Kliniska betydelsen av uPA-systemet i magsäckscancer med peritoneal metastas

Kliniska betydelsen av uPA-systemet i magsäckscancer med peritoneal metastas Bild Sammanfattning
Bakgrund
Det har visats att urokinas-plasminogenaktivator (uPA) är involverad i tumörcellmetastas genom nedbrytning den extracellulära matrisen. Men det finns lite direkta bevis för klinisk uPA-systemet uttryck i peritoneala metastatiska vävnader magcancer. Syftet med denna studie var att undersöka uPA-systemet uttryck i peritoneala vävnader peritoneala och nonperitoneal metastasering patienter och att utforska det diagnostiska värdet av uPA-systemet.
Metoder
Uttryck av uPA, uPAR och PAI-1 var mätt genom semikvantitativ RT-PCR och ELISA. uPA-aktivitet detekterades med användning av en uPA aktivitet kit.
resultat
Det fanns ingen signifikant skillnad i uPA, uPAR och PAI-1 uttryck i två typer av peritoneal vävnad i sju patienter med peritoneal metastas. Men uPA, uPAR och PAI-1 uttryck i peritoneala metastaser var betydligt högre än i normala peritoneala vävnader 24 nonperitoneal metastas patienter (P Hotel < 0,05). Dessutom fanns ingen statistisk skillnad på uPA-aktivitet observerades i olika vävnader.
Slutsatser
uttryck för uPA-systemet korrelerar positivt med peritoneal metastas av magcancer. Detta uttryck skillnad i peritoneala eller nonperitoneal metastas patienter kan ge en referens för diagnos av peritoneal metastas.
Nyckelord
Magcancer ELISA Peritoneal metastaser RT-PCR UPA-systemet Bakgrund
Även om förekomsten och mortaliteten i magcancer har minskat i Kina under de senaste decennierna, är magcancer fortfarande en stor börda för den lokala hälsoprogrammet [1]. Viktigt sker en upprepning av magcancer även efter potentiellt kurativ resektion, oftast i form av peritoneal metastas [2]. Således finns det ett akut behov av att utveckla effektiva tidig diagnos strategier för peritoneal metastas av magcancer.
Cancerinvasion och metastaser är multifaktoriella processer [3] och ett viktigt steg innebär rad förstörelse och återuppbyggnad av den extracellulära matrisen och basalmembran, vilket i sin tur kräver deltagande av flera proteolytiska enzymsystem, såsom serinproteaser och metalloproteaser [4]. Urokinas-typ-plasminogenaktivator (uPA) är en av de serinproteinaser och den binder till dess receptor, uPA-receptorn (uPAR) på ytan av tumörcellen. Efter aktivering, är cellbundet uPA med förmåga att omvandla plasminogen till plasmin, som därefter kan bryta ned flera komponenter i den extracellulära matrisen [5]. Verkan av den uPA-uPAR-komplexet på plasminogen kan styras av den proteashämmare PAI [6, 7]. Således är en balanserad produktion av cellulär och pericellulär uPA, uPAR och PAI-1 förutsättningen för effektiv fokal proteolys, celladhesion och migration, och därmed tumörcellinvasion och metastaser [8, 9].
Har observerats att uPA-systemet är väl korrelerad med gastric cancer, genom att mäta uttrycksnivån för uPA, uPAR och PAI-1 i magcancer och normal slemhinnevävnad och analysera deras samband med olika kliniska patologiska egenskaper. Till exempel, Plebani et al
. [10] fastställt uPAR, uPA och PAI-1 nivåer med hjälp av ELISA i magcancer och normala prover från 20 patienter med magcancer opereras. uPAR uttrycksnivån är betydligt högre i magcancer, och låga nivåer av uPAR är förknippade med en bättre överlevnad. Taniguchi et al
. [11] studerat sambandet mellan uttrycket av uPAR och clinicopathologic parametrar med immunohistokemisk analys från 102 primära gastriska karcinom. uPAR-immunoreaktivitet observerades i 38 fall av 102 (37%). Dessutom är de uttryck för uPA, uPAR och PAI-1 signifikant korrelerad med olika kliniskt patologiska faktorer: tumörstorlek, djup av tumörinvasion, differentiering, lymfkörtel metastas [12-15], och bukhinna metastas [16, 17].
Däremot har det funnits väldigt lite direkta bevis för den kliniska betydelsen av uPA-systemet i särskiljande peritoneal metastaserad från normala peritoneala vävnader i magcancer. Jämfört med jämn fördelning och arrangemang av lymfkörtlar, har peritoneal vävnad ett större område, som upptar hela bukhålan, vilket innebär mer slumpmässighet och oförutsägbarhet i cell peritoneal metastas i magcancer. Således är syftet med den här studien var att ytterligare undersöka uttrycket skillnaden i uPA-systemet mellan peritoneala metastaserande vävnader och normala peritoneala vävnader magcancer och att bekräfta diagnosen betydelsen av uPA-systemet genom att kombinera dessa resultat med kliniska data.
metoder
klinisk prov
Vi bedömde 31 patienter (21 män, 10 kvinnor) med en diagnos av magcancer, som hade antagits till vår avdelning mellan juli 2010 och december 2010. Deras medelålder var 62,58 år (intervall, 23-85). Patienterna diagnostiserades med magcancer baserad på den preoperativa eller postoperativ patologisk analys. Bland dem hade 7 patienter peritoneal metastas (patologiska typ: ett fall av måttligt differentierad rörformiga adenokarcinom, ett fall av grad II-III adenokarcinom, 3 fall av dåligt differentierat adenocarcinom, och 3 fall av dåligt differentierat adenocarcinom i kombination med signetring cellscancer) , medan 24 patienter hade nonperitoneal metastaser (patologiska typ: 3 fall av måttligt differentierade tubulär adenokarcinom, 3 fall av grad II adenokarcinom, 2 fall av grad II-III adenokarcinom, 9 fall av dåligt differentierat adenocarcinom, 3 fall av signetring cellscancer, en fråga om mucinous cancer, ett fall av grad II adenocarcinom i kombination med signetring cellscancer, en fråga om grad III adenocarcinom i kombination med signetring cellscancer, och en fråga om klass II adenocarcinom i kombination med mucinöst cancer).
i patienter med peritoneal metastas, skars vi peritoneala metastaser skador, samt en liten mängd omentum majus, pelveoperitoneum och diafragma bukhinna utan peritoneal metastas. I patienter med nonperitoneal metastaser, några resektioner av omentum majus, pelveoperitoneum och diafragma bukhinna också genomföras. De insamlade proverna lagrades vid -80 ° C för vidare analys.
Alla patienter levde i slutet av forskningen, och vår studie godkändes av den etiska kommittén i Shanghai East sjukhus, anslutna till Tong Ji University.
cell culture
Celler från en peritoneal mesotelcell linje (HMrSV5) bibehölls i DMEM (Sigma, St. Louis, USA) kompletterat med 10% fetalt bovint serum. Cellerna subodlades nästan varje dag av 1: 4 eller 1: 5 spädning i odlingskolvar vid 37 ° C under en atmosfär av 5% CO 2
Total RNA-extraktion och cDNA-syntes
Total RNA var. isolerades genom cell utfällning med användning av en RNeasy ™ RNA-extraktion kit enligt tillverkarens instruktioner (Qiagen, Valencia, USA). RNA-renheten och koncentrationen bestämdes genom spektrofotometrisk absorbans vid 260 och 280 nm, respektive. Omvänd transkription utfördes på en

• FOLFIRI som andrahandsbehandling hos patienter med docetaxel förbehandlat magcancer: en historisk cohort
• Upptäckt av promotor hypermethylation av CpG ön E-cadherin i magsäcken hjärt adenocarcinoma