Il co-espressione di proteine ​​funzionali gastrici in malattie gastriche dinamiche e la sua significance

clinica La co-espressione di proteine ​​gastrici funzionali in malattie gastriche dinamiche e il suo significato clinico
Abstract
sfondo
Pepsinogeno C (PGC) e mucin1 (MUC1) sono importanti proteine ​​gastrici fisiologicamente funzionali; Mucin2 (MUC2) è una proteina funzionale "ectopica" in metaplasia intestinale della mucosa gastrica. Abbiamo analizzato l'co-espressione dei suddetti tre proteine ​​nelle malattie gastriche dinamici {gastrite superficiale (SG) gastrite -atrophic (AG) - cancro gastrico (GC)}, così come diversi tipi istologici di cancro gastrico al fine di trovare fenotipi molecolari del cancro gastrico e malattie precancerose e esplorare ulteriormente il potenziale co-funzione del PGC, MUC1 e MUC2 nella comparsa e lo sviluppo del cancro gastrico.
Metodi
la sequenza SG-AG-GC era 57-57- 70 casi di questo studio caso-controllo, rispettivamente. Diversi tipi istologici di GC sono stati 28 casi di altamente e moderatamente differenziato ocarcinoma Aden (HMDA), 30 di adenocarcinoma differenziata mal (PDA) e 12 di adenocarcinoma mucinoso (MA) o carcinoma a cellule anello con sigillo (SRCC). . PGC, MUC1 e MUC2 espressione in situ sono stati rilevati in tutti i 184 casi utilizzando l'immunoistochimica
Risultati
Sia PGC e MUC1 avevano un significativamente diminuita espressione in CG che in SG e AG (P
< 0,0001 e P
< 0,01, rispettivamente); Mentre MUC2 ha avuto un significativo aumento dell'espressione di AG che in SG e GC (P
< 0,0001). Sette fenotipi di PGC, MUC1 e MUC2 co-espressione sono stati trovati in quale PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotipo ha preso il 94,7% (54/57) nel gruppo SG; PGC + /MUC1 + /+ MUC2 e PGC- /MUC1 + /+ MUC2 fenotipo ha preso il 43,9% (25/57) e il 52,6% (30/57) di AG; i fenotipi di gruppo GC apparso variabile; straordinariamente, PGC- /MUC1- /MUC2 + fenotipo ha preso 100% (6/6) in MA o SRCC gruppo e aveva una significatività statistica rispetto ad altri (P
< 0,05).
Conclusioni
fenotipi di PGC, MUC1 e MUC2 co-espressione nelle malattie gastriche dinamici sono variabili. Nel gruppo SG è sempre mostrato PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotipo e AG gruppo ha mostrato due fenotipi (PGC + /MUC1 + /+ MUC2 e PGC- /MUC1 + /MUC2 +); i fenotipi di gruppo GC apparso variabile, ma il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + può essere un biomarcatore predittivo per la diagnosi di MA o SRCC, o distinguere MA istologico o SRCC da adenocarcinoma tubolare accompagnati da secrezione mucinoso o la distribuzione sparsi cellulare anello con sigillo.
Parole
Pepsinogeno C (PGC) Mucin1 (MUC1) Mucin2 (MUC2), il cancro gastrico immunoistochimica proteine ​​funzionali Sfondo
funzione normale di stomaco ha bisogno di due tipi di materiali che esistono principalmente nel succo gastrico normale. Sono componenti proteici e piccoli materiali molecolari che partecipano a regolamentazione. Tra questi, soltanto pepsinogeno e mucina appartengono componenti proteiche nel succo gastrico, che sono entrambi importanti proteine ​​gastriche fisiologicamente funzionali. Pepsinogeno sono stati divisi in pepsinogeno A (PGA) e pepsinogeno C (PGC), e il secondo è un precursore della pepsina C umana, che è un enzima digestivo [1]. L'aspetto di PGC è un segnale di graduale maturazione della funzione digestiva [2]. 1% di PGC umana dallo stomaco è secreto nel sangue periferico e il rapporto di PGA e PGC rilevato nel siero era un biomarker per gastrite atrofica (AG) o cancro gastrico (GC) [3-5]. Mucina (MUC) è una sorta di glicoproteina famiglia secreto da epitelio della mucosa funzioni di protezione, lubrificazione e idratazione possedere per lumen epiteliali, e 20 tipi di mucine era stato individuato da MUC1 a MUC21 fino ad ora [6]. MUC1 è una mucina contenente catena peptidica core e glicoproteina catena laterale associata alla membrana altamente polimorfici. MUC1 possiede una capacità protettiva che partecipa nel comporre la barriera di "muco-bicarbonato", e funziona anche in una gamma di segnalazione cellulare [7, 8]. La sua iperespressione o localizzazione intracellulare aberranti si trova nelle cellule cancerose e è associata con i carcinomi [9-12].
Tranne le proteine ​​gastrici fisiologicamente funzionali di cui sopra, una proteina funzionale "ectopica", MUC2 potrebbe essere espressa quando la mucosa gastrica verificato metaplasia intestinale. MUC2 è anche una mucina altamente polimorfici contenente catena peptidica core e catena laterale glicoproteina [13, 14]. Nelle normali circostanze fisiologiche, la proteina MUC2 esprime nella mucosa intestinale ed è assente nella mucosa gastrica. Tuttavia, MUC2 potrebbe essere "ectopica" espresso alla mucosa gastrica sotto effetto patogeno di fattori esterni. Sia che si partecipa alla risposta dell'ospite a questi fattori patogeni esterni, come l'infiammazione [15] o di H. pylori
[16, 17] rimane controverso.
Proteine ​​gastrici Come fisiologicamente funzionali e "ectopica" espresso proteine , l'associazione di PGC, MUC1 e MUC2 unicamente e le malattie gastriche era stato segnalato in passato [18-22]. La nostra squadra ha anche dimostrato in studi precedenti che l'espressione PGC ha avuto uno stretto rapporto con il grado di malignità della mucosa gastrica [23], e abbiamo anche trovato la proteina MUC1 aveva una sottoespressione significativo GC rispetto ai soggetti non-cancro [24]. Inoltre, l'espressione MUC2 aveva uno stretto rapporto con gastrite atrofica [25]. Tuttavia, l'analisi di queste proteine ​​in uno stesso gruppo di casi che rappresentano diverse fasi della progressione del tumore non era mai stata riportata fino ad ora, che può fornito alcune nuove informazioni nella possibile funzione di queste proteine, e anche nelle possibili fenotipi molecolari di diverse malattie gastriche .
in questo studio caso-controllo, abbiamo studiato la co-espressione di PGC, MUC1 e MUC2 in situ nello stesso gruppo di casi nella sequenza SG-AG-GC, così come in diversi tipi istologici di GC in per trovare fenotipi molecolari del cancro gastrico e malattie precancerose e ulteriormente esplorare il potenziale co-funzione del PGC, MUC1 e MUC2 nella comparsa e lo sviluppo del cancro gastrico.
Metodi
pazienti
Questo progetto di ricerca è stato approvato dal Comitato Etico del China Medical University, e tutti i campioni di tessuto gastrico di 184 pazienti sono stati raccolti da pazienti con lettere di consenso e il questionario di anamnesi che hanno partecipato a un programma di controllo sanitario da gastroscopia per lo screening del cancro gastrico o negli ospedali situati in Zhuanghe e Shenyang della provincia di Liaoning in Cina tra il 2002 e il 2005. I pazienti con una storia di altri tumori maligni o altre malattie benigne gastriche, tra cui l'erosione gastrica, malattie ulcera peptica, polipi gastrici, e adenomi sono stati esclusi. I campioni bioptici dalle gastroscopie sono stati inclusi in paraffina e colorate con ematossilina e metodo di colorazione eosina (HE); il criterio di ammissibilità per tutti i casi è la diagnosi istologica. I campioni bioptici sono stati raccolti da 70 pazienti GC con un'età media di 59.13 ± 10,50 anni che vanno da 34 a 80 anni. 57 pazienti affetti da gastrite superficiale (SG) e 57 pazienti con gastrite atrofica (AG) avevano un'età media simile di 57.18 ± 11.74 e 57.88 ± 10,62 anni rispettivamente, che vanno da 34 a 79 anni di età. Il GC e SG, AG gruppi avevano alcuna differenza statistica in termini di sesso ed età composizione (P = 0,812
e P = 0,593
, rispettivamente Tabella 1). Inoltre, abbiamo classificato i campioni di 70 pazienti GC secondo la classificazione WHO (28 HMDA, 30 PDA e 12 mA o SRCC). I HMDA, PDA e MA o SRCC sottogruppi ha mostrato alcuna differenza statisticamente significativa in genere e composizione per età (p = 0.310
e P
= 0.141, rispettivamente Tabella 1) .table 1 I messaggi di base degli oggetti
variabilità
SG
AG
GC
GC analizzato per PGC, MUC1 e MUC2 (n = 70)

HMDA
PDA
MA o SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
sesso maschile

36
38
48
20
22
6

Femmina 21
19
22 Pagina 8 Pagina 8 Pagina 6
P = 0,812

P = 0,310

Età

media 57.88 ± 10.62
57.18 ± 11.74
59.13 ± 10.50
61.54 ± 9.62
58.77 ± 11.05
54.42 ± 10.17
Gamma
42-79
34-79
34-80
42-80
35-80
34-71
P = 0,593

P = 0,141

colorazione immunoistochimica per la rilevazione dell'espressione proteica PGC, MUC1 e MUC2 in situ
analisi immunoistochimica è stata eseguita in sezioni 5 micron di spessore da campioni sequenzialmente fette di fissate in formalina e campioni inclusi in paraffina secondo il metodo descritto da Byrd [24, 26 ] con leggera modifica. Brevemente, sezioni di tessuto sono stati deparaffinate e reidratati. La perossidasi endogena è stata bloccata con perossido di idrogeno al 3% in metanolo per 10 min e poi le sezioni sono state lavate con tampone fosfato (PBS), pH 7,4. Le sezioni sono state incubate con siero di cavallo non immunizzati per 20 min a temperatura ambiente e lavate prima di essere incubate con un anticorpo specifico per una notte a 4 ° C. Poi le sezioni sono state lavate e incubate con (anticorpi di capra anti-topo, Maixin Inc., Fujian, Cina) biotinilati anticorpi secondari e perossidasi streptavidina-biotina. Dopo tre lavaggi con PBS, le sezioni sono state visualizzate con 3,3'- diaminobenzidina tetra-cloridrato e di contrasto con ematossilina. Gli anticorpi primari sono stati sostituiti con tampone PBS come controllo negativo. Le specifiche del mouse anticorpi anti-umani sono stati acquistati da NeoMarkers Inc. Fremont, Stati Uniti d'America (Essere umano Milk Fat Global-1, HMFG-1, contro MUC1, 1: 200 diluizione) [27, 28] e Maixin Inc. Funjian, Cina (contro MUC2, clone n ° M53, 1: 100 diluizioni). E topo anti-umano di anticorpi contro il PGC (clone n 2D5, 1: 500 diluizione) è stato presentato da Istituto Clinico Laboratorio di giapponese, gentilmente. risultati immunoistochimici sono stati giudicati da HSCORE (punteggio istologico) [29]. Il HSCORE è stato calcolato utilizzando due indici di proporzione (Pί) e intensità (ί). La proporzione (Pί) è stato stimato tenendo conto della percentuale di cellule positive. L'intensità (ί) è stata giudicata come 0 (nessuna colorazione), 1+ (marrone colorazione della luce), 2+ (marrone colorazione), o 3+ (pesante colorazione marrone). Il HSCORE stato derivato sommando la proporzione di cellule colorazione intensità moltiplicata per l'intensità della colorazione. HSCORE
=
Σ
Pί
×
ί
Dove ί = 0, 1, 2, 3 e Pί varia da 0.0 a 1.0, i HSCOREs variava da un minimo di zero in casi senza colorazione ad un massimo di 3,0 nel caso in cui tutte le cellule sono state colorate con intensità massima. Abbiamo giudicato HSCORE > 0.0 come positivo mentre HSCORE = 0,0 come negativo. Il HSCORE è stata determinata da due osservatori indipendenti.
Statistiche
test non parametrico e le probabilità esatte di Fisher sono stati usati per determinare la differenza di espressione PGC, MUC1, MUC2 nella sequenza SG-AG-GC e in diversi tipi istologici di GC. χ 2 prova e le probabilità di Fisher sono stati usati per determinare la differenza di co-espressione delle tre proteine. Il rank-sum test e analisi di correlazione di Spearman sono stati usati per analizzare le correlazioni in diversi gruppi. Tutte le analisi statistica è stata effettuata utilizzando SPSS (16,0) programma software statistico (SPSS, Chicago, USA). Tutto il test statistico era prova di probabilità two-side e P
< 0.05 è stato considerato statisticamente significativo
Risultati
L'espressione di PGC, MUC1, MUC2 in GC e malattie precancerose di Gruppi espressione PGC. è stato trovato nel citoplasma delle cellule della mucosa gastrica (Figura 1A). espressione MUC1 è stato trovato nel citoplasma e /o membrana delle cellule della mucosa gastrica (Figura 1E). proteine ​​MUC2 era colorato nel citoplasma delle cellule caliciformi (Figura 1 undecies). Figura 1 L'espressione di proteine ​​PGC, MUC1, MUC2 in diversi tessuti della mucosa gastrica (× 200). A. forte espressione positiva del PGC nella mucosa gastrica di gastrite (SG) gruppo superficiale; B. positiva espressione di PGC in gastrite atrofica (AG) di gruppo, alcuni espressione negativa; C. espressione negativa di PGC in adenocarcinoma gruppo (MDA) moderatamente differenziato; D. espressione negativa di PGC nel carcinoma a cellule anello con sigillo di gruppo (SRCC). E. forte espressione positiva di MUC1 nel gruppo SG; F. positiva espressione di MUC1 in AG gruppo; G. positiva espressione di MUC1 in adenocarcinoma differenziato (PDA) Gruppo male; H. espressione negativa di MUC1 nel gruppo SRCC; I. espressione negativa di MUC2 nel gruppo SG; J. forte espressione positiva di MUC2 in AG gruppo; K. espressione positiva di MUC2 nel gruppo PDA; L. forte espressione positiva di MUC2 nel gruppo adenocarcinoma mucinoso. La freccia indica tutte le cellule del alterazioni patologiche.
La frequenza espressione delle tre proteine ​​in diversi gruppi di malattie gastriche è stata esaminata mediante analisi immunoistochimica. PGC e MUC1 proteine ​​espressione nel gruppo GC era significativamente inferiore a quella nel SG e AG gruppi (P
< 0,05). espressione della proteina MUC2 nel gruppo GC era significativamente inferiore a quella nel gruppo AG (P
< 0,001), ma l'espressione di gruppo SG è stata inferiore a quella nel gruppo di GC (P
< 0,001). La correlazione di espressione della proteina PGC, MUC1 e MUC2 con la sequenza SG-AG-GC è stato analizzato rispettivamente. Abbiamo trovato c'erano correlazioni tra queste tre proteine ​​e la sequenza di malattia (P
< 0,01); PGC e MUC1 ha mostrato correlazioni negative con la sequenza di SG-AG-GC (coefficienti di correlazione sono stati r = -0,770, r = -0,210, rispettivamente; P
< 0,001; p = 0.004
, rispettivamente). MUC2 indicato correlazione positiva con la sequenza SG-AG-GC (coefficiente di correlazione era r = 0.260, P
< 0,001). Inoltre, secondo l'OMS classificazione istologica, il gruppo GC è stato diviso in alto e moderato adenocarcinoma (HMDA), mal adenocarcinoma differenziato (PDA), adenocarcinoma mucinoso o gruppo carcinoma a cellule anello con sigillo (MA o SRCC) gruppi. Abbiamo scoperto che la proteina MUC1 in MA o SRCC gruppo era significativamente inferiore a quella nei gruppi HMDA e PDA (P
< 0,001, la tabella 2), e in MUC2 MA o SRCC gruppo era significativamente più alta di quella nei gruppi PDA (P = 0,013
, tabella 2), ma la proteina PGC ha avuto alcuna differenza significativa nel GC group.Table 2 Frequenza di PGC, MUC1 e MUC2 espressione della proteina in malattie gastriche
colorazione punteggio
SG
AG
GC
GC (n = 70)

HMDA

PDA
MA o SRCC
n = 57
n = 57
n = 70
n = 28
n = 30
n = 12
PGC
2.0-3.0
19(33.3)
2(3.5)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
1.0-1.9
29(50.9)
14(24.6)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0.1-0.9
9(15.8)
13(22.8)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0(0.0)
0
0(0.0)
28(49.1)
70(100.0)
28(100.0)
30(100.0)
12(100.0)
P
1
< 0,0001
< 0,0001 -
P Pagina 2
1.000
1.000 -
MUC1
2.0-3.0
24(42.1)
29(50.9)
21(30.4)
12(42.9)
9(31.0)
0(0.0)
1.0-1.9
19(33.3)
19(33.3)
15(21.7)
8(28.6)
6(20.7)
1(8.3)
0.1-0.9
13(22.8)
9(15.8)
23(33.3)
7(25.0)
12(41.4)
4(33.0)
0
1(1.8)
0(0.0)
10(14.5)
1(3.6)
2(6.9)
7(58.3)
P
3
0.012
0,0003 -
P Pagina 4
< 0,0001
0,0004 -
MUC2
2.0-3.0
2(3.5)
46(80.7)
12(17.1)
6(21.4)
2(6.7)
4(33.3)
1.0-1.9
0(0.0)
6(10.5)
8(11.4)
3(10.7)
2(6.7)
3(25.0)
0.1-0.9
0(0.0)
3(5.3)
19(27.1)
9(32.1)
8(26.7)
2(16.7)
0
55(96.5)
2(3.5)
31(44.3)
10(35.7)
18(60.0)
3(25.0)
P
5
< 0,0001
< 0,0001 -
P
6
0,273
0.013 -
P
7
< 0,0001
< 0,0001 -
P Pagina 8
< 0,0001
< 0,0001
-
P
9
< 0,0001
0.001 -
Nota: L'analisi statistica utilizzata test non parametrici e test esatti di Fisher. P
1, P 3
, P
5
significa il significato rispetto al gruppo GC, rispettivamente. P 2
, P 4
, P
6
significa il significato rispetto a, rispettivamente, MA o gruppo SRCC,. P
7
significa il significato rispetto al gruppo HMDA; P
8
significa il significato rispetto al gruppo di PDA; P
9
significa il significato rispetto a MA o gruppo SRCC.
La co-espressione fenotipo di PGC, MUC1, MUC2 in GC e gruppi di malattie precancerose
Le caratteristiche di co-espressione di PGC, MUC1 , proteine ​​MUC2 sono stati analizzati. Abbiamo trovato il fenotipo di PGC + /MUC1 + /MUC2- rappresentato il 94,7% (54/57) nel gruppo SG; PGC + /MUC1 + /+ MUC2 e PGC- /MUC1 + /+ MUC2 fenotipo hanno rappresentato il 43,9% (25/57) e il 52,6% (30/57) nel gruppo di AG, rispettivamente. I fenotipi di gruppo GC apparso variabile, tra i quali, tutti i casi erano fenotipo PGC-, in cui la maggior parte erano gli individui con fenotipo di PGC- /MUC1 + /+ MUC2 o PGC- /MUC1 + /MUC2- (33 o 26 casi, ha rappresentato il 47,1% rispettivamente 37,1%, come mostrato nella Figura 2 AC o DF). Inoltre, i casi GC sono stati classificati in base ai tipi istologici, abbiamo scoperto che il 100% (6/6) nel gruppo MA o SRCC fosse il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + (Figura 2 GI), gruppo di altri fenotipi in MA o gruppo SRCC erano significativamente più bassi rispetto a quella dei PGC- /MUC1- /MUC2 + gruppo fenotipo (P
< 0,05, tabella 3). Figura 2 Il fenotipo di PGC /MUC1 /MUC2 co-espressione nelle stesse alterazioni patologiche (× 200). A. L'espressione negativa di PGC in adenocarcinoma moderatamente differenziato gruppo (MDA). B. L'espressione positiva di MUC1 in gruppo MDA. C. L'espressione positiva di MUC2 in gruppo MDA. D. L'espressione negativa di PGC in adenocarcinoma differenziato (PDA) Gruppo male. E. L'espressione positiva di MUC1 in gruppo PDA. F. L'espressione negativa di MUC2 in gruppo PDA. G. L'espressione negativa di PGC nel carcinoma a cellule anello con sigillo di gruppo (SRCC). H. L'espressione negativa di MUC1 in gruppo SRCC. I. L'espressione positiva di MUC2 in gruppo SRCC. Ogni tre figure in una composizione orizzontale erano tutti dello stesso individuo. La freccia indica tutte le cellule del alterazioni patologiche.
Tabella 3 diverso fenotipo della concordanza di PGC, MUC1 e MUC2 espressione della proteina in malattie gastriche
Fattori
n
diverso gastrica malattie
diverso tipo istologico di GC
PGC
MUC1
MUC2
SG (n = 57 )
AG (n = 57)
GC (n = 70)
HMDA (n = 28)
PDA (n = 30)
MA o SRCC (n = 12)
P
*
- Francia - -
5
- -
5 (100,0)
1 (20,0) Pagina 3 (60,0)
1 (20,0)
0.015 -
-
+
6 -
- Pagina 6 (100,0) -
- Pagina 6 (100,0) -
-
+
-
27 -
1 (3,7)
26 (96,3)
9 (34,6)
15 (57,7) Pagina 2 (7.7)
< 0,0001
-
+
+
63 -
30 (47.6)
33 (52,4)
18 (54,8)
12 (38,7)
3 ( 6.5)
< 0,0001 +
-
-
1 1 (100.0)
-
-
-
-
-
-
+
-
+
0
-
-
-
-
-
-
-
+
+
-
55
54 (98,2)
1 (1,8) -
- Francia - -
+
+
+
27 Pagina 2 (7.4)
25 (92,6) -
- Francia - -
Nota: * P
valore significava altro gruppo rispetto al PGC- /gruppo fenotipo MUC1- /MUC2 + e usato Fisher . probabilità esatta
L'analisi di correlazione di Spearman ha mostrato che ogni due di PGC, MUC1 e MUC2 avevano correlazione (P
< 0,05). C'era una correlazione positiva tra PGC e MUC1 (P = 0.006
, r = 0.200), così come MUC1 e MUC2 (P = 0,177
, r = 0.016), mentre il PGC e MUC2 hanno una correlazione negativa ma il coefficiente di correlazione è stato il più grande. (P
< 0,001, r = -0,313)
Discussione
Pepsinogeno C (PGC) e mucin1 (MUC1) sono importanti proteine ​​gastrici fisiologicamente funzionali; Mucin2 (MUC2) è una proteina funzionale "ectopica" in metaplasia intestinale della mucosa gastrica. Abbiamo analizzato l'co-espressione delle tre proteine ​​in una sequenza malattia gastrica dinamica così come diversi tipi istologici di cancro gastrico al fine di esplorare i fenotipi molecolari co-espressione a base di cancro gastrico, così come la sua malattia precancerosa e correlazione tra il modello di co-espressione e di diverse malattie gastriche.
Come sappiamo, PGC, MUC1, MUC2, le tre proteine ​​aveva solo importante ruolo diagnostico per la malattia gastrica. Ma la co-espressione e il loro fenotipo molecolare non sono stati riportati fino ad ora, mentre nella distinzione tra diverse malattie gastriche. In effetti, la co-espressione di proteine ​​combinate suggerendo fenotipo molecolare come MUC2 e CD10 era stata segnalata in precedenza. Wakatsuki, K et al. e Hasuo, T et al. divisa GC nel fenotipo gastrica (G-type) e fenotipo intestinale (I-tipo) secondo MUC5AC, MUC6, MUC2, e CD10 [30, 31], mentre altri studiosi divisi tipo G e I-tipo in base al MUC2 con altre proteine ​​[20, 32]. Ma il significato di questi studi è stato tutto basato sulla considerazione che i diversi fenotipi avevano diversi modelli di progressione per GC. Si è voluto indagare la co-espressione di PGC, MUC1 e MUC2 che potrebbe anche dare un indizio per la comprensione della progressione delle malattie gastriche.
C'erano sette tipi di co-espressione per le studiate tre proteine ​​in questo studio . Nel gruppo SG ha sempre mostrato il fenotipo di PGC + /MUC1 + /MUC2- che significa PGC e MUC1 sono stati entrambi positivi e MUC2 era negativo. Abbiamo anche analizzato le correlazioni tra le tre proteine ​​e la sequenza di SG-AG-GC e ha scoperto che PGC e MUC1 entrambi avevano correlazione negativa e solo MUC2 avuto correlazione positiva con la sequenza malattia, il che significa PGC e MUC1 aveva simile distribuzione tendenza mentre PGC aveva un grande coefficiente di correlazione di MUC1 (r = -0,770 e r = -0,210, rispettivamente). In AG gruppo co-espressione di queste tre proteine ​​ha mostrato due fenotipi (PGC + /MUC1 + /+ MUC2 e PGC- /MUC1 + /MUC2 +) e la differenza principale tra loro era se la proteina PGC è stato espresso. PGC è un segnale di graduale maturazione della funzione digestiva, un prodotto differenziazione del enzima digestivo pepsina C, ed è stato riportato che PGC gradualmente diminuito nella sequenza SG-AG-GC [23]. Nel nostro studio, PGC è stato positivo circa il 50% e il 50% negativo nel gruppo AG. Nel cambiamento dinamico di SG per AG, una parte dei campioni è apparso negativo PGC mentre una parte dei campioni è rimasta positiva. Tra i campioni positivi del 50%, ci sono stati ancora 22,8% dei casi (13/57, Tabella 2) che erano debolmente positivo (segnato 0,1-0,9). Perché una parte dei campioni è apparso negativo, mentre alcuni sono rimasti ancora positivo? Ci possono essere due ipotesi per spiegare: in primo luogo, esso può essere associato con il grado di atrofia ghiandolare; In secondo luogo, la variabilità genetica di PGC umane tra gli individui possono contribuire alla diversa espressione di PGC in AG gruppo. Anche se quest'ultimo era solo una ipotesi, altre proteine ​​come marcatore ipossia carbonica (CA) IX era stato riferito che lo stato di metilazione genetica è stato contribuire alla diversa espressione di CA IX nel gruppo GC [33]. Queste ipotesi devono essere studiati in futuro. Nel gruppo GC co-espressione di queste tre proteine ​​apparso variabile, ma abbiamo trovato un fenomeno interessante. Quando si analizzano i diversi gruppi GC istologici, abbiamo trovato il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + tutti distribuiti nel gruppo di adenocarcinoma o carcinoma mucinoso anello con sigillo cellule (MA o SRCC, 100%, 6/6). Nella diagnosi clinica patologica, il carcinoma a cellule adenocarcinoma e Sigillo anello mucinoso istologico erano sempre difficile distinguere con adenocarcinoma tubolare accompagnati da secrezione mucinoso o cella anello con sigillo di distribuzione sparsi. Nel nostro studio, il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + tutti distribuiti nel gruppo di MA o SRCC piuttosto che altri gruppi, che hanno suggerito che il peggio istologico differenziazione MA o SRCC perso PGC e MUC1 che sono biomarcatori di differenziazione maturo. Abbiamo trovato MUC1 positivo in adenocarcinoma tubolare. Anche se è accompagnata mucinoso distribuzione sparsa la secrezione o un anello con sigillo cellulare, ha suggerito una differenziazione migliore in modo che potessero apparire biomarcatori di differenziazione maturo come MUC1 e PGC. Il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + può essere un biomarcatore predittivo per la diagnosi di MA o SRCC o distinguere da adenocarcinoma tubolare accompagnati da secrezione mucinoso o con sigillo cella anello di distribuzione sparsi. Choi ed i suoi colleghi hanno trovato adenocarcinoma mucinoso sempre mostrato MUC1- e MUC2 + in uno studio di 133 casi MA [34], che era coerente con il risultato del nostro studio. Potrebbe MUC2 identificare unicamente adenocarcinoma mucinoso? Probabilmente no, perché non era specifico in quanto parte della MUC2 + fenotipo di GC appartiene tubolare adenocarcinoma. Dopo aver aggiunto MUC1 che era un biomarker di differenziazione maturo per limitare, l'identificazione di MA o SRCC si è rivelata più sensibile.
È pienamente consapevole che il nostro studio ha avuto alcune limitazioni. In primo luogo, solo campioni bioptici gastroscopic sono state adottate e dati clinici limitati (solo per età e sesso) erano disponibili. In secondo luogo, il campione dei casi era relativamente piccolo gruppo particolarmente GC e la sua analisi sottogruppo. studio campione più ampio Future è stato richiesto per validare il nostro risultato. In terzo luogo, le malattie precancerose inclusi solo AG gruppo, mentre altri tipi di malattie precancerose quali adenomi non sono stati determinati, in quanto la dimensione del campione di altre malattie precancerose come adenomi era troppo piccolo per essere un gruppo. In quarto luogo, l'attuale studio ha discusso solo due mucine (cioè MUC1 e MUC2) e un PGC pepsinogen senza inclusione di altri mucine come MUC4 che è stato segnalato un aumento dell'espressione di diversi tipi di cancro gastrico, come adenocarcinoma e SRCC [35] o altre proteine ​​funzionali gastrici come pepsinogen A [36] e trifoglio fattori famiglia [37-40]. Ulteriori indagini tra cui proteine ​​di stomaco legati potrebbe dare un profilo della progressione e anche biomarker di malattie gastriche.
Conclusioni
In conclusione, abbiamo studiato la co-espressione di PGC, MUC1 e MUC2 in situ della SG-AG sequenza -GC, così come in diversi tipi istologici di GC. Abbiamo scoperto che SG ha mostrato PGC + /MUC1 + /MUC2- fenotipo e AG mostrato PGC + /MUC1 + /+ MUC2 e PGC- /MUC1 + /+ MUC2 fenotipi. Il fenotipo di PGC- /MUC1- /MUC2 + può essere un biomarcatore predittivo per la diagnosi di MA o SRCC, o distintivo MA istologico o SRCC da adenocarcinoma tubolare accompagnati da secrezione mucinoso o con sigillo cella anello di distribuzione sparsi. L'associazione tra co-funzione del PGC, MUC1 e MUC2 e l'insorgenza e lo sviluppo del cancro gastrico e malattie precancerose deve essere chiarito in futuro
Abbreviazioni
SG:.
Superficiale gastrite

AG:
gastrite atrofica
GC:
cancro gastrico
HMDA:
alta e moderatamente differenziato adenocarcinoma
PDA: Adenocarcinoma
scarsamente differenziato
MA:
mucinoso adenocarcinoma

SRCC:
Anello con sigillo Cell Carcinoma
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Questo lavoro è sostenuto da sovvenzioni dal Programma nazionale della ricerca chiave di base di. Cina (973 Programma Rif. 2010CB529304), la National Science Foundation naturale della Cina (Rif No.31200968), e la Fondazione di Scienza e Tecnologia nella provincia di Liaoning (Rif. 2.011.225,002 mila).
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