differentiell genuttryck i den murina gastric fundus saknar interstitiella celler i Cajal Bild Sammanfattning
Bakgrund sälja The muskelskikt mus gastric fundus har inga interstitiella celler av Cajal vid nivån för plexus myentericus och endast besitter intramuskulära interstitiella celler och denna vävnad inte genererar elektriska långsamma vågor. Frånvaron av intramuskulär interstitiella celler i W /W
V
mutanter ger en unik möjlighet att studera de molekylära förändringar som är förknippade med förlusten av dessa interkalerande celler.
Metod
genen uttrycksprofilen för den gastriska fundus av vildtyp och W /W
V
möss analyserades genom murin microarray analys visar totalt 8734 element. Frågas gener från microarray analys bekräftades genom semikvantitativ omvänd transkription-polymeraskedjereaktion.
Resultat
Tjugoen gener differentiellt uttryckt i vildtyp och W /W
V
möss. Elva transkript hade 2,0-2,5 gånger högre mRNA uttryck i W /W
V
gastric fundus jämfört med vild typ vävnader. Tio transkript hade 2,1-3,9 gånger lägre uttryck i W /W
V
mutanter i jämförelse med vildtyp djur. Ingen av dessa gener har någonsin varit inblandad i någon tarmrörlighet funktion.
Slutsatser
Dessa data visar att flera viktiga gener väsentligt har förändrats i den murina fundus W /W
V
mutanter som saknar intramuskulär interstitiella celler i Cajal och har minskat entermotorneurotransmission.
bakgrund
interstitiella celler i Cajal (ICC) är gastrointestinala (GI) pacemakerceller och mellanhänder i enter motor neurotransmission i mag-tarmkanalen [1, 2 ]. ICC Express KIT
/c-kit Mössor och beror på att signalera via genprodukten protein, KIT, en receptor tyrosinkinas som är avgörande för utveckling och underhåll av ICC fenotypen [3]. Mutationer i vita spotting
locus (dvs W /W
V
) resulterar i minskad KIT uttryck. Dessa muterade djur utvecklar några ICC i nivå med den myenteric plexus (IC-MY) i tunntarmen och de reducerade ICC nummer är associerat med en förlust av långsam våg aktivitet. Intramuskulär ICC (IC-IM) som ligger i magen, nedre matstrupen och pyloric sfinktrar är frånvarande i W /W
V
muterade djur [4]. Minskat antal ICC har också rapporterats i flera GI motilitetsstörningar, såsom kronisk intestinal pseudo-obstruktion [5, 6], infantil hypertrofisk pylorusstenos [7-9], Hirschsprungs sjukdom [10-12], långsam transit förstoppning och vissa former av gastropares [13, 14].
association mellan motilitetsstörningar och förlust av specifika populationer av ICC tyder på att en mer fullständig förståelse av den molekylära och cellbiologi av ICC nätverk inom mag-tarmkanalen kan bidra till att förstå etiologin av vissa GI motoriska patologier. Syftet med denna studie var att karakterisera genetiska sekvenser som uttrycks i ICC i magen som kan koda viktiga funktionella delar av GI pacemaker /motor neurotransmission systemet. Vi drivit hypotesen att sådana gener kan visa differentiellt uttryck i tunntarmen av vildtyp möss och W /W
V
möss [15, 16]. Vi tidigare identifierat femton kända och nya gener som var differentiellt uttryckta i de små inälvorna av vildtyp och W /W
V
möss, som utvecklar några IC-MY användning av en differentiell genexpression metod [17, 18].
i föreliggande studie har vi upp hypotesen att det också kan finnas differentiellt uttryck av gener i den gastriska fundus av W /W
V
möss, där IC-IM är förlorade. Vår genen microarray analys lyckats identifiera 21 gener som differentiellt uttryckta i fundus av W /W
V
möss. Det differentiella uttrycket av dessa möss bekräftades genom semi-kvantitativ omvänd transkription-polymeraskedjereaktion (RT-PCR).
Metoder
Djur och Vävnadsberedning
användning och behandling av försöksdjur har godkänts av riktlinjen reglerar djurförsök kommittén vid University of Yamanashi School of Medicine och vid University of Nevada School of Medicine. Sex vuxna handjur WBB6F1 - + /+ möss (vild typ) och åldersmatchade sex vuxna manliga WBB6F1-W /W
V
möss, som väger 20 till 30 g, köptes från Japan SLC Inc (Shizuoka , Japan). De bedövades med eter eller kol inandning koldioxid och avlivades genom halshuggning. För gen analyser, var magar avlägsnades från djuret och slemhinnan med den bifogade submucosa snabbt skarpa dissekeras från tunica muscularis
. Vävnaderna därefter fryses i flytande kväve (-196 ° C). Vävnaderna lagrades vid -80 ° C fram till isolering av RNA förformade [18].
RNA-framställning och Microarray Data Analysis
För gen microarray analys, poly (A) + RNA isolerades från varje prov vävnad genom TRIZOL ( Life Technologies, Inc., Gaithersburg, MD, USA) och Poly (A) + Isolation Kit från Total RNA (ISOGEN, Nippon Gene, Tokyo, Japan). 18 Före start microarray analys, differentiell genexpression av KIT
mellan mag fundic vävnader vildtyp möss och de W /W
V
muterade möss bekräftades genom semikvantitativ RT-PCR (Se avsnittet av semi-kvantitativ RT-PCR
) (Fig. 1A). Microarrays hybridiserades och skannas, och bildanalys utfördes såsom beskrivits tidigare [19, 20]. I korthet var förändringar i genuttryck utvärderades genom omvänd transkription av poly (A) + RNA i närvaro av Cy3 eller Cy5 fluorokromerna följt av hybridisering till mus GEM en microarray chips (Incyte Genomics, Inc., Porter Drive Palo Alto, Kalifornien, USA). Att bekräfta giltigheten av analysen, var de experiment utfördes i duplikat. De 8734 cDNA vi använde representerar 7854 unika gener /Unigene kluster: 3205 noter och 4649 är utan not sekvenser. Vi tilldelas en cut-off-värdet, med hjälp av en variansanalys, till microarray bild. Gener vars Cy3- och Cy5-signalnivåer var lägre än cut-off-värden uteslöts från ytterligare undersökning. Balanserad differentialuttryck bestämdes för kontroll vildtyp möss kontra W /W
V
muterade möss. Värden som var < -2,0 Eller > 2,0 i båda två oberoende experiment ansågs signifikanta och medelvärdena av den relativa fluorescensförhållandet för varje gen beräknades. Figur 1 A. Expression av KIT
gen med hjälp av semikvantitativ RT-PCR, i mag fundic vävnader från vild typ och W /W
V
muterade möss hölls under faste
förhållanden. GAPDH
nivåer mättes som en kontroll. B. representativ bild av DNA microarray-hybridisering. Förändringar i genuttryck som representeras av förhållandet mellan fluorescensintensiteten mättes med användning av Cy3 och Cy5 fluorokromer. Uttryck profiler utvärderades genom omvänd transkription av poly (A) + RNA från gastriska fundic muskler från vildtyp och W /W
V
möss i närvaro av Cy3 eller Cy5 fluorescerande märkningsfärgämnen, följt av hybridisering till mus-GEM 1 microarrays. Bilden som visas producerades genom att överlagra Cy5 fluorescens bilden (pseudo-färgad grön som representerar uttrycksnivån av RNA från tunica muscularis
W /W
V
fundus) och Cy3 fluorescens bilden (pseudo- färgad röd som representerar RNA uttryck från vildtyp vävnader). Arrayer motfärgades med DAPI (blå). C. Bekräftelse av tillförlitligheten hos de microarray data genom semikvantitativ RT-PCR. Representativa exempel på RT-PCR-analys, i fundic vävnader från sex vildtyp och sex W /W
V
muterade möss som hållits under utsvultna villkor. Expression av CPO
genen reducerades avsevärt i fundus av W /W
V
möss jämfört med åldersmatchade möss av vildtyp, under det att MCM7
genen visade en ökning av uttryck i W /W
V
möss. D. Relativ uttrycksnivå CPO
(CPO
/GAPDH
) och MCM7
(MCM7
/GAPDH
) i fundic vävnader från sex vildtyp och sex W /W
V
muterade möss. Data representerar medelvärdet (± SD) av sex olika RT-PCR-experiment med användning av sex vildtyp eller W
/W
V
fundus-RNA som templat.
Semi-kvantitativ RT-PCR
nivåerna av mRNA uttryck som minskade eller ökade med > 2,0-faldig eller större, bekräftades genom semikvantitativ RT-PCR från fundus av sex av varje vildtyp möss och W /W
V
möss. RT-PCR utfördes såsom beskrivits tidigare [18]. I korthet tillsattes 2 pg alikvoter av den totala RNA som behandlats med DNas I (Roche Diagnostics, Basel, Schweiz) från mössens fundic vävnader användes för att syntetisera enkelsträngs cDNA. Dessa cDNA användes som mallar för PCR i en anordning för cyklisk värmebehandling (PerkinElmer, Shelton, CT, USA), med användning av primrar som anges i tabell 1 eller KIT
(5'-ATG ACG TCA TGA AGA CTT GCT-3 'och 5' -CTA CCC TGG AAT AGG ATG CA-3 '), och GAPDH
specifika primeruppsättningar (5'-GACAACAGCCTCAAGATCATCA-3' och 5'-GGTCCACCACTGACACTGTG-3 '). Uttryck av GAPDH
tjänade som en intern kontroll. Primers härledda från olika exoner i samma gen, när motsvarande mus genomsekvensen var tillgänglig vid den tidpunkten. PCR-reaktionerna optimerades för antalet cykler för att säkerställa produktens intensitet inom det linjära fasen av amplification.Table 1 primeruppsättningar används för semikvantitativ RT-PCR.
Gennamn
Accession No.
Forward Primer
Reverse Primer
EST
AA185701
CGA AAG CCT TGA GGT TGA AG
TAG GAA AAC AGG CGT CAC TG
EST
AA166336
GAA GAA AAG GCT GCA GAT CG
CAA GAG GCA AAG AGC AAT CC
EST
AA021806
CAC GAA TTG CAG GAC TAC CT
ACC TGC ACT GTA GGC TGA GT
MCM7
Q61881
GCC CAC TGG ATT GTG AAG AT
AGG AGA CTG GTC CAC ACC AC
P160 ROCK2
U58513
AAG AAC CTG TCA AGC GTG GT
TCC AGG GTC ATC TGG AGT TC
EST
W18585
AGA CTT GGT GGC AGA GGA GA
GCA GCT CAT GAC AGA ACA CC
EST
AA403748
CCT AAA GCA ACC CAA CCT GA
TAG CCT TAT GGG ACC TGG TG
BST1 /BP3
Q64277
GAT TTC TTG AGC TGG TGT CG
AAA ACC CTC TCG TGG GAT AG
EST
AA024250
CAG ATA GAG CAA GGG ATG GA
CTG AGC CCA AAC CAG TAG AA
RBP2
Q08652
GAC GAA GGA CCA AAA TGG AA
CGG TGA AAT CCA GGT CGT AG
EST
W46016
AGC AAC AAC AGC TGG ACT TC
ACC TTC TGT TTG GTG CTG AG
BP1 /6C3
S30398
TAT CGG CCT CAT CTA ACC AG
ATC TTC AAG CAG CAC CTG AC
EST
AI552444
CAT GCG ATA CTG GAA CAT GA
TGA CTC CAA ATA GCC CTC AG
EST
AA108876
TGG AGC AAG AGA GGA AAG TG
CTA GAC CTG AGC TTG CCT TG
EST
AA049294
ACG TGG AGA AAG TTC TCG TG
GCA ATA GTG TCA CCG AAT CC
EST
AA254777
GCC CTG GAG TTG AGA CTG TA
TGA CAA GCT GCA CAG TAA CC
RHAMM
AF031932 GCA GAA GGA GGA GCA GAG TG
GCA GTG ACG TCC CTC AGA CT
EST
AA002293
AAG TCT TTG TGT GGG CTG AG
AGG AAG CTT CGT CTC TCC AT
EST
AI595081
CAC CAG GAT GTC TGC CTA CT
CCG AGA TCA TGT TCT TCA CC
CPO
D16333
GAA GAC CAA GAT GGA GCT GA
CAG AAA GAT TCC CAT GAA CG
EST
AA000304
TTC ATC TGC TGC TCC TTC TC
TTA TAG ACC TTC CCG CAC AG
Resultat
microarray analys och Semi -quantitative RT-PCR
att identifiera gener som kan selektivt associerade med IC-IM, jämförde vi genuttryck mönster i gastric fundic vävnader som härrör från vild typ och W /W
V
möss med användning av en gen microarray-metoden [19, 20]. Murin fundus utan epitelvävnader härledda från vildtyp och W /W
V
möss som upprätthålls under fastande
betingelser användes för att alstra poly (A) + mRNA för microarray analys genom att använda musen GEM en mikromatris . Resultaten av detta experiment, belysa gener som reproducerbart minskade eller ökade med > 2,0-faldig eller större, visas i tabell 2 och fig. 1B. Flera kända och nya gener var differentiellt uttryckta i fundus av W /W
V
möss (> 2,0 balanserat differentiellt uttryck). För att bekräfta det differentiella uttrycket profiler har vi granskat ytterligare uttrycksnivåer i mus fundic mRNA härlett från vilda typer och W /W
V
möss hölls under faste
villkor som mallar, med hjälp av semi-kvantitativ RT-PCR-analys (Representativa data visas i Fig. 1C, 1D. Alla primeruppsättningar används för bekräftelse noterades i tabell 1). Expression av tio generna minskat betydligt i den gastriska fundus W /W
V
möss jämfört med åldersmatchade vildtyp möss. Ytterligare elva gener visade en ökning i uttryck i fasta W /W
V
mice.Table 2 Analys av genuttryck i fundus av vild typ och W /W
V
möss
Gennamn
W /W
V
/vildtyp förhållande (a)
åtkomstnummer
Subcellulär läge (b)
Cytoband (c)
EST
2,5
AA185701
EST
2,5
AA166336
EST
2,4
AA021806
MCM7
: DNA Replication Licensing Factor
2,4
Q61881
kärna
7q21.3-q22.1
P160 ROCK2
: Rho-associerat protein kinas
2,3
U58513
cytoskelettet
2p24
EST
2,3
W18585
EST
2,3
AA403748
BST1 /BP3 Blogg: ADP-ribosyl cyklas två prekursor
2,0
Q64277
membran
4p15
EST
2,0
AA024250
RBP2
: retinol-bindande protein 2, cellulär
2,0
Q08652
cytoplasman
3q23
EST
2,0
W46016
BP1 /6C3
: glutamyl Aminopeptitase
- 2,1
S30398
membran
16
EST
-2,2
AI552444
EST
-2,3
AA108876
EST
-2,4
AA049294
EST
-2,4
AA254777
RHAMM
: Hyaluronan-medierad Motility Receptor
-2,5
AF031932
membran
5q33.2-qter
EST
-2,5
AA002293
EST
-3,4
AI595081
CPO
: Coproporphyrinogen Oxidas
-3,6
D16333
mitokondrier
3q12
EST
-3,9
AA000304
(a) Balanced differentiellt uttryck för kontroll vildtyp möss vs W /W
V
muterade möss. Värden som minskade eller ökade med > 2-faldig eller större i båda två oberoende experiment ansågs signifikanta och medelvärdena beräknades. Samtliga resultat bekräftades med semikvantitativ RT-PCR med användning av fundic vävnader från sex vildtyp och sex W /W
V
muterade möss. (B) Subcellulär läge bestäms av källprogrammet http:. //Källa Stanford edu.. (C) Human kromosomal lokalisering av genen.
Diskussion Review, en jämförelse av differentiellt uttryckta gener från fundus av W /W
V
möss med användning DNA microarray analys avslöjade att uttrycket av elva gener transkript var betydligt uppreglerat i W /W
V
möss, medan tio gener transkript dramatiskt undertryckt i dessa djur. Vi bekräftade dessa resultat med semikvantitativ RT-PCR av vävnader från sex vardera av vildtyp och W /W
V
möss. Data erhållna från dessa experiment tyder på att expression av generna var specifikt regleras i W /W
V
möss.
De elva gener som var uppreglerade i den gastriska fundus av W /W
V
möss identifierades som MCM7
, P160 ROCK2
, BST1 /BP3
, RBP2
, och ytterligare sju utan not transkript. MCM7 är en däggdjurs homolog av jästen nukleärt protein MCM2 /CDC47, som tros spela en viktig roll vid två avgörande steg av cellcykeln, det vill säga, uppkomsten av DNA-replikation och celldelning [21, 22]. P160 ROCK2, som är ett isozym av Rock1 är ett mål för den lilla GTPas, Rho [23]. ROCK2 är en serin /treonin-kinas som reglerar cytokines, glatt muskulatur kontraktion, bildandet av aktin spänningsfibrer och fokala sammanväxningar och aktiveringen av FOS serumresponselement [24]. Den uppreglering av P160 ROCK2 kan ha en kompenserande effekt för förlusten av ICC-beroende mekanismer i mag fundus. Den BST1 /BP3, en benmärgs stromal cellyteantigen, är en variabelt glykosylerat glykosyl-fosfatidylinositol (GPI)-kopplad molekyl som selektivt uttrycks av tidig B- och T-härstamningsceller och en diskret subpopulation av retikulära celler i de perifera lymfoida organ. Det uttrycks också på borsten gränsen till intestinala epitelceller, den luminala ytan av njur samla tubuli och mogna myeloidceller [25]. Detta protein är tänkt att tillhöra ADP-ribosyl cyklas familjen [26]. Cellular RBP2 är en riklig 134 rester protein närvarande i tunntarmens epitel [27]. Det är tänkt att delta i upptaget och /eller intracellulär metabolismen av vitamin A och tillhör en proteinfamilj som innehåller leverfettsyrabindande protein. Vitamin A är en fettlöslig vitamin som är nödvändiga för tillväxt, reproduktion, differentiering av epitelvävnader, och vision. Däggdjur beroende av intestinal absorption av detta vitamin för sin överlevnad. RBP2, som begränsas i hög grad till den lilla tarm enterocyter, spelar troligen en viktig roll i den intestinala absorptionen och /eller metabolism av vitamin A [27].
Vi bekräftade också nedreglering av tio gener i W /W
V
möss: BP1 /6C3
, RHAMM
, CPO
, och ytterligare sju utan not EST. Den murina β-lymfocyter differentieringsantigen, BP1 /6C3 karakteriserades som glutamyl aminopeptidas, som rapporteras att fungera som celldifferentiering markör för lymphomyelocytic härstamningar och kan vara involverad i cellaktivering, signaltransduktion, och cellmatris vidhäftning. Det är också uttrycks av kapillära endotelceller, placenta, och epitelceller i tarmen och proximala njurtubuli [28]. RHAMM
kodar en hyaluronan receptor protein [29]. När hyaluronan binder till RHAMM, fosforyleringen av ett antal proteiner inklusive fokaladhesion kinas pp125-FAK uppträder [30]. Detta är ett nödvändigt steg för demontering av bränn kontakter och efterföljande rörlighet. CPO är den sjätte enzymet i heme-biosyntesvägen. Detta lösligt protein är lokaliserat i intermembrane loppet av mitokondrier och katalyserar omvandlingen av två propionat grupper vid positionerna två och fyra av coproporphyrinogen III till två vinylgrupper protoporfyrinogen IX [31]. Det rapporterades att koproporfyri (CPO brist) patienter visade förstoppning och onormala kolik som är viktigaste symptomen på denna sjukdom [32]. Markant förhöjning av koproporfyri i avföring differentierade tillståndet från det svenska typ i vilken avförings porfyriner är vanligen normala och från porfyria variegata, i vilken både koproporfyrin och protoporfyrinogen fraktionerna ökas i avföringen [33].
Under de 21 gener identifierade, bestämde vi humant kromosomalt kartläggning av de 7 kända gener genom att använda källprogrammet http subcellulära lokalisering och.. //källa Stanford edu (tabell 2). Dessa gener visade en mängd cellulär lokalisering, inklusive tre membran, två cytoplasma, en mitokondriell och 1 nukleära proteiner. Ytterligare analyser av dessa gener kan göra det möjligt för oss att belysa inte bara deras relation med KIT, en receptor tyrosinkinas, men även de molekylära aspekterna av GI pacemakersystem.
Vi har tidigare identifierat femton gener som differentiellt uttryckta i tunntarmen av vild typ och W /W
V
möss som utvecklar några IC-MY med hjälp av en differentiell genuttryck metod [17, 18]. ™ @ ingen av dessa 15 gener finns i listan över 21 gener som var differentiellt uttryckta i den gastriska fundus av vildtyp och W /W
V
möss, vilka utvecklar några IC-IM med användning av en cDNA-mikromatris. Som vi bekräftat differentiell genexpression av KIT
mellan tunntarmen /gastriska fundic vävnader hos vildtyp och de av W /W
V
mutanta möss genom semikvantitativ RT-PCR, vår experiment systemet kan detektera genetisk avvikelse i W /W
V
möss. Därför våra resultat kan återspegla skillnaden mellan den cellulära enheten av två typer av ICC, IC-MIN och IC-IM, eller skillnaden mellan den cellulära sammansättningen mellan tunntarmen och fundus. Att tillhandahålla avgörande bevis, som stöder dessa spekulationer, expressionsprofil med användning av renat mRNA från isolerade enstaka interstitiella celler kan vara mycket användbar i nästa studie.
För närvarande vet vi inte om dessa gener är viktiga för funktionen av gastric pacemaker /neurotransmission apparat eller var ned- eller upp-regleras som en följd av förlust av ICC. Dessa data ger dock klara system genetiska bevis på att flera viktiga proteiner som har roller i cellcykeln, cytokines och bildandet av cytoskelettet, cellulär metabolism, syremetabolism, cellvidhäftning, och utveckling och differentiering av tarmceller ändrats betydligt gastric fundus W /W
V
möss. Generering av transgena djur som visar vävnadsspecifikt överexpression av kandidatgener, såväl som de gen knockoutdjur kan vara till hjälp för att klargöra rollen för varje gen i gastrointestinal motilitet.
Upptäckten av ett helt humana och mus-gener genom genomprojektet är tänkt att revolutionera biologisk medicin inklusive molekylär diagnos av olika sjukdomar och utveckling av nya behandlings. Informationen i kombination med hög genomströmning teknik såsom DNA microarray och SNP-typning analys kommer att påskynda upptäckten av gener som är mottagliga för eller orsakar olika sjukdomar och bidra till screening av nya läkemedel som riktar dessa sjukdoms genprodukter. I denna mening, att insatser för molekylär profilering projekt där vi försöker upptäcka genetisk avvikelse i djursjukdomsmodeller såsom W /W
V
möss kommer att generera mycket varierande resurser för ytterligare klarläggande av motilitetsstörningar . Som minskat antal ICC har också rapporterats i flera GI motilitetsstörningar, såsom kronisk intestinal pseudo-obstruktion [5, 6], långsam transit förstoppning och vissa former av gastropares [13, 14], bör dessa gen informationen underlätta utvecklingen av nya molekylära inriktade terapier för dessa sjukdomar, och kan också identifiera diagnostiska molekylära markörer för dessa sjukdomar.
Slutsats
Vi har identifierat tjugoen gener som kodar för funktionella proteiner som är signifikant upp- eller nedreglerade i tunica muscularis
av mag fundus av W /W
V
möss. Med tanke på att ingen av dessa gener har varit inblandad i någon aspekt av Motilitetstimulerande, föreslår vi att många okända gener kan vara involverade i de cellförändringar som leder till motilitetsstörningar i samband med förlusten av ICC. Gene microarray analys är en effektiv metod för screening av de förändringar som sker i uttrycksmönstren av gener som svar på spontana eller genetiska mutationer som leder till förlust av en specifik celltyp. Tillämpningen av denna teknik kan tillåta igenkänning av mönster av genuttryck som är gemensamma för flera motilitetsstörningar där ICC går förlorade, vilket ger nya insikter i de molekylära mekanismer som ansvarar för den selektiva förlusten av ICC populationer.
Notes
Yataro Daigo, Ichiro Takayama bidragit lika för detta arbete
Lista över förkortningar
BP1 /6C3.
glutamyl aminopeptidas
BST1 /BP3:
benmärg stromal antigen en (alias ADP-ribosylcyclase två föregångare)
CPO:
coproporphyrinogen oxidas
DMP:
djup muskel plexus
EST:
expressed sequence tag
FISK:
fluorescens in situ hybridisering
GI:
gastrointestinal
ICC:
interstitiella celler i Cajal
IC- DMP:
ICC på nivån för den djupa muskel plexus
IC-IM:
intramuskulär ICC
IC-MY
ICC i nivå med den myenteric plexus
MCM7:
minikromosom underhåll 7
MY:
myenteric plexus
P160 ROCK2
P160 Rho-associerat, lindad spole bildar proteinkinas 2
RBP2:
retinol bindande protein 2, cellulär
RHAMM
hyaluronan-medierad motilitet receptor
RT-PCR:
omvänd transkription-polymeraskedja reaktion
SNP:
single nucleotide polymorphism
förklaringar
Tack
stöds av 08457165 (MF) från det japanska ministeriet för utbildning, vetenskap, idrott och kultur, JAPAN och DK 57.236 (till SW) och PO1 DK41315 (till SW och KS) från National Institutes of Health, USA.
Authors 'ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan är länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 12876_2002_51_MOESM1_ESM.ppt Författaroriginalfilen för figur 1 konkurrerande intressen
Inga uppgivna.