Klinický význam systému UPA v karcinómu žalúdka s peritoneálnej metastasis

klinický význam systému UPA v karcinómu žalúdka s peritoneálnej metastázami
abstraktné
pozadia
Bolo preukázané, že sa jedná o urokináza typu aktivátora plazminogénu (UPA) v nádorových buniek metastáz degradáciou extracelulárnej matrix. Avšak, existuje len málo priamy dôkaz o klinickej systéme expresie UPA v peritoneálnej metastatických tkanivách karcinómu žalúdka. Cieľom tejto štúdie bolo skúmať systému expresie UPA v peritoneálnej tkanivách peritoneálnej a nonperitoneal pacientov metastáz, a preskúmať diagnostickú hodnotu systému Úpa.
Metódy
Vyjadrenie Upa, upÃr a PAI-1 boli merané semi-kvantitatívnej RT-PCR a ELISA. UPA aktivita bola detekovaná s použitím súpravy aktivity UPA.
Výsledky
Nebol žiadny významný rozdiel v ÚPA, upÃr a PAI-1 expresie v oboch typov peritoneálnej tkaniva v siedmich pacientov s peritoneálnej metastáz. Avšak, UPA, upÃr a PAI-1 výrazy v peritoneálnej metastatických lézií boli významne vyššie než v normálnych tkanivách peritoneálnej 24 pacientov nonperitoneal metastáz (P
menšie ako 0,05). Okrem toho žiadna štatistická rozpor UPA aktivita bola pozorovaná v rôznych rôznych tkanivách.
Závery
Expresia systému UPA pozitívne koreluje s peritoneálnej metastázy karcinómu žalúdka. Tento rozdiel expresie v peritoneálnej alebo s nonperitoneal pacientov metastáz môže poskytnúť referencie pre diagnostiku peritoneálnej metastázy.
Kľúčové
Karcinóm žalúdka ELISA peritoneálnej metastázy RT-PCR UPA pozadia systému
Hoci výskyt a úmrtnosť na rakovinu žalúdka klesli v Číne v posledných niekoľkých desaťročiach, rakovina žalúdka je stále veľká záťaž miestneho zdravotného programu [1]. Dôležité je, že recidívy rakoviny žalúdka dochádza aj po potenciálne kuratívnu resekcii, najčastejšie vo forme peritoneálnej metastázy [2]. Preto existuje naliehavá potreba vyvinúť účinné stratégie pre včasnej diagnózy peritoneálnej metastázy rakoviny žalúdka.
Cancer invázie a metastázy sú multifaktoriálne procesy [3] a nevyhnutným krokom zahŕňa po sebe idúce zničení a rozpustenie extracelulárnej matrix a bazálnych membránach, čo vyžaduje účasť viacerých proteolytického enzýmu systémov, ako sú serínové proteázy a metaloproteázy [4]. Urokináza typu aktivátor plazminogénu (UPA), je jedným z serínových proteináz a viaže sa na svoj receptor je receptor UPA (Upar) na povrchu nádorové bunky. Po aktivácii bunky viazané UPA je schopný premeniť plazminogén na plazmín, ktorý je potom schopná degradovať niekoľko zložiek extracelulárnej matrix [5]. Pôsobenie komplexu UPA-upÃr na plazminogénu môže byť riadená inhibítory proteázy PAI [6, 7]. Tak, vyvážený produkcie bunkovej a pericelulárních ÚPA, upÃr a PAI-1 je predpokladom pre efektívnu ohniskovú proteolýzou, bunkovej adhézie a migrácie, a teda, inváziu nádorových buniek a metastáz [8, 9].
Má bolo pozorované, že systém UPA je dobre koreluje s karcinómov žalúdka, meraním hladiny expresie ÚPA, upÃr a PAI-1, rakovinou žalúdka a normálne slizničnej tkanivo a analýzou ich koreláciu s rôznymi klinickými patologickými vlastnosťami. Napríklad plebán et al
. [10] stanovená upÃr, UPA, a PAI-1 hladiny pomocou ELISA rakoviny žalúdka a normálne vzorky od 20 pacientov s rakovinou žalúdka podstúpi chirurgický zákrok. Upar úroveň expresie je významne vyššia u karcinómu žalúdka, a nízke hladiny Upar sú spojené s lepšou prežitie. Taniguchi et al
. [11] študovali vzťah medzi expresiou upÃr a patologickým parametrov pomocou imunohistochemické analýzou od 102 primárnych karcinómov žalúdka. Upar imunoreaktivita bola pozorovaná v 38 prípadoch z 102 (37%). Okrem toho, výrazy UPA, upÃr a PAI-1 sa významne koreluje s rôznymi klinicko-faktorov: veľkosť nádoru, hĺbka invázie nádoru, diferenciácie, lymfatických uzlín [12-15], a pobrušnice metastáz [16, 17].
Avšak, tam bolo len veľmi málo priamych dôkazov svedčiacich o klinický význam systému UPA v rozlišovaní peritoneálnej metastázujúci od bežných peritoneálnej tkanivách karcinómu žalúdka. V porovnaní s pravidelnou distribúciou a usporiadanie lymfatických uzlín, peritoneálnej tkanivo má väčšiu plochu, zaberajúce celý peritoneálnej dutiny, a spôsobiť tak ďalšie náhodnosti a nepredvídateľnosť v bunke peritoneálnej metastáz u karcinómu žalúdka. To znamená, že cieľom tejto štúdie bolo ďalej skúmať výraz rozdiel systému UPA medzi peritoneálnej metastatických tkanív a normálnych peritoneálnej tkanivách karcinómu žalúdka a potvrdiť diagnózu význam systému UPA Kombináciou týchto výsledkov s klinickými dátami.
metódy
klinická vzorka
sme hodnotili 31 pacientov (21 mužov, 10 žien) s diagnózou rakoviny žalúdka, ktorí boli prijatí na našom pracovisku v období od júla 2010 do decembra 2010. Ich priemerný vek bol 62.58 rokov (rozsah, 23 až 85). Pacienti boli diagnostikovaní s rakovinou žalúdka, vztiahnuté na predoperačnom alebo pooperačnom patologickú analýzu. Medzi nimi, 7 pacientov malo peritoneálnej metastázy (patologických symbol: 1 prípad stredne diferencovaného rúrkového adenokarcinóm, 1 prípad v stupni II až III adenokarcinóm, 3 prípady zle diferencovaný adenokarcinóm a 3 prípady zle diferencovaný adenokarcinóm v kombinácii s karcinómom pečatný prsteň buniek) , zatiaľ čo 24 pacientov malo nonperitoneal metastázy (patologické Typ: 3 prípady stredne diferencovaného rúrkového adenokarcinóm, 3 prípady adenokarcinóm stupeň II, 2 prípady v stupni II až III adenokarcinóm, 9 prípadov zle diferencovaného adenokarcinómu, 3 prípady karcinómu pečatný prsteň buniek, 1 prípadov mucinózního karcinómu, jeden prípadov adenokarcinómu stupeň II v kombinácii s uzatváracou prsteň karcinómu, 1 ak o stupeň III adenokarcinóm v kombinácii s karcinómom pečatný prsteň buniek a 1 prípad adenokarcinóme stupeň II v kombinácii s mucinózního karcinóm).
v pacienti s peritoneálnej metastázy sme vyrezané peritoneálnej metastázy lézie, rovnako ako malé množstvo omentum majus, pelveoperitoneum a bránice pobrušnice bez peritoneálnej metastázy. U pacientov s metastázami nonperitoneal, boli vykonané aj niekoľko resekciou opony majus, pelveoperitoneum a diafragmatická pobrušnice. Odobraté vzorky boli skladované pri -80 ° C pre ďalšiu analýzu.
Všetci pacienti boli nažive na konci výskumu, a naša štúdia bola schválená etickou komisiou Shanghai East nemocnice, ktorá je pripojená k Tong Ji University.
Cell Culture
bunky z bunkovej línie peritoneálnej mezotelových (HMrSV5) boli udržiavané v DMEM (Sigma, St. Louis, USA) doplnenom 10% fetálnym hovädzím sérom. Bunky boli subkultivovať takmer každý deň od 1: 4 alebo 1: 5, riedenie v kultivačných nádob pri teplote 37 ° C v atmosfére 5% CO 2
Celková Extrakcia RNA a syntéza cDNA
Celková RNA bola. izolovaný buniek zrážaním za použitia extrakčného kitu RNA je RNeasy ™ podľa pokynov výrobcu (Qiagen, Valencia, USA). RNA čistota a koncentrácia bola stanovená spektrofotometricky meraním absorbancie pri 260 a 280 nm, resp. Reverzný transkripcie bola vykonaná na 1 ug celkovej RNA za použitia oligo (dT) primérov a AMV reverznej transkriptázy (Promega, Madison, USA). 20 ul PCR reakčná zmes obsahovala 2 ul 10 x RT pufru, 2 ul dNTPs, 4 ul MgCl 2, RNasin 0,5 ul, 1 ul oligo (dT) 18, reverznej 0,75 ul transkriptázy a 1 ug RNA , Stav PCR bola 70 ° C počas 10 minút, 42 ° C počas 15 min, a 99 ° C po dobu 5 minút, načo sa cDNA bol uložený pri teplote 4 ° C (do 3 mesiacov).
Semi-kvantitatívna RT PCR
hladiny génovej expresie ÚPA, upÃr a PAI-1 bola stanovená v porovnaní s beta-aktínu génu alebo glyceraldehyd-3-fosfát dehydrogenázy (GAPDH). 25 ul RT-PCR reakčná zmes obsahovala 1 ul cDNA, zmysel a anti-sense priméry (každá 0,25 ul), 2,5 ul 10 x PCR pufra, 2 ul 25% MgCl 2, 0,5 ul Taq polymerázy 1 ul dNTP a 17,5 ul prosté RNázy H 2O. Nested PCR bola použitá pre amplifikáciu karcinoembryonálneho antigénu (CEA), s 1 ul prvého produktu PCR použité pre druhú PCR templát. Podmienky amplifikácie boli nasledovné: (i) počiatočné denaturácia pri teplote 95 ° C počas 5 min; (Ii) 30 cyklov denaturácie pri teplote 94 ° C počas 1 min; (Iii) žíhanie pri teplote 56 ° C počas 30 s na ÚPA, 60 ° C po dobu 1 minúty pre upÃr, 55 ° C po dobu 1 minúty pre PAI-1, alebo 72 ° C počas 2,5 minúty pre CEA; a (iv) predĺženie pri 72 ° C počas 1 min a 2,5 min. PCR primery boli nasledujúce: pre ÚPA, A, 5'-AGAATTCACCACCATCGA GA-3 'a 5'-B, ATCAGCTTCACAACAGTCA T-3'; pre upÃr, A, 5'-ACA GGAGCTGCCCTCGCGAC-3 'a B, 5'-GAGGGGGATTT CAGGTTT AGG-3'; PAI-1, A, 5'-CTTTGGTGAAGGGTCTGC-3 'a B, 5'-CTC CACCTCTGAAAAGTCC-3'; CEA, A, 5'-TCTGGAACTTCTCCTGGTCT CAGCTGG-3 ', B, 5'-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3', a C, 5'-GGGCCACTGTCGGCATCATG ATTGG-3 '; pre beta-aktínu, A, 5'-TTGAAGGTAGTTTC GGGAAT-3 'a B, 5'-GAA AATCTG GCACCACAC CTT-3'; pre GAPDH, A, 5'-GAAGGTGAAGGCGGAGT C-3 'a 5'-B, GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'. Primery A a B CEA boli použité pre prvý PCR, zatiaľ čo primery B a C boli použité pre druhú amplifikáciu. Produkt amplifikácie bol 474 bp, 1046 bp, 409 bp, 131 bp, 591 bp a 230 bp, v danom poradí.
Kvantitatívna analýza ELISA
Tris-vyrovnanom fyziologickom roztoku (pH 8,5, 1,8 ml) sa pridá k mrazené tkaniva (100 až 300 mg) a homogenizácia bola vykonaná v ľadovom kúpeli. Potom sa pridalo 0,2 ml 10% Trixon X-100 pre zaistenie konečnej koncentrácie 1% Trixon X-100 v homogenátu. Homogenát sa trepe počas 16 hodín a potom sa odstreďuje v chladenej odstredivke pri teplote 4 ° C po dobu 1 h pri 100000 g
. Supernatant bol prenesený do novej skúmavky a koncentrácia proteínu bola stanovená pomocou testu s kyselinou bicinchoninic. Koncentrácia UPA, upÃr a PAI-1 antigénu boli stanovené pomocou ELISA kitov podľa inštrukcií výrobcu (American Diagnostica, Greenwich, USA). Reakcia bola zastavená pridaním 50 ul H 2SO 4, a absorpcie sa meria pri 450 nm na čítačke doštičiek ELISA (EL312e mikrodoštičiek, Bio-Tek Instruments, Winooski, USA). Hodnoty UPA, upÃr a PAI-1 antigénu boli vyjadrené ako ng /mg proteínu.
Testu aktivity UPA
UPA aktivita bola meraná pomocou testu aktivity súpravy UPA (Chemicon). Stručne povedané, tkanivo proteín sa zmieša s testovacím pufri a inkubujú sa s chromogenním substrátom v 96-jamkových doskách pri teplote 37 ° C počas 2 až 24 hodín. Absorbancia bola odpočítaná pri OD 405, a aktivita (jednotky) bolo extrapolované zo štandardnej krivky.
Štatistická analýza
Všetky dáta boli analyzované s použitím SAS verzie 6.12 softvér a výsledky boli zaznamenané ako priemerné štandardné ± odchýlka. Významnosť rozdielov medzi skupinami bola hodnotená pomocou analýzy variance a následne párového t testu
. P Hotel < 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú.
Výsledky
Semi-kvantitatívna RT-PCR analýzy CEA, UPA, upÃr a PAI-1 expresie mRNA
CEA je dôležitým ukazovateľom gastroenteric nádorov. A tým, sme použili vysokú citlivosť vnorené metóda RT-PCR pre detekciu expresie CEA v žalúdočných rakovinové tkanive s alebo bez peritoneálnej metastázy. Ako sa dalo očakávať, že výsledky boli všetky pozitívne na CEA v peritoneálnej metastatických lézií siedmich peritoneálnych metastáz u pacientov (obrázok 1). Tiež tým, že voľným pozorovaním okom pacientov s peritoneálnej metastázy tri prípady vykazovali CEA-pozitívne vyjadrenie v nonperitoneal metastatických tkanív. Z 24 pacientov s metastázami nonperitoneal, 2 mal CEA-pozitívnej expresie v normálnych peritoneálnych tkanivách. Žiadna expresia CEA bola detekovaná v peritoneálnej bunkovej línii mezotelových HMrSV5. Avšak, UPA, upÃr a PAI-1could byť exprimovaný v HMrSV5 bunkách (obrázok 2). Obrázok 1 CEA expresiu mRNA v siedmich prípadoch rakovinou žalúdka s peritoneálnej metastázy. M: 1000 značka bp; Dráhy 1, 2, 3, 4, 5, 6, a 7 je uvedené sedem peritoneálnej metastatické prípady. beta-aktínu bol použitý vnútorný štandard pre normalizáciu expresie CEA. Produkty amplifikácie boli 131 bp CEA a 591 bp beta-aktínu, resp. CEA, karcinoembryonální antigén.
Obrázok 2 UPA systém mRNA expresiu v bunke HMrSV5. M, 1000 značka bp; lane 1, UPA; lane 2, Upar; dráha 3, PAI-1; dráha 4, β-aktínu. β-aktínu bol použitý vnútorný štandard. Produkty amplifikácie boli 474 bp ÚPA, 1046 bp upÃr, 409 bp z PAI-1, a 591 bp beta-aktínu, v danom poradí.
UPA expresiu proteínu v systéme žalúdočnej rakovinové tkanive s alebo bez metastáz peritoneálnej
kvantitatívne metódou ELISA bol použitý determinovať UPA, upÃr a PAI-1 sa obsahu bielkovín v peritoneálnej metastatických lézií a CEA-negatívnych nonperitoneal metastatických tkanív 7 pacientov s peritoneálnej metastázy a CEA-negatívnych normálne peritoneálnej tkaniva z 24 pacientov nonperitoneal metastáz. Výsledky (tabuľka 1), je uvedené, že neexistujú žiadne významné rozdiely v ÚPA, upÃr a PAI-1 expresie v oboch typov peritoneálnej tkanív siedmich pacientov peritoneálnych metastáz. Avšak, UPA, upÃr a PAI-1 expresie boli signifikantne vyššie u peritoneálnych metastatických lézií než tie bežné peritoneálnej tkanív 24 nonperitoneal metastáz pacientov (P Hotel &0,05) .Table 1 ÚPA systému, expresia proteínov v žalúdku rakovinových tkanív alebo bez metastáz peritoneálnej
Protein
peritoneálnej metastázy (7 prípadoch)
Nonperitoneal metastázy (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

uPA
3.312
2.488
0.408
0.784
0.640
3.088
1.664
0.280
0.632
0.488
2.952
0.648
0.672
0.664
0.224
0.712
0.504
0.280
0.800
0.424
0.520
0.488
0.440
0.656
0.328
0.480
0.128
0.440
0.256
0.384
0.376
1.440
0.512
0.440
0.848
0.312
0.464
0.168
uPAR
3.664
4.936
1.432
0.345
1.034
2.720
2.304
0.640
1.256
0.532
2.744
2.192
1.536
0.239
0.479
1.432
1.808
0.704
0.671
0.561
0.912
1.280
0.792
0.845
0.390
1.184
0.480
0.272
0.432
0.633
1.064
2.728
1.280
0.467
0.291
1,120 0,968
0,776
PAI-1
1,511 4,204
0,568 3,665
Žiadna detekcia
3.872
1,725 ​​0,262

1,426 0,071
2,782 0,876
0.488 3,598
Žiadna detekcia
0,369 0,745
0,662 0.488
Žiadna detekcia
1,315 3,023
0,894 0,127
0,289 1,041
0,262 0,963
Žiadna detekcia
0,195 1,181
0,977
0,041 0,329
0,395 0,085
0,316 0,382
detekcie aktivity UPA
sme tiež zistená UPA činnosť v peritoneálnej metastatických lézií a CEA-negatívnych nonperitoneal metastatických tkanív 7 peritoneálnej metastázy pacienti, a CEA-negatívne normálne peritoneálnej tkaniva 24 pacientov nonperitoneal metastáz. výsledky ukázali, že žiadna štatistické odchýlky bola pozorovaná v rôznych rôznych tkanivách (tabuľka 2) .Table 2 UPA aktivitu v žalúdočnej rakovinové tkanive s alebo bez metastáz peritoneálnej
peritoneálnej metastázy (7 prípadov)
Nonperitoneal metastázy (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

19.936
16.536
3.914
4.510
5.635
0.846
3.091
1.942
5.407
4.151
1.417
8.725
3.117
4.702
0.899
2.352
16.170
2.142
10.046
2.419
2.820
4.799
1.302
3.730
2.828
2.123
3.310
5.299
7.287
1.233
6.066
6.533
7.922
6.485
8.150
7,802 4,466
3,468
Diskusia
Vzhľadom na nedostatok špecifických klinických prejavov v ranom štádiu metastáz peritoneálnej, optimálna možnosť liečby bola vždy chýbal u pacientov s karcinómom žalúdka. Výskyt ascitu, brušnej nádory a črevnej obštrukcie označuje pokročilom štádiu rakoviny žalúdka. Preto je efektívna diagnóza rakovinou žalúdka s peritoneálnej metastázy je stále výzvou klinikách. v súčasnosti je hlavnou diagnostická metóda pre rakovinou žalúdka s peritoneálnej metastázy zahŕňa peritoneálnej výplach a cytologický vyšetrovanie [18, 19]. Avšak, pozitívne výsledky len naznačujú subklinickou peritoneálnej metastázy, pretože peritoneálnou metastázy tiež nie je, ktoré sa objavili, aj keď sú prítomné v peritoneálnej kvapaline nádorové bunky. teda, detekcia v peritoneálnych tkanivách sa zdá byť priame a presné. je pozoruhodné, peritoneálnej tkaniva pokrývajú celé dutiny brušnej, pri implantácii nádorových buniek je náhodný, takže priama detekcia nádorových buniek do peritoneálnej tkanivách je veľmi ťažké. Molekulárna biológovia veria, že existujú určité molekulárne zmeny vo vlastnom nádorových buniek a ich postihnutého tkaniva, a tieto zmeny v tkanivách, sa môže začať predtým, ako je [9] kontaktné nádorové bunky. Na základe tejto koncepcie, sme skúmali molekulárne zmeny v peritoneálnych tkanivách preskúmať možnú diagnózu peritoneálnej metastáz.
CEA je spoločný tumor asociovaný antigén, a je prijatý na medzinárodnej úrovni ako gastroenteric nádorový marker [20, 21]. Z tohto dôvodu sme zistili expresiu CEA v peritoneálnej tkanív. Pozitívne výsledky CEA-expresie ukazujú, že nádorové bunky sú prítomné v peritoneálnych tkanivách. Ako sa dalo očakávať, naše výsledky ukazujú, že CEA bola vyjadrená vo všetkých peritoneálnej metastatických lézií u siedmich pacientov peritoneálnych metastáz. Je zaujímavé, že tam boli traja pacienti s peritoneálnej metastázy, u ktorých CEA sa pozitívne vyjadrené v nonperitoneal metastatických tkanív a dvoch pacientov s metastázami nonperitoneal, ktorí mali pozitívny CEA expresie v normálnych peritoneálnych tkanivách. To naznačuje, že títo pacienti mali možnosť vzniku metastáz peritoneálnej
Ako to zahŕňa významné proteolytické enzýmy, systém UPA v nádorových bunkách bola preukázaná interakcia s extracelulárnej matrix, s cieľom uľahčiť tvorbu mikroprostredie metastáz .; To znamená, že systém UPA môže byť zapojený do procesu peritoneálnej metastáz [22]. sa nachádza expresia systému UPA byť zvýšená v implantovaných nádorov a hostiteľskými tkanivami [23, 24]. Systém sa skladá z UPA serínovej proteázy ÚPA, receptor GLYKOLIPIDY ukotvené, upÃr a inhibítor serpinů, PAI-1, [25]. Preto sme sa zamerali na skúmať komplexne zmeny v týchto troch faktorov v peritoneálnej tkanív s alebo bez metastáz
Systém UPA je široko distribuovaný v rôznych bunkách .; Naše RT-PCR ukázala, že UPA, upÃr a PAI-1 by mohol byť dokonca exprimovaný v bunkách mezotelu. Aby sa zabránilo nešpecifickej výsledky, ďalšie kvantitatívne ELISA bola použitá pre detekciu expresie proteínov systému UPa. Zistili sme, že UPA, upÃr a PAI-1, s obsahom proteínov boli významne vyššie u CEA-pozitívne zmeny alebo CEA-negatívne peritoneálnej tkaniva pacientov s peritoneálnej metastáz v porovnaní s normálnymi tkanivami pacientov peritoneálnej nonperitoneal metastáz (P
menšie ako 0,05) , A to najmä, môže byť väčší, klinický význam v systéme zvýšeným obsahom bielkovín UPA v CEA-negatívne peritoneálnej tkanivami pacientov peritoneálnych metastáz. Toto zistenie vyplynulo, že tieto CEA-negatívne peritoneálnej tkaniva môže byť v stave subklinické peritoneálnej metastázy a progresie tohto ochorenia môže viesť k peritoneálnej metastáz. Aj keď UPA systémové zmeny v peritoneálnych tkanivách doteraz jednoznačne preukázané, v nádorových bunkách, zmeny v peritoneálnych tkanivách aspoň poskytuje referenčnú hodnotu pre diagnostiku peritoneálnej metastáz [26]. Heiss et al
. [27] zistili, že Upar by mohla byť považovaná za závislú index pre predikciu rakoviny žalúdka micrometastasis kostnej drene v porovnaní s cytokeratin (CK18). V tejto štúdii, obsah Upar proteín bol tiež v CEA-negatívne peritoneálnej tkanivami pacientov s peritoneálnej metastáz výrazne vyššie, než v CEA-negatívne peritoneálnej tkanivami pacientov nonperitoneal metastáz (P
menšie ako 0,05). Stručne povedané, vyplýva, že zvýšená upÃr a PAI-1 výrazy v peritoneálnej tkanivami pacientov nonperitoneal metastáz môže byť považovaný za referenčný indikátor pre peritoneálnej metastázy.
Podľa testu aktivity UPA v žalúdočnej rakovinové tkanive a ich extracelulárnej matrix, okúsi et al
. [28] Správa, že vyššia aktivita UPA je významne spojená s nádormi s peritoneálnych metastáz a nádory s hlbším inváziou do žalúdočnej steny. UPA produkovaný stromálne bunky môžu regulovať rakovinových buniek inváziu [29]. Avšak, naše výsledky ukázali, že neexistuje žiadny významný rozdiel v aktivite medzi UPA rôznych tkanivách. Toto môže byť pripísané k dynamickému aktivite Upa, ktorý sa zdá byť závislé na konkrétnych bunkových prostrediach a uvádza, že sa stretne s [30].
Závery
Naša štúdia ukazuje, že systém expresie UPA je výrazne vyššia v peritoneálnej tkanív peritoneálnych metastáz u pacientov okrem pacientov s nonperitoneal metastáz. Tento výraz rozdiel môže poskytnúť odkaz pre diagnostiku peritoneálnej metastázy. Avšak, stále ešte existujú určité obmedzenia v tejto štúdii. Počet prípadov zahrnutých v tejto štúdii bol pomerne malý, a to predovšetkým preto, že niekoľko pacientov s peritoneálnej metastázy boli prijaté v našej nemocnici v období od júla 2010 do decembra 2010. Snažili sme sa odstrániť vplyv tohto problému tým, že zahŕňa tkanív (vrátane omentum majus, pelveoperitoneum, a bránicový pobrušnice) v tejto štúdii. je stále potrebné ďalšie štúdie s vyšším počtom subjektov získať jasnejší a presvedčivé výsledky
Skratky
CEA :.
Karcinoembryonální antigén
DMEM:
Dulbecco modifikovanom Eaglovho média
ELISA:
Enzyme-linked ImmunoSorbent assay
GAPDH:
glyceraldehyd-3-fosfát dehydrogenáza
PCR:
polymerázovej reťazovej reakcie
RT:
reverznej transkriptázy
RT-PCR:
Reverzný transkriptáza PCR
UPA:
Urokináza typu aktivátor
Upar:
Urokináza typu aktivátor receptoru
deklarácia
Poďakovanie
ďakujeme za nasledujúce jednotlivcov :. Xuehua Chen, ktorí sa podieľali na sekvenčného a pomáhal pri príprave rukopisu. Sme si tiež uvedomujú, Yuba Ji Yi Zhang a Bin LV, ktorí prispeli k tejto štúdii. "Originál predloženej súbory pre obrazy
Nižšie sú uvedené odkazy k autorom '
autori pôvodných predložených súbory pre obrazy. "Pôvodný súbor pre Obrázok 1 40001_2012_56_MOESM2_ESM.tif autorského 40001_2012_56_MOESM1_ESM.tif autorov pôvodného súboru na obrázku 2 protichodnými záujmami
autori vyhlasujú, že nemajú žiadne finančné či nefinančné súperiacich záujmov. Príspevky
autori '
YD a ZZ navrhol štúdium, a vykonal RT-PCR, ELISA a detekcia aktivity sa HZ a ZZhou. YD, MZ, a XW podieľal na sekvenčného a navrhol rukopis. ZZ pomohol vykonať štatistické analýzy. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• FOLFIRI ako druhá línia terapie u pacientov s karcinómom žalúdka docetaxelom vopred: historické kohorte
• Detekcia promótor hypermetylace z CPG ostrova e-cadherinu v žalúdku srdcovej adenokarcinóm