Den co-ekspression af funktionelle gastrisk proteiner i dynamiske gastrisk sygdomme og dens kliniske betydning

Den co-ekspression af funktionelle gastriske proteiner i dynamiske gastrisk sygdomme og dens kliniske betydning
Abstract
Baggrund
Pepsinogen C (PGC) og mucin1 (MUC1) er vigtige fysiologisk funktionelle gastrisk proteiner; Mucin2 (MUC2) er en "ektopisk" funktionel protein i tarmen metaplasi af maveslimhinden. Vi analyserede co-ekspression af de ovennævnte tre proteiner i dynamiske gastrisk sygdomme {overfladisk gastritis (SG) -atrophic gastritis (AG) - mavekræft (GC)} samt forskellige histologiske typer af gastrisk kræft for at finde molekylære fænotyper af mavekræft og præcancer sygdom og yderligere udforske potentialet co-funktion af PGC, MUC1 og MUC2 i forekomsten og udviklingen af ​​mavekræft.
Metoder
SG-AG-GC sekvens var 57-57- 70 tilfælde i denne case-kontrol undersøgelse hhv. Forskellige histologiske typer af GC var 28 tilfælde af højt og moderat differentieret aden ocarcinoma (HMDA), 30 af dårligt differentieret adenocarcinom (PDA) og 12 i mucinøs adenocarcinom (MA) eller signetring celle carcinom (SRCC). . PGC, MUC1 og MUC2 udtryk in situ blev påvist i alle 184 sager, der bruger immunhistokemi
Resultater
Både PGC og MUC1 havde en signifikant nedsat udtryk i GC end i SG og AG (P
< 0,0001 og P
< 0,01, henholdsvis); Mens MUC2 havde en signifikant øget udtryk i AG end i SG og GC (P
< 0,0001). Syv fænotyper af PGC, MUC1 og MUC2 co-ekspression blev fundet i hvilken PGC + /MUC1 + /MUC2- fænotype tog 94,7% (54/57) i SG gruppe; PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fænotype tog 43,9% (25/57) og 52,6% (30/57) i AG; de fænotyper i GC gruppe optrådte variabel; ekstraordinært, PGC- /MUC1- /MUC2 + fænotype tog 100% (6/6) i MA eller SRCC gruppe og havde en statistisk signifikans sammenlignet med andre (P
< 0,05).
Konklusioner
fænotyper af PGC, MUC1 og MUC2 co-ekspression i dynamiske gastriske sygdomme er variabel. I SG gruppe det altid viste PGC + /MUC1 + /MUC2- fænotype og AG gruppen viste to fænotyper (PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 +); de fænotyper i GC gruppe optrådte variabelt, men fænotype PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prædiktiv biomarkør til diagnosticering MA eller SRCC, eller skelne histologiske MA eller SRCC fra rørformet adenokarcinom ledsaget af mucinøs sekretion eller signetring celle spredt fordeling.
søgeord
Pepsinogen C (PGC) Mucin1 (MUC1) Mucin2 (MUC2) Immunhistokemi gastrisk kræft Funktionelle proteiner Baggrund
normal funktion af mave behov to slags materialer, som primært findes i normal mavesaft. De er protein komponenter og små molekylære materialer, der deltager i reguleringen. Blandt dem, kun pepsinogen og mucin tilhører proteinkomponenter i mavesaften som både er vigtige fysiologisk funktionelle gastriske proteiner. Pepsinogens var inddelt i pepsinogen A (PGA) og pepsinogen C (PGC), og sidstnævnte er en precursor af humant pepsin C, som er en fordøjelsesenzym [1]. Udseendet af PGC er et signal om gradvis modning af mave-funktion [2]. 1% af humant PGC fra maven blev udskilt i perifert blod og forholdet mellem PGA og PGC påvist i serum var en biomarkør for atrofisk gastritis (AG) eller gastrisk cancer (GC) [3-5]. Mucin (MUC) er en slags glycoprotein familie udskilles af mucosale epitel besidder funktioner af beskyttelse, smøring og hydrering til epitel lumen, og 20 slags muciner var blevet identificeret fra MUC1 til MUC21 indtil nu [6]. MUC1 er et meget polymorf membranassocieret mucin kerne peptidkæde og glycoprotein sidekæde. MUC1 har en beskyttende kapacitet, som deltager i komponere barrieren af ​​"slim-bikarbonat", og fungerer også i en celle signalering kapacitet [7, 8]. Dets overekspression eller afvigende intracellulær lokalisering findes i cancerceller og er forbundet med carcinomer [9-12].
Undtagen ovennævnte fysiologisk funktionelle gastriske proteiner, en "ektopisk" funktionelt protein, kunne MUC2 udtrykkes når maveslimhinden Der opstod intestinal metaplasi. MUC2 er også et særdeles polymorf mucin kerne peptidkæde og glycoprotein sidekæde [13, 14]. I de normale fysiologiske omstændigheder MUC2 proteinet udtrykker i tarmslimhinden og er fraværende i den normale gastriske mucosa. Men MUC2 kunne være "uden for livmoderen" udtryk på maveslimhinden under patogene effekt af eksterne faktorer. Uanset om det deltager i svaret fra værten til disse eksterne sygdomsfremkaldende faktorer som betændelse [15] eller H. pylori
[16, 17] er fortsat kontroversiel.
Som fysiologisk funktionelle gastrisk proteiner og "ektopisk" udtrykte protein , sammenslutningen af ​​PGC, MUC1 og MUC2 udelukkende og mavesygdomme var blevet rapporteret i fortiden [18-22]. Vores hold havde også påvist i tidligere undersøgelse, at PGC udtryk havde et tæt forhold til graden af ​​malignitet af maveslimhinden [23], og vi fandt også MUC1 protein haft en betydelig underekspression i GC sammenlignet med ikke-kræft emner [24]. Derudover MUC2 udtryk havde et tæt forhold til atrofisk gastritis [25]. Imidlertid havde aldrig blevet rapporteret, analyse af disse proteiner i en samme gruppe af sager, der repræsenterer forskellige stadier af cancer progression indtil nu, hvilket kan tilvejebringes nogle nye indsigt i den mulige funktion af disse proteiner, og også i de eventuelle molekylære fænotyper af forskellige mavesygdomme .
i dette case-kontrol undersøgelse, undersøgte vi co-ekspression af PGC, MUC1 og MUC2 in situ i den samme gruppe af sager i SG-AG-GC sekvens, samt i forskellige histologiske typer af GC i for at finde molekylære fænotyper af mavekræft og præcancer sygdom og yderligere udforske potentialet co-funktion af PGC, MUC1 og MUC2 i forekomsten og udviklingen af ​​mavekræft.
Metoder
Patienter
Dette forskningsprojekt blev godkendt af Etisk Komité China Medical University, og alle mavens vævsprøver af 184 patienter blev indsamlet fra patienter med breve af samtykke og spørgeskema af sygehistorie, der deltog i et sundhedstjek program ved gastroskopi for gastrisk kræftscreening eller på hospitaler beliggende i Zhuanghe og Shenyang i Liaoning-provinsen i Kina mellem 2002 og 2005. Patienter med en historie af andre maligne neoplasmer eller andre gastrisk godartede sygdomme, herunder gastrisk erosion, mavesår sygdomme, gastrisk polyp, og adenomer blev udelukket. Biopsi prøver fra gastroskopier blev paraffinindlejrede og plettet af hæmatoxylin og eosin (HE) farvning metode; den kriterium for alle de tilfælde er histologisk diagnose. De biopsi prøver blev indsamlet fra 70 GC patienter med en gennemsnitsalder på 59,13 ± 10,50 år spænder fra 34 til 80 år gammel. 57 patienter med overfladiske gastritis (SG) og 57 patienter med atrofisk gastritis (AG) havde en lignende gennemsnitsalder på 57,18 ± 11,74 og 57,88 ± 10,62 år henholdsvis, der spænder fra 34 til 79 år gammel. GC og SG, AG-grupper havde ingen statistisk forskel med hensyn til køn og alder sammensætning (P
= 0,812 og P
= 0,593 henholdsvis tabel 1). Desuden vi klassificeret prøver fra 70 GC patienter i henhold til WHO klassificering (28 HMDA, 30 PDA og 12 MA eller SRCC). De HMDA, PDA og MA eller SRCC undergrupper viste ingen statistisk forskel i køn og alderssammensætning (P
= 0,310 og P
= 0,141 henholdsvis tabel 1) .table 1 De grundlæggende budskaber objekterne
variabilitet
SG
AG
GC
GC analyseret for PGC, MUC1 og MUC2 (n = 70)

HMDA
PDA
MA eller SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
Sex
Mand
36
38
48
20
22
6
kvindelige
21
19
22
8
8
6
P
= 0,812
P
= 0,310
Age
Gennemsnitlig
57,88 ± 10.62
57,18 ± 11,74
59,13 ± 10,50
61,54 ± 9,62
58,77 ± 11,05
54,42 ± 10.17
Range
42-79
34-79
34-80
42-80
35-80
34-71
P
= 0,593
P
= 0,141
Immunohistokemisk farvning til påvisning af PGC, MUC1 og MUC2 proteinekspression in situ
Immunhistokemisk analyse blev udført i 5-um-tykke snit fra sekventielt skiver prøver af formalinfikserede og paraffinindlejrede prøver ifølge fremgangsmåden beskrevet af Byrd [24, 26 metode ] med mindre modifikation. Kort fortalt blev vævssnit afparaffineret og rehydreret. Endogen peroxidase blev blokeret under anvendelse af 3% hydrogenperoxid i methanol i 10 minutter og derefter blev snittene vasket med phosphatbufret saltvand (PBS), pH 7,4. Snittene blev inkuberet med ikke-immuniserede hesteserum i 20 minutter ved stuetemperatur og vaskes, før det inkuberes med et specifikt antistof natten over ved 4 ° C. Derefter blev snittene vasket og inkuberet med biotinylerede sekundære antistoffer (gede-anti-muse-antistof, Maixin Inc., Fujian, Kina) og streptavidin-biotin peroxidase. Efter tre vaske med PBS blev snittene visualiseret med 3,3' diaminobenzidin tetra-hydrochlorid og modfarvet med hæmatoxylin. Primære antistoffer blev erstattet med PBS-buffer som en negativ kontrol. De specifikke muse-anti-humane antistoffer blev købt fra NeoMarkers Inc. Fremont, USA (Human Milk Fat Global-1, HMFG-1, mod MUC1, 1: 200 fortyndinger) [27, 28] og Maixin Inc. Funjian, Kina (mod MUC2, klon nr M53, 1: 100 fortyndinger). Og muse-anti-humant antistof mod PGC (klon nr 2D5, 1: 500 fortyndinger) blev præsenteret af Clinical Laboratory Institut for japansk, venligt. Immunohistokemiske resultater blev dømt af HScore (histologisk score) [29]. Den HScore blev beregnet ved hjælp af to indeks af andel (Pί) og intensitet (ί). Andelen (Pί) blev estimeret efter hensyntagen til procentdelen af ​​positive celler. Intensiteten (ί) blev bedømt som 0 (ingen farvning), 1+ (lysebrun farvning), 2+ (brun farvning) eller 3+ (tung brun farvning). Den HScore blev afledt som summen af ​​andelen af ​​celler farvningsintensitet multipliceret med intensiteten af ​​farvning. HScore
=
Σ
Pί
×
ί
Hvor ί = 0, 1, 2, 3 og Pί varierer fra 0.0 til 1.0, de HSCOREs varierede fra et minimum på nul i tilfælde med ingen farvning til maksimalt 3,0 i tilfælde, hvor alle cellerne blev farvet med maksimal intensitet. Vi dømmes HScore > 0,0 som positiv, mens HScore = 0,0 som negativ. Den HScore blev bestemt ved to uafhængige observatører.
Statistik
Ikke parametrisk test og Fishers eksakte sandsynligheder blev brugt til at determinate forskellen på PGC, MUC1, MUC2 udtryk i SG-AG-GC sekvens og i forskellige histologiske typer GC. χ 2 test og Fishers eksakte sandsynligheder blev brugt til at determinate forskellen på co-ekspression af de tre proteiner. Rang-sum test og Spearman rang korrelationsanalyse blev anvendt til at analysere de sammenhænge i forskellige grupper. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS (16,0) statistisk program (SPSS, Chicago, USA). Alle de statistiske test var to-side sandsynlighed test og P
< 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant
Resultater
udtryk for PGC, MUC1, MUC2 i GC og forstadier til sygdomme grupper
PGC udtryk. blev fundet i cytoplasmaet af gastriske slimhindeceller (figur 1A). MUC1 ekspression blev fundet i cytoplasmaet og /eller en membran af gastriske slimhindeceller (figur 1E). MUC2 protein blev farvet i cytoplasmaet af slimceller (fig 1J). Figur 1 Ekspressionen af ​​PGC, MUC1, MUC2 proteiner i forskellige maveslimhinden væv (× 200). A. kraftig positiv ekspression af PGC i maveslimhinden af ​​overfladisk gastritis (SG) gruppe; B. positivt udtryk for PGC i atrofisk gastritis (AG) gruppe, et par negative udtryk; C. negative udtryk for PGC i moderat differentieret adenocarcinom (MDA) gruppe; D. negative udtryk for PGC i signetring celle carcinom (SRCC) gruppe. E. stærk positivt udtryk for MUC1 i SG gruppe; F. positivt udtryk for MUC1 i AG gruppe; G. positivt udtryk for MUC1 i dårligt differentieret adenocarcinom (PDA) gruppe; H. negativ ekspression af MUC1 i SRCC gruppe; I. negative udtryk for MUC2 i SG gruppe; J. stærk positivt udtryk for MUC2 i AG gruppe; K. positivt udtryk for MUC2 i PDA gruppe; L. stærk positivt udtryk for MUC2 i mucinøs adenocarcinom gruppe. Pilen alle midler cellerne af patologiske ændringer.
Ekspressionen frekvens af de tre proteiner i forskellige gastriske sygdomsgrupper blev undersøgt ved immunhistokemisk analyse. PGC og MUC1 proteiner udtryk i GC-gruppen var signifikant lavere end i SG og AG-grupper (P
< 0,05). MUC2 proteinekspression i GC-gruppen var signifikant lavere end i AG (P
< 0,001), men udtryk for SG-gruppen var lavere end i GC (P
< 0,001). Korrelationen af ​​PGC, MUC1 og MUC2 proteinekspression med SG-AG-GC sekvens blev analyseret henholdsvis. Vi fandt der var korrelationer mellem disse tre proteiner og sygdommen sekvens (P
< 0,01); PGC og MUC1 viste negative korrelationer med SG-AG-GC sekvens (korrelationskoefficienter var r = -0,770, r = -0,210, henholdsvis; P
< 0,001, P
= 0,004, henholdsvis). MUC2 angivet positiv korrelation med SG-AG-GC sekvens (korrelationskoefficient var r = 0,260, P
< 0,001). Endvidere ifølge WHO histologisk klassifikation blev GC koncernen opdelt i høje og modereret adenocarcinom (HMDA), dårligt differentieret adenocarcinom (PDA), mucinøs adenocarcinom eller signetring celle karcinom gruppe (MA eller SRCC) grupper. Vi fandt, at MUC1 protein i MA eller SRCC gruppe var signifikant lavere end i HMDA og PDA grupper (P
< 0,001, tabel 2), MUC2 i MA eller SRCC var væsentligt højere end i PDA grupper (P
= 0,013, tabel 2), men PGC protein havde ingen signifikant forskel i GC group.Table 2 Hyppigheden af ​​PGC, MUC1 og MUC2 proteinekspression i gastrisk sygdomme
Farvning score
SG
AG
GC
GC (n = 70) Vejviser
HMDA

PDA
MA eller SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
PGC
2.0-3.0
19(33.3)
2(3.5)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
1.0-1.9
29(50.9)
14(24.6)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0.1-0.9
9(15.8)
13(22.8)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0
0(0.0)
28(49.1)
70(100.0)
28(100.0)
30(100.0)
12(100.0)
P
en
< 0,0001
< 0,0001 -
P
2
1,000
1,000 -
MUC1
2.0-3.0
24(42.1)
29(50.9)
21(30.4)
12(42.9)
9(31.0)
0(0.0)
1.0-1.9
19(33.3)
19(33.3)
15(21.7)
8(28.6)
6(20.7)
1(8.3)
0.1-0.9
13(22.8)
9(15.8)
23(33.3)
7(25.0)
12(41.4)
4(33.0)
0
1(1.8)
0(0.0)
10(14.5)
1(3.6)
2(6.9)
7(58.3)
P
3
0,012
0,0003 -
P
4
< 0,0001
0,0004 -
MUC2
2.0-3.0
2(3.5)
46(80.7)
12(17.1)
6(21.4)
2(6.7)
4(33.3)
1.0-1.9
0(0.0)
6(10.5)
8(11.4)
3(10.7)
2(6.7)
3(25.0)
0.1-0.9
0(0.0)
3(5.3)
19(27.1)
9(32.1)
8(26.7)
2(16.7)
0
55(96.5)
2(3.5)
31(44.3)
10(35.7)
18(60.0)
3(25.0)
P
5
< 0,0001
< 0,0001 -
P
6
0,273
0,013 -
P
7
< 0,0001
< 0,0001 -
P
8
< 0,0001
< 0,0001
-
P
9
< 0,0001
0.001 -
Bemærk: Statistisk analyse anvendte parametriske tests og Fishers eksakte test. P
1
, P
3 fotos, P
5
betyder signifikans sammenlignet med GC gruppe, hhv. P
2
, P
4
, P
6
betyder signifikans sammenlignet med MA eller SRCC gruppe, hhv. P
7
betyder signifikans sammenlignet med HMDA gruppe; P
8
betyder signifikans sammenlignet med PDA gruppe; P
9
betyder signifikans sammenlignet med MA eller SRCC gruppe.
Co-ekspression fænotype af PGC, MUC1, MUC2 i GC og forstadier til sygdomsgrupper
co-ekspression karakteristika PGC, MUC1 Der blev analyseret MUC2 proteiner. Vi fandt fænotype PGC + /MUC1 + /MUC2- udgjorde 94,7% (54/57) i SG gruppe; PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fænotype udgjorde 43,9% (25/57) og 52,6% (30/57) i AG-gruppen. De fænotyper i GC gruppe optrådte variable, blandt dem, alle tilfælde var PGC- fænotype, hvor de fleste var personer med fænotype af PGC- /MUC1 + /MUC2 + eller PGC- /MUC1 + /MUC2- (33 eller 26 tilfælde, tegnede sig for 47,1% og 37,1% henholdsvis som vist i figur 2 AC eller DF). Endvidere blev GC tilfælde klassificeres efter histologiske typer, fandt vi, at 100% (6/6) i MA eller SRCC gruppe var fænotypen af ​​PGC- /MUC1- /MUC2 + (Figur 2 GI), andre fænotyper gruppe i MA eller SRCC gruppen var signifikant lavere sammenlignet med den for PGC- /MUC1- /MUC2 + fænotype (P
< 0,05, tabel 3). Figur 2 fænotype af PGC /MUC1 /MUC2 co-ekspression i de samme patologiske ændringer (× 200). A. Den negative udtryk for PGC i moderat differentieret adenocarcinom (MDA) gruppe. B. positivt udtryk for MUC1 i MDA gruppe. C. Den positive udtryk for MUC2 i MDA gruppe. D. Den negative udtryk for PGC i dårligt differentieret adenocarcinom (PDA) gruppe. E. positivt udtryk for MUC1 i PDA-gruppe. F. Den negative ekspression af MUC2 i PDA gruppe. G. Den negative udtryk for PGC i signetring celle carcinom (SRCC) gruppe. H. Den negative ekspression af MUC1 i SRCC gruppe. I. positivt udtryk for MUC2 i SRCC gruppe. Hvert tredje tal i en vandret sammensætning var alle fra det samme individ. Pilen alle midler cellerne i patologiske ændringer.
Tabel 3 Forskellige fænotype af konkordans af PGC, MUC1 og MUC2 proteinekspression i gastrisk sygdomme
Faktorer
n
Forskellige gastrisk sygdomme
Forskellige histologiske type GC
PGC
MUC1
MUC2
SG (n = 57 )
AG (n = 57)
GC (n = 70)
HMDA (n = 28)
PDA (n = 30)

MA eller SRCC (n = 12)
P
*
-
- -
5 fotos - -
5 (100,0)
1 (20,0)
3 (60,0)
1 (20,0)
0,015
- -
+
6 -
-
6 (100,0) -
-
6 (100,0) -
-
+
-
27 -
1 (3.7)
26 (96,3)
9 (34,6)
15 (57,7)
2 (7,7)
< 0,0001
-
+
+
63 -
30 (47,6)
33 (52,4)
18 (54,8)
12 (38,7)
3 ( 6.5)
< 0,0001
+
- -
1
1 (100.0)
-
-
-
-
-
-
+
-
+
0
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
55
54 (98,2)
1 (1,8) -
-
- -
+
+
+
27
2 (7,4)
25 (92,6) -
-
- -
Bemærk: * P Drømmeholdet værdi betød anden gruppe sammenlignet med PGC- /MUC1- /MUC2 + fænotype gruppe og brugte Fishers . eksakt sandsynlighed
Spearman korrelationsanalyse viste, at hver to af PGC, MUC1 og MUC2 havde korrelation (P
< 0,05). Der var en positiv korrelation mellem PGC og MUC1 (P
= 0,006, r = 0,200), samt MUC1 og MUC2 (P
= 0,177, r = 0,016), mens PGC og MUC2 havde en negativ korrelation, men korrelationskoefficienten var den største. (P
< 0,001, r = -0,313)
diskussion
Pepsinogen C (PGC) og mucin1 (MUC1) er vigtige fysiologisk funktionelle gastrisk proteiner; Mucin2 (MUC2) er en "ektopisk" funktionel protein i tarmen metaplasi af maveslimhinden. Vi analyserede co-ekspression af de disse tre proteiner i en dynamisk gastrisk sygdom sekvens samt forskellige histologiske typer af gastrisk cancer for at undersøge coekspression-baserede molekylære fænotyper af mavekræft samt dets præcancerøse sygdom og korrelation mellem co-ekspression mønster og forskellige mavesygdomme.
Som vi ved, PGC, MUC1, MUC2, de tre proteiner havde udelukkende vigtig diagnostisk rolle for gastrisk sygdom. Men co-ekspression samt deres molekylære fænotype ikke var blevet rapporteret indtil nu, mens i skelnen mellem forskellige mavesygdomme. Faktisk havde den co-ekspression af kombineret proteiner tyder molekylær fænotype ligesom MUC2 og CD10 tidligere blevet rapporteret. Wakatsuki, K et al. og Hasuo, T et al. opdelt GC i den gastriske fænotype (G-type) og intestinal fænotype (I-type) ifølge MUC5AC, MUC6, MUC2, og CD10 [30, 31], mens andre forskere delte type G og I-typen ifølge MUC2 med andre proteiner [20, 32]. Men betydningen af ​​disse undersøgelser var alle baseret på den betragtning, at forskellige fænotyper havde forskellige mønstre udvikler sig til GC. Vi havde til formål at undersøge co-ekspression af PGC, MUC1 og MUC2 som kunne også give et fingerpeg for forståelsen af ​​udviklingen af ​​gastrisk sygdomme.
Der var syv typer af co-ekspression for de undersøgte tre proteiner i denne undersøgelse . I SG gruppe det altid viste fænotype PGC + /MUC1 + /MUC2- hvilket betyder PGC og MUC1 var både positive og MUC2 var negativ. Vi analyserede også sammenhænge mellem de tre proteiner og SG-AG-GC sekvens og fundet, at PGC og MUC1 begge havde negativ korrelation og kun MUC2 havde positiv korrelation med sygdommen sekvens, hvilket betyder PGC og MUC1 havde lignende fordeling tendens mens PGC havde en større korrelationskoefficient end MUC1 (r = -0,770 og r = -0,210, henholdsvis). I AG co-ekspression af disse tre proteiner viste to fænotyper (PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 +) og den vigtigste forskel mellem dem var, om PGC protein blev udtrykt. PGC er et signal om gradvis modning af mave-funktion, en differentiering produkt af fordøjelsesfremmende enzym pepsin C, og det blev rapporteret, at PGC gradvist faldt i SG-AG-GC sekvens [23]. I vores undersøgelse PGC var næsten 50% positive og 50% negativ i AG. I den dynamiske ændring af SG til AG, en del af prøverne viste PGC negativ mens en del af prøver fortsat positiv. Blandt de 50% positive prøver, der stadig var 22,8% af tilfældene (13/57, tabel 2), der var svage positive (scorede 0,1-0,9). Hvorfor del af prøverne viste negativ, mens nogle stadig forblev positiv? Der kan være to hypoteser til at forklare: for det første kan det være forbundet med graden af ​​glandulær atrofi; for det andet kan den genetiske variabilitet af human PGC mellem individer bidrage til den forskellige ekspression af PGC i AG. Selv om sidstnævnte var blot en hypotese, andet protein som hypoxisk markør carbonanhydrase (CA) IX var blevet rapporteret, at genetisk methylering status blev bidrage til den forskellige ekspression af CA IX i GC-gruppen [33]. Disse hypoteser skal undersøges i fremtiden. I GC gruppe co-ekspression af disse tre proteiner optrådte variabel, men vi fandt et interessant fænomen. Ved analyse af forskellige histologiske GC grupper, fandt vi fænotype PGC- /MUC1- /MUC2 + alt fordelt i gruppen af ​​mucinøs adenocarcinom eller signetring celle carcinom (MA eller SRCC, 100%, 6/6). I den kliniske patologisk diagnose, den histologiske mucinøs adenocarcinom og signetring celle karcinom var altid svært at skelne med rørformet adenocarcinom ledsaget af mucinøs sekretion eller signetring celle spredt fordeling. I vores undersøgelse fænotypen af ​​PGC- /MUC1- /MUC2 + alt fordelt i gruppen af ​​MA eller SRCC snarere end andre grupper, der tydede på, at den histologiske værre differentiering MA eller SRCC tabt PGC og MUC1 som er biomarkører for modne differentiering. Vi fandt MUC1 positiv i rørformede adenocarcinom. Selvom det ledsaget mucinøs sekretion eller signetring celle spredt fordeling, det foreslog en bedre differentiering, så biomarkører for moden differentiering ligesom MUC1 og PGC kunne vises. Den fænotype PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prædiktiv biomarkør til diagnosticering MA eller SRCC eller skelne fra rørformet adenokarcinom ledsaget af mucinøs sekretion eller signetring celle spredt fordeling. Choi og hans kolleger fundet mucinøs adenocarcinom altid viste MUC1- og MUC2 + i en undersøgelse af 133 MA sager [34], som var i overensstemmelse med resultatet af vores undersøgelse. Kunne MUC2 udelukkende identificere mucinøs adenocarcinom? Sandsynligvis ikke fordi det ikke var specifikt, da en del af MUC2 + fænotype af GC tilhører rørformet adenocarcinom. Efter tilsætning af MUC1 som var en biomarkør for moden differentiering at begrænse, identifikation af MA eller SRCC viste sig at være mere følsomme.
Det er fuldt klar over, at vores undersøgelse havde nogle begrænsninger. Først kun gastroskopisk biopsi prøver blev vedtaget og begrænsede kliniske data (kun alder og køn) var til rådighed. For det andet, den stikprøve af tilfældene var relativt små især GC gruppe og dens undergruppe analyse. Fremtidige større prøve studie var forpligtet til at validere vores resultat. For det tredje, forstadier sygdomme kun medtaget AG gruppe, mens andre typer af forstadier sygdomme som adenomer ikke blev vurderet, fordi stikprøvestørrelse på andre forstadier sygdomme som adenomer var for lille til at være en gruppe. For det fjerde, den aktuelle undersøgelse diskuterede kun to muciner (dvs. MUC1 og MUC2) og en pepsinogen PGC uden inddragelse af andre muciner som MUC4, som er blevet rapporteret forøget ekspression i forskellige typer af mavekræft som adenocarcinom og SRCC [35] eller andre gastrisk funktionelle proteiner ligesom pepsinogen A [36] og kløverblad faktorer familie [37-40]. Yderligere undersøgelse, herunder mave-relaterede proteiner kunne give en profil af progression og også biomarkør for gastrisk sygdomme.
Konklusioner
Afslutningsvis undersøgte vi co-ekspression af PGC, MUC1 og MUC2 in situ af SG-AG -Gc sekvens, såvel som i forskellige histologiske typer af GC. Vi fandt, at SG viste PGC + /MUC1 + /MUC2- fænotype og AG viste PGC + /MUC1 + /MUC2 + og PGC- /MUC1 + /MUC2 + fænotyper. Den fænotype PGC- /MUC1- /MUC2 + kan være en prædiktiv biomarkør til diagnosticering MA eller SRCC, eller skelne histologisk MA eller SRCC fra rørformet adenokarcinom ledsaget af mucinøs sekretion eller signetring celle spredt fordeling. Sammenhængen mellem co-funktion af PGC, MUC1 og MUC2 og forekomsten og udviklingen af ​​mavekræft og præcancer sygdom bør præciseres i fremtiden
Forkortelser
SG:.
Overfladiske Gastritis

AG:
atrofisk gastritis
GC:
Gastric Cancer
HMDA:
høj og Moderat Differentieret adenocarcinom
PDA:
Dårligt Differentieret adenocarcinom
MA:
mucinøs Adenocarcinom

SRCC:
Signet Ring celle karcinom
erklæringer
Tak
Dette arbejde understøttes af tilskud fra National Key Basic Research Program for. Kina (973 Program ref no. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968), og Fonden for Videnskab og Teknologi i Liaoning-provinsen (ref nr. 2011225002).
Forfattere 'oprindelige indsendt filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12907_2013_140_MOESM1_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 1 12907_2013_140_MOESM2_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 2 konkurrerende interesser
Alle forfatterne læst og godkendt den endelige manuskript, og ikke har en kommerciel eller anden forening, der kan udgøre en interessekonflikt .
Forfattere bidrag
YY udtænkt og designet denne undersøgelse og revideres manuskriptet. QX var ansvarlig for hele forsøget og er involveret i at skrive papiret. LP-S og PL var ansvarlig for en del af forsøget. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Fase I undersøgelse med neoadjuverende kemo- og stråleterapi med S-1 plus hver anden uge cisplatin for avancerede mavecancerpatienter med lymfeknude metastaser: -KOGC04-
• Gastrisk T-celle lymfom er forbundet med hemophagocytic syndrome