MYC, FBXW7 an TP53 Kopie Zuel Variant an Ausdrock vun Gastric Cancer

MYC, FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung Zuel Variant Copy an Ausdrock vun Gastric Cancer VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung MYC Dereguléierung ass eng gemeinsam Manifestatioun zu gastric carcinogenesis, normalerweis als eng Konsequenz vun der Gentherapie amplification, chromosomal translocations, oder posttranslational Mechanismen. FBXW7 VerfÜgung ass eng p53-kontrolléiert entholl-suppressor datt eng Roll an der Regulatioun vun Zell Zyklus Sortie an Äerdatmosphär via MYC ofgeschnidden spillt. VerfÜgung Method VerfÜgung Mir MYC VerfÜgung évaluéiert, FBXW7 VerfÜgung, an TP53 VerfÜgung Kopie Zuel, mRNA Niveauen, a FAQ Ausdrock vun gastric Kriibs a vläit Net-neoplastic uplanzen vun 33 Patiente an och zu gastric adenocarcinoma Zell Linnen. Mir sech och d'Invasioun Potential vun der gastric Kriibs Zell Linnen. VerfÜgung Resultater VerfÜgung MYC VerfÜgung amplification war an 51,5% vun gastric entholl Echantillon observéiert. Läsche vun eng Kopie vun FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung war zu 45,5% a 21,2% vun gastric erhéijen observéiert, bzw.. MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock war wiesentlech méi héich an erhéijen wéi an Net-neoplastic Echantillon. FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung Ausdrock mRNA Ofstand ënneschten zu erhéijen wéi an vläit Net-neoplastic uplanzen. Desweideren, dereguléierte MYC VerfÜgung an FBXW7 VerfÜgung mRNA Ausdrock war mat der Präsenz vun lymph Node Metastasen an entholl Etapp III-IV assoziéiert. Ausserdeem, war méi MYC immunostaining dacks zu intestinal-Typ observéiert wéi diffusen-Typ gastric Cancers a war VerfÜgung mRNA Ausdrock mat MYC assoziéiert. Kënschtlech Studie weisen dass MYC fräi a reduzéiert FBXW7 Ausdrock mat engem méi invasiv phenotype zu gastric Kriibs Zell Linnen verbonnen ass. Dëst Resultat encouragéiert eis d'Aktivitéit vun der gelatinases MMP-2 an MMP-9 zu souwuel Zell Zeilen ze ermëttelen. Béid gelatinases sinn Kannerbetreiung vun stromal Zellen Wierderbuch anstatt Kriibs Zellen, an et ass proposéiert ginn, datt souwuel un Kriibs Werdegang bäidroen. Mir observéiert engem groussen Zouhuele MMP-9 Aktivitéit zu ACP02 Verglach mat ACP03 Zellen. Dës Resultater confirméiert datt ACP02 Zellen hunn grouss Invasioun Méiglechen stoussen wéi ACP03 Zellen. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung An Conclusioun, FBXW7 an MYC mRNA vläicht eng Roll an aggressiv biologic Behuele vun gastric Kriibs Zellen spillen a vläicht eng nëtzlech Luucht vun aarme hätt ginn. Ausserdeem, ass MYC engem Kandidat Zil fir nei Therapien géint gastric Kriibs. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Gastric Kriibs MYC FBXW7 TP53 Background VerfÜgung Gastric Kriibs (GC) ass de véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an der zweeter Virwaat Ursaach vum Kriibs Doud weltwäit [1]. GC considéréiert ass eng grouss ëffentlech Gesondheet Suerg, besonnesch a Länner entwéckelen, dorënner Brasilien [2]. Eng fundamental Aspekt vun carcinogenesis VerfÜgung ass ongebremste Zell Zouhuelen vun der Heefung vun Verännerunge datt den Ausdrock oder Repressioun vun Zell Zyklus-Kontroll Genen Promotioun [3]. MYC VerfÜgung ass eng transcriptional Faktor Équipe zu Zell Zyklus Regulatioun a Zell Wuesstem verhaft datt allgemeng am Cancers dereguléierte ass an huet wéi e Schlësselelement vun gastric carcinogenesis beschriwwe gouf [4, 5]. Verschidden aner Zorte vun posttranslational Modifikatioune vun MYC beschriwwe goufen, dorënner phosphorylation, acetylation, an ubiquitination [6]. D'ubiquitin-proteasome System ass de groussen reglementaresche FAQ ofgeschnidden Passerelle zu Zell dat a Wuesstem Kontroll Équipe [7]. FBXW7 VerfÜgung eng F-Këscht FAQ subunit vun der Skp1 /Cul1 /F-Këscht komplex (SCF) ubiquitin ligase komplex encodes. SCF FBXW7 induces ofgeschnidden vun de Produite vu positive Zell Zyklus regulator Genen, wéi cyclin E VerfÜgung, MYC VerfÜgung, top VerfÜgung, an juni VerfÜgung, duerch phosphorylation-ofhängeg ubiquitination [8]. Dorënner SCF FBXW7 dat heescht de Législateur, ass MYC besonnesch Bedeitung am Sortie Zell Zyklus well se gemengt ass eng Roll ze spillen an der Bestëmmung ob mammalian Zellen deelen oder net [9]. VerfÜgung dereguléierte FBXW7 VerfÜgung Ausdrock ass eng grouss Ursaach vun carcinogenesis [10-12]. Verloscht vun FBXW7 VerfÜgung Ausdrock kënnt zu MYC overexpression nodeems an huet mat aarmséileg hätt am GC Patienten [13] assoziéiert gouf. Allerdéngs, MYC Aktivatioun vun FBXW7 VerfÜgung Verloscht kontrolléiert an Aktivéierung vun p53, déi zu der Regelung vun bewosst Äntwerte DNA Schued a Manque Ausdrock vun oncogenes eng wichteg Roll spillt. Schulung vun Zell Zyklus verhaft vun p53 erlaabt fir DNA gefléckt oder apoptosis Aféierungs- [14]. Soumat ass concomitant Verloscht vun FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung néideg genetesch Onstabilitéit an tumorigenesis zu induce [11]. Am Moment studéieren VerfÜgung, ze propagéieren mir MYC VerfÜgung, FBXW7 VerfÜgung, an TP53
Gentherapie Kopie Zuel Variant an mRNA an FAQ Ausdrock am GC Echantillonen an Linnen gastric Zell adenocarcinoma. Méiglech Associatiounen tëscht eis Conclusiounen an der clinicopathological Fonctiounen an /oder Invasioun an Migratioun Méiglechen stoussen vun der Zell Linnen goufen och bewäert. VerfÜgung Method VerfÜgung Séminairen Echantillon VerfÜgung Echantillon vun 33 GC Patiente kritt huet, deen um João chirurgesch Behandlung mécht de Barros Barreto University Hospital zu Para Stat, Brasilien. Leschten entholl a vläit Net-neoplastic Otemschwieregkeeten uplanzen sech direkt aus de Mo. Géigewier an flëssegem Stéckstoff bis RNS Extraktioun gefruer. D'clinicopathological Charakteristike vun de Patient Echantillon VerfÜgung sinn an Table 1. GC Echantillon ausseet dës Funktioun ze Lauren [15] . All GC Echantillon zougedréckt der Präsenz vun Helicobacter pylori VerfÜgung, an der cagA virulence Faktor war vun Hinnen alleguer Analyse vun ureA VerfÜgung alles an cagA VerfÜgung wéi vun Clayton et al VerfÜgung beschriwwen. [16] an Covacci et al. VerfÜgung [17], respektiv. All Patienten déi negativ mat der vun aussetzt entweder Chimiotherapie oder radiotherapy virum Agrëff, an et waren och keng aner Co-Optriede vum festgestallte Cancers. Awëllegung mat Akraafttriede vun der Ethik Comité vun der Federal Universitéit vun Para war obtained.Table 1 MYC, FBXW7 an TP53 Gentherapie Kopie Zuel Variant, MYC an p53 FAQ Ausdrock an clinicopathological Charakteristike vun 33 GC Patienten CNV MYC

CNV FBXW7
CNV TP53
IHC MYC
IHC p53
2 Exemplairen (n = 16)
≥ 3 Kopien (n = 17)
p- Wäert
2 Exemplairen (n = 18)
1 Kopie (n = 15)
p- Wäert
2 Exemplairen (n = 25)
1 Kopie (n = 7)
p - Wäert
P (n = 19)
N (n = 14)
p- Wäert
P (n = 6)
N (n = 25)
p- Wäert
Alter (y) (mengen ± Fils) VerfÜgung > 50 (65.3 ± 9.1)
7
12
0.166
12
7
0.304
15
3
0.393
10
4
0.310
5
9
0.094
≤50 (42.1 ± 8.2) VerfÜgung 9 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 6 VerfÜgung 8 VerfÜgung 10 VerfÜgung 4 VerfÜgung 10 VerfÜgung 9 VerfÜgung 2 VerfÜgung 17 VerfÜgung Geschlecht
Male
8
7
0.437
7
8
1.000
13
1
0.104
12
3
0.072
2
13
0.413
Female
8
10
8 VerfÜgung 10 zu 12 VerfÜgung 6 VerfÜgung 8 VerfÜgung 10 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 13 VerfÜgung Histopathology
Intestinal
12
10
0.465
12
10
1.000
16
6
0.387
17
5
0.009*
6
16
0.378
Diffuse
4
7
6 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 9 VerfÜgung 1 VerfÜgung 3 VerfÜgung 8 VerfÜgung 1 VerfÜgung 10 VerfÜgung Déift vun entholl Invasioun
T1
3
3
1.000
5
1
0.186
5
1
1.000
2
4
0.182
1
5
1.000
T2-T4
13
14
13 zu 14 zu 20 VerfÜgung 6 VerfÜgung 18 VerfÜgung 9 VerfÜgung 6 VerfÜgung 21 VerfÜgung Lymph Node Metastasen
Absent
5
8
0.481
8
5
0.722
10
3
1.000
7
6
0.717
2
11
0.676
Present
11
9
10 zu 10 zu 15 VerfÜgung 4 VerfÜgung 13 VerfÜgung 7 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 15 VerfÜgung Etapp
I-II
8
10
0.732
12
6
0.170
14
3
0.678
12
6
0.493
3
15
0.674
III-IV
8
7
6 bis 9 bis 11 VerfÜgung 4 VerfÜgung 8 VerfÜgung 7 VerfÜgung 4 VerfÜgung 11 VerfÜgung MYC IHC VerfÜgung Negativ VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 8 VerfÜgung 0,481 VerfÜgung 7 VerfÜgung 6 VerfÜgung 1.000 VerfÜgung 11 VerfÜgung 2 VerfÜgung 0,671 VerfÜgung positiv VerfÜgung 11 VerfÜgung 9 VerfÜgung 11 VerfÜgung 9 VerfÜgung 14
5 zur VerfÜgung p53 Negativ VerfÜgung 14 zu 12 VerfÜgung 0,398 VerfÜgung 14 zu 12 VerfÜgung 1.000 VerfÜgung 21 VerfÜgung 4 VerfÜgung 0,157
IHC positiv VerfÜgung 2 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 4 VerfÜgung 3 VerfÜgung 4 VerfÜgung 3 VerfÜgung * p VerfÜgung &si besteet; 0,05; P: positiv; N:. negativen VerfÜgung BTS Linnen VerfÜgung Gastric adenocarcinoma Zell Linnen ACP02 an ACP03 [18] huet cultured zu komplett RPMI mëttelfristeg (Invitrogen Corp., Karlsbad CA, USA) ergänzt mat 10% an et Bovine serum (FBS), 1% penicillin /streptomycin, an 1% kanamycin. VerfÜgung Copy Zuel Variant (CNV) VerfÜgung DNA ofgebaut gouf mat engem DNAQiamp Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Däitschland) no der Taktik vum Produzent. Duplex grouss real-Zäit Hinnen alleguer (real-Zäit qPCR) war mat der FAM /standing MGB-Label TaqMan Ämter fir MYC VerfÜgung (Hs01764918_cn), FBXW7 VerfÜgung (Hs01362464_cn), oder TP53 VerfÜgung (Hs06423639_cn), an VIC /TAMRA-Label TaqMan CNV RNAse P VerfÜgung (Ƹ3326) war fir d'intern Kontroll benotzt. All real-Zäit qPCR Reaktioune waren am quadruplicate mat gDNA laut den Hiersteller d'Protokoll andeems en 7500 Fast Real-Time Hinnen alleguer System (Life Technologies, Foster City, CA, USA) gesuergt. D'Kopie Zuel vun all Prouf huet déi Analys CNV Copy Ament Software V1.0 (Life Technologies, Foster City, CA, USA) geschat. Bekannt Mënscherechter Frankräich DNA (Promega, Madison, USA) war fir Eechung benotzt. VerfÜgung Chemeschen real-Zäit transcriptase Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS Géigendeel war mat TRI Reagent ofgebaut ® Solution (Life Technologies, Carlbad, CA, USA folgenden) kritt den Hiersteller d'. RNS Konzentratioun an Qualitéit huet mat enger NanoDrop spectrophotometer (Thermo Wëssenschaftlech, Mëtt, DE, USA) an 1% agarose gels alles. Ergänzen DNA (cDNA) war mat engem High-Kapazitéit cDNA Archive Kit Wierderbuch laut den Hiersteller d'Recommandatiounen (Life Technologies, Foster City, CA, USA). Real-Zäit qPCR primers an TaqMan Ämter gezielt MYC VerfÜgung (Hs00153408_m1), FBXW7 VerfÜgung (Hs00217794_m1), an TP53 VerfÜgung (Hs01034249_m1) huet als Assays-op-réicht Produkter fir Gene Expression ((Life Technologies kaaft, . Foster City, CA, USA) Echtzäit qPCR Leeschtung war eng Abi Prism 7500 System benotzt (Life Technologies, Foster City, CA, USA) laut den Hiersteller d'Instruktioune GAPDH VerfÜgung (NM_002046.3;. Life Technology, USA) fir iwwerwaacht RNS Input war wéi eng intern Kontroll ausgewielt an Transkriptiouns Effizienz ëmgedréint. All real-Zäit qPCR Reaktioune fir Zil- Genen an intern Kontrollen zu triplicate standing waren op der selwechter zappen. d'famill quantification (RQ) vun der Gentherapie Ausdrock berechent war d'ΔΔCt benotzt Method [19], an déi d'Net-neoplastic Echantillonen gouf als calibrator fir all vläit entholl Prouf designéierte. VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung Immunohistochemical fir MYC waren an p53 op formalin-fix, paraffin-Ënnerbewosstsinn chirurgesch Rubriken standing analyséiert. Serial 3-μm Rubriken sech benotzt. Heat-entschlof antigen retrieval war Employé (microprocessor-kontrolléiert Drock Pascal ® DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA). Eng universell peroxidase-conjugated Secondaire antibody Kit (LSAB System, DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA) war fir ze erkennen mat diaminobenzidine (botzt) wéi der chromogen benotzt. Déi folgend Primärschoul antibodies benotzt goufen: Maus monoclonal antibodies ausernee géint MYC (dilution 1: 150; sc-40, Santa Cruz Déi, Santa Cruz, CA, USA a Klon 9E10, Zymed ®, San Francisco, CA, USA) , FBXW7 (dilution 1:50, Abnova Corp., Taipei City, Taiwan), an p53 (dilution 1:50; DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA). Positiv FAQ Ausdrock war wéi kloer nuklear staining definéiert zu méi wéi 10% vun den Zellen. VerfÜgung Migratioun an Invasioun assay VerfÜgung Migratioun an Invasioun assays sech zu engem geännert Boyden Chamber mam filter am Text (8-μm Pore) duerchgefouert fir 12-gutt Placke (BD Biosciences, San Jose, CA, USA). Ze bewäerten Invasioun, Filter- sech mat 10 μl vun Matrigel (10-13 mg /ml) (BD Biosciences, San Jose, CA, USA) Beschichtete iwwerdeems op Äis. Zellen (2 × 10 5) waren an 1 ml vun RPMI ouni FBS an der ieweschter Chambre plated. Déi ënnescht ëmkomm war mat 1,5 ml vun RPMI mat FBS gefëllt. No 48 h zu Kultur, mat 4% paraformaldehyde an Post-fix mat 0,2% glaskloer mauve Zellen sech zu 20% methanol fest. Zellen op der ieweschter Säit vun den filter, inklusiv deenen vun der Matrigel, sech mat engem Koteng Swab geläscht. Hypothetesch Zellen (op déi ënnescht Säit vun de filter) waren fotografeschen an gezielt. Experiment an triplicate gesuergt. VerfÜgung Immunofluorescence VerfÜgung BTS op Glas coverslips ugebaut goufen, fir 10 min mat 1% paraformaldehyde zu phosphate-gefiermt Salins (PBS) fix, dann permeabilized mat 0,5% Triton X-100 (Fläch-Aldrich, St. Louis, MO, USA) zu PBS fir 15 min an mat 1% Bovine serum albumin (BSA) zu PBS gespaart. D'Zellen sech mat der Maus antibodies géint MYC Kierchefënster (verdënntem 1:50; Zymed ®, USA), p53 (verdënntem 1:50; DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA), a FBXW7 (verdënntem 1:50; Abnova Verletzung ., Taipei City, Taiwan). Primärschoul antibodies huet mat enger Anti-Maus Alexa-568-conjugated Secondaire antibody (Invitrogen) bekannt. All incubations sech fir 60 min bei Raumtemperatur duerchgefouert. Kären sech mat DAPI zu verlängeren anti-Fade Opriichte mëttelfristeg (Invitrogen) geschriwwen. Negativ Kontroll Echantillon waren ëmschriwwen Filteren virun ausser dass Primärschoul antibodies sech eleng mat PBS ewech a ersat. VerfÜgung Western blotting VerfÜgung Protein Reduktioun vun Zellen war no schëlleg Prozeduren gesuergt. Kuerz, war total FAQ aus ACP02 an ACP03 Zellen Quecksëlwer mat 50 mm Tris-HCl gefiermt mat 100 mmol /L NaCl, 50 mm NaF, 1 mm NaVO 4, 0,5% NP-40, a komplett protease inhibitor Cocktail (Roche , Däitschland). Protein Konzentratioun war mat engem Bradford assay (Fläch-Aldrich) geschat. Iwwer 30 μg vun insgesamt FAQ Extrait war op engem 12% Natrium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) gelies an electrophoresed iwwerlaascht. Geléist Proteinen sech dann aus der gelies op engem nitrocellulose Membran transferéiert. D'Membran war mat 5% nonfat Mëllech an Tris-gefiermt Salins mat 5% Tween (Fläch-Aldrich, Sant Louis, MO, USA) gespaart an dann mat der Maus monoclonal anti-MYC (Santa Cruz Déi), anti-FBXW7 (Abnova incubated 200, 1::, Taipei City, Taiwan), anti-p53 (DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA), an anti-β-actin (Fläch-Aldrich, Sant Louis, MO, USA) antibodies 1 verdënntem 100, 1: 100, an 1: 2.000, respektiv. 5000 dilution vun horseradish peroxidase (HRP) -conjugated Schof anti-Maus antibody (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ, USA) fir 1 h bei Raumtemperatur: Duerno, goufen Schläimhait mat engem 1 incubated. Proteinen sech duerch verstäerkte chemiluminescence visualized. VerfÜgung Zymography VerfÜgung ACP02 an ACP03 Zellen (5 × 10 4 vun all) sech plated an erlaabt ze halen an hiere fir op d'mannst 8 h. Operstéiungszeen Zellen sech dräimol mat PBS gewäsch, an der Kultur mëttelfristeg war mat serum-gratis mëttelfristeg fir 24 h ersat. Der Aktivitéit vun MMP2 an MMP9 am bedingt mëttelfristeg war vun zymography évaluéieren. Bedingt mëttelfristeg gesammelt gouf, Konzentratioun (Microcon 30 K, Merck Millipore, Darmstadt, Däitschland) an resuspended zu SDS-PAGE Prouf Prellbock (ouni β-mercaptoethanol). Déi reschtlech Zellen sech lysed an d'FAQ Konzentratioun war mat engem BCA assay (Thermo Wëssenschaftlech Pierce, Rockford, IL, USA) geschat. Eng total vun 1 μg vun FAQ aus all bedingt mëttelfristeg gouf op 10% polyacrylamide gels getrennt mat 0,2% gelatin. No electrophoresis, goufen d'gels fir 30 min an 2,5% Triton X-100 Leit zou, duerno zu 10 mm Tris equilibrated (pH 8.0) a bei 37 ° C fir 16-24 h zu enger Entwécklung gefiermt mat 50 mm Tris (pH 8.0 incubated ), 5 mm CaCl 2, an 0,02% Nan 3. D'gels sech mat 0,2% Coomassie blo R250 (GE Amersham, Piscataway, NJ, USA) Kierchefënster an destained mat 1: 1 acetic Seier /methanol Léisung. Experiment an triplicate gesuergt. Zymographic Bands, déi schonns vun MMP Aktivitéit sinn, sech duerch Scannen densitometry laachen. VerfÜgung statistique Analysë VerfÜgung D'Normalitéit vun Variabel distributions sech war d'Shapiro-Wilk Test mat. Associatiounen tëscht MYC VerfÜgung, FBXW7 VerfÜgung, an TP53 VerfÜgung Zuel Variant kopéieren, mRNA Niveauen, FAQ Ausdrock, clinicopathological Fonctiounen, a Zell Invasioun an Migratioun Méiglechen stoussen sech mat der Chi-Feld analyséiert (χ 2) a Mann-Whitney Tester. Korrelatioun tëschent den Ausdrock vun de verschiddenen Zil- mRNAs war mat Spearman d'Test alles, an déi engem Wäert drënner 0.3 eng schwaach Korrelatioun uginn, uginn 0.3-0.7 engem mëttel- Korrelatioun, a Wäerter iwwer 0,7 uginn eng staark Korrelatioun. Date sinn wéi d'Steiren an interquartile Rei gewisen; p Wäerter manner wéi 0,05 waren bedeitendst considéréiert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Gastric entholl uplanzen zougedréckt amplification vun MYC VerfÜgung a Läsche vun FBXW7 VerfÜgung an TP53
dräi oder méi Kopië vun MYC VerfÜgung sech zu 51,5% (17/33) vun gastric entholl Zellen fonnt. Am Géigesaz, 45,5% (15/33) an 21,2% (7/33) vun Zellen gastric entholl enthale just een Kopie vun FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung, bzw.. VerfÜgung D'Associatioun tëscht clinicopathological Fonctiounen an MYC
, FBXW7 VerfÜgung, an TP53 VerfÜgung Zuel Kopie ass zu Table 1. One gastric entholl zesummegefaasst, datt dräi Kopien vun TP53 enthale VerfÜgung vun der Chi-Feld Analyse ausgeschloss war. Nee Veräin huet tëscht Kopie Zuel Variant vun der Genen studéiert an clinicopathological Fonctiounen fonnt. VerfÜgung MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock war héich an erhéijen wéi an Net-neoplastic uplanzen hierkommen FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung Ausdrock mRNA niddreg zu entholl uplanzen VerfÜgung den Ausdrock Niveau vun MYC VerfÜgung mRNA (2.01 ± 1,72 fantastesch änneren) zu entholl Otemschwieregkeeten Echantillon war wesentlech méi héich wéi an Net-neoplastic Otemschwieregkeeten (p = 0.0002), wobäi d'Ausdrock Niveau vun FBXW7 VerfÜgung mRNA (0.53 ± 0,40 fantastesch änneren) an TP53 VerfÜgung mRNA (0.84 ± 0,55 fantastesch änneren) an uplanzen entholl Otemschwieregkeeten war wesentlech méi niddreg wéi an Net-neoplastic Otemschwieregkeeten (p &Si besteet; 0,0001 a p = 0,0011, bzw.). Mir hu net e wesentleche Korrelatioun tëscht MYC VerfÜgung, FBXW7 VerfÜgung, an TP53 VerfÜgung mRNA Ausdrock (MYC VerfÜgung /FBXW7 VerfÜgung mRNA r = -0,3464, p = 0,0562 fannen; MYC VerfÜgung /TP53 VerfÜgung mRNA r = 0,0950, p = 0,6113; FBXW7 VerfÜgung /TP53 VerfÜgung mRNA r = -0,0745, p = 0.4747). Soumat war nëmmen eng Tendenz Richtung Korrelatioun tëscht eng Erhéijung vun MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock an enger Ofsenkung FBXW7 VerfÜgung mRNA Ausdrock fonnt. VerfÜgung Table 2 resüméiert d'Associatiounen tëscht verschiddene clinicopathological Fonctiounen an der RQ vun MYC VerfÜgung FBXW7, VerfÜgung, an TP53 VerfÜgung mRNA Ausdrock vun entholl a vläit Net-neoplastic uplanzen. Eng Erhéijung vun MYC VerfÜgung mRNA Niveau war mat der Präsenz vun lymph Node Metastasen (p = 0.016) an GC entholl Etapp III-IV (p = 0.036) assoziéiert. Eng bedeitend Reduktioun vun FBXW7 VerfÜgung mRNA Niveau war och mat der Präsenz lymph Node Metastasen (p = 0.015) an entholl Etapp III-IV (p = 0.008) .Table 2 MYC, FBXW7 an TP53 mRNA Ausdrock Niveauen a clinicopathological Faktoren assoziéiert vun 33 gastric Kriibs Patienten
n (%)
MYC
p- Wäert
FBXW7

p- Wäert
TP53
p- Wäert
Paracetamol ± IQR VerfÜgung Paracetamol ± IQR VerfÜgung Paracetamol ± IQR VerfÜgung Alter (y) (mengen ± Fils) VerfÜgung > 50 (65.3 ± 9.1) VerfÜgung 19 (57.6%) VerfÜgung 2,04 ± 1,35 VerfÜgung 0,8873 VerfÜgung 0,55 ± 0,37
0,9247 VerfÜgung 0,86 ± 0,62 VerfÜgung 0,7409 VerfÜgung ≤50 (42.1 ± 8.2) VerfÜgung 14 (42.4%) 1.44 ± 4,88 VerfÜgung 0,53 ± 0,50 VerfÜgung 0,94 ± 1,65 VerfÜgung
Geschlecht VerfÜgung Männlech VerfÜgung 15 (45.5%) VerfÜgung 2,01 ± 1,01 VerfÜgung 0,4065 VerfÜgung 0,53 ± 0,22 VerfÜgung 0,6353 VerfÜgung 0,89 ± 0,58 VerfÜgung 0,8125 VerfÜgung Weiblech
18 (54.5%) VerfÜgung 1,67 ± 2,03 VerfÜgung 0,56 ± 0,56 VerfÜgung 0,87 ± 0.69 VerfÜgung Histopathology VerfÜgung Intestinal VerfÜgung 22 (66,7%) VerfÜgung 2,06 ± 0,99 VerfÜgung 0,3525 VerfÜgung 0,53 ± 0,16 VerfÜgung 0,1391 VerfÜgung 0,81 ± 0,78 VerfÜgung 0,3311 VerfÜgung Firwat VerfÜgung 11 (33.3%) VerfÜgung 1,40 ± 2,32 VerfÜgung 0.77 ± 0,74 VerfÜgung 0,94 ± 0,38 VerfÜgung Déift vun T1 VerfÜgung entholl Invasioun VerfÜgung 6 (18.2%) VerfÜgung 0,89 ± 0,47 VerfÜgung 0,0857 VerfÜgung 0,88 ± 0,58 VerfÜgung 0,0678 VerfÜgung 0,85 ± 0,15 VerfÜgung 0,7069
T2-T4 VerfÜgung 27 (81.8%) VerfÜgung 2,08 ± 1,42 VerfÜgung 0,53 ± 0,43 VerfÜgung 0,91 ± 0,79 VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung feelen VerfÜgung 13 (39.4%)
0,98 ± 1.09 VerfÜgung 0,0225 * VerfÜgung 0,68 ± 0,36 VerfÜgung 0,0238 * VerfÜgung 0,84 ± 0,44 VerfÜgung 0,6121
20 (60.6%) Présent VerfÜgung 2.10 ± 2,20
0,46 ± 0,38 VerfÜgung 0,94 ± 0,79 VerfÜgung Etapp VerfÜgung ech-II VerfÜgung 18 (54.5%) VerfÜgung 1,39 ± 1,23 VerfÜgung 0,0362 * VerfÜgung 0,57 ± 0,38 VerfÜgung 0,0380 * VerfÜgung 0,83 ± 0,55 VerfÜgung 0,0892 † VerfÜgung III-IV VerfÜgung 15 (45.5%) VerfÜgung 2,41 ± 2,79 VerfÜgung 0,34 ± 0,45 VerfÜgung 0,96 ± 1.19 VerfÜgung MYC IHC
positiv VerfÜgung 20 (60.6%) VerfÜgung 2,18 ± 1,59 VerfÜgung 0,0022 * VerfÜgung 0,53 ± 0,32 VerfÜgung 0,4090 VerfÜgung 0,81 ± 0,57 VerfÜgung 0,1372 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 13 (39.4%) VerfÜgung 0,89 ± 0,85 VerfÜgung 0,58 ± 0,53 VerfÜgung 0,99 ± 0,90 VerfÜgung p53 IHC VerfÜgung positiv VerfÜgung 7 (21.2%) VerfÜgung 4,25 ± 6,53 VerfÜgung 0,0891
0,64 ± 0,68 VerfÜgung 0,9203 VerfÜgung 1,06 ± 0,83 VerfÜgung 0,2937 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 26 (78.8%) VerfÜgung 2,00 ± 1,44 VerfÜgung 0,55 ± 0,35 VerfÜgung 0,87 ± 0,60
* p VerfÜgung &Si besteet; 0,05; IQR:. Interquartile Rei VerfÜgung Nuclear MYC FAQ staining mat intestinal-Typ GC VerfÜgung Positiv staining fir nuklear MYC an p53 assoziéiert ass huet zu 64,5% (20/31) an 19,4% (6/31) vun de GC Echantillon fonnt bzw. (Dorënner 1). Nee komm war fir FBXW7 fonnt. Table 1 resüméiert d'clinicopathological Fonctiounen an MYC an p53 immunostaining Resultater. Ausdrock vun MYC war méi heefeg an intestinal-Typ wéi diffusen-Typ GC (p = 0.007). Doriwwer eraus, war MYC immunostaining mat fräi MYC VerfÜgung mRNA Niveau (p = 0.0022) assoziéiert. Nee Veräin huet tëscht p53 immunostaining an clinicopathological Charakteristiken, TP53 VerfÜgung Kopie Nummer, oder TP53 VerfÜgung mRNA Ausdrock fonnt. Figur 1 Immunohistochemical Analyse vun MYC an p53 FAQ Ausdrock am GC. (A) Negativ MYC immunostaining vun diffusen-Typ GC; (B) MYC immun komm an intestinal-Typ GC; (C) Positiv p53 immunostaining vun diffusen-Typ GC; (D) p53 immun komm an intestinal-Typ GC (Vergréisserung × 40). VerfÜgung Se ACP02 an ACP03 Zell Linnen VerfÜgung Béid ACP02 an ACP03 Zellen aus dräi MYC VerfÜgung Exemplairen an nëmmen ee FBXW7 VerfÜgung Kopie . D'Zuel vun TP53 VerfÜgung Exemplare war virweisen an zwee Zell Linnen. Verglach mat mRNA Ausdrock vun ACP03 Zellen, ausgedréckt ACP02 Zellen engem héichen Niveau vun MYC VerfÜgung (1.34-fantastesch) an nidderegen Niveaue vun FBXW7 VerfÜgung an TP53 VerfÜgung mRNA (0.62- an 0.73-fantastesch, bzw.).
Western blot Analysë Teamchef MYC Ausdrock war wiesentlech méi héich an ACP02 Zellen wéi ACP03 Zellen (p = 0.048). Ausserdeem, war FBXW7 Ausdrock vill manner an ACP02 Zellen wéi ACP03 Zellen (p = 0.049). Mä, do kee groussen Ënnerscheed zu p53 Ausdrock tëscht der Zell Linnen war (p = 0.077) (Dorënner 2A-B). VerfÜgung Immunofluorescence Analyse vun béiden Proteinen engem punctiform Muster vun Etikette gewisen, déi Western blot Resultater ënnerstëtz eng Erhéijung vun weisen MYC a Reduktioun vun FBXW7 Ausdrock vun ACP02 Zellen am Verglach mat ACP03 (Dorënner 2). Matrigel Invasioun assay Resultater weisen, datt ACP02 Zellen sech invasiv wéi ACP03 Zellen (p = 0.001). Migratioun assay Resultater weisen, dass manner ACP02 migrated Zellen am Verglach mat ACP03 Zellen (p = 0.0028) (Dorënner 2C-D). Figur 2 MYC, FBXW7 an p53 Ausdrock, Migratioun an Invasioun Fähegkeet an ACP02 an ACP03. (A) heeschen Grafik weisen ± Fils vum MYC, FBXW7 an p53 FAQ Ausdrock vun ACP02 an ACP03. Dës Proteinen sech un den Niveau vun Beta actin normalized; (B) Vertriederin Donnéeën vun MYC, FBXW7 an p53 FAQ Ausdrock; (C-D) Grafiken weisen mengen ± Fils vum Wanderung an invasiv Zellen triplicates assay; (E) Vertriederin Resultater vun MYC, FBXW7 an p53 immunofluorescence VerfÜgung Béid ACP02 an ACP03 Zellen véier gelatinase Aktivitéit Bands virgestallt:. MMP-9 Uklang fonnt (92 kDa), MMP-9 aktiv (88 kDa), MMP-2 Uklang fonnt ( 72 kDa), an MMP-2 aktiv (66 kDa) (Well 3). Mir hunn keng Differenze zu MMP-9 Uklang fonnt (p = 0.9788), MMP-2 aktiv (p = 0.7848), an MMP-2 Uklang fonnt (p = 0.1678) tëscht ACP02 an ACP03 Zellen. Allerdéngs, Differenze waren tëscht ACP02 an ACP03 Zellen mat Respekt ze MMP-9 aktiv (p = 0.0182) fonnt. Figur 3 Vertriederin gelatin zymography Analyse vun MMP-2 an MMP-9 Aktivitéit zu ACP02 an ACP03. (A) Bands ze souwuel Uklang fonnt an aktiv Formen vun MMP-2 an MMP-9 entspriechend waren am ACP02 an ACP03 observéiert. Densitometric analyséiert ginn vun der Bande op Uklang fonnt an aktiv Formen vun MMP-2 entspriechende (B) an MMP-9 (C). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung An der aktueller Etude, mir observéiert datt MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock fräi war am GC Echantillon Verglach mat Net-neoplastic Echantillon entspriechend. Ausserdeem, fir eis Kenntnisser, ass dat déi éischt Etude eng Associatioun tëscht fräi MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock an der Präsenz vun lymph Node Metastasen an CG Etapp III-IV bis Rapport, verstärkt d'Iddi dass MYC VerfÜgung Dereguléierung eng staark ass Faktor fir malignancy am GC. VerfÜgung Adams et al VerfÜgung. [20] an Leder et al. VerfÜgung [21] bewisen, dass MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock Dereguléierung der Entwécklung vum Kriibs zu transgenic Maus Modeller Promotioun kann. D'Erhéijung vun MYC VerfÜgung mRNA Niveau vun de Mënscherechter Cancers kann aus Resultat souwuel direkten an indirekte Mechanismen, déi e puer Explikatioune hätt. Éischt, MYC VerfÜgung amplification ass déi gemeinsam Mechanismus vun MYC VerfÜgung Dereguléierung an GC [5]. Dëse Mechanismus féiert zu fräi Produktioun vun oncogenic Produiten zu Quantitéite datt d'transcriptional Kapazitéit vun engem normalen duebel Kopie Gentherapie ugeholl. Hei, observéiert mir dräi oder méi MYC VerfÜgung Gentherapie Exemplairen an 51,5% vun gastric erhéijen uplanzen. Virdrun Etuden aus eisem Grupp awer och, datt MYC VerfÜgung amplification oder trisomy vun chromosome 8, op déi MYC VerfÜgung wellkomm ass, an all GC Echantillon präsent war vun Individuën an Northern Brasilien iwwerpréift, wéi och am GC Zell Linnen gouf duerch eise Grupp aus erhéijen vum brasilianesche Patienten [18, 22-27]. D'Präsenz vun MYC VerfÜgung amplification huet och zu Plasma Echantillon vu Persounen mat GC [28] gemellt ginn. Allerdéngs gouf am Moment Etude nogewise keen direkten association tëscht MYC VerfÜgung Kopie Zuel Variant an mRNA Ausdrock. VerfÜgung Second, aus konsequent recombination tëscht der immunoglobulin (IG) nët d'Erhéigung vun MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock Resultat kann an der MYC VerfÜgung oncogene. Dëse Phänomen ass zu Burkitt d'lymphoma dacks beschriwwen an ass mat engem méi Halschent-Liewen vun MYC VerfÜgung mRNA zu betraff Zellen [29] assoziéiert. Virdrun, observéiert eiser Fuerschung Grupp MYC VerfÜgung insertions vun diffusen-Typ GC haaptsächlech an chromosomes datt zu Genen vun immunoglobulins (chromosomes 2, 14, an 22) Ëmgéigend ginn [26]. Sou, chromosomal translocations der MYC VerfÜgung nët sensibiliséieren (8q24) an diffusen-Typ CG am Individuen vun Northern Brasilien och eng Erhéijung vun MYC VerfÜgung mRNA Niveau Réflexioun kéint. VerfÜgung Immunohistochemistry (IHC) Analyse Teamchef MYC Ausdrock ass méi dacks an intestinal-Typ GC wéi diffusen-Typ GC uplanzen fonnt. Dës hire Restaurant hätt fir en Manque MYC FAQ nodeems datt net déi entweder vun der benotzt antibodies am Moment studéieren unerkannt ass. Desweideren, observéiert mir eng Associatioun tëscht MYC VerfÜgung mRNA Ausdrock Niveau an MYC staining. Ausserdeem, Kontroll posttranscriptional Mechanismen MYC Stabilitéit [6, 30]. MYC VerfÜgung Dereguléierung huet mat Verloscht vun FBXW7 VerfÜgung verbonne gouf, eng haploinsufficient entholl suppressor Gentherapie. Am Allgemengen, FBXW7 VerfÜgung Verloscht kënnen duerch e Verloscht vun heterozygosity (Loh) an stattfannen [30] verursaacht ginn. De Verloscht um 4q, déi FBXW7 VerfÜgung nët, ass eng permanent chromosomal hire Restaurant zu GC [31, 32], an FBXW7 VerfÜgung kennen hun an 3.7-6% vun gastric erhéijen [12] fonnt ginn. VerfÜgung An de Moment studéieren, mir observéiert nëmmen een Kopie vun der FBXW7 VerfÜgung Gentherapie zu 45,16% vun der gastric erhéijen studéiert. Spannen, ass FBXW7 VerfÜgung mRNA Ausdrock am GC Echantillon ofgeholl Ofstand am Verglach mat Net-neoplastic Otemschwieregkeeten entspriechend. Ausserdeem war FBXW7 VerfÜgung mRNA Ausdrock Dereguléierung mat der Präsenz vun lymph Node Metastasen an GC Etapp III-IV assoziéiert, wéi och mat MYC VerfÜgung mRNA observéiert gouf. Dës Conclusiounen beléieren der Aarbecht vun Yokobori el al. VerfÜgung [13], déi och eng Associatioun tëscht reduzéiert FBXW7 VerfÜgung mRNA Ausdrock an lymph Node Metastasen gewisen, datt fir d'malignant Potential vun GC Zellen a Resultater an aarme hätt dréit. Desweideren, observéiert mir datt dem Wëllen vun MYC VerfÜgung an FBXW7 VerfÜgung mRNA Lien inversely am Moment Etude soll gin. VerfÜgung puer Studien weisen dass MYC VerfÜgung inactivation erhéijen an Déieren Hien suggeréiert datt MYC
kann ee molekulare Zil- zu Kriibs Behandlung [33-35] gin. Geff Soucek et al VerfÜgung. [36] proposéiert, datt FBXW7 kéint "entholl dormancy Therapie" vereinfachen. Soumat kënnen MYC ofgeschnidden vun FBXW7 net nëmmen e Staat vun entholl dormancy induce awer och en Anti-entholl Wierkung hätt. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Helicobacter pylori Wonn an libre ghrelin Niveauen - Eng systematesch review
• "Fast Streck" Rééducatioun der gastric Kriibs resection: Erfahrung mat 80 Nuechten Fäll