Differential genuttrykk i murine mage fundus mangler interstitielle celler av Cajal

differensial genuttrykk i murine mage fundus mangler interstitielle celler av Cajal
Abstract
Bakgrunn Bedrifter Den muskellagene murine mage fundus har ingen interstitiell celler av Cajal ved nivået for den myenterisk plexus og bare eie intramuskulær interstitielle celler, og dette vevet ikke genererer elektriske langsomme bølger. Fraværet av intramuskulære interstitielle celler i W /W
V
mutanter gir en unik mulighet til å studere de molekylære endringer som er knyttet til tap av disse innføyings cellene.
Metode
genet uttrykk profilen av mage fundus av villtype og W /W
V
mus ble analysert ved murine microarray analyse viser totalt 8734 elementer. Spørres gener fra microarray analyse ble bekreftet av semi-kvantitativ revers transkripsjon-polymerase chain reaction.
Resultater
Tjueen gener ble uttrykt forskjellig i villtype og W /W
V
mus. Elleve transkripsjoner hadde 2,0-2,5 ganger høyere mRNA uttrykk i W /W
V
mage fundus sammenlignet med villtype vev. Ti transkripsjoner hadde 02.01 til 03.09 ganger lavere uttrykk i W /W
V
mutanter sammenlignet med villtype dyr. Ingen av disse genene har noen gang vært innblandet i noen tarm motilitet funksjon.
Konklusjoner
Disse dataene gir bevis for at flere viktige gener har vesentlig endret i det murine fundus av W /W
V
mutanter som mangler intramuskulære interstitielle celler av Cajal og har redusert ente motor neurotransmission.
bakgrunns
interstitiale celler av Cajal (ICC) er gastrointestinale (GI) pacemakerceller og mellommenn i ente motor neurotransmission i mage-tarmkanalen [1, 2 ]. ICC uttrykkelig KIT
/c-kit
og er avhengig av signalering via genprodukt protein, KIT, en reseptor tyrosin kinase som er essensielt for utvikling og vedlikehold av ICC fenotype [3]. Mutasjoner i den hvite-spotting
locus (dvs. W /W
V
) fører til redusert KIT uttrykk. Disse muterte dyr utvikle noen ICC ved nivået for den myenterisk plexus (IC-MY) i tynntarmen og de reduserte ICC-tallene er forbundet med et tap av langsom bølgeaktivitet. Intramuskulær ICC (IC-IM) som ligger i magen, nedre esophageal og pylorusstenose sphincters er fraværende i W /W
V
muterte dyr [4]. Redusert antall ICC har også blitt rapportert i flere GI motilitetsforstyrrelser, så som kronisk intestinal pseudoobstruksjon [5, 6], infantil hypertrofisk pylorusstenose [7-9], Hirschsprungs sykdom [10-12], sakte transitt forstoppelse og visse former for gastroparese [13, 14].
assosiasjon mellom motilitetsforstyrrelser og tap av spesifikke populasjoner av ICC tyder på at en mer fullstendig forståelse av den molekylære og cellebiologi av ICC nettverk inne i mage-tarmkanalen kan bidra til å forstå etiologien av noen GI motor patologi. Formålet med denne studien var å karakter genetiske sekvenser som er uttrykt i ICC av magen som kan kode for viktige funksjonelle elementer i GI-pacemaker /motor neurotransmisjon system. Vi fulgte hypotesen om at slike gener kan vise differensial uttrykk i tynntarmen av villtype mus og W /W
V
mus [15, 16]. Vi har tidligere identifisert femten kjente og nye gener som ble forskjellig uttrykt i tynntarmen av villtype og W /W
V
mus, som utvikler noen IC-MY bruker en differensial genuttrykk metoden [17, 18].
i denne studien vi en hypotese om at det også kan være differensial uttrykket av gener i mage fundus av W /W
V
mus, der IC-IM er tapt. Vår genet microarray analyse hell identifisert 21 gener som var forskjellig uttrykt i fundus av W /W
V
mus. Differensial uttrykk for disse musene ble bekreftet av semi-kvantitativ revers transkripsjon-polymerasekjedereaksjon (RT-PCR)
Metoder
Dyr og Tissue Forberedelse
bruk og behandling av forsøksdyr. Ble godkjent av Guideline styrende dyreforsøk Utvalget ved Universitetet i Yamanashi School of Medicine og ved University of Nevada School of Medicine. Seks voksne mannlige WBB6F1 - + /+ mus (villtype) og alder matchet seks voksne mannlige WBB6F1-W /W
V
mus, som veier 20 til 30 g, ble kjøpt fra Japan SLC Inc (Shizuoka , Japan). De ble bedøvet med eter eller karbondioksyd inhalering og avlivet ved cervikal dislokasjon. For genet analyser, ble magene fjernet fra dyret og slimhinnene med den vedlagte submucosa hurtig skarp dissekert fra tunica muscularis
. Vevene ble deretter frosset i flytende nitrogen (-196 ° C). Vevene ble lagret ved -80 ° C inntil isolering av RNA ble utført [18] Fremstilling RNA og Microarray dataanalyse.
For gene mikromatriseanalyse, poly (A) + RNA ble isolert fra hver vevsprøve av TRIZOL ( life Technologies, Inc., Gaithersburg, MD, USA) og Poly (A) + Isolation Kit fra Total RNA (ISOGEN, Nippon Gene, Tokyo, Japan). 18 Før du starter microarray analyse, differensial genuttrykk av KIT
mellom fundic mage vev av villtype mus og de av W /W
V
muterte musene ble bekreftet av semi-kvantitativ RT-PCR (se den delen av semi-kvantitativ RT-PCR
) (fig. 1A). Mikromatriser ble hybridisert og skannet, og bildeanalyse ble utført som beskrevet tidligere [19, 20]. I korte trekk, ble endringer i genekspresjon bedømt ved revers transkripsjon av poly (A) + RNA i nærvær av Cy3 Cy5 eller fluorokromer, etterfulgt av hybridisering til mus GEM en microarray chips (Incyte Genomics, Inc., Porter Drive Palo Alto, CA, USA). For å bekrefte gyldigheten av analysen, ble forsøkene utført i duplikat. De 8734 cDNA vi brukte representerer 7854 unike gener /UniGene klynger: 3205 er kommentert og 4649 er Umerket sekvenser. Vi tildelt en cut-off verdi, med en avviksanalyse, til microarray lysbildet. Gener som Cy3- og Cy5-signal intensiteter var lavere enn de grenseverdier ble ekskludert fra videre undersøkelser. Balansert differensial uttrykk ble bestemt for kontroll villtype mus versus W /W
V
mutante mus. Verdier som var < -2,0 Eller > 2,0 i begge to uavhengige eksperimenter ble betraktet som signifikant, og de midlere verdier av den relative fluorescens-forholdet for hvert gen ble beregnet. Figur 1 A. Expression of KIT
gen ved hjelp av semi-kvantitativ RT-PCR, i mage fundus vev fra villtype og W /W
V
mutant mus holdt under fastende
forhold. GAPDH
nivåer ble målt som en kontroll. B. Representant bilde av DNA microarray hybridisering. Endringer i genekspresjon som var representert av forholdet mellom intensiteten av fluorescens målt ved anvendelse av Cy3 Cy5 og fluorokromer. Ekspresjonsprofiler ble evaluert ved revers transkripsjon av poly (A) + RNA fra mage-fundus-muskler fra villtype og W /W
V
mus i nærvær av Cy3 Cy5 eller fluorescerende markørfargestoffer, etterfulgt av hybridisering til mus GEM 1 mikromatriser. Bildet som vises er produsert av superimposing Cy5 fluorescens bilde (pseudo-farget grønn som representerer uttrykk nivå av RNA fra tunica muskularis
av W /W
V
fundus) og Cy3 fluorescens bilde (pseudo- farget rød som representerer RNA uttrykk fra villtype vev). Arrays ble kontra med DAPI (blå). C. Bekreftelse av påliteligheten av microarray data ved semi-kvantitativ RT-PCR. Representative eksempler på RT-PCR-analyse, i fundus vev fra seks villtype og seks W /W
V
muterte musene holdt under sultet forhold. Uttrykk for CPO
genet ble betydelig redusert i fundus av W /W
V
mus sammenlignet med matchende villtype mus, mens MCM7
genet viste en økning i uttrykk i W /W
V
mus. D. Relativ uttrykk nivå av CPO plakater (CPO Twitter /GAPDH
) og MCM7 plakater (MCM7 Twitter /GAPDH
) i fundus vev fra seks villtype og seks W /W
V
mutant mus. Dataene representerer gjennomsnittet (± SD) av seks forskjellige RT-PCR eksperimenter med seks villtype eller W Twitter /W
V
fundus RNA som maler.
Semi-kvantitativ RT-PCR
nivåene av mRNA uttrykk som ble redusert eller økt med > 2,0-ganger eller større, ble bekreftet ved semi-kvantitativ RT-PCR fra fundus av 6 av hvert villtype mus og W /W
V
mus. RT-PCR ble utført som beskrevet tidligere [18]. I korte trekk ble 2 mikrogram prøver av total RNA ble behandlet med DNase I (Roche Diagnostics, Basel, Sveits) fra muse fundus-vev benyttes for å syntetisere enkelttråd cDNA. Disse cDNA ble anvendt som templater for PCR i en termosykler (PerkinElmer, Shelton, CT, USA), ved anvendelse av primere som er oppført i Tabell 1 eller SETT plakater (5'-ATG ACG TCA TGA AGA CTT GCT-3 'og 5'- -CTA CCC TGG AAT AGG ATG CA-3 '), og GAPDH
spesifikke primersett (5'-GACAACAGCCTCAAGATCATCA-3' og 5'-GGTCCACCACTGACACTGTG-3 '). Uttrykk for GAPDH
fungerte som en intern kontroll. -Primere var avledet fra forskjellige eksoner i det samme gen, når det tilsvarende mus-genomisk sekvens var tilgjengelige på det tidspunktet. PCR-reaksjonene ble optimalisert for antall sykluser for å sikre produkt intensitet innenfor det lineære fase av amplification.Table 1 primersett brukt for semi-kvantitativ RT-PCR.
Gene Name
tilgangsnummer
Forward Primer

Omvendt Primer
EST
AA185701
CGA AAG CCT TGA GGT TGA AG: TAG GAA AAC AGG CGT CAC TG
EST
AA166336
GAA GAA AAG GCT GCA GAT CG
CAA GAG GCA AAG AGC AAT CC
EST
AA021806
CAC GAA TTG CAG GAC TAC CT
ACC TGC ACT GTA GGC TGA GT
MCM7
Q61881
GCC CAC TGG ATT GTG AAG AT
AGG AGA CTG GTC CAC ACC AC
P160 ROCK2

U58513
AAG AAC CTG TCA AGC GTG GT
TCC AGG GTC ATC TGG AGT TC
EST
W18585
AGA CTT GGT GGC AGA GGA GA
GCA GCT CAT GAC AGA ACA CC
EST
AA403748
CCT AAA GCA ACC CAA CCT GA
Tags CCT TAT GGG ACC TGG TG
BST1 /BP3
Q64277
GAT TTC TTG AGC TGG TGT CG
AAA ACC CTC TCG TGG GAT AG: EST
AA024250
CAG ATA GAG CAA GGG ATG GA
CTG AGC CCA AAC CAG Tags AA
RBP2

Q08652
GAC GAA GGA CCA AAA TGG AA
CGG TGA AAT CCA GGT CGT AG: EST
W46016
AGC AAC AAC AGC TGG ACT TC
ACC TTC TGT TTG GTG CTG AG: BP1 /6C3
S30398
TAT CGG CCT CAT CTA ACC AG: ATC TTC AAG CAG CAC CTG AC
EST
AI552444
CAT GCG ATA CTG GAA CAT GA
TGA CTC CAA ATA GCC CTC AG: EST
AA108876
TGG AGC AAG AGA GGA AAG TG
CTA GAC CTG AGC TTG CCT TG
EST
AA049294
ACG TGG AGA AAG TTC TCG TG
GCA ATA GTG TCA CCG AAT CC
EST
AA254777
GCC CTG GAG TTG AGA CTG TA
TGA CAA GCT GCA CAG TAA CC
RHAMM
AF031932 GCA GAA GGA GGA GCA GAG TG
GCA GTG ACG TCC CTC AGA CT
EST
AA002293
AAG TCT TTG TGT GGG CTG AG: AGG AAG CTT CGT CTC TCC AT
EST
AI595081
CAC CAG GAT GTC TGC CTA CT
CCG AGA TCA TGT TCT TCA CC
CPO
D16333
GAA GAC CAA GAT GGA GCT GA
CAG AAA GAT TCC CAT GAA CG
EST
AA000304
TTC ATC TGC TGC TCC TTC TC
TTA Tags ACC TTC CCG CAC AG: Resultater
microarray analyse og Semi -quantitative RT-PCR
å identifisere gener som kan være selektivt forbundet med IC-IM, sammenlignet vi genuttrykksmønster i mage fundus vev avledet fra villtype og W /W
V
mus utnytte et gen microarray metoden [19, 20]. Murine fundus uten epitelvev stammer fra villtype og W /W
V
mus holdt under fastende
forhold ble brukt til å generere poly (A) + mRNA for microarray analyse ved hjelp av musen GEM en microarray . Resultatene av dette forsøket, opplyser gener som reproduserbart ble redusert eller økt med > 2,0-ganger eller større, er vist i tabell 2 og fig. 1B. Flere kjente og nye gener ble uttrykt forskjellig i fundus av W /W
V
mus (> 2,0 balansert differensial uttrykk). For å bekrefte differensial uttrykk profiler, vi videre undersøkt uttrykket nivåer i murine fundic mRNA avledet fra ville typer og W /W
V
mus holdt under fastende
forhold som maler, ved hjelp av semi-kvantitativ RT-PCR-analyse (Representative data er vist i fig. 1C, 1D. Alle primersett brukt til bekreftelse var oppført i tabell 1). Uttrykk av ti gener ble betydelig redusert i mage fundus av W /W
V
mus i forhold til alder matchet villtype mus. En annen elleve gener viste en økning i uttrykk i fastet W /W
V
mice.Table 2 Analyse av genuttrykk i fundus av villtype og W /W
V
mus
Gene Navn
W /W
V Twitter /hvete ratio (a)
Tiltredelse No.
subcellulære sted (b)
Cytoband (c)
EST
2,5
AA185701
EST
2,5
AA166336
EST
2,4
AA021806
MCM7
: DNA Replication Licensing Factor
2,4
Q61881
kjernen
7q21.3-q22.1
P160 ROCK2
: Rho-Associated Protein Kinase
2,3
U58513
cytoskjelettet
2p24
EST
2,3
W18585
EST
2,3
AA403748
BST1 /BP3
: ADP-ribosyl cyclase 2 Precursor
2.0
Q64277
membran
4p15
EST
2.0
AA024250
RBP2
: retinol bindende protein 2, cellular
2.0
Q08652
cytoplasma
3q23
EST
2.0
W46016
BP1 /6C3
: Glutamyl Aminopeptitase Anmeldelser - 2.1
S30398
membran
16
EST
-2,2
AI552444
EST
-2,3
AA108876
EST
-2,4
AA049294
EST
-2,4
AA254777
RHAMM
: hyaluronan-mediert motilitet Receptor
-2,5
AF031932
membran
5q33.2-qter
EST
-2,5
AA002293
EST
-3,4
AI595081
CPO
: Coproporphyrinogen oxidase
-3,6
D16333
mitokondriene
3q12
EST
-3,9
AA000304 product: (a) Balansert differensial uttrykk for kontroll villtype mus vs W /W
V
mutante mus. Verdier som ble redusert eller økt med > To ganger eller større i begge to uavhengige eksperimenter ble betraktet som signifikant og middelverdiene ble beregnet. Alle resultatene ble bekreftet med semi-kvantitativ RT-PCR bruker fundic vev fra seks villtype og seks W /W
V
mutante mus. (B) subcellulære plassering bestemmes av kildeprogrammet http:. //Kilde Stanford edu.. (C) Menneskelig kromosomal lokalisering av genet.
Diskusjon, En sammenligning av forskjellig uttrykt gener fra fundus av W /W
V
mus ved hjelp av DNA microarray analyse viste at uttrykket av elleve gener transkripsjoner var signifikant oppregulert i W /W
V
mus, mens ti gener transkripsjoner ble dramatisk undertrykt i disse dyrene. Vi har bekreftet disse resultatene med semi-kvantitativ RT-PCR av vev fra seks hver av villtype og W /W
V
mus. Data fra disse eksperimentene tyder på at uttrykket av genene ble spesifikt regulert i W /W
V
mus.
De elleve gener som var oppregulert i mage fundus av W /W
V
mus ble identifisert som MCM7
, P160 ROCK2
, BST1 /BP3
, RBP2
, og sju Umerket transkripsjoner. MCM7 er et pattedyr-homolog av gjær-kjerneprotein MCM2 /CDC47, som er tenkt å spille en viktig rolle i to avgjørende trinn av cellesyklusen, nemlig inntreden av DNA-replikasjon og celledelingen [21, 22]. P160 ROCK2, som er en isozyme av ROCK1 er et mål for den lille GTPase, Rho [23]. ROCK2 er en serin /treonin-kinase som regulerer cytokinese, kontraksjon av glatt muskulatur, dannelsen av actin spennings fibre og fokal adhesjon og aktivering av FOS serumresponselementet [24]. Oppreguleringen av P160 ROCK2 kan ha en kompenserende virkning for tap av ICC-avhengige mekanismer i den gastriske fundus. Den BST1 /BP3, en stromale benmargscelleoverflateantigenet, er et variabelt glykosylert glykosyl-fosfatidyl-inositol (GPI) -koblet molekyl som er selektivt uttrykt ved begynnelsen av B- og T-celler avstamning og en diskret subpopulasjon av retikulære celler i det perifere lymfoide organer. Det uttrykkes også på børsten grensen av intestinale epitelceller, luminal overflaten av nyre samle tubuli og modne myeloide celler [25]. Dette proteinet er ment å tilhøre ADP-ribosyl cyclase familie [26]. Cellular RBP2 er et rikt 134-resters protein som er tilstede i små tarmepitelet [27]. Det er antatt å delta i opptak og /eller intracellulær metabolisme av vitamin A og tilhører en familie proteiner som inneholder lever fettsyre-bindende protein. Vitamin A er et fettløselig vitamin som er nødvendig for vekst, reproduksjon, differensiering av epitelvev, og visjon. Pattedyr er avhengig av intestinal absorpsjon av dette vitamin for deres overlevelse. RBP2, som er begrenset stort sett til tynntarm enterocyte, spiller sannsynligvis en viktig rolle i den intestinale absorpsjon og /eller metabolisme av vitamin A [27].
Vi har også bekreftet nedregulering av ti gener i W /W
V
mus: BP1 /6C3
, RHAMM
, CPO
, og sju Umerket samle såkalte. Den murine β-lymfocytt differensieringsantigen, BP1 /6C3 ble karakterisert som glutamyl aminopeptidase, som er rapportert å tjene som celle-differensiering markør for lymphomyelocytic linjer og kan være involvert i celle-aktivering, signaltransduksjon, og celle-matrise-adhesjon. Den er også uttrykt av kapillære endotelceller, placenta, og epiteliale celler av tarmen og proksimale nyretubuli [28]. RHAMM
koder for et hyaluronan receptor protein [29]. Når hyaluronan binder seg til RHAMM, fosforylering av et antall proteiner, inkludert fokal adhesjonskinase pp125-FAK oppstår [30]. Dette er et nødvendig skritt for demontering av fokale kontakter og påfølgende motilitet. CPO er den sjette enzym av hemen biosyntetiske vei. Dette løselig protein er lokalisert i den intermembrane plass av mitokondrier og katalyserer omdannelsen av to propionat grupper i posisjonene to og fire av coproporphyrinogen III til to vinylgrupper av protoporfyrinogen IX [31]. Det ble rapportert at coproporphyria (CPO mangel) pasienter viste forstoppelse og unormal kolikk som er viktigste symptomene på denne sykdommen [32]. Merket heving av coproporphyria i avføringen differensiert tilstanden fra den svenske typen der avføring porfyriner er vanligvis normalt og fra variegate porfyri der både coproporfyrin og protoporfyrinogen fraksjoner økt i avføringen [33].
I de 21 genene identifisert, vi bestemt subcellulære lokalisering og menneskelige kromosom kartlegging av de 7 kjente gener ved hjelp av kILDE program http:.. //kilde Stanford edu (tabell 2). Disse genene viste en rekke cellulær lokalisering blant annet tre membran, 2 cytoplasmatisk, en mitokondriell og 1 kjerneproteiner. Ytterligere analyser av disse genene kan gjøre oss i stand til å belyse ikke bare sitt forhold til KIT, en reseptor tyrosin kinase, men også de molekylære aspekter av GI pacemaker system.
Vi har tidligere identifisert femten gener som ble forskjellig uttrykt i tynntarmen av villtype og W /W
V
mus som utvikler noen IC-MY bruker en differensial genuttrykk metoden [17, 18]. ™ @ Ingen av disse 15 gener ble funnet i listen over 21 gener som ble uttrykt forskjellig i mage fundus av villtype og W /W
V
mus som utvikler noen IC-IM bruker et cDNA microarray. Som vi bekreftet differensial genuttrykk av KIT
mellom tynntarmen /mage fundus vev av villtype og de av W /W
V
mutant mus ved semi-kvantitativ RT-PCR, vår eksperimentelle systemet kan oppdage genetiske avvik i W /W
V
mus. Derfor er våre resultater kan reflektere forskjellen i mobil enhet av to typer ICC'er, IC-MY og IC-IM, eller forskjellen i mobil sammensetningen mellom tynntarmen og fundus. Å gi avgjørende bevis som støtter disse spekulasjonene, uttrykk profil ved hjelp av renset mRNA fra isolerte enkelt interstitielle celler kan være svært nyttig i neste studien.
På det nåværende tidspunkt vet vi ikke om disse genene er viktige for funksjonen av gastrisk pacemaker /neurotransmisjon apparat eller var ned- eller oppregulert som et resultat av tap av ICC. Disse data gir imidlertid klare systemiske genetisk bevis for at flere viktige proteiner som har roller i cellesyklus, cytokinese og dannelsen av cytoskjelettet, cellenes stoffskifte, oksygen metabolisme, celle adhesjon, og utvikling og differensiering av tarmcellene er vesentlig endret i mage fundus av W /W
V
mus. Generering av transgene dyr som viser vevsspesifikt overekspresjon av kandidatgener, så vel som de genet knockout-dyrene kan være nyttig for å belyse rollen av hvert gen i gastrointestinal motilitet.
Oppdagelsen av et helt humane og musegener via genom-prosjektet er ment å revolusjonere biologisk medisin inkludert molekylær diagnose av ulike sykdommer og utvikling av ny behandling. Informasjonen kombinert med høy gjennomstrømning teknologi som DNA microarray og SNP skrive analysen vil akselerere oppdagelsen av gener som er mottakelige for eller forårsaker ulike sykdommer og bidra til screening av nye medikamenter som er rettet mot disse sykdoms genprodukter. I denne forstand, til innsats for den molekylære profilering prosjekt der vi forsøker å oppdage genetiske avvik i dyresykdomsmodeller som for eksempel W /W
V
mus vil generere svært variable ressurser for ytterligere klarlegging av motilitetslidelser . Som redusert antall ICC har også blitt rapportert i flere GI motilitetsforstyrrelser, så som kronisk intestinal pseudoobstruksjon [5, 6], sakte transitt forstoppelse og visse former for gastroparese [13, 14], bør disse genet informasjon bidra til utviklingen av nye molekylære målrettede behandlingsformer for disse lidelser, og kan også identifisere diagnostiske molekylære markører for disse lidelsene.
Konklusjon
Vi har identifisert tjueen gener som koder funksjonelle proteiner som er betydelig opp- eller nedregulert i tunica muskularis
av mage fundus av W /W
V
mus. Tatt i betraktning at ingen av disse genene har vært innblandet i noen aspekter av GI motilitet, foreslår vi at mange ukjente gener kan være involvert i celleforandringer som fører til motilitetslidelser forbundet med tap av ICC. Gene microarray analyse er en effektiv metode for screening av de endringer som skjer i uttrykket mønstre av gener i respons til spontane eller genetiske mutasjoner som fører til tap av en bestemt celletype. Bruk av denne teknikken kan tillate anerkjennelse av genekspresjonsmønster som er felles for flere motilitetslidelser der ICC er tapt, og dermed gi ny innsikt i de molekylære mekanismene som er ansvarlig for den selektive tap av ICC populasjoner.
Merknader
Yataro Daigo, Ichiro Takayama bidratt likt til dette arbeidet
Liste over forkortelser
BP1 /6C3.
glutamyltransferase aminopeptidase
BST1 /BP3:
benmarg stromal antigen 1 (alias ADP-ribosylcyclase 2 forløper)
CPO:
coproporphyrinogen oxidase
DMP:
dype muskel plexus
ESTs:
uttrykt sekvens koder
FISH:
fluorescens in situ
hybridisering

GI:
gastrointestinal
ICC:
interstitielle celler av Cajal
IC- DMP:
ICC på nivå med den dype muskel plexus
IC-IM:
intramuskulær ICC
IC-MY :
ICC på nivå med den myentericus plexus
MCM7:
minichromosome vedlikehold 7
MY:
myenterisk plexus
P160 ROCK2:
P160 Rho-forbundet, coiled-spole dannende protein kinase 2
RBP2:
retinol bindende protein 2, cellular
RHAMM:
hyaluronan-mediert motilitet reseptor
RT-PCR:
revers transkripsjon-polymerase chain reaksjon
SNP:
enkeltnukleotidpolymorfi
Erklæringer
Takk
støttes av 08457165 (til MF) fra det japanske departementet for utdanning, vitenskap, idrett og kultur, JAPAN og DK 57236 (til SW) og PA1 DK41315 (til SW og KS) fra National Institutes of Health, USA.
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er de linker til forfatternes originale innsendte filer for bilder. 12876_2002_51_MOESM1_ESM.ppt Forfatteroriginalfilen for figur 1 Konkurrerende interesser
Ingen erklært.

• Regulering av amylin frigjøring fra dyrkede kanin mage fundus slimhinneceller
• Duplisering cyste av pyloroduodenal kanalen: en sjelden årsak til neonatal mage utsalgsstedet hindringer: en kasuistikk