Klinische betekenis van het uPA-systeem in de maag buikvlieskanker met uitzaaiingen

Klinische betekenis van het uPA-systeem maagkanker met peritoneale metastasen
Abstract achtergrond
Aangetoond is dat urokinase-type plasminogeen activator (uPA) is betrokken bij tumorcelmetastase door verslechtering van de extracellulaire matrix. Er is echter weinig direct bewijs van klinische uPA systeem expressie in peritoneale metastatische weefsels van maagkanker. Het doel van deze studie was het onderzoeken uPA systeem expressie in peritoneale weefsels van peritoneale en nonperitoneal metastase patiënten, en de diagnostische waarde van het uPA te verkennen.
Werkwijzen
blijken van uPA, uPAR en PAI-1 waren gemeten door semi-kwantitatieve RT-PCR en ELISA. uPA-activiteit werd gedetecteerd met een kit uPA-activiteit.
Resultaten
Er was geen significant verschil in uPA, uPAR en PAI-1 expressie in twee typen peritoneale weefsel in zeven patiënten met peritoneale metastasen. Echter, uPA, uPAR en PAI-1 in termen peritoneale metastasen waren significant hoger dan in normale weefsels van peritoneale 24 nonperitoneal metastase patiënten (P
< 0,05). Bovendien is er geen statistisch verschil van uPA-activiteit werd waargenomen in verschillende weefsels.
Conclusies
De expressie van het uPA-systeem correleert positief met peritoneale metastasen van maagkanker. Deze uitdrukking verschil in peritoneale of nonperitoneal metastase patiënten kunnen een referentie voor de diagnose van peritoneale metastasen te bieden.
Sleutelwoorden
Maagkanker ELISA peritoneale metastasen RT-PCR UPA systeem Achtergrond
Hoewel de incidentie en mortaliteit van maagkanker zijn gedaald in China in de afgelopen decennia, maagkanker is nog steeds een grote last van de lokale gezondheidsprogramma [1]. Belangrijk is dat de herhaling van maagkanker blijft bestaan ​​zelfs als curatieve resectie, meestal in de vorm van peritoneale metastasen [2]. Er is dus dringend behoefte aan effectieve vroegtijdige diagnose strategieën voor peritoneale metastase van maagkanker te ontwikkelen. Invasie en metastase
Cancer zijn multifactoriële processen [3] en een essentiële stap omvat opeenvolgende vernietiging en reconstructie van de extracellulaire matrix en kelder membranen, dat daartoe de deelname van diverse proteolytische enzymsystemen, zoals serineproteasen en metalloproteasen [4]. Urokinase-type plasminogeen activator (uPA) is een van de serine proteasen en bindt aan zijn receptor, de uPA-receptor (uPAR) op het oppervlak van de tumorcel. Na activatie celgebonden uPA is in staat om plasminogeen in plasmine, dat vervolgens kan verschillende componenten van de extracellulaire matrix [5] degraderen. De werking van de uPA-uPAR complex op plasminogeen kan worden geregeld door de proteaseremmers PAI [6, 7]. Dus een evenwichtige productie van cellulaire en pericellulaire uPA, uPAR en PAI-1 is een voorwaarde voor efficiënte focale proteolyse, celadhesie en migratie, en dus tumorcel invasie en metastase [8, 9]. Het heeft
waargenomen is dat het uPA-systeem is goed gecorreleerd met maagkanker, door het meten van het expressieniveau van uPA, uPAR en PAI-1 bij maagkanker en normale mucosale weefsel en analyseren van hun correlatie met verschillende klinische pathologische kenmerken. Bijvoorbeeld Plebani et al
. [10] bepaald uPAR, uPA en PAI-1 niveaus middels ELISA bij maagkanker en normale monsters van 20 patiënten met maagkanker geopereerd. uPAR expressieniveau aanzienlijk hoger bij maagkanker en lage niveaus van uPAR worden geassocieerd met een betere overleving. Taniguchi et al
. [11] bestudeerden de relatie tussen de expressie van uPAR en clinicopathologic parameters met immunohistochemische analyse van 102 primaire maagcarcinomen. uPAR-immuunreactiviteit werd waargenomen in 38 gevallen van de 102 (37%). Bovendien worden de uitdrukkingen van uPA, uPAR en PAI-1 significant gecorreleerd met verschillende klinische en pathologische factoren: tumorgrootte diepte van tumorinvasie, differentiatie, lymfeklier [12-15], en peritoneum metastase [16, 17].
echter, er is zeer weinig direct bewijs om de klinische betekenis van het uPA-systeem bij het onderscheiden van peritoneale uitgezaaide van normale peritoneale weefsels bij maagkanker tonen. Vergeleken met de normale verdeling en opstelling van lymfeklieren, peritoneaal weefsel heeft een groter gebied beslaat de gehele peritoneale holte, met als gevolg meer willekeurigheid en onvoorspelbaarheid in cel peritoneale metastasering bij maagkanker. Dus het doel van deze studie was om verder de expressie van het verschil tussen uPA systeem peritoneale metastatische weefsels en normale peritoneale weefsels van maagkanker en de diagnose betekenis van het uPA-systeem bevestigen deze resultaten te combineren met klinische gegevens.
methoden
Klinische steekproef
We onderzocht 31 patiënten (21 mannen, 10 vrouwen) met een diagnose van maagkanker, die al naar onze afdeling had toegegeven tussen juli 2010 en december 2010. Hun gemiddelde leeftijd was 62,58 jaar (range, 23-85). De patiënten werden gediagnosticeerd met maagkanker basis van preoperatieve of postoperatieve pathologische analyse. Onder hen, 7 patiënten hadden peritoneale uitzaaiingen (pathologische soort: 1 geval van matig gedifferentieerde buisvormige adenocarcinoom, 1 geval van klasse II tot en met III adenocarcinoom, 3 gevallen van slecht gedifferentieerd adenocarcinoom, en 3 gevallen van slecht gedifferentieerde adenocarcinoom in combinatie met zegelring cell carcinoma) , terwijl 24 patiënten hadden nonperitoneal metastase (pathologische type: 3 gevallen van matig gedifferentieerde buisvormige adenocarcinoom, 3 gevallen van graad II adenocarcinoom, 2 gevallen van klasse II tot en met III adenocarcinoom, 9 gevallen van slecht gedifferentieerde adenocarcinoom, 3 gevallen van zegelring cell carcinoma, 1 geval van mucinous carcinoom, 1 geval van klasse II adenocarcinoom in combinatie met zegelring cell carcinoma, 1 geval van graad III adenocarcinoom in combinatie met zegelring cell carcinoma, en 1 geval van klasse II adenocarcinoom in combinatie met mucinous carcinoom).
In de patiënten met peritoneale metastasen, we uitgesneden de peritoneale metastasen laesies, evenals een kleine hoeveelheid omentum majus, pelveoperitoneum en middenrif peritoneum zonder peritoneale metastasen. Bij patiënten met nonperitoneal metastase, werden enkele resecties van het omentum majus, pelveoperitoneum en middenrif peritoneum ook uitgevoerd. De verzamelde monsters werden opgeslagen bij -80 ° C voor verdere analyse.
Alle patiënten in leven waren aan het eind van het onderzoek, en onze studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van Shanghai East Hospital, aangesloten bij Tong Ji University.

Celkweek cellen uit een peritoneale mesotheelcellen cellijn (HMrSV5) werden in DMEM (Sigma, St. Louis, USA) aangevuld met 10% foetaal runderserum gehandhaafd. De cellen werden vrijwel dagelijks subkweek van 1: 4 of 1: 5 verdunning in kweekflessen bij 37 ° C onder een atmosfeer van 5% CO 2
Totale RNA-extractie en cDNA-synthese Totaal RNA werd
. cellen geïsoleerd door precipitatie met een RNeasy ™ RNA extractie kit volgens de instructies van de fabrikant (Qiagen, Valencia, USA). De RNA-concentratie en zuiverheid werden bepaald door spectrofotometrische absorptie bij 260 en 280 nm, respectievelijk. Reverse transcriptie werd uitgevoerd op 1 ug totaal RNA met behulp van oligo (dT) primers en AMV reverse transcriptase (Promega, Madison, USA). De 20 pi PCR-reactiemengsel bevatte 2 ul 10 x RT-buffer, 2 pl dNTP, 4 ul MgCl 2, 0,5 ui RNasin, 1 ul oligo (dT) 18, 0,75 ul reverse transcriptase, en 1 ug RNA . De PCR conditie was 70 ° C gedurende 10 min, 42 ° C gedurende 15 min, en 99 ° C gedurende 5 minuten, waarna het cDNA bij 4 ° C (binnen 3 maanden) opgeslagen.
Semi-kwantitatieve RT- PCR Ondernemingen De genexpressie niveaus van uPA, uPAR en PAI-1 werd bepaald door vergelijking met β-actine gen of glyceraldehyde-3-fosfaatdehydrogenase (GAPDH). De 25 pl RT-PCR reactiemengsel bevatte 1 ui cDNA sense en antisense primers (elk 0,25 pl), 2,5 pi 10 x PCR-buffer, 2 pi 25% MgCl 2, 0,5 pi Taq-polymerase, 1 ui dNTP , en 17,5 pi RNase-vrij H 2O. Geneste PCR werd gebruikt voor de amplificatie van carcino-antigeen (CEA) met 1 ui eerste PCR-product voor de tweede PCR-matrijs. De amplificatie-omstandigheden waren: (i) initiële denaturatie bij 95 ° C gedurende 5 minuten; (Ii) 30 cycli van denaturatie bij 94 ° C gedurende 1 min; (Iii) hybridisatie bij 56 ° C gedurende 30 s voor uPA, 60 ° C gedurende 1 min bij uPAR, 55 ° C gedurende 1 minuut voor PAI-1, of 72 ° C gedurende 2,5 min voor CEA; en (iv) bij 72 ° C gedurende 1 min en 2,5 min. De PCR-primers waren als volgt: voor uPA, A, 5'-AGAATTCACCACCATCGA GA-3 'en B, 5'-ATCAGCTTCACAACAGTCA T-3'; voor uPAR, A, 5'-ACA GGAGCTGCCCTCGCGAC-3 'en B, 5'-GAGGGGGATTT CAGGTTT AGG-3'; voor PAI-1, A, 5'-CTTTGGTGAAGGGTCTGC-3 'en B, 5'-CTC CACCTCTGAAAAGTCC-3'; CEA, A, 5'-TCTGGAACTTCTCCTGGTCT CAGCTGG-3 ', B, 5'-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3' en C, 5'-GGGCCACTGTCGGCATCATG ATTGG-3 '; voor β-actine, A, 5'-TTGAAGGTAGTTTC GGGAAT-3 'en B, 5'-GAA AATCTG GCACCACAC CTT-3'; voor GAPDH, A, 5'-GAAGGTGAAGGCGGAGT C-3 'en B, 5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'. De A en B primers CEA werden gebruikt voor de eerste PCR, terwijl de B en C primers werden gebruikt voor de tweede amplificatie. Het amplificatieproduct is 474 bp, 1046 bp, 409 bp, 131 bp, 591 bp en 230 bp, resp.
Kwantitatieve ELISA analyse
Tris-gebufferde zoutoplossing (pH 8,5, 1,8 ml) werd toegevoegd bevroren weefsels (100 tot 300 mg) en homogenisatie werd uitgevoerd in een ijsbad. Vervolgens wordt 0,2 ml 10% Trixon X-100 werd toegevoegd tot een eindconcentratie van 1% Trixon X-100 in het homogenaat waarborgen. Het homogenaat werd geschud gedurende 16 uur en vervolgens gecentrifugeerd in een gekoelde centrifuge bij 4 ° C gedurende 1 uur bij 100.000 g
. Het supernatant werd overgebracht naar een nieuwe buis en de eiwitconcentratie werd bepaald door de bicinchoninezuur assay. Concentraties van uPA, uPAR en PAI-1 antigen werden bepaald met ELISA-kits volgens de instructies van de fabrikant (American Diagnostica, Greenwich, USA). De reactie werd gestopt door de toevoeging van 50 gl H 2SO 4, en de absorptie werd gemeten bij 450 nm op een ELISA plaatlezer (EL312e microplaat reader, Bio-Tek Instruments, Winooski, USA). Waarden van uPA, uPAR en PAI-1-antigeen werden uitgedrukt als ng /mg eiwit.
UPA activiteitstest
uPA-activiteit werd gemeten met een uPA-activiteit assay kit (Chemicon). In het kort werd het weefsel eiwit gemengd met testbuffer en geïncubeerd met een chromogeen substraat in 96-well platen bij 37 ° C gedurende 2 tot 24 uur. De absorptie werd afgelezen bij OD 405, en de activiteit (eenheden) werd geëxtrapoleerd van een standaard kromme.

Statistische analyse Alle gegevens werden geanalyseerd onder toepassing van SAS versie 6.12 software en de resultaten werden vastgelegd als gemiddelde ± standaardfout afwijking. De significantie van de verschillen tussen groepen werd geëvalueerd door analyse van de variantie, gevolgd door een gepaarde t Electronics Test. P Restaurant < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.
Resultaten
Semi-kwantitatieve RT-PCR analyse van CEA, uPA, uPAR en PAI-1 mRNA expressie
CEA is een belangrijke marker voor gastro tumoren. Daarbij gebruikten we een hoge gevoeligheid geneste RT-PCR-werkwijze om de expressie van CEA bij maagkanker weefsels met of zonder peritoneale metastasen gedetecteerd. Zoals verwacht, de resultaten waren positief voor CEA in de peritoneale metastasen zeven peritoneale metastasen patiënten (Figuur 1). Ook door het blote oog observatie van peritoneale metastasen patiënten, drie gevallen bleek CEA-positieve uitdrukking in de nonperitoneal metastatische weefsels. Van de 24 patiënten met nonperitoneal metastase, 2 hadden CEA-positieve expressie in normale peritoneale weefsels. Geen CEA expressie werd gedetecteerd in de peritoneale mesotheelcellen cellijn HMrSV5. Echter, uPA, uPAR en PAI-1could worden uitgedrukt in HMrSV5 cellen (figuur 2). Figuur 1 CEA mRNA expressie in zeven gevallen van maagkanker met peritoneale metastasen. M: 1000 bp marker; Lanen 1, 2, 3, 4, 5, 6 en 7 aangeduid zeven peritoneale metastasen gevallen. ß-actine werd gebruikt voor interne referentie om de expressie van CEA normaliseren. De amplificatieproducten werden 131 bp en 591 bp CEA van β-actine respectievelijk. CEA, carcino-antigeen.
Figuur 2 uPA systeem mRNA expressie in HMrSV5 cel. M, 1000 bp marker; laan 1, uPA; laan 2, uPAR; baan 3, PAI-1; laan 4, β-actine. β-actine werd gebruikt voor interne referentie. De amplificatieproducten werden 474 bp van uPA, uPAR 1046 bp, 409 bp PAI-1, en 591 bp van β-actine respectievelijk.
UPA-systeem eiwitexpressie in maagkanker weefsels met of zonder peritoneale metastasen
Een kwantitatieve ELISA-methode werd gebruikt om de uPA, uPAR en PAI-1 eiwitgehalten in peritoneale metastasen en CEA-negatieve nonperitoneal metastatische weefsels van 7 peritoneale metastasen patiënten en CEA-negatieve peritoneale normale weefsels van 24 nonperitoneal metastase patiënten determineren. De resultaten (Tabel 1) gaf aan dat er geen significante verschillen in uPA, uPAR en PAI-1 expressie in twee typen peritoneale weefsel van zeven patiënten peritoneale metastasen. Echter, uPA, uPAR en PAI-1-expressie was significant hoger in peritoneale metastasen dan de normale peritoneale weefsels van 24 nonperitoneal metastase patiënten (P
< 0,05) .table 1 uPA systeem eiwitexpressie in maagkanker weefsels of zonder peritoneale metastasen
Protein
peritoneale metastasen (7 gevallen)
Nonperitoneal metastase (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

uPA
3.312
2.488
0.408
0.784
0.640
3.088
1.664
0.280
0.632
0.488
2.952
0.648
0.672
0.664
0.224
0.712
0.504
0.280
0.800
0.424
0.520
0.488
0.440
0.656
0.328
0.480
0.128
0.440
0.256
0.384
0.376
1.440
0.512
0.440
0.848
0.312
0.464
0.168
uPAR
3.664
4.936
1.432
0.345
1.034
2.720
2.304
0.640
1.256
0.532
2.744
2.192
1.536
0.239
0.479
1.432
1.808
0.704
0.671
0.561
0.912
1.280
0.792
0.845
0.390
1.184
0.480
0.272
0.432
0.633
1.064
2.728
1.280
0.467
0.291
1.120
0,968
0,776
PAI-1
1,511
4,204
0,568
3,665 verhuur No detectie
3,872
1.725
0,262
1.426
0,071
2,782
0,876
0,488
3,598 verhuur No detectie
0,369
0,745
0,662
0,488 verhuur No detectie
1.315
3,023
0,894
0,127
0,289
1.041
0,262
0,963 verhuur No detectie
0,195
1.181
0,977
0,041
0,329
0,395
0,085
0,316
0.382
uPA activiteit detectie
We hebben geconstateerd ook uPA-activiteit in peritoneale metastatische laesies en CEA-negatieve nonperitoneal metastatische weefsels van 7 peritoneale metastase patiënten en CEA-negatieve peritoneale normale weefsels van 24 nonperitoneal metastase patiënten. De resultaten gaven aan dat er geen statistisch verschil werd waargenomen in verschillende weefsels (Tabel 2) .table 2 uPA-activiteit in maagkanker weefsels met of zonder peritoneale metastasen
peritoneale metastase (7 gevallen)
Nonperitoneal metastase (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

19.936
16.536
3.914
4.510
5.635
0.846
3.091
1.942
5.407
4.151
1.417
8.725
3.117
4.702
0.899
2.352
16.170
2.142
10.046
2.419
2.820
4.799
1.302
3.730
2.828
2.123
3.310
5.299
7.287
1.233
6.066
6.533
7.922
6.485
8.150
7,802
4,466
3,468
Discussie
Door het ontbreken van specifieke klinische verschijnselen in het vroege stadium van peritoneale metastase, is de optimale behandeling kans altijd gemist bij maagkanker patiënten. Het optreden van ascites, buiktumoren en intestinale obstructies geeft een vergevorderd stadium van maagkanker. Daarom is de effectieve diagnose van maagkanker met peritoneale metastasen blijft een uitdaging in klinieken. Momenteel is de belangrijkste diagnostische methode voor maagkanker met peritoneale metastasen omvat peritoneale lavage en cytologisch onderzoek [18, 19]. echter positieve resultaten geven subklinische peritoneale metastasen omdat de peritoneale metastasen is evenmin opkomende zelfs als tumorcellen in de peritoneale vloeistof zijn. Aldus detectie in peritoneale weefsels lijkt directer en accuraat. Opmerkelijk peritoneale weefsel het gehele peritoneale holte, terwijl tumorcel implantatie is willekeurig, zodat directe detectie van tumorcellen in de peritoneale weefsel is zeer moeilijk. Moleculair biologen van mening dat er een aantal moleculaire veranderingen in self-tumorcellen en de aangetaste weefsels, en deze veranderingen in weefsels worden geïnitieerd voordat de tumorcellen bij hen [9]. Op basis van dit concept onderzochten we moleculaire veranderingen in peritoneale weefsels naar de mogelijke diagnose van peritoneale metastasen verkennen.
CEA is een gemeenschappelijk tumor-geassocieerd antigen en internationaal geaccepteerd als het maag- tumormarker [20, 21]. Daarom gedetecteerd we de expressie van CEA in peritoneale weefsels. Positief CEA-expressie geven aan dat tumorcellen aanwezig zijn in peritoneale weefsels. Zoals verwacht, toonden onze resultaten dat CEA tot expressie werd gebracht in de peritoneale metastasen van zeven patiënten peritoneale metastasen. Interessant genoeg waren drie patiënten met peritoneale metastasen bij wie CEA positief werd uitgedrukt in de nonperitoneal metastatische weefsels en twee patiënten met metastasen nonperitoneal die positief CEA-expressie in normale weefsels peritoneale had. Dit suggereert dat deze patiënten een kans op het ontwikkelen peritoneale metastasen
Zoals bevat belangrijke proteolytische enzymen, de uPA-systeem in tumorcellen is aangetoond dat interactie met de extracellulaire matrix tot de vorming van micro-metastasen vergemakkelijken.; dus kan het uPA-systeem betrokken bij het proces van peritoneale metastasen [22]. Expressie van het uPA-systeem blijkt te worden verhoogd geïmplanteerde tumor en gastheer weefsels [23, 24]. Het uPA bestaat uit het serine protease uPA, het glycolipide-verankerde receptor, uPAR en het serpine remmer PAI-1 [25]. Daarom hebben we geprobeerd om te onderzoeken uitvoerig veranderingen in deze drie factoren in peritoneale weefsels met of zonder uitzaaiingen Ondernemingen De uPA-systeem is wijd verspreid in verschillende cellen.; onze RT-PCR toonde aan dat uPA, uPAR en PAI-1 ook kan worden uitgedrukt in mesotheelcellen. Om niet-specifieke resultaten te vermijden, werd verdere kwantitatieve ELISA toegepast om expressie van het uPA-systeem eiwitten te detecteren. We vonden dat uPA, uPAR en PAI-1 eiwitgehalten significant hoger in CEA-positieve laesies of CEA-negatieve peritoneale weefsels van patiënten peritoneale metastasen in vergelijking met normale weefsels van peritoneale metastasen nonperitoneal patiënten (P
< 0,05) . Met name kan er meer klinisch belang het hogere uPA-systeem eiwitgehalte CEA-negatieve peritoneale weefsels van peritoneale metastasen patiënten. Deze bevinding geeft aan dat deze CEA-negatieve peritoneale weefsel kan in een toestand van subklinische peritoneale metastasen en progressie van deze ziekte kan leiden tot peritoneale metastasen. Hoewel uPA systeemveranderingen in peritoneale weefsels nog niet definitief aangetoond in tumorcellen, de veranderingen in peritoneale weefsels tenminste biedt een referentiewaarde voor de diagnose van peritoneale metastasen [26]. Heiss et al
. [27] vinden dat uPAR als een afhankelijke index voor de voorspelling van maagkanker beenmerg micrometastasen kan worden beschouwd vergeleken met cytokeratine (CK18). In deze studie uPAR eiwitgehalte ook CEA-negatieve peritoneale weefsels van peritoneale metastasen patiënten significant hoger dan in CEA-negatieve peritoneale weefsels van nonperitoneal metastase patiënten (P
< 0,05). In het kort, stellen wij voor dat uPAR en PAI-1-uitingen in peritoneale weefsels van nonperitoneal metastase patiënten verhoogd kan als een referentie-indicator voor peritoneale metastasen worden beschouwd.
Door analyse van de uPA-activiteit in maagkanker weefsels en hun extracellulaire matrix, Okusa et al
. [28] melden dat de hogere uPA-activiteit significant geassocieerd met tumoren met peritoneale metastasen en tumoren met diepere invasie in de maagwand. uPA door stromale cellen kankercel invasie [29] te reguleren. Echter, onze resultaten bleek dat er geen significant verschil in uPA-activiteit tussen verschillende weefsels. Dit kan worden toegeschreven aan de dynamische activiteit van uPA, dat verschijnt afhankelijk van de specifieke cellulaire omgevingen en dat stuit [30].
Conclusies Home Onze studie toont aan dat uPA systeem expressie significant hoger in peritoneale weefsels peritoneale metastasen patiënten dan bij patiënten nonperitoneal metastase. Deze uitdrukking verschil kan een referentie voor diagnose van peritoneale metastasen verschaffen. Er zijn echter nog enkele beperkingen aan deze studie. Het aantal gevallen in deze studie was nogal klein, vooral omdat weinig patiënten met peritoneale metastasen in ons ziekenhuis werden opgenomen tussen juli 2010 en december 2010. We hebben geprobeerd om de invloed van dit probleem te verwijderen door het opnemen van weefsels (inclusief omentum majus, pelveoperitoneum, en middenrif peritoneum) in deze studie. Nader onderzoek met een hoger aantal patiënten is nog steeds nodig om duidelijker en overtuigende resultaten te verkrijgen
Afkortingen
CEA.
Carcino-antigeen
DMEM:
Dulbecco's gemodificeerd Eagle's medium
ELISA:
Enzyme-linked immunosorbent assay
GAPDH:
glyceraldehyde-3-fosfaat dehydrogenase
PCR:
Polymerase kettingreactie
RT:
reverse transcriptase
RT-PCR:
reverse transcriptase polymerase chain reaction
uPA:
urokinase-type plasminogeenactivator
uPAR:
urokinase-type plasminogeenactivator receptor
verklaringen
Dankwoord
Wij dankbaar de volgende personen te erkennen. Xuehua Chen, die deelnamen aan de sequence alignment en hielp bij de voorbereiding van het manuscript. We hebben ook erkennen Yubao Ji, Yi Zhang, en Bin LV, die hebben bijgedragen aan deze studie. 'Originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs'
Auteurs originele ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 40001_2012_56_MOESM2_ESM.tif Authors' 40001_2012_56_MOESM1_ESM.tif Auteurs originele bestand voor figuur 2 Concurrerende belangen Ondernemingen De auteurs verklaren dat zij geen financiële of niet-financiële concurrerende belangen.
Auteurs bijdragen
YD en ZZ ontwierp de studie, en voerde RT-PCR, ELISA, en de activiteit detectie met HZ en ZZhou. YD, MZ, en XW deel aan de sequence alignment en de opstellers van het manuscript. ZZ geholpen om statistische analyse uit te voeren. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• FOLFIRI als tweede lijn therapie bij patiënten met docetaxel voorbehandeld maagkanker: een historisch cohort
• Detectie van promotor hypermethylering van het CpG eiland van E-cadherine in de maag cardiale adenocarcinoma