Koekspressio toiminnallisten mahalaukun proteiinien dynaamiseen mahalaukun sairauksien ja sen kliinisten significance

koekspressio toiminnallisten mahalaukun proteiinien dynaamiseen mahalaukun sairauksien ja sen kliinistä merkitystä
tiivistelmä
tausta
pepsinogeeni C (PGC) ja mucin1 (MUC1) ovat tärkeitä elimistön toimintaa mahalaukun proteiinit; Mucin2 (MUC2) on "kohdunulkoinen" toiminnallinen proteiini suoliston metaplasiaa mahalaukun limakalvon. Analysoimme ilmentäminen rinnakkain edellä mainitun kolmen proteiinin dynaamisissa mahasairauksia {pinnallinen gastriitti (SG) -atrophic gastriitti (AG) - mahasyöpä (GC)} sekä erilaisia ​​histologisia tyyppejä mahasyövän, jotta löydettäisiin molekyyli- fenotyyppien mahasyövän ja precancerous sairaus ja edelleen tutkia mahdollisuuksia yhteistyön funktio PGC, MUC1 ja MUC2 esiintymiseen ja mahalaukun syövän syntyyn. Tool menetelmät
SG-AG-GC sekvenssi oli 57-57- 70 tapauksessa tässä tapauskontrollitutkimuksessa, vastaavasti. Eri histologisia tyyppejä GC oli 28 tapausta erittäin ja kohtalaisesti eriytetty aden ocarcinoma (HMDA), 30 huonosti eriytetty adenokarsinooma (PDA) ja 12 mucinous adenokarsinooma (MA) tai sinettisormus cell carcinoma (SRCC). PGC, MUC1 ja MUC2 ilmentymistä in situ havaittiin kaikissa 184 tapauksissa käyttävät immunohistokemiallisesti.
Tulokset
Sekä PGC ja MUC1 oli merkittävästi vähentynyt ilmentyminen GC kuin SG ja AG (P
< 0,0001 ja P
< 0,01, vastaavasti); Vaikka MUC2 oli merkittävästi lisätä ilmaisun AG kuin SG ja GC (P
< 0,0001). Seitsemän fenotyypit PGC, MUC1 ja MUC2 koekspressoimalla löytyivät joka PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotyyppiä vei 94,7% (54/57) SG ryhmä; PGC + /MUC1 + /MUC2 + ja PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotyyppiä vei 43,9% (25/57) ja 52,6% (30/57) in AG; fenotyypit GC ryhmässä esiintyi muuttuja; harvinaisen, PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotyyppiä kesti 100% (6/6) MA tai SRCC ryhmän ja oli tilastollista merkittävyyttä verrattuna muiden (P
< 0,05).
Johtopäätökset
fenotyypit PGC, MUC1 ja MUC2 koekspressoimalla dynaamisissa mahalaukun sairaudet ovat muuttuvia. SG ryhmässä se oli aina PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotyyppiä ja AG ryhmä osoitti kaksi fenotyyppiä (PGC + /MUC1 + /MUC2 + ja PGC- /MUC1 + /MUC2 +); fenotyypit GC ryhmässä esiintyi muunneltavissa, mutta fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + voi olla ennakoivaa biomarkkereiden diagnosoimiseksi MA tai SRCC, tai erottavan histologinen MA tai SRCC pyöröneulotusta adenokarsinooma mukana mucinous erityksen tai sinettisormus solujen hajallaan jakeluun.
Avainsanat
pepsinogeeni C (PGC) Mucin1 (MUC1) Mucin2 (MUC2) immunohistokemia Mahasyöpää Functional proteiineja Background
normaali toiminta mahan tarvitsee kaksi materiaaleista, jotka pääosin olemassa normaalissa mahanesteessä. Ne ovat proteiini komponentteja ja pieni molekyyli aineet osallistuvat asetuksessa. Heistä vain pepsinogeeni ja musiinin kuuluvat proteiinin osien mahanesteessä jotka ovat tärkeitä elimistön toimintaa mahalaukun proteiineja. Pepsinogeenia jaettiin pepsinogeeni A (PGA) ja pepsinogeeni C (PGC), ja jälkimmäinen on esiaste ihmisen pepsiini C, joka on ruoansulatusentsyymien [1]. Ulkonäkö PGC on merkki vähitellen kypsymistä ruoansulatuskanavan toiminnan [2]. 1% ihmisen PGC mahasta erittyi perifeerisen veren ja suhde PGA ja PGC havaittu seerumissa oli biomarkkeri atrofinen gastriitti (AG) tai mahalaukun syöpä (GC) [3-5]. Mucin (MUC) on eräänlainen glykoproteiinin perheen erittämien limakalvon epiteelin joilla toimintoja suojaa, voitelu ja nesteytystä epiteelin lumenia, ja 20 erilaista musiineja oli tunnistettu MUC1 ja MUC21 asti [6]. MUC1 on erittäin polymorfinen kalvoon liittyvä mukiinia sisältävän ytimen peptidiketjun ja glykoproteiinin sivuketjussa. MUC1 hallussaan suojaava kapasiteettia, joka osallistuu säveltäminen este "limaa-bikarbonaatti", ja myös toimii solussa signalointikapasiteettia [7, 8]. Sen yli-ilmentyminen tai poikkeava solunsisäinen sijainti on löydetty syöpäsoluja ja liittyy karsinoomien [9-12].
Lukuun ottamatta edellä mainittua fysiologisesti toiminnalliset maha- proteiineja, joka on "ectopic" toiminnallinen proteiini, MUC2 voitaisiin ilmaista, kun mahan limakalvon tapahtui suoliston metaplasiaa. MUC2 on myös erittäin polymorfinen mukiinia sisältävän ytimen peptidiketjun ja glykoproteiinin sivuketjun [13, 14]. Normaalissa fysiologisessa tilanteessa MUC2 proteiini ilmaisee, että suoliston limakalvolla ja puuttuu normaali mahan limakalvon. Kuitenkin MUC2 voisi olla "kohdunulkoinen" ilmaistiin mahalaukun limakalvon alle patogeeninen vaikutus ulkoisten tekijöiden. Olipa se osallistuu vaste isännän nämä ulkoiset patogeenisten tekijöiden, kuten tulehdus [15] tai helikobakteeri
[16, 17] on edelleen kiistanalainen.
Kuten fysiologisesti toiminnalliset maha- proteiineja ja "kohdunulkoinen" ilmentynyt proteiini , yhdistys PGC, MUC1 ja MUC2 ainoastaan ​​ja mahalaukun sairauksien oli raportoitu aikaisemmin [18-22]. Tiimimme oli myös osoittanut aiemmissa tutkimuksessa että PGC ilme oli läheinen suhde aste maligniteetin mahalaukun limakalvon [23], ja löysimme myös MUC1 proteiini oli merkittävä ali GC verrattuna ei-syöpäpotilailla [24]. Lisäksi MUC2 ilme oli läheinen suhde atrofinen gastriitti [25]. Kuitenkin analyysi näistä proteiineista on samaan tapauksiin, jotka edustavat eri vaiheissa syövän etenemisessä ei ole koskaan raportoitu asti, joka voi antoi joitakin uutta tietoa on mahdollista funktion näiden proteiinien, ja myös mahdollinen molekyyli fenotyypit eri mahalaukun sairauksien .
tässä tapauskontrollitutkimuksessa, tutkimme ilmentäminen rinnakkain PGC, MUC1 ja MUC2 in situ samaan tapausten SG-AG-GC-sekvenssin, sekä eri histologisia tyyppejä GC jotta löydettäisiin molekyyli- fenotyypit mahasyövän ja precancerous sairaus ja edelleen tutkia mahdollisuuksia yhteistyön funktio PGC, MUC1 ja MUC2 esiintymiseen ja mahalaukun syövän syntyyn. Tool menetelmät
Potilaat
tutkimushanke on hyväksytty eettisen komitean Kiinan Medical University, ja kaikki mahalaukun kudosnäytteet 184 potilasta kerättiin potilailta kirjaimia suostumuksen ja kyselylomakkeen sairaushistoria, jotka osallistuivat terveystarkastukseen ohjelma gastroskopialla mahasyövän seulontaan tai sairaaloissa sijaitsee Zhuanghe ja Shenyang Liaoningin maakunnassa Kiinassa vuosina 2002 ja 2005. Potilailla, joilla on ollut muut pahanlaatuiset kasvaimet tai muu mahalaukun hyvänlaatuinen sairauksien kuten maha- eroosio, mahahaava sairaudet, mahan polyyppi, ja adenoomia jätettiin pois. Biopsia yksilöitä tähystystutkimusten upotettiin paraffiiniin ja värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (HE) värjäysmenetelmällä; tukikelpoisuusperusteena kaikissa tapauksissa on histologista diagnoosia. Biopsia näytteet kerättiin 70 GC potilasta, joiden keski-ikä 59,13 ± 10,50 vuotta vaihtelevat 34-80 vuotta vanhoja. 57 potilasta, joilla oli pinnallinen gastriitti (SG) ja 57 potilasta, joilla atrofinen gastriitti (AG) oli samanlainen keskimääräinen ikä 57,18 ± 11,74 ja 57,88 ± 10,62 vuotta vastaavasti, jotka vaihtelevat 34-79 vuotta vanhoja. GC ja SG, AG ryhmiä ei ollut tilastollista eroa sukupuolen ja iän koostumus (P
= 0,812 ja P
= 0,593, taulukko 1). Lisäksi me luokiteltu näytteitä 70 GC potilaiden mukaan WHO: n luokituksen (28 HMDA, 30 PDA ja 12 MA tai SRCC). HMDA, PDA ja MA tai SRCC alaryhmiin osoittanut mitään tilastollista eroa sukupuolen ja iän koostumus (P
= 0,310 ja P
= 0,141, taulukko 1) .table 1 perusviestejä esineiden
vaihtelevuus
SG
AG
GC
GC analysoitiin PGC, MUC1 ja MUC2 (n = 70)

HMDA
PDA
MA tai SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
Sukupuoli
Mies
36
38
48
20
22
6
Nainen
21
19
22
8
8
6
P
= 0,812
P
= 0,310
Ikä
keskimäärin
57,88 ± 10,62
57,18 ± 11,74
59,13 ± 10,50
61.54 ± 9,62
58,77 ± 11,05
54,42 ± 10,17
Range
42-79
34-79
34-80
42-80
35-80
34-71
P
= 0,593
P
= 0,141
immunohistokemiallinen värjäys havaitsemiseksi PGC, MUC1 ja MUC2-proteiinin ilmentymistä in situ
immunohistokemiallinen analyysi suoritettiin 5 um: n paksuisia leikkeitä päässä peräkkäin leikatut näytteet formaliinilla kiinnitetyt ja parafiiniin upotettuja yksilöitä menetelmän mukaisesti kuvataan Byrd [24, 26 ] kanssa pienin muutoksin. Lyhyesti, kudosleikkeet parafiini ja nesteytyksestä. Endogeeninen peroksidaasi estettiin käyttäen 3% vetyperoksidia metanolissa 10 minuutin ajan ja sitten leikkeet pestiin fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS), pH 7,4. Leikkeitä inkuboitiin ei-immunisoiduissa hevosen seerumia 20 min huoneen lämpötilassa ja pestiin ennen inkuboitiin spesifistä vasta-ainetta yli yön 4 ° C: ssa. Sitten leikkeet pestiin, ja niitä inkuboitiin biotinyloidun sekundaarisen vasta-aineilla (vuohen anti-hiiri-vasta-aine, Maixin Inc., Fujian, Kiina) ja streptavidiini-biotiini peroksidaasilla. Kolmen pesun jälkeen PBS: llä, leikkeet visualisoitiin 3,3'- diaminobentsidiinillä tetra-hydrokloridia ja vastavärjättiin hematoksyliinillä. Primaaristen vasta-aineiden korvattiin PBS-puskurilla negatiivisena kontrollina. Erityiset hiiren anti-humaani-vasta-aineet hankittiin Neomarkers Inc. Fremont, USA (Human Milk Fat Global-1, HMFG-1, vastaan, MUC1, 1: 200 laimennokset) [27, 28] ja Maixin Inc. Funjian, Kiina (vastaan MUC2, klooni nro M53, 1: 100 laimennoksina). Ja hiiren anti-ihmisen vasta vastaan ​​PGC (klooni nro 2D5, 1: 500 laimennokset) esitteli Clinical Laboratory Institute of Japani, ystävällisesti. Immunohistokemialliset tulokset arvosteli HSCORE (histologinen pistemäärä) [29]. HSCORE laskettiin käyttäen kahta indeksit osuuden (Pί) ja intensiteetti (ί). Osuus (Pί) arvioitiin sen jälkeen, kun otetaan huomioon positiivisten solujen prosenttiosuuden. Intensiteetti (ί) arvosteltiin 0 (ei värjäystä), 1+ (vaaleanruskea värjäytyminen), 2+ (ruskea värjäytyminen), tai 3+ (raskas ruskea värjäytyminen). HSCORE on johdettu yhteen solujen osuus värjäytymisen intensiteetti kerrottuna värjäytymisen intensiteetti. HSCORE
=
Σ
Pί
×
ί
Missä ί = 0, 1, 2, 3 ja Pί vaihtelee 0,0-1,0, The HSCOREs vaihteli vähintään nolla tapauksissa ilman värjäystä enintään 3,0 tapauksissa, joissa kaikki solut värjättiin maksimaalinen intensiteetti. Me arvosteli HSCORE > 0.0 positiivisina vaikka HSCORE = 0,0 negatiivisina. HSCORE määritettiin kaksi riippumatonta tarkkailijaa.
Tilastot
Non parametrinen testi ja Fisherin todennäköisyyksiä käytettiin kartoitettiin ero PGC, MUC1, MUC2 ilmaisun SG-AG-GC-sekvenssin ja eri histologisia tyyppejä GC. χ 2 testi ja Fisherin todennäköisyyksiä käytettiin kartoitettiin ero ilmentäminen rinnakkain kolmen proteiineja. Sijoitus-summa testi ja Spearmanin rho korrelaatioanalyysiä käytettiin analysoimaan korrelaatioita eri ryhmissä. Kaikki tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS (16,0) tilastollinen ohjelmisto (SPSS, Chicago, USA). Kaikki tilastollinen testi oli kahden puolen todennäköisyys testi ja P
< 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
ilmentyminen PGC, MUC1, MUC2 GC ja syöpää edeltävät taudit ryhmien
PGC ilme todettiin sytoplasmassa mahalaukun limakalvon soluista (kuvio 1A). MUC1 ekspressio havaittiin sytoplasmassa ja /tai kalvon mahalaukun limakalvon soluista (kuvio 1 E). MUC2 proteiini värillinen sytoplasmassa pikarisolujen (kuvio 1J). Kuva 1: n ilmentyminen PGC, MUC1, MUC2 proteiinit eri mahalaukun limakalvon kudoksissa (x 200). A. vahva positiivinen ilmaus PGC mahalaukun limakalvon pinnallinen gastriitti (SG) ryhmä; B. positiivinen ilmaus PGC vuonna atrofinen gastriitti (AG) ryhmä, muutama negatiivinen ilmaus; C. negatiivinen ilmaus PGC kohtalaisen eriytetty adenokarsinooma (MDA) ryhmä; D. negatiivinen ilmaus PGC vuonna sinettisormus cell carcinoma (SRCC) ryhmä. E. vahva positiivinen ilmaus MUC1 SG ryhmä; F. positiivinen ilmaus MUC1 vuonna AG ryhmä; G. positiivinen ilmaus MUC1 huonosti eriytetty adenokarsinooma (PDA) ryhmä; H. negatiivinen ilmaus MUC1 vuonna SRCC ryhmä; I. negatiivinen ilmaus MUC2 SG ryhmä; J. vahva positiivinen ilmaus MUC2 vuonna AG ryhmä; K. positiivinen ilmaus MUC2 PDA ryhmä; L. vahva positiivinen ilmaus MUC2 vuonna mucinous adenokarsinooma ryhmässä. Nuoli kaikki tarkoittaa solut patologisia muutoksia.
Ilmaus taajuus kolmen proteiinin eri mahalaukun sairauksien ryhmää tutkittiin immunohistokemiallisella analyysillä. PGC ja MUC1 proteiinien ilmentyminen GC ryhmässä oli merkittävästi pienempi kuin vuonna SG ja AG ryhmät (P
< 0,05). MUC2 proteiinin ilmentymistä GC ryhmässä oli merkittävästi pienempi kuin vuonna AG ryhmässä (P
< 0,001), mutta ilmaus SG ryhmässä oli alhaisempi kuin GC ryhmässä (P
< 0,001). Korrelaatio PGC, MUC1 ja MUC2 proteiinin ilmaisutapoja SG-AG-GC-sekvenssi analysoitiin vastaavasti. Löysimme oli korrelaatioita näiden kolmen proteiinin ja taudin järjestyksessä (P
< 0,01); PGC ja MUC1 osoittivat negatiivista korrelaatiota SG-AG-GC-sekvenssin (korrelaatiokertoimet olivat r = -0,770, r = -0,210, vastaavasti; P
< 0,001, P
= 0,004, tässä järjestyksessä). MUC2 merkitty positiivinen korrelaatio SG-AG-GC-sekvenssin (korrelaatiokerroin oli r = 0.260, P
< 0,001). Lisäksi WHO histologista luokitusta, GC ryhmä jaettiin korkea ja valvottu adenokarsinooma (HMDA), huonosti eriytetty adenokarsinooma (PDA), mucinous adenokarsinooman tai sinettisormus cell carcinoma ryhmä (MA tai SRCC) ryhmiä. Huomasimme, että MUC1 proteiini MA tai SRCC ryhmässä oli merkittävästi pienempi kuin vuonna HMDA ja PDA ryhmät (P
< 0,001, taulukko 2), ja MUC2 MA tai SRCC ryhmässä oli merkittävästi suurempi kuin vuonna PDA ryhmissä (P
= 0,013, taulukko 2), mutta PGC proteiini ei ollut merkittävää eroa GC group.Table 2 Taajuus PGC, MUC1 ja MUC2 proteiinin ilmentymistä mahasairauksia
värjäys pisteet
SG
AG
GC
GC (n = 70)

HMDA

PDA
MA tai SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
PGC
2.0-3.0
19(33.3)
2(3.5)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
1.0-1.9
29(50.9)
14(24.6)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0.1-0.9
9(15.8)
13(22.8)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0
0(0.0)
28(49.1)
70(100.0)
28(100.0)
30(100.0)
12(100.0)
P
1
< 0,0001
< 0,0001 -
P
2
1.000
1.000
- MUC1
2.0-3.0
24(42.1)
29(50.9)
21(30.4)
12(42.9)
9(31.0)
0(0.0)
1.0-1.9
19(33.3)
19(33.3)
15(21.7)
8(28.6)
6(20.7)
1(8.3)
0.1-0.9
13(22.8)
9(15.8)
23(33.3)
7(25.0)
12(41.4)
4(33.0)
0
1(1.8)
0(0.0)
10(14.5)
1(3.6)
2(6.9)
7(58.3)
P
3
0,012
0,0003 -
P
4
< 0,0001
0,0004
- MUC2
2.0-3.0
2(3.5)
46(80.7)
12(17.1)
6(21.4)
2(6.7)
4(33.3)
1.0-1.9
0(0.0)
6(10.5)
8(11.4)
3(10.7)
2(6.7)
3(25.0)
0.1-0.9
0(0.0)
3(5.3)
19(27.1)
9(32.1)
8(26.7)
2(16.7)
0
55(96.5)
2(3.5)
31(44.3)
10(35.7)
18(60.0)
3(25.0)
P
5
< 0,0001
< 0,0001 -
P
6
0,273
0,013
- P
7
< 0,0001
< 0,0001 -
P
8
< 0,0001
< 0,0001
-
P
9
< 0,0001
0,001
- Huomautus: tilastollinen analyysi käytetyt nonparametric testejä ja Fisherin tarkka testejä. P
1
, P
3
, P
5
tarkoittaa merkitys verrattuna GC ryhmä, vastaavasti. P
2
, P
4
, P
6
tarkoittaa merkitys verrattuna MA tai SRCC ryhmä, vastaavasti. P
7
tarkoittaa merkitys verrattuna HMDA ryhmä; P
8
tarkoittaa merkitys verrattuna PDA ryhmä; P
9
tarkoittaa merkitys verrattuna MA tai SRCC ryhmä.
Koekspressoimalla fenotyyppi PGC, MUC1, MUC2 GC ja syöpää edeltävät tautiryhmistä
koekspressoimalla ominaisuudet PGC, MUC1 , MUC2 proteiinit analysoitiin. Löysimme fenotyyppi PGC + /MUC1 + /MUC2- osuus 94,7% (54/57) SG ryhmä; PGC + /MUC1 + /MUC2 + ja PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotyyppiä oli 43,9% (25/57) ja 52,6% (30/57) in AG ryhmässä, vastaavasti. Fenotyyppeihin GC ryhmässä esiintyi muuttuja, niiden joukossa, kaikki tapaukset olivat PGC- fenotyyppi, jossa suurin osa oli yksilöiden fenotyypin PGC- /MUC1 + /MUC2 + tai PGC- /MUC1 + /MUC2- (33 tai 26 tapausta, osuus 47,1% ja 37,1% vastaavasti, kuten kuviossa 2 on esitetty AC tai DF). Lisäksi GC tapausta luokiteltiin histologisia tyyppejä, huomasimme, että 100% (6/6) on MA tai SRCC ryhmä oli fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + (kuvio 2 GI), muut fenotyyppejä ryhmä MA tai SRCC ryhmä olivat merkittävästi alhaisemmat verrattiin PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotyyppiä ryhmä (P
< 0,05, taulukko 3). Kuva 2 fenotyyppi PGC /MUC1 /MUC2 ilmentäminen rinnakkain samassa patologisia muutoksia (x 200). A. Negatiivinen ilmentymistä PGC kohtalaisen eriytetty adenokarsinooma (MDA) ryhmä. B. positiivinen ilmaus MUC1 MDA ryhmässä. C. Positiivinen ilmaus MUC2 MDA ryhmässä. D. negatiivinen ilmaus PGC huonosti eriytetty adenokarsinooma (PDA) ryhmä. E. positiivinen ilmaus MUC1 PDA ryhmässä. F. negatiivinen ilmaus MUC2 PDA ryhmässä. G. negatiivinen ilmaus PGC vuonna sinettisormus cell carcinoma (SRCC) ryhmä. H. negatiivinen ilmaus MUC1 in SRCC ryhmässä. I. positiivinen ilmaus MUC2 in SRCC ryhmässä. Jokainen kolmen luvun vaakasuorassa koostumuksessa olivat kaikki samasta yksilöstä. Nuoli kaikki tarkoittaa solut patologisia muutoksia.
Taulukko 3 Eri fenotyyppiä konkordanssin PGC, MUC1 ja MUC2 proteiinin ilmentymistä mahasairauksia
tekijät
n
Erilaiset maha- sairaudet
eri histologinen tyyppi GC
PGC
MUC1
MUC2
SG (n = 57 )
AG (n = 57)
GC (n = 70)
HMDA (n = 28)
PDA (n = 30)

MA tai SRCC (n = 12)
P
*
-
- -
5
-
- 5 (100,0) B 1 (20,0) B 3 (60,0) B 1 (20,0) B 0,015
-
- +
6 -
-
6 (100,0) B -
- 6 (100,0) B - -
+
-
27 -
1 (3,7)
26 (96,3) B 9 (34,6)
15 (57,7) B 2 (7,7) B < 0,0001
-
+
+
63
- 30 (47,6)
33 (52,4)
18 (54,8)
12 (38,7) B 3 ( 6.5) B < 0,0001
+ -
-
1
1 (100.0)
-
-
-
-
-
-
+
-
+
0
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
55
54 (98,2) B 1 (1,8) B - -
- -
+
+
+
27
2 (7,4)
25 (92,6) B - -
-
- Huomautus: * P
arvo tarkoitti muut ryhmässä verrattuna PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotyyppiä ryhmä ja käytetyt Fisherin tarkka todennäköisyys.
Spearmanin korrelaatio analyysi osoitti, että joka toinen on PGC, MUC1 ja MUC2 oli korrelaatio (P
< 0,05). Oli positiivinen korrelaatio PGC ja MUC1 (P
= 0,006, r = 0,200), sekä MUC1 ja MUC2 (P
= 0,177, r = 0,016), kun taas PGC ja MUC2 oli negatiivinen korrelaatio, mutta korrelaatiokerroin oli suurin (P
< 0,001, r = -0,313).
keskustelu
pepsinogeeni C (PGC) ja mucin1 (MUC1) ovat tärkeitä fysiologisesti toiminnalliset maha- proteiinit; Mucin2 (MUC2) on "kohdunulkoinen" toiminnallinen proteiini suoliston metaplasiaa mahalaukun limakalvon. Analysoimme yhteistyössä ilmentymistä näiden kolmen proteiinin dynaamisessa mahalaukun sairauksien järjestyksessä sekä erilaisia ​​histologisia tyyppejä mahasyövän voidakseen tutkia koekspressio-pohjainen molekyyli fenotyyppejä mahasyövän sekä sen precancerous tauti ja korrelaatio yhteistyössä ekspressiokuviota ja eri mahalaukun sairauksien.
Kuten tiedämme, PGC, MUC1, MUC2, kolme proteiinit oli ainoastaan ​​tärkeä diagnostinen rooli mahalaukun sairaus. Mutta ilmentäminen rinnakkain sekä niiden molekyylitason fenotyyppiä ei ole raportoitu tähän saakka, kun erottelu eri mahalaukun sairauksia. Itse asiassa, koekspressio yhdistettyjen proteiinien viittaa molekyyli- fenotyypin, kuten MUC2 ja CD10 oli aiemmin raportoitu. Wakatsuki, K et ai. ja Hasuo, T et ai. jaettu GC osaksi mahan fenotyypin (G-tyyppi) ja suoliston fenotyypin (I-tyyppi) mukaan MUC5AC, MUC6, MUC2, ja CD10 [30, 31], kun taas muut tutkijat jaettu G-tyypin ja I-tyypin mukaan MUC2 kanssa muut proteiinit [20, 32]. Mutta merkitys näistä tutkimuksista oli kaikki perustuu näkemykseen, että eri fenotyyppejä oli eri malleja etenee kuin GC. Meidän tavoitteena oli tutkia ilmentäminen rinnakkain PGC, MUC1 ja MUC2 joka voisi myös antaa vihjeen ymmärtämiseksi etenemisen mahasairauksia.
Oli seitsemän eri co-lauseke tutkittu kolmen proteiinin tässä tutkimuksessa . SG ryhmässä aina osoitti fenotyyppi PGC + /MUC1 + /MUC2- mikä tarkoittaa PGC ja MUC1 olivat molemmat positiivisia ja MUC2 oli negatiivinen. Olemme myös analysoineet korrelaatiot kolmen proteiinien ja SG-AG-GC-sekvenssin ja totesi, että PGC ja MUC1 molemmilla oli negatiivinen korrelaatio ja vain MUC2 oli positiivinen korrelaatio sairauden kanssa järjestyksessä, mikä tarkoittaa PGC ja MUC1 oli samanlaisia ​​jakelu taipumus taas PGC oli suurempi korrelaatiokerroin kuin MUC1 (r = -0,770, ja r = -0,210, vastaavasti). Vuonna AG ryhmä ilmentäminen rinnakkain näiden kolmen proteiinin havaittiin kaksi fenotyypit (PGC + /MUC1 + /MUC2 + ja PGC- /MUC1 + /MUC2 +) ja tärkein ero niiden välillä oli se, PGC-proteiini ilmentyi. PGC on merkki vähitellen kypsyminen ruoansulatuskanavan toiminnan, erottelu tuote ruoansulatuskanavan entsyymi pepsiini C, ja on raportoitu, että PGC vähitellen laski SG-AG-GC-sekvenssi [23]. Tutkimuksessamme PGC oli lähes 50% positiivisia ja 50% negatiivinen AG ryhmässä. Dynaamisen muutoksen SG AG, osa näytteistä esiintyi PGC negatiivinen, kun taas osa näytteistä pysyi positiivisena. Niistä 50% positiivista näytettä, oli vielä 22,8% tapauksista (13/57, taulukko 2), jotka olivat heikkoja positiivisia (sijoitettiin 0,1-0,9). Miksi osa näytteistä esiintyi negatiivisia kun taas jotkut pysyi edelleen positiivisena? Voi olla kaksi hypoteesia selittää: Ensinnäkin se voi liittyä aste glandular surkastumista; toiseksi, geneettistä vaihtelua ihmisen PGC yksilöiden välillä voivat edistää eri ilmentymistä PGC in AG ryhmässä. Vaikka jälkimmäinen oli vain hypoteesi, muun proteiinin kuten hypoksinen merkki hiilihappoanhydraasi (CA) IX oli raportoitu, että geneettinen metylaatiostatuksen oli edistää eri ilmentymistä CA IX GC ryhmässä [33]. Nämä olettamukset on tutkittava tulevaisuudessa. Vuonna GC ryhmä ilmentäminen rinnakkain näiden kolmen proteiinin ilmestyi vaihteleva, mutta löysimme mielenkiintoinen ilmiö. Tarkasteltaessa eri histologisia GC ryhmää, löysimme fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + kaikki jaetaan ryhmässä mucinous adenokarsinooma tai sinettisormus cell carcinoma (MA tai SRCC, 100%, 6/6). Kliinisissä patologinen diagnoosi, histologinen mucinous adenokarsinooma ja sinettisormus karsinooma olivat aina vaikea erottaa kanssa putkimainen adenokarsinooma mukana mucinous erityksen tai sinettisormus solujen hajallaan jakeluun. Tutkimuksessamme fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + kaikki jaetaan ryhmässä MA tai SRCC sijasta muita ryhmiä, joiden mukaan histologinen pahempi erilaistumista MA tai SRCC kadonnut PGC ja MUC1 jotka ovat biomarkkerit kypsä erilaistumista. Löysimme MUC1 positiivinen putkimainen adenokarsinooma. Vaikka mukana mucinous eritys tai sinettisormus solujen hajallaan jakelu, se ehdotti parempaa eriytyminen siten, että biomarkkerit kypsien erilaistumisen kuten MUC1 ja PGC voisi esiintyä. Fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + voi olla ennakoivaa biomarkkereiden diagnosoimiseksi MA tai SRCC tai erottavan pyöröneulotusta adenokarsinooma mukana mucinous erityksen tai sinettisormus solujen hajallaan jakeluun. Choi ja hänen kollegansa totesi mucinous adenokarsinooma aina osoitti MUC1- ja MUC2 + tutkimuksessa 133 MA tapauksista [34], mikä oli yhdenmukainen tulos tutkimuksemme. Voisi MUC2 ainoastaan ​​tunnistaa mucinous adenokarsinooma? Luultavasti ei, koska se ei ollut erityinen, koska osa MUC2 + fenotyyppi GC kuuluu putkimainen adenokarsinooma. Kun oli lisätty MUC1 joka oli biomarkkereiden kypsä eriyttäminen rajoittaa, tunnistaminen MA tai SRCC osoittautui herkemmäksi.
Se on täysin tietoinen siitä, että tutkimus oli joitakin rajoituksia. Ensinnäkin, vain gastroskopisten koepalanäytteistä hyväksyttiin ja rajoitetusti kliinistä tietoa (vain ikä ja sukupuoli) olivat saatavilla. Toiseksi näyte tapauksista oli suhteellisen pieni erityisesti GC ryhmän ja sen alaryhmäanalyysi. Tulevaisuuden suurempi näyte tutkimus velvollinen vahvistamaan tuloksemme. Kolmanneksi precancerous sairaudet mukana vain AG: n, kun taas muunlaisia ​​precancerous sairauksien kuten adenoomia ei arvioitu, koska otoskoko muiden syöpää edeltävien sairauksien, kuten adenoomia oli liian pieni ollakseen ryhmään. Neljänneksi, nykyinen tutkimus vain keskusteltiin kaksi musiineilla (eli MUC1 ja MUC2) ja yksi pepsinogeeni PGC ilman, että muiden musiineja kuten MUC4 joka on raportoitu lisääntynyt ilmentyminen erilaisissa mahasyövän kuten adenokarsinooma ja SRCC [35] tai muiden mahalaukun toiminnallisia proteiineja kuten pepsinogeeni [36] ja apila tekijöiden perhe [37-40]. Lisätutkimuksia lukien vatsa-sukuiset proteiinit voisi antaa profiilin etenemisen ja myös biomarkkereiden mahalaukun sairauksien.
Johtopäätökset
Johtopäätöksenä olemme tutkineet yhteistyössä ilmentymä PGC, MUC1 ja MUC2 in situ SG-AG -GC järjestyksessä, samoin kuin eri histologisia tyyppejä GC. Huomasimme, että SG osoitti PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotyyppiä ja AG näytti PGC + /MUC1 + /MUC2 + ja PGC- /MUC1 + /MUC2 + fenotyyppejä. Fenotyyppi PGC- /MUC1- /MUC2 + voi olla ennakoivaa biomarkkereiden diagnosoimiseksi MA tai SRCC tai erottava histologinen MA tai SRCC pyöröneulotusta adenokarsinooma mukana mucinous erityksen tai sinettisormus solujen hajallaan jakeluun. Yhdistys välinen yhteistyö funktio PGC, MUC1 ja MUC2 sekä esiintyminen ja mahalaukun syövän syntyyn ja syöpää edeltävät tauti on selvennettävä tulevaisuudessa.
Lyhenteet
SG:
pinnallinen gastriitti

AG:
atrofisen gastriitin
GC:
mahasyövän
HMDA:
korkea ja kohtuullisesti erilaistunut adenokarsinooma
PDA:
Huonosti Differentiated Adenokarsinooma
MA:
mucinous Adenokarsinooma

SRCC:
sinettisormus cell carcinoma.
julistukset
Kiitokset
työ tukee avustusta National Key Basic Research Program Kiina (973 Program viite no. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968), ja säätiön Science and Technology Liaoningin maakunnassa (viite no. 2011225002).
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alta linkit kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12907_2013_140_MOESM1_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12907_2013_140_MOESM2_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 Kilpailevat edut
Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus, ja ei ole kaupallista tai muu järjestö voivat aiheuttaa eturistiriidan .
Tekijät osuudet
YY suunniteltu ja tässä tutkimuksessa ja tarkistettiin käsikirjoituksen. QX oli vastuussa koko kokeen ja mukana kirjallisesti paperilla. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Vaihe I tutkimuksen neoadjuvant kemosädehoito S-1 plus toinen viikko sisplatiinia edennyt mahasyöpä potilaita, joilla imusolmuke etäpesäke: -KOGC04-
• Mahalaukun T-solulymfooma liittyy hemophagocytic oireyhtymä