (GC) og 412 ikke-cancerpatienter (ikke-GC). Status for methylering af gener blev bestemt ved MSP. Genotypebestemmelse af rs2607474 blev udført ved PCR-SSCP.
Resultater
Methylering af DAPK
og CDH1
blev observeret i 296 og 246 forsøgspersoner med henholdsvis. Hyppigheden af ​​CDH1
methylering i fagene med GC var signifikant lavere i kræft læsion end i ikke kræft slimhinde, mens den for DAPK
methylering ikke var anderledes. Den allele fordeling af rs2607474 var 401GG, 119GA og 7AA. Den GG homozygot var forbundet med en signifikant øget risiko for methylering af både DAPK
og CDH1
(p < 0,0001 og p = 0,0009, henholdsvis). I de ikke-GC emner eller mere end 60 år, blev GG homozygot mere tæt forbundet med både DAPK
og CDH1
methylering. Men dette genotype ikke viser en øget risiko for udvikling af methylering af begge gener i patienter med GC. I H. pylori
negative emner, GG homozygot viste en øget risiko for methylering af både DAPK
og CDH1
(p = 0,0074 og p = 0,0016, henholdsvis), hvorimod dette genotype var forbundet med en øget risiko for udvikling af DAPK
methylering i H. pylori
positive patienter (p = 0,0018). Derudover hos forsøgspersoner over 60 år, atrofi og metaplasi scoringer var signifikant højere i GG homozygot (p = 0,011 og p = 0,039, henholdsvis) blev observeret og en betydelig korrelation mellem alder og atrofi eller metaplasi.
konklusioner
Vores resultater tyder på, at rs2607474 GG homozygot giver en signifikant øget risiko for alders- og betændelse-relaterede DAPK
CDH1
methylering.
Nøgleord
HRH2
Genetisk polymorfisme Aberrant DNA methylering baggrund
mavekræft er en af ​​de mest almindelige cancere verdensplan og er forbundet med en høj dødelighed [1, 2]. Flere kræftformer, herunder gastriske tumorer, show methylering af flere gener, herunder E-cadherin (CDH1
),
død-associeret protein kinase (DAPK
) og cyklin-afhængige kinase inhibitor 2A (CDKN2A
) [3, 4]. Methylering af promotor- CpG-øer fører til DNA strukturelle ændringer og, som følge heraf, gen-inaktivering [5]. Mange undersøgelser har identificeret denne silencing ved methylering af DNA som en mekanisme ansvarlig for tumor suppressor inaktivering. Imidlertid er nogle gener også methyleret i ikke neoplastiske væv som følge af ældning [6, 7], og det er også blevet foreslået, at gen methylering forekommer under kronisk inflammation i forskellige væv [8-10]. I maveslimhinden, er det blevet postuleret, at methylering af CpG island induceres af Helicobacter pylori
(H. pylori
) infektion hos ikke-kræft mucosa [11, 12] og betragtes som de præcancertilstande i gastrisk carcinogenese [ ,,,0],13]. Blandt flere gener, DAPK Salg, CDH1 Salg og CDKN2A
vides at blive hyppigt methyleret i ikke-neoplastisk gastrisk mucosa og denne methylering er knyttet til alder, H. pylori
infektion, histologisk grad af gastritis og gastrisk cancer [11, 13, 14].
imidlertid histamin, et af de aktive aminer frigivet som respons på en række fysiologiske stimuli, er vidt udbredt i mavetarmkanalen, herunder maven og er involveret i patogenesen af gastro-duodenale sår og gastrisk inflammation [15]. I maven, H2-receptorer, skønt bredt fordelt i kroppens væv, synes at have en central rolle i reguleringen af ​​syresekretion, hvilket bekræftes af den udbredte anvendelse af H2-receptor-blokkere i terapien af ​​syrerelaterede forstyrrelser [16, 17] . Histamin spiller en vigtig rolle i gastrisk inflammation virker via H2-receptoren, skønt H. pylori
infektion er en af ​​de vigtigste medvirkende faktorer til udviklingen af ​​gastro-duodenale inflammation [18]. For nylig er sammenhængen mellem genetiske polymorfier af histaminreceptor gener og modtagelighed for skizofreni, og dets kliniske respons på clozapin behandling blevet undersøgt [19]. Denne undersøgelse af polymorfier i HRH2
, der koder for H2-receptor, afslører association mellem genotypen på HRH2
-1018 G /A locus (rs2607474) og klinisk respons på clozapin behandling. Desuden har denne rapport vist, at rs2607474 ligger i et enhancerelement af HRH2
genpromotoren [19, 20], og det er derfor sandsynligt, at denne variant inducerer ændringer i ekspressionen af ​​receptorer. Ifølge HapMap-JPT, er der kun en bindingsuligevægt (LD) blok, der består af rs686874, rs2067474, rs678591, rs645574, rs2890892 og rs11954815, i HRH2. Alle de andre SNPs er mindre polymorfier. Derfor vi spekuleret på, at dette LD blok påvirke ekspressionen og /eller funktionen af ​​histamin H2-receptor og udvalgte rs2607474 som et tag SNP. Der har endnu ikke været nogen rapport om rs2607474 indflydelse på udvikling og progression af gastrointestinale lidelser. Vores hypotese, at rs2607474 kan påvirke udviklingen af ​​afvigende DNA methyleringsmønstre i maveslimhinden.
I den foreliggende undersøgelse undersøgte vi forholdet mellem HRH2
promotor polymorfi (rs2607474) og DNA methylering af DAPK
og CDH1
i ikke-kræft gastrisk epitel. Forskellen af ​​DNA-methylering status blandt mavecancerpatienter og ikke-kræft forsøgspersoner blev også undersøgt. Salg Metoder
Vævsprøver, DNA-ekstraktion og Helicobacter pylori infektion status Salg Vores undersøgte population bestod 527 individer (412 uden maligne tumorer og 115 med mavekræft) rekrutteret fra Endoskopi center of Fujita Health University Hospital eller Kanazawa Medical University Hospital. Patienter med systemiske alvorlige sygdomme blev udelukket fra denne undersøgelse. Dem med aktivt mavesår eller sår på tolvfingertarmen blev også udelukket. Alle emner undergik øvre endoskopi med biopsi fra ikke-kræft slimhinde. I 115 patienter med gastrisk cancer, blev biopsiprøve også opnået fra kræft læsion. Dele af hver prøve blev straks frosset og opbevaret ved -80 ° C, mens nogle af den anden side blev fikseret i 10% pufret formalin og indlejret i paraffin. Senere blev Genomisk DNA ekstraheret direkte fra frosne prøver vha standard phenol /kloroform metode efter proteinase K-fordøjelse. I 296 af 412 forsøgspersoner uden mavekræft, blev sværhedsgraden af ​​kronisk gastritis klassificeret efter den opdaterede Sydney-systemet [21] af en patolog, der ikke havde adgang til nogen kliniske oplysninger. H. pylori
infektion status blev vurderet ved serologi, histologi, eller urea udåndingsluften. Forsøgspersonerne blev diagnosticeret som inficeret, når mindst en af ​​de diagnostiske test var positiv.
Den etiske komitéer i Fujita Health University og Kanazawa Medical University godkendt protokollen, og før, blev skriftligt informeret samtykke indhentet fra alle deltagende fag.
bisulfit modifikation og methylering-specifik PCR (MSP)
at undersøge DNA methylering, blev genomisk DNA behandlet med natriumbisulfit hjælp BislFast DNA ændring Kit til Methylated DNA Detection (TOYOBO, Co., Ltd., Osaka, Japan). MSP for DAPK
CDH1
blev udført ved hjælp af de metoder, rapporteret af Katzenellenbogen et al. [22] og Herman et al. . [23], henholdsvis
I korte, MSP reaktioner blev udført med de følgende primerpar bruger EX Taq HS (Takara Bio, Inc., Shiga, Japan)
Primerpar:.
DAPK: methylerede forward; 5 '- ggatagtcggatcgagttaacgtc-3 '
omvendt; 5 '- ccctcccaaacgccga-3 ',
DAPK: umethyleret fremad; 5 '- ggaggatagttggattgagttaatgtt-3 ',
omvendt; 5 '- caaatccctcccaaacaccaa-3 ',
CDH1: methylerede fremad; 5 '- ttaggttagagggttatcgcgt-3 ',
omvendt; 5 '- taactaaaaattcacctaccgac-3 ',
CDH1: umethyleret fremad; 5 '- taattttaggttagagggttattgt-3 ',
omvendt; 5 '- cacaaccaatcaacaacaca-3 ',
Annealingtemperatur og blev bestemt under anvendelse af DNA fra perifert blod fra en ung person uden H. pylori
infektion som en negativ kontrol og dette DNA methyleres med SSSI methylase (New England Biolabs Inc., Beverly, MA) som en positiv kontrol. MSP blev udført i et volumen på 20 pi indeholdende 0,1 ug bisulfit modificated DNA. DNA'et blev denatureret ved 95 ° C i 5 minutter, efterfulgt af 35 cykler ved 95 ° C i 30 sekunder, 64 eller 65 ° C (for CDH1
eller DAPK
henholdsvis) i 1 minut og 72 ° C i 1 minut med en endelig forlængelse ved 72 ° C i 5 minutter. Båndene af MSP blev påvist ved elektroforese i 3,0% agarosegeler farvet med ethdium bromid. Hypermethylering blev defineret som tilstedeværelse af en positiv methylering bånd viser signaler omtrent lig med eller større end den størrelse markør (10 ng /pi: 100 bp DNA Ladder, Takara Bio Inc., Shiga, Japan), uanset tilstedeværelsen af umethylerede bands [4].
genotypebestemmes HRH2 polymorfi
rs2607474 blev genotype ved PCR-SSCP som tidligere rapporteret [24, 25]. At påvise genotypen under anvendelse af primerparret (fremadrettet: 5 '- acctgacccttttctgaaaaagtttgtc-3 ', og revers: 5 '- ctactcctctgaagtgctgagaaccat-3 '), PCR blev udført i en volumen på 20 pi indeholdende 0,1 ug genomisk DNA. DNA'et blev denatureret ved 95 ° C i 3 minutter, efterfulgt af 35 cykler ved 96 ° C i 15 sekunder, 60 ° C i 30 sekunder og 72 ° C i 30 sekunder, med endelig ekstension ved 72 ° C i 5 minutter. Derefter blev 2 pi PCR-produkt denatureret med 10 pi formamid (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, USA) ved 95 ° C i 5 minutter. SSCP blev udført ved 6 ° C under anvendelse af en GenePhor DNA separationssystem med GeneGel Excel 12.5 /24 (GE Healthcare, USA), hvorefter de denaturerede enkelt streng DNA-bånd blev påvist under anvendelse af et DNA Silver Staining Kit (GE Healthcare). Vi bekræftede, at enkeltstrengede DNA'er klart blev adskilt ved denne betingelse [25]. SSCP resultater blev bekræftet ved anvendelse af positive DNA-fragmenter fremstillet ved nested-PCR som tidligere rapporteret [24, 26].
Statistisk analyse
Alder og opdaterede Sydney systemet scoringer blev udtrykt som middel ± SD. Gennemsnitsalder mellem to grupper blev sammenlignet med Students t
test. Forholdet mellem køn, blev H. pylori
infektion og DNA-methylering sammenlignet under anvendelse af Fishers eksakte test. Allelen tællinger blev også sammenlignet mellem den methylerede og ikke-methylerede grupper ved Fishers eksakte test. Justeret yderste periferi blev beregnet med brug af logistisk regressionsanalyse efter justering for alder, køn og H. pylori
infektion status. Hver opdaterede Sydney systemet score blandt 2 grupper blev sammenlignet med Mann Whitney U
-test. Sammenhængen mellem alder og hver opdateret Sydney systemet score blev vurderet ved ANOVA. For alle analyser blev signifikansniveau sat til p
< 0.05.
Resultater
Emner
alt 412 ikke-cancer (non-GC) fag og 115 mavekræft (GC) patienter deltog i denne undersøgelse. Disse karakteristika er opsummeret i tabel 1. Den gennemsnitlige alder og mand /kvinde forholdet af GC-gruppen var signifikant højere end i den ikke-GC gruppe. H. pylori
positivt forhold af GC-gruppen var også signifikant højere end for den ikke-GC gruppe. Desuden frekvenserne af CpG methylering af både DAPK
og CDH1
var signifikant højere i GC-gruppen end i de ikke-GC group.Table 1 Karakteristik af de emner og hyppighed for gen-methylering
Samlet
ikke-GC
GC
p-værdi *
antallet af fag
527
412
115
gennemsnitsalder ± SD
61,0 ± 13,7
60,0 ± 13,8
66,2 ± 9,7
0,0019
mand: kvinde
319: 208
235: 177
84:31
0,0018
H.pylori positivt forhold
338/527
249/412
89/115
0,00091
DAPK methylerede forhold
296/527
201/412
95/115
< 0,0001
CDH1 methylerede forhold
246/527
150/412
96/115
< 0,0001
*:. ikke-GC gruppe vs. GC gruppe
Frekvensen af ​​rs2607474 genotyper blandt DAPK methylerede og umethylerede grupper
fordelingen af ​​denne genotype i alle 527 forsøgspersoner var 401GG, 119GA og 7AA og var i Hardy -Weinberg ligevægt (p = 0,70). Gennemsnitsalderen, H. pylori
positivt forhold og GC /ikke-GC-forholdet var signifikant højere i DAPK
methylerede end i de methylerede grupper, mens mand /kvinde-forholdet mellem de to grupper var ikke signifikant forskellige ( tabel 2). Den mindre allel frekvens på rs2607474 i methyleret gruppe var signifikant lavere end i den ikke-methylerede (p < 0,0001, indstilling α = 0,05, 1-βpower = 0,978). Derudover er frekvensen af ​​GG homozygot var signifikant højere i den methylerede gruppen end i umethyleret (p < 0,0001) .table 2 Hyppigheden af ​​genotyper blandt DAPK methylerede og ikke-methylerede grupper
DAPK methyleret

DAPK denatureret
p-værdi *
antallet af fag
231
296
gennemsnitsalder ± SD
59,6 ± 13,4
62,1 ± 13,8
0,035
mand: kvinde
137: 94
182: 114
NS
H. pylori positivitet
122/231
216/296
< 0,0001
ikke-GC GC
211: 20
201: 95
< 0,0001
HRH2 rs2607474 genotype
GG
155
246
< 0,0001 # Georgien
72
47
AA
4
3
En allel frekvens
17,3%
9,0%
< 0,0001
*:.. umethyleret vs. methylerede, #: hyppigheden af ​​GG homozygot
NS: ikke signifikant
frekvensen af ​​rs2607474 genotyper blandt CDH1 methylerede og umethylerede grupper
H. pylori
positivt forhold og GC /ikke-GC-forholdet var signifikant højere i CDH1
methylerede gruppen end i umethyleret gruppe, mens gennemsnitsalder og mand /kvinde-forholdet mellem de to grupper ikke var signifikant forskellige (tabel 3). Den mindre allel frekvens på rs2607474 i methyleret gruppe var signifikant lavere end i den ikke-methylerede (p = 0,0004, indstilling α = 0,05, 1-βpower = 0,946) og frekvensen af ​​GG homozygot var signifikant højere i den methylerede gruppe end i umethyleret (p = 0,013) .table 3 Hyppigheden af ​​genotyper blandt CDH1 methylerede og umethylerede grupper
CDH1 umethyleret
CDH1 methylerede
p-værdi *

antallet af fag
281
246
gennemsnitsalder ± SD
60,6 ± 14,0
61,4 ± 13,3
NS
mand: kvinde
165: 116
154: 92
NS
H. pylori positivitet
152/281
186/246
< 0,0001
ikke-GC: GC
262 : 19
150: 96
< 0,0001
HRH2 rs2607474 genotype
G /G
197
204
0,013 #
G /A
78
41
A /A
6
1
En allel frekvens
16,0%
8,7%
0,0004
*: umethyleret vs. methylerede, #: frekvens af GG homozygot
NS:.. ikke signifikant
risiko rs2607474 GG homozygot for DAPK og CDH1 methylering
Samlet set rs2607474 GG homozygot tillagt en yderst signifikant øget risiko for udvikling af DAPK
methylering ( OR, 2,43; 95% CI, 1,60-3,69; p < 0,0001; Tabel 4). I de ikke-GC fag, GG homozygot viste også en signifikant øget risiko for udvikling af DAPK
methylering (OR, 2,61; 95% CI, 1,62-4,20; p < 0,0001). Men det viste hverken en betydelig risiko i ikke kræft slimhinde eller i kræft læsion hos forsøgspersoner med GC (tabel 4). Hyppigheden af ​​DAPK
methylering var ikke signifikant forskellige mellem ikke kræft mucosa og kræft læsion hos forsøgspersoner med GC (95/115 vs. 104/115, p = 0,12) .table 4 Risiko for -1018 GG homozygot for udvikling af DAPK methylering
Samlet (527)
GG
GA
AA
GG vs A luftfartsselskab; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (231)
155
72
4
henvisning -
methylerede (296 )
246
47
3
2,43 (1,60-3,69)
< 0,0001
ikke-GC (412)
umethyleret (211)
138
69
4
henvisning -
methylerede (201)
167
31
3
2,61 (1,62-4,20)
< 0,0001
GC (115) Hotel (ikke kræft slimhinde)
umethyleret (20)
17
3
0
henvisning -
methylerede (95)
79
16
0
0,825 (0,379 til 3,73)
0,78
(kræft læsion)
umethyleret (11)
10
1
0
henvisning -
methylerede (104)
86
18
0
0,598 (0,069 til 5,19)
0,64
af logistisk regressionsanalyse efter justering for alder, køn og H. pylori-infektion status
():.. antallet af emner
på den anden side blev rs2607474 GG homozygot associeret med en signifikant øget risiko for udvikling af CDH1
, samt DAPK
, methylering (OR, 2,07; 95% CI, 1,35-3,17; p = 0,0009; Tabel 5). I de ikke-GC fag, blev GG homozygote også forbundet med en signifikant øget risiko for udvikling af CDH1
methylering (OR, 2,25; 95% CI, 1,35-3,75; p = 0,0019). Men det udviste hverken en betydelig risiko i ikke kræft slimhinde eller i kræft læsion hos forsøgspersoner med GC (tabel 5). Hyppigheden af ​​CDH1
methylering i fagene med GC var signifikant lavere i kræft læsion end i ikke kræft slimhinde (78/115 vs. 96/115, p = 0,009) .table 5 Risiko for -1018 GG homozygot for udviklingen af CDH1 methylering
Samlet (527)
GG
GA
AA
GG vs A luftfartsselskab; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (281)
197
78
6
henvisning -
methylerede (246 )
204
41
1
2,07 (1,35-3,17)
0,0009
ikke-GC (412)
umethyleret (262)
180
76
6
henvisning -
methylerede (150)
125
24
1
2,25 (1,35-3,75)
0,0019
GC (115 ) Hotel (ikke kræft slimhinde)
umethyleret (19)
17
2
0
henvisning -
methylerede (96)
79
17
0
0,579 (0,120 til 2,80)
0,50
(kræft læsion)
umethyleret (37)
30
7
0
henvisning
-
methylerede (78)
66
12
0
1,50 (0,507 til 4,42)
0,47
af logistisk regressionsanalyse efter justering for alder, køn og H. pylori-infektion status
():. antallet af emnet
Risiko rs2607474 GG homozygote for udviklingen af ​​DNA-methylering i fag over og under 60 år
Hos forsøgspersoner yngre end 60 år. , rs2607474 GG homozygot tillagt en lidt, men betydeligt, øget risiko for DAPK
methylering (OR, 2,12; 95% CI, 1,13-3,98; p = 0,020, tabel 6), mens ikke for CDH1
methylering. Men viste GG homozygot, en signifikant øget risiko for udvikling af både DAPK
og CDH1
methylering hos forsøgspersoner over 60 år (eller, 2,72; 95% CI, 1,55-4,80; p = 0,0005 og OR, 2,81; 95% CI, 1,53-5,17; p = 0,0009, henholdsvis tabel 6) .table 6 Risiko for rs2697474 GG homozygot hos yngre eller ældre patienter
DAPK methylering Vejviser

= < 60 (233)
GG Georgien
AA
GG vs GA + AA; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (115)
80
32
3
henvisning -
methylerede (118)
96
21
1
2,12 (1,13-3,98)
0,020
60 < (294)
umethyleret (116)
75
40
1
henvisning -
methylerede (178)
150
26
2
2,72 (1,55-4,80)
0,0005
CDH1 methylering
= < 60 (233)
GG Georgien
AA
GG vs A luftfartsselskab; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (121)
88
29
4
henvisning -
methylerede (112)
88
24
0
1,55 (0,827 til 2,91)
0,17
60 < (294)
umethyleret (160)
109
49
2
henvisning -
methylerede (134)
116
17
1
2,81 (1,53-5,17)
0,0009
af logistisk regressionsanalyse efter justering for alder, køn og H. pylori infektion status
():.. antallet af emner
Risiko rs2607474 GG homozygote for udvikling af DNA-methylering i H. pylori negative eller positive emner
i H. pylori
negative forsøgspersoner blev rs2607474 GG genotype forbundet med en øget risiko for methylering af både DAPK
CDH1
(OR, 2,70; 95% CI, 1,31-5,57; p = 0,0074, og OR, 4,43; 95% CI, 1,76 til 11,1; p = 0,0016, henholdsvis tabel 7). Imidlertid GG homozygot viste en øget risiko for udvikling af DAPK
methylering i H. pylori
positive patienter (SR, 2,29; 95% CI, 1,36-3,86; p = 0,0018), men ikke for CDH1
methylation.Table 7 Risiko for rs2607474 GG homozygot i H. pylori positive eller negative emner
DAPK methylering Vejviser
H. pylori negative ( 189)
GG Georgien
AA
GG vs GA + AA; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (109)
73
35
1
henvisning -
methylerede (80)
67
12
1
2,70 (1,31-5,57)
0,0074
H. pylori positive (338)
umethyleret (122)
82
37
3
henvisning -
methylerede (216)
179
35
2
2,29 (1,36-3,86)
0,0018
CDH1 gen methylering
H. pylori negative (189)
GG Georgien
AA
GG vs A luftfartsselskab; OR (95% CI)
p-værdi
umethyleret (129)
86
41
2
henvisning -
methylerede (60)
54
6
0
4,43 (1,76 til 11,1)
0,0016
H. pylori positive (338)
umethyleret (152)
111
37
4
henvisning -
methyleret (186)
150
35
1
1,50 (0,900 til 2,51)
0,12
af logistisk regressionsanalyse efter justering for alder og køn
():.. antallet af emner
associering mellem Sydney systemet scores og rs2607474
Samlet set var der ingen signifikante forskelle i atrofi eller metaplasi scores mellem GG homozygot og GA + AA-genotypen (figur 1). Men hos personer ældre end 60 år, begge scoringer var signifikant højere i GG homozygot end i GA + AA genotype. Figur 1 Sammenligninger af Sydney systemet score blandt GG homozygot og GA + AA genotype. Samlet set hverken atrofi eller metaplasi scoringer var signifikant forskellige blandt GG homozygot og GA + AA genotype. Men i de emner ældre end 60 år, begge scoringer var betydeligt højere i GG homozygot end i GA + AA genotype
Både atrofi og metaplasi scoringer var stærkt korreleret med alder i GG homozygot (begge p. ≪ 0,0001 ved ANOVA , figur 2a, b), mens der ikke var nogen sådan sammenhæng mellem alder og enten score i GA + AA-genotypen (p = 0,76 og p = 0,69, henholdsvis figur 2c, d). Figur 2 associering mellem rs2607474 og gastrisk mucosal atrofi. a: Sammenhæng mellem alder og atrofi score i GG homozygot Atrofi score var signifikant korreleret til alder (p = 0,0001 ved ANOVA, n = 233). b: Sammenhæng mellem alder og metaplasi score i GG homozygot Metaplasi score var signifikant korreleret til alder (p < 0,0001 ved ANOVA). c: Sammenhæng mellem alder og atrofi score i GA + AA genotype. Der var ingen signifikant korrelation (p = 0,47 ved ANOVA, n = 63). d: Sammenhæng mellem alder og metaplasi score i GA + AA genotype. Der var ingen signifikant korrelation (p = 0,48 ved ANOVA).
Diskussion
Vi har tidligere rapporteret, at CpG ø metylering af både DAPK
og CDH1
, i ikke-neoplastiske maveslimhinden, svarede til en øget risiko for mavekræft [4]. I den foreliggende undersøgelse, hyppigheden af ​​methylering i begge gener var signifikant højere i de forsøgspersoner med GC end uden GC. Men hyppigheden af ​​CDH1
methylering i kræft læsion var signifikant lavere end i ikke kræft slimhinde i fagene med GC, selv om hyppigheden af ​​DAPK
methylering ikke var. Ud fra disse resultater, CDH1
methylering synes at tage lidt del i udviklingen af ​​mavekræft. I vores studerede individer, kan gen methylering ikke afspejler ekspressionen af ​​protein eller mRNA, selv om nogle tidligere undersøgelser viser, at disse gen methyleringer bidrager til faldende niveauer af protein og mRNA [27-30]. En anden mulighed er, at tumor kan udvikle gennem E-cadherin uafhængige veje for carcinogenese. Mekanismen af ​​carcinogenese via gen methylering er stadig uklart. Men vi er opmærksomme på, at akkumuleringen af ​​gen methylering faktisk viser en øget risiko for carcinogenese så mange undersøgelser har indikeret [3, 4, 6, 7, 11-14, 31, 32], selv om methylering af CDH1
kan ikke direkte påvirke tumor udvikling.
der er få rapporter, der viser en indflydelse af polymorfier af HRH2
på risikoen for menneskelige lidelser, men dem der er rapporten ingen sammenhæng mellem rs2607474 og neurologiske eller psykiske lidelser, såsom som skizofreni eller Parkinsons sygdom [19, 20, 33]. Vi er uvidende om eventuelle tidligere rapporter om sammenhængen mellem denne polymorfi og gastrisk disorders.In den foreliggende undersøgelse, undersøgte vi sammenhængen mellem rs2607474 og udviklingen i CpG ø methylering af både DAPK
og CDH1
i ikke-kræft maveslimhinden. Vores nuværende undersøgelse viser, at rs2607474 GG genotype var positivt associeret med udviklingen af ​​CpG ø metylering af begge gener. Derudover har vi også afsløre, at maveslimhinden atrofi er mere alvorlig i forholdsvis ældre GG homozygot end GA + AA genotype, og at maveslimhinden atrofi skrider med alderen kun i GG homozygot.
En af de vigtigste faktorer, der forårsager gen-methylering i maven er H. pylori
infektion [4]. Infektion med H. pylori
første inducerer kronisk overfladisk gastritis, som kan udvikle sig til kronisk atrofisk gastritis, intestinal metaplasi og dysplasi, der kan føre gastrisk carcinom [34]. De faktorer, der fremmer H. pylori
medierede gastrisk atrofi er noget mere kontroversielt. H. pylori
infektion resulterer i en forhøjelse af serum gastrin niveau, i den tidlige fase af infektion, og provenuet til udviklingen af ​​atrofisk gastritis. De fleste af de kliniske studier har dog accepteret, at protonpumpehæmmere (PPI), som inducerer aklorhydri og hypergastrinæmi, fremskynde starten af ​​atrofisk gastritis i H. pylori
positive patienter [35-37]. Derfor hypergastrinæmi synes at fremme maveslimhinden atrofi, som påvirkes af H. pylori
infektion. Interstingly, langtidsbehandling af rotter og mus med loxtidine, et potent H2-receptor-antagonister inducerer ECL-celle hyperplasi, (ligesom omeprazol), ikke resultere i tab af parietalceller, men i stedet viste sig at resultere i øget parietalceller [38, 39]. Desuden HDC knockout-mus blev ved en lav-histamin kost viste en ekspanderet parietalcellens pool trods udviser markant hypergastrinæmi [40]. Disse resultater antyder, at det er den opregulering af histamin, ikke aklorhydri eller hypergastrinæmi, der bidrager til den gradvise nedregulering af parietale celleantal og gastrisk atrofi. I vores nuværende studie, maveslimhinden atrofi skred med alder i rs2607474 GG homozygot kohorte, mens i GA + AA genotype den ikke gjorde. Desuden er graden af ​​gastrisk mucosal atrofi var højere hos ældre personer, som var GG homozygote end i dem, der var GA + AA genotype. I vores tidligere undersøgelse, har en korrelation mellem intestinal metaplasi og gen methylering af forskellige gener blevet bekræftet [4]. Vi foreslår derfor, at gen-methylering skrider hurtigere parallelt med maveslimhinden atrofi i GG homozygot end i GA + AA genotype. Endvidere er det muligt, at virkningen af ​​histamin opreguleres i GG homozygot. Imidlertid har der ikke været nogen undersøgelser for effekterne af rs2607474 på funktion eller ekspressionen af ​​H2-receptorer og vores genetiske statistisk undersøgelse afslørede ikke dem. Dette er en af ​​begrænsningerne i vores undersøgelse.

• Fedtsyresammensætning af subkutant fedtvæv og maveslimhinden: Er der en relation med mavesår
• Lokal gentagelse af mavekræft efter total gastrektomi: en usædvanlig presentation