Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock vun der murine gastric fundus interstitial Zellen vun Cajal subtil

Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock vun der murine gastric fundus interstitial Zellen vun Cajal VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung D'Fleesch Schichten vun murine gastric fundus suivéiert hunn keen interstitial Zellen vun Cajal um Niveau vun der myenteric plexus a Besëtz nëmmen intramuscular interstitial Zellen an dësem Otemschwieregkeeten heescht generéieren net elektresch luesen Wellen. D'Feele vun intramuscular interstitial Zellen an W /W VerfÜgung V VerfÜgung mutants stellt eng eemoleg Geleeënheet fir d'molekulare Ännerungen ze studéieren, datt mat de Verloscht vun dësen intercalating Zellen verbonne sinn. VerfÜgung Language VerfÜgung der Gentherapie Ausdrock Profil vun der gastric fundus vun wëll Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais vun murine microarray Analyse assayed war en total vun 8734 Elementer ginn. Queried Genen vun der microarray Analyse sech duerch semi-grouss ëmgedréint Transkriptiouns-polymerase Kette Reaktioun confirméiert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Twenty-eent Genen huet an Wëllschwäin Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung differentially ausgedréckt Mais. Eelef gët haten 2.0-2.5 fantastesch héich mRNA Ausdrock an W /W VerfÜgung V VerfÜgung gastric fundus wann Verglach zu wëll Typ Stoffer. Zéng gët haten 2.1-3.9 fantastesch ënneschten Ausdrock an W /W VerfÜgung V VerfÜgung mutants am Verglach mat Wëld Zort Déieren. Keen vun dësen Genen hun schons an all bowel motility Funktioun agebonne ginn. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Dës Donnéeë liwwert Beweiser, datt e puer wichteg Genen hunn an der murine fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung vill geännert gastrointestinal (gi) pacemaker Zellen an Zwëscheprodukter enteric Motor neurotransmission am gi TRACT mutants datt intramuscular interstitial Zellen vun Cajal opgepasst an hunn enteric Motor neurotransmission reduzéiert. interstitial Zellen vun Cajal (Sanktioune)
Background sinn [1, 2 ]. Sanktioune auszedrécken KIT VerfÜgung /c-Kit VerfÜgung an hänken iwwer der Gentherapie Produit FAQ, KIT, engem receptor tyrosine kinase op sécher wat fir Entwécklung an Ënnerhalt vun de Sanktioune phenotype essentiel ass [3]. Projet'en am white-Erdlach VerfÜgung nët (i.e. W /W VerfÜgung V VerfÜgung) Resultat vun reduzéiert KIT Ausdrock. Dës Mann- Déieren entwéckelen puer Sanktioune um Niveau vun der myenteric plexus (IC-MENG) an de klenge Daarm an der reduzéiert Sanktioune Zuelen ass mat enger Perte vu luesen Schwéngung Aktivitéit verbonnen. Intramuscular Sanktioune (IC-IM) an de Mo läit, déif esophageal an pyloric sphincters veréiert ginn an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Déieren [4]. Reduzéiert Zuel vun Sanktioune hunn och zu e puer gi motility Onuerdnung, wéi chronesch intestinal pseudo-dogéint [5, 6], · D hypertrophic pyloric stenosis [7-9], Hirschsprung d'Krankheet [10-12], luesen-oennert Majo gemellt ginn an verschidde Forme vun gastroparesis [13, 14]. d'Associatioun tëscht motility Entwécklungsstéierungen an Verloscht vun spezifesch Populatiounen vun Sanktioune VerfÜgung hindeit, datt e méi komplett Versteesdemech vun der molekulare an Zell Biologie vun Sanktioune Netzwierker am gastrointestinal TRACT zu Versteesdemech der etiology hëllefen kann vun e puer gi Motor pathologies. D'Zil vun dëser Etude war bis genetesch Message Markenzeeche datt zu Sanktioune vun der Mo. ausgedréckt ginn, datt wichteg funktionell Elementer vum gi pacemaker /Motor neurotransmission System gerannt kann. Mir weiderverfollegt der Hypothes, datt esou Genen Ënnerscheed Ausdrock vun de klenge intestines vun wëll Typ Mais an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais [15, 16] weisen kéint. Mir identifizéiert virdrun fofzéng bekannt an Roman Genen datt differentially am klenge intestines vun wëll Typ ausgedréckt huet an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais, déi puer entwéckelen IC-MENG engem Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock Method benotzt [17, 18]. VerfÜgung am Moment studéieren mir Hypothes, datt et och Ënnerscheed Ausdrock vun Genen vun der gastric fundus vun W /W kann VerfÜgung V VerfÜgung Mais, wou IC-IM gi verluer. Eis Gentherapie microarray Analyse erfollegräich 21 Genen identifizéiert datt differentially an der fundus vun W /W ausgedréckt huet VerfÜgung V VerfÜgung Mais. Den Ënnerscheed Ausdrock vun deene Mais war vun semi-grouss ëmgedréint Transkriptiouns-polymerase Kette Reaktioun (RT-Hinnen alleguer) confirméiert. VerfÜgung Method VerfÜgung Déieren a Ray Virbereedunge VerfÜgung d'Benotzung an Behandlung vun experminteller Déieren déi Linne ofgeseent gouf Déieren fonnt Comité letzebuergescht op der Universitéit vun Yamanashi School vun Medezin an op der Universitéit vun Nevada School vun Medezin. Sechs volljäreg männlech WBB6F1 - + /+ Mais (Wëllschwäin Zort) an Alter reagéiert sechs volljäreg männlech WBB6F1-W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais, Persoun vu 20 bis 30 g, sech aus Japan SLC INC kaaft (Shizuoka , Japan). Si huet sech mat ETHER oder Kuelendioxid inhalation Nodeel a vun cervical dislocation geaffert. Fir Gentherapie gebueden, sech Mamm aus dem Déier an der mucosa mat der verbonnen submucosa séier spatz aus der tunica muscularis VerfÜgung Leschten geläscht. Stoffer sech dono zu flëssegem Stéckstoff gefruer (-196 ° C). Stoffer op -80 ° C gespäichert sech bis Isolatioun vun RNS preformed war [18]. VerfÜgung RNS Virbereedunge an Microarray analyteschen VerfÜgung Fir Gentherapie microarray Analyse, puer dovun (A) + RNS aus all Otemschwieregkeeten Prouf vun TRIZOL isoléiert war ( Life Technologies, Inc., Gaithersburg, MD, USA) a puer dovun (a) + Isolatioun Kit vum Total RNS (ISOGEN, Nippon Gene, Tokyo, Japan). 18 ier ab microarray Analyse, Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock vun KIT
tëscht der gastric fundic Stoffer vun wëll Typ Mais an déi vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais vun semi-grouss RT-Hinnen alleguer (Kuck der Rubrik vun semi-grouss RT-Hinnen alleguer bestätegt goufen
) (Figebam. 1A). Microarrays sech hybridized an gescannt, an Bild Analyse Leeschtung war wéi virdru beschriwwen [19, 20]. An dowéinst, sech hire Restaurant op der Gentherapie Ausdrock vun ëmgedréint Transkriptiouns vun puer dovun (A) bewäert + RNAs an der Präsenz vun Cy3 oder Cy5 fluorochromes vun hybridization zu Maus Bijou 1 microarray Fritten (Incyte Genomics Galaxy, Porter Drive gekësst Alto, CA gefollegt, USA). Fir d 'Validitéit vun der assay confirméieren, goufen d'Experimenter am zweete gesuergt. D'8734 cDNAs mir benotzt vertrieden 7854 eenzegaarteg Genen /UniGene Stärekéip: 3205 si forcéiert an 4649 sinn unannotated Message. Mir unerkannten e präventive Wäert, e Varianz Analyse benotzt, fir d 'microarray Rutsch. Genen hir Cy3- an Cy5-Signal intensities waren manner wéi de präventive Wäerter sech aus weider Enquête ausgeschloss. Equilibréiert Ënnerscheed Ausdrock war fir Kontroll Wëllschwäin Typ Mais alles versus W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais. Wäerter, déi sech &Si besteet; -2,0 Oder > 2.0 zu zwee an zwee onofhängeg Experiment berechent fir all Gentherapie sech däitlech an der heeschen Wäerter vun der famill fluorescence Verhältnis considéréiert. Figur 1 A. Expression vum KIT VerfÜgung Gentherapie mat semi-grouss RT-Hinnen alleguer, an gastric fundic Stoffer aus Wëllschwäin Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais ënner VerfÜgung Konditiounen fasted haten. GAPDH VerfÜgung Niveauen sech als eng Kontroll gemooss. B. Vertriederin Bild vun DNA microarray hybridization. Hire Restaurant op der Gentherapie Ausdrock, datt duerch d'Verhältnis vun Intensitéit vun fluorescence gemooss mat Cy3 an Cy5 fluorochromes vertruede waren. Ausdrock Profiller ware vun ëmgedréint Transkriptiouns vun puer dovun (A) + RNAs aus gastric fundic Muskelen aus Wëllschwäin Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais an der Präsenz vun Cy3 oder Cy5 unisse Etikette Hoer duerno hybridization zu Maus Bijou bewäert 1 microarrays. D'Bild gewisen gouf produzéiert vun der Cy5 fluorescence Bild (pseudo-faarweg gréng datt Ausdrock Niveau vun RNS vum tunica muscularis VerfÜgung vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung fundus duerstellt) superimposing an der Cy3 fluorescence Bild (pseudo- faarweg rout datt RNS Ausdrock vu Wëllschwäin Typ Stoffer duerstellt). Flamenden Ofgrond sech mat DAPI (blo) counterstained. C. Confirmatioun vun der Zouverlässegkeet vun der microarray Donnéeën vun semi-grouss RT-Hinnen alleguer. Vertrieder Beispiller vun RT-Hinnen alleguer Analyse, an fundic Stoffer aus sechs wëll Aart a sechs W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais ënner gehongert Konditiounen haten. Ausdrock vun der CPO VerfÜgung Gentherapie war an der fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais am Verglach zu Alter reagéiert wëll Typ Mais däitlech reduzéiert, wobäi d'MCM7 VerfÜgung Gentherapie eng Erhéijung vun Ausdrock an W /W zougedréckt VerfÜgung V VerfÜgung Mais. D. rel Ausdrock Niveau vun CPO VerfÜgung (CPO VerfÜgung /GAPDH VerfÜgung) an MCM7 VerfÜgung (MCM7 VerfÜgung /GAPDH VerfÜgung) zu fundic Stoffer aus sechs wëll Aart a sechs W /W
V VerfÜgung Mann- Mais. D'Daten déi mengen (± Fils) vu sechs verschiddene RT-Hinnen alleguer Experimenter benotzt sechs wëll Typ oder W VerfÜgung /W VerfÜgung V VerfÜgung fundus RNS als Skeletter. VerfÜgung Semi-grouss RT-Hinnen alleguer
D'Niveaue vun mRNA Ausdrock, datt duerch > ofgeholl oder eropzesetzen; 2.0-fantastesch oder besser, sech duerch semi-grouss RT-Hinnen alleguer aus fundus vun 6 vun all Wildwest Typ Mais an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais confirméiert. RT-Hinnen alleguer war virdrun ëmschriwwen standing [18]. An dowéinst, 2 μg aliquots vun insgesamt RNAs mat DNase ech (Roche kinnt, Basel, Schwäiz) behandelt aus der Mais fundic Stoffer sech benotzt Single-staarkt cDNAs zu synthesize. Dës cDNAs sech als Schabloune fir Hinnen alleguer an engem thermesch LS benotzt (PerkinElmer, Shelton, CT, USA), primers zu Table 1 oder KIT VerfÜgung opgezielt benotzt (5'-ATG ACG TCA Name Agées CTT GCT-3 "a 5 ' -CTA CCC TGG AAT AGG ATG CA-3 "), an GAPDH VerfÜgung spezifesch primer baut (5'-GACAACAGCCTCAAGATCATCA-3 'an 5'-GGTCCACCACTGACACTGTG-3"). Ausdrock vun GAPDH VerfÜgung als eng intern Kontroll. Primers sech aus verschiddene exons an der selwechter Gentherapie ofgeleet, wou déi entspriechend Maus Frankräich Haaptrei deemols sinn war. D'Hinnen alleguer Reaktioune waren fir Zuel vu Monaco optimiséiert zu Produit Intensitéit am linear Phase vun amplification.Table 1 Primer baut benotzt fir semi-grouss RT-Hinnen alleguer. VerfÜgung Gene Numm séchergestallt
Zougank Nr
Stiermer Primer VerfÜgung Primer Réckproduktioun
EST VerfÜgung AA185701 VerfÜgung CGA AAG CCT Name GGT Name AG VerfÜgung Tag GAA AAC AGG CGT CAC TG VerfÜgung EST VerfÜgung AA166336 VerfÜgung GAA GAA AAG GCT GCA Gat CG VerfÜgung CAA Série GCA AAG AGC AAT CC VerfÜgung EST VerfÜgung AA021806 VerfÜgung CAC GAA TTG CAG GAC TAC CT VerfÜgung zu Enn TGC ACT GTA GGC Name GT VerfÜgung MCM7
Q61881 VerfÜgung GCC CAC TGG ATT GTG AAG OP VerfÜgung AGG Agées CTG GTC CAC zu Enn AC VerfÜgung p160 ROCK2
zu U58513 VerfÜgung AAG AAC CTG TCA AGC GTG GT VerfÜgung tcc AGG GTC ATC TGG Agt TC VerfÜgung EST VerfÜgung W18585 VerfÜgung Agées CTT GGT GGC Agées GGA GA VerfÜgung GCA GCT CAT GAC Agées ACA CC VerfÜgung EST VerfÜgung AA403748 VerfÜgung CCT AAA GCA zu Enn CAA CCT GA VerfÜgung Tag CCT Stoffel GGG zu Enn TGG TG VerfÜgung BST1 /BP3
Q64277 VerfÜgung Gat TTC TTG AGC TGG TGT CG VerfÜgung AAA zu Enn CTC TCG TGG Gat AG VerfÜgung EST VerfÜgung AA024250 VerfÜgung CAG ATA Série CAA GGG ATG GA VerfÜgung CTG AGC CCA AAC CAG Tag AA VerfÜgung RBP2 VerfÜgung
Q08652 VerfÜgung GAC GAA GGA CCA AAA TGG AA VerfÜgung CGG Name AAT CCA GGT CGT AG VerfÜgung EST VerfÜgung W46016 VerfÜgung AGC AAC AAC AGC TGG ACT TC VerfÜgung zu Enn TTC TGT TTG GTG CTG AG VerfÜgung BP1 /6C3
S30398 VerfÜgung Stoffel CGG CCT CAT cta zu Enn AG VerfÜgung ATC TTC AAG CAG CAC CTG AC VerfÜgung EST VerfÜgung AI552444 VerfÜgung CAT GCG ATA CTG GAA CAT GA VerfÜgung Name CTC CAA ATA GCC CTC AG VerfÜgung EST VerfÜgung AA108876 VerfÜgung TGG AGC AAG Agées GGA AAG TG VerfÜgung cta GAC ​​CTG AGC TTG CCT TG VerfÜgung EST VerfÜgung AA049294
ACG TGG Agées AAG TTC TCG TG VerfÜgung GCA ATA GTG TCA CCG AAT CC VerfÜgung EST VerfÜgung AA254777 VerfÜgung GCC CTG Série TTG Agées CTG TA VerfÜgung Name CAA GCT GCA CAG TAA CC VerfÜgung RHAMM
AF031932 GCA GAA GGA GGA GCA Série TG VerfÜgung GCA GTG ACG tcc CTC Agées CT VerfÜgung EST VerfÜgung AA002293 VerfÜgung AAG TCT TTG TGT GGG CTG AG VerfÜgung AGG AAG CTT CGT CTC tcc OP VerfÜgung EST VerfÜgung AI595081 VerfÜgung CAC CAG Gat GTC TGC cta CT VerfÜgung CCG Agées TCA TGT TCT TCA CC VerfÜgung CPO
D16333 VerfÜgung GAA GAC CAA Gat GGA GCT GA VerfÜgung CAG AAA Gat tcc CAT GAA CG VerfÜgung EST VerfÜgung AA000304 VerfÜgung TTC ATC TGC TGC tcc TTC TC VerfÜgung TTA Tag zu Enn TTC CCG CAC AG VerfÜgung Resultater VerfÜgung Microarray Analys an Semi -quantitative RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Genen ze identifizéieren déi selektiv mat IC-IM verbonne ginn, am Verglach mir Gentherapie Ausdrock Musteren an gastric fundic aus Wëllschwäin Typ ofgeleet Stoffer an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais schreiwen engem Gene microarray Method [19, 20]. Murine fundus ouni epithelial aus Wëllschwäin Typ ofgeleet Stoffer an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais ënner VerfÜgung Konditiounen fasted haten sech benotzt puer dovun ze generéieren (A) + mRNA fir microarray Analyse mat der Maus Bijou 1 microarray . Resultater vun dëser Erfarung, déi ervirhiewt Genen datt duerch > reproducibly ofgeholl oder eropzesetzen; 2.0-fantastesch oder grouss, sinn an Table 2 an Lalumi gewisen. 1B. E puer bekannt an Roman Genen huet an der fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais (> 2.0 equilibréiert Ënnerscheed Ausdrock) differentially ausgedréckt. Fir den Ënnerscheed Ausdrock Profiler confirméieren, iwwerpréift mir weider de Ausdrock Niveauen am murine fundic mRNA aus Wëllschwäin Zorte ofgeleet a W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais ënner VerfÜgung Konditiounen wéi Skeletter fasted haten, mat semi-grouss RT-Hinnen alleguer Analyse (sech Représentante Donnéeën dës Distanz an Figebam. 1c, 1D. All primer baut fir d'Bestätegung fir sech an Table 1 opgezielt). Ausdrock vun zéng Genen war an der gastric fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais am Verglach zu Alter reagéiert wëll Typ Mais däitlech reduzéiert. Aneren eelef Genen huet eng Erhéijung vun Ausdrock vun fasted W /W VerfÜgung V VerfÜgung mice.Table 2 Analys vun der Gentherapie Ausdrock vun der fundus vun wëll Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais
Gene Numm
W /W VerfÜgung V VerfÜgung /wildtype Verhältnis (e)
Zougank Nr
Subcellular Standuert (b)
Cytoband (c)
EST VerfÜgung 2,5 VerfÜgung AA185701 VerfÜgung EST VerfÜgung 2,5 VerfÜgung AA166336
EST VerfÜgung 2,4 VerfÜgung AA021806 VerfÜgung MCM7 VerfÜgung: Lizenzéiert Factor DNA Gedächtnis VerfÜgung 2,4 VerfÜgung Q61881 VerfÜgung Keimzell VerfÜgung 7q21.3-q22.1 VerfÜgung p160 ROCK2
: Rho-Associéierten Protein Kinase VerfÜgung 2,3 VerfÜgung U58513 VerfÜgung cytoskeleton VerfÜgung 2p24 VerfÜgung EST VerfÜgung 2,3 VerfÜgung W18585 VerfÜgung EST VerfÜgung 2,3 VerfÜgung AA403748
BST1 /BP3 VerfÜgung: Fliger näischt-Ribosyl Cyclase 2 Virleefer VerfÜgung 2.0 VerfÜgung Q64277 VerfÜgung Membran VerfÜgung 4p15 VerfÜgung EST VerfÜgung 2.0 VerfÜgung AA024250 VerfÜgung RBP2 VerfÜgung: retinol bindend FAQ 2, bewosst VerfÜgung 2.0 VerfÜgung Q08652 VerfÜgung Zytoplasma VerfÜgung 3q23 VerfÜgung EST VerfÜgung 2.0 VerfÜgung W46016 VerfÜgung BP1 /6C3 VerfÜgung: Glutamyl Aminopeptitase VerfÜgung - 2.1 VerfÜgung S30398
Membran 16 VerfÜgung EST VerfÜgung -2,2 VerfÜgung AI552444 VerfÜgung EST VerfÜgung -2,3 VerfÜgung AA108876 VerfÜgung EST VerfÜgung -2,4
AA049294 VerfÜgung EST VerfÜgung -2,4 VerfÜgung AA254777 VerfÜgung RHAMM VerfÜgung: Hyaluronan-Mediated Motility Receptor VerfÜgung -2,5 VerfÜgung AF031932 VerfÜgung Membran VerfÜgung 5q33.2-qter
EST VerfÜgung -2,5 VerfÜgung AA002293 VerfÜgung EST VerfÜgung -3,4 VerfÜgung AI595081 VerfÜgung CPO VerfÜgung: Coproporphyrinogen Oxidase VerfÜgung -3,6 VerfÜgung D16333 VerfÜgung Mitochondrie
3q12
-3,9 VerfÜgung AA000304 VerfÜgung (e) gutt Ënnerscheed Ausdrock fir Kontroll Wëllschwäin Typ Mais vs W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais. Wäerter, déi vun > ofgeholl oder eropzesetzen; 2-fantastesch oder méi zu zwee an zwee onofhängeg Experiment als bedeitend an der heeschen Wäerter waren berechent. All vun de Resultater ware mat semi-grouss RT-Hinnen alleguer mat fundic Stoffer aus sechs wëll Aart a sechs W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mann- Mais confirméiert. (B) Subcellular Lag vun der SOURCE Programm http alles:. //Quell Stanford Goalkeeper opgepasst hat.. (C) Mënscherechter chromosomal Lokalisatioun vun der Gentherapie. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung E Verglach vum differentially ausgedréckt Genen vun der fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais DNA microarray Analyse mat verroden, datt de Begrëff vun eelef Genen gët mein-reglementéiert an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais hierkommen ten Genen gët getuut zu dësen Déieren opgeléist goufen. Mir bestätegt dës Resultater mat semi-grouss RT-Hinnen alleguer vu Stoffer aus sechs all vun wëll Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais. Daten aus dëse Experimenter kritt hindeit datt Ausdrock vun de Genen speziell reegelen waren an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais. VerfÜgung Déi eelef Genen datt an der gastric fundus vun W /W an-regulariséiert goufen
V VerfÜgung Mais sech als MCM7 identifizéiert VerfÜgung, p160 ROCK2 VerfÜgung, BST1 /BP3 VerfÜgung, RBP2 VerfÜgung, an aner siwen unannotated gët. MCM7 ass eng mammalian homologue vun den Happ nuklear FAQ MCM2 /CDC47, déi geduecht ass eng wichteg Roll an zwee entscheedende Schrëtt vun der Zell Zyklus spillt, nämlech, gezu vun DNA Gedächtnis a Zell Divisioun [21, 22]. p160 ROCK2, déi eng isozyme vun ROCK1 ass ass en Zil fir déi kleng GTPase, Rho [23]. ROCK2 ass eng serine /threonine kinase datt cytokinesis, glat Muskel Kontraktioun, d'Équipe vun actin Stress Faseren an Brennwäit adhesions, an der Aktivatioun vun der Erhëtzung serum Äntwert Element reguléieren [24]. Déi weider-Regulatioun vun p160 ROCK2 vläicht e Inhaber Effekt fir de Verloscht vun Sanktioune-ofhängeg Mechanisme vun der gastric fundus hunn. D'BST1 /BP3, engem Réckemuerch hiirgestallt stromal Zell Uewerfläch antigen, ass e variably glycosylated glycosyl-phosphatidylinositol (GPI) -linked Protein dat selektiv vun fréi B an T antike Zellen an enger diskret subpopulation vun reticular Zellen am Randerscheinung lymphoid Organer ausgedréckt gëtt. Et ass och op der Biischt Grenz vun intestinal epithelial Zellen, d'luminal Uewerfläch vum keen Auto Sammelt tubules an eeler Servicer sinn Zellen ausgedréckt [25]. Dëst FAQ Gag'en Kréien-ribosyl cyclase Famill ze gehéieren [26]. Bewosst RBP2 ass eng räich 134-Ermächtegung FAQ präsent an de klenge intestinal epithelium [27]. Et ass geduecht an der Notzong an /oder intracellular ukuerbelt vun Vitamin A a gehéieren zu enger FAQ Famill matmaachen, datt Liewer fatty Seier-verbindlech FAQ enthält. Vitamin A ass eng Fett-soluble Vitamin néideg fir Wuesstem, Reproduktioun, dat vun epithelial Stoffer, an Visioun. Mamendéieren hänkt op intestinal Tellur vun dëser Vitamin fir hir Iwwerliewensfro. RBP2, déi haaptsächlech op der klenger intestinal enterocyte agespaart ass, wahrscheinlech spillt eng wichteg Roll an der intestinal Tellur an /oder ukuerbelt vun Vitamin A [27]. VerfÜgung Mir confirméiert och de verwandelt-Regulatioun vun zéng Genen an W /W
V VerfÜgung Mais: BP1 /6C3 VerfÜgung, RHAMM VerfÜgung, CPO VerfÜgung, an aner siwen unannotated ESTs. D'murine β-lymphocyte dat antigen, BP1 /6C3 war den glutamyl aminopeptidase charakteriséiert, déi als Zell-dat Bewaacher vun lymphomyelocytic lineages ze déngen gemellt ass a kann zu Zell Aktivéierung Signal transduction, an Zell-Matrixentgasung Haftung Équipe ginn. Et ass och duerch capillary endothelial Zellen, placenta, an epithelial Zellen vun den Daarm an proximal keen Auto tubules [28] ausgedréckt. RHAMM VerfÜgung encodes engem hyaluronan receptor FAQ [29]. Wann hyaluronan Photo'en ze RHAMM, déi phosphorylation vun enger Zuel vu Proteinen dorënner de Schwéierpunkt Haftung kinase pp125-FAK existeiert [30]. Dëst ass en noutwendege Schrëtt fir disassembly vun Brennwäit Kontakter a Kierzunge motility. CPO ass de sechsten Aktivitéit vun der heme biosynthetic Passerelle. Dëst soluble FAQ ass an der intermembrane Plaz vun Mitochondrie en der an catalyzes den Ëmbau vun zwee propionate Gruppe bei Positiounen zwee a véier vun coproporphyrinogen III zu zwee Vinyl Gruppe vun protoporphyrinogen IX [31]. Et gouf gemellt, datt coproporphyria (CPO hunn) Patienten Majo an Manque Linga zougedréckt datt Haaptgrond Symptomer vun dëser Krankheet ginn [32]. Markéiert Héicht vun coproporphyria an der feces ënnerscheet der Bedingung vun der schwedescher Typ vun deem Hocker porphyrins meeschtens normal sinn an aus variegate porphyria an dat souwuel coproporphyrin an protoporphyrinogen ufale gi vun der Hocker fräi [33]. VerfÜgung An der 21. Genen identifizéiert, mir alles der subcellular Lokalisatioun a mënschlech chromosomal androën vun der 7. bekannt Genen der SOURCE Programm http benotzt:.. //Quell Stanford hat (Table 2). Dës Genen huet eng Rei vu bewosst Lokalisatioun dorënner 3 Membran, 2 cytoplasmic, 1 Kënschtlech an 1 nuklear Proteinen. Weider Analysë vun dësen Genen kéinten eis erlaben net nëmme mat de KIT, engem receptor tyrosine kinase, mä och de molekulare Aspekter vun gi pacemaker System hir Relatioun ze entschlësselen. VerfÜgung Mir virdrun fofzéng Genen identifizéiert datt differentially am klenge intestines ausgedréckt huet vun Wëllschwäin Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais déi puer IC-MENG entwéckelen engem Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock Method benotzt [17, 18]. ™ @ Keen vun dësen 15 Genen huet zu der Lëscht vun 21 Genen fonnt datt sech differentially an der gastric fundus vun wëll Typ an W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais ausdrécke déi puer IC-IM mat engem cDNA microarray entwéckelen. Well mir Ënnerscheed Gentherapie Ausdrock vun KIT VerfÜgung tëscht de klenge intestines /gastric fundic Stoffer vun wëll Typ an déi vun W /W VerfÜgung bestätegt V VerfÜgung Mann- Mais vun semi-grouss RT-Hinnen alleguer, eis experimentell System kéint genetesch aberration an W /W entdecken VerfÜgung V VerfÜgung Mais. Dofir eis Resultater kéint d'Differenz vun der bewosst Entitéiten vun zwou Zorte vun ICCs, IC-MENG an IC-IM, oder d'Differenz vun de bewosst Zesummesetzung tëscht kleng Daarm an fundus spigelen. Fir déi mer eis Beweiser, déi dës Spekulatiounen, Ausdrock Profil benotzt Dir sidd mRNA aus isoléiert eenzel interstitial Zellen Ënnerstëtzung kéint ganz nëtzlech sinn an den nächsten studéieren. VerfÜgung Am Moment mir wëssen net, ob dës Genen op d'Funktioun vun der wichteg sinn gastric pacemaker /neurotransmission Staatsapparat oder sech down- oder als Resultat vun de Verloscht vun Sanktioune up-reegelen. Dës Donnéeën, allerdéngs, déi kloer systemesch genetesch Beweiser, datt e puer wichteg Proteinen déi Chargen zu Zell Zyklus, cytokinesis an Opstellung vun cytoskeleton, bewosst ukuerbelt, Sauerstoff ukuerbelt, Zell Haftung hunn, an Entwécklung an dat vun GUT Zellen sinn däitlech an der gastric fundus geännert vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais. Generatioun vun transgenic Déieren déi Otemschwieregkeeten-spezifesch overexpression vun de Kandidat Genen, souwéi der Gentherapie Knockout Déieren kéint hëllefräich sinn fir elucidating d'Roll vun all Gentherapie zu gastrointestinal motility weisen. VerfÜgung D'Entdeckung vun engem ganze Mënsch a Maus Genen duerch d' Nepgen Projet ass ugeholl biologescher Medezin dorënner molekulare Diagnos vun verschidde Krankheeten an Entwécklung vum Roman Behandlung ze wiesselen. D'Informatiounen kombinéiert mat héije duerch dat Technologie wéi DNA microarray an SNP ennerluecht Analyse gëtt Entdeckung vun Genen Rief oder dauernd verschidde Krankheete Boost an zu Duerchmusterung vum Roman Drogen bäidroen, datt dës Krankheet-Gentherapie Produiten viséieren. An dësem Sënn, an deem den Effort vun der molekulare profiling Projet mir Versuch genetesch aberration zu Modeller Déier Krankheet ze entdecken wéi W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais wäert ganz Variabel Ressourcen fir weider Opkläerungsaarbecht vun motility Entwécklungsstéierungen produzéiert . Als reduzéiert Zuel vun Sanktioune hunn och zu e puer gi motility Onuerdnung, wéi chronesch intestinal pseudo-dogéint gemellt ginn [5, 6], luesen-oennert Majo an verschidden Formen vun gastroparesis [13, 14], soll dës Gentherapie Informatiounen der Entwécklungshëllef vum Roman molekulare-geziilte Therapien fir dësen Onuerdnung, an och diagnostic molekulare lues fir dëse Krankheete identifizéiere kann. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Mir hunn zwanzeg-eent Genen identifizéiert datt funktionell Proteinen gerannt datt vill Bastelen oder erof-reglementéiert an d'sinn tunica muscularis VerfÜgung vun der gastric fundus vun W /W VerfÜgung V VerfÜgung Mais. Que dass keent vun dëse Genen huet an all Aspekt vun gi motility agebonne ginn, proposéiere mir, datt vill onbekannt Genen vun der bewosst Ännerungen Équipe kéint dat verbonne mat de Verloscht vun Sanktioune fir motility Entwécklungsstéierungen Féierung. Gene microarray Analyse ass eng efficace Method fir d'Ännerungen Duerchmusterung datt am Ausdrock Musteren vun Genen an Äntwert ze spontan oder genetesch kennen virkommen, datt op de Verloscht vun engem bestëmmten Typ Zell Féierung. Uwendung vun dëser Technik kann Unerkennung vun Musteren vun der Gentherapie Ausdrock erlaben, dass d'puer motility Entwécklungsstéierungen gemeinsam sinn an déi Sanktioune verluer ginn, also nei Abléck an der molekulare Mechanismen responsabel fir d'selektiv Verloscht vun Sanktioune Populatiounsschichte ëmzesetzen. VerfÜgung Notes VerfÜgung Yataro Daigo, Ichirō Takayama matgehollef gläich un dëser Aarbecht VerfÜgung Lëscht vun Ofkierzungen VerfÜgung BP1 /6C3:. VerfÜgung glutamyl aminopeptidase
BST1 /BP3:
Réckemuerch hiirgestallt stromal antigen 1 (alias Kréien-ribosylcyclase 2 Virleefer)
CPO: VerfÜgung coproporphyrinogen oxidase
DMP: VerfÜgung déif Hautfaarf plexus
ESTs: VerfÜgung ausgedréckt Haaptrei Tags
FISH: VerfÜgung fluorescence zu situ VerfÜgung hybridization VerfÜgung
gi: VerfÜgung gastrointestinal
Sanktioune: VerfÜgung interstitial Zellen vun Cajal
IC- DMP: VerfÜgung Sanktioune um Niveau vun der déif Hautfaarf plexus
IC-IM: VerfÜgung intramuscular Sanktioune
IC-MENG : VerfÜgung vun der myenteric plexus um Niveau Sanktioune
MCM7: VerfÜgung minichromosome Ënnerhalt 7
MENG: VerfÜgung myenteric plexus
p160 ROCK2: VerfÜgung p160 Rho-assoziéiert, coiled-coil administrativ FAQ kinase 2
RBP2: VerfÜgung retinol verbindlechen FAQ 2, bewosst
RHAMM: VerfÜgung hyaluronan-mediated motility receptor
RT-Hinnen alleguer: VerfÜgung Transkriptiouns-polymerase Kette ëmgekéierte Reaktioun
SNP: VerfÜgung Single Nukleotid polymorphism
Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Ënnerstëtzung vun 08457165 (bis MF) aus der japanescher Ministère vun Education, Science, Sport a Kultur, Japan an wees 57236 (fir stellare) an PO1 DK41315 (bis stellare an KS) aus der National Instituter vun Gesondheet, USA. VerfÜgung Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn drënner der Linken op der original deposéiert Fichieren fir Biller "Auteuren. 12876_2002_51_MOESM1_ESM.ppt Auteuren 'original Datei fir Figur 1 Interessen Wettsträit VerfÜgung Keen deklaréiert. VerfÜgung

• Regulatioun vun amylin Fräiloosse vu cultured Kanéngchen gastric fundic mucosal cells
• Duplikatioun Beruf vun pyloroduodenal Chirurgie: eng rare Ursaach vun neonatal gastric Outlet dogéint: e Fall report