BRCAA1 monoclonal antibody unisse Magnéitfeld nanoparticles fir an VIVO geziilte magnetofluorescent Imaging vun gastric Kriibs conjugated

BRCAA1 monoclonal antibody fir unisse Magnéitfeld nanoparticles conjugated zu VIVO VerfÜgung geziilte magnetofluorescent Imaging vun gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Gastric Kriibs ass 2ten déi heefegste Kriibs an China, an ass nach ëmmer déi zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs -related Doud vun der Welt. Wéi erkenne fréi Zellen gastric Kriibs ass nach ëmmer eng grouss Erausfuerderung fir fréi Diagnos an Therapie vun Patienten mat gastric Kriibs. Dës Etude anzeschätzen ass eng Zort vun Salle nanoprobes fir an VIVO VerfÜgung geziilte magnetofluorescent Imaging vun gastric Kriibs ze entwéckelen. VerfÜgung Method VerfÜgung BRCAA1 monoclonal antibody bereet war, gouf als éischt antibody benotzt 50 Puer uplanzen vun gastric zu stain Kriibs an normal gastric Panz Stoffer Kontroll, an conjugated mat unisse Magnéitfeld nanoparticles mat 50 nm Duerchmiesser, déi entstoent BRCAA1-conjugated unisse Magnéitfeld nanoprobes vun Transmissioun Elektronen microscopy an photoluminescence spectrometry charakteriséiert sech, wéi-virbereet nanoprobes sech mat gastric Kriibs MGC803 Zellen incubated, a sech an Mais Modell mat gastric Kriibs vu 5 mm Duerchmiesser via Schwäif verfeelt iwwerlaascht heijen, an duerno vun fluorescence opteschen Imaging an Magnéitresonanztomographie Radioberäich goufen, war hir biodistribution propagéieren. D'Otemschwieregkeeten serwéiert sech duerch unisse microscopy observéiert, an déi wichteg Organer wéi Häerz, haett, Nier, Gehir a Liewer sech duerch hematoxylin an eosin (HIEN) stain Method analyséiert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung BRCAA1 monoclonal antibody war erfollegräich bereet, BRCAA1 FAQ Schatzkummer iwwer-Ausdrock vun 64% gastric Kriibs Stoffer, keen Ausdrock zu Kontroll normal gastric Panz Stoffer, gëtt et statistesch Differenz tëscht zwou Gruppen (P VerfÜgung &Si besteet; 0.01). D'BRCAA1-conjugated unisse Magnéitfeld nanoprobes Collectioun Héich-toxicity, manner Magnéitfeld Intensitéit a manner unisse Intensitéit mat Héichpunkt-blo-dréint wéi reng FMNPs, kéinten duerch gastric Kriibs MGC803 Zellen endocytosed ginn, hätt am VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Stoffer Zil- iwwerlaascht vum Mais, a konnt bis Bild gastric Kriibs Stoffer vun unisse Imaging an Magnéitresonanztomographie, an haaptsächlech verdeelt am lokal gastric Kriibs Stoffer bannen 12 h Post-Sprëtz benotzt ginn. HIEN stain Analyse gewisen, datt keng kloer Schuedenersaz vun wichteg Organer observéiert goufen. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Déi héich-Performance BRCAA1 monoclonal antibody-conjugated unisse Magnéitfeld nanoparticles Zil- kënnen zu VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Zellen, kann fir gläichzäiteg magnetofluorescent benotzt ginn Imaging, an kann een groussen Potential an Applikatiounen hunn wéi duebel-Modell Imaging a lokal thermesch Therapie vun fréi gastric Kriibs an nächster Zukunft. VerfÜgung Background VerfÜgung gastric Kriibs war eemol d'zweet Équipe gemeinsam Kriibs zu Wuert [1]. Bis Datum, an de Vereenegte Staaten, Mo. malignancy ass am Moment de 14. heefegen Kriibs, an 2ten déi heefegste Kriibs an China [2, 3]. Gastric Kriibs ass nach d'zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud vun der Welt, a bleift schwéier ze heelen, well déi meescht Patienten präsent mat fortgeschratt Krankheet. Dofir, wéi ze erkennen, Pisten oder fréi gastric Kriibs Zellen kill ass ganz wichteg fir fréi Diagnos an Therapie vun Patienten mat gastric Kriibs. Up zu Datum VerfÜgung, sicht biomarkers enk mat gastric Kriibs assoziéiert ass nach ëmmer eng wichteg Aufgab. Zënter 1998, hunn mir probéiert ginn geregelten fréi gastric Kriibs Pre-Warnung System [4] ze etabléieren, an hoffen, dat de Précoce-Warnung System ze benotzen ze fréi gastric Kriibs Zellen entdecken zu de Patiente mat fréi gastric Kriibs unerkennen. Obwuel verschidde anescht-ausgedréckt Genen mat fréi gastric Kriibs verbonne identifizéiert goufen [5, 6], kann keen Gentherapie gin spezifesch uweist vun gastric Kriibs confirméiert ginn. Dofir, fir fréi gastric Kriibs Zellen ze erkennen, just mir Potential biomarkers wielt mat gastric Kriibs verbonnen, an nanoparticles a molekulare Imaging Techniken kombinéieren, versicht zu VIVO VerfÜgung fréi gastric Kriibs Zellen duerch an VIVO VerfÜgung entholl geziilte Imaging fannen . An eiser leschter Aarbecht, mir opgefouert eraus an gekloonten BRCAA1 Gentherapie aus Broscht Kriibs Zell Linn MCF-7cells (Broscht Kriibs antigen 1 Gentherapie verbonne) [AF208045, och ARID4B (OP-räiche interaktiv Domain-haltege FAQ 4B) genannt], a bestëmmt seng antigen epitope peptide SSKKQKRSHK [7, 8]. Mir bereet och BRCAA1 polyclonal antibody, an observéiert, dass de BRCAA1 FAQ zu bal 65% Medeziner uplanzen vun gastric Kriibs Stoffer iwwer-Ausdrock Schatzkummer [9-11]. Mir gesinn och datt BRCAA1 antigen zu gastric Kriibs Zell Linnen wéi MKN-1, MKN-74, SGC-7901, Kato-III an MGC803 Zellen iwwer-ausgedréckt gëtt. Dofir, soe mer, datt BRCAA1 FAQ Potential gezielt Protein een kann fir an VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung Am leschte Joer, molekulare Imaging Technologien baséieren op der Multi-funktionell nanoprobes hu grouss Fortschrëtter gemaach. Zum Beispill, nanoparticles wéi Quantemechanik dots, Magnéitfeld nanoparticles a Gold nanorods, etc. gewiescht fir molekulare Imaging [12-19] benotzt. Mettlerweil puer kleng Déieren Imaging Technologien wéi opteschen Imaging entwéckelt goufen (OI) vun bioluminescence (BLI), fluorescence (FLI) a vun intravital microscopy (IVM), Mikro-PET, Grausamkeet an CT [20-26]. Vun all dësen Technologien, wéi hir raimlech Resolutioun an Otemschwieregkeeten Déift Sensibilitéit ze verbesseren ass eng grouss Erausfuerderung. Sou wäit zu VIVO VerfÜgung entholl Stoffer mat iwwer 1 cm Duerchmiesser kënnen einfach vun CT, Grausamkeet, PET an bioluminescence Imaging novollzu ginn, erhéijen mat manner wéi oder gléich 5 mm Duerchmiesser ass ganz schwéier an de Medeziner Patienten fonnt ginn. An eiser leschter Rapporten, photosensitizer-conjugated Magnéitfeld nanoparticles sech fir an VIVO VerfÜgung gläichzäiteg magnetofluorescent Imaging a gezielt Therapie [27] erfollegräich benotzt. Allerdéngs war d'Reklamme Fähegkeet vun nanoprobes héich ofhängeg op Magnéitfeld nanoparticles. Mir bereet och eng Salle Ribonuclease-A-conjugated CdTe Quantephysik Punkt Stärekoup nanosystem fir Synchron- Kriibs Imaging an Therapie [28], de Reklamme Fähegkeet vun den-virbereet nanoprobes ass op RGD peptide ofhängeg. Verschidde Studie weisen dass KLENGE-2 FAQ Manque Ausdrock vun 6-35% gastric Kriibs Stoffer geet [29, 30], an huet sou de therapeutesch Zil fir Medeziner Patienten mat gastric Kriibs benotzt ginn [31], also, KLENGE-2 FAQ gehéiert grousse Potential an Imaging an Therapie vun gastric Kriibs. Allerdéngs, bis Datum, weist kee Rapport datt geziilte Imaging an Therapie vun am VIVO VerfÜgung gastric Kriibs baséiert op biomarkers mat gastric Kriibs assoziéiert. VerfÜgung Am leschte Joer, mir controllably bereet Silikatsubstrat-Beschichtete Quantephysik dots a super-paramagnetic nanoparticle composites (FMNPs) mat staarke unisse Signaler an excellent Magnéitfeld Eegeschaften, an hunn hinnen fir Bio-Etikette benotzt, Stammzellen Noféierung, Bio-Trennung, gezielt Imaging an hyperthermia vun erhéijen [29-32], mir gesinn och, dass den-virbereet nanoparticles eege gutt biocompatibility a Stabilitéit [33-38]. an dësem Pabeier VerfÜgung, mir voll d'Virdeeler vun FMNPs an BRCAA1 antigen, virbereet monoclonal antibody géint BRCAA1 FAQ benotzen, a bereet BRCAA1 monoclonal antibody-conjugated unisse Magnéitfeld nanoprobes (BRCAA1- FMNPs), Employé Sauna Mais Modell iwwerlaascht mat gastric Kriibs vu 5 mm Duerchmiesser an IVIS Imaging System an Magnéitresonanztomographie, ze propagéieren d'Machbarkeet vun esou-virbereet nanoprobes fir Net-invasiv zu VIVO VerfÜgung geziilte duebel modal Imaging vun gastric Kriibs. Resultater weisen, dass den-virbereet nanoprobes kann fir an VIVO VerfÜgung duebel-Modell Imaging vun gastric Kriibs benotzt ginn, an an Applikatiounen wéi duebel-Modell Imaging a lokal thermesch Therapie vun fréi gastric Kriibs an nächster Zukunft e grousst Potential hun kann.
Resultater an Diskussioun VerfÜgung Characterization vun Anti-BRCAA1 monoclonal Antibody VerfÜgung Als zu Table dës 1, mir erfollegräich zwee positiv Klon Zell Linnen S-200-5 kritt an S-335-5, hir titers waren anescht, endlech mir ausgewielt der anti-BRCAA1 monoclonal antibody vum S-200-5 Zell Linn als éischt antibody gastric Kriibs Stoffer a Kontroll Stoffer zu stain. Mir hu fonnt, datt BRCAA1 FAQ zu 64% gastric Kriibs Stoffer iwwer-Ausdrock Schatzkummer, keen Ausdrock vun normal Kontroll gastric Panz Stoffer, wéi 1 zu Dorënner gewisen, et statistesch Ënnerscheed tëschent zwee Grupp existéiert (P VerfÜgung &Si besteet; 0.01). Dëst Resultat ass bal identesch zu eisem leschte Rapport [4, 9-11], deen héich schloen datt BRCAA1 antigen kann als d'Potential Zil fir déi gastric Kriibs ausgewielt ginn, wann den-virbereet nanoprobes 64% Patienten mat fréi gastric Kriibs zougesprach, et gëtt fir Diagnos an Therapie vun Medeziner gastric Kriibs patients.Table 1 Titers vun BRCAA1 Monoclonal Antibodies zu Ascites Flesseggassystem entschlof vun Hybridoma Klon BTS vum Elisa VerfÜgung ganz nëtzlech sinn zu Antibody titer *
Klon
BRCAA1 (C) -OVA **
BRCAA1 (C) -BSA **
BSA **
OVA **
S-200-5 VerfÜgung 1.024.000 VerfÜgung 1.024.000 VerfÜgung &Si besteet; 1000 VerfÜgung &Si besteet; 1000 VerfÜgung S-335- 5 zur VerfÜgung 128.000 VerfÜgung 512.000 VerfÜgung &Si besteet; 1000 VerfÜgung &Si besteet; 1000 VerfÜgung * déi enk vun ascites Flesseggassystem dilution, déi éischt dilution vun ascites Flesseggassystem war 1:. 1000 VerfÜgung ** d'antigens sech op Elisa zappen bedeckt. VerfÜgung 1 Expression vun BRCAA1 FAQ zu gastric Kriibs Stoffer an normal Kontroll gastric Panz Stoffer Dorënner. A: gastric Kriibs Stoffer, × 100; B: normal Kontroll Stoffer, × 50. VerfÜgung Virbereedunge an Characterization vun BRCAA1- FMNPs nanoprobes VerfÜgung Als zu Dorënner 2A gewisen, sech bereet FMNPs komponéiert vun Silikatsubstrat-Opzielung CdTe a magnéitesch nanoparticles, hir Gréisst goufen 50 nm oder sou am Duerchmiesser. Als zu Dorënner 2D gewisen, no FMNPs mat anti-BRCAA1 antibody conjugated goufen, als-virbereet nanoprobes 'photoluminescence (eens) war Intensitéit niddreg wéi déi vun FMNPs, lénks-Verréckelung vun 40 nm suer-, déi wéinst war vun der Polariséierung Tarif ze begleede vum Ëmfeld Molekülle, an an der Ofsenkung vun Stokes Verleeen doraus, endlech zu engem bloen Verréckelung vun der Emissioun Spektren doraus. Den Zerfall, war Magnéitfeld Intensitéit vun den-virbereet nanoprobes och manner wéi FMNPs. Figur 2 Characterization vun Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes. A: HR-Tem Bild vun FMNPs; B: Magnéitescht Besëtz vun Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes; C: Zeta-Potential vun FMNPs mat Aminosaier Grupp, COOH, Infraktiounen-O Grupp; D:. Eens Spektren vun FMNPs conjugated mat an ouni BRCAA1 antibody VerfÜgung Am Laf BRCAA1-FMNPs nanoprobes vun virbereeden, hu mir dat Uewerfläch functionalization vun FMNPs ganz wichteg war anti-BRCAA1 mat FMNPs via covalent Emissioun antibody zu conjugate. Als zu Dorënner 2C gewisen, verschidden funktionell Gruppe vun FMNPs hu verschidden Zeta-Potential Wäerter. FMNPs Équipe negativ Infraktiounen-O-Grupp, hir Zeta-Potential Wäert war -34,05 mV, déi FMNPs mat Aminosaier Grupp hu positiv Zeta-Potential Wäert vun 24,80 mV, FMNPs mat carboxyl Grupp haten negativ Zeta-Potential Wäert vun -30,50 mV. Mir gesinn, datt carboxyl Gruppen op der Uewerfläch vun FMNPs conjugated mat anti-BRCAA1 antibody einfach wéi Aminosaier Gruppen op der Uewerfläch vun FMNPs. Wéi an Table 2 gewisen, huet d'Moyenne Kopplung Taux vun Anti-BRCAA1 antibody mat FMNPs-COOH 80,28% .Table 2 Kopplung Taux Miessung vun FMNPs-Anti-BRCAA1 antibody VerfÜgung zu Total Konzentratioun vun der anti-BRCAA1 antibody (Dummeldéng /μL)
d'Konzentratioun vun Anti-BRCAA1 antibody zu Reschtoffall Reaktioun Mëschung (Dummeldéng /μL)
Kopplung Taux (%)

1
1000.0
197.3
80.27
2
1000.0
191.2
80.88
3
1000.0
203.0
79.70
Als-virbereet nanoprobes fir eng kënschtlech VerfÜgung geziilte cytometer gastric Kriibs Zellen VerfÜgung gezielt Fähegkeet vun den-virbereet nanoprobes kënschtlech VerfÜgung sech duerch fluorescence microscope observéiert a berechent vun FACSCalibur Flow. Als 3 an Dorënner gewisen, FMNPs zoufälleg an d'bannenzegt vun der Zytoplasma verspreet, an anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes vierdrun der nucleolus ronderëm. Béid FMNPs a bereet BRCAA1-FMNPs nanoprobes an der Zytoplasma vun MGC803 Zellen no 4 h incubation mat MGC803 Zellen eran kënnt, wéi zu Dorënner 4A gewisen, FMNPs 25,23% MGC803 Zellen Label hätt, bleiwen der 74,77% Zellen konnt net ausgezeechent ginn. Als zu Dorënner 4B gewisen, 45,92% MGC803 Zellen kënnt vun der BRCAA1-FMNPs nanoprobes ausgezeechent ginn. Wann FMNPs an Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes respektiv mat MGC803 Zellen a mënschlech fibroblast Zellen fir 0,5 h incubated huet, mir vill vun Anti-BRCAA1-FMNPs an MGC803 Zellen aginn nanoprobes observéiert, puer nanoprobes duerch mënschlech fibroblast Zellen aginn, hätt puer FMNPs triede MGC803 Zellen a mënschlech fibroblast Zellen, déi héich schloen, dass anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes speziell MGC803 Zellen Zil- kënnen. D'Magnéitresonanztomographie vun MGC803 Zellen a mënschlech incubated fibroblast Zellen mat anti-BRCAA1-FMNPs fir 4 h waren am Well dës 5, MGC803 Zellen staarke Magnéitfeld Signal wéi mënschlech fibroblast Zellen (HDF) Schatzkummer, déi och gewisen, dass de bereet nanoprobes Zil- kënnen MGC803 Zellen speziell. Figur 3 Am kënschtlech fluorescence Biller vun MGC 803 no mat FMNPs behandelt a FMNPs-BRCAA1 nanoparticles (Vergréisserung = × 200). Déi wonnerbar Grupp vu Biller illustréiert FMNPs zoufälleg an der Zytoplasma verdeelen, ënnen Grupp vu Biller FMNPs-BRCAA1 ronderëm d'nucleolus verspreet Schatzkummer an hat och un d'MGC803 gezielt Fähegkeet. VerfÜgung 4 FACSCalibur Flow cytometer Analyse vun MGC803 mat FMNPs Fortgeschratten Dorënner an FMNPs-BRCAA1. A: den MGC803 mat 50 μg /ML behandelt vun FMNPs fir 24 h 25,23% Zell Schatzkummer sech mat FMNPs ausgezeechent. B: d'MGC803 mat 50 μg /ml vun FMNPs-BRCAA1 behandelt fir 24 h illustréiert bis zu 45,92% Zell sech mat FMNPs-BRCAA1 Fortgeschratten VerfÜgung 5 MR Imaging vun MGC803 Zellen an HDF Zellen Dorënner.. A: MGC803 Zellen mat anti-BRCAA1-FMNPs. B: HDF Zellen mat anti-BRCAA1-FMNPs. C:. MGC803 Zellen mat nëmmen FMNPs VerfÜgung Als-virbereet nanoprobes fir unisse Imaging vun am VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Zellen VerfÜgung Fir entholl geziilte Eegeschafte vun Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes, Sauna Mais Modeller iwwerlaascht mat MGC- diskutéieren 803 gastric Kriibs Zellen sech bereet an ënner engem Net-invasiv Manéier fir 12 h iwwerwaacht vun IVIS fluorescence Imaging System benotzt. VerfÜgung vun iwwerwaacht real-Zäit fluorescence Intensitéit an de ganze Kierper, déi entholl-gezielt Charakter vun der anti-BRCAA1- FMNPs Studiebäihëllefe war an der Sauna Mais iwwerlaascht mat gastric Kriibs MGC803 Zellen einfach alles. Als zu Dorënner 6A gewisen, no der ganzer Déieren unisse Signaler bannent 30 min vu Post-Sprëtz vun nanoprobes, konnt de subcutaneous entholl Stoffer kloer aus dem Ëmfeld Hannergrond Otemschwieregkeeten tëscht 1 h an 12 h Post-Sprëtz delineated ginn, mat maximal Géigesaz geschitt um 6 h Post-Sprëtz. Staark fluorescence Signal war nach an der entholl Site op 6 h Post-Sprëtz fonnt ginn, déi uginn, datt d'Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes waren an der entholl Stoffer zéien alldeeglech. Tatsächlech baséiert op de Resultater vun Dorënner 6B, déi héich entholl zu Hannergrond Verhältnis (TBR) Wäert ugeholl héich dass den-virbereet nanoprobes zéien an entholl Stoffer alldeeglech Verglach zu normal Kontroll Stoffer. Dat war am fluorescence Biller bestätegt, déi weisen, dass d'fluorescence Signal vun den-virbereet nanoprobes an der entholl Site stäerkst ënnert all Mais Organer war wéi an Dorënner 6C gewisen. Zousätzlech, no 12 h Post-Sprëtz vun Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes, fluorescence Intensitéit an entholl war ëmmer kloer observéiert, iwwerdeems d'Notzong vun bereet nanoprobes zu normal Organer net kloer war. Dës Donnéeë héich schloen datt bereet nanoprobes Zil- kënnen héich effizient entholl Stoffer bannen Sauna Mais mat gastric Kriibs iwwerlaascht. Mir gesinn och, dass déi nanoprobes am ganze Maus Kierper bal komplett um 12 h Post-Sprëtz verschwonnen, mir festgestallt och de nanoprobes aus der cholecyst System Buffon eraus (Donnéeën net gewisen), der Zäit-ofhängeg cholecyst Minnen vun nanoprobes proposéiere héich, datt den -prepared nanoprobes kann net bannen Sauna Mais fir méi laang Zäit bleiwen, also, wéi-virbereet nanoprobes gutt Bio-Sécherheet eegenen. Figur 6 Am VIVO fluorescence Biller vun entholl Heefung an Otemschwieregkeeten Verdeelung fir FMNPs-BRCAA1 nanoparticles zu MGC803 Mënsch gastric entholl-Träger athymic Sauna Mais. A, An VIVO VerfÜgung fluorescence Biller vun athymic Sauna Mais dotéiert. MGC803 Mënsch gastric entholl war an der Sprëtz vun FMNPs-BRCAA1 nanoparticles bei verschiddene Zäit Punkt kritt. D'entholl Plaatz ass mat eng Pfeil uginn. A-1: 0 h, E-2: 0,5 h, E-3: 1 h, A-4: 3 h, E-5: 6 h, E-6: 12 h. B, TBR [Ray zu Hannergrond (Fleesch) Verhältnis] Wäert. D'TBR Wäert sech war wéi follegt: TBR = (entholl Signal-Hannergrond Signal) /(Hannergrond Signal). C, Ex VIVO VerfÜgung fluorescence Biller vum Leschten Uergel an entholl vun Mais MGC803 Mënsch gastric entholl Träger geaffert um 12 h der Sprëtz vun FMNPs-BRCAA1 nanoparticles. D'fluorescence Biller vum Leschten Uergel an entholl sech mat engem fluorescence Imaging Technik mat engem 630 nm Emissioun ewechgeholl kritt. D, Biodistribution vun anti- BRCAA1-FMNPs zu Mais no intravenous Sprëtz. Puer Zäit Punkten no beim Sprëtzen, Eisen Quantitéiten an Otemschwieregkeeten Echantillon sech duerch ICP Mass spectrometry bewäert (n = 3). VerfÜgung agebousst Analyse vun entholl a wichteg Organer VerfÜgung An kënschtlech VerfÜgung Evaluatioun vun excised grouss Stoffer dorënner Liewer, haett , Mëlz, Nier, an Häerz, souwéi d'entholl, uginn, datt d'Anti-BRCAA1-FMNPs Ämter goufen haaptsächlech-up geholl vun der entholl Stoffer, déi staark fluorescence Signaler Schatzkummer, wéi zu dorënner 7 hierkommen aner Stoffer dorënner Liewer dës , haett, Mëlz an Häerz an-an Anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes ganz manner, wat furtherly beweist, datt den-virbereet BRCAA1-FMNPs nanoprobes gastric Kriibs Stoffer Zil- kënnen. Mir ginn och HIEN staining all Organer ze kontrolléieren, kee kloer Schuedenersaz sech zu wichteg Organer observéiert [gesinn zousätzlech Fichier 1]. Figur 7 Resultat vun Immunofluorescence Analys. A, entholl Otemschwieregkeeten. B, Liewer. (Vergréisserung = × 200). VerfÜgung Als-virbereet nanoprobes fir MR Imaging vun Sauna Mais mat gastric Kriibs iwwerlaascht VerfÜgung An VIVO VerfÜgung MR Imaging op Sauna Mais Leeschtung war mat subcutaneous gastric Kriibs iwwerlaascht um 12 h Post-Sprëtz . Vertrieder Biller vun T2 Kaarten waren am Dorënner 8, dës no der nanoprobes iergendee, e wesentleche Changement am Signal Intensitéit war zu puer Regioune vun erhéijen observéiert, wat beweist, datt et Heefung vun der nanoprobes zu entholl Site vierdrun well zu Dorënner 8B, wéi de Pfeil dës zougedréckt. Als Kontroll, nodeems de Mais Modell mat sech gastric Kriibs heijen FMNPs fir 12 h, huet de Mais MR Imaging gesuergt, déi net intensiv Signal an entholl Géigend (Dorënner 8A) show gemaach. Figur 8 Grausamkeet Bild vu Mais. A, FMNPs ouni BRCAA1 B Kopplung, FMNPs zesummen mat BRCAA1 VerfÜgung D'Mechanismus vun Imaging VerfÜgung Am leschte Joer gezielt, molekulare Imaging Technologien gewiescht fir real-Zäit an Net-invasiv Imaging vun am VIVO VerfÜgung entholl Stoffer déi benotzt [39-43]. Zum Beispill, der Quantephysik dots, wéinst hirer eenzegaarteger photoluminescent Eegeschaften, goufen fir Bio-Etikette an unisse Imaging [11-13, 33, 43], mä Quantephysik dots 'toxicity limitéiert hir Applikatioun vun mënschleche Kierper, sou wäit puer sécher Quantephysik benotzt dots entwéckelt ginn. Magnéitescht nanoparticles hunn och den Kontrast reagent fir MR Imaging [15, 33, 36] benotzt ginn. Gläichzäiteg, Kombinatioun vun zwee Imaging Aberuffung stellt d'Virdeeler vun souwuel wéi benotzt een Method, déi detailléiert Informatiounen iwwert entholl Lokalisatioun, Ëmwelt, a Status déi géif. VerfÜgung An dëser Etude, entworf mir an virbereet engem Roman Imaging Studiebäihëllefe, deen huet vun Silicon-Opzielung Quantephysik dots komponéiert a magnéitesch nanoparticles mam Zil hir biocompatibility vun Tempo. Eis Resultater weisen, datt bereet Silicon-Opzielung Quantephysik dots a magnéitesch nanoparticles si ganz stabil, an eegen staark unisse Signaler a magnéitesch Intensitéit. D 'staark unisse Signaler vun den-virbereet nanoprobes, dèi mir erfollegräich unisse Biller vun an VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Stoffer mat 5 mm Duerchmiesser an Sauna Mais Modell. D 'staark Magnéitfeld Signaler vun den-virbereet nanoprobes, mir och kritt erfollegräich MR Biller vun an VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Stoffer mat 5 mm Duerchmiesser an Sauna Mais Modell. Am Verglach mat virdrun Rapporten, grouss Gréisst vun entholl Stoffer (> 5 mm) einfach andems unisse Imaging a Grausamkeet Imaging, als Géigesaz Radioberäich ginn hätt, eis Resultater weisen, dass den-virbereet nanoprobes kleng Gréisst vun entholl Stoffer entdecken kann (manner 5 mm Duerchmiesser), deen Ofstand der Empfindlechkeet vun erkennen Method verbessert. Eist Resultat ass och déi éischte Kéier duebel-modal gezielt Imaging vun am VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Stoffer ze mellen. VerfÜgung Wéi zu VIVO VerfÜgung gastric Kriibs Stoffer zu Zil ass och eng challengeable Problem. Bis Datum, ware keng spezifesch gastric Kriibs biomarkers gemellt. Obwuel KLENGE-2 FAQ bestätegt gouf an 6-35% vun gastric Kriibs Stoffer positiven Ausdrock ze hunn [28-31], KLENGE-2 FAQ geet och iwwer-Ausdrock an vill entholl Stoffer wéi Broscht Kriibs, haett Kriibs, Colon Kriibs, etc, dofir KLENGE-2 misst net spezifesch uweist fir gastric Kriibs ginn. Eis Resultater weisen, datt BRCAA1 antigen ass nëmmen iwwer-ausgedréckt zu 64% oder sou vun gastric Kriibs Stoffer aus Medeziner Agrëff Patienten, mir och confirméiert, datt BRCAA1 antigen ass an e puer gastric Kriibs Zell Linnen wéi MKN-1 iwwer-ausgedréckt, MKN-74 , SGC-7901, Kato-III an MGC803 [6-9]. Mir benotzt MGC803 Zellen ze Sauna Mais Modell preparéieren mat gastric Kriibs iwwerlaascht, a observéiert erfollegräich datt den-virbereet nanoprobes zéien an entholl Stoffer alldeeglech Verglach mat normal Kontroll Stoffer, a wéi d'Post-Sprëtz Zäit fräi. Mir gesinn och datt nanoprobes am ganze Kierper heijen der Zäit-ofhängeg Minnen Schatzkummer an der unisse Signaler ofgeholl lues wéi d'wéinst der Liewer-cholecyst excretion System an Niere clearness vun den-virbereet nanoprobes ofgelaf Zäit. Puer Reportagen zougedréckt datt Nier just kloer nanoparticles mat 5 nm Duerchmiesser vun eiser Etude, mir gesinn dat als-virbereet nanoprobes mat 50 nm Duerchmiesser och bannent 12 h laanscht ginn hätt. Dëst konkret Mechanismus ass amgaang. VerfÜgung Nanoprobe biosafety ass och e wichtege Problem [44], déi d'Applikatioun Perspektiv vun den-virbereet nanoprobes decidéiert. Eis Resultater zougedréckt voll datt den-virbereet nanoprobes net wichteg Organer dorënner Liewer, Nier, Häerz, haett, etc hutt Schued, och net langfristeg hutt Collectioun zu wichteg Organer Generatioun, déi héich schloen, datt den-virbereet nanoprobes eege gutt biocompatibility, an hunn grousse Potential an Applikatiounen wéi duebel Modell Imaging a selektiv Therapie vun fréi gastric Kriibs. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Mir erfollegräich engem Roman anti-BRCAA1-FMNPs nanoprobes virbereet, wat fir an VIVO VerfÜgung zwee modal Imaging benotzt kënne eng offensichtlech spezifesch gezielt ëmmer bei enger gastric Kriibs Stoffer mat 5 mm Duerchmiesser während 0,5 h an 12 h vu Post-Sprëtz kréien, an eegen gutt biocompatibility wéi unisse Imaging an Magnéitresonanztomographie, an eegen. Dëst soll éischte Rapport ginn. Déi als-virbereet Salle nanoprobes kann och ënner kënschtlech VerfÜgung oofwiesselnd Magnéitfeld irradiation fir hyperthermia Therapie vun gastric Kriibs benotzt ginn, an hu vill Potential an Applikatiounen wéi gläichzäiteg Imaging a gezielt Therapie vun Medeziner gastric Kriibs an nächster Zukunft.
spontan a Virbereedunge VerfÜgung Methode vun Anti-BRCAA1 monoclonal Antibodies VerfÜgung Déieren Experimenter no ageschafft Déieren Care an Benotzt Comité, Shanghai JIAO Tong University gesuergt huet. Monoclonal antibodies sech géint eng stilvoller Fusioun FAQ BRCAA1 virbereet. BALB /c weiblech Mais, 4-6 Wochen al, sech aus der Shanghai LAC schafft Déieren Co. Ltd., Chinese Akademie vun de Wëssenschaften (Shanghai, China) kaaft. De Mais sech duerch intraperitoneal Sprëtz mat 50 μg vun sidd BRCAA1 FAQ immunized déi mat gläicher Volume vun Freund d'komplett adjuvant emulsified war. Dräi weider injections benotzt onkomplett adjuvant all zwou Wochen verwalt. Dräi Deeg no der leschter Sprëtzen, déi Mëlz Zellen vun de Mais sech mat der SP 2/0 Maus myeloma Zell Linn gesammelt an Method. Nom 10-14 Deeg, huet de Kultur supernatants mat enger Elisa Test schlëmm an deem d'staark Phas mat der recombinant BRCAA1 FAQ (2 μg /ml) benotzt fir den immunization bedeckt war. An der Duerchmusterung Prozess, zu kruet der monoclonal antibodies mat Beschichtete BRCAA1 FAQ ausgewielt goufen. Vun zweemol dilution limitéieren, sech positiv Kolonien subcloned. Ascitic Flëssegkeeten sech aus de Mais recoltéiert primed mat engem 0,5 ml intraperitoneal Sprëtz vun Pristane an dann mat 10 6 hybridoma Zellen heijen. Der Klass an Ënnerklass vun all MAB- huet mat enger Maus monoclonal antibody isotyping Kit (Hy Cult Déi B.V., Holland) alles. D'mAbs sech aus der Maus Duerfir hätt Flëssegkeeten sidd Komponente mat engem FAQ G-Sepharose 4FF (Pharmacia, Uppsala, Schweden) Kolonn no der Uweisungen d'Hiersteller ze protégéieren, déi mat der biopanning Experimenter Amëschung kéint. D'antibody titers sech duerch Elisa Methoden sech [45]. Endlech een vun bereet anti-BRCAA1 monoclonal antibodies war als éischt antibody benotzt 50 Beem uplanzen vun gastric Kriibs ze stain an gastric Panz Stoffer Kontroll, déi aus Changzheng Hospital a Platz 1 Leit Hospital zu Shanghai an identifizéiert vun agebousst Ënnersichung gesammelt goufen. VerfÜgung Virbereedung an Fläch Functionalization vun FMNPs VerfÜgung Virbereedung vun géréiert 3O 4 nanoparticles war baséiert op Co-Nidderschlag vun Eisenmetall an ferric ioun Léisungen (1: 2 Dokter Verhältnis) [46-49]. CdTe nanocrystals sech Wierderbuch wéi follegt laut eiser leschter Rapport: CdCl 2 (5 mmol) war zu 110 ml vu Waasser opgeléist, an 12 mmol vun Name goufen ënner réieren notéiert, gefollegt vun der PH zu 11 vun dropwise Zousätzlech ugepasst vun 1 M NaOH Léisung. D'gemëscht Léisung war an engem dräi-necked flask deaerated vun N 2 Bullage fir 30 min gesat. Ënner réieren, 2,5 mmol vun Sauerstoff-gratis NaHTe Léisung war an der dräi-necked flask heijen, déi frësch vun Tellur Pudder bereet war an NaBH 4 (Dokter Taux vun 1: 2) am Waasser op 0 ° C. Déi doraus resultéierend Léisung war iwwer 4 mg /l, a 3,5 nm Duerchmiesser Produit mat engem Maximum ronn 630 nm gesicht. Unisse Magnéitfeld nanoparticles (FMNPs) sech mat dem Recyclage microemulsion Approche virbereet. Ier Kopplung der FMNPs mat der BRCAA1, functionalized mir éischter der Uewerfläch funktionell Grupp vun FMNPs als carboxyl Grupp. 95 ml Ethanol an 2 ml 3-Aminopropyltriethoxysilane (APS) bäigebaut e gemëschtent Léisung ze grënnen a fir 24 h bei Raumtemperatur ze reagéieren erlaabt. D'aminosilane-geännert FMNPs sech duerch permanent Magnéit trennt sech mat deionized Waasser dräi Mol gewäsch. Dunn redispersed der FMNPs-NH 2 zu 100 ml Dimethylformamide (DMF), derbäi exzessiv succinic anhydride e gemëschtent Léisung ze Form a reagéieren bei Raumtemperatur fir 24 h. D'carboxyl-geännert FMNPs sech nees vun permanent Magnéit getrennt a mat deionized Waasser dräi Mol gewäsch. VerfÜgung Virbereedunge an characterization vun BRCAA1 antibody-conjugated FMNPs VerfÜgung Mir benotzt zwee-Schrëtt Prozess stabil anti-BRCAA1-FMNPs unhéier ze kréien [ ,,,0],48, 49]. 1,5 mg FMNPs-COOH Léisung war zu 2 ml pH7 PBS gefiermt verspreet, an war fir 10 min sonicated. Dunn gemëscht mer 1 ml vu frësch 400 mm EDC an 100 mm NHSS zu pH 6.0 MES gefiermt an rotated et bei Raumtemperatur fir 15 min. No deem, war déi doraus resultéierend Léisung vum Magnéitfeld getrennt an 1 mg /ML BRCAA1 monoclonal antibody sech un d'uewe Mëschung dobäi, an donkel Plaz fir 2 h géinteneen. Ewechzehuelen war gratis BRCAA1, de Reschtoffall Reaktioun Mëschung vun Magnéitfeld getrennt an de massive Rescht Katakombe mat 1 ml PBS dräimol gefiermt. Endlech, 1 ml 0,05% Tween-20 /PBS war fir d'BRCAA1-FMNPs unhéier notéiert an der Finale Bio-unhéier war bei 4 ° C gespäichert. Wann mir benotzt, dat BRCAA1-FMNPs unhéier solle mat PBS /0,05% Tween-20 verdënntem ginn. Da ginn mir d'Nano Drop Apparat d'Kopplung Taux vun BRCAA1 antibody mat FMNPs-COOH zu ofgedonkelt. Ier Reaktioun Kopplung, gemooss mir de ganzen Konzentratioun vun BRCAA1 antibody. No Kopplung Reaktioun, gemooss mir de BRCAA1 antibody Konzentratioun vun Reschtoffall Reaktioun Mëschung an d'Kupplung Tarif no der Equatioun berechent: VerfÜgung Kupplung (%) = (1-Konzentratioun vun BRCAA1 antibody zu Reschtoffall Reaktioun Mëschung /Total Konzentratioun vun BRCAA1 antibody) × 100 VerfÜgung D'als-virbereet nanoprobes a reng FMNPs sech duerch Transmissioun Elektronen microscopy an photoluminescence (eens) spectrometry, an Zeta Potential Organer charakteriséiert. VerfÜgung nanoprobes fir eng kënschtlech VerfÜgung gezielt Imaging vun gastric Kriibs Zellen VerfÜgung Gastric Kriibs Zell Linn MGC803 Zellen mat iwwer-ausgedréckt BRCAA1 FAQ als Zil Zellen benotzt goufen, Mënsch fibroblast Zellen ouni ausgedréckt BRCAA1 FAQ als Kontroll benotzt gouf, goufen cultured a gesammelt, an sech dann mat 50 μg /mL BRCAA1-FMNPs nanoprobes behandelt a cultured zu engem humidified 5% CO 2 ausgeglach Loft incubator bei 37 ° C fir 4 h an der Tëschenzäit de MGC803 a mënschlech fibroblast Zellen sech mat FMNPs wéi d'Kontroll Grupp behandelt. Rausch, goufen d'Zellen mat PBS dräimol rinsed, an da fix Zellen mat 2,5% glutaraldehyde Léisung fir 30 min. Fir nuklear counterstaining, goufen MGC803 mat 1 mm Hoechst 33258 vun PBS fir 5 min incubated. D'Zellen vun fluorescence microscope observéiert goufen (Zur Nikon TS100-F), an am Eenzelne vun GE HDX 3.0T MR Imaging Instrument equipéiert mat ParaVision 3.0 Software. VerfÜgung Mir ginn och de Flow cytometer der gastric Kriibs Zell Fähegkeet vun BRCAA1- gezielt ze diskutéieren FMNPs nanoprobes.

• Deep sequencing vun gastric carcinoma verréid somatic kennen relevant fir personaliséiert medicine
• BariSurg Prozess: Kopp gastrectomy versus Roux-en-Y gastric Contournement zu mockeleg Patienten mat BMI 35-60 kg /m2 - enger Multi-Zentrum zoufälleg Patient an Observeur blann Net-inferiority trial