Samtidig uttrykk av funksjonelle mage proteiner i dynamiske mage sykdommer og klinisk significance

co-uttrykk av funksjonelle mage proteiner i dynamiske magesykdommer og klinisk betydning
Abstract
Bakgrunn
pepsinogen C (PGC) og mucin1 (MUC1) er viktige fysiologisk funksjonelle mage proteiner; Mucin2 (MUC2) er en "utenfor livmoren" funksjonelt protein i intestinal metaplasi av mageslimhinnen. Vi analyserte ko-ekspresjon av de ovennevnte tre proteiner i dynamiske gastriske sykdommer {overfladisk gastritt (SG) -atrophic gastritt (AG) - magekreft (GC)}, så vel som forskjellige histologiske typer magekreft for å finne molekylære fenotyper av magekreft og forstadier til sykdom og videre undersøke mulighetene co-funksjon av PGC, MUC1 og MUC2 i forekomst og utvikling av magekreft.
Metoder
SG-AG-GC sekvensen var 57-57- 70 tilfeller i denne case-control studie, henholdsvis. Ulike histologiske typer GC var 28 tilfeller av høyt og moderat differensiert aden ocarcinoma (HMDA), 30 av dårlig differensiert adenokarsinom (PDA) og 12 av mucinous adenokarsinom (MA) eller signetring cellekreft (SRCC). . PGC, MUC1 og MUC2 uttrykk in situ ble påvist i alle 184 tilfeller ved hjelp av immunhistokjemi
Resultater
Både PGC og MUC1 hadde en betydelig redusert uttrykk i GC enn i SG og AG (P
< 0,0001 og P
< 0,01, henholdsvis); Mens MUC2 hadde en signifikant økt uttrykk i AG enn i SG og GC (P
< 0,0001). Syv fenotyper av PGC, MUC1 og MUC2 co-uttrykk ble funnet der PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotype tok 94,7% (54/57) i SG gruppe; PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotype tok 43,9% (25/57) og 52,6% (30/57) i AG; fenotypene i GC gruppe dukket variabel; used, PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotype tok 100% (6/6) i MA eller SRCC gruppe og hadde en statistisk signifikans sammenlignet med andre (P
< 0,05).
Konklusjoner
fenotyper av PGC, MUC1 og MUC2 co-uttrykk i dynamiske mage sykdommer er variabel. I SG gruppe viste det alltid PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotype og AG gruppen viste to fenotyper (PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 +); fenotypene i GC gruppe dukket variabel, men fenotypen PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prediktiv biomarkør for diagnostisering MA eller SRCC, eller skille histologisk MA eller SRCC fra rørformet adenokarsinom ledsaget av mucinous sekresjon eller signetring celle spredt distribusjon.
nøkkelord
pepsinogen C (PGC) Mucin1 (MUC1) Mucin2 (MUC2) Immunohistochemistry mage~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP Funksjonelle proteiner Bakgrunn
Normal funksjon av mage trenger to typer materialer som hovedsakelig finnes i normal magesaft. De er proteinkomponenter og små molekylære materialer som deltar i reguleringen. Blant dem, bare pepsinogen og mucin hører til proteinbestanddeler i magesaften som begge er viktige fysiologisk funksjonelle gastrisk proteiner. Pepsinogens ble delt inn i pepsinogen A (PGA) og pepsinogen C (PGC), og den sistnevnte er en forløper for humant pepsin C som er et fordøyelsesenzym [1]. Utseendet av PGC er et signal med gradvis modning av fordøyelsesfunksjonen [2]. 1% av humant PGC fra magen ble utskilt i perifert blod, og forholdet mellom PGA og PGC detekteres i serum var en biomarkør for atrofisk gastritt (AG) eller magekreft (GC) [3-5]. Mucin (MUC) er en slags glykoprotein familie skilles ut av slimhinnene epitel inneha funksjoner for beskyttelse, smøring og hydrering for epiteliale lumen, og 20 typer slimstoffer hadde blitt identifisert fra MUC1 til MUC21 til nå [6]. MUC1 er en svært polymorfe membran-assosiert mucin inneholdende kjerne peptidkjede og glykoprotein-sidekjeden. MUC1 besitter en beskyttende kapasitet som deltar i å komponere barrieren av «slim-bikarbonat", og fungerer også i en cellesignalisering kapasitet [7, 8]. Dets overekspresjon eller avvikende intracellulær lokalisering er funnet i kreftceller og er forbundet med karsinomer [9-12].
Bortsett fra de ovenfor nevnte fysiologisk funksjonelle gastriske proteiner, en "ektopisk" funksjonelt protein, kan MUC2 uttrykkes ved gastrisk mucosa skjedde intestinal metaplasi. MUC2 er også en svært polymorfe mucin inneholdende kjerne peptidkjede og glykoprotein sidekjede [13, 14]. I den normale fysiologiske forhold, uttrykker MUC2 proteinet i tarmslimhinnen og er fraværende i normale mageslimhinnen. Men MUC2 kunne være "utenfor livmoren" uttrykte på mageslimhinnen etter sykdomsfremkallende effekten av eksterne faktorer. Uansett om det deltar i responsen av verten til disse ytre patogene faktorer, så som inflammasjon [15] eller H. pylori product: [16, 17] fremdeles kontroversiell.
Som fysiologisk funksjonelle gastrisk proteiner og "ektopisk" uttrykte proteinet , foreningen av PGC, MUC1 og MUC2 utelukkende og mage sykdommer hadde blitt rapportert tidligere [18-22]. Vårt team hadde også vist i tidligere studie som PGC uttrykk hadde et nært forhold til graden av malignitet av mageslimhinnen [23], og vi har også funnet MUC1 protein hatt en betydelig underexpression i GC sammenlignet med ikke-kreft fag [24]. I tillegg MUC2 uttrykk hatt et nært forhold til atrofisk gastritt [25]. Imidlertid analyse av disse proteiner i en samme gruppe av tilfellene representerer forskjellige stadier av kreft progresjon var aldri blitt rapportert frem til nå, som kan forutsatt noen ny innsikt i den mulige funksjon av disse proteinene, og også i de mulige molekylære fenotypene av forskjellige gastriske sykdommer .
i dette case-control studie undersøkte vi co-uttrykk for PGC, MUC1 og MUC2 in situ i den samme gruppen av tilfeller i SG-AG-GC sekvens, samt i ulike histologiske typer GC i for å finne molekylære fenotyper av magekreft og forstadier til sykdom og videre undersøke mulighetene co-funksjon av PGC, MUC1 og MUC2 i forekomst og utvikling av magekreft.
Metoder
Pasienter
Dette forskningsprosjektet ble godkjent av Etisk komité i Kina Medical University, og alle mage eksemplarer av 184 pasienter vev ble samlet fra pasienter med bokstavene samtykke og spørreskjema for medisinsk historie som deltok i en helsesjekk program ved gastroskopi for magekreft screening eller på sykehus som ligger i Zhuanghe og Shenyang i Liaoning-provinsen i Kina mellom 2002 og 2005. Pasienter med en historie med andre ondartede svulster eller andre mage godartede sykdommer, inkludert mage erosjon, magesår sykdom, mage polypp, og adenomer ble ekskludert. Lige snitt fra gastroscopies ble parafin-embedded og farget med hematoxylin og eosin (HE) farging metoden; valgbarhet kriterium for alle sakene er histologisk diagnose. Lige snitt ble samlet inn fra 70 GC pasienter med en gjennomsnittsalder på 59.13 ± 10,50 år strekker seg fra 34 til 80 år gamle. 57 pasienter med overfladisk gastritt (SG) og 57 pasienter med atrofisk gastritt (AG) hadde en lignende gjennomsnittsalder på 57,18 ± 11,74 og 57,88 ± 10,62 år henholdsvis, som strekker seg fra 34 til 79 år gamle. GC og SG, AG grupper hadde ingen statistisk forskjell i forhold til kjønn og alderssammensetning (P
= 0,812 og P
= 0,593, henholdsvis tabell 1). Videre klassifiseres vi prøver av 70 GC pasienter i henhold til WHO-klassifisering (28 HMDA, 30 PDA og 12 MA eller SRCC). De HMDA, PDA og MA eller SRCC undergrupper viste ingen statistisk forskjell i kjønn og alderssammensetning (P
= 0,310 og P
= 0,141, henholdsvis tabell 1) .table 1 De grunnleggende budskap objektene
variasjon
SG
AG
GC
GC analysert for PGC, MUC1 og MUC2 (n = 70)

HMDA
PDA hoteller, MA eller SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
Sex
Mann fra 36
38
48
20
22
6
Kvinne
21
19
22
8
8
6
P
= 0,812
P
= 0,310
Age
Gjennomsnittlig
57,88 ± 10,62
57,18 ± 11,74
59,13 ± 10,50
61,54 ± 9,62
58,77 ± 11,05
54,42 ± 10,17
Range
42-79
34-79
34-80
42-80
35-80
34-71
P
= 0,593
P
= 0,141
Immunhistokjemisk farging for påvisning av PGC, MUC1 og MUC2 proteinekspresjon in situ
Immunhistokjemisk analyse ble utført i 5-mikrometer tykke seksjoner fra sekvensmessig oppskåret prøver av formalinfiksert og parafininnstøpte prøver i henhold til den metode som er beskrevet av Byrd [24, 26 ] med små modifikasjoner. Kort fortalt ble vevssnitt deparaffinized og vannes ut. Endogen peroksidase ble blokkert ved bruk av 3% hydrogenperoksid i metanol i 10 min og deretter ble seksjonene vasket med fosfatbufret saltvann (PBS), pH 7,4. Snittene ble inkubert med ikke-immuniserte hesteserum i 20 minutter ved romtemperatur og vasket før den ble inkubert med et spesifikt antistoff over natten ved 4 ° C. Deretter ble seksjonene vasket og inkubert med biotinylerte sekundære antistoff (geite-anti-mus-antistoff, Maixin Inc., Fujian, Kina) og streptavidin-biotin-peroksidase. Etter tre vaskinger med PBS, ble seksjonene visualisert med 3,3'-diaminobenzidin tetra-hydroklorid og motfarget med hematoksylin. Primære antistoffer ble byttet ut med PBS-buffer som en negativ kontroll. De spesifikke mus anti-humane antistoffer ble kjøpt fra Neomarkers Inc. Fremont, USA (morsmelk Fat Global-en, HMFG-1, mot MUC1, 1: 200 fortynninger) [27, 28] og Maixin Inc. Funjian, Kina (mot MUC2, klone No. M53, 1: 100 fortynninger). Og mus anti-human antistoff mot PGC (klone No. 2D5, 1: 500 fortynninger) ble presentert av Clinical Laboratory Institute of japansk, vennligst. Immunhistokjemiske resultatene ble bedømt av HScore (histologiske score) [29]. Den HScore ble beregnet ved hjelp av to indekser av andel (Pί) og intensitet (ί). Andelen (Pί) ble beregnet etter å ha tatt hensyn til prosentandelen av positive celler. Intensiteten (ί) ble vurdert som 0 (ingen flekker), 1+ (lys brune flekker), 2+ (brune flekker), eller 3+ (tunge brune flekker). Den HScore ble utledet ved å summere den andel av celler som fargeintensitet multiplisert med intensiteten av fargingen. HScore
=
Σ
Pί
×
ί
Hvor ί = 0, 1, 2, 3 og Pί varierer fra 0.0 til 1.0, er HSCOREs varierte fra et minimum på null i tilfeller med ingen farging til et maksimum på 3,0 i de tilfeller hvor alle cellene ble farget med maksimal intensitet. Vi dømt HScore > 0,0 som positive, mens HScore = 0,0 som negative. Den HScore ble bestemt av to uavhengige observatører.
Statistikker og ikke parametrisk test og Fishers eksakte sannsynligheter ble brukt til å determinate forskjellen på PGC, MUC1, MUC2 uttrykk i SG-AG-GC sekvens og i ulike histologiske typer GC. χ 2 test og Fishers eksakte sannsynligheter ble brukt til å determinate forskjellen på co-uttrykk av de tre proteiner. Rang-sum test og Spearmans rank korrelasjonsanalyse ble brukt for å analysere sammenhenger i ulike grupper. All statistisk analyse ble utført ved hjelp av SPSS (16,0) statistisk programvare (SPSS, Chicago, USA). All den statistiske testen var to-side sannsynlighet test og P
< 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
uttrykk for PGC, MUC1, MUC2 i GC og forstadier til sykdommer grupper
PGC uttrykk. ble funnet i cytoplasmaet av mageslimhinneceller (figur 1A). MUC1-ekspresjon ble funnet i cytoplasma og /eller membran av gastrisk mucosal celler (figur 1E). MUC2 protein ble farget i cytoplasma av slimceller (Figur 1 J). Figur 1 Ekspresjon av PGC, MUC1, MUC2-proteiner i forskjellige vev gastrisk mucosa (x 200). A. sterk positivt uttrykk for PGC i mageslimhinnen av overfladisk gastritt (SG) gruppe; B. positivt uttrykk for PGC i atrofisk gastritt (AG) gruppe, noen negative uttrykk; C. negative uttrykk for PGC i moderat differensiert adenokarsinom (MDA) gruppe; D. negative uttrykk for PGC i signetring cellekreft (SRCC) gruppe. E. sterk positivt uttrykk for MUC1 i SG gruppe; F. positivt uttrykk for MUC1 i AG gruppe; G. positivt uttrykk for MUC1 i dårlig differensiert adenokarsinom (PDA) gruppe; H. negative uttrykk for MUC1 i SRCC gruppe; I. negative uttrykk for MUC2 i SG gruppe; J. sterk positivt uttrykk for MUC2 i AG gruppe; K. positivt uttrykk for MUC2 i PDA gruppe; L. sterk positivt uttrykk for MUC2 i mucinous adenokarsinom gruppe. Pilen alle midler celler av patologiske forandringer.
Ekspresjon frekvensen av de tre proteinene i forskjellige gastriske sykdomsgrupper ble undersøkt ved immunhistokjemisk analyse. PGC og MUC1 proteinene uttrykket i GC-gruppen var signifikant lavere enn det i SG og AG-grupper (P
< 0,05). MUC2 protein ekspresjon i GC-gruppen var signifikant lavere enn det i den AG gruppe (P
< 0,001), men ekspresjonen av SG gruppe var lavere enn den i GC gruppe (P
< 0,001). Korrelasjonen av PGC, MUC1 og MUC2 protein uttrykk med SG-AG-GC sekvensen ble analysert henholdsvis. Vi fant det var sammenheng mellom disse tre proteiner og sykdommen sekvens (P
< 0,01); PGC og MUC1 viste negativ korrelasjon med SG-AG-GC sekvens (korrelasjonskoeffisienter var r = -0,770, r = -0,210, henholdsvis; P
< 0,001, P
= 0,004, henholdsvis). MUC2 indikert positiv korrelasjon med SG-AG-GC sekvens (korrelasjonskoeffisient var r = 0,260, P
< 0,001). Videre, ifølge WHO histologiske klassifikasjon ble GC gruppen delt inn i høy og moderert adenokarsinom (HMDA), dårlig differensiert adenokarsinom (PDA), mucinous adenokarsinom eller signetring cell carcinoma gruppe (MA eller SRCC) grupper. Vi fant at MUC1-protein i MA eller SRCC gruppe var betydelig lavere enn i de HMDA og PDA-grupper (P
< 0,001, tabell 2), og MUC2 i MA eller SRCC gruppe var signifikant høyere enn i PDA grupper (P
= 0,013, Tabell 2), men PGC protein hadde ingen signifikant forskjell i GC group.Table 2 Frekvens av PGC, MUC1 og MUC2 protein uttrykk i mage sykdommer
Farging scorer
SG
AG
GC
GC (n = 70)

HMDA

PDA
MA eller SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
PGC
2.0-3.0
19(33.3)
2(3.5)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
1.0-1.9
29(50.9)
14(24.6)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0.1-0.9
9(15.8)
13(22.8)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0
0(0.0)
28(49.1)
70(100.0)
28(100.0)
30(100.0)
12(100.0)
P
en
< 0,0001
< 0,0001 -
P
2
1,000
1,000 -
MUC1
2.0-3.0
24(42.1)
29(50.9)
21(30.4)
12(42.9)
9(31.0)
0(0.0)
1.0-1.9
19(33.3)
19(33.3)
15(21.7)
8(28.6)
6(20.7)
1(8.3)
0.1-0.9
13(22.8)
9(15.8)
23(33.3)
7(25.0)
12(41.4)
4(33.0)
0
1(1.8)
0(0.0)
10(14.5)
1(3.6)
2(6.9)
7(58.3)
P
3
0,012
0,0003 -
P
4
< 0,0001
0,0004 -
MUC2
2.0-3.0
2(3.5)
46(80.7)
12(17.1)
6(21.4)
2(6.7)
4(33.3)
1.0-1.9
0(0.0)
6(10.5)
8(11.4)
3(10.7)
2(6.7)
3(25.0)
0.1-0.9
0(0.0)
3(5.3)
19(27.1)
9(32.1)
8(26.7)
2(16.7)
0
55(96.5)
2(3.5)
31(44.3)
10(35.7)
18(60.0)
3(25.0)
P
5
< 0,0001
< 0,0001 -
P
6
0,273
0,013 -
P
7
< 0,0001
< 0,0001 -
P
8
< 0,0001
< 0,0001
-
P
9
< 0,0001
0,001 -
Merk: Statistisk analyse benyttes parametriske tester og Fishers eksakte tester. P
1, P
3
, P
5
betyr betydning sammenlignet med GC gruppe, henholdsvis. P
2
, P
4
, P
6
betyr betydning sammenlignet med MA eller SRCC gruppe, henholdsvis. P
7
betyr betydning sammenlignet med HMDA gruppe; P
8
betyr betydning sammenlignet med PDA gruppe; P
9
betyr betydning sammenlignet med MA eller SRCC gruppe.
Co-uttrykk fenotype av PGC, MUC1, MUC2 i GC og forstadier til sykdomsgrupper
Den co-uttrykk karakteristikker av PGC, MUC1 , MUC2 proteiner ble analysert. Vi fant fenotype av PGC + /MUC1 + /MUC2- utgjorde 94,7% (54/57) i SG gruppe; PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotype utgjorde 43,9% (25/57) og 52,6% (30/57) i AG gruppe, henholdsvis. De fenotyper i GC gruppe dukket variabel, blant dem alle tilfeller var PGC- fenotype, der de fleste var personer med fenotype av PGC- /MUC1 + /MUC2 + eller PGC- /MUC1 + /MUC2- (33 eller 26 tilfeller, utgjorde 47,1% og henholdsvis 37,1%, som vist i figur 2 AC eller DF). Videre ble GC tilfeller klassifisert i henhold til histologiske typer, har vi funnet at 100% (6/6) i MA eller SRCC gruppe var fenotypen til PGC- /MUC1- /MUC2 + (figur 2 GI), andre fenotyper gruppe i MA eller SRCC gruppen var signifikant lavere sammenlignet med den PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotype gruppen (P
< 0,05, tabell 3). Figur 2 fenotype av PGC /MUC1 /MUC2 co-uttrykk i de samme patologiske forandringer (× 200). A. Den negative uttrykk for PGC i moderat differensiert adenokarsinom (MDA) gruppe. B. positivt uttrykk for MUC1 i MDA gruppe. C. Den positive uttrykk for MUC2 i MDA gruppe. D. Den negative uttrykk for PGC i dårlig differensiert adenokarsinom (PDA) gruppe. E. Den positive uttrykk for MUC1 i PDA-gruppen. F. Den negative uttrykk for MUC2 i PDA-gruppen. G. Den negative uttrykk for PGC i signetring cellekreft (SRCC) gruppe. H. Den negative uttrykk for MUC1 i SRCC gruppe. I. positivt uttrykk for MUC2 i SRCC gruppe. Hvert tredje tall i en horisontal komposisjon var alle fra samme individ. Pilen alle midler cellene patologiske forandringer.
Tabell 3 forskjellige fenotype av samstemmighet av PGC, MUC1 og MUC2 protein uttrykk i mage sykdommer
Faktorer Book n
Different mage sykdommer Book Ulike histologisk type GC
PGC
MUC1
MUC2
SG (n = 57 )
AG (n = 57)
GC (n = 70)
HMDA (n = 28)
PDA (n = 30) <.no> MA eller SRCC (n = 12)
P product: * tøybleieforumet - -
-
5
- -
5 (100,0)
1 (20,0)
3 (60,0)
1 (20,0)
0,015 -
-
+
6 -
-
6 (100,0) -
-
6 (100,0) -
-
+
-
27 -
1 (3,7)
26 (96,3)
9 (34,6)
15 (57,7)
2 (7,7)
< 0,0001
-
+
+
63 -
30 (47,6)
33 (52,4)
18 (54,8)
12 (38,7)
3 ( 6.5)
< 0,0001
+ -
-
1 1 (100.0)
-
-
-
-
-
-
+
-
+
0
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
55
54 (98,2)
1 (1,8) -
- -
-
+
+
+
27
2 (7,4)
25 (92,6) -
-
- -
Merk: * P
verdi menes andre gruppen sammenlignet med PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotype gruppe og brukte Fisher . nøyaktige sannsynligheten
Spearman korrelasjonsanalyse viste at hver to av PGC, MUC1 og MUC2 hadde korrelasjon (P
< 0,05). Det var en positiv korrelasjon mellom PGC og MUC1 (P
= 0,006, r = 0,200), samt MUC1 og MUC2 (P
= 0,177, r = 0,016), mens PGC og MUC2 hadde en negativ sammenheng, men korrelasjonskoeffisienten var den største. (P
< 0,001, r = -0,313)
diskusjon
pepsinogen C (PGC) og mucin1 (MUC1) er viktige fysiologisk funksjonelle mage proteiner; Mucin2 (MUC2) er en "utenfor livmoren" funksjonelt protein i intestinal metaplasi av mageslimhinnen. Vi analyserte co-uttrykk for disse tre proteinene i et dynamisk magesykdom sekvens samt ulike histologiske typer magekreft for å utforske de co-uttrykk-baserte molekylære fenotyper av magekreft samt dens forstadier sykdom og sammenheng mellom co-uttrykk mønster og ulike mage sykdommer.
Som vi vet, PGC, MUC1, MUC2, de tre proteinene hadde utelukkende viktig diagnostisk rolle for magesykdom. Men co-uttrykk, så vel som deres molekylær fenotype ikke hadde blitt rapportert til nå, mens i skillet mellom ulike mage sykdommer. Faktisk hadde co-uttrykk av kombinerte proteiner som tyder på molekylært fenotype som MUC2 og CD10 blitt rapportert tidligere. Wakatsuki, K et al. og Hasuo, T et al. delt GC inn i mage- fenotype (G-type) og tarm fenotype (I-type) ifølge MUC5AC, MUC6, MUC2, og CD10 [30, 31], mens andre forskere delt G-type og I-type i henhold til MUC2 med andre proteiner [20, 32]. Men betydningen av disse studiene var alle basert på hensynet til at ulike fenotyper hadde ulike mønstre som utvikler seg til GC. Vi forsøkte å undersøke co-uttrykk for PGC, MUC1 og MUC2 som også kan gi et hint for forståelsen av utviklingen av mage sykdommer.
Det var syv typer co-uttrykk for de studerte tre proteiner i denne studien . I SG gruppe det viste alltid fenotype av PGC + /MUC1 + /MUC2- som betyr PGC og MUC1 var både positive og MUC2 var negativ. Vi har også analysert sammenhengene mellom de tre proteiner og SG-AG-GC sekvens og funnet ut at PGC og MUC1 begge hadde negativ korrelasjon og bare MUC2 hadde positiv sammenheng med sykdommen sekvens, noe som betyr at PGC og MUC1 hadde lignende fordeling tendens mens PGC hadde et større korrelasjonskoeffisient enn MUC1 (r = -0,770 og r = -0,210, henholdsvis). I AG gruppe co-uttrykket av disse tre proteinene viste to fenotyper (PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 +) og den største forskjellen mellom dem var om PGC protein ble uttrykt. PGC er et signal med gradvis modning av fordøyelsesfunksjonen, et produkt differensiering av fordøyelses enzymet pepsin C, og det ble rapportert at PGC gradvis redusert i SG-AG-GC-sekvensen [23]. I vår studie var PGC nesten 50% positive og 50% negative i AG gruppen. I den dynamiske endring av SG til AG, en del av prøvene viste PGC negativ mens en del av prøvene forble positive. Blant de 50% positive prøver, er det fortsatt var 22,8% av tilfellene (13/57, tabell 2) som var svak positiv (scoret 0,1-0,9). Hvorfor en del av prøvene viste negativ, mens noen fortsatt forble positiv? Det kan være to hypoteser for å forklare: For det første kan det være forbundet med graden av kjertler atrofi; sekund, kan den genetiske variabilitet av human PGC mellom individer bidrar til de forskjellige uttrykk for PGC i AG-gruppen. Selv om den sistnevnte var bare en hypotese, annet protein som hypoksisk markør karbonsyreanhydrase (CA) IX hadde blitt rapportert at genetisk metylering status ble bidra til de forskjellige uttrykk for CA IX i GC gruppe [33]. Disse hypotesene trenger å bli undersøkt i fremtiden. I GC gruppe co-uttrykket av disse tre proteinene dukket variabel, men vi fant en interessant fenomen. Ved å analysere ulike histologiske GC grupper, fant vi fenotypen PGC- /MUC1- /MUC2 + alt fordelt i gruppen av mucinous adenokarsinom eller signetring cellekreft (MA eller SRCC, 100%, 6/6). I den kliniske patologisk diagnose, histologisk mucinous adenokarsinom og signetring cell carcinoma var alltid vanskelig å skille med rørformet adenokarsinom ledsaget av mucinous sekresjon eller signetring celle spredt distribusjon. I vår studie, fenotypen PGC- /MUC1- /MUC2 + alt fordelt i gruppen av MA eller SRCC snarere enn andre grupper, som antydet at histologiske verre differensiering MA eller SRCC mistet PGC og MUC1 som er biomarkører for modne differensiering. Vi fant MUC1 positive i rørformet adenokarsinom. Selv om det ledsages mucinous sekresjon eller signetring celle spredt distribusjon, det foreslått en bedre differensiering slik at biomarkører av modne differensiering som MUC1 og PGC kan vises. Fenotypen av PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prediktiv biomarkør for diagnostisering MA eller SRCC eller skille fra rørformet adenokarsinom ledsaget av mucinous sekresjon eller signetring celle spredt distribusjon. Choi og hans kolleger fant mucinous adenokarsinom alltid viste MUC1- og MUC2 + i en studie av 133 MA tilfeller [34], som var i samsvar med resultatet av vår undersøkelse. Kan MUC2 utelukkende identifisere mucinous adenokarsinom? Sannsynligvis ikke fordi det ikke var bestemt da en del av MUC2 + fenotype av GC tilhører rørformet adenokarsinom. Etter å legge MUC1 som var en biomarkør for moden differensiering for å begrense, identifisering av MA eller SRCC viste seg å være mer følsomme.
Det er fullt klar over at vår studie hadde noen begrensninger. Først bare gastroscopic biopsiprøver ble vedtatt og begrensede kliniske data (bare alder og kjønn) var tilgjengelig. For det andre utvalget av tilfellene var relativt små spesielt GC gruppen og dens subgruppeanalyse. Future større utvalg studien var nødvendig for å validere resultatet vårt. Tredje, forstadier til sykdommer kun tatt AG gruppe mens andre typer forstadier til sykdommer som adenomer ikke ble vurdert fordi størrelsen på utvalget av andre forstadier til sykdommer som adenomer var for liten til å være en gruppe. For det fjerde, den aktuelle studien beskrevet bare to slimstoffer (dvs. MUC1 og MUC2) og en pepsinogen PGC uten inkludering av andre slimstoffer som MUC4 som er blitt rapportert øket ekspresjon i forskjellige typer av magekreft som adenokarsinom og SRCC [35] eller andre gastrisk funksjonelle proteiner som pepsinogen A [36] og trekløverfaktorer familie [37-40]. Videre undersøkelser inkludert magerelaterte proteiner kan gi en profil av progresjon og også biomarkør av mage sykdommer.
Konklusjoner
I konklusjonen, undersøkte vi co-uttrykk for PGC, MUC1 og MUC2 in situ av SG-AG -GC sekvens, så vel som i forskjellige histologiske typer av GC. Vi fant ut at SG viste PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotype og AG viste PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotyper. Fenotypen av PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prediktiv biomarkør for diagnostisering MA eller SRCC, eller skille histologisk MA eller SRCC fra rørformet adenokarsinom ledsaget av mucinous sekresjon eller signetring celle spredt distribusjon. Sammenhengen mellom co-funksjon av PGC, MUC1 og MUC2 og forekomst og utvikling av magekreft og forstadier til sykdom må avklares i fremtiden
Forkortelser
SG.
Overfladisk gastritt

AG:
atrofisk gastritt
GC:
Gastric Cancer
HMDA:
høy og moderat differensiert adenokarsinom
PDA:
dårlig differensiert adenokarsinom
MA:
mucinous Adenocarcinoma

SRCC:
Signet Ring Cell Carcinoma
Erklæringer
Takk
Dette arbeidet støttes med tilskudd fra National Key Basic Research Program for. Kina (973 Program Ref. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968) og Foundation of Science and Technology i Liaoning-provinsen (Ref. 2011225002).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er de linker til forfatternes originale innsendte filer for bilder. 12907_2013_140_MOESM1_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 1 12907_2013_140_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 konkurrerende interesser
Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet, og ikke har en kommersiell eller annen forening som kan utgjøre en interessekonflikt bidrag.
Forfatternes
YY unnfanget og utviklet denne studien og revidert manuskriptet. QX var ansvarlig for hele forsøket og involvert i å skrive på papiret. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Fase I-studie av neoadjuvant kjemoradioterapi med S-1 pluss annenhver uke cisplatin for avanserte magekreftpasienter med lymfeknutemetastaser: -KOGC04-
• Gastric T-cellelymfom forbundet med hemophagocytic syndrom