Significado clínico del sistema de uPA en el cáncer gástrico con metastasis

peritoneal importancia clínica del sistema de uPA en el cáncer gástrico con metástasis peritoneal
Abstract
Antecedentes
Se ha demostrado que activador de plasminógeno de tipo uroquinasa (uPA) está involucrado en la metástasis de células tumorales mediante la degradación de la matriz extracelular. Sin embargo, hay poca evidencia directa de la expresión clínica sistema de UPA en tejidos metastásicos peritoneal de cáncer gástrico. El objetivo de este estudio fue investigar la expresión sistema de UPA en los tejidos peritoneales de pacientes metástasis peritoneales y nonperitoneal, y para explorar el valor diagnóstico del sistema UPA.
Métodos
Expresiones de UPA, uPAR y PAI-1 fueron medido por semi-cuantitativos RT-PCR y ELISA. la actividad del uPA se detectó usando un kit de actividad de uPA.
Resultados
No hubo diferencia significativa en uPA, uPAR y PAI-1 expresión en dos tipos de tejido peritoneal en siete pacientes con metástasis peritoneal. Sin embargo, uPA, uPAR y PAI-1 expresiones en lesiones metastásicas peritoneales fueron significativamente más altos que los de los tejidos peritoneales normales de 24 pacientes de metástasis nonperitoneal (P
< 0,05). Por otra parte, no se observó diferencia estadística de la actividad de uPA en varios tejidos diferentes.
Conclusiones
La expresión del sistema de uPA se correlaciona positivamente con la metástasis peritoneal de cáncer gástrico. Esta diferencia en la expresión de los pacientes de metástasis peritoneales o nonperitoneal puede proporcionar una referencia para el diagnóstico de la metástasis peritoneal.
Palabras clave
El cáncer gástrico ELISA peritoneal metástasis RT-PCR UPA Antecedentes sistema
Aunque la incidencia y mortalidad del cáncer gástrico han disminuido en china durante las últimas décadas, el cáncer gástrico es todavía una gran carga del programa local de salud [1]. Es importante destacar que, la recurrencia de cáncer gástrico se produce incluso después de la resección potencialmente curativa, lo más frecuentemente en forma de metástasis peritoneal [2]. Por lo tanto, existe una necesidad urgente de desarrollar estrategias eficaces de diagnóstico precoz de metástasis peritoneal del cáncer gástrico.
Invasión y la metástasis del cáncer son procesos multifactoriales [3] y un paso esencial consiste en la destrucción consecutiva y la reconstitución de las membranas de la matriz extracelular y el sótano, que a su vez requiere la participación de varios sistemas de enzimas proteolíticas, tales como proteasas de serina y metaloproteasas [4]. De tipo activador del plasminógeno uroquinasa (uPA) es una de las serina proteinasas y se une a su receptor, el receptor de uPA (uPAR) en la superficie de la célula tumoral. Después de la activación, el uPA unido a la célula es capaz de convertir plasminógeno en plasmina, que es entonces capaz de degradar varios componentes de la matriz extracelular [5]. La acción del complejo uPA uPAR en plasminógeno puede ser controlada por los inhibidores de proteasa PAI [6, 7]. Por lo tanto, una producción equilibrada de celular y pericellular uPA, uPAR y PAI-1 es el requisito previo para la proteólisis eficiente focal, la adhesión celular y la migración, y por lo tanto, invasión de células tumorales y la metástasis [8, 9].
Tiene han observado que el sistema de uPA está bien correlacionada con el cáncer gástrico, midiendo el nivel de expresión de uPA, uPAR y PAI-1 en el cáncer gástrico y el tejido normal de la mucosa y analizando su correlación con diversas características patológicas clínicas. Por ejemplo, Plebani et al
. [10] determinó uPAR, uPA, PAI-1 y niveles utilizando ELISA en el cáncer gástrico y muestras normales de 20 pacientes con cáncer gástrico sometidos a cirugía. nivel de expresión de uPAR es significativamente mayor en el cáncer gástrico, y niveles bajos de uPAR están asociados con una mejor supervivencia. Taniguchi et al
. [11] estudiaron la relación entre la expresión de uPAR y parámetros clínico utilizando análisis inmunohistoquímico de 102 carcinomas gástricos primarios. Se observó inmunoreactividad uPAR en 38 casos de un total de 102 (37%). Además, las expresiones de uPA, uPAR y PAI-1 se correlacionan significativamente con diversos factores clinicopatológicos: tamaño de tumor, profundidad de la invasión tumoral, la diferenciación, los ganglios linfáticos metástasis [12-15], y metástasis peritoneo [16, 17].
Sin embargo, no ha habido evidencia muy poco directa para demostrar la importancia clínica del sistema de uPA en metastásico peritoneal distintiva de los tejidos peritoneales normales en el cáncer gástrico. En comparación con la distribución regular y disposición de los ganglios linfáticos, el tejido peritoneal tiene un área más grande, que ocupa toda la cavidad peritoneal, con lo que implica más aleatoriedad y la imprevisibilidad en la celda metástasis peritoneal en el cáncer gástrico. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue investigar más la diferencia de expresión del sistema UPA entre los tejidos metastásicos peritoneales y tejidos peritoneales normales de cáncer gástrico y para confirmar la importancia del diagnóstico del sistema UPA mediante la combinación de estos resultados con los datos clínicos.
métodos
muestra clínica
se evaluaron 31 pacientes (21 hombres, 10 mujeres) con un diagnóstico de cáncer gástrico, que había sido admitido en nuestro servicio entre julio de 2010 y diciembre de 2010. la edad media fue de 62,58 años (rango, 23-85). Los pacientes fueron diagnosticados con cáncer gástrico en base al análisis patológico preoperatorio o postoperatorio. Entre ellos, los 7 pacientes tenían metástasis peritoneal (tipo patológico: 1 caso de adenocarcinoma tubular moderadamente diferenciado, 1 caso de grado II a III adenocarcinoma, 3 casos de adenocarcinoma pobremente diferenciado, y 3 casos de adenocarcinoma pobremente diferenciado combinado con carcinoma de células en anillo de sello) , mientras que 24 pacientes tenían metástasis nonperitoneal (tipo patológico: 3 casos de adenocarcinoma tubular moderadamente diferenciado, 3 casos de grado II adenocarcinoma, 2 casos de grado II a III adenocarcinoma, 9 casos de adenocarcinoma pobremente diferenciado, 3 casos de carcinoma de células en anillo de sello, 1 caso de carcinoma mucinoso, 1 caso de adenocarcinoma de grado II en combinación con carcinoma de células en anillo de sello, 1 caso de adenocarcinoma de grado III en combinación con carcinoma de células en anillo de sello, y 1 caso de adenocarcinoma de grado II en combinación con carcinoma mucinoso). En el
pacientes con metástasis peritoneal, se extirparon las lesiones metástasis peritoneales, así como una pequeña cantidad de majus epiplón, pelveoperitoneum, y el peritoneo diafragmática sin metástasis peritoneal. En los pacientes con metástasis nonperitoneal, también se llevaron a cabo unos resecciones del majus epiplón, pelveoperitoneum, y el peritoneo diafragmático. Las muestras recolectadas fueron almacenadas a -80 ° C para su posterior análisis. MyBestPlay Todos los pacientes estaban vivos al final de la investigación, y nuestro estudio fue aprobado por el Comité Ético del Hospital Shanghai Oriental, afiliado a la Universidad Tong Ji.
cultivo de células
Las células de una línea de células mesoteliales peritoneal (HMrSV5) se mantuvieron en DMEM (Sigma, St. Louis, EE.UU.) suplementado con suero bovino fetal 10%. Las células se subcultivaron casi todos los días por 1: 4 o dilución 1: 5 en frascos de cultivo a 37 ° C bajo una atmósfera de 5% de CO 2
La extracción total de ARN y síntesis de ADNc
ARN total fue. aislado por precipitación de células usando un kit de extracción de ARN RNeasy ™ siguiendo las instrucciones del fabricante (Qiagen, Valencia, EE.UU.). La pureza del ARN y la concentración se determinó por absorbancia espectrofotométrica a 260 y 280 nm, respectivamente. La transcripción inversa se realizó en 1 g de ARN total usando oligo (dT) y transcriptasa inversa de AMV (Promega, Madison, EE.UU.). La mezcla de reacción de PCR 20 l contenía 2 l 10 x tampón de RT, 2 dNTPs mu l, 4 l MgCl 2, 0,5 l RNasin, 1 l oligo (dT) 18, 0,75 l de transcriptasa inversa, y el ARN 1 mg . La condición de la PCR fue de 70 ° C durante 10 min, 42 ° C durante 15 min, y 99 ° C durante 5 min, después de lo cual el ADNc se almacenó a 4 ° C (a menos de 3 meses).
RT- semicuantitativa PCR
Los niveles de expresión génica de uPA, uPAR y PAI-1 se determinó por comparación con el gen de β-actina o la gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH). La mezcla de reacción RT-PCR 25 l contenía 1 cDNA l, sentido y anti-sentido cebadores (cada 0,25 l), 2,5 l 10 x tampón de PCR, 2 l 25% MgCl 2, 0,5 l de Taq polimerasa, dNTP 1 l y 17,5 l RNasa libre de H 2O. Nested PCR se utilizó para la amplificación del antígeno carcinoembrionario (CEA) con 1 l de primera producto de PCR utilizados para la segunda plantilla de PCR. Las condiciones de amplificación fueron: (i) desnaturalización inicial a 95 ° C durante 5 min; (Ii) 30 ciclos de desnaturalización a 94 ° C durante 1 min; (Iii) hibridación a 56 ° C durante 30 s para uPA, 60 ° C durante 1 min para uPAR, 55 ° C durante 1 min para PAI-1, o 72 ° C durante 2,5 min para CEA; y (iv) de extensión a 72 ° C durante 1 min o 2,5 min. Los cebadores de PCR utilizados fueron los siguientes: para uPA, A, 5'-AGAATTCACCACCATCGA GA-3 'y B, 5'-ATCAGCTTCACAACAGTCA T-3'; para uPAR, A, 5'-ACA GGAGCTGCCCTCGCGAC-3 'y B, 5'-GAGGGGGATTT CAGGTTT AGG-3'; para PAI-1, A, 5'-CTTTGGTGAAGGGTCTGC-3 'y B, 5'-CTC CACCTCTGAAAAGTCC-3'; para CEA, A, 5'-TCTGGAACTTCTCCTGGTCT CAGCTGG-3 ', B, 5'-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3', y C, 5'-GGGCCACTGTCGGCATCATG ATTGG-3 '; para β-actina, A, 5'-TTGAAGGTAGTTTC GGGAAT-3 'y B, 5'-GAA AATCTG GCACCACAC CTT-3'; para GAPDH, A, 5'-GAAGGTGAAGGCGGAGT C-3 'y B, 5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'. Los cebadores A y B de CEA se utilizaron para la primera PCR, mientras que los cebadores B y C se utilizaron para la segunda amplificación. El producto de amplificación fue 474 pb, 1046 pb, 409 pb, 131 pb, 591 pb y 230 pb, respectivamente análisis.
Cuantitativa ELISA
solución salina tamponada con Tris (pH 8,5, 1,8 ml) se añadió a los tejidos congelados (100 a 300 mg) y la homogeneización se realizó en un baño de hielo. Posteriormente, se añadió 0,2 ml 10% Trixon X-100 para asegurar una concentración final de 1% Trixon X-100 en el homogenado. El homogeneizado se agitó durante 16 h y después se centrifugó en una centrífuga refrigerada a 4 ° C durante 1 h a 100.000 g
. El sobrenadante se transfirió a un nuevo tubo y la concentración de proteína se determinó mediante un ensayo de ácido bicinconínico. Las concentraciones de uPA, uPAR, y el antígeno PAI-1 se determinaron utilizando kits de ELISA de acuerdo con las instrucciones del fabricante (American Diagnostica, Greenwich, EE.UU.). La reacción se detuvo mediante la adición de 50 l H 2SO 4, y la absorción se midió a 450 nm en un lector de placas ELISA (lector de microplacas EL312e, Bio-Tek Instruments, Winooski, EEUU). Los valores de uPA, uPAR, y el antígeno PAI-1 se expresaron como ng /mg de proteína.
Ensayo de actividad de uPA
actividad de uPA se midió utilizando un kit de ensayo de actividad de uPA (Chemicon). Brevemente, la proteína del tejido se mezcló con tampón de ensayo y se incuba con un sustrato cromogénico en placas de 96 pocillos a 37 ° C durante 2 a 24 h. Se leyó la absorbancia a OD 405, y la actividad (unidades) se extrapoló a partir de una curva estándar. El análisis estadístico

Todos los datos fueron analizados mediante el programa SAS versión 6.12 y los resultados se registraron como estándar promedio ± desviación. La significación de las diferencias entre grupos se evaluó mediante análisis de la varianza, seguido de una prueba t
emparejado. P Hotel < 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
: Resultados de la semi-cuantitativos de RT-PCR análisis de CEA, uPA, uPAR y PAI-1 mRNA expresión
CEA es un marcador importante para tumores gastrointestinales. De este modo, se utilizó una alta sensibilidad anidado método RT-PCR para detectar la expresión de CEA en tejidos de cáncer gástrico con o sin metástasis peritoneal. Como era de esperar, los resultados fueron todas positivas para CEA en las lesiones metastásicas peritoneales de siete pacientes de metástasis peritoneales (Figura 1). Además, mediante la observación a simple vista de los pacientes de metástasis peritoneales, tres casos mostraron expresión positivo para CEA en los tejidos metastásicos nonperitoneal. Entre los 24 pacientes con metástasis nonperitoneal, 2 tenían expresión positivo para CEA en los tejidos peritoneales normales. No se detectó la expresión de CEA fue en la línea celular mesotelial peritoneal HMrSV5. Sin embargo, uPA, uPAR y PAI-1could pueden expresar en células HMrSV5 (Figura 2). Figura 1 la expresión mRNA de CEA en siete casos de cáncer gástrico con metástasis peritoneal. M: 1000 pb marcador; Los carriles 1, 2, 3, 4, 5, 6, y 7 indicaron los siete casos con metástasis peritoneales. ß-actina se utilizó como referencia interna para normalizar la expresión de CEA. Los productos de amplificación fueron 131 pb de CEA y 591 pb de la β-actina, respectivamente. CEA, antígeno carcinoembrionario.
Figura 2 UPA expresión de ARNm de sistema en la celda HMrSV5. M, marcador de 1000 pb; carril 1, UPA; carril 2, uPAR; carril 3, PAI-1; carril 4, β-actina. β-actina se utilizó como referencia interna. Los productos de amplificación fueron 474 pb de uPA, 1046 pb de uPAR, 409 pb de PAI-1, y 591 pb de la β-actina, respectivamente.
Expresión proteína del sistema de uPA en los tejidos de cáncer gástrico con o sin metástasis peritoneal
Un método ELISA cuantitativo se utilizó para determinar la UPA, uPAR y PAI-1 contenidos de proteínas de las lesiones metastásicas peritoneales y tejidos metastásicos nonperitoneal CEA-negativos de los 7 pacientes metástasis peritoneales, y los tejidos peritoneales normales de CEA-negativos de 24 pacientes de metástasis nonperitoneal. Los resultados (Tabla 1) indicaron que no hubo diferencias significativas en uPA, uPAR y PAI-1 expresión en dos tipos de tejido peritoneal de siete pacientes de metástasis peritoneales. Sin embargo, uPA, uPAR y PAI-1 de expresión fueron significativamente mayores en las lesiones metastásicas peritoneales de los tejidos peritoneales normales de 24 pacientes de metástasis nonperitoneal (P
< 0,05) .Tabla 1 de uPA de expresión de proteínas del sistema en los tejidos de cáncer gástrico con o sin metástasis peritoneal
proteína
metástasis peritoneal (7 casos) guía empresas Nonperitoneal metástasis (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

uPA
3.312
2.488
0.408
0.784
0.640
3.088
1.664
0.280
0.632
0.488
2.952
0.648
0.672
0.664
0.224
0.712
0.504
0.280
0.800
0.424
0.520
0.488
0.440
0.656
0.328
0.480
0.128
0.440
0.256
0.384
0.376
1.440
0.512
0.440
0.848
0.312
0.464
0.168
uPAR
3.664
4.936
1.432
0.345
1.034
2.720
2.304
0.640
1.256
0.532
2.744
2.192
1.536
0.239
0.479
1.432
1.808
0.704
0.671
0.561
0.912
1.280
0.792
0.845
0.390
1.184
0.480
0.272
0.432
0.633
1.064
2.728
1.280
0.467
0.291
1.120
0,968 0,776

PAI-1 | 1.511
4.204 0.568

3.665
Sin detección
3.872
1,725 ​​0,262

1,426 0,071

2.782
0,876 0,488

3.598
Sin detección
0,369 0,745

0,662 0,488

Sin detección
1.315 3.023

0,894 0,127

0.289 1.041

0,262 0,963

Sin detección
0,195
1.181 0.977

0,041 0,329

0,395 0,085

0,316 0,382

UPA detección de actividad de
también se detectó la actividad de uPA en las lesiones metastásicas peritoneales y tejidos metastásicos nonperitoneal CEA-negativos de 7 metástasis peritoneal pacientes, y los tejidos peritoneales normales CEA-negativos de 24 pacientes de metástasis nonperitoneal. Los resultados indicaron que no discrepancia estadística se observó en varios tejidos diferentes (Tabla 2) .Tabla 2 la actividad de uPA en los tejidos de cáncer gástrico con o sin metástasis peritoneal
peritoneal metástasis (7 casos) guía empresas metástasis Nonperitoneal (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

19.936
16.536
3.914
4.510
5.635
0.846
3.091
1.942
5.407
4.151
1.417
8.725
3.117
4.702
0.899
2.352
16.170
2.142
10.046
2.419
2.820
4.799
1.302
3.730
2.828
2.123
3.310
5.299
7.287
1.233
6.066
6.533
7.922
6.485
8.150
7,802 4,466

3,468
Discusión
Debido a su falta de manifestaciones clínicas específicas en la etapa temprana de metástasis peritoneal, la oportunidad de un tratamiento óptimo siempre se ha perdido en pacientes con cáncer gástrico. La ocurrencia de ascitis, tumores abdominales y obstrucciones intestinales indica un estado avanzado de cáncer gástrico. por lo tanto, el diagnóstico eficaz del cáncer gástrico con metástasis peritoneal sigue siendo un reto en las clínicas. en la actualidad, el método diagnóstico principal para el cáncer gástrico con metástasis peritoneal incluye el lavado peritoneal y la investigación citológica [18, 19]. sin embargo, los resultados positivos sólo indican la metástasis peritoneal subclínico porque la metástasis peritoneal es también no emergentes incluso si las células tumorales están presentes en el fluido peritoneal. Así, la detección en los tejidos peritoneales parece ser más directo y preciso. Sorprendentemente, tejidos peritoneales cubren toda la cavidad peritoneal, mientras que la implantación de las células tumorales es al azar, la detección de manera directa de las células tumorales en los tejidos peritoneales es muy difícil. Los biólogos moleculares creen que hay algunos cambios moleculares en las células auto-tumorales y sus tejidos afectados, y estos cambios en los tejidos pueden ser iniciadas antes de que las células tumorales ellos [9] en contacto. Sobre la base de este concepto, se investigó cambios moleculares en los tejidos peritoneales para explorar el potencial diagnóstico de la metástasis peritoneal.
CEA es un antígeno común asociado a un tumor, y es aceptado internacionalmente como el marcador tumoral tracto intestinal [20, 21]. Por lo tanto, hemos detectado la expresión de CEA en los tejidos peritoneales. Los resultados positivos en CEA-expresión indican que las células tumorales presentes en los tejidos peritoneales. Como era de esperar, nuestros resultados mostraron que CEA se expresó en todas las lesiones metastásicas peritoneales de siete pacientes de metástasis peritoneales. Curiosamente, había tres pacientes con metástasis peritoneales en los que el CEA se expresó positivamente en los tejidos metastásicos nonperitoneal y dos pacientes con metástasis nonperitoneal que tenían la expresión de CEA positivo en los tejidos peritoneales normales. Esto sugiere que estos pacientes tenían un potencial para el desarrollo de la metástasis peritoneal
Como incluye importantes enzimas proteolíticas, el sistema de uPA en células tumorales se ha demostrado interactuar con la matriz extracelular para facilitar la formación de metástasis microambiente.; Así, el sistema de uPA puede estar involucrado en el proceso de metástasis peritoneal [22]. se encontró que la expresión del sistema de uPA que aumentarse en los tejidos tumorales y de acogida implantados [23, 24]. El sistema de uPA consiste en la serina proteasa uPA, el receptor glicolípido de anclado, uPAR, y el inhibidor de serpina, PAI-1, [25]. Por lo tanto, el objetivo fue investigar los cambios ampliamente en estos tres factores en los tejidos peritoneales con o sin metástasis comentario El sistema de UPA se encuentra ampliamente distribuida en varias células.; nuestra RT-PCR mostró que uPA, uPAR y PAI-1, incluso se podían expresar en las células mesoteliales. Para evitar resultados inespecíficos, más ELISA cuantitativo se utilizó para detectar la expresión de las proteínas del sistema de uPA. Se encontró que el uPA, uPAR y PAI-1 contenidos de proteína fueron significativamente más altos en las lesiones o tejidos peritoneales CEA-negativos de pacientes metástasis peritoneales positivo para CEA en comparación con los tejidos peritoneales normales de pacientes metástasis nonperitoneal (P
< 0,05) . En particular, puede haber una mayor importancia clínica en el aumento del contenido de proteína del sistema de uPA en los tejidos peritoneales CEA-negativos de pacientes metástasis peritoneales. Este hallazgo indica que estos tejidos peritoneales CEA-negativos podrían estar en un estado de metástasis peritoneal subclínica y que la progresión de esta enfermedad pueden conducir a la metástasis peritoneal. Aunque los cambios del sistema de uPA en los tejidos peritoneales todavía no se ha demostrado definitivamente en las células tumorales, los cambios en los tejidos peritoneales, al menos, proporciona un valor de referencia para el diagnóstico de la metástasis peritoneal [26]. Heiss y colaboradores
. [27] encuentran que uPAR podría considerarse como un índice para la predicción dependiente de cáncer de estómago micrometástasis de médula ósea en comparación con citoqueratina (CK18). En este estudio, el contenido de proteína uPAR también fue significativamente mayor en los tejidos peritoneales CEA-negativos de pacientes metástasis peritoneales que en los tejidos peritoneales CEA-negativos de pacientes metástasis nonperitoneal (P
< 0,05). En breve, se sugiere que el aumento de uPAR y PAI-1 expresiones en los tejidos peritoneales de pacientes metástasis nonperitoneal puede ser considerado como un indicador de referencia para la metástasis peritoneal. Fotos: por ensayo de la actividad de uPA en tejidos de cáncer gástrico y de su matriz extracelular, Okusa et al
. [28] informan de que la mayor actividad de uPA se asocia significativamente con tumores con metástasis peritoneales y los tumores con invasión más profunda en la pared gástrica. de uPA producida por las células del estroma puede regular la invasión de células del cáncer [29]. Sin embargo, nuestros resultados mostraron que no hubo diferencia significativa en la actividad de uPA entre diferentes tejidos. Esto puede atribuirse a la actividad dinámica de uPA, que parece ser dependiente de los entornos celulares particulares y establece que se encuentra con [30].
Conclusiones
Nuestro estudio muestra que la expresión sistema de uPA es significativamente mayor en los tejidos peritoneales de los pacientes con metástasis peritoneales que en los pacientes de metástasis nonperitoneal. Esta diferencia de expresión puede proporcionar una referencia para el diagnóstico de la metástasis peritoneal. Sin embargo, todavía hay algunas limitaciones en este estudio. El número de casos incluidos en este estudio era bastante pequeña, sobre todo porque algunos pacientes con metástasis peritoneal fueron ingresados ​​en nuestro hospital entre julio de 2010 y diciembre de 2010. Tratamos de eliminar la influencia de este problema mediante la inclusión de tejidos (incluyendo majus epiplón, pelveoperitoneum, y el peritoneo diafragmático) en este estudio. Estudios posteriores con un mayor número de sujetos sigue siendo necesaria para obtener resultados más claros y convincentes
abreviaciones
CEA:. El antígeno carcinoembrionario
DMEM:
medio de Eagle modificado por Dulbecco
ELISA:
Enzima ensayo de inmunoabsorción ligado
GAPDH:
gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa
PCR: reacción en cadena de la polimerasa

RT: Read La transcriptasa inversa
RT-PCR: Read reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa
UPA:
activador del plasminógeno de tipo uroquinasa
uPAR:
de tipo uroquinasa receptor activador del plasminógeno
Declaraciones
Agradecimientos
reconocemos con gratitud a las siguientes personas:. Xuehua Chen, que participaron en la secuencia de alineación y ayudaron en la preparación del manuscrito. También reconocemos Yubao Ji, Zhang Yi, y Bin LV, que contribuyeron a este estudio. 'archivos originales presentados para las imágenes
A continuación se presentan los enlaces a los autores de los autores
archivos presentados originales de las imágenes. 'archivo original de la figura 1 40001_2012_56_MOESM2_ESM.tif autores 40001_2012_56_MOESM1_ESM.tif Autores archivo original para la figura 2 Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses financieros o no financieros en competencia.
contribuciones de los autores
YD y ZZ diseñó el estudio, realizado y RT-PCR, ELISA, y la detección de actividad con HZ y ZZhou. YD, MZ, y XW participaron en la secuencia de alineación y redactó el manuscrito. ZZ ayudó a llevar a cabo el análisis estadístico. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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