Ekspression af energistofskiftet beslægtede gener i det gastriske væv af fede individer med ikke-alkoholiske fedtlever disease

ekspression af energistofskiftet beslægtede gener i den gastriske væv af fede individer med ikke-alkoholiske fedtlever sygdom
Abstract
Baggrund
mave er en integreret del af energibalancen reguleringskredsen. Undersøgelser udforske virkningerne af cross-systemændringer på energiområdet homeostase i maven væv er knappe. Nærheden af ​​maven til leveren - den mest almindelige sekundære mål ramt af fedme - antyder, at disse to organer er udsat for hinandens lokale sekretion. Derfor har vi rettet mod udtryk profilering af energi metabolisme associerede gener i den gastriske væv af overvægtige ikke-alkoholiske fedtlever sygdom (NAFLD) patienter.
Metoder
alt 24 patienter med histologisk-bevist NAFLD blev inkluderet. I det gastriske væv blev genekspression profilering af 84 energistofskiftet associerede gener båret ud.
Resultater
akkumulering af fedt i leveren parenkym ledsages af nedregulering af gener, der koder for carboxypeptidase E (CPE
) og Interleukin 1B (IL1B
) i maveslimhinden af ​​samme patient. Hos patienter med høj kvalitet leversteatose, Interleukin 1 beta-kodende gen med anorexigene funktion blev IL1B
nedreguleres. De niveauer udtryk for 21 gener, herunder ADRA2B
, CNR1
og LEP
blev ændret betydeligt i den gastriske væv af NAFLD patienter med nedsat inflammation. Der var også tegn på en stigning i opioid signalering inden maveslimhinden, der kan resulterer i et skift til proinflammatorisk miljø i dette organ, og bidrager til systemisk inflammation og de patogene processer i hepatisk parenkym.
Konklusioner
Vi har vist forskellen ekspression af energistofskiftet associerede gener i det gastriske væv af fede NAFLD patienter. Vigtigere, er disse genekspressionsprofiler forbundet med ændringer i det hepatiske parenchym, som afspejles i øget scorer for hepatisk steatose, inflammation, fibrose og NASH. Denne undersøgelse tyder på det komplekse samspil af flere organer i patogenesen af ​​fedme-relaterede komplikationer såsom NAFLD og giver yderligere dokumentation for en vigtig rolle for gastrisk væv i at fremme fedme-relaterede komplikationer.
Baggrund
Energibalance reguleres af et miljø af hormoner, cytokiner og neurotransmittere. Denne homøostatiske regulering integrerer signaler fra centralnervesystemet og forskellige perifere organer og sikrer, at uanset udsving i daglige mad og energiindtag, variationen i daglige vægt, i de fleste tilfælde forbliver uagtsom [1]. Dette hele systemet krydstale tyder på, at netværket balancering appetit og mæthed er meget komplekse, og til dels overflødig. Mave er en integreret del af denne energi balance regulering kredsløb og er kendt for at videresende mæthed signaler til hypothalamus [2].
Interessant undersøgelser, som deltagelse i maven i energi- homeostase og virkningerne af cross-systemændringer i energi-homeostase på maven funktion er knappe [3-5]. Bortset fra dens indlysende rolle i fordøjelsen og optagelsen af ​​næringsstoffer, maven har endokrine funktion [3, 4]. En af de bedste eksempler på det endokrine rolle i maven ses i sin produktion af ghrelin, obestatin og leptin, hormoner, der vides at bidrage til mange kroniske sygdomme asscociated med fedme [5-7]. Derudover har flere nylige undersøgelser antydet en rolle af disse molekyler i systemisk inflammation [8-10]. Dette indikerer nødvendigheden af ​​yderligere undersøgelser på den rolle, gastrisk væv i fedme og fedme-relaterede lidelser.
Vigtigere, er fedme forbundet med ændringer i genekspression mønster inden mange typer af ikke-adipøst perifere væv, herunder muskel [11] , lever [12], og mononukleære celler fra perifert blod [13]. Navnlig blev virkningen af ​​fedme på maven væv og den rolle af maven i metabolisk dysfunktion har været stort set overset. Histologiske undersøgelser af maven væv hos overvægtige patienter rapporterede en række synlige ændringer i slimhinden i de fleste prøver [14, 15]. Det er meget vanskeligt at sige, om disse ændringer er følgesygdomme af systemisk inflammation eller aktive bidragydere til vægtøgning. Det er muligt, at ændrede sekretoriske mønstre forbundet med gastrisk betændelse forøge udviklingen af ​​fedme-associerede tilstande. Nærheden af ​​maven til leveren - den mest almindelige sekundære mål ramt af fedme - antyder, at disse to organer er udsat for hinandens lokale sekretion. Derved kan genekspression responser i disse organer i reageret til central adipositas være potentielt indbyrdes forbundne.
En vigtig komplikation af fedme, ikke-alkoholiske fedtlever sygdom (NAFLD), skønnes at berøre ~ 30% af det amerikanske voksne [16]. Den progressive form for NAFLD eller ikke-alkoholisk steatohepatitis (NASH) er kendetegnet ved akkumulering af fedt i leveren sammen med ballooning af hepatocytter, luftrør inflammation med eller uden fibrotiske ændringer i hepatisk parenkym. Det er vigtigt at bemærke, at aflejring af fedt i leveren er associeret med nedsat insulinfølsomhed [17, 18]. Forskellige adipokiner og hormoner produceret af visceralt fedtvæv, gastrisk væv og levervæv kan potentielt bidrage til udviklingen af ​​NAFLD og dens progression til NASH [10, 12].
I en tidligere undersøgelse viste vi et ændret mønster af genekspression for cytokin og kemokin-kodende gener i den gastriske væv af overvægtige personer med NAFLD [19]. I denne undersøgelse undersøger vi yderligere dette forhold ved genekspression profilering af energimetabolisme forbundne gener i det gastriske væv af fede NAFLD patienter.
Metoder
Samples Salg mave vævsprøver blev opsamlet efter informeret samtykke fra sygeligt overvægtige NAFLD patienter under laparoskopisk ærme gastrektomi. Vævet blev lynfrosset i flydende nitrogen og opbevaret ved -80 ° C. En leverbiopsi blev udført på samme tid; alle biopsier blev aflæst ved samme hepatopathologist. Kliniske og laboratorium variabler fra tidspunktet for kirurgi blev udvundet fra medicinske journaler (tabel 1). Andre årsager til kronisk leversygdom blev udelukket af negativ serologi for hepatitis B og C, ingen rapporterede historie toksiske påvirkning og alkoholmisbrug (> 10 gram /dag hos kvinder og > 20 gram /dag hos mænd) blev også anset som en eksklusionsårsag. Ingen af ​​patienterne modtog thiazolidindioner (TZD'er), protonpumpehæmmere eller andre medikamenter for gastritis såvel som dem forbundet med fedtlever. Undersøgelsen blev godkendt af Internal Review Board of Inova Hospital (Federal Assurance FWA00000573) .table 1 Kliniske og demografiske data for patienten kohorter profilerede for ekspression af fedme-relaterede gener
Demografisk eller klinisk parameter
Mean ± SD, eller%
(N = 24)
BMI (*)
47,96 ± 8,2
AST, (U /L) (*)
24,92 ± 8,37
aLT, (U /L) (*)
30,38 ± 12.88
Total kolesterol, mg /dl (*)
205,08 ± 41,82
HDL, mg /dl (*) Kvinder
50,33 ± 11,85
HDL, mg /dl (*) Mænd
39,66 ± 41,82
triglycerid, mg /dl (*)
197 ± 105,39
Age
43,93 ± 10,2
Køn (kvinder)
79% (N = 19)
Race (kaukasiske)
67% (N = 16)
Avanceret inflammation (score ≥ 3)
54% ( N = 13)
NASH
63% (N = 15)
Advanced steatosis
42% (N = 10)
fibrose
79% (N = 19)
steatose med tilstedeværelse af hepatisk inflammation
96% (N = 23)
NASH med tilstedeværelse af hepatisk inflammation
62,5% (N = 15)
Værdier markeret med stjerne (*) er givet som gennemsnit ± SD. SD: standardafvigelse; BMI: Body Mass Index; NASH: Non-Alcoholic steatohepatitis; AST: aspartataminotransferase; ALT: alanin transaminase; HDL:. High-density lipoprotein
Alle leverbiopsier blev læst af samme hepatopathologist. Histologiske træk såsom portal inflammation, lymfoplasmacytisk lobular inflammation, polymorfnuclear lobular inflammation, Kupffer-celle hypertrofi, apoptotiske legemer, fokal parenchymale nekrose, glycogen kerner, hepatocellulær ballooning, og Mallory-Denk organer blev vurderet i H &E sektioner. Omfanget af steatose blev gradueret på grundlag af et skøn over procentdelen af ​​væv besat af fedt vakuoler som følger: 0 = ingen, 1 = < 5%, 2 = 6-33%, 3 = 34-66%, 4 = > 66%. NASH blev defineret som steatosis, lobular inflammation, og ballooning degeneration med eller uden Mallory Denk organer, og med eller uden fibrose. Omfanget af forskellige immun celleinfiltration såsom lymfoplasmacytisk celler, polymorfonukleære celler og Kupffer-celle hypertrofi blev vurderet ved hematoxylin-eosin (H &E) -farvning. For hver kategori blev scores tildelt efter følgende systemet: 0 = ingen, 1 = få, 2 = moderat, 3 = mange. Omfanget af hepatisk inflammation blev bestemt på grundlag af summen af ​​de ovennævnte individuelle scores med en score på ≥ 3 betragtes som avancerede hepatisk inflammation og score på < 3 betragtes som mild /uden nedsat inflammation. Sværhedsgraden af ​​pericellulært og portal fibrose blev bestemt ved Masson trichromfarvning af biopsi, hhv. Den scoring var som følger: 0 = ingen fibrose, 1 = mild fibrose, 2 = moderat fibrose, 3 = markant fibrose. Sværhedsgraden af ​​den samlede hepatisk fibrose blev fastsat på grundlag af summen af ​​de individuelle scores (pericellulært og portal fibrose) med score på ≥ 3 betragtes som avancerede hepatisk fibrose og score på < 3 betragtes som mild /ingen leverfibrose. Patienter med hepatisk steatose eller NASH blev anset for at have NAFLD.
RNA-ekstraktion og revers transkription
Totale cellulære RNA'er blev ekstraheret fra fundiske mave vævsprøver (N = 24) under anvendelse af RNeasy kittet (Qiagen, USA) ifølge producentens instruktioner . Koncentration og kvalitet af de ekstraherede RNA'er blev målt under anvendelse af absorbans ved 260 nm (A 260) og 280 nm (A 280) med GeneQuant1300 spektrofotometer (GE Healthcare, USA). Kun mRNA prøver med A 260 /A 280-forholdet i intervallet 1,8-2,1 blev udnyttet. Derudover integritet af hver total-RNA blev bedømt ved 1% agarosegelelektroforese med ethidiumbromid. Ekstraherede totale RNA'er blev revers transkriberet til enkeltstrengede cDNA ved hjælp RT 2 første streng (Qiagen, USA), pr producentens protokol.
Kvantitativ realtids-PCR-analyse
genekspressionsprofilering eksperimenter blev udført på cDNA prøver ved anvendelse RT 2 Profiler PCR Arrays (Qiagen, USA), der omfatter 84 orexigenic, anorexigene, og energi udgifter gener og deres receptorer sammen med fem husholdning gener, i henhold til producentens protokol (Yderligere fil 1: tabel S1). Kvantitative real-time PCR reaktioner blev udført i 96 brønds PCR-format under anvendelse Bio-Rad CFX96 tidstro system (BioRad Laboratories, USA) med en rampe hastighed på 1 ° C /sek. Real Time PCR-blandinger bestod af 1 pi cDNA, 7,5 pi af RT-PCR Master-blanding (Qiagen, USA) i et endeligt volumen på 25 pi. Den termiske profil af RT-PCR-procedure blev gentaget for 50 cykler: 1) 95 ° C i 10 min; 2) 10 s denaturering ved 95 ° C, 15 s, annealing ved 60 ° C (opformering data indsamlet i slutningen af ​​hvert amplifikationstrin); 3) dissociationskurven bestående af 10 s inkubation ved 95 ° C, 5 s inkubation ved 65 ° C, en rampe op til 95 ° C (Bio-Rad CFX96 tidstro system, USA). . Smelte kurver blev brugt til at validere produkt specificitet
Analyse af genekspression profiler
tærskel cyklus (C
t
) værdier blev opnået for hvert gen; kun C
t
værdier mindre end 40 blev anset for analyse. C
t
værdier af kontrol brønde (genomisk DNA-kontrol, revers transkriptase kontrol, positiv PCR-kontrol) blev undersøgt separat og bruges til bestemmelse af kvaliteten af ​​kørslen, i henhold til producentens anbefalinger. Gennemsnittet af fem husholdning gener: B2M
, HPRT1, RPL13A, GAPD
, og ACTB,
blev brugt til at normalisere C
t
værdier. Relativ ekspression blev bestemt under anvendelse af delta delta Ct
metode (1). Fold forandring (2) for hvert gen blev beregnet som følger: ΔΔ
C
t
=
2
-
Δ
C
t Hotel (1) Fold
Skift
=
Δ
C
t
Eksp
/
Δ
C
t
Kontrol
.
(2) Statistisk analyse
undersøgelsen blev designet til at detektere ændringer i genekspression i maven af ​​patienter med avancerede former for NAFLD i forhold til dem med mildere former. De scoringer for hver histopatologiske stand er som beskrevet ovenfor. Følgende sammenligninger blev udført: 1. Svær sygdomstilstand i forhold til mild /ingen sygdomstilstand eller
2. Tilstedeværelse af sygdommen i forhold til ingen sygdom
betydning forskelle i genekspression mellem grupperne blev vurderet ved hjælp af univariate ikke-parametrisk Mann-Whitney test. Spearmans korrelationskoefficienter blev brugt til at bestemme, om to variabler co-variere, og at måle styrken af ​​deres forhold. De uafhængige effekter af betydelige variable (P
< 0,05) på avanceret inflammation, NASH og steatosis blev vurderet ved hjælp af multipel trinvis regressionsanalyse, med både de tilbagestående og terminsforretninger trinvise udvælgelsesprocedurer
Resultater
alt. 24 patienter med histologisk-bevist NAFLD blev inkluderet. Kliniske og demografiske data for patienter er sammenfattet i tabel 1. I den gastriske væv, genekspression profilering af 84 energistofskiftet forbundet gener (Yderligere fil 1: Tabel S1) blev gennemført
Genekspression signatur forbundet med fremskreden leversteatose <. br> Når mRNA ekspression niveauer blev sammenlignet i prøver af patienter med fremskreden steatose (grad ≥ 3) til at med mild eller ingen steatose (Grade < 3), signifikante fald i ekspressionsniveauer af mRNA, der koder for CPE
(-1.88, p < 0,04) og IL1B
(-2,5, p < 0,05) gener blev observeret (tabel 2) .table 2 Liste over fedmerelaterede gener signifikant opreguleret i gastriske væv fra patienter med følgende patologiske tilstande
gener myHotelVideo.com: Fold regulering
P-værdi
Avanceret steatose (grad ≥ 3) vs mild /ingen steatose (score < 3)
CPE
-1,8
0.04
IL1B
-2,5
0,05
NASH stede vs Ingen NASH
IL1R1
1,99
0,04
OPRM1

2,65
0.02
SIGMAR1
3.13
0,03
THRB
1,94
0.02
ZFP91
3.09
0.01
Avanceret hepatisk inflammation (score ≥ 3) vs mild /uden nedsat inflammation (score < 3)
ADCYAP1
5,5
0,04
ADRA2B
2,1
0.02
BDNF
3,5
0.03
CNR1
5,1
0.001
CNTFR
3,2
0.02
GALR1
2,5
0,04
GH2

5.1
0.01
GRPR
4,1
0,004
IAPP
2,5
0,03
LEP
2.3
0,04
LEPR
2.3
0.02
MC3R
4,1
0.02
NMB
2.4
0,04
NMU
3,9
0,004
NMUR1
6,9
0,03
PPARGC1A
4,1
0,006
PRLHR

4.2
0.02
RAMP3
2,5
0.02
SIGMAR1
2.3
0.01
SSTR2
3.2
0,04
UCN
4,9
0,04
fibrose stede vs ingen fibrose
NTS
6,7
0.02
OPRK1
5.6
0.01
gastritis stede vs ingen gastritis
C3
-2,1
0,04
DRD1
2,6
0.02
Avanceret leverbetændelse (score ≥ 3) (N = 13), Advanced Steatose (score ≥ 3) (N = 10), NASHǂ (N = 15), Fibrosisǂ (N = 19), Gastritisǂ (N = 11). ǂComparison blev udført for at grupper af patienter uden den betingelse opført
Gastrisk genekspression signatur forbundet med NASH
mRNA kodet af IL1R1
(1,99, p < 0,04)., OPRM1
(2,65, p <0,02), SIGMAR1
(3,13, p < 0,03), THRB
(1,94, p < 0,02) og ZFP91
(3,09, p < 0,01) gener blev opreguleret i gastrisk prøver af patienter med NASH sammenlignet med dem uden NASH (tabel 2).
Genekspression signatur forbundet med fremskreden hepatisk inflammation
Når prøver fra patienter med fremskreden hepatisk inflammation (score ≥ 3), blev sammenlignet med den for patienter med mild inflammation , 21 gener (0,001 < p < 0,05) viste sig at have forøget genekspression (fold ændring interval 2.1 - 6.9) (tabel 2). Blandt disse gener, at ekspressionsniveauer for ADRA2B
, CNR1
og LEP
blev også fundet være korreleret (r > 0,5, p < 0,05) med graden af ​​hepatisk inflammation (tabel 3). Derudover ekspressionsniveauer for IL1A
og OPRM1
blev også korreleret med graden af ​​hepatisk inflammation (r > 0,5, p < 0,05) (tabel 3) .table 3 Analyse af sammenhænge mellem ekspressionsniveauer af forskellige gener og scorede karakteristika NAFLD
Gene
korrelation (r)
p-værdi
NASH
IL1R1
0,42
0.03
OPRM1
0,43
0,034
SIGMAR1
0,51
0,009
THRB
0,40
0.05
ZFP91

0,43
0,03
grad af betændelse
ADRA2B
0,45
0.02
CNR1
0,43
0.03
LEP

0,40
0,04
IL1A
0,43
0,03
OPRM1
0,42
0.03
fibrose
GHR

0,42
0,03
IL1A
0,48
0.01
Gastritis
DRD1
0,46
0.02
GHRL

0,41
0,04
BMI
CPE
0,47
0.01
ZFP91
-0,48
0.01
fastende glukose (mg /dl)
AGRP
0,52
0,008
NMB
0,41
0,04
THRB
0,55
0,005
TNF
0,42
0,04
UCP1
0,65
0,0005
Serum triglycerider (mg /dl)
ADCYAP1R1
0,48
0,01
ADIPOQ
0,50
0.01
APOA4
0,44
0.02
CNTFR
0,41
0,04
Calca
0,44
0.02
DRD2
0,49
0.01
GCGR
0,43
0.03
GH2

0,41
0,04
GLP1R
0,56
0.003
IL6
0,42
0,03
NMUR1
0,48
0,01
NTRK2
0,40
0,04
PPARGC1A
0,42
0,04
PRLHR
0,43
0.03
CPD
-0,42
0.03
Gen-ekspression signatur i forbindelse med hepatisk fibrose
Sammenligning af gastriske prøver indsamlet fra patienter med fibrose og prøver fra dem uden fibrose viste mRNA for NTS
og OPRK1
gener var mere end 5-fold opreguleret i nærvær af fibrose (p < 0,02) (tabel 2). Analyse af korrelationer viste, at mRNA-niveauer for GHR
og IL1A
gener konsekvent stige sammen med en progression af fibrose (r > 0,5, p < 0,05). (Tabel 3)
Sammenslutningen af ​​genekspression med risikofaktorer for NAFLD
niveauerne af mRNA-ekspression for CPE
blev korreleret positivt til BMI, mens mRNA ekspressionsniveauer for ZFP91
og BMI var korreleret negativt (P < 0,01) (tabel 3). Desuden blev fastende blodsukkerniveau positivt korreleret med ekspressionsniveauer af mRNA kodet af AGRP
, NMB
, THRB
, TNF
og UCP1
gener serumtriglyceridniveauer var positivt korreleret med ekspressionsniveauer af 14 gener (tabel 3), herunder ADIPOQ
og APOA4
og negativt korreleret med den af ​​CPD
(tabel 3).
diskussion
Fedme er almindeligvis ses som en ophobning af alt for mange forstørrede adipocytter inden for en bughulen og i subkutane depoter. Desuden er fedme også forbundet med fedtophobning i en række organer, især muskel og lever [20]. Disse ektopiske steder er ikke godt tilpasset til fedt opbevaring og selv beskedne stigninger i lipid koncentrationer kan manifesteret som væv dysfunktion på grund af lipotoxicity [21]. Et spektrum af lipotoxicity-associerede ændringer i ekspressionsmønstre er blevet påvist både i muskel og lever af overvægtige patienter [22-24] samt i dyremodeller af fedme [25].
Foruden fedtinfiltration af disse organer en række andre ændringer kan ske hos overvægtige patienter. For eksempel, mavens væv af overvægtige personer gennemgår ændringer, der er synlige ved histologisk vurdering. Faktisk oxyntic mucosa af sygeligt overvægtige patienter uden metabolisk syndrom indeholder mere ghrelin-immunoreaktive celler sammenlignet med den for ikke-adipøse patienter [26]. Endvidere serumniveauer af tre proteinprodukterne af ghrelin-genet (acyleret ghrelin, des-acyleret ghrelin, og obestatin) er blevet vist at være forhøjet hos overvægtige patienter med NAFLD [10, 27]. Endelig i en tidligere undersøgelse, har vi vist, at mRNA'er koder for forskellige opløselige molekyler overproduceres i det gastriske væv af sygeligt overvægtige patienter med fremskredne former af NAFLD.
I denne undersøgelse har vi vurderet genekspressionsmønstre for energi stofskifte beslægtede gener i den gastriske væv af sygeligt overvægtige patienter med NAFLD. Vi har især bemærket, at ophobning af fedt i leveren parenkym ledsages af nedregulering af gener, der koder for carboxypeptidase E (CPE
) og Interleukin 1B (IL1B
) i maveslimhinden af ​​samme patient. I betragtning af den nærhed og intime samspil af maven med lever, mener vi disse observationer i den gastriske væv kan have stor betydning for ændringer set i levervæv.
Carboxypeptidase E er involveret i post-translationel behandling af mange prohormoner og neuropeptider, herunder dem hovedsageligt udtrykkes i mavetarmkanalen og spiller en central rolle i energi-homeostase [28]. I modeller dyr, inaktiverende af både CPE alleler resulterer i fedme, der er forårsaget af defekt næringsstof partitionering snarere end ved øget forbrug mad [28]. Ikke meget er kendt om et udtryk for CPE hos mennesker, men der er tegn på, at allele variationer i dette gen kan bidrage til koronar åreforkalkning, en anden komplikation af fedme og metabolisk syndrom [29]. Til dato, vores er den første rapport at knytte faldet i humane ikke-adipøst perifere væv ekspression af CPE til fedme relateret tilstand.
Anden mRNA nedreguleres i gastrisk væv af patienter med højkvalitets leversteatose koder for interleukin 1 beta (IL1B
), en inflammatorisk cytokin med anorexigene funktion [30, 31]. IL1β hæmmer genekspression af orexigenic ghrelin [32] og undertrykker produktionen af ​​mavesyre og gastrin [32]. Imidlertid blev det vist for nylig, at IL1β understøtter ektopisk fedtophobning i hepatocytter og adipøst-vævsmakrofager [33]. Interessant fedtrig-fodret (HFF) mus udviste en præferentiel stigning af IL-1β koncentrationen i portalen sammenlignet med systemisk blod [34], således, hvilket indikerer, at leveren kan afvige i sin IL-1β regulering fra andre perihearl væv.
Det vigtigt at bemærke, at fedme er kendt for at være forbundet med lav kvalitet systemisk inflammation. Desuden spiller betændelse en vigtig rolle i patogenesen af ​​progressiv NAFLD eller NASH. I vores undersøgelse, blev niveauerne af 21 gener signifikant ændret i det gastriske væv af NAFLD patienter med nedsat inflammation (tabel 2). Blandt disse ADRA2B
, CNR1
, LEP
også signifikant korreleret (r = 0,5, p < 0,05). Med graden af ​​hepatisk inflammation
andet interessant fund af vores undersøgelse vedrører udtryk for leptin i det gastriske væv. Sekretionen af ​​leptin er akut øges som reaktion på inflammation og inflammatoriske cytokiner, såsom TNF-α og IL-1β. Selv hovedstedet af leptin produktion er hvidt fedtvæv, er også blevet påvist leptin genekspression i det gastriske epitel og i kirtler af mavens fundiske slimhinde i både rotter [35], og mennesker [36]. Der er et organ af beviser på, at leptin i patogenesen af ​​NAFLD. I en undersøgelse af Chitturi et al., Leptin niveauer hos patienter med biopsi bevist NASH var dobbelt dem, der findes i ikke-NASH matchede kontroller [37]. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Evaluering af en ny motilitet kapsel til mavetømning i et porcint model af akut lungeskade
• Evaluering af transabdominal ultralyd efter oral administration af en echoic cellulosebaseret gastrisk ultralyd kontrastmiddel til mavekræft